Effect of interleukiini-1β proliferaatioon mahalaukun epiteelisolujen kulttuuri

Vaikutus interleukiini-1β proliferaatioon mahalaukun epiteelisolujen viljelmässä
Abstract
tausta
Helicobacter pylori
on tärkein riskitekijä kehitystä ei-cardia mahasyövässä. Lisääntynyt leviämisen mahalaukun limakalvon ominaisuus on, H. pylori
infektio. Limakalvon interkeukin-1β tuotanto on lisääntynyt H. pylori
infektion ja IL-1β genotyypit, joihin liittyy lisääntynyt pro-inflammatorinen aktiivisuus ovat riskitekijöitä kehitykselle mahasyövän. Vaikutus IL-1β: n vaikutusta mahalaukun epiteelisolujen proliferaatiota on tutkittu tässä tutkimuksessa.
Menetelmät
AGS soluja viljeltiin IL-1β. DNA-synteesi oli assed mukaan [ 3 H] tymidiinin ja yhteensä elinkelpoisten solujen määrä MTT: llä.
Tulokset
IL-1β annosriippuvaisesti lisäsi DNA-synteesiä ja solujen määrä. Parannettu proliferaatio estyi interleukiini-1-reseptorin antagonisti. Lisäksi neutraloivien vasta-GM-CSF vähensi IL-1β-stimuloitu proliferaatio 31 ± 4%. GM-CSF yksinään merkittävästi stimuloi lisääntymistä. Lisäksi tai neutralointi IL-8 ollut vaikutusta perustason tai IL-1β: n stimuloimaa proliferaatiota. Tyrosiinikinaasin estäjä genistein esti täysin IL-1β: n stimuloimaa proliferaatiota ja estävät solunulkoisen signaalin liittyvät kinaasireitin PD 98059 inhiboi IL-1β-stimuloitu proliferaatio 58 ± 5%.
Päätelmät
IL-1β stimuloi proliferaatiota mahalaukun epiteelisolujen. Autokriinisella stimulaatio GM-CSF vaikuttaa tähän proliferatiivisen vasteen. Signalointi kautta tyrosiinikinaasin aktiivisuus on olennaista, että mitogeeninen vaste IL-1β. Solunulkoinen signaali liittyvä kinaasireittiä on mukana, mutta ei välttämätöntä alavirran signalointia. IL-1β voivat myötävaikuttaa hyperproliferaatiota nähdään H. pylori
tartunnan mahan limakalvoa, ja olla mukana karsinogeeninen prosessissa.
Tausta
Helicobacter pylori
uskotaan olevan merkittävä etiologinen tekijä kehittäminen ei-cardia mahalaukun adenokarsinoomaa. Laajamittainen epidemiologiset tutkimukset ovat vahvistaneet vahvan yhteyden helikobakteeri
infektion ja molemmat syöpä [1-3] ja aikaisemman histologinen vaiheet, surkastumista ja suoliston metaplasiaa [4, 5]; jotka molemmat lisäävät myöhemmin neoplastisen transformaation. Eläinkokeet ovat myös osoittaneet, että on tärkeää H. pylori
in mahasyövän [6, 7]. Lisääntynyt hinnat leviämisen mahalaukun limakalvon ovat tyypillisiä helikobakteeri
infektion [8-11], ja hyperproliferaation maha näyttää olevan markkeri myöhempää pahanlaatuinen muutos [12]. Syy korotettua leviämisen ei ole selvä, mutta noussut vähentää normaali puhdistumaan infektion [8, 13]. Vaikka hypeprproliferation on tyypillinen in vivo,
tutkimukset testaamalla vaikutuksia Helikobakteeri
tai sen tuotteita in vitro
ovat osoittaneet ristiriitaisia ​​tuloksia, sekä parannettu [14, 15] ja vähentynyt [16-18] leviämisen raportoitu. On mahdollista, että muut tulehdusreaktion tyypillinen H. pylori
tartunnan limakalvo voi olla ainakin osittain vastuussa ajo lisääntynyt solujen lisääntymistä.
