Effect van Interleukine-1β op de proliferatie van maag epitheelcellen in cultuur

Effect van Interleukine-1β op de proliferatie van maag epitheelcellen in cultuur
Abstracte achtergrond
Helicobacter pylori
is de belangrijkste risicofactor voor de ontwikkeling van niet-cardia maagkanker. Verhoogde proliferatie van het maagslijmvlies is een kenmerk van H. pylori infectie
. Mucosale interkeukin-1β productie wordt verhoogd H. pylori infectie
en IL-1β genotypes geassocieerd met verhoogde pro-inflammatoire activiteit risicofactoren voor het ontwikkelen van maagkanker. Het effect van IL-1β op gastrische epitheelcel proliferatie werd onderzocht in deze studie.
Werkwijzen
AGS-cellen werden gekweekt met IL-1β. DNA-synthese werd assed door [ 3 H] thymidine incorporatie en het totale aantal levensvatbare cellen door MTT-test.
Resultaten
IL-1β dosisafhankelijk toegenomen DNA-synthese en mobiele nummers. De verhoogde proliferatie werd geblokkeerd door interleukine-1 receptor antagonist. Toevoeging van neutraliserende antilichamen tegen GM-CSF verlaagde IL-1β-gestimuleerde proliferatie van 31 ± 4%. GM-CSF alleen aanzienlijk gestimuleerde proliferatie. Toevoeging of neutralisatie van IL-8 geen effect op basale of IL-1β-gestimuleerde proliferatie. De tyrosine kinase inhibitor genisteïne blokkeerde IL-1β-gestimuleerde proliferatie en remming van de extracellulaire signaal-gerelateerde kinase pathway Parkinson 98.059 remde IL-1β gestimuleerde proliferatie van 58 ± 5%.
Conclusies
IL-1β proliferatie in maagepitheelcellen. Autocriene stimulatie door GM-CSF bij aan deze proliferatieve respons. Signalering via tyrosinekinase-activiteit is essentieel voor de mitogene respons op IL-1β. Het extracellulaire signaal-gerelateerde kinase pathway betrokken is, maar niet essentieel voor stroomafwaartse signalering. IL-1β kunnen bijdragen tot de hyperproliferatie waargenomen bij H. pylori geïnfecteerde
maagslijmvlies, en betrokken bij de carcinogenese. Achtergrond
Helicobacter pylori
wordt beschouwd als de belangrijkste etiologische factor in de ontwikkeling van niet-cardia adenocarcinoom van de maag.; Grootschalige epidemiologische studies hebben een sterke associatie tussen H. pylori
infectie en beide kanker [1-3] en de eerdere histologische stadia, atrofie en intestinale metaplasie [4, 5] bevestigd die beide het risico van latere neoplastische transformatie. Dierlijke modellen hebben ook aangetoond hoe belangrijk het is H. pylori
in de maag carcinogenese [6, 7]. Verhoogde snelheden van proliferatie van het maagslijmvlies zijn typisch in H. pylori-infectie
[8-11], en hyperproliferatie in het maagdarmkanaal lijkt een marker voor latere kwaadaardige veranderingen [12] zijn. De oorzaak van de verhoogde mate van proliferatie is niet duidelijk, maar het verhoogde verlagen normaal met speling van de infectie [8, 13]. Hoewel hypeprproliferation is typisch in vivo,
studies testen van de effecten van de H. pylori golfreizen of haar producten in vitro
hebben aangetoond tegenstrijdige resultaten, met zowel verbeterde [14, 15] en verminderde [16-18] proliferatie gerapporteerd. Het is mogelijk dat andere componenten van de ontstekingsreactie typisch H. pylori geïnfecteerde mucosa
ten minste gedeeltelijk verantwoordelijk voor het stimuleren van de verhoogde celproliferatie kunnen zijn. Ondernemingen De pluripotente pro-inflammatoir cytokine interleukine-1β een centrale rol in de pathogenese van H. pylori
geïnduceerde slijmvliesontsteking. IL-1β genexpressie en eiwitproductie zijn verhoogd bij H. pylori
