Virkning af interleukin-1β på proliferation af gastriske epitelceller i kultur

Effekt af interleukin-1β om spredning af gastriske epitelceller i kultur
Abstrakt
Baggrund
Helicobacter pylori
er den vigtigste risikofaktor for udvikling af ikke-Cardia mavekræft. Forøget proliferation af maveslimhinden er en funktion af H. pylori
infektion. Mucosal interkeukin-1β produktion er forøget i H. pylori
infektion og IL-1 genotyper forbundet med forøget pro-inflammatorisk aktivitet er risikofaktorer for udvikling af gastrisk cancer. Virkningen af ​​IL-1β på gastrisk epitelcelleproliferation er blevet undersøgt i denne undersøgelse. Salg Fremgangsmåder
AGS celler blev dyrket med IL-1β. DNA-syntese blev assed af [ 3H] thymidin og totale levedygtige celletal ved MTT-analysen.
Resultater
IL-1β dosisafhængig øget DNA syntese og celle numre. Den forøgede proliferation blev blokeret af interleukin-1-receptorantagonist. Tilsætning af neutraliserende antistof mod GM-CSF reducerede IL-1β-stimulerede proliferation med 31 ± 4%. GM-CSF alene signifikant stimuleret proliferation. Tilføjelse eller neutralisering af IL-8 havde ingen virkning på basal eller IL-1β-stimuleret proliferation. Tyrosinkinaseinhibitoren genistein fuldstændigt blokerede IL-1β-stimulerede proliferation og inhibering af den ekstracellulære signal relateret kinase pathway med PD 98059 inhiberede IL-1β stimuleret proliferation med 58 ± 5%.
Konklusioner Salg IL-1β stimulerer proliferation i gastriske epitelceller. Autokrin stimulering af GM-CSF bidrager til denne proliferativt respons. Signalering via tyrosinkinaseaktivitet er afgørende for den mitogene respons på IL-1β. Det ekstracellulære signal relateret kinase pathway er involveret i, men ikke afgørende for downstream signalering. IL-1β kan bidrage til hyperproliferation ses i H. pylori
inficeret maveslimhinden, og være involveret i den kræftfremkaldende proces.
Baggrund
Helicobacter pylori
menes at være den væsentligste ætiologiske faktor i udviklingen af ​​ikke-Cardia gastrisk adenocarcinom. Storstilede epidemiologiske undersøgelser har bekræftet en stærk sammenhæng mellem H. pylori
infektion og både kræft [1-3], og den tidligere histologiske stadier, atrofi og tarm metaplasi [4, 5]; som begge øger risikoen for senere neoplastisk transformation. Dyremodeller har også vist, hvor vigtigt det H. pylori
i gastrisk carcinogenese [6, 7]. Forøgede proliferation af maveslimhinden er typiske i H. pylori
infektion [8-11], og hyperproliferation i mave-tarmkanalen synes at være en markør for senere malign forandring [12]. Årsagen til den forøgede hastighed af proliferation er ikke klart, men den forøgede reducere til normal med clearance af infektionen [8, 13]. Selvom hypeprproliferation er typisk in vivo,
undersøgelser teste effekten af ​​H. pylori
eller sine produkter i vitro
har vist modstridende resultater, med både forbedret [14, 15] og formindsket [16-18] spredning rapporteret. Det er muligt, at andre komponenter af den inflammatoriske reaktion er typisk for H. pylori
inficeret slimhinde kunne være i det mindste delvist ansvarlig for at drive den forøgede celleproliferation.
Pluripotente pro-inflammatoriske cytokin interleukin-1β har en central rolle i patogenesen af ​​H. pylori
induceret slimhindeinflammation. IL-1β genekspression og protein produktion øges i H. pylori
infektion og reducere med vellykket udryddelse [19, 20]. Tilstedeværelsen af ​​IL-1β genotype polymorfi forbundet med forøget IL-1β-produktion er blevet forbundet med en signifikant øget risiko for mavekræft og forstadier til kræft [21, 22]. Interleukin-1β er en potent inhibitor af mavesyresekretion, og det antages, at den forbedrede IL-1β respons ændrer topografien af ​​mavens infektion og dermed fremmer inflammation og efterfølgende atrofi i mavens corpus [23, 24]. Muligheden for, at IL-1 selv driver en øget spredning af gastriske epitelceller er ikke fuldt undersøgt. Ændring af gastrisk proliferation med IL-1β kunne bidrage til den kræftfremkaldende proces, ud over virkningerne på syresekretion. Derfor de direkte virkninger af IL-1β på gastrisk epitelproliferation er blevet vurderet.