Pluripotenttien pro-inflammatoristen sytokiinien interleukiini-1β on keskeinen rooli patogeneesin helikobakteeri
indusoiman limakalvotulehdus. IL-1β geenin ilmentyminen ja proteiinin tuotanto lisääntyvät helikobakteeri
infektion ja vähentää kanssa onnistuneen poistamisen [19, 20]. Läsnäolo IL-1β genotyyppi polymorfismi liittyy tehostetun IL-1β-tuotanto on liittynyt merkittävästi lisätä mahasyövän ja syövän esiasteista [21, 22]. Interleukiini-1β on voimakas estäjä mahahapon eritystä ja on arveltu, että tehostettu IL-1β vastaus muuttaa topografia mahainfektio ja siten edistää tulehdusta ja myöhemmin surkastumista mahalaukun korpus [23, 24]. Mahdollisuutta, että IL-1 itse ohjaa lisääntyvän leviämisen mahalaukun epiteelisolujen ei ole täysin tutkittu. Muuttaminen mahalaukun lisääntymisen IL-1β saattaisi edistää karsinogeeninen prosessin lisäksi vaikutuksia eritykseen. Siksi suorat vaikutukset IL-1β mahalaukun epiteeliproliferaation on arvioitu.
Mitogeeniaktivoidut proteiinikinaasi (MAPK) kaskadeja ovat hyvin tunnettu polkuja kuuluvien signaalien solun pinnalta tumaan. Perhe sisältää erillisiä alaryhmiä; ekstrasellulaarinen signaali liittyvien kinaasien (ERK: t), c-Jun NH 2-terminaali kinaasien (JNK) ja p38 MAPK [25]. ERK: t aktivoituvat erilaisten solunulkoisten ärsykkeet, ja välittävät pro-proliferatiivisia vaikutuksia useiden hormonien ja kasvutekijöiden [26, 27]. Aktivointi fosforylaatio kahden spesifisyyden proteiinin (MAP-kinaasin kinaasi (MAPKK)), (tunnetaan myös nimellä MEK), jonka avulla se vuorostaan ​​aktivoida perheen seriini-treoniiniproteiinikinaaseja, joka tunnetaan nimellä ERK: t. ERK: t puolestaan ​​fosfory- lukuisissa solun proteiinien kuten transkriptiotekijät joten niillä on keskeinen rooli etenemistä mitogeenisesta signaaleja. Niinpä rooli MAP-kinaasireitin välittämisessä vastauksista IL-1β on arvioitu. Tool Menetelmät
Soluviljely
Ihmisen AGS mahakarsinoo- solulinja hankittiin European Collection of Animal Cell Cultures (Porton Down, UK). Soluja kasvatettiin yksikerrosviljelmään RPMI 1640 -alustassa, jota oli täydennetty 100 ug /ml penisilliiniä, 100 ug /ml streptomysiiniä, 100 ug /ml gentamisiinia, 2,5 ug /ml amphoteracin B ja 10% naudan sikiön seerumia. Soluja kasvatettiin 75 cm 2 kudosviljelykolveissa 37 ° C: ssa ilmakehässä, jossa 5% CO 2 ja 95% ilmaa ja siirrostettiin joka 5-7 päivää.
Leviämisen tutkimukset
[ 3H] tymidiinin. Soluja kasvatettiin väliaineessa, joka sisälsi 10% vasikan sikiön seerumia, maljattiin 24-kuoppalevyille 10 5 solua /kuoppa ja annettiin kiinnittyä yön yli. Pesun jälkeen seerumittomassa alustassa, soluja inkuboitiin seerumittomassa väliaineessa, joka sisälsi 0,2 mM merkitsemätöntä tymidiiniä 24 tunnin ajan, kun läsnä on kasvavia pitoisuuksia IL-1β, IL-8 tai GM-CSF. DNA-synteesi arvioitiin mittaamalla [ 3H] tymidiinin sisään trikloorietikkahappoa (TCA) saostuva materiaali [28]. [ 3H] tymidiiniä (0,1 uCi /ml, 10 Ci /mmol), lisättiin 2 tuntia ennen loppua 24 tunnin hoitojakson aikana. Solut pestiin kahdesti seerumittomalla alustalla inkorporoimatto- [ 3H] tymidiiniä, ja DNA saostettiin 5% TCA: lla 4 ° C: ssa 15 minuutin ajan. Sakat pestiin sitten kahdesti 95% etanolilla, liuotettiin 1 ml: aan NaOH: ta, ja analysoitiin nestetuikelaskennalla. Tulokset ilmaistaan ​​prosentuaalisena ohjaus stimuloimaton [ 3H] -tymidiinin (keskiarvo ± SD) on 4-6 eri kokeissa, kukin suoritettiin kolmena rinnakkaisena. Havaitsemiseksi kasvun inhibition, soluja inkuboitiin joko erityisten MEK estäjä PD 98059 (25 uM) [29], IL-1-reseptorin antagonisti (500 ng /ml) [30] tai neutraloivat vasta-aineet, anti-GM-CSF- (5 ug /ml) tai anti-IL-8 (10 ug /ml). Inhibiittorit tai vasta-aineita lisättiin 30 minuuttia ennen sytokiineja.
