Efecto de la interleucina-1β sobre la proliferación de las células epiteliales gástricas en cultivo

Efecto de la interleucina-1β sobre la proliferación de las células epiteliales gástricas en la cultura
Resumen Antecedentes

Helicobacter pylori
es el principal factor de riesgo para el desarrollo de cáncer gástrico no cardias. Aumento de la proliferación de la mucosa gástrica es una característica de H. pylori
infección. Mucosa interkeukin-1β producción se incrementa en H. pylori
infección y genotipos IL-1ß asociados con aumento de la actividad pro-inflamatoria son factores de riesgo para el desarrollo de cáncer gástrico. El efecto de la IL-1β en la proliferación de células epiteliales gástricas ha sido examinado en este estudio.
Métodos
células AGS se cultivaron con IL-1β. síntesis de ADN se valoraron a [ 3H] número de células viables totales mediante el ensayo de MTT y la incorporación de timidina.
Resultados sobre Il-1β aumento de la dosis dependiente números de síntesis de ADN y células. La mayor proliferación fue bloqueado por la interleucina-1 antagonista de los receptores. La adición de anticuerpos neutralizantes a GM-CSF redujo la proliferación estimulada por IL-1β por 31 ± 4%. GM-CSF solo estimuló significativamente la proliferación. La adición o neutralización de IL-8 no tuvieron efecto sobre basal o la proliferación estimulada por IL-1β. El inhibidor de quinasa tirosina genisteína bloqueó completamente la proliferación y la inhibición de la vía de la quinasa relacionada con la señal extracelular con PD 98059 inhibió la IL-1β la proliferación estimulada por 1β estimulada por IL por 58 ± 5%.
Conclusiones
IL-1β estimula la proliferación en las células epiteliales gástricas. estimulación autocrina por GM-CSF contribuye a esta respuesta proliferativa. De señalización a través de la actividad de tirosina quinasa es esencial para la respuesta mitogénica de IL-1β. La vía de la quinasa relacionada con señal extracelular está implicado en, pero no es esencial para la señalización aguas abajo. IL-1β puede contribuir a la hiperproliferación visto en H. pylori de la mucosa gástrica
infectado, y participar en el proceso carcinogénico.
Antecedentes
Helicobacter pylori
se cree que es el factor etiológico importante en el desarrollo de adenocarcinoma gástrico no cardias. Los estudios epidemiológicos a gran escala han confirmado una fuerte asociación entre la infección por H. pylori
y tanto el cáncer [1-3] y el anterior histológico etapas, atrofia y metaplasia intestinal [4, 5]; ambas que aumentan el riesgo de transformación neoplásica más tarde. Los modelos animales han demostrado también la importancia de H. pylori
en la carcinogénesis gástrica [6, 7]. El aumento de las tasas de proliferación de la mucosa gástrica son típicos en H. pylori
infección [8-11], y la hiperproliferación dentro del tracto gastrointestinal parece ser un marcador de cambio maligno más adelante [12]. La causa del aumento de la frecuencia de la proliferación no es clara, pero las mayores tasas de reducir a la normalidad con un aclaramiento de la infección [8, 13]. Aunque hypeprproliferation es típico en vivo de búsqueda estudios que evaluaron los efectos de H. pylori
o sus productos in vitro
han mostrado resultados contradictorios, con tanto mayor [14, 15] y la disminución de la proliferación [16-18] reportado. Es posible que otros componentes de la respuesta inflamatoria típicos de H. pylori
mucosa infectada podría ser al menos parcialmente responsable de conducir la proliferación de células aumentado.
