Účinok interleukíny-1β na proliferáciu žalúdočných epiteliálnych buniek v culture

Vplyv interleukíny-1β na proliferáciu žalúdočných epiteliálnych buniek v kultúre
abstraktné
pozadia
Helicobacter pylori
je hlavným rizikovým faktorom pre vývoj non-kardio karcinómu žalúdka. Zvýšená proliferácia žalúdočnej sliznice je funkcia H. pylori
infekcie. Slizničné interkeukin-1β produkcia je zvýšená v H. pylori
infekcii a IL-1 genotypov spojených so zvýšenou pre-zápalové aktivity sú rizikové faktory pre vývoj rakoviny žalúdka. Účinok IL-1 na žalúdočné proliferáciu epiteliálnych buniek bol skúmaný v tejto štúdii.
Metódy
AGS Bunky boli kultivované s IL-1. Syntéza DNA bola zadkom o [ 3 H] tymidínu a celkový počtu životaschopných buniek MTT testom.
Výsledky
IL-1 v závislosti na dávke zvýšenie počtu syntézu DNA a buniek. Zvýšená proliferácia bol blokovaný antagonistami receptorov interleukínu-1. Prídavok neutralizačných protilátok pre GM-CSF znižuje IL-1β-stimulovanou proliferáciu o 31 ± 4%. GM-CSF samostatne výrazne stimuloval proliferáciu. Pridanie alebo neutralizáciu IL-8 nemal žiadny účinok na bazálnu alebo IL-1β-stimulovanej proliferácie. Tyrozín kinázy inhibítor genistein úplne blokovaný IL-1 stimulovanej proliferácie a inhibícia extracelulárnej spojené signálne cesty kinázy s PD 98059 inhiboval IL-1β stimulovanej proliferácie o 58 ± 5%.
Závery
IL-1 stimuluje proliferáciu žalúdočné epiteliálne bunky. Autokrinný stimulácia GM-CSF, prispieva k tomuto proliferačnú odpoveď. Signalizácia cez tyrozín kinázy je nevyhnutná pre mitogénnu odpoveď na IL-1. Extracelulárna signál súvisiace kinázovej dráha je zapojený do, ale nie nevyhnutné, aby signalizácia downstream. IL-1β môže prispieť k hyperproliferáciu vidieť v H. pylori-
infikované žalúdočnej sliznice, a podieľať sa na karcinogénny procese.
Pozadie
Helicobacter pylori
sa predpokladá, že je hlavným etiologickým faktorom rozvoj non-kardio adenokarcinómu žalúdka. Rozsiahle epidemiologické štúdie potvrdili silnú súvislosť medzi H. pylori
infekcie a ako rakoviny [1-3] a skôr histologické fázach, atrofia a intestinálnej metaplázia [4, 5]; obaja, ktoré zvyšujú riziko neskoršej neoplastické transformácie. Zvieracie modely tiež ukázali, že je dôležité H. pylori
v žalúdočnej karcinogenéze [6, 7]. Zvýšené rýchlosti proliferácie žalúdočnej sliznice je typická v H. pylori infekcie
[8-11] a hyperproliferáciou v gastrointestinálnom trakte sa javí ako marker pre neskoršie malígne zmeny [12]. Príčinou zvýšenej rýchlosti proliferácie nie je jasné, ale zvýšené sadzby zníži na normálnu s vôľou infekcie [8, 13]. Aj keď hypeprproliferation je typické in vivo,
štúdie boli testované účinky baktérie H. pylori alebo jeho
produktov in vitro preukázali
rozporuplné výsledky, ako s zvýšenou [14, 15] a zmenšila [16-18] proliferácie hlásené. Je možné, že ostatné zložky zápalové reakcie typické H. pylori
infikovaný sliznicu by mohli byť aspoň čiastočne zodpovedný za riadenie zvýšenej proliferácii buniek.