Cell kasvu
Yhteensä elävien solujen määrä arvioitiin modifioidun MTT: tä (3- [4,5-dimetyylitiatsol-2-yyli] -2,5 difenyyli tetrazolim bromidi-määritys) [31]. Solut maljattiin 24-kuoppaisille levyille kasvatusliuoksessa, joka sisälsi 10% vasikan sikiön seerumia. Kiinnittymisen jälkeen yön yli, väliaine vaihdettiin 1% vasikan sikiön seerumia täydennettyyn keskipitkän ja kasvavia pitoisuuksia IL-1β lisättiin. Soluja viljeltiin 48 tunnin ajan, ja sitten väliaine poistettiin ja tuoretta RPMI 1640-alustassa, joka sisälsi 0,5 ng /ml MTT lisättiin. Soluja inkuboitiin 37 ° C: ssa 3 tunnin ajan. Sitten väliaine poistettiin ja 0,04 M HCI: a isopropanolissa lisättiin uuttamiseksi vähentää formatsaanituotteesta. Saatu optinen tiheys 550 nm: ssä määritettiin.
Kemikaalit ja reagenssit
Rekombinantti ihmisen IL-1β: n ja IL-8 hankittiin Sigmalta (Poole, UK), rekombinantti ihmisen GM-CSF: n ja IL-1-reseptorin antagonisti, anti-GM-CSF: n ja anti-IL-8 olivat R ja D systems (Abingdon, UK). PD 95059 oli Calbiochem (Nottingham, UK). RPMI 1640 oli Gibco BRL (Paisley, UK) ja kaikki muut reagenssit olivat Sigma. Pitoisuuksia estäjiä käytetään otettiin valmistajien tiedot ja julkaistut tiedot. Kyky 500 ng /ml IL-1 RA poistaa 10 ng /ml IL-1β-stimulaatio IL-8 eritystä AGS-soluissa vahvistettiin. Tehokkuus anti-GM-CSF: 5 ng /ml vasta-ainetta poistaa GM-CSF: ää (1 ng /ml) indusoi AGS soluproliferaatiota vahvistettiin.
Tilastot
Sytokiinistimuloidun tuloksia, jossa verrataan kontrolliarvoihin stimuloimattomiin soluihin samalla 24-kuoppalevylle. Tietoja vertailtiin yksisuuntaisella varianssianalyysillä ja Studentin t-testi määrittää tilastollista merkittävyyttä. Jokainen koe kuin suoritettiin kolminkertaisena 4-6 kertaan. Tulokset ilmaistaan ​​keskiarvona ± keskihajonta. Erot P arvojen < 0,05 pidettiin merkittävinä.
