Funkcionális módosítások járó gyomor-bél traktus organogenesis alatt metamorfózis az atlanti óriás laposhal (Hippoglossus hippoglossus)

Funkcionális módosítások járó gyomor-bél traktus organogenesis alatt metamorfózis az atlanti óriás laposhal (Hippoglossus hippoglossus katalógusa) hotelben Abstract Background katalógusa katalógusa Lepényhal metamorfózis egy hormon szabályozott posztembrionális fejlődési esemény, amely átalakítja szimmetrikus lárva egy aszimmetrikus fiatalkorú. A altricial-gyomor csontos hal, a differenciálás a gyomor után kerül sor a kezdeti első etetés alatt és metamorfózis drámai molekuláris és morfológiai módosítások a gyomor-bél (GI-) traktus előfordulhat. Itt bemutatjuk a funkcionális egyedfejlődés a fejlődő GI-traktus egy integratív szempontból a pleuronectiforme atlanti óriás laposhal, és tesztelje a hipotézist, hogy a több funkciót a csontos gyomor fejleszteni szinkron alatt metamorfózis. Katalógusa eredményei katalógusa kialakulása gyomor funkció határoztuk meg több megközelítés (anatómiai, biokémiai, molekuláris és in vivo katalógusa megfigyelések). In vivo
pH-elemzés a GI traktus lumen kombinált kvantitatív PCR (qPCR) az α és p-alegységei a gyomor protonpumpa (H
+
/K
+ katalógusa áz katalógusa) és pepszinogén A2 katalógusa jelezte, hogy a gyomor fehérjebontó kapacitás során megállapított csúcspontja metamorfózis. Transcript rengeteg ghrelin katalógusa, egy feltételezett orexigén jelátvivő molekula termelődik a fejlődő gyomor, korrelált (p < 0,05) a megjelenése a gyomor fehérjebontó aktivitást, ami arra utal, hogy a gyomor szerepét az étvágy szabályozásában egyszerre jelenik létrehozásával proteolitikus funkció . A 3D-s modellek sorozatában GI-traktus fejlesztés jelzett funkcionális pylorus záróizom előtt első etetés. Megfigyelések etetett lárvák in vivo katalógusa megerősítette, hogy a gyomor tározó funkció előtt hozták létre metamorfózis, és ezzel önálló ezt az eseményt. Mechanikus táplálék lebontása és szállításának béltartalom a GI traktus volt megfigyelhető in vivo katalógusa és eredt fázisos és szaporítóanyagok összehúzódások létrehozott előtt jól metamorfózis. Száma összehúzódások középbél csökkent metamorf csúcspontja szinkronban létrehozása a gyomor fehérjebontó kapacitás és a fokozott perisztaltikus aktivitást. A vélt osmoregulatory hatáskörébe GI-traktus, következtethet rengeteg Na katalógusa + katalógusa /K katalógusa + katalógusa áz α katalógusa átiratok, megállapításra került kezdetén exogén etetés volt módosítatlan által metamorfózis.
Következtetések katalógusa funkcionális specializáció a GI-traktus nem volt kizárólagos a metamorfózis, és osmoregulatory kapacitás és a tartály működés előtt megkezdett első etetés. Ennek ellenére, a savas termelés, és a proteolitikus kapacitása a gyomor egybeesett metamorf csúcspontját, és azt is jelezte a kezdete a gyomor részvételét étvágy szabályozásában keresztül ghrelin. Katalógusa Kulcsszavak katalógusa atlanti óriás laposhal Gyomor protonpumpa Emésztőrendszeri ghrelin Motilitásvizsgálat Na + /K + - ATP-áz Pepszinogén egyedfejlődés pH gyomor Háttér katalógusa A divergens gasztrointesztinális (GI-) traktus morfológia és takarmányozási stratégiák között lárva és kifejlett fázisok kiigazításokat alapvetően különböző élőhelyek és az élelmiszer-források [1]. A poszt-embrionális érését az emésztőrendszer egyik legfontosabb esemény az életében történetében gerincesek és elengedhetetlen a túlélés. Pajzsmirigy hormon (TH) hajtott metamorfózis döntő szerepet játszik a funkcionális éréséhez a GI-traktusban, és kialakításában a morfológia a felnőtt forma [2, 3]. Remodelling A GI-traktus származó lárva a felnőtt-t kiterjedten vizsgálták Xenopus
[2, 4]. Ebben a szervezetben, a bél transzformáljuk hatása alatt THS egy hosszú tekercselt cső egy összetett szerv egy differenciált gyomorban és a vékonybélben [5, 6]. Ez magában foglalja a hám- és mesenchymalis proliferáció, simaizom megvastagodása és a kialakulását bél redők. Számos tanulmány leírta a celluláris mechanizmusok felelősek ezen átalakítás kétéltűek [7, 8], mégis keveset tudunk azok hatását szöveti funkciót a gerincesek, különösen a több funkciót integrálni a gyomorban.
