Efeito da interleucina-1β sobre a proliferação de células epiteliais gástricas em efeito culture

de interleucina-1β na proliferação das células epiteliais gástricas na cultura da arte abstracta
Fundo
Helicobacter pylori
é o principal fator de risco para o desenvolvimento do cancro gástrico não-cárdia. Aumento da proliferação da mucosa gástrica é uma característica da infecção por H. pylori
. Mucosa interkeukin-1β de produção é maior em H. pylori
infecção e genótipos de IL-1 associada ao aumento da atividade pró-inflamatória são fatores de risco para o desenvolvimento de câncer gástrico. O efeito de IL-1β sobre a proliferação celular epitelial gástrica foi examinada neste estudo.
Métodos
AGS células foram cultivadas com IL-1β. síntese de ADN foi assed por [ 3H] timidina e o número de células viáveis ​​total pelo ensaio MTT.
Resultados de Il-1β forma dependente da dose o aumento do número de síntese de DNA e células. A proliferação aumentada foi bloqueado pelo antagonista do receptor de interleucina-1. A adição de anticorpos neutralizantes para o GM-CSF reduziu a proliferação estimulada por IL-1β até 31 ± 4%. GM-CSF sozinho estimulou significativamente a proliferação. A adição ou neutralização de IL-8 não teve nenhum efeito sobre a proliferação basal ou estimulada por IL-1β. A quinase de tirosina genisteína inibidor bloqueou completamente a IL-1β estimulada por proliferação e a inibição da quinase relacionada com sinal via extracelular com PD 98059 inibiu a IL-1β proliferação estimulada por 58 ± 5%.
Conclusões de Il-1β estimula a proliferação em células epiteliais gástricas. a estimulação autócrina por GM-CSF contribui para esta resposta proliferativa. Sinalização através de actividade de tirosina cinase é essencial para a resposta mitogénica de IL-1β. O sinal relacionado cinase extracelular está envolvido em, mas não é essencial para a sinalização a jusante. IL-1β podem contribuir para a hiperproliferação visto em H. pylori da mucosa gástrica infectada
, e estar envolvido no processo cancerígeno.
Fundo
Helicobacter pylori
acredita-se ser o principal factor etiológico em o desenvolvimento de adenocarcinoma gástrico não-cárdia. estudos epidemiológicos de grande escala confirmaram uma forte associação entre H. pylori
infecção e ambos câncer [1-3] e quanto mais cedo histológica etapas, atrofia e metaplasia intestinal [4, 5]; ambas as quais aumentam o risco de transformação neoplásica mais tarde. Os modelos animais também demonstraram a importância de H. pylori
na carcinogênese gástrica [6, 7]. Aumento das taxas de proliferação da mucosa gástrica são típicos em H. pylori
infecção [8-11], hiperproliferação e no tracto gastrointestinal parece ser um marcador para a transformação maligna posterior [12]. A causa do aumento da taxa de proliferação não é clara, mas as taxas aumentadas reduzir ao normal com a depuração da infecção [8, 13]. Embora hypeprproliferation é típico in vivo,
estudos que testam os efeitos da H. pylori
ou seus produtos in vitro
mostraram resultados conflitantes, com os dois reforçada [14, 15], e diminuiu [16-18] proliferação relatado. É possível que outros componentes da resposta inflamatória típicos de H. pylori
mucosa infectada pode ser pelo menos parcialmente responsável por conduzir a proliferação celular aumentada.
Pluripotentes A citocina pró-inflamatória interleucina-1β tem um papel central na patogênese da H. pylori
inflamação da mucosa induzida. IL-1β expressão gênica e produção de proteínas estão aumentadas na infecção por H. pylori
e reduzir com sucesso da erradicação [19, 20]. A presença do polimorfismo genótipo IL-1β associada com um aumento de IL-1β-produção tem sido associado com um aumento significativo do risco de cancro gástrico e lesões pré-cancerosas [21, 22]. A interleucina-1β é um inibidor potente da secreção de ácido gástrico e é a hipótese de que a resposta a IL-1β reforçada altera a topografia da infecção gástrica e, portanto, promove a inflamação e a atrofia subsequente do corpo gástrico [23, 24]. A possibilidade de que a IL-1p-se acciona o aumento da proliferação de células epiteliais gástricas não foi completamente investigada. A alteração da proliferação gástrica por IL-1β pode contribuir para o processo carcinogénico, em adição aos efeitos sobre a secreção de ácido. Por conseguinte, os efeitos directos de IL-1β na proliferação epitelial gástrica foram avaliados.