Tulokset
vaikutus IL-1β on [3H] -tymidiinin
interleukiini-1β aiheutti annoksesta riippuva lisäys DNA-synteesin mitattuna tymidiinin. Kuten kuviossa 1 on esitetty, nähtiin merkittävä stimulaatio 1-100 ng /ml IL-1β. Maksimaalinen stimulaatio 52 ± 6% yli ohjaus nähtiin 10 ng /ml. Korkeampi annos 100 mg /ml oli hieman vähemmän tehokas stimuloimaan. Kuvio 1 vaikutus IL-1β on [3H] tymidiinin mahalaukun epiteeli- AGS-solut Soluja käsiteltiin kasvavilla pitoisuuksilla IL-1β: ssa 24 tuntia ja DNA-synteesi arvioitiin [3H] tymidiinin. Tulokset ilmaistaan ​​keskiarvoina ± keskihajonta. * P
< 0,01 vs. kontrolli
vaikutus IL-1β solujen määrä
kasvu DNA-synteesiä IL-1β käännettiin absoluuttinen lisääntyminen elävien solujen määrä. Kuten kuviossa 2, IL-1β lisääntynyt solujen määrä annoksesta riippuvalla tavalla kuin vaikutukset [ 3H] tymidiinin. Maksimaalinen stimulaatio on jälleen nähtävissä 10 ng /ml IL-1β, joka tuotti 22 ± 5%: n nousu solujen kokonaismäärä. Kuvio 2 vaikutus IL-1β solujen määrä mahalaukun epiteelisolujen Soluja käsiteltiin kasvavilla pitoisuuksilla IL-1β: ssa 48 tuntia ja yhteensä elinkykyisten solujen lukumäärät arvioitiin MTT-määrityksellä. Tulokset ilmaistaan ​​keskiarvoina ± keskihajonta. * P
< 0,01 vs. kontrolli
vaikutukset sytokiinin inhibitio tai reseptorin antagonismi IL-1β-proliferaation
Solujen esikäsittely interleukiini-1-reseptorin antagonisti poisti stimuloivia vaikutuksia IL-1β on [ 3H] tymidiinin (kuvio 3). Aikaisemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että IL-1β voi aktivoida mahan epiteelisolujen, mukaan lukien AGS-solut, erittämään muut sytokiinit, erityisesti interleukiini-8 ja granulosyytti-makrofagi-pesäkkeitä stimuloiva tekijä (GM-CSF) [31, 32]. Siksi lisätutkimukset tehtiin arvioimaan jos stimuloiva toimia IL-1β välitettiin kumpaankaan sytokiineja. Neutraloivia vasta-aineita joko IL-8 tai GM-CSF ei ollut vaikutusta stimuloitumattomissa [ 3 H] tymidiinin. Neutralointi IL-8 ollut vaikutusta IL-1β-stimuated kasvua, mutta anti-GM-CSF-vasta-aine vähensi IL-1β: n stimuloiman proliferaation 31 ± 4% (P
< 0,01) (kuvio 3). Kuvio 3 vaikutus sytokiinin inhibitio IL-1β-stimulaatio [3H] tymidiinin mahalaukun epiteelisoluihin AGS-soluja käsiteltiin 10 ng /ml IL-1β: ssa 24 tuntia ja joko interleukiini-1-reseptoriantagonisti (IL-1 RA 500 ng /ml), neutraloivat anti-IL-8-vasta-ainetta (10 ug /ml) tai neutraloivan anti-GM-CSF-vasta-aineen (5 pg /ml). DNA-synteesi arvioitiin [3H] tymidiinin. Tulokset ilmaistaan ​​keskiarvoina ± keskihajonta. * P
< 0,01 vs. IL-1β stimulaation puuttuessa estäjä.
Effects of GM-CSF: n proliferaatioon
Ottaen huomioon saadut tulokset anti-GM-SCF vasta-aineen suora kasvua stimuloivaa toimiin GM-CSF tutkittiin. GM-CSF oli voimakas kasvu stimuloiva toimia AGS soluissa: paranevat merkittävästi [ 3 H] tymidiinin nähtiin kaikilla pitoisuuksilla (0,001-100 ng /ml) GM-CSF. GM-CSF itse näytti olevan tehokkaampi nautintoaine kuin IL-1β; maksimaalinen stimulaatio 108 ± 17% edellä ohjaus nähtiin 100 ng /ml GM-CSF: n (kuvio 4). Estovaikutuksen anti-GM-CSF-vasta-ainetta vahvistettiin poistaminen kasvua stimuloivan vaikutuksen 1 ng /ml GM-CSF: ää (tietoja ei esitetä). Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että IL-1β-kannustanut GM-CSF release samanlaisissa olosuhteissa AGS soluissa olevan noin 10-20 pg /kuoppa /24 tuntia [32]. Vahvistaa tulokset, jotka saatiin anti-IL-8-vasta-aine, [ 3H] tymidiinin inkorporaatio mitattiin vasteena IL-8. Lisääntymistä ei ole proliferaatiota havaittiin missä tahansa pitoisuudessa IL-8 (0,001-100 ng /ml) (tietoja ei esitetty). Samanlaisissa olosuhteissa IL-1β-stimuloitujen IL-8 vapautuminen on noin 3000 pg /kuoppa /24 tuntia [31]. Kuvio 4 vaikutus GM-CSF: n proliferaatioon mahalaukun epiteelisolujen. AGS soluja käsiteltiin kasvavilla pitoisuuksilla GM-CSF: 24 tuntia. Solujen lisääntyminen määritettiin [3H] tymidiinin. Tulokset ilmaistaan ​​keskiarvoina ± keskihajonta. * P
< 0,05, ** P
< 0,01 vs. kontrolli
mekanismi IL-1β-solujen lisääntymisen stimuloituminen
spesifisiä inhibiittoreita genistein, joka estää tyrosiinikinaasien ja PD 98059, joka estää MAP-kinaasin kinaasi (MEK), ja näin ollen estää ERK-reitin, olivat käytetään arvioitaessa mahdollisia solunsisäisiä reittejä vaikutukset välittyvät IL-1β. Jotta voidaan tutkia vaikutuksia IL-1β eroavat GM-CSF, nämä kokeet suoritettiin, kun läsnä oli anti-GM-CSF-neutraloiva vasta-aine. Kuten kuviossa 5 on esitetty, ei genisteiini eikä PD 98059 muutettu stimuloimaton [ 3H] tymidiinin. Genistein kokonaan poisti IL-1β-proliferaation. Esto MEK PD 98059 vähensi IL-1β: n stimuloiman proliferaation 58 ± 5% (P
< 0,01) (kuvio 5), mutta ei täysin poistaa kasvua stimuloivan vaikutuksen IL-1β. Kasvaa edelleen supra maksimaalisesta pitoisuudet PD 98050 ei edelleen inhiboivat IL-1β-stimuloitu proliferaatio (tuloksia ei ole esitetty). Kuva 5 vaikutus estämällä tyrosiinikinaasin ja MEK aktiivisuutta IL-1β-stimuloidun mahahapon epiteelisolujen lisääntymistä. AGS-soluja käsiteltiin 10 ng /ml IL-1β: ssa 24 tuntia, kun läsnä on tyrosiinikinaasi-inhibiittorin genisteiiniä (100 uM) tai MEK-inhibiittori PD 98059 (25 uM). Proliferaatiota arvioitiin [3H] tymidiinin. Tutkimukset suoritettiin, kun läsnä oli anti-GM-CSF-vasta-aineen (5 pg /ml). Tulokset ilmaistaan ​​keskiarvoina ± keskihajonta. * P
< 0,01 vs. kontrolli
Keskustelu
Tämä tutkimus osoitti, että IL-1β lisääntyvän leviämisen AGS soluja. Tämä vaikutus on päinvastainen, jonka reseptorin antagonisti, mikä viittaa siihen, se välittyy interleukiini-1-reseptorin. IL-1β stimuloi sekä [ 3 H] tymidiinin, mittana stimulaation DNA synteettisiä korko ja myös koko solujen määrä mitattuna MTT-määritystä. Tämä osoittaa, että stimulaatio DNA-synteesin IL-1β on käännetty todellinen lisäys solujen määrä.
Osa stimuloivan vaikutuksen IL-1β näyttää olevan epäsuora. Neutralisointi GM-CSF tiedotusvälineissä johtanut merkittävään vähentämiseen IL-1β-stimuloitu proliferaatio. AGS solujen tiedetään erittävän GM-CSF vasteena IL-1β [32]. GM-CSF itsessään oli voimakas stimulantti solujen lisääntymisen. Näin ollen vaikuttaa siltä, ​​että osa kasvusta stimuloivat toiminnat IL-1β johtuvat autokriininen välittäjänä toimintaa GM-CSF. On rajoitetusti edellinen data viittaa siihen, että GM-CSF stimuloi ei-hematopoieettisten solujen; Dippold ym
osoitti, että eksogeenista GM-CSF stimuloi kasvua kaksi kahden kulttuurin peräisin mahakarsinoomat ja kaksi yhdeksästä haiman sinoomasolulinjoja [33, 34]. Kuitenkin, toisin kuin nykyinen tutkimus, autokriinisen tuotanto GM-CSF ei ollut havaittavissa.