El pluripotentes pro-inflamatoria de citoquinas interleuquina-1β tiene un papel central en la patogénesis de H. pylori
inflamación de la mucosa inducida. IL-1β la expresión génica y la producción de proteínas se incrementan en H. pylori
infección y reducir con éxito en la erradicación [19, 20]. La presencia del polimorfismo genotipo IL-1β asociado con una mejora de IL-1β-producción se ha asociado con un aumento significativo del riesgo de cáncer gástrico y lesiones precancerosas [21, 22]. La interleucina-1β es un potente inhibidor de la secreción de ácido gástrico y se plantea la hipótesis de que la respuesta de la IL-1β mejorada altera la topografía de la infección gástrica y por lo tanto promueve la inflamación y posterior atrofia de los corpus gástrico [23, 24]. La posibilidad de que IL-1ß sí impulsa el aumento de la proliferación de las células epiteliales gástricas no se ha investigado a fondo. La alteración de la proliferación gástrica por IL-1β podría contribuir al proceso carcinogénico, además de los efectos sobre la secreción de ácido. Por lo tanto, se han evaluado los efectos directos de la IL-1β en la proliferación del epitelio gástrico. Francia El proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK) cascadas son las vías de transducción bien caracterizados señales desde la superficie celular al núcleo. La familia incluye distintos subgrupos; quinasas relacionadas por señales extracelulares (ERK), c-Jun NH quinasas 2-terminal (JNKs) y de p38 MAPK [25]. Los ERKs son activadas por una variedad de estímulos extracelulares y median los efectos pro-proliferativos de una serie de hormonas y factores de crecimiento [26, 27]. La activación por fosforilación de una proteína quinasa de especificidad dual (MAP quinasa quinasa (MAPKK)), (también conocido como MEK), le permite a su vez para activar una familia de proteínas quinasas serina-treonina, conocidos como el ERKs. Los ERKs a su vez fosforila numerosas proteínas celulares incluyendo factores de transcripción y por lo tanto tienen un papel central en la propagación de señales mitogénicas. En consecuencia, el papel de la vía de la MAP-quinasa en la mediación de las respuestas a IL-1β ha sido evaluada.
Métodos Cultivo de células

La línea celular de carcinoma gástrico AGS humana se adquirió de la Colección Europea de Cultivos Celulares Animales (Porton Down, Reino Unido). Las células fueron cultivadas en cultivo en monocapa en medio RPMI 1640 suplementado con 100 mg /ml de penicilina, 100 mg ml de estreptomicina, 100 g, 2,5 mg /ml B anfotericina y 10% de suero de ternera fetal //ml de gentamicina. Las células fueron cultivadas en 75 cm 2 frascos de cultivo de tejidos a 37 ° C en una atmósfera de 5% de CO 2 de aire y un 95% y se pasaron cada 5-7 días. Estudios de proliferación
[ 3H] timidina. Las células fueron cultivadas en medios que contienen suero de ternera fetal 10%, chapada en placas de 24 pocillos a 10 5 células /pocillo y se dejó que se unieran durante la noche. Después de lavar con medio libre de suero, las células se incubaron en medio libre de suero que contiene 0,2 mM de timidina sin por 24 horas en presencia de concentraciones crecientes de IL-1β, IL-8 o GM-CSF. la síntesis de ADN se estimó por medición de [ 3H] timidina en el ácido tricloroacético (TCA) de material precipitable [28]. [ 3H] timidina (0,1 Ci /ml, 10 Ci /mmol) se añadió 2 horas antes del final de un periodo de tratamiento de 24 horas. Las células se lavaron dos veces con medio libre de suero para eliminar no incorporada [ 3H] timidina, y el ADN se precipitó con TCA al 5% a 4 ° C durante 15 minutos. a continuación, los precipitados se lavaron dos veces con 95% de etanol, se disolvió en 1 ml de NaOH, y se analizaron por recuento de centelleo líquido. Los resultados se expresan como porcentaje de control no estimulado [ 3H] timidina (media ± SD) de 4-6 experimentos diferentes, cada uno realizado por triplicado. Para la detección de la inhibición del crecimiento, las células se incubaron con el PD inhibidor de MEK específica 98059 (25 mM) [29], IL-1 antagonista del receptor (500 ng /ml) [30] o los anticuerpos neutralizantes, anti-GM-CSF (5 mg /ml) o anti-IL-8 (10 mg /ml). Los inhibidores o anticuerpos se añadieron 30 minutos antes de citoquinas. El crecimiento celular
número de células viables totales fueron evaluados por un MTT modificado (3- [4,5-dimetiltiazol-2-il] -2,5 difenil bromuro de ensayo tetrazolim) [31]. Las células se sembraron en placas de 24 pocillos en medio que contiene suero de ternera fetal 10%. Después de la unión durante la noche, el medio se cambió a 1% medio suplementado con suero de ternera fetal y se añadieron concentraciones crecientes de IL-1β. Las células se cultivaron durante 48 horas y después se eliminó el medio y fresco medio RPMI 1640 que contiene 0,5 ng /ml se le añadió MTT. Las células se incubaron a 37 ° C durante 3 horas. Después se retiró el medio y se añadió 0,04 M de HCl en isopropanol para extraer el producto de formazán reducido. Se determinó la densidad óptica resultante a 550 nm.