A proteína-quinase activada por mitogénio (MAPK) cascatas estão bem caracterizadas vias de transdução de sinais a partir da superfície da célula para o núcleo. A família inclui subgrupos distintos; quinases relacionadas com sinais extracelulares (ERKs), quinases c-Jun NH2-terminal (JNK) e MAPK p38 [25]. Os ERKs são activadas por uma variedade de estímulos extracelulares, e medeiam os efeitos pró-proliferativas de um número de hormonas e factores de crescimento [26, 27]. A activação por fosforilação de uma proteína cinase de dupla especificidade (MAP-quinase-quinase (MAPKK)), (também conhecido como MEK), permite que, por sua vez para activar uma família de cinases de proteínas serina-treonina, conhecidas como a ERK. Os ERK, por sua vez fosforila numerosas proteínas celulares, incluindo factores de transcrição e, assim, têm um papel central na propagação de sinais mitogénicos. Por conseguinte, o papel da via da MAP-cinase em mediar as respostas a IL-1β foi avaliada.
Métodos
cultura celular
A linha celular de carcinoma gástrico humano AGS foi adquirido da Colecção Europeia de Culturas de Células Animais (Porton Down, UK). As células foram cultivadas em cultura em monocamada em meio RPMI 1640 suplementado com 100 ug /ml de penicilina, 100 ug /ml de estreptomicina, 100 ug /ml de gentamicina, 2,5 ug /ml anfoteracina B e 10% de soro fetal de vitelo. As células foram cultivadas em 75 cm 2 frascos de cultura de tecidos a 37 ° C numa atmosfera de 5% de CO 2 e 95% de ar e passadas a cada 5-7 dias. Estudos de proliferação
[ 3H] timidina. As células foram cultivadas em meio contendo 10% de soro fetal de vitelo, plaqueadas em placas de 24 poços em 10 5 células /poço e deixadas a ligar durante a noite. Após lavagem com meio isento de soro, as células foram incubadas em meio isento de soro, contendo 0,2 mM de timidina não marcada durante 24 horas na presença de concentrações crescentes de IL-1β, IL-8 ou GM-CSF. a síntese de ADN foi estimada por medição de [ 3H] timidina em ácido tricloroacético (TCA) de material precipitável [28]. [ 3H] timidina (0,1 uCi /ml, 10 Ci /mmol) foi adicionado 2 horas antes do fim de um período de tratamento de 24 horas. As células foram lavadas duas vezes com meio isento de soro, para remover não incorporada [ 3H] timidina, e o ADN foi precipitado com TCA a 5% a 4 ° C durante 15 minutos. Os precipitados foram então lavados duas vezes com etanol a 95%, dissolvido em 1 ml de NaOH e analisadas por contagem de cintilação líquida. Os resultados são expressos como percentagem de controlo não estimulado [ 3H] timidina (média ± DP) de 4-6 experiências diferentes, cada uma realizada em triplicado. Para a detecção de inibição de crescimento, as células foram incubadas com o PD específico inibidor MEK 98059 (25 uM) [29], IL-1 receptor antagonista (500 ng /ml) [30] ou a anticorpos neutralizantes, anti-GM-CSF (5 ug /ml) ou anticorpo anti-IL-8 (10 ng /ml). Os inibidores ou anticorpos foram adicionados 30 minutos antes de citocinas. O crescimento celular
número de células viáveis ​​totais foram avaliados por um MTT modificado (3- [4,5-dimetiltiazol-2-il] -2,5 difenil brometo de ensaio tetrazolim) [31]. As células foram plaqueadas em placas de 24 poços em meio contendo 10% de soro fetal de vitelo. Após fixação durante a noite, o meio foi mudado para meio suplementado com soro fetal de vitelo a 1% e adicionaram-se concentrações crescentes de IL-1β. As células foram cultivadas durante 48 horas e, em seguida, o meio foi removido e meio fresco RPMI 1640 contendo 0,5 ng /ml foi adicionado MTT. As células foram incubadas a 37 ° C durante 3 horas. O meio foi então removido e HCl 0,04 M em isopropanol, foi adicionado para extrair o produto de formazano reduzido. Determinou-se a densidade óptica a 550 nm resultante.