Mahalaukun epiteelisolujen tuottavat myös IL-8 vasteena IL-1β [31]. Kuitenkin tämä malli järjestelmä, IL-8 yksinään ei ollut pro-proliferatiivinen toimintaa ja neutralointi IL-8 ei vaikuttanut stimuloivan vaikutuksen IL-1β. Sen vuoksi on epätodennäköistä, että IL-8 on autokriininen rooli kasvun-stimuloivan vaikutuksen IL-1β. On mahdollista, että muita sytokiineja tuottaman mahalaukun epiteelisolujen vasteena IL-1β, helikobakteeri tai
muiden inflammatoristen solvauksia voisi myös olla rooli autokriinisella tai parakriinisen välittäjäaineiden kasvua. Se on viime aikoina raportoitu, että toinen C-X-C-kemokiinin, GRO /CINC-1, joka on myös yliaktiivista H. pylori
-infektio stimuloi proliferaatiota rotan mahalaukun epiteelisolujen [35]. Rooli näiden muiden mahdollisten autokriininen välittäjinä ansaitsee lisätutkimuksia.
Tulokset inhibiittorin tutkimukset viittaavat vahvasti siihen, että tyrosiinikinaasiaktiivisuutta on olennaista kasvua edistävää vaikutusta IL-1β in AGS-soluissa. Tyrosiinikinaasin estäjä genistein poisti stimuloivan vaikutuksen IL-1β. IL-1β tiedetään aktivoida lukuisia solunsisäisten signalointireittien [31, 36-39], mutta nykyisessä tilanteessa näyttää olevan ehdoton edellytys signaloinnin kautta tyrosiinikinaasin, myöhemmin on reseptorin aktivointi.
Mitogeenia aktivoitujen proteiini cascade on hyvin kuvattu reitin välittämisessä solujen kasvua stimuloivaa toimia monien kasvutekijöiden ja hormonit. Estämällä ERK-reitin, jossa MEK estäjän PD 98059, joka estää aktivoinnin ERK fosforylaation, oli merkittävä estävä vaikutus vastaan ​​stimuloivan vaikutuksen IL-1β. Tämä viittaa siihen, että aktivointi ERK-reitin on tärkeää välittämisessä kasvua stimuloiva toimia IL-1β. Aktivointi MAP-kinaasilla kaskadeja, mukaan lukien p42 ja p44 ERK reittejä ja p46JNK ja p55JNK c-Jun NH 2-terminaalin kinaasien IL-1β on osoitettu rotan mahalaukun epiteelisolujen [41, 42], mutta toiminnallinen merkitys näistä reiteistä ei ole tutkittu. Aktivointi ERK: t ja JNK estyi genisteiini- [41], sopusoinnussa päättely nykyisen tutkimuksen että MAPK sijaitsevat alavirtaan tyrosiinin aktiivisuuden IL-1β aiheuttama signalointi. Kuitenkin nykyisessä tutkimuksessa PD 98059 ei täysin poistamaan stimuloivan vaikutuksen IL-1β, mikä viittaa siihen, että vaihtoehtoisia väyliä, aktivoidaan myöhemmin on tyrosiinikinaasiaktiivisuuden, myös osansa signalointia proliferatiiviset vasteet IL-1β. Lisätutkimukset ovat käynnissä tällä hetkellä tutkimaan näitä.
Olemassa ristiriitaisia ​​tietoja koskevia suoria vaikutuksia IL-1β mahalaukun epiteeliproliferaation. Vaikka nykyinen tutkimus ja tutkimuksen Fan et al
käyttäen stimuloi-leukosyyteillä media osoitti lisääntyvän leviämisen ihmisen AGS solulinjassa [14], muut ovat osoittaneet esto seerumin, TGF-α ja EGF-stimuloidun proliferaation RGM1 rotta mahalaukun epiteelisolujen IL-1β [41, 42]. Tominaga et ai
osoitti, että esikäsittely RGM1 solujen IL-1β: ssa 6 tuntia esti lisääntymistä 24 tunnin, mutta estävä vaikutus hävisi 48 tuntia, [41]. Syyt näihin eroihin eivät ole selkeitä. Ne voivat heijastaa väliset luontaiset erot solulinjojen erot aktivointi ja osallistuminen paracrine kasvua edistäviä kulkuväylillä lajien vaihtelu, vaikutus on spesifinen tiettyjä kasvutekijöitä, tai taustalla eroja biologian johdetut solulinjat syöpä (AGS) tai normaali kudoksen (RGM1). Tutkimukset osoittavat proliferaation esto IL-1β suoritettiin, kun läsnä on voimakas kasvua edistävä ärsykkeitä (korkea seerumin tai erityisen kasvutekijän pitoisuudet elatusaineet), visti nykyinen tutkimukset suoritettiin seerumittomassa tai 1% seerumia media . On mahdollista, että useita signalointireittien aktivoidaan IL-1β on erilaisia ​​vaikutuksia proliferaatioon, hallitseva vaikutus riippuen monimutkainen välisten suhteiden ärsykkeiden ja signalointipolkujen eri olosuhteissa. Proinflammatoristen sytokiinien, kuten IL-1β ja TNF-α aktivoida erilaisia ​​signalointireitteihin toisistaan ​​poikkeavia tuloksia ja eri aika-kursseja mahalaukun hormonitoimintaa ja parietaalisoluista [37, 38, 43-46]. Lisätutkimukset ovat käynnissä tutkimalla erityiset roolit eri signalointireittien mahalaukun epiteelisolujen eri olosuhteissa.