Productos químicos y reactivos
recombinante IL-1β humana y la IL-8 se adquirieron de Sigma (Poole, Reino Unido), recombinante humano GM-CSF e IL-1 antagonista de los receptores, anti-GM-CSF y anti-IL-8 eran de D Systems (Abingdon, Reino Unido) R y. PD 95059 era de Calbiochem (Nottingham, Reino Unido). RPMI 1640 era de Gibco BRL (Paisley, UK) y todos los demás reactivos fueron de Sigma. Las concentraciones de los inhibidores utilizados fueron tomados de los datos del fabricante y los datos publicados. Se confirmó la capacidad de los 500 ng /ml de IL-1RA abolir 10 ng /ml de IL-1β-estimulación de IL-8 secreción en las células AGS. La eficacia de los anti-GM-CSF a 5 mg /ml de anticuerpo para abolir GM-CSF (1 ng /ml) inducida por la proliferación de células AGS se confirmó. Resultados estadísticas
estimuladas por citoquinas en comparación con las células no estimuladas de control en la misma placa de 24 pocillos. Los datos se compararon por análisis de una vía de la varianza y la prueba t de Student para determinar la significación estadística. Cada experimento que realizó por triplicado en 4-6 ocasiones. Los resultados se expresan como media ± desviación estándar. Las diferencias con valores de p < 0,05 se consideraron significativos.
Resultados
efecto de la IL-1β de [3H] timidina
interleucina-1β causó un aumento dependiente de la dosis en la síntesis de ADN, medida por la incorporación de timidina. Como se muestra en la figura 1, la estimulación significativa se observó con 1-100 IL-1β ng /ml. La estimulación máxima de 52 ± 6% por encima del control fue visto con 10 ng /ml. La dosis más alta de 100 mg /ml fue ligeramente menos eficaz en la estimulación de la proliferación. Figura 1 Efecto de la IL-1β de [3H] timidina en AGS epiteliales gástricas células Las células se trataron con concentraciones crecientes de IL-1β durante 24 horas y la síntesis de ADN evaluadas por [3H] timidina. Resultados expresados ​​como medias ± desviación estándar. * P Hotel < 0,01 frente a control
efecto de la IL-1β en el número de células comentario El aumento de la síntesis de ADN por la IL-1β se tradujo en un aumento absoluto del número de células viables. Como se muestra en la figura 2, IL-1β se incrementó el número de células de una manera dependiente de la dosis similar a los efectos sobre [ 3H] timidina. La estimulación máxima fue visto de nuevo a 10 ng /ml de IL-1β, que produjo un aumento de 22 ± 5% en el número total de células. Figura 2 Efecto de la IL-1β en el número de células de las células epiteliales gástricas Las células se trataron con concentraciones crecientes de IL-1β durante 48 horas y el número total de células viables evaluados mediante el ensayo de MTT. Resultados expresados ​​como medias ± desviación estándar. * P Hotel < 0,01 frente a control
efectos de la inhibición de citoquinas o antagonismo del receptor de IL-1β-estimulación de la proliferación
El pretratamiento de las células con la interleucina-1 antagonista de los receptores abolió los efectos estimulantes de IL-1β en [ 3H] la incorporación de timidina (Figura 3). Estudios anteriores han demostrado que la IL-1β puede activar las células epiteliales gástricas, incluyendo las células AGS, a secretar otras citoquinas, particularmente la interleucina-8 y factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF) [31, 32]. Por lo tanto, se llevaron a cabo más estudios para evaluar si las acciones estimulantes de la IL-1β se mediada por cualquiera de estas dos citoquinas. Anticuerpos neutralizadores de la IL-8 o GM-CSF no tuvo efecto sobre estimulada [ 3H] timidina. La neutralización de IL-8 no tuvo ningún efecto sobre el crecimiento de IL-1β-stimuated pero la proliferación estimulada por IL-1β de anticuerpos anti-GM-CSF redujo en un 31 ± 4% (P
< 0,01) (figura 3). Figura 3 Efecto de la inhibición de citoquinas en IL-1β-estimulación de [3H] timidina en las células epiteliales las células AGS gástricas fueron tratados con 10 ng /ml de IL-1β durante 24 horas más, ya sea la interleucina-1 antagonista del receptor (IL-1RA 500 ng /ml), la neutralización de IL-8-anticuerpo anti (10 mg /ml) o anticuerpos neutralizantes anti-GM-CSF (5 mg /ml). la síntesis de ADN se evaluó mediante la [3H] timidina. Resultados expresados ​​como medias ± desviación estándar. * P Hotel < estimulación 0,01 vs. IL-1β en ausencia de inhibidor.