de produtos químicos e reagentes de Il-1β humana recombinante e IL-8 foram adquiridos a partir de Sigma (Poole, Reino Unido), recombinante humano de GM-CSF e o antagonista do receptor de IL-1, anti-GM-CSF e anti-IL-8 eram de D systems (Abingdon, RU) e R. PD 95059 era de Calbiochem (Nottingham, Reino Unido). RPMI 1640 era da Gibco BRL (Paisley, Reino Unido) e todos os outros reagentes foram da Sigma. As concentrações de inibidores usadas foram tomadas a partir dos dados do fabricante e os dados publicados. A capacidade de 500 ng /ml de IL-1Ra abolir 10 ng /ml de IL-1β-estimulação de secreção de IL-8 em células AGS foi confirmada. A eficácia do anti-GM-CSF a 5 ug /ml de anticorpo para abolir o GM-CSF (1 ng /ml) a proliferação celular induzida AGS foi confirmada. Resultados estatísticas
citocina estimulada onde em comparação com células não estimuladas de controlo na mesma placa de 24 poços. Os dados foram comparados por análise unidireccional da variância e do teste t de Student para determinar a significância estatística. Cada experimento como realizado em triplicado em 4-6 ocasiões. Os resultados são expressos como média ± desvio padrão. Diferenças com valores de P < 0,05 foram considerados significativos.

Resultados Efeito de IL-1β em [3H] timidina
Interleucina-1β causou um aumento dependente da dose da síntese de DNA tal como medido por incorporação de timidina. Como mostrado na Figura 1, a estimulação significativa foi observada com 1-100 ng ml de IL-1β /. A estimulação máxima de 52 ± 6% acima do controlo foi observado com 10 ng /ml. A dose mais elevada de 100 mg /ml foi ligeiramente menos eficaz na estimulação da proliferação. A Figura 1 Efeito de IL-1β em [3H] timidina em células epiteliais gástricas AGS As células foram tratadas com concentrações crescentes de IL-1β durante 24 horas e a síntese de ADN avaliadas por [3H] timidina. Resultados expressos em média ± desvio padrão. * P Art < 0,01 vs. controlo
Efeito de IL-1β no número de células
O aumento da síntese de ADN por IL-1β foi traduzido para um aumento absoluto no número de células viáveis. Como mostrado na figura 2, a IL-1β aumento do número de células num modo dependente da dose semelhante para os efeitos sobre a [ 3H] timidina. A estimulação máxima foi novamente visto a 10 ng /ml de IL-1β, que produziu um aumento de 22 ± 5% no número total de células. Figura 2 Efeito de IL-1β em números de células de células epiteliais gástricas As células foram tratadas com concentrações crescentes de IL-1β durante 48 horas e o número de células viáveis ​​totais avaliadas pelo ensaio de MTT. Resultados expressos em média ± desvio padrão. * P Art < 0,01 vs. controlo
Efeitos da inibição de citoquinas ou antagonismo do receptor de IL-1β-estimulação de proliferação
O pré-tratamento das células com o antagonista do receptor de interleucina-1 aboliu os efeitos estimuladores da IL-1β em [ 3H] a incorporação de timidina (Figura 3). Estudos anteriores têm demonstrado que a IL-1β pode activar as células epiteliais gástricas, incluindo células de AGS, a secreção de outras citocinas, particularmente interleucina-8 e factor estimulante de colónias de granulócitos-macrófagos (GM-CSF) [31, 32]. Por conseguinte, novos estudos foram realizados para avaliar se as acções estimuladoras de IL-1β foram mediados por qualquer uma destas duas citocinas. Quer de anticorpos neutralizadores da IL-8 ou GM-CSF tinha nenhum efeito sobre a não estimulado [ 3H] timidina. A neutralização da IL-8 não teve nenhum efeito sobre o crescimento de IL-stimuated-1β mas o anticorpo anti-GM-CSF reduz a proliferação estimulada por IL-1β até 31 ± 4% (P
< 0,01) (Figura 3). Figura 3 Efeito de inibição de citocinas em IL-1β-estimulação de [3H] timidina em células AGS células epiteliais gástricas foram tratadas com 10 ng /ml de IL-1β durante 24 horas mais qualquer antagonista do receptor de interleucina-1 (IL-1Ra 500 ng /ml), neutralizando-IL-8 anti anticorpo (10 ug /ml) ou anticorpo neutralizante anti-GM-CSF (5 ng /ml). a síntese de ADN foi avaliada por [3H] timidina. Resultados expressos em média ± desvio padrão. * P Art < estimulação 0,01 vs. IL-1β na ausência de inibidor.