On nyt vahvoja epidemiologista tietoa yhdistävät H. pylori
mahalaukun syöpä. Karsinogeenista prosessi näyttää liittyvän useita vaiheita: H. pylori
indusoima tulehdus etenee surkastumista, suoliston metaplasiaa, dysplasia ja lopulta syöpä [47]. Samoin Helikobakteeri
infektion Mongolian gerbiilit helposti aiheuttaa mahalaukun surkastuminen ja syöpä [6]. Vaikka mahasyövän on epäilemättä monitekijäinen prosessi, johon patogeenisten bakteeri- ja isännän tekijät, kuten HLA tila, ruokavalion ja antioksidanttien [47, 48], on selvää, että lisääntynyt mahalaukun epiteeliproliferaation, varsinkin kun suhteellisen lisääntynyt verrattuna apoptoosin, on tärkeä osa koulutusjakson [49, 50]. Lisääntynyt mahalaukun epiteeliproliferaation on tyypillistä helikobakteeri
infektio; se on todistettavasti kaikissa vaiheissa infektio ja infektion hävittämiseen vähentää leviämisen. Lisääntynyt proliferaatio on tärkeä markkeri lisääntynyt riski ruuansulatuskanavan adenokarsinooma [12]. Mekanismit lisääntynyt leviämisen ei täysin ymmärretä. In vitro
tutkimuksissa testaus viljelmät helikobakteeri tai
aineosia ovat antaneet ristiriitaisia ​​tuloksia eri järjestelmissä, joissa eri solutyyppejä ja bakteerikantoja. Suora stimulaatio mahalaukun epiteelisolujen lisääntymisen helikobakteeri
on raportoinut jotkut kirjoittajat [14, 15], kun taas joko neutraaleja vaikutuksia [15] tai lisääntynyt apoptoosin ja vähentynyt proliferaatio on raportoitu muiden [16-18]. Fan et ai
todettu, että vakioitua elatusainetta joko Helikobakteeri tai
mitogeenin aktivoitujen lymfosyyttien stimuloivat suoraan AGS soluproliferaatiota [14], mikä viittaa siihen, että tulehdusreaktio voi olla osittain vastuussa parantamiseksi epiteeliproliferaation. IL-1β tuotanto paranee helikobakteeri
infektion ja tämän sytokiinin katsotaan olevan keskeinen sääntelyn pro-tulehdusreaktio helikobakteeri
infektio.
IL-1β on syvällinen estäjä mahahapon eritystä in vivo
[51] ja eristetyissä parietaalisoluissa [37, 38]. Geneettisten polymorfismien IL-1β geeni klusterin aiheuttaen transkriptioaktiviteettia ovat liittyy lisääntynyt riski syöpää edeltävän ja syöpä histologisia muutoksia helikobakteeri
infektion [21, 22]. Yleinen hypoteesi selittää tämä havainto on ollut, että parannettu IL-1β tuotannon seurauksena, H. pylori
infektio vastaa suurempaa tukahduttamista erityksen, mikä puolestaan ​​mahdollistaa suuremman asuttaminen happo-erittävien elin limakalvon [24]. Tämä suurempi kolonisaatio herättää edelleen tulehdus, joka lopulta johtaa menetykseen erikoistuneiden hapon erityksen epiteelin (atrofia) ja edelleen voimistaa noidankehä lisääntynyt tulehdus ja vähentynyt haponerityksen [52]. Mahalaukun surkastuminen merkittävästi altistaa syövälle [3]. Uskotaan, että surkastumista yhdistettynä välittäjäaineiden vapautuu tulehduksen kuten vapaita happiradikaaleja ja typpioksidi, ruokavalio, antioksidantti tila ja mahdollisesti bakteerien liikakasvun ja sukupolvi nitrosamiinien muualla ruoansulatuskanavassa [53] etukäteen histologisia muutoksia, syy mutageneisis ja ajaa etenemisessä syöväksi.