infectie en te verminderen met succesvolle uitroeiing [19, 20]. De aanwezigheid van de IL-1β genotype polymorfisme geassocieerd met verhoogde IL-1β-productie is in verband gebracht met een significant verhoogd risico op maagkanker en voorstadia van kanker [21, 22]. Interleukine-1β is een krachtige remmer van maagzuursecretie en wordt verondersteld dat de verhoogde IL-1β respons verandert de topografie van de maag infectie en bevordert zo ontsteking en daaropvolgende atrofie van de maag corpus [23, 24]. De mogelijkheid dat IL-1 ß zelf drijft de verhoogde proliferatie van maagepitheelcellen niet volledig onderzocht. Verandering van de maag proliferatie van IL-1β kan bijdragen tot de carcinogenese, naast de effecten op de zuursecretie. Dus de directe effecten van IL-1β on maagepitheel proliferatie onderzocht. Ondernemingen De mitogeen-geactiveerde proteïne kinase (MAPK) cascades zijn goed gekarakteriseerde trajecten transduceren signalen van het celoppervlak naar de kern. De familie omvat verschillende subgroepen; extracellulair signaal verwante kinasen (ERK), c-Jun NH 2-terminale kinasen (JNK) en p38 MAPK [25]. De ERK's worden geactiveerd door een verscheidenheid van extracellulaire stimuli en bemiddelen de pro-proliferatieve effecten van een aantal hormonen en groeifactoren [26, 27]. Activering door fosforylering van een tweevoudige specificiteit eiwitkinase (MAP kinase kinase (MAPKK)), (ook bekend als MEK), maakt het mogelijk weer tot een familie van serine-threonine eiwitkinasen, zogenaamde ERK te activeren. De ERK beurt fosforyleren vele cellulaire eiwitten, waaronder transcriptiefactoren en dus een centrale rol bij voortplanting van mitogene signalen. Dienovereenkomstig heeft de rol van de MAP-kinase route bij het mediëren de respons op IL-1β is beoordeeld.

Werkwijzen Celkweek
menselijke AGS maagcarcinoom cellijn werd gekocht bij de Europese Collection of Animal Cell Cultures (Porton down UK). De cellen werden gekweekt in monolaag cultuur in RPMI 1640 medium aangevuld met 100 ug /ml penicilline, 100 ug /ml streptomycine, 100 ug /ml gentamicine, 2,5 ug /ml amphoteracine B en 10% foetaal kalfsserum. Cellen werden gekweekt in 75 cm 2 weefselkweek kolven bij 37 ° C in een atmosfeer van 5% CO 2 en 95% lucht en gepasseerd om de 5-7 dagen.
Proliferatie studies
[ 3H] thymidine. De cellen werden gegroeid in medium dat 10% foetaal kalfsserum, uitgeplaat in 24-well platen bij 10 5 cellen /putje en gedurende de nacht hechten. Na wassen met serumvrij medium werden de cellen geïncubeerd in serumvrij medium met 0,2 mM niet-gemerkt thymidine gedurende 24 uur in aanwezigheid van toenemende concentraties van IL-1β, IL-8 of GM-CSF. DNA synthese werd geschat door meting van [ 3H] thymidine incorporatie in de trichloorazijnzuur (TCA) precipiteerbare materiaal [28]. [ 3H] thymidine (0,1 uCi /ml, 10 Ci /mmol) werd 2 uur voor het einde van een behandelingsperiode van 24 uur toegevoegd. Cellen werden tweemaal met serumvrij medium gewassen om niet opgenomen [ 3H] thymidine te verwijderen en DNA werd gedurende 15 minuten geprecipiteerd met 5% TCA bij 4 ° C. De precipitaten werden vervolgens tweemaal met 95% ethanol gewassen, opgelost in 1 ml NaOH en geanalyseerd door vloeistofscintillatietelling. Resultaten worden uitgedrukt als percentage bestrijding gestimuleerde [ 3H] thymidine incorporatie (gemiddelde ± SD) van 4-6 verschillende experimenten, elk in triplo uitgevoerd. Voor de detectie van groeiremming werden cellen geïncubeerd met hetzij de specifieke MEK remmer PD 98059 (25 uM) [29], IL-1 receptor antagonist (500 ng /ml) [30] of neutraliserende antilichamen, anti-GM-CSF (5 ug /ml) of anti-IL-8 (10 ug /ml). Remmers of antilichamen werden toegevoegd 30 minuten voorafgaand aan cytokinen.