Efectos de GM-CSF sobre la proliferación
En vista de los resultados obtenidos con el anticuerpo anti-GM-SCF, las acciones de crecimiento-estimuladoras directos de GM-CSF fueron examinados. GM-CSF tuvo un crecimiento acción estimuladora potente sobre las células AGS: aumento significativo de la [ 3H] timidina se vio en todas las concentraciones (0,001 a 100 ng /ml) de GM-CSF. sí GM-CSF parece ser un estimulante más potente que la IL-1β; estimulación máxima de 108 ± 17% por encima del control se observó con 100 ng /ml de GM-CSF (Figura 4). La acción inhibidora del anticuerpo anti-GM-CSF fue confirmada por la abolición de la acción estimulante de crecimiento de 1 ng /ml de GM-CSF (datos no mostrados). Estudios anteriores han demostrado que la liberación estimulada por IL-1β GM-CSF en condiciones similares en las células AGS a ser aproximadamente 10 a 20 pg /pocillo /24 horas [32]. Para confirmar los resultados obtenidos con el anticuerpo anti-IL-8, [ 3H] timidina se midió en respuesta a IL-8. No aumento de la proliferación fue visto en cualquier concentración de IL-8 (0,001 a 100 ng /ml) (datos no mostrados). En condiciones similares estimulada por IL-1β liberación de IL-8 es de aproximadamente 3000 pg /pocillo /24 horas [31]. Figura 4 Efecto de GM-CSF sobre la proliferación de las células epiteliales gástricas. células AGS se trataron con concentraciones crecientes de GM-CSF durante 24 horas. La proliferación celular se evaluó mediante la [3H] timidina. Resultados expresados ​​como medias ± desviación estándar. * P Hotel < 0,05, ** P Hotel < 0,01 vs control de
Mecanismo de IL-1β-estimulación de la proliferación de células Francia El inhibidores de genisteína específica, que inhibe la tirosina quinasas y PD 98059, que inhibe la quinasa MAP quinasa (MEK), y por lo tanto inhibe la vía de ERK-, eran utilizado para evaluar las posibles vías intracelulares que median los efectos de la IL-1β. Con el fin de examinar los efectos de IL-1β distintos de los de GM-CSF, estos experimentos se realizaron en presencia del anticuerpo neutralizante anti-GM-CSF. Como se muestra en la figura 5, ni la genisteína ni PD 98059 alterados sin estimular [ 3H] timidina. La genisteína completamente abolido la IL-1β-estimulación de la proliferación. La inhibición de MEK con EP 98059 redujo la proliferación estimulada por IL-1β en un 58 ± 5% (P Hotel < 0,01) (figura 5), ​​pero no abolió completamente el crecimiento acción estimuladora de la IL-1β. Incrementos adicionales a concentraciones superiores a la máxima de 98050 PD no inhibieron la proliferación estimulada por IL-1β (datos no mostrados). Figura 5 Efecto de la inhibición de la tirosina quinasa y la actividad de MEK en la proliferación celular epitelial gástrica estimulada por IL-1β. células AGS se trataron con 10 ng /ml de IL-1β durante 24 horas en presencia del inhibidor de la tirosina quinasa genisteína (100 M) o el inhibidor de MEK PD 98059 (25 mM). La proliferación se evaluó por [3H] timidina. Los estudios se realizaron en presencia de anticuerpos anti-GM-CSF (5 mg /ml). Resultados expresados ​​como medias ± desviación estándar. * P Hotel < 0,01 frente al control
Discusión
Este estudio demostró que la IL-1β aumento de la proliferación de las células AGS. Este efecto fue revertido por el antagonista del receptor, lo que sugiere que fue mediada a través del receptor de interleuquina-1. IL-1β estimulada tanto [ 3H] timidina, como una medida de la estimulación de la DNA tasa sintética y también el número de células totales, medido por el ensayo de MTT. Esto ilustra que la estimulación de la síntesis de ADN por la IL-1β se traduce en un aumento real en el número de células.