Pluripotentných prozápalový cytokín interleukín-1β má centrálne úlohu v patogenézy H. pylori
indukovanú zápalu sliznice. IL-1β génovej expresie a produkcie proteínu sú zvýšené v H. pylori
infekcie a zníži sa úspešnom odstránenie [19, 20]. Prítomnosť IL-1 genotypu polymorfizmu spojené so zvýšenou IL-1-produkcie bolo spojené s významným zvýšením rizika rakoviny žalúdka a prekanceróznych lézií [21, 22]. Interleukín-1β je silný inhibítor sekrécie žalúdočnej kyseliny a Predpokladá sa, že zvýšená IL-1β reakcie mení topografie žalúdočné infekcie, a tým podporuje zápal a následnou atrofiou žalúdočných korpusu [23, 24]. Možnosť, že IL-1 sa riadi zvýšená proliferácia epitelových buniek žalúdočnej nebol úplne preskúmaný. Zmena žalúdočné proliferácia IL-1 by mohli prispieť k karcinogénne procesu, okrem účinkov na sekréciu kyseliny. Z tohto dôvodu boli posúdené priame účinky IL-1 na proliferáciu epitelu žalúdočnej.
MAP kináza (MAPK) kaskády sú dobre charakterizované cesty transdukcie signálu z bunkového povrchu do jadra. Rad zahŕňa rôzne podskupiny; extracelulárnej kináz signálne súvisiacich (EKR), c-Jun NH 2-terminálny kinázy (JNK) a p38 MAPK [25]. Tieto EKR sú aktivované rôznymi extracelulárnej stimuly, a sprostredkovávajú pre-proliferatívne účinky radu hormónov a rastových faktorov [26, 27]. Aktivácia fosforylácie proteínovej kinázy s dvojitou špecifickosťou (MAP kináza kináza (MAPKK)), (tiež známy ako MEK), umožňuje to zase k aktivácii rodinu serín-treonín proteínkinázy, známy ako EKR. Že EKR zase fosforizuje bunkových proteínov, vrátane transkripčných faktorov, a preto majú kľúčovú úlohu v šírení mitogénne signálov. V súlade s tým bola posúdená úloha MAP-kinázy dráhy pri sprostredkovaní odpovede na IL-1.
Metódy
bunkové kultúry
ľudskej AGS žalúdočné karcinóm bunkové línie bola zakúpená od Európskej zbierke kultúrach živočíšnych buniek (Porton Down, UK). Bunky boli pestované v jednovrstvovej kultúre v RPMI 1640 médiu doplnenom 100 ug /ml penicilínu, 100 ug /ml streptomycínu, 100 ug /ml gentamycínu, 2,5 ug /ml amphoteracin B a 10% fetálneho teľacieho séra. Bunky boli pestované v 75 cm 2 fľašiach pre tkanivové kultúry pri 37 ° C v atmosfére 5% CO 2 a 95% vzduchu a pasážovania každé 5-7 dni.
Proliferačnej štúdie
[ 3H] tymidínu. Bunky boli pestované v médiu obsahujúcom 10% fetálne teľacie sérum, umiestnené do 24-jamkových doštičiek pri 10 5 buniek /jamka a ponechané prichytiť sa cez noc. Po umytí sa média bez séra, bunky boli inkubované v médiu bez séra obsahujúcom 0,2 mM neoznačený tymidín po dobu 24 hodín za prítomnosti zvyšujúcich sa koncentrácií IL-1, IL-8 alebo GM-CSF. Syntéza DNA bola odhadnutá meraním [ 3H] tymidínu do kyseliny trichlóroctovej (TCA) vyzrážať materiálu [28]. [ 3H] tymidín (0,1 UCI /ml, 10 Ci /mmol) bol pridaný 2 hodiny pred koncom liečebného obdobia 24 hodín. Bunky boli dvakrát premyté médiom bez séra pre odstránenie neprirodzenej [ 3H] tymidínu, a DNA sa vyzráža 5% TCA pri teplote 4 ° C počas 15 minút. Zrazeniny boli potom dvakrát premyté 95% etanolom, rozpustená v 1 ml roztoku hydroxidu sodného, ​​a analyzované kvapalinovým oscilačnom počtom. Výsledky sú vyjadrené ako percento nestimulované [ 3H] tymidínu (priemer ± SD) 4-6 rôznych experimentov, každý vykonaný trikrát. Pre detekciu inhibícia rastu, boli bunky inkubované s buď špecifický inhibítor MEK PD 98059 (25 uM), [29], IL-1 receptora (500 ng /ml) [30] alebo neutralizačných protilátok, anti-GM-CSF (5 ug /ml) alebo anti-IL-8 (10 ng /ml). Inhibítory alebo protilátky boli pridané 30 minút pred cytokínov.