Legszembetűnőbb jellegzetessége a gerinces metamorfózis a organogenesis a gyomor. A korai fejlődési stádiumokban a halak és anurans a gyomor gyakran hiányzik, és része a funkcióját végezhetjük a belekben. A fő szerepe a gerinces gyomor tárolására elfogyasztott élelmiszer, szekrécióját sósav (HCI) és a pepszinogén, és mechanikai bontása és keverése élelmiszer gyomor váladék [1, 9]. Így a lárvák altricial-gyomor fajok, mint például a Óriás laposhal, hiányában a gyomor korlátozza képes megemészteni étrendi fehérje, amikor exogén etetés megkezdése [10-14]. Ez az egyik oka annak, hogy a legtöbb tanulmány a GI-traktus fejlesztés alatt metamorfózis összpontosítottak gyomor fejlődés, és megvizsgálja a megjelenése gyomor mirigyek elegendő mutató egy teljesen kidolgozott gyomor [15, 16]. Azonban világossá vált, hogy a szövettani azonosítása gyomor mirigyek nem jelzi, hogy a gyomor teljesen működőképes. Ezért, a gyomor proteolitikus funkciót legjobban jelzi pepszin aktivitás [11, 17] és a pepszinogén
tartalom [18]. Ahhoz, hogy jobban megértsük a hatékonyságát emésztési feldolgozás során hal egyedfejlődés számos tanulmány képest expressziós profilok pepszinogén katalógusa és a gyomor protonpumpa (H katalógusa + katalógusa /K katalógusa +
áz katalógusa), lokalizált HCI kiválasztó oxynticopeptic sejtek [19-22]. Murray et al. [23] használta szövettani és pepszinogén katalógusa átirat vizsgálat az egyedfejlődés a gyomor-atlanti óriás laposhal és kiderült, hogy a megjelenés 66 nappal a tojások (DPH) a gyomor mirigyek megelőzte kifejezése pepsinogens A1 és az A2 katalógusa
átiratok 80 DPH. A hatás azonban a metamorfózis más fontos funkciók a gyomor vagy a GI-traktusban általános fejlesztése nagyrészt figyelmen kívül hagyták a lepényhal.
Kívül-termelés a fehérjében levő gerinces gyomorban is tározó funkciókat. Lenyelés után, a gyomor és a boltok predigests élelmiszer, majd elszállítja a béltartalom a középbélben további emésztést és a tápanyagok felszívódását követő [9]. A tárolási funkció a gyomor enyhíti fiatalkorú és felnőtt halak a szükségességét, hogy folyamatosan táplálkoznak, mint az stomachless lárvastádiumok. Létrehozása a gyomorban, mint a tartály felé azonban szükségessé funkcionális záróizom (a nyelőcső és a pylorus) és jól fejlett idegi és simaizom réteg. A mechanikus keverés és az élelmiszerek szállításának a GI-traktus érjük el konkrét motilitását és összevetjük a bélmozgást a kiadás az emésztőenzimek. Ez a folyamat központi szerepet játszik a hatékony élelmiszer-feldolgozás (lásd áttekintés, [24]), bár nagyon kevés tanulmány célzott GI-traktus mozgását hal lárvák. Az előnye, hogy a hal lárvák, például atlanti óriás laposhal, az ő optikai átláthatóság mindaddig fennmarad, amíg a metamorfózis. Ez lehetővé teszi a közvetlen vizuális megfigyelések a GI-traktus és mozgékonyságát minták az élő állatok. Pittman és mtsai. [25] számolt perisztaltikus összehúzódásokat atlanti óriás laposhal lárvák, az elülső bélben 35 DPH. Juvenilis atlanti laposhal GI-traktus mind előrefelé (szaporító az anális irány) és a retrográd (szaporító be orális irányban) kontrakció hullámok le [26], és azonos mintázatot is megfigyelhetők voltak az embriók és lárvák a stomachless zebradánió (Danio rerio
) [27].