Una parte de la acción estimuladora de la IL-1β parece ser indirecta. Neutralización de GM-CSF en los medios de comunicación condujo a una reducción significativa de la proliferación estimulada por IL-1β. se sabe que las células AGS para secretar GM-CSF en respuesta a IL-1β [32]. sí GM-CSF era un potente estimulante de la proliferación celular. Por lo tanto, parece probable que parte del crecimiento acciones estimulantes de IL-1β se deben a una acción intermediario autocrina de GM-CSF. Hay pocos datos previos que sugieren que el GM-CSF estimula la proliferación de células no hematopoyéticas; Dippold et al
mostró que exógeno GM-CSF estimuló el crecimiento de dos de cada dos cultivos derivados de carcinomas gástricos y dos de cada nueve líneas celulares de carcinoma de páncreas [33, 34]. Sin embargo, a diferencia del presente estudio, la producción autocrina de GM-CSF fue no. Células epiteliales gástricas
detectables también producen IL-8 en respuesta a IL-1β [31]. Sin embargo, en este sistema modelo, IL-8 solo no tuvo ningún acción pro-proliferativa y la neutralización de IL-8 no afectó a la acción estimuladora de IL-1β. Por lo tanto, es poco probable que la IL-8 tiene un papel autocrino en la acción de crecimiento estimulante de IL-1β. Es posible que otras citoquinas producidas por las células epiteliales gástricas en respuesta a IL-1β, H. pylori o
otras insultos inflamatorias también podrían desempeñar un papel como mediadores autocrina o paracrina del crecimiento. Recientemente se ha informado de que otra quimioquina C-X-C, GRO /CINC-1, que también se regula positivamente en la proliferación estimulada por H. pylori
infección en ratas células epiteliales gástricas [35]. El papel de estos otros mediadores autocrinos potenciales merece más estudio.
Los resultados de los estudios de inhibidor sugieren fuertemente que la actividad de tirosina quinasa es esencial para el crecimiento promoción de la acción de IL-1β en las células AGS. El inhibidor de tirosina quinasa genisteína abolió la acción estimulante de IL-1β. IL-1β se conoce para activar una plétora de vías intracelulares de señalización [31, 36-39], pero en la situación actual no parece ser un requisito absoluto para la señalización a través de una tirosina quinasa, posterior en la activación del receptor.
El mitógeno activado por cascada de proteína es un camino bien caracterizado mediar las acciones de células de crecimiento-estimuladoras de muchos factores de crecimiento y hormonas. La inhibición de la vía de ERK, con el inhibidor de MEK PD 98059, que impide la activación de ERK por fosforilación, tenía una acción inhibidora significativa contra la acción estimulante de la IL-1β. Esto sugiere que la activación de la vía de ERK es importante en la mediación de las acciones de crecimiento estimulantes de la IL-1β. La activación de las cascadas de MAP quinasa, incluyendo las vías p42 y ERK p44 y p46JNK y p55JNK c-Jun NH quinasas 2-terminal de IL-1β se ha demostrado en ratas células gástricas epiteliales [41, 42], pero la importancia funcional de estas vías no se examinó. La activación de ERK y JNK se inhibió por la genisteína [41], en consonancia con la inferencia del estudio muestran que las MAPK se encuentran aguas abajo de la actividad tirosina en la señalización inducida por IL-1β. Sin embargo, en la corriente de 98.059 PD estudio no abolió completamente la acción estimulante de la IL-1β, lo que sugiere que las vías alternativas, activan posterior sobre la actividad de la tirosina quinasa, también juegan un papel en la señalización de las respuestas proliferativas a IL-1β. Otros estudios están en marcha en la actualidad para examinar estos.