Celgroei
Totaal aantal levensvatbare cellen werden bepaald door een gemodificeerde MTT (3- [4,5- dimethylthiazol-2-yl] -2,5 difenyl tetrazolim bromide assay) [31]. Cellen werden uitgeplaat in 24 putjes in medium dat 10% foetaal kalfsserum. Na hechting gedurende de nacht werd het medium veranderd naar 1% foetaal kalf serum aangevuld medium en toenemende concentraties van IL-1β toegevoegd. De cellen werden gedurende 48 uur en vervolgens werd het medium verwijderd en vers RPMI 1640 medium dat 0,5 ng /ml MTT werd toegevoegd. Cellen werden geïncubeerd bij 37 ° C gedurende 3 uur. Het medium werd vervolgens verwijderd en 0,04 M HCI in isopropanol werd toegevoegd aan het verlaagde formazan product te extraheren. De resulterende optische dichtheid bij 550 nm werd bepaald.
Chemicaliën en reagentia
Recombinant humaan IL-1β en IL-8 werden gekocht bij Sigma (Poole, UK), recombinant humaan GM-CSF en IL-1 receptor antagonist, anti-GM-CSF en anti-IL-8 waren van R &D Systems (Abingdon, UK). PD 95.059 was van Calbiochem (Nottingham, UK). RPMI 1640 was van Gibco BRL (Paisley, UK) en alle andere reagentia waren van Sigma. Concentraties van remmers die werden genomen uit gegevens van fabrikanten en gepubliceerde gegevens. Het vermogen van 500 ng /ml IL-1RA tot 10 ng /ml IL-1β-stimulatie van IL-8 secretie in cellen AGS schaffen bevestigd. De werkzaamheid van de anti-GM-CSF bij 5 ug /ml antilichaam voor GM-CSF (1 ng /ml) induceerde schaffen AGS celproliferatie werd bevestigd. Statistische gegevens
cytokine-gestimuleerde resultaten wanneer vergeleken met controle cellen gestimuleerde op dezelfde 24-wells plaat. De gegevens werden vergeleken door eenrichtingsanalyse van variantie en Student's t-test om statistische significantie te bepalen. Elk experiment uitgevoerd in drievoud 4-6 keer. Resultaten worden uitgedrukt als gemiddelde ± standaardafwijking. Verschillen met P-waarden van < 0,05 werden significant geacht.