Efeitos de GM-CSF na proliferação
Em vista dos resultados obtidos com o anticorpo anti-GM-SCF, as acções de crescimento-estimuladores directos de GM-CSF foram examinados. GM-CSF tinha uma acção estimuladora de crescimento potente em células AGS: aumento significativo da [ 3H] timidina foi observada em todas as concentrações de 0,001-100 (ng /ml) de GM-CSF. -se o GM-CSF parece ser um estimulante mais potente do que a IL-1β; estimulação máxima de 108 ± 17% acima do controlo foi visto com 100 ng /ml de GM-CSF (Figura 4). A acção inibidora do anticorpo anti-GM-CSF foi confirmada por abolição da acção estimuladora de crescimento 1 ng /mL de GM-CSF (dados não mostrados). Estudos anteriores demonstraram que a libertação estimulada por IL-1β GM-CSF em condições semelhantes em células AGS ser de aproximadamente 10-20 pg /poço /24 horas [32]. Para confirmar os resultados obtidos com o anticorpo anti-IL-8, [ 3H] timidina foi medida em resposta a IL-8. Sem aumento de proliferação foi observada em qualquer concentração de IL-8 (0,001-100 ng /ml) (dados não mostrados). Sob condições semelhantes estimulada por IL-1β IL-8 de libertação é de aproximadamente 3000 pg /poço /24 horas [31]. Figura 4 Efeito de GM-CSF sobre a proliferação de células epiteliais gástricas. AGS células foram tratadas com concentrações crescentes de GM-CSF durante 24 horas. A proliferação celular foi avaliada por [3H] timidina. Resultados expressos em média ± desvio padrão. * P Art < 0,05, ** P Art < 0,01 vs controlo
Mecanismo de IL-1β-estimulação da proliferação de células in the inibidores genisteína específica, que inibe cinases de tirosina e PD 98059, que inibe a cinase de MAP cinase (MEK), e, assim, inibe a via de ERK-, eram usada para avaliar as possíveis vias de sinalização intracelular que medeiam os efeitos da IL-1β. A fim de examinar os efeitos de IL-1β distintos daqueles de GM-CSF, estas experiências foram realizadas na presença do anticorpo neutralizante anti-GM-CSF. Como mostrado na Figura 5, nem a genisteína nem PD 98059 alterado não estimulado [ 3H] timidina. A genisteína aboliu completamente a IL-1β-estimulação de proliferação. A inibição de MEK PD 98059 com reduziu a proliferação estimulada por IL-1β por 58 ± 5% (P
< 0,01) (figura 5), ​​mas não aboliu completamente a sua acção estimuladora do crescimento de IL-1β. Aumentos adicionais para concentrações supra-máxima de 98050 PD não inibiu a proliferação estimulada por IL-1β (dados não mostrados). Figura 5 Efeito de inibição da tirosina quinase e da actividade de MEK sobre a proliferação celular epitelial gástrica estimulada por IL-1β. AGS células foram tratadas com 10 ng /ml de IL-1β durante 24 horas na presença do inibidor de tirosina cinase genisteína (100 uM) ou o inibidor da MEK PD 98059 (25 uM). A proliferação foi avaliada por [3H] timidina. Os estudos foram realizados na presença de anticorpo anti-GM-CSF (5 ng /ml). Resultados expressos em média ± desvio padrão. * P Art < 0,01 vs controle
Discussão
Este estudo demonstrou que a IL-1β aumento da proliferação de células AGS. Este efeito foi revertido pelo antagonista do receptor, sugerindo que era mediada através do receptor de interleucina-1. IL-1β estimulada tanto [ 3H] timidina, como medida de estimulação da taxa de síntese de ADN e também os números de células totais, tal como medido pelo ensaio MTT. Isto ilustra que a estimulação da síntese de DNA pela IL-1β é traduzido num aumento real no número de células.