Bunkového rastu
Celkový počet životaschopných buniek bola hodnotená pomocou modifikovaného MTT (3- [4,5-dimetyl-thiazol-2-yl] -2,5 difenyl tetrazóliom bromid test) [31]. Bunky boli umiestnené do 24-jamkových doštičiek v médiu s obsahom 10% fetálneho teľacieho séra. Po pripojení cez noc bolo médium zmenené na 1% fetálneho teľacieho séra, doplnenom médiu a boli pridané zvyšujúce sa koncentrácie IL-1. Bunky boli kultivované počas 48 hodín a potom sa médium odstránilo a čerstvé RPMI 1640 obsahujúci 0,5 ng /ml bol pridaný MTT. Bunky boli inkubované pri 37 ° C počas 3 hodín. Médium potom bolo odstránené a 0,04 M kyseliny chlorovodíkovej v izopropylalkohole sa pridá k extrakcii redukovaného formazánu. Výsledná optická hustota pri 550 nm bola určená.
Chemikálie a činidlá
rekombinantný ľudský IL-1 a IL-8 boli získané od firmy Sigma (Poole, UK), rekombinantný ľudský GM-CSF a antagonistu receptora IL-1, anti-GM-CSF a anti-IL-8 boli zo systémov D (Abingdon, UK) a R. PD 95059 bol od Calbiochem (Nottingham, UK). RPMI 1640 bol od firmy Gibco BRL (Paisley, UK) a všetky ostatné reagencie boli od firmy Sigma. Koncentrácia inhibítorov používané boli prevzaté z údajov výrobcov a publikovaných dát. Schopnosť 500 ng /ml IL-1RA zrušiť 10 ng /ml IL-1-stimulácii IL-8 sekrécie AGS bunkách bola potvrdená. Účinnosť anti-GM-CSF pri 5 ug /ml protilátky zrušiť GM-CSF (1 ng /ml) indukovanú proliferáciu AGS buniek bola potvrdená. Štatistiky
cytokíny stimulovanými výsledky v prípade, v porovnaní s kontrolnými bunkami nestimulovanými na rovnakom 24-jamkové doštičky. Údaje boli porovnané pomocou jednocestnej analýzy rozptylu a Študentov t-test pre stanovenie štatistickej významnosti. Každý experiment ako je prevedený v troch opakovaniach na 4-6 príležitostiach. Výsledky sú vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka. Rozdiely s P hodnotami < 0,05 boli považované za významné.
Výsledky
Vplyv IL-1 na [3H] tymidínu
Interleukín-1β spôsobil od dávky závislé zvýšenie syntézy DNA, ako je merané pomocou inkorporácie tymidínu. Ako je znázornené na obrázku 1, signifikantná stimulácia bolo pozorované u 1-100 ng /ml IL-1. Maximálna stimulácia 52 ± 6% nad kontrolou bolo pozorované u 10 ng /ml. Čím vyššia je dávka 100 mg /ml bol o niečo menej účinný pri stimulácii proliferácie. Obrázok 1 Účinok IL-1 na [3H] tymidínu do žalúdočných epiteliálnych buniek AGS bunky boli ošetrené so zvyšujúcimi sa koncentráciami IL-1 po dobu 24 hodín a syntézu DNA posudzovaných [3H] tymidínu. Výsledky boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka. * P Hotel < 0,01 verzus kontrola
Vplyv IL-1 na počte buniek