Hay contradictorios datos disponibles sobre los efectos directos de la IL-1β en la proliferación del epitelio gástrico. Aunque el estudio actual y el estudio de Fan et al
la proliferación de leucocitos estimulados usando-medio condicionado indicaron un aumento en la proliferación de la línea celular AGS humana [14], otros han mostrado inhibición de suero, TGF-α y EGF-estimulado en RGM1 rata células epiteliales gástricas por la IL-1β [41, 42]. Tominaga et al
mostraron que el tratamiento previo de las células RGM1 con IL-1β durante 6 horas inhibió la proliferación a las 24 horas, pero el efecto inhibidor se perdió a las 48 horas, [41]. Las razones de estas discrepancias no son claras. Ellos pueden reflejar diferencias intrínsecas entre las líneas celulares, diferencias en la activación y la participación de vías promotoras del crecimiento paracrinos, variabilidad de las especies, un efecto específico para ciertos factores de crecimiento, o diferencias subyacentes en la biología de las líneas celulares derivadas de cáncer (AGS) o normal tejido (RGM1). Se realizaron los estudios que demuestran la inhibición de la proliferación de IL-1β en presencia de poderosos estímulos que promueven el crecimiento (alta de suero o concentraciones específicas de factores de crecimiento en el medio de cultivo), whist se realizaron los estudios actuales en medio de suero libre de suero o 1% . Es posible que las múltiples vías de señalización activadas por la IL-1β tienen efectos diferentes sobre la proliferación, el efecto dominante en función de las complejas interrelaciones de los estímulos y las vías de señalización en diferentes circunstancias. citoquinas pro-inflamatorias como la IL-1β y TNF-α activan diferentes vías de señalización con resultados divergentes y diferentes cursos temporales en las células endocrinas y parietales gástricas [37, 38, 43-46]. Otros estudios en curso están examinando las funciones específicas de las diversas vías de señalización en las células epiteliales gástricas bajo diferentes condiciones.
Ahora hay fuertes datos epidemiológicos que relacionen H. pylori
con carcinoma gástrico. El proceso carcinogénico parece involucrar una serie de pasos: H. pylori
la inflamación inducida por progresa a atrofia, metaplasia intestinal, displasia y, finalmente, el carcinoma [47]. Del mismo modo H. pylori
infección en gerbos de Mongolia induce fácilmente atrofia gástrica y cáncer [6]. Mientras que la carcinogénesis gástrica es, sin duda, un proceso multifactorial, que implica factores bacterianos y del huésped patógenos, incluyendo el estado de HLA, la dieta y el estado antioxidante [47, 48], es evidente que el aumento de la proliferación epitelial gástrica, especialmente cuando relativamente mayor en comparación con la apoptosis, es un importante parte de la vía [49, 50]. Aumento de la proliferación del epitelio gástrico es típica de la infección por H. pylori
; es demostrable en todas las etapas de la infección y la erradicación de la infección reduce la proliferación. Aumento de la proliferación es un marcador importante de aumento del riesgo de adenocarcinoma gastrointestinal [12]. Los mecanismos de aumento de la proliferación no se entienden completamente. En vitro
cultivos de ensayo estudios de H. pylori o
constituyentes han dado resultados contradictorios en diferentes sistemas, con diferentes tipos de células y cepas bacterianas. La estimulación directa de la proliferación epitelial gástrica por H. pylori
se ha informado por algunos autores [14, 15], mientras que cualquiera de los efectos neutros [15] o el aumento de la apoptosis y la disminución de la proliferación han sido reportados por otros [16-18]. Fan et al
informó que los medios acondicionados procedentes de cualquiera de H. pylori o linfocitos activados por mitógenos
estimula directamente la proliferación de células AGS [14], lo que sugiere que la respuesta inflamatoria podría ser en parte responsable del aumento de la proliferación epitelial. la producción de IL-1β se ve reforzada en H. pylori y
esta citocina se considera una unidad central para la regulación de la respuesta proinflamatoria en H. pylori
. hotels, IL-1β es un inhibidor de la profunda de la secreción de ácido gástrico in vivo
[51] y en las células parietales aisladas [37, 38]. polimorfismos genéticos de la agrupación de genes IL-1β causando un aumento en la actividad transcripcional están asociados con un mayor riesgo de cambios histológicos pre-cancerosas y cancerosas en la infección por H. pylori
[21, 22]. La hipótesis general explicar esta observación ha sido que el aumento de IL-1β consiguiente producción en H. pylori infección
es responsable de una mayor supresión de la secreción de ácido, que a su vez permite una mayor colonización de la mucosa cuerpo secretoras de ácido [24]. Esta mayor colonización provoca la inflamación adicional, que en última instancia conduce a la pérdida del epitelio secretor de ácido especializada (atrofia) y además potencia el círculo vicioso de aumento de la inflamación y la disminución de la secreción de ácido [52]. atrofia gástrica predispone de manera significativa a cáncer [3]. Se cree que la atrofia en combinación con mediadores liberados en la inflamación tales como los radicales libres de oxígeno y óxido nítrico, la dieta, estado anti-oxidante y el crecimiento excesivo posiblemente bacterianas y generación de nitrosaminas en el estómago aclorhidria [53] avanzar los cambios histológicos, causa mutageneisis y conducir la progresión a cáncer.