a gyomorban termelődő hormonok egyaránt részt szabályozásában étvágyat és az emésztést. A ghrelin egy példa egy hormon, amely elsősorban a gyomorban termelt és viselkedik, mint egy stimulátor táplálékfelvétel [28, 29]. Emlősökben ghrelin is javasolták, hogy serkentik a gyomorsav-szekréciót, és motilitás [30, 31]. A funkció a ghrelin halakban lárvák még mindig kevéssé le, de azt javasolták, indikátorként a gyomor részvétele étvágy szabályozásában fejlődő hal [32]. Ebben az óriási laposhal a ghrelin katalógusa génexpresszió során növekszik a csúcspontja metamorfózis, amely egybeesik a gyomor fejlesztés [33]. A ghrelin bőséges a fejlődő gyomor mirigyek és számos osmoregulatory szövetekben. Továbbá, annak együtt-Na katalógusa + katalógusa /K katalógusa + katalógusa áz katalógusa sugallja egy feltételezett szerepe hydromineral egyenleg [34]. Mégis, a szerepe a ghrelin az étvágy szabályozásában, motilitás és ozmoregulációban ismeretlen, valamint a kapcsolat a fehérjebontó és tározó funkciója a gyomor-atlanti laposhal metamorfózis.
A tanulmány célja, hogy milyen hatással van a agastric- gyomor átmenet a funkcionális szerepe a posztembrionális GI-traktus átalakítás során bekövetkező átalakulás az atlanti óriás laposhal, a lepényhal fajok nagy kereskedelmi érdeklődés az észak-európai és észak-amerikai akvakultúra-ágazat. Feltérképezni a változások GI-traktus fejlesztése és létrehozása kapcsolódó események TH-vezérelt metamorfózis építettünk egy sor 3D-s modellek a morfológiai és térbeli elrendezése az emésztőszervek reprezentatív fejlődési szakaszban. Megvizsgáltuk a hipotézist, hogy a fejlődés a több gyomorfunkciókat szinkron és kapcsolódik a fizikai megjelenés metamorfózis. A proteolitikus funkciója a gyomor vizsgáltuk in vivo katalógusa pH elemzések kombinálva expressziós profilját az adott gén marker H katalógusa + katalógusa /K katalógusa + katalógusa áz α katalógusa és β alegység katalógusa és pepszinogén A2 katalógusa kvantitatív PCR (qPCR). Gyomor töltő és tározó funkció értékelték in vivo katalógusa vizuális vizsgálatok, az átlátszó lárvák prometamorphosis és csúcspontja a metamorfózis. A feltételezett szerepe teljesen működőképes gyomor étvágy szabályozásában mérésével ghrelin katalógusa átirat bőség. A létesítmény a GI-traktus minták fejlesztés során határoztuk meg in vivo katalógusa megfigyelések és a részvétel a GI-traktusban ozmoregulációban mérésével a rengeteg Na katalógusa + katalógusa /K
+ katalógusa áz α katalógusa alegység átiratokat. katalógusa Eredmények katalógusa 3D rekonstrukció az emésztőszervek
3D-s modellek a morfológia az emésztőrendszer fejlődése során rekonstruálták egy sor szövettani metszeteken. Helyét és méretét a Gi-traktus és a hozzá kapcsolódó szervek, mint a máj, az endokrin és exokrin hasnyálmirigy, és az epehólyag, volt megfigyelhető a 3. szakaszt (megelőzően első etetés), amíg a poszt-metamorf szakaszban 10 (1. ábra). 1. ábra Az egyedfejlődés az emésztőszervek Atlantic laposhal lárvák. 3D modellek is rekonstruálható soros szövettani metszeteken a Imaris szoftver. Az emésztőszervek jelennek három oldalról; bal, jobb és háti oldalán. A nyilak jelzik katalógusa anterior irányban (száj). Orange katalógusa külső réteg GI-traktus, piros katalógusa máj, zöld katalógusa epehólyag, lila katalógusa hasnyálmirigy, rózsaszín katalógusa Langerhans, sárga katalógusa sárgája sac. Átlátszó színt használja exokrin hasnyálmirigy (lila katalógusa) annak bizonyítása érdekében, Langerhans-szigetek (rózsaszín katalógusa) és az epehólyag (zöld katalógusa).