zvýšenie syntézy DNA IL-1 bol preložený do absolútneho zvýšenie počtu životaschopných buniek. Ako je znázornené na obrázku 2, IL-1β zvýšenie počtu buniek v závislosti na dávke závislé podobné účinky na [ 3H] tymidínu. Maximálna stimulácia bola opäť vidieť na 10 ng /ml IL-1, ktorý produkoval nárast o 22 ± 5% z celkového počtu buniek. Obrázok 2 Účinok IL-1 na počte buniek žalúdočných epiteliálnych buniek Bunky boli ošetrené so zvyšujúcimi sa koncentráciami IL-1 po dobu 48 hodín a celkového počtu životaschopných buniek hodnotených testom MTT. Výsledky boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka. * P Hotel < 0,01 verzus kontrola
účinky inhibície cytokínov alebo inhibíciu receptora pre IL-1-stimulácia proliferácie
Predbežné spracovanie buniek s antagonistom receptora pre interleukín-1, zrušil stimulačný účinok IL-1 na [ 3H] tymidínu (obrázok 3). Predchádzajúce štúdie ukázali, že IL-1β môže aktivovať žalúdočné epiteliálne bunky, vrátane buniek AGS, vylučovať iné cytokíny, najmä interleukín-8 a faktor stimulujúci kolónie granulocytov a makrofágov (GM-CSF) [31, 32]. Z tohto dôvodu boli vykonané ďalšie štúdie, ktoré posúdi, či stimulačné akcia IL-1 sú sprostredkované jeden z týchto dvoch cytokínov. Neutralizujúce protilátky buď IL-8 alebo GM-CSF nemá žiadny vplyv na nestimulované [ 3H] tymidínu. Neutralizácia IL-8 nemá žiadny vplyv na IL-1-stimuated rastu, ale anti-GM-CSF zníženie IL-1β stimulovanej proliferácie o 31 ± 4% (P Hotel &0,01) (obrázok 3). Obrázok 3 Účinok inhibícia cytokínu na IL-1-stimulácii [3H] tymidínu do žalúdočných epiteliálnych buniek AGS bunky boli ošetrené 10 ng /ml IL-1β po dobu 24 hodín v kombinácii buď s antagonistami receptora interleukínu-1 (IL-1RA 500 ng /ml), neutralizuje anti-IL-8 protilátky (10 ug /ml), alebo neutralizačných protilátok anti-GM-CSF (5 ug /ml). Syntéza DNA bola hodnotená pomocou [3H] tymidínu. Výsledky boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka. * P Hotel < 0,01 vs. IL-1 stimulácia v neprítomnosti inhibítora.
Účinky GM-CSF na proliferáciu
s ohľadom na výsledky získané s anti-GM-SCF protilátky, priame rastovo stimulačné akcie GM-CSF bolo vyšetrených. GM-CSF mal silný rastový stimulačný účinok na AGS buniek: výraznému zlepšeniu [ 3 H] tymidínu bol videný vo všetkých koncentráciách (0,001 až 100 ng /ml) GM-CSF. GM-CSF samo o sebe zdá byť účinnejší stimulant ako IL-1; Maximálna stimulácia 108 ± 17% nad kontrolou bolo pozorované u 100 ng /ml GM-CSF (obrázok 4). Inhibičný účinok protilátky anti-GM-CSF bola potvrdená odstránenie rastového stimulačného pôsobenia 1 ng /ml GM-CSF (dáta nie sú uvedené). Predchádzajúce štúdie ukázali, že uvoľňovanie IL-1β stimulovanej GM-CSF za podobných podmienok v AGS buniek na približne 10 až 20 pg /jamku /24 hodín [32]. Pre potvrdenie výsledkov získaných s protilátkou anti-IL-8, [ 3H] tymidínu sa merala v odpovedi na IL-8. Žiadne zvýšenie proliferácie bola pozorovaná pri akejkoľvek koncentrácii IL-8 (0,001 až 100 ng /ml) (dáta nie sú uvedené). Za podobných podmienok, IL-1β stimulované uvoľňovanie IL-8 je približne 3000 pg /jamku /24 hodín [31]. Obrázok 4 Účinok GM-CSF na proliferáciu žalúdočných epiteliálnych buniek. AGS bunky boli ošetrené s rastúcou koncentráciou GM-CSF po dobu 24 hodín. Bunková proliferácia bola hodnotená pomocou [3H] tymidínu. Výsledky boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka. * P Hotel < 0,05, ** P Hotel < 0,01 verzus kontrola