Mitogenaktiveret proteinkinase (MAPK) cascades er velkarakteriserede pathways transducerende signaler fra celleoverfladen til kernen. Familien omfatter særskilte undergrupper; ekstracellulære signal-relaterede kinaser (ERK'er), c-Jun NH 2-terminale kinaser (JNK'erne) og p38 MAPK [25]. De ERK'er aktiveres ved en række ekstracellulære stimuli, og mediere de pro-proliferative virkninger af en række hormoner og vækstfaktorer [26, 27]. Aktivering ved phosphorylering af et dobbelt specificitet proteinkinase (MAP-kinase kinase (MAPKK)), (også kendt som MEK), gør det muligt igen at aktivere en familie af serin-threoninproteinkinaser, kendt som ERK'er. De ERK'er gengæld phosphorylere talrige cellulære proteiner, herunder transkriptionsfaktorer og har således en central rolle i udbredelse af mitogene signaler. Derfor rolle MAP-kinase pathway i mediering svarene på IL-1β er blevet vurderet.
Metoder
Celledyrkning
humane AGS gastrisk karcinom cellelinje blev købt fra European Collection af Animal Cell Cultures (Porton Down, UK). Celler blev dyrket i monolagskultur i RPMI 1640 medium suppleret med 100 ug /ml penicillin, 100 ug /ml streptomycin, 100 ug /ml gentamicin, 2,5 ug /ml amphoteracin B og 10% føtalt kalveserum. Celler blev dyrket i 75 cm 2 vævskulturkolber ved 37 ° C i en atmosfære af 5% CO 2 og 95% luft og passeret hver 5-7 dage. Salg Proliferation undersøgelser
[ 3H] thymidin. Celler blev dyrket i medium indeholdende 10% føtalt kalveserum, udpladet i plader med 24 brønde ved 10 5 celler /brønd og fik lov til at binde natten over. Efter vask med serumfrit medium blev celler inkuberet i serumfrit medium indeholdende 0,2 mM umærket thymidin i 24 timer i nærværelse af stigende koncentrationer af IL-1β, IL-8 eller GM-CSF. DNA-syntese blev bedømt ved måling af [ 3H] thymidin-inkorporering i den trichloreddikesyre (TCA) præcipiterbart materiale [28]. [ 3H] thymidin (0,1 uCi /ml, 10 Ci /mmol) blev tilsat 2 timer før afslutningen af ​​en 24 timers behandlingsperiode. Celler blev vasket to gange med serum-frit medium til fjernelse af ikke-inkorporeret [ 3H] thymidin, og DNA blev udfældet med 5% TCA ved 4 ° C i 15 minutter. Præcipitaterne blev derefter vasket to gange med 95% ethanol, opløst i 1 ml NaOH, og analyseret ved væskescintillationstælling. Resultater udtrykkes som procent kontrol ustimuleret [ 3H] thymidininkorporering (middelværdi ± SD) af 4-6 forskellige eksperimenter, hver udført in triplo. Til påvisning af vækstinhibering blev celler inkuberet med enten den specifikke MEK-inhibitor PD 98059 (25 uM) [29], IL-1-receptorantagonist (500 ng /ml) [30] eller neutraliserende antistoffer, anti-GM-CSF (5 ug /ml) eller anti-IL-8 (10 ug /ml). Inhibitorer eller antistoffer blev tilsat 30 minutter før cytokiner.