A GI-traktus tartalmaz egy keskeny előbél (nyelőcső és a vélelmezett gyomor /gyomor), középbél, és egy rövid utóbél (végbél) (2. ábra). Az elülső régió a középbél, csak miután a pylorus záróizom (PS), volt nagyobb átmérőjű, azaz nagyobb térfogatú, mint a többi a középbél. Ezt a funkciót alatt tartani GI-traktus egyedfejlődés (1. és 2. ábra). Mindkét PS (amely elválasztja a vélelmezett gyomor az elülső középbél) és ileorectal záróizom (amely elválasztja középbél és utóbél) azonosítottunk 3. szakasz kezdődően (1. és 2. ábra). Pylorus vakbelet nyilvánvalóvá vált, mint előrejelzései legtöbb elülső része középbél a szakaszban 6 (1. és 2. ábra). A gyomrot jól differenciált az első lépcsőben 10, és a gyomor mirigyek látható volt a szövettani metszeteken (Plusz fájl 1). Luminális térfogata GI-traktus fokozott fejlesztés során, különösen a két utolsó szakaszában elemezni (állapotok 9A és 10) (3. ábra, 1. táblázat és további fájl 2). A gyomor térfogata 9A 10 növekedett 415-4933 nl, ill és megfelelt egy 11-szeres növekedés (1. táblázat). 2. ábra Az egyedfejlődés a vélelmezett gyomor (átlátszó világos kék) és GI-traktus lumen (kék), atlanti óriás laposhal lárvák. 3D modellek is rekonstruálható soros szövettani metszeteken a Imaris szoftver. Gi-traktus lumen képviseli a belső réteg (szemben a lumen) A GI-traktusban. A GI-traktus látható három oldalról; jobbra, balra, és a háti oldalán. A nyilak jelzik katalógusa anterior irányban (száj). Nyílhegy katalógusa pont helyzetét záróizom (piros: pylorus záróizom; fekete: ileorectal sphincter). st katalógusa vélelmezett gyomor /gyomor, mg katalógusa középbél, hg katalógusa utóbél.
3. ábra standardizált mennyiség növekedése emésztőszervek közötti szakasz (S) 3-10 óriás laposhal. A volumen növekedése volt normalizált összesített átlagos mennyiség növekedése közötti szakaszok az egyes szövetek (részletes magyarázat: További fájlt 2). 1. táblázat katalógusa GI-traktus szerv mennyiség (nl) és felülete (10 6 um 2) Matton Stage 3 Matton Stage 4 Matton Stage 5 Matton Stage 6 Matton Stage 9A Matton Stage 10
katalógusa GI-traktus külső réteg (nl) hotelben 157,42 katalógusa 261,03 katalógusa 490,65 katalógusa 1038,48 2670,15 katalógusa katalógusa 12.855,10 katalógusa GI-traktus külső réteg (106 μm2)
3,59 katalógusa 5.12 katalógusa 6,74 katalógusa 10.07 katalógusa 20.53 katalógusa 63.38 katalógusa GI-traktus belső réteg (nl) hotelben 78.40 katalógusa 136,84 katalógusa 266,55 katalógusa 525,89
1034,10 6451,16 katalógusa katalógusa GI-traktus belső réteg (106 μm2) hotelben 2,83 katalógusa 4,73 katalógusa 9.60 katalógusa 16.34 katalógusa 50,45 katalógusa 54.76 katalógusa GI-traktus szövet volumea (nl) hotelben 79,02 katalógusa 124,19 katalógusa 224,10 katalógusa 512,59 katalógusa 1636,05 6403,94 katalógusa katalógusa Máj (nl) hotelben 35.24 katalógusa 48.82 katalógusa 98.18 katalógusa 225,23 katalógusa 928,25 katalógusa 4232,77 katalógusa Pancreas (nl) hotelben 13,79 katalógusa 21.42 katalógusa 37.91 katalógusa 109,08 katalógusa 471,25 katalógusa 463,79 katalógusa Langerhans-szigetek (nl)
0,50 katalógusa 0.46 katalógusa 0,57 katalógusa 1.05 katalógusa 5.33 katalógusa 11.73 katalógusa valószínűsített gyomor (nl) hotelben 15.51 katalógusa 27.29 katalógusa 32.06 katalógusa 84,09 katalógusa 414,54 katalógusa 4932,67 katalógusa az értékeket számoltuk a 3D modellek Imaris MeasurementsPro. katalógusa AGI-traktus csontszövet mennyisége = GI-traktus külső réteg - GI-traktus belső réteg.