mechanizmus IL-1-stimulácia bunkovej proliferácie
špecifické inhibítory genistein, ktorý inhibuje tyrozínkinázy a PD 98059, ktorý inhibuje MAP kinázy kinázy (MEK), a tým inhibuje EQF-cestu, boli slúži na posúdenie možných intracelulárnej cesty sprostredkováva účinky IL-1. Aby bolo možné skúmať účinky IL-1β odlišné od tých, GM-CSF, tieto experimenty boli vykonávané v prítomnosti neutralizačného anti-GM-CSF. Ako je znázornené na obrázku 5, ani genistein ani PD 98059 zmeniť nestimulovaných [ 3 H] tymidínu začlenenie. Genistein úplne zrušil IL-1-stimulácii proliferácie. Inhibícia MEK s PD 98059 znižuje IL-1β-stimulovanou proliferáciu o 58 ± 5% (P Hotel &0,01) (obrázok 5), ale nebol úplne zrušiť rastový stimulačný pôsobenia IL-1. Ďalej zvyšuje až na vyššia ako maximálna koncentrácia PD 98050 sa ďalej inhibíciu IL-1β-stimulovanou proliferáciu (dáta nie sú uvedené). Obrázok 5 Vplyv inhibícia tyrozín kinázy a aktivity MEK z IL-1β stimulovanej žalúdočnej proliferácie epiteliálnych buniek. AGS bunky boli ošetrené 10 ng /ml IL-1 po dobu 24 hodín v prítomnosti inhibítora tyrozínkinázy genisteínu (100 uM) alebo inhibítorom MEK PD 98059 (25 uM). Proliferácia bola hodnotená [3H] tymidínu. Štúdie boli vykonané v prítomnosti protilátok anti-GM-CSF (5 ug /ml). Výsledky boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka. * P Hotel < 0,01 vs kontroly
diskusiu
Táto štúdia preukázala, že IL-1β zvýšilo proliferáciu buniek AGS. Tento účinok bol obrátený antagonistu receptora, čo naznačuje, že bolo sprostredkované receptorom interleukínu-1. IL-1β stimulované obaja [ 3H] inkorporácie tymidínu, ako miera stimulácia DNA syntetického rýchlosti a tiež celkový počet buniek, ako merané testom MTT. To ukazuje, že stimulácia syntézy DNA IL-1 je preložený do skutočnej zvýšenie počtu buniek.
Časť stimulačné pôsobenie IL-1 sa zdá byť nepriame. Neutralizácia GM-CSF v médiách viedlo k významnému zníženiu IL-1β-stimulovanej proliferácie. AGS buniek je známe, že vylučujú GM-CSF v odpovedi na IL-1 [32]. GM-CSF bola sama o sebe silne stimulujúce proliferáciu buniek. Zdá sa teda pravdepodobné, že časť rastu stimulačný akcia IL-1 sú z dôvodu autokrinný sprostredkovateľský pôsobenie GM-CSF. K dispozícii sú iba obmedzené informácie, ktoré naznačujú, že predchádzajúce GM-CSF stimuluje proliferáciu non-hematopoetických buniek; Dippold et al
ukázali, že exogénny GM-CSF stimuloval rast dva z dvoch kultúr odvodených od žalúdočných karcinómov a dvaja z deviatich karcinóm pankreasu bunkových línií [33, 34]. Avšak, na rozdiel od súčasnej štúdie, autokrinný produkciu GM-CSF bola zistiteľná.