Cellevækst
Total levedygtige celleantal blev vurderet ved en modificeret MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5 diphenyl tetrazolim bromid assay) [31]. Celler blev udpladet i plader med 24 brønde i medium indeholdende 10% føtalt kalveserum. Efter fastgørelse natten over blev mediet ændret til 1% føtalt kalveserum-suppleret medium og stigende koncentrationer af IL-1β blev tilsat. Celler blev dyrket i 48 timer og derefter blev mediet fjernet og frisk RPMI 1640 medium indeholdende 0,5 ng /ml MTT blev tilsat. Cellerne blev inkuberet ved 37 ° C i 3 timer. Mediet blev derefter fjernet og 0,04 M HCI i isopropanol blev tilsat for at ekstrahere det reducerede formazanprodukt. Den resulterende optiske densitet ved 550 nm blev bestemt. Salg Kemikalier og reagenser
Rekombinant human IL-1β og IL-8 blev indkøbt fra Sigma (Poole, UK), rekombinant human GM-CSF og IL-1-receptorantagonist, anti-GM-CSF og anti-IL-8 var fra R og D-systemer (Abingdon, Uk). PD 95.059 var fra Calbiochem (Nottingham, UK). RPMI 1640 var fra Gibco BRL (Paisley, UK) og alle andre reagenser var fra Sigma. Koncentrationer af inhibitorer anvendte blev taget fra producentens data og offentliggjorte data. Evnen af ​​500 ng /ml IL-1 RA at afskaffe 10 ng /ml IL-1β-stimulering af IL-8-sekretion i AGS celler blev bekræftet. Effektiviteten af ​​anti-GM-CSF ved 5 ug /ml antistof mod afskaffe GM-CSF (1 ng /ml) inducerede AGS-celleproliferation blev bekræftet. Salg Statistik Salg cytokinstimuleret resultater, hvor sammenlignet med kontroldyr ustimulerede celler på den samme plade med 24 brønde. Data blev sammenlignet ved envejs variansanalyse og t-test for at bestemme statistisk signifikans. Hvert eksperiment som udført tredobbelt på 4-6 gange. Resultater udtrykkes som middelværdi ± standardafvigelse. Forskelle med P-værdier for < 0,05 blev betragtet som signifikante.
Resultater Salg Virkning af IL-1β i [3H] thymidin-inkorporering
Interleukin-1β forårsagede en dosisafhængig stigning i DNA-syntese som målt ved inkorporering af thymidin. Som vist i figur 1, blev signifikant stimulering set med 1-100 ng /ml IL-1β. Den maksimale stimulering af 52 ± 6% over kontrol blev set med 10 ng /ml. Den højere dosis på 100 mg /ml var lidt mindre effektivt til at stimulere proliferation. Figur 1 Virkning af IL-1β i [3H] thymidin-inkorporering i gastriske epitelceller AGS celler Celler blev behandlet med stigende koncentrationer af IL-1β i 24 timer og DNA-syntese vurderet ved [3H] thymidininkorporering. Resultater udtrykkes som middelværdi ± standardafvigelse. * P
< 0,01 over for kontrol
Effekt af IL-1β på celleantal
Stigningen i DNA-syntese ved IL-1β blev oversat til en absolut stigning i antallet af levedygtige celler. Som vist i figur 2, IL-1β forøgede celleantal i en dosisafhængig måde svarende til virkningerne på [ 3H] thymidin inkorporering. Den maksimale stimulering blev igen set ved 10 ng /ml IL-1β, hvilket frembragte en stigning i den samlede celleantal 22 ± 5%. Figur 2 Virkning af IL-1β på celleantal af gastriske epitelceller Cellerne blev behandlet med stigende koncentrationer af IL-1β i 48 timer og totale levedygtige celleantal vurderet ved MTT-assay. Resultater udtrykkes som middelværdi ± standardafvigelse. * P
< 0,01 over for kontrol
Virkninger af cytokininhibering eller receptorantagonisme på IL-1β-stimulering af proliferation
Forbehandling af cellerne med interleukin-1-receptorantagonist afskaffede stimulerende virkninger af IL-1β på [ 3H] thymidininkorporering (figur 3). Tidligere undersøgelser har vist, at IL-1β kan aktivere gastriske epitelceller, herunder AGS celler, til at udskille andre cytokiner, især interleukin-8 og granulocyt-makrofagkolonistimulerende faktor (GM-CSF) [31, 32]. yderligere undersøgelser blev derfor forpligtet sig til at vurdere, om de stimulerende virkninger af IL-1β blev medieret af en af ​​disse to cytokiner. Neutraliserende antistoffer til enten IL-8 eller GM-CSF havde ingen effekt på ustimuleret [ 3H] thymidin. Neutralisering af IL-8 havde ingen virkning på IL-1β-stimuated vækst, men anti-GM-CSF-antistof reducerede IL-1β-stimulerede proliferation med 31 ± 4% (P
< 0,01) (figur 3). Figur 3 Virkning af cytokininhibering på IL-1β-stimulering af [3H] thymidin i gastriske epitelceller AGS celler blev behandlet med 10 ng /ml IL-1β i 24 timer plus enten interleukin-1-receptorantagonist (IL-1 RA 500 ng /ml), neutraliserende anti-IL-8-antistof (10 ug /ml) eller neutraliserende anti-GM-CSF-antistof (5 ug /ml). DNA-syntese blev bedømt ved [3H] thymidininkorporering. Resultater udtrykkes som middelværdi ± standardafvigelse. * P
< 0,01 vs. IL-1β stimulering i fravær af inhibitor.