Uma porção da acção estimuladora da IL-1β parece ser indirecta. A neutralização de GM-CSF nos meios levou a uma redução significativa da proliferação estimulada por IL-1β. AGS células são conhecidos para secretar GM-CSF em resposta à IL-1β [32]. -se o GM-CSF foi um potente estimulante da proliferação de células. Assim, parece provável que a parte de crescimento a acções estimuladoras de IL-1β são devidas a uma acção intermediário autócrina de GM-CSF. Existem dados anteriores limitados, sugerindo que o GM-CSF estimula a proliferação de células não-hematopoiéticas; Dippold et ai
exógeno mostraram que o GM-CSF estimulou o crescimento de duas em cada duas culturas derivadas de carcinomas gástricos e dois dos nove linhas celulares de carcinoma pancreático [33, 34]. No entanto, ao contrário do presente estudo, a produção autócrina de GM-CSF foi NO. Células epiteliais gástricas
detectáveis ​​também produzem IL-8 em resposta a IL-1β [31]. No entanto, neste sistema modelo, IL-8 sozinha teve nenhuma acção pró-proliferativa e a neutralização de IL-8 não afectou a acção estimuladora de IL-1β. Por isso, é improvável que a IL-8 tem um papel na acção autócrino de crescimento-estimuladora de IL-1β. É possível que outras citoquinas produzidas pelas células epiteliais gástricas em resposta a IL-1β, H. pylori ou outros insultos
inflamatórias podem também desempenhar um papel como mediadores autócrinos ou parácrinos de crescimento. Foi recentemente relatado que uma outra quimiocina C-X-C, GRO /CINC-1, que também é regulada positivamente em H. pylori
infecção proliferação estimulada em células epiteliais gástricas de rato [35]. O papel desses outros potenciais mediadores autócrinos merece mais estudo.
Os resultados dos estudos de inibidor sugerem fortemente que a actividade da tirosina quinase é essencial para o crescimento de promoção da acção da IL-1β em células AGS. A genisteína inibidor de tirosina cinase aboliu a acção estimuladora de IL-1β. IL-1β é conhecida para activar uma multiplicidade de vias de sinalização intracelulares [31, 36-39], mas na situação actual não parece ser um requisito absoluto para a sinalização através de uma tirosina-cinase, na subsequente activação do receptor.
O mitogénio cascata proteína -activated é um caminho bem caracterizado mediar as acções de células de crescimento-estimuladoras de diversos factores de crescimento e hormonas. A inibição da via de ERK, com o inibidor da MEK PD 98059, que previne a activação de ERK pela fosforilação, teve uma acção inibidora significativa contra a acção estimuladora de IL-1β. Isto sugere que a activação da via ERK é importante na mediação das acções estimuladoras do crescimento de IL-1β. A activação de cascatas de MAP-cinase, incluindo as vias de p42 e ERK p44 e p46JNK e p55JNK c-Jun NH quinases 2-terminal por IL-1β tem sido demonstrada em ratos células epiteliais gástricas [41, 42], mas a importância funcional destas vias não foi examinado. A activação de ERK e JNK foi inibida por genisteína [41], consistente com a conclusão do estudo actual que se encontram MAPK a jusante da actividade da tirosina na sinalização induzida por IL-1β. No entanto, no estudo corrente 98059 PD não aboliu completamente a acção estimuladora de IL-1β, sugerindo que as vias alternativas, activado subsequente da actividade de tirosina quinase, também desempenham um papel na sinalização das respostas proliferativas a IL-1β. Mais estudos estão em andamento no momento de examinar estes.