Resultaten
Effect van IL-1β on [3H] thymidine incorporatie
interleukine-1β veroorzaakte een dosisafhankelijke toename van DNA-synthese gemeten door thymidine. Zoals getoond in figuur 1, werd significante stimulering waargenomen met 1-100 ng /ml IL-1β. De maximale stimulering van 52 ± 6% boven de controle werd waargenomen bij 10 ng /ml. De hogere dosis van 100 mg /ml was iets minder effectief in het stimuleren van proliferatie. Figuur 1 Effect van IL-1β on [3H] thymidine incorporatie in maagepitheel AGS cellen Cellen werden behandeld met toenemende concentraties van IL-1β gedurende 24 uur en DNA-synthese bepaald door [3H] thymidine incorporatie. Resultaten uitgedrukt als gemiddelde ± standaardafwijking. * P Restaurant < 0,01 versus controle
effect van IL-1β op mobiele nummer Ondernemingen De toename van de DNA-synthese door IL-1β werd vertaald in een absolute toename van aantal levensvatbare cellen. Zoals getoond in figuur 2, IL-1β verhoogde celaantallen in een dosisafhankelijke manier vergelijkbaar met de effecten op [ 3H] thymidine incorporatie. De maximale stimulatie werd opnieuw gezien bij 10 ng /ml IL-1β, die een verhoging 22 ± 5% in totaal celaantal geproduceerd. Figuur 2 Effect van IL-1β over celaantallen van maagepitheelcellen Cellen werden behandeld met toenemende concentraties van IL-1β gedurende 48 uur en totaal aantal levensvatbare cellen bepaald door MTT assay. Resultaten uitgedrukt als gemiddelde ± standaardafwijking. * P Restaurant < 0,01 versus controle
Effecten van cytokine inhibitie of receptor antagonisme op IL-1β-stimulatie van proliferatie
Voorbehandeling van de cellen met interleukine-1 receptor antagonist schafte de stimulerende effecten van IL-1β on [ 3H] thymidine (figuur 3). Eerdere studies hebben aangetoond dat IL-1β maagepitheelcellen kunnen activeren en AGS cellen, andere cytokinen, in het bijzonder interleukine-8 en granulocyt-macrofaag koloniestimulerende factor (GM-CSF) [31, 32] scheiden. Daarom werden verdere studies uitgevoerd om te beoordelen of de stimulerende werkingen van IL-1β werden gemedieerd door een van deze twee cytokinen. Neutraliserende antilichamen tegen ofwel IL-8 of GM-CSF had geen effect op gestimuleerde [ 3 H] thymidine. Neutralisatie van IL-8 geen effect op IL-1β stimuated groei, maar de anti-GM-CSF antilichaam verlaagde IL-1β-gestimuleerde proliferatie van 31 ± 4% (P
< 0,01) (figuur 3). Figuur 3 Effect van cytokine inhibitie op de IL-1β-stimulatie van [3H] thymidine in maagepitheelcellen AGS cellen werden behandeld met 10 ng /ml IL-1β gedurende 24 uur plus ofwel interleukine-1 receptor antagonist (IL-1RA 500 ng /ml), neutraliserend anti-IL-8-antilichaam (10 ug /ml) of neutraliserende anti-GM-CSF antilichamen (5 ug /ml). DNA synthese werd bepaald door [3H] thymidine incorporatie. Resultaten uitgedrukt als gemiddelde ± standaardafwijking. * P Restaurant < 0,01 vs. IL-1β stimulatie bij afwezigheid van remmer.
Effecten van GM-CSF op proliferatie
Gezien de resultaten verkregen met de anti-GM-SCF antilichaam direct groeistimulerende werking van GM-CSF resultaten werden onderzocht. GM-CSF had een krachtige groeistimulerende werking op cellen AGS: significante versterking van [ 3H] thymidine werd waargenomen bij alle concentraties (0,001-100 ng /ml) of GM-CSF. GM-CSF bleek zich een krachtigere stimulant dan IL-1β zijn; maximale stimulering van 108 ± 17% boven de controle werd waargenomen met 100 ng /ml GM-CSF (Figuur 4). De remmende werking van de anti-GM-CSF-antilichaam werd bevestigd door opheffing van de groeistimulerende werking van 1 ng /ml GM-CSF (gegevens niet getoond). Eerdere