Žalúdočné epiteliálne bunky tiež produkujú IL-8 v odozve na IL-1 [31]. Avšak v tomto modelovom systéme, IL-8 samotný nemal pre-proliferačnú akciu a neutralizáciu IL-8 neovplyvnil stimulačné pôsobenie IL-1. Preto je pravdepodobné, že IL-8 je autokrinný úlohu v raste-stimulačný pôsobenia IL-1. Je možné, že ďalšie cytokíny produkované žalúdočných epitelovými bunkami v odpovedi na IL-1, H. pylori alebo
ďalšie zápalové urážky by tiež mohla hrať úlohu autokrinný alebo parakrinný mediátory rastu. Nedávno bolo oznámené, že ďalšie C-X-C chemokiny, GRO /CINCA-1, ktorý je tiež up-regulované v H. pylori infekcie
stimulovanej proliferácie v krysích žalúdočných epiteliálnych buniek [35]. Úloha týchto ďalších potenciálnych autokrinný mediátorov si zaslúži ďalšie štúdium.
Výsledky štúdií inhibítory silne naznačujú, že tyrozín kinázy je nevyhnutná pre rast podporujúci účinok IL-1 v bunkách AGS. Inhibítor tyrozínkinázy genistein zrušil stimulačné pôsobenie IL-1. IL-1β je známe, že aktivuje nepreberné množstvo intracelulárnych signálnych dráh [31, 36-39], ale v súčasnej situácii sa zdá, že absolútna požiadavka na signalizáciu prostredníctvom tyrozínkináz, následnú na aktiváciu receptora.
Mitogény aktivovaný proteín kaskáda je dobre charakterizovaný dráha sprostredkováva rast buniek-stimulačný akcie mnohých rastové faktory a hormóny. Inhibícia EKR, s inhibítorom MEK PD 98059, ktorý zabraňuje aktivácii EKR fosforylácie mal významný inhibičný účinok proti stimulačné pôsobenie IL-1. To naznačuje, že aktivácia EQF je dôležitá pri sprostredkovaní rastové stimulačnej akcie IL-1. Aktiváciu MAP kinázy kaskád, vrátane P42 a P44 EQF dráhy a p46JNK a p55JNK c-Jun NH 2-terminálnych kináz pomocou IL-1 bola preukázaná u potkanov žalúdočné epiteliálne bunky [41, 42], ale funkčné význam, z týchto dráh nebola skúmaná. Aktivácia EKR a JNK bola inhibovaná genisteínu [41], v súlade s záveroch z tejto štúdie, ktoré MAPK ležať v smere prúdenia za tyrozín aktivity v IL-1β-indukovanú signalizáciu. Avšak v súčasnej štúdie PD 98059 nebol úplne zrušiť stimulačný účinok IL-1, čo naznačuje, že alternatívne cesty, aktivuje následné na tyrozín kinázy, tiež hrajú úlohu v signalizácii proliferatívnej odpovedi na IL-1. Ďalšie štúdie prebiehajú v súčasnosti skúmať nich.
K dispozícii sú s ňou v rozpore údaje týkajúce sa priamej účinky IL-1 na žalúdočné epitelové proliferácie. Aj keď súčasné štúdie a štúdie Fan et al for S-stimulovanej leukocytov kondiciovaného média preukázali zvýšenú proliferáciu ľudské bunkové línie AGS [14], iné ukázali inhibíciu séra, TGF-a a EGF-stimulovanú proliferáciu v RGM1 potkaním žalúdka epitelové bunky a IL-1 [41, 42]. Tominaga et al
ukázali, že predúprava RGM1 buniek IL-1 po dobu 6 hodín inhibovaná proliferácia po 24 hodinách, avšak inhibičný účinok bol stratený na 48 hodín, [41]. Dôvody týchto rozdielov nie sú jasné. Môžu odrážať štrukturálne rozdiely medzi jednotlivými bunkovými líniami, rozdiely v aktivácii a zapojení parakrinný dráh podporujúcich rast, druhovej variability, čo je účinok špecifický pre určité rastových faktorov alebo základných rozdielov v biológii bunkových línií odvodených od karcinómu (AGS) alebo normálne tkanivo (RGM1). Tieto štúdie demonštrujúce inhibíciu proliferácie IL-1 boli vykonané v prítomnosti silných podnetov podporujúcich rast (vysoká séra alebo špecifických koncentrácií rastového faktora v médiu), kartové hry uvedenej štúdie boli vykonané u séra médiu bez séra alebo 1% , Je možné, že viac signálne dráhy aktivované IL-1 majú rozdielne účinky na proliferáciu, dominantný účinok v závislosti na komplexných vzájomných vzťahov podnetov a signálnych dráh za rôznych okolností. Pre-zápalové cytokíny, ako je IL-1 a TNF-a aktiváciu rôznych signálnych dráh s rozdielnym výsledkom a rôznych časových ihrísk v žalúdočných žliaz s vnútornou sekréciou, a parietálnych bunkách [37, 38, 43-46]. Ďalšie štúdie sú v plnom prúde budú preskúmané konkrétne úlohy jednotlivých signálnych dráh v žalúdočných epiteliálnych bunkách za rôznych podmienok.