Há dados conflitantes disponíveis relativos aos efeitos diretos de IL-1β na proliferação epitelial gástrica. Embora o estudo e o estudo por Fan et ai
proliferação utilizando meio condicionado estimulou-leucócitos mostraram um aumento da proliferação da linha celular humana AGS [14], outros demonstraram inibição de soro, TGF-α e EGF-estimuladas in RGM1 rato células epiteliais gástricas por IL-1β [41, 42]. Tominaga et ai
mostrou que o pré-tratamento de células com IL-RGM1 1β durante 6 horas inibiu a proliferação em 24 horas, mas o efeito inibitório foi perdida em 48 horas, [41]. As razões para estas discrepâncias não são claras. Eles podem reflectir diferenças intrínsecas entre as linhas celulares, a diferenças na activação e envolvimento das vias de promoção do crescimento parácrino, a variabilidade de espécies, um efeito específico para determinados factores de crescimento, ou diferenças subjacentes na biologia das linhas celulares derivadas de cancro (AGS) ou normal tecido (RGM1). Os estudos que demonstram a inibição de proliferação por IL-1β foram realizadas na presença de poderosos estímulos de promoção do crescimento (alta de soro ou concentrações de factor de crescimento específico em meio de cultura), enquanto que as actuais estudos foram realizados em meio de soro isento de soro ou 1% . É possível que as múltiplas vias de sinalização activadas por IL-1β têm diferentes efeitos sobre a proliferação, o efeito dominante de acordo com as inter-relações complexas de estímulos e vias de sinalização em diferentes circunstâncias. citocinas pró-inflamatórias, tais como IL-1β e TNF-α ativam diferentes vias de sinalização com resultados divergentes e os diferentes tempos cursos de células endócrinas e parietais gástricas [37, 38, 43-46]. Mais estudos estão em andamento examinando os papéis específicos das diferentes vias de sinalização em células epiteliais gástricas em diferentes condições.
Há agora fortes dados epidemiológicos que ligam H. pylori
com carcinoma gástrico. O processo cancerígeno parece envolver uma série de passos: H. pylori
inflamação induzida por progride para atrofia, metaplasia intestinal, displasia e, eventualmente, carcinoma [47]. Da mesma forma H. ​​pylori
infecção em gerbilos da Mongólia prontamente induz atrofia gástrica e câncer [6]. Enquanto carcinogênese gástrica é, sem dúvida, um processo multifatorial, envolvendo fatores bacterianos e de acolhimento patogénicos, incluindo o status HLA, dieta e estado antioxidante [47, 48], é evidente que o aumento da proliferação epitelial gástrica, especialmente quando relativamente aumentou em relação à apoptose, é um importante parte da via de [49, 50]. O aumento da proliferação epitelial gástrica é típica da infecção por H. pylori
; é demonstrável em todos os estágios da infecção e erradicação da infecção reduz a proliferação. Aumento da proliferação é um importante marcador de risco aumentado de adenocarcinoma gastrointestinal [12]. Os mecanismos do aumento da proliferação não são completamente compreendidos. In vitro
teste estudos culturas de H. pylori ou
constituintes deram resultados conflitantes em diferentes sistemas, com diferentes tipos de células e estirpes bacterianas. estimulação directa da proliferação epitelial gástrica por H. pylori
foi relatado por alguns autores [14, 15], enquanto que, quer a efeitos neutro [15] ou com um aumento da apoptose e diminuição da proliferação foram relatados por outros [16-18]. Fan et al relataram que
meios condicionados a partir de qualquer de H. pylori ou linfócitos activados mitogénio
estimulada directamente a proliferação de células AGS [14], sugerindo que a resposta inflamatória pode ser em parte responsável pelo aumento da proliferação epitelial. a produção de IL-1β é reforçada na infecção por H. pylori e
esta citocina é considerado como sendo essencial para a regulação da resposta pro-inflamatória na infecção por H. pylori
.