studies hebben aangetoond dat IL-1β-gestimuleerde GM-CSF afgifte onder vergelijkbare omstandigheden AGS cellen ongeveer 10-20 pg /well /24 uur [32] zijn. De resultaten verkregen met de anti-IL-8-antilichaam te bevestigen, [ 3H] thymidine werd gemeten in respons op IL-8. Geen toename van proliferatie werd gezien bij concentraties van IL-8 (0,001-100 ng /ml) (gegevens niet getoond). Onder soortgelijke omstandigheden IL-1β-gestimuleerde IL-8 afgifte ongeveer 3000 pg /well /24 uur [31]. Figuur 4 Effect van GM-CSF op proliferatie van maagepitheelcellen. AGS cellen werden behandeld met toenemende concentraties van GM-CSF gedurende 24 uur. Celproliferatie werd bepaald door [3H] thymidine incorporatie. Resultaten uitgedrukt als gemiddelde ± standaardafwijking. * P Restaurant < 0,05, ** P Restaurant < 0,01 vs controle
Mechanisme van IL-1β-stimulatie van celproliferatie
specifieke remmers genisteïne, die tyrosine kinases en PD 98059 remt, welke MAP kinase kinase (MEK) remt, en remt de ERK-route, waren gebruikt om de mogelijke intracellulaire routes mediëren de effecten van IL-1β beoordelen. Teneinde de effecten van IL-1β van die van GM-CSF te onderzoeken, werden deze experimenten uitgevoerd in aanwezigheid van de anti-GM-CSF neutraliserend antilichaam. Zoals getoond in figuur 5, niet genisteïne of PD 98.059 veranderd gestimuleerde [ 3H] thymidine incorporatie. Genisteïne afgeschaft de IL-1β-stimulatie van proliferatie. Remming van MEK Parkinson 98.059 verlaagde IL-1β-gestimuleerde proliferatie van 58 ± 5% (P
< 0,01) (figuur 5) maar de groeistimulerende werking van IL-1β niet volledig af te schaffen. Verdere verhoging supra-maximale concentratie van PD 98050 niet verder IL-1β-gestimuleerde proliferatie te remmen (gegevens niet getoond). Figuur 5 Effect van remming van tyrosinekinase en MEK activiteit op IL-1β-gestimuleerde celproliferatie maagepitheel. AGS cellen werden behandeld met 10 ng /ml IL-1β gedurende 24 uur in aanwezigheid van de tyrosine kinase inhibitor genisteïne (100 uM) of MEK remmer PD 98059 (25 uM). Proliferatie werd bepaald door [3H] thymidine. Werden uitgevoerd in de aanwezigheid van anti-GM-CSF antilichamen (5 ug /ml). Resultaten uitgedrukt als gemiddelde ± standaardafwijking. * P Restaurant < 0,01 versus controle
Discussie Inloggen Deze studie toonde aan dat IL-1β verhoogde proliferatie van AGS-cellen. Dit effect werd omgekeerd door de receptor antagonist, voorstellend werd gemedieerd via de interleukine-1 receptor. IL-1β gestimuleerde beide [ 3H] thymidine incorporatie, als maat voor stimulatie van DNA synthetische rate alsmede totale aantal cellen gemeten met de MTT-bepaling. Dit illustreert dat de stimulatie van DNA synthese door IL-1β wordt vertaald in een echte toename celaantallen.
Een deel van de stimulerende werking van IL-1β lijkt indirect te zijn. Neutralisatie van GM-CSF in het medium tot een significante afname van IL-1β-gestimuleerde proliferatie. AGS cellen is bekend dat GM-CSF uitscheiden in reactie op IL-1β [32]. GM-CSF zelf was een krachtige stimulans van celproliferatie. Zo lijkt het waarschijnlijk dat een deel van de groeistimulerende werking van IL-1β gevolg zijn van een autocriene intermediair werking van GM-CSF. Er zijn beperkte eerdere gegevens suggereren dat GM-CSF stimuleert de proliferatie van niet-hematopoëtische cellen; Dippold et al
toonde aan dat exogeen GM-CSF stimuleerde de groei van twee van de twee culturen afkomstig uit de maag carcinomen en twee van de negen pancreascarcinoom cellijnen [33, 34]. Anders dan de huidige studie, autocriene productie van GM-CSF niet detecteerbaar.