V súčasnej dobe existuje silná epidemiologické údaje spájajúce H. pylori
s karcinómom žalúdka. Karcinogénne proces vyzerá, že zahŕňa množstvo krokov: H. pylori
indukovaná zápal postupuje k atrofii, črevné metaplázia, dysplázia a nakoniec karcinómu [47]. Podobne H. pylori
infekcie u mongolských Gerbil ľahko vyvoláva žalúdočné atrofia a rakoviny [6]. Kým žalúdočné karcinogenézy je bezpochyby multifaktoriálne proces zahŕňajúci patogénne bakteriálne a hostiteľských faktorov, vrátane stavu HLA, diéty a antioxidačné stav [47, 48], je zrejmé, že zvýšené žalúdočné epiteliálne proliferáciu, a to najmä pri relatívne vyššia ako v apoptóze, je dôležitým časť dráhy [49, 50]. Zvýšené žalúdočné epiteliálne proliferácia je typický pre H. pylori
infekcie; Je preukázateľné vo všetkých fázach infekcie a odstránenie infekcie znižuje proliferáciu. Zvýšená proliferácia je dôležitým ukazovateľom zvýšené riziko gastrointestinálnych adenokarcinómu [12]. Mechanizmy zvýšenej proliferácie však nie sú celkom známe. In vitro štúdie
testovacích kultúr H. pylori alebo
zložiek dali rozporuplné výsledky v rôznych systémoch s rôznymi typmi buniek a bakteriálnych kmeňov. Priame stimulácia žalúdočnej epiteliálne proliferácie H. pylori
bola označená niektorými autormi [14, 15], pričom buď neutrálne účinky [15], alebo zvýšenú apoptózu a zníženie proliferácie boli popísané aj ďalšie [16-18]. Fan et al uvádzajú, že
kondiciovaného média z oboch H. pylori alebo
mitogénom aktivovaných lymfocytov priamo stimulovanej proliferácie AGS buniek [14], čo naznačuje, že zápalová reakcia môže byť čiastočne zodpovedný za zvýšenie epitelové proliferácie. Produkcia IL-1β sa zvyšuje v H. pylori
infekciu, a to cytokín je považovaný za zásadné pre reguláciu pre-zápalové odpovede v H. pylori
infekcie.
IL-1β je hlboký inhibítor sekrécie žalúdočnej kyseliny in vivo
[51] a v izolovaných parietálnych bunkách [37, 38]. Genetické polymorfizmy v zoskupení génov IL-1 spôsobuje zvýšenú transkripčný aktivitu sú spojené so zvýšeným rizikom pre-rakovinových a rakovinových histologických zmien v H. pylori infekcie
[21, 22]. Všeobecný hypotéza vysvetľuje toto pozorovanie je, že zvyšuje produkciu IL-1β ktorá vznikla po H. pylori
infekcií je zodpovedný za väčšiu potlačenie sekrécie kyseliny, čo umožňuje väčšiu kolonizáciu sliznice tela kyseliny sekretujících [24]. Táto väčšia kolonizácia vyvoláva ďalšie zápal, čo v konečnom dôsledku vedie k strate epitelu špecializované kyselinu sekrečnú (atrofia) a ďalej zosilňuje bludný kruh zvýšenou zápalu a zmenšil sekréciu kyseliny [52]. Žalúdočné atrofia významne predurčuje k rakovine [3]. Predpokladá sa, že atrofia v kombinácii s mediátorov uvoľnených zápalu, ako voľných kyslíkových radikálov a oxidu dusnatého, strave, antioxidačné stav a prípadne bakteriálne prerastanie a vytvárania nitrozamínov v achlorhydric žalúdku [53] vopred histologické zmeny, pretože mutageneisis a riadiť progresiu do karcinómu.