IL-1β é um inibidor profunda da secreção de ácido gástrico in vivo
[51] e em células parietais isolados [37, 38]. Os polimorfismos genéticos do agrupamento de genes de IL-1β causando um aumento da actividade de transcrição estão associados com um risco aumentado de alterações histológicas pré-cancerosas e cancerosas em pylori
infecção por H. [21, 22]. A hipótese geral explicar esta observação foi que a consequente produção aumentada de IL-1β sobre a infecção por H. pylori
é responsável pela maior supressão da secreção ácida, que por sua vez permite um maior colonização da mucosa corpo secretoras de ácido [24]. Esta maior colonização provoca mais inflamação, que em última análise conduz à perda de epitélio secretor-ácido especializado (atrofia) e ainda mais potência o ciclo vicioso de inflamação aumentada e diminuída a secreção de ácido [52]. atrofia gástrica predispõe significativamente para câncer [3]. Acredita-se que a atrofia em combinação com mediadores libertados na inflamação, tais como radicais livres de oxigénio e o óxido nítrico, dieta, estado anti-oxidante e sobrecrescimento possivelmente bacteriana e a geração de nitrosaminas no estômago achlorhydric [53] avançar as alterações histológicas, causa mutageneisis e conduzir a progressão para cancro.
uma alternativa, mas não se excluem mutuamente, a hipótese é que a resposta de citocinas reforçada melhora directamente a proliferação de células epiteliais e predispõe-se a cancro, em adição aos seus efeitos sobre a secreção de ácido. O aumento do volume de células desta resposta hiperproliferativa que, por si, a mucosa mais vulnerável aos efeitos mutagénicos dos radicais livres e outros produtos tóxicos gerados no estômago inflamado achlorhydric.
Em outras partes do tracto gastrointestinal, IL-1β foi mostrada para estimular [ 3H] timidina e aumentar o número de células de miofibroblastos cólon humanas cultivadas subepiteliais, que é pensado para ter importância na remodelação da mucosa na inflamação [54]. Os efeitos pró-proliferativos da IL-1β no tracto gastrointestinal merece mais estudo, tendo em conta a importância desta citocina na regulação da resposta inflamatória da mucosa.

Conclusões Os resultados do presente estudo sugerem que a IL-1β e GM-CSF pode estimular diretamente a proliferação epitelial gástrica. Isso pode explicar as respostas proliferativas para a mídia de linfócitos condicionado demonstradas por Fan et al
[14]. proliferação epitelial melhorada devido a IL-1β podem contribuir para o risco aumentado de cancro gástrico e lesões pré-cancerosas em H. pylori
indivíduos infectados com alelos IL-1β específicos associados com níveis mais elevados de produção. IL-1β estimula a proliferação através da activação mediada pelo receptor de uma via de cinase de tirosina. sinalização a jusante envolve dependente da ERK e vias independentes de.
Estudos adicionais serão necessários para esclarecer os mecanismos envolvidos na IL-1β-estimulação de proliferação epitelial gástrica, assim como os dados que correlacionam o genótipo IL-1β, a produção de proteína IL-1β e proliferação epitelial in vivo
Estes irão complementar o estudo e melhorar ainda mais a nossa compreensão do H. pylori carcinogênese gástrica induzida
Lista de abreviaturas
EGF:..
epidérmica fator de crescimento
ERK:
quinase relacionada sinal extracelular
GM-CSF:
fator estimulante de colônias de granulócitos e macrófagos

IL:
interleucina
JNK:
c-Jun NH 2-terminal

MAPA:
proteína ativada mitogen
MTT - 3- [4:
5-dimetiltiazol-2-il] -2,5 difenil tetrazolim

TCA: ácido tricloroacético
TGF-α:.
fator transformador de crescimento alfa

Declarações
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