Maagepitheelcellen produceren ook IL-8 als reactie op IL-1β [31]. Maar in dit modelsysteem, IL-8 alleen had geen pro-proliferatieve werking en neutralisatie van IL-8 beïnvloedde de stimulerende werking van IL-1β. Het is derhalve onwaarschijnlijk dat IL-8 heeft een autocriene rol in de groei-stimulerende werking van IL-1β. Het is mogelijk dat andere cytokines door de maag epitheelcellen in respons op IL-1β, H. pylori of
andere inflammatoire beledigingen kan ook een rol als autocriene of paracriene mediatoren van groei. Onlangs is vermeld dat een andere C-X-C chemokine, GRO /CINC-1, welke ook in H. pylori-infectie
gestimuleerde proliferatie opgereguleerd in ratten maagepitheelcellen [35]. De rol van deze andere mogelijke autocriene mediatoren verdient verder onderzoek. Ondernemingen De resultaten van de remmer studies suggereren sterk dat tyrosine kinase-activiteit is essentieel voor de groei bevorderende werking van IL-1β in AGS cellen. De tyrosine kinase remmer genistein schafte de stimulerende werking van IL-1β. IL-1β is bekend dat een overvloed van intracellulaire signaalroutes [31, 36-39] activeren, maar de huidige situatie lijkt er een absolute vereiste voor signalering via een tyrosinekinase, volgend op receptoractivering. Ondernemingen De mitogeen -geactiveerde eiwit cascade is een goed gekarakteriseerde route medieert de celgroei-stimulerende invloed van vele groeifactoren en hormonen. Remming van de ERK route, de MEK remmer PD 98059, die de activering van ERK's voorkomt door fosforylering, een significante remmende werking tegen de stimulerende werking van IL-1β. Dit suggereert dat activering van de ERK route is van belang bij het mediëren van de groeistimulerende werking van IL-1β. Activering van MAP kinase cascades, waaronder de P42 en P44 ERK paden en p46JNK en p55JNK c-Jun NH 2-terminale kinasen door IL-1β aangetoond bij ratten maagepitheelcellen [41, 42], maar de functionele betekenis van deze routes werd niet onderzocht. Activatie van ERK en JNK werd geremd door genisteïne [41], consistent met de conclusie van deze studie dat MAPK liggen stroomafwaarts van tyrosine activiteit in IL-1β-geïnduceerde signalering. Echter in de huidige studie PD 98.059 niet volledig de stimulerende werking van IL-1β schaffen, wat suggereert dat alternatieve routes, geactiveerde daarna uitgevoerde tyrosine kinase activiteit een rol spelen bij het signaleren van de proliferatieve reacties op IL-1β. Verdere studies gaande thans deze onderzoeken.
Er zijn tegenstrijdige gegevens over de directe effecten van IL-1β on maagepitheel proliferatie. Hoewel de huidige studie en het onderzoek van Fan et al
met behulp van gestimuleerde leukocyten geconditioneerde media toonden verhoogde proliferatie van de menselijke AGS-cellijn [14], anderen hebben aangetoond remming van serum, TGF-α en EGF-gestimuleerde proliferatie in RGM1 rat maagepitheelcellen door IL-1β [41, 42]. Tominaga et al
gebleken dat voorbehandeling van cellen met RGM1 IL-1β gedurende 6 uur remde proliferatie bij 24 uur, maar het remmende effect werd verloren op 48 uur [41]. De redenen voor deze verschillen zijn niet duidelijk. Zij kunnen intrinsieke verschillen tussen de cellijnen verschillen in activering en betrokkenheid van paracriene groei bevorderende routes, species variabiliteit, een effect dat specifiek is voor bepaalde groeifactoren of onderliggend verschillen in de biologie van cellijnen afgeleid van kanker (AGS) of normaal weerspiegelen weefsel (RGM1). De studies tonen remming van proliferatie van IL-1β werden uitgevoerd in de aanwezigheid van krachtige groeibevorderende stimuli (hoog serum of specifieke groeifactor concentraties in het kweekmedium), whist de huidige studies werden uitgevoerd in serumvrij en 1% serum medium . Het is mogelijk dat de meervoudige signaalwegen geactiveerd door IL-1β hebben verschillende effecten op de proliferatie, de dominante effect afhankelijk van de complexe onderlinge relaties van stimuli en signaalwegen onder verschillende omstandigheden. Pro-inflammatoire cytokinen zoals IL-1β en TNF-α hangt de signaalwegen met uiteenlopende resultaten en verschillende tijd gangen in gastrische endocriene en pariëtale cellen [37, 38, 43-46]. Verdere studies zijn aan de gang onderzoek van de specifieke rol van de verschillende signaalwegen in de maag epitheelcellen onder verschillende omstandigheden.