Virkninger af GM-CSF på proliferation
I betragtning af resultaterne opnået med anti-GM-SCF-antistof, de direkte vækst-stimulerende virkninger af GM-CSF blev undersøgt. GM-CSF havde en potent vækst stimulerende virkning på AGS celler: signifikant forøgelse af [ 3H] thymidininkorporering blev set ved alle koncentrationer (0,001-100 ng /ml) af GM-CSF. GM-CSF selv syntes at være en mere potent stimulerende end IL-1β; maksimal stimulering af 108 ± 17% over kontrol blev set med 100 ng /ml GM-CSF (figur 4). Den inhiberende virkning af anti-GM-CSF-antistof blev bekræftet ved afskaffelse af vækststimulerende virkning af 1 ng /ml GM-CSF (data ikke vist). Tidligere undersøgelser har vist, at IL-1β-stimulerede GM-CSF-frigivelse under lignende betingelser i AGS celler til at være ca. 10-20 pg /brønd /24 timer [32]. For at bekræfte resultaterne opnået med anti-IL-8-antistof, [ 3H] thymidin-inkorporering blev målt som respons på IL-8. Ingen forøgelse af proliferation blev set på enhver koncentration af IL-8 (0,001-100 ng /ml) (data ikke vist). Under lignende forhold IL-1β-stimuleret IL-8 release er ca. 3000 pg /godt /24 timer [31]. Figur 4 Virkning af GM-CSF på proliferation af gastriske epitelceller. AGS-celler blev behandlet med stigende koncentrationer af GM-CSF i 24 timer. Celleproliferation blev vurderet ved [3H] thymidininkorporering. Resultater udtrykkes som middelværdi ± standardafvigelse. * P
< 0,05, ** P
< 0,01 vs kontrol
Mekanisme af IL-1β-stimulering af celleproliferation
specifikke inhibitorer genistein, som inhiberer tyrosinkinaser og PD 98059, som hæmmer MAP-kinase-kinase (MEK), og således hæmmer ERK-pathway, var anvendes til at vurdere de mulige intracellulære signalveje medierer effekterne af IL-1β. For at undersøge virkningerne af IL-1β er forskellige fra dem af GM-CSF, blev udført disse forsøg i nærvær af anti-GM-CSF neutraliserende antistof. Som vist i figur 5, hverken genistein eller PD 98059 ændret ustimuleret [ 3H] thymidin inkorporering. Genistein helt afskaffede IL-1β-stimulering af proliferation. Inhibering af MEK med PD 98059 reducerede IL-1β-stimulerede proliferation med 58 ± 5% (P
< 0,01) (figur 5), men ikke helt afskaffe vækststimulerende virkning af IL-1β. Yderligere stigninger til supra-maksimal koncentrationer af PD 98050 ikke længere hæmmer IL-1β-stimuleret proliferation (data ikke vist). Figur 5 Virkning af inhibering af tyrosinkinaseaktivitet og MEK aktivitet på IL-1β-stimulerede gastrisk epitelcelleproliferation. AGS-celler blev behandlet med 10 ng /ml IL-1β i 24 timer i nærværelse af tyrosinkinaseinhibitoren genistein (100 uM) eller MEK-inhibitor PD 98059 (25 uM). Proliferation blev vurderet ved [3H] thymidininkorporering. Undersøgelser blev udført i nærvær af anti-GM-CSF-antistof (5 ug /ml). Resultater udtrykkes som middelværdi ± standardafvigelse. * P
< 0,01 vs kontrol
Diskussion
Denne undersøgelse viste, at IL-1β øget spredning af AGS celler. Denne virkning blev vendt ved receptorantagonisten, tyder det var medieret via interleukin-1-receptoren. IL-1β stimulerede både [ 3H] thymidin-inkorporering, som et mål for stimulering af DNA syntetisk sats og også det samlede celleantal målt ved MTT-assayet. Dette illustrerer, at stimuleringen af ​​DNA-syntese ved IL-1β omsættes til en reel stigning i celleantal.
En portion af den stimulerende virkning af IL-1β synes at være indirekte. Neutralisering af GM-CSF i medierne førte til en betydelig reduktion af IL-1β-stimuleret proliferation. AGS celler vides at udskille GM-CSF som respons på IL-1β [32]. GM-CSF selv var en potent stimulerende af celleproliferation