vaihtoehtoinen, mutta eivät sulje pois toisiaan, hypoteesi on, että tehostettu sytokiinivasteen suoraan tehostaa epiteelisolujen lisääntymistä ja itse altistaa syövän lisäksi vaikutukset eritykseen. Lisääntynyt solujen uusiutumista tämän hyperproliferatiivisten vastaus olisi itse tehdä limakalvon alttiimpia perimää vaurioittavat vapaiden radikaalien ja muiden myrkyllisten tuotteiden syntyy hapoton maha-.
Muualla ruoansulatuskanavassa, IL-1β on osoitettu stimuloivan [ 3 H] tymidiinin ja lisätä solujen määrä ihmisen viljellyissä paksusuolen epiteelinalaisella myofibroblasteja, jonka arvellaan olevan merkitystä remontin limakalvon tulehdus [54]. Pro-proliferatiivisia vaikutuksia IL-1β ruoansulatuskanavassa ansaitsevat lisätutkimusta, kun otetaan huomioon tämän sytokiinin sääntelyssä limakalvon tulehdusvasteen.
Johtopäätökset
tulokset Nykyisen aiheen olettaa, että IL-1β ja GM-CSF voi suoraan stimuloida mahahapon epiteeliproliferaation. Tämä saattaa selittää proliferatiiviset vasteet ilmastoitu lymfosyyttien median osoittaneet Fan et al
[14]. Parannettu epiteeliproliferaation johtuvat IL-1β voi myötävaikuttaa tehostettua mahalaukun syövän riski ja syövän esiasteita H. pylori
infektoiduista yksilöiden erityisiä IL-1β alleeleja liittyy korkeampi tuotannon. IL-1β stimuloi proliferaatiota kautta reseptorin aktivaatiota tyrosiinikinaasin kautta. Loppupään signalointi koskee ERK riippuvia ja riippumattaman polkuja.
Lisätutkimuksia tarvitaan selventää mekanismeja IL-1β-stimulaation mahalaukun epiteeliproliferaation sekä data korreloidaan IL-1β genotyyppi, IL-1β-proteiinin tuotanto ja epiteeliproliferaation in vivo.
Nämä täydentävät nykyinen tutkimus ja edelleen parantaa kykyä ymmärtää paremmin helikobakteeri
indusoiman mahasyövän.
lyhenteet
EGR:
epidermaalinen kasvutekijä
ERK:
solunulkoisen liittyvä signaali kinaasi
GM-CSF:
granulosyytti-makrofagikasvutekijä

IL:
interleukiini
JNK:
c-Jun NH 2-terminaalin kinaasin

MAP:
mitogeeni aktivoitua proteiini
MTT - 3- [4:
5-dimetyylitiatsol- 2-yyli] -2,5 difenyyli tetrazolim bromidi

TCA:
trikloorietikkahappo
TGF-α:
transformoivan kasvutekijä alfan.

julistukset
kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 12876_2001_21_MOESM1_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 12876_2001_21_MOESM2_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 12876_2001_21_MOESM3_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 3 12876_2001_21_MOESM4_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 4 12876_2001_21_MOESM5_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäisen tiedoston luku 5 Kilpailevat edut
yhtään ilmoitettu.

• Kliinisessä tutkimuksessa korjuu imusolmukkeiden kanssa hiilen nanohiukkasten pitkälle mahasyövässä: prospektiivinen satunnaistettu trial
• Vaikutus omenaviinietikkaa on viivästynyt mahalaukun tyhjenemistä potilailla, joilla on tyypin 1 diabetes: pilotti study