Er zijn nu sterke epidemiologische gegevens te koppelen H. pylori hotels met maagkanker. De carcinogenese blijkt een aantal stappen omvatten: H. pylori geïnduceerde ontsteking
vordert atrofie, intestinale metaplasie, dysplasie en carcinoom uiteindelijk [47]. Evenzo H. pylori
infectie bij Mongoolse gerbils gemakkelijk induceert maagatrofie en kanker [6]. Terwijl maagkanker is ongetwijfeld een multifactorieel proces waarbij pathogene bacteriële en gastheerfactoren, zoals HLA status voeding en antioxidantstatus [47, 48] blijkt dat maagepitheel proliferatie verhoogd, vooral bij betrekkelijk toegenomen ten opzichte van apoptose, is een belangrijke deel van het pad [49, 50]. Verhoogde maag epitheliale proliferatie is een typisch voorbeeld van H. pylori
infectie; Het is aantoonbaar in alle stadia van de infectie en de uitroeiing van de infectie vermindert proliferatie. Verhoogde proliferatie is een belangrijke marker verhoogd risico op gastro-intestinale adenocarcinoom [12]. De mechanismen van de verhoogde proliferatie niet volledig begrepen. In vitro studies
testen culturen van H. pylori of
kiezers hebben tegenstrijdige resultaten in verschillende systemen, met verschillende celtypen en bacteriestammen gegeven. Directe stimulering van gastrische epitheliale proliferatie van H. pylori
gerapporteerd door sommige auteurs [14, 15], terwijl hetzij neutraliteit [15] of verhoogde apoptose en verminderde groei zijn gerapporteerd door anderen [16-18]. Fan et al
gemeld dat geconditioneerd medium van beide H. pylori of
mitogeen geactiveerde lymfocyten direct gestimuleerd AGS celproliferatie [14], wat suggereert dat de ontstekingsreactie gedeeltelijk verantwoordelijk voor de verbetering van epitheliale proliferatie zijn. IL-1β productie verbeterd in H. pylori
infectie en dit cytokine wordt beschouwd als centraal in de regulering van de pro-inflammatoire reactie in H. pylori-infectie
.
IL-1β is een diepe remmer maagzuursecretie in vivo
[51] en in geïsoleerde pariëtale cellen [37, 38]. Genetische polymorfismen van het IL-1β gencluster veroorzaakt verhoogde transcriptie-activiteit geassocieerd met een verhoogd risico op precancereuze en cancereuze histologische veranderingen in H. pylori
infecties [21, 22]. De algemene hypothese verklaren deze waarneming is dat verhoogde IL-1β productie verband met H. pylori infectie
belast mate onderdrukt zuursecretie, wat op zijn beurt zorgt voor een grotere kolonisatie van de zuur-afscheidende body mucosa [24]. Deze grotere kolonisatie veroorzaakt verdere ontsteking, wat uiteindelijk leidt tot verlies van gespecialiseerde zuur-secretoire epitheel (atrofie) en verder versterkt de vicieuze cirkel van toegenomen inflammatie en verminderde maagzuursecretie [52]. Maagatrofie predisponeert aanzienlijk kanker [3]. Aangenomen wordt dat atrofie in combinatie met mediatoren van inflammatie zoals zuurstof vrije radicalen en stikstofoxide, dieet, anti-oxidant staat en eventueel bacteriële overgroei en productie van nitrosaminen in de achloorhydrie maag [53] vooraf de histologische veranderingen veroorzaken mutageneisis en rijden ontwikkelen van kanker.