alternatívou, ale sa navzájom nevylučujú, hypotéza je, že zvýšená odpoveď cytokínov priamo zvyšuje epitheliální bunkovú proliferáciu, a sama o sebe predispozíciu k rakovine, okrem účinkov na sekréciu kyseliny. Zvýšený obrat buniek tohto hyperproliferativní reakcie by sama o sebe, aby sliznice náchylnejšie na mutagénne účinky voľných radikálov a iných toxických látok vznikajúcich pri achlorhydric zápal žalúdka.
Inom mieste v gastrointestinálnom trakte, IL-1β bolo preukázané, že stimulujú [ 3 H] tymidínu a zvyšuje počet buniek kultivovaných ľudských črevných subepiteliální myofibroblastů, ktorý je myšlienka mať význam v prestavbe sliznice pri zápaloch [54]. Pre-proliferačnej účinky IL-1 v tráviacom trakte si zaslúži ďalšie štúdium, vzhľadom na význam tohto cytokínu v regulácii slizničné zápalovej reakcie.
Závery
Výsledky tejto štúdie naznačujú, že IL-1β a GM-CSF môže priamo stimulovať žalúdočné proliferáciu epitelu. To by mohlo vysvetliť proliferatívne odozvy na kondicionovaných médií lymfocytov preukázaná tým, Fan et al
[14]. Zvýšenú epiteliálne proliferácia vzhľadom k IL-1 sa môže podieľať na zvýšené riziko rakoviny žalúdka a prekanceróznych lézií v H. pylori
-infected osôb so špecifickými IL-1β alely spojené s vyššou úrovňou produkcie. IL-1β stimuluje proliferáciu prostredníctvom aktivácie receptora sprostredkovanej tyrozín kinázy. Následný signalizácia zahŕňa EKR závislé a -independent cesty.
Ďalších štúdií bude potrebné objasniť mechanizmy zapojené do IL-1-stimulácia žalúdka epitelové proliferácie, ako aj údaje o koreláciu genotyp IL-1, produkcia IL-1β proteín a epitelu proliferácie in vivo
Tie doplnia existujúce štúdie a ďalej zlepšiť naše chápanie H. pylori
indukovanej žalúdočnej karcinogenéze
Zoznam skratiek
EGF: ..
epidermálne rastový faktor
EKR:
extracelulárnej súvisiace signálu kinázy
GM-CSF:
faktor stimulujúci kolónie granulocytov a makrofágov

IL:
interleukín
JNK:
c-Jun NH 2-terminálny kinázy

MAP:
mitogénom aktivovanej proteín
MTT - 3- [4:
5-dimetyl-thiazol-2-yl] -2,5 difenyl tetrazóliom bromid

TCA: kyselina trichlóroctová
TGF-α :.
transformujúci rastový faktor alfa

vyhlásenie
autorov pôvodné predloženej súbory obrazov
Nižšie sú uvedené odkazy na autorov pôvodných predložených súborov pre obrázky. "Pôvodný súbor pre Obrázok 1 12876_2001_21_MOESM2_ESM.pdf autorského 12876_2001_21_MOESM1_ESM.pdf autorov pôvodného súboru na obrázku 2 12876_2001_21_MOESM3_ESM.pdf autorského pôvodného súboru pre obrázok 3 12876_2001_21_MOESM4_ESM.pdf autorov pôvodný súbor na Obrázok 4 pôvodného súboru 12876_2001_21_MOESM5_ESM.pdf autorského na obrázku 5 konkurenčné záujmy
Žiadne deklarovaný.

• Klinické štúdie úrodu lymfatických uzlín s uhlíkovými nanočasticami v pokročilým karcinómom žalúdka: prospektívna randomizovaná štúdia
• Vplyv jablčný ocot z oneskoreného vyprázdňovania žalúdka u pacientov s diabetes mellitus 1. typu: pilotné štúdie