a májat alatt elhelyezett előbél és anterior a felszálló hurok a középbél (1. ábra), és a térfogatát folyamatosan nőtt a fejlődés során (3. ábra és 1. táblázat). Az exokrin hasnyálmirigy volt megfigyelhető között a feltételezett gyomor és az elülső része a középbél 3. stádiumban, és ez veszi körül ezt a középbél terület egész egyedfejlődés (1. ábra). Az endokrin hasnyálmirigy, jól megkülönböztethető Langerhans-sziget volt megfigyelhető közel az epehólyag 3. stádiumban (1. ábra). Ezzel szemben a többi emésztőszervek, a növekmény a normalizált térfogatú endokrin és exokrin hasnyálmirigy alacsony volt, és a negatív, illetve szakaszok között 9A és 10 (3. ábra és 1. táblázat). A tojássárgáját-sac, alatt elhelyezett GI-traktus 3. stádiumban, kicsinyítve megindítását követően táplálkozásról az exogén és egy kis emlék maradt kívül a máj a 4. szakasz (6 nappal az első etetés, dpff). Az epehólyag volt megfigyelhető a jobb oldalon között az exokrin hasnyálmirigy és a máj, a és fenntartani ebben a helyzetben minden fejlődési szakaszban elemzett (1. ábra). A hasnyálmirigy-vezeték és az epevezeték nyitott egymás mellett lumenébe a középsíkja az elülső középbél, csak miután a PS (az adatokat nem mutatjuk be).
Klónozása és filogenetikai jellemzése pepszinogén A2, ghrelin, gyomor protonpumpa alegységek és a Na + /K + ATPáz alegység α
teljes kódoló szekvenciáját (CDS) óriás laposhal pepszinogén A2 katalógusa 1128 bp, és be a GenBank számon. KF184647 (Plusz fájl 3: C). Az aminosav (AA) szekvenciáját pepszinogén viszonylag jól konzerváltak a csontos halak, és mint az várható volt, több variábilis összehasonlítva más gerinces pepsinogens. Például, laposhal pepszinogén A2 megosztott rendre 88% és 64% AA szekvencia azonosságot téli lepényhal (Pseudopleuronectes americanus katalógusa) Pepszinogén A forma IIb és IIa, de csak 52%, illetve 48% -os azonosságot homológok Xenopus laevis katalógusa és emberi, illetve (nem közölt adatok).
A cDNS fragmentumokat klónozott atlanti laposhal H katalógusa + katalógusa /K katalógusa + katalógusa áz α alegység katalógusa ( 911 bp) és Na katalógusa + katalógusa /K katalógusa + katalógusa áz α alegység katalógusa (714 bp) rakódtak GenBank a csatlakozási számokat KF184648 és KF184650, illetőleg (Plusz fájl 3: B, D). A CDS H katalógusa + katalógusa /K katalógusa + katalógusa áz β alegység katalógusa 874 bp klónozták és be kell nyújtani a GenBank csatlakozás nélkül. KF184649 (Plusz fájl 3: A). Filogenetikai elemzését α alegysége a gyomor protonpumpa és Na + /K + - ATP-áz, és gerinces homológok (További fájlok 4) létrehozott két fő kládok, egy megfelelő H + /K + - ATP-áz és a másik Na + /K + - ATP-áz. Filogenetikai elemzés a β alegység (Plusz fájl 5) létrehozott egy fa két fő kládok hogy ugyanazokkal a általános topológia a phylotree az α alegység a H + /K + - ATP-áz és Na + /K + - ATP-áz fürtözött függetlenül. katalógusa óriási laposhal a H + /K + - ATP-áz α alegység csoportosulnak leginkább a csontos homológok, amellyel