een alternatief, maar niet uitsluiten, hypothese is dat de verhoogde cytokine respons rechtstreeks verbetert epitheelcelproliferatie en zich predisponeert kanker, naast de effecten op de zuursecretie. De verhoogde celdeling van deze hyperproliferatieve reactie zou zelf de mucosa gevoeliger voor de mutagene effecten van vrije radicalen en andere toxische producten geproduceerd in de achloorhydrie ontstoken maagpijn.
Elders in het maagdarmkanaal, is IL-1β aangetoond dat stimuleren [ 3H] thymidine incorporatie en verhoging van het aantal cellen gekweekte menselijke colon subepitheliale myofibroblasten, waarvan men denkt dat belang zijn in de hermodellering van het slijmvlies bij ontsteking [54]. De pro-proliferatieve effecten van IL-1β in het maagdarmkanaal verdient verdere studie, gezien het belang van dit cytokine in de regulering van de mucosale ontstekingsreactie.

Conclusies De resultaten van deze studie suggereren dat IL-1β en GM-CSF direct stimuleren maagepitheel proliferatie. Dit kan de proliferatieve reacties uitleggen geconditioneerde media lymfocyten blijkt by Fan et al
[14]. Verhoogde epitheliale proliferatie door IL-1β kan bijdragen tot een betere kans op maagkanker en precancereuze laesies in H. pylori geïnfecteerde individuen
specifieke IL-1β allelen geassocieerd met hogere productieniveaus. IL-1β proliferatie via receptor-gemedieerde activering van een tyrosine kinase route. Stroomafwaartse signalering omvat ERK-afhankelijke en -onafhankelijke routes.
Verdere studies zijn nodig om de mechanismen betrokken bij IL-1β-stimulatie van maag epitheliale proliferatie, alsmede gegevens correleren IL-1β genotype verduidelijken, IL-1β eiwitproductie en epitheliale proliferatie in vivo
Deze zullen de huidige studie complimenteren en verdere versterking van ons begrip van H. pylori
geïnduceerde maag carcinogenese Nederlands Lijst van afkortingen
EGF:..
epidermale groeifactor
ERK:
extracellulaire signaal-gerelateerde kinase
GM-CSF:
granulocyt-macrofaag kolonie stimulerende factor

IL:
interleukine
JNK:
c-Jun NH 2-terminal kinase

MAP:
mitogeengeactiveerde eiwit
MTT - 3- [4:
5-dimethyl-2-yl] -2,5 difenyl tetrazolim bromide

TCA:
trichloorazijnzuur
TGF-α.
transformerende groeifactor alfa

verklaringen
Authors 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar de auteurs oorspronkelijke ingediende dossiers voor afbeeldingen. 'Originele bestand voor figuur 1 12876_2001_21_MOESM2_ESM.pdf Authors' 12876_2001_21_MOESM1_ESM.pdf Auteurs originele bestand voor figuur 2 12876_2001_21_MOESM3_ESM.pdf Authors 'originele bestand voor figuur 3 12876_2001_21_MOESM4_ESM.pdf Authors' originele bestand voor figuur 4 originele bestand 12876_2001_21_MOESM5_ESM.pdf Authors 'voor figuur 5 concurrerende belangen
geen gemeld.

• Klinische studie van de oogst lymfeklieren met carbon nanodeeltjes in gevorderde maagkanker: een prospectieve gerandomiseerde trial
• Effect van appelazijn op vertraagde maaglediging bij patiënten met type 1 diabetes mellitus: een pilot study