una alternativa, pero no se excluyen mutuamente, hipótesis es que la respuesta de citoquinas mejorada mejora directamente la proliferación de células epiteliales y en sí predispone al cáncer, además de los efectos sobre la secreción de ácido. El aumento de la renovación de las células de esta respuesta hiperproliferativa sería en sí que la mucosa más vulnerables a los efectos mutagénicos de radicales libres y otros productos tóxicos generados en el estómago inflamado aclorhidria.
En otra parte en el tracto gastrointestinal, IL-1β se ha demostrado que estimula [ 3H] timidina y aumentar el número de células de miofibroblastos de colon humano cultivadas subepiteliales, que se cree que tiene importancia en la remodelación de la mucosa en la inflamación [54]. Los efectos pro-proliferativos de IL-1β en el tracto gastrointestinal merecen más estudio, dada la importancia de esta citocina en la regulación de la respuesta inflamatoria de la mucosa.
Conclusiones
Los resultados del presente estudio sugieren que la IL-1β y GM-CSF puede estimular directamente la proliferación del epitelio gástrico. Esto podría explicar las respuestas proliferativas a los medios de linfocitos acondicionado demostradas por Fan et al
[14]. proliferación epitelial mejorada debido a la IL-1β puede contribuir a la mayor riesgo de cáncer gástrico y las lesiones precancerosas en H. pylori
individuos infectados con alelos específicos de IL-1β asociados con los niveles más altos de producción. IL-1β estimula la proliferación a través de la activación mediada por el receptor de una vía de la tirosina quinasa. aguas abajo de señalización implica ERK-dependiente y vías -independiente.
más estudios serán necesarios para aclarar los mecanismos implicados en la IL-1β-estimulación de la proliferación del epitelio gástrico, así como los datos que correlacionan el genotipo IL-1β, la producción de proteína IL-1β y la proliferación epitelial en vivo
Estos se complementan el estudio actual y mejorar aún más nuestra comprensión de H. pylori
carcinogénesis gástrica inducida por
Lista de abreviaturas
EGF:..
epidérmica el factor de crecimiento
ERK:
quinasa relacionada con la señal extracelular
GM-CSF:
granulocitos y macrófagos factor estimulante de colonias

IL: interleucina

JNK:
c-Jun NH 2-terminal

MAPA:
proteína activada por mitógeno
MTT - 3- [4: página 5-dimetiltiazol-2-il] -2,5 difenil tetrazolim

TCA: ácido tricloroacético
TGF-α:.
factor de crecimiento transformante alfa

Declaraciones
los autores originales presentados archivos de imágenes
a continuación se presentan los enlaces a los autores originales presentados archivos de imágenes. 'archivo original para la figura 1 12876_2001_21_MOESM2_ESM.pdf autores 12876_2001_21_MOESM1_ESM.pdf Autores archivo original de la figura 2 12876_2001_21_MOESM3_ESM.pdf autores archivo original de la figura 3 12876_2001_21_MOESM4_ESM.pdf autores archivo original de la figura 4 12876_2001_21_MOESM5_ESM.pdf archivo original de los autores de la figura 5 Conflicto de intereses Ninguno declarado
.

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