közös 94% AA szekvencia azonosságot, és nőtt 98% -os téli lepényhal és atlanti tőkehal (Gadus morhua katalógusa). Alsó AA szekvencia azonosságot (72%) találtak, amikor az óriási laposhal a H + /K + - ATP-áz α alegység képest óriási laposhal a Na + /K + - ATP-áz α alegység (70 %) és más gerinces társaik (72%). Az atlanti óriás laposhal Na + /K + - ATP-α alegység csoportosulnak egy antarktiszi anyaangolnára (Pachycara brachycephalum katalógusa) homológ (98%) és a megosztott körülbelül 88% AA azonosságot más csontos gén homológok. H + /K + - ATP-β alegység csoportosulnak, mint várható a csontos kládja (teljes azonosság körülbelül 80%) és a közös meglehetősen alacsony azonosságot a humán homológ (50%). Óriási laposhal a H + /K + - ATP-áz β alegység nem osztja több mint 39% AA szekvencia azonosságot az atlanti laposhal Na + /K + - ATP-áz β alegység. Katalógusa Az egyedfejlődés során expressziós mintázata és korrelációs elemzés katalógusa A fejlődési expressziós profilok pepszinogén A2 katalógusa, H katalógusa + katalógusa /K katalógusa + katalógusa áz α katalógusa és β alegységek
, Na katalógusa + katalógusa /K katalógusa + katalógusa áz α alegység katalógusa és a ghrelin katalógusa elemeztük qPCR a GI traktus az egyes atlanti laposhal lárvák (4. ábra). A gén expressziója mindkét gyomor protonpumpa alegységek szignifikánsan (p < 0,05; korrigált R 2: 0,773) korrelációt mutatott (5. ábra), és párhuzamos, expressziós mintázatot, egy éles és szignifikáns (p < 0,05) emelkedést klimax és a poszt-metamorf szakaszban (4. ábra). Pepszinogén A2
szignifikánsan (p < 0,05) korrelált expressziós profiljának a gyomor protonpumpa α (korrigált r 2: 0,9738) és β (korrigált r 2: 0,7963) alegység (5. ábra ). A szignifikáns (p < 0,05) növekedés első szakaszában a 8. volt megfigyelhető pepszinogén A2 katalógusa és annak kifejezése tetőzött a poszt-metamorf szakaszban. A ghrelin katalógusa mRNS bőségesen nőtt fokozatosan és jelentősen (p < 0,05) alatt proclimax /csúcspontja metamorfózis, és elérte a maximális utáni metamorf szakaszban (4. ábra). Sőt, ghrelin átirat a bőség és a proteolitikus aktivitás során GI-traktus egyedfejlődés szignifikánsan korrelált (p < 0,05; korrigált R 2: 0,9342, 0,8852, 0,9252 számára pepszinogén A2, A gyomor protonpumpa α és P alegység, illetve, lásd ábra 5). Expression of Na
+
/K
+
-ATPáz α alegység
mRNS kimutatható volt valamennyi fejlődési szakaszban, és szignifikánsan (p < 0,05) több átiratok az első lépcsőben 5. a 4. ábra az átlagos normalizált expressziós mintázata a jelzett mRNS-transzkriptumok egyedi lárvák (szakasz 5-10). Eredmények pepszinogén A2 katalógusa prekurzor, gyomor H katalógusa + katalógusa /K + katalógusa katalógusa áz alegység α katalógusa és β katalógusa, Na katalógusa + katalógusa /K
+
-ATPáz alegység α
és a ghrelin
mRNS transzkriptumokat bemutatjuk átlag ± SEM a normalizált kifejezés (a referencia gén eEF1A1). Átlagértékeket különböző betűk szignifikáns különbség (One Way ANOVA, p < 0,05).
5. ábra Lineáris regresszió becsült korrelációs elemzések között gyomor specifikus génmarkerek alatt óriási laposhal a egyedfejlődés. Lineáris regressziós modellt szerelt log-transzformált átlagos expressziós értékek (NGM) az A) gyomor H katalógusa + katalógusa /K + katalógusa katalógusa áz α alegység katalógusa és β alegység katalógusa; B) pepszinogén A2
és a H
+
/K
+
-ATPáz β alegység katalógusa (fekete négyzetek és folytonos vonal), valamint a H
+
/K + katalógusa katalógusa áz α alegység katalógusa (szürke pontok és szaggatott vonal); C) ghrelin katalógusa és H katalógusa + katalógusa /K + katalógusa katalógusa áz β alegység katalógusa (fekete négyzetek és folytonos vonal), H katalógusa + katalógusa /K
+
-ATPáz α alegység katalógusa (szürke pontok és szaggatott vonal), valamint a pepszinogén A2 katalógusa (világosszürke háromszögek és szaggatott vonal). Minden korreláció szignifikáns (p < 0,05). A log-transzformált középértéke NGM per szakasz (5 to10) vett hat egyének.
Becslése pH-lumenében gyomor és kimutatására savtermelés katalógusa A pH értékelést a lumen a gyomor és középbél /utóbél alatt utáni embrionális fejlődés alapult a szín megfigyelt injektálása után pH indikátor oldatok (6. ábra és 2. táblázat). A pH-t a középbél /utóbél maradt lúgos (pH 8 felett) minden fejlődési szakaszban elemezni (5. szakasz a 9b). A vélelmezett gyomor is volt egy lúgos pH-értékek a fenti 7.5, amíg a szakaszban 8. Fokozatos savasodás volt megfigyelhető a szakaszok megfelelő a csúcspontja metamorfózis. Átmenet a lúgos, hogy savas pH a gyomorban lumen volt nyilvánvaló a szakaszban a 9A, amikor az injektált Sol
CPR maradt lila de a szol
MCP adott egy sárga elszíneződés (pH6.5 - 7,5). A lumen a gyomor egyértelműen a savas tartományban (pH = < 3.5) az első lépcsőben a 9B, amint azt a sárga szín a gyomorban beadását követően egyaránt CPR és a BPB megoldásokat. 6. ábra a pH változását GI-traktus óriás laposhal lárvák fejlődése során. A panel: eredmények szondatápok pH indikátor megoldásokat a lárva származó premetamorphosis (5. lépés) a csúcsra metamorfózis (színpad 9.a és 9.b). pH sol katalógusa MCP tartalmazott 0,1% m-krezol lila, sol katalógusa CPR következő: 0,1% Chlorphenol Piros pH sol katalógusa BPB volt 1% brómfenolkék. st: gyomor /vélelmezett gyomorban; mg: középbélben; hg: utóbél. Scale bar = 0,5 mm. B panel: szabványok elmerül a vízben, és fényképezett hasonló fényviszonyokat lárva alatt mikroszkóp. Katalógusa 2. táblázat pH változások a GI-traktus óriás laposhal lárvák különböző fejlődési szakaszaiban katalógusa Stage Matton gyomor Matton középbélben /utóbél Matton 5 katalógusa > 7,5 katalógusa > 8,0 katalógusa 6 katalógusa > 7,5 katalógusa > 8,0 katalógusa 7
> 7,5 katalógusa > 8,0 katalógusa 8 katalógusa > 7,5 katalógusa > 8,0 katalógusa 9A katalógusa 6,5-7,5 katalógusa > 8,0 katalógusa 9B katalógusa < 3,5 katalógusa > 6,5 katalógusa a bemutatott pH értékek alapján vizuális megfigyelések színváltozás beadása után három pH indikátor megoldásokat. katalógusa elemzése GI-traktus katalógusa Spontán szaporító összehúzódásokat figyeltek a GI-bélrendszeren prometamorphosis (6. szakasz; 25 dpff) és a klimax metamorfózis (színpadi 9A /B; 49 dpff) (7. ábra). Miatt jelentős egyedi eltérések, száma és gyakorisága összehúzódások nem lehetett csoportosítani, és bemutatják az egyes elemzett (3. táblázat és kiegészítő fájl 6). Kétféle összehúzódások voltak megfigyelhetők a középbél 1. régió (MG1; miután a PS, csökkenő része a hurok) és 2 (Mg2): fázisos és szaporítóanyagok hullámok (Plusz fájl 7). A szaporító összehúzódások megfigyelt Mg2 volt retrográd hullámok, hogy eredetileg a területen "Egy fiatal", és költözött a száj felé. Azonban a MG1 legtöbb szaporító összehúzódások származott csak az PS és voltak anterograd hullámok mozdult anális irányban. Motilitás aktivitás mindkét középbél régiókban detektáltuk 6. szakasz egy frekvencia tartományban 0,31-3,77 min -1, attól függően, az egyén és típusát összehúzódás. A 9. szakasz, viszonylag kevés spontán összehúzódásait rövid időtartamú volt megfigyelhető a középbél. A csúcspontja a metamorfózis, összehúzódások a gyomorban regisztrálták minden egyén, szemben a 6. szakasz, amikor mozgékonyságát a vélelmezett gyomorban csak figyelték meg az egyik lárva. A rektális összehúzódás (vagy székletürítés reflex) keveréke volt retro- és anterográd összehúzódásait és volt megfigyelhető mindkét szakaszban a 6. és 9. hasonló frekvenciákat legtöbb egyén elemezték. 7. ábra GI-traktus óriási laposhal a lárvák szakasz 6. és 9. retrográd és anterográd hullámmozgásukban (szaporító összehúzódásokat) jelzi a szaggatott vonal. Ezek a hullámok fordulnak elő a területről egy B; és pylorus záróizom (képviselő két piros nyilak *) a B terület és fordítva katalógusa. Az A és B jelenti a fő területek, ahol fázisos kontrakciók előfordulhat. st: gyomor /vélelmezett gyomorban; MG1: középbélben régió 1; Mg2: középbélben 2. régió; hg: utóbél; r: végbél területén. Skála = 1 mm. Katalógusa 3. táblázat GI-traktus minták - számszerűsítése Matton Gyomor Matton középbélben 1 Matton középbélben 2 Matton utóbél
katalógusa végbél területén Matton szaporítóanyagok Matton fázisos Matton szaporítóanyagok Matton fázisos
lárva Matton n Matton frekvencia (min-1) Matton n
frekvencia (min-1) Matton n
frekvencia (min-1 ) Matton n
frekvencia (min-1) Matton n
frekvencia (min-1) Matton n katalógusa
Frekvencia (min-1) Matton n
frekvencia (min-1) Matton 6. szakasz
1
-
-
14
2.31
50
1.69
57
1.84
79
3.54
13
1.46
161
5.24
2
-
-
26
1.81
-
-
95
3.77
12
0.44
15
0.54
3
0.22
3
17
0.56
5
0.31
4
0.24
28
1.66
77
3.01
-
-
96
3.22
4*
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
43
2.25
25
1.69
9. szakasz
1
11
2.37
-
-
-
-
-
-
-
-
1
-
11
1.44
2
10
0.90
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
11
0.41
3
4
0.44
-
-
-
-
9
3.83
-
-
-
-
13
0.46
4
4
0.56
-
-
3
1.13
-
-
-
-
12
1.12
24
0.81
Szaporító és fázisos összehúzódásokat feltüntetésre középbélben 1 és 2 középbélben régiókban. A frekvencia száma összehúzódások regisztrált (n) percenként. Katalógusa * Nem lehet számszerűsíteni fázisos és szaporító hullám összehúzódások. Az érintett GI-traktus szegmensek folyamatosan (tónusos) időtartama alatt a teljes megfigyelési időszak (lásd a Kiegészítő fájl 7). Katalógusa Megbeszélés katalógusa Minden altricial gyomor faj, a gyomor-bél traktus megy drámai átalakítás során TH-vezérelt metamorfózis . A GI-traktus változásai egy egyszerű cső alakú formát egy bonyolultabb háromdimenziós szerkezete. Ugyanakkor a gyomor válik egy külön rekeszt, és továbbra is, hogy megszerezzék több funkciót keresztül metamorfózis. Vannak meglepően kevés tanulmány vizsgálata és integrálása az anatómiai és funkcionális változások a GI-traktus társított TH-vezérelt esemény. Kétéltűek, mint a Xenopus katalógusa, ez közismert, hogy THs indukáló GI-traktus átalakítás vezető bél lerövidítése és a fejlesztés a kripták és bolyhok [35-37]. [25].

• Közötti kapcsolat H. pylori fertőzés és a klinikopatológiai jellemzők és gyomorrák prognózisa
• Korreláció a HER-2 /neu (ErbB-2) expressziós szintje és a terápiás hatás kombinációs kezelés HERCEPTIN® és a kemoterápiás szerek gyomor rákos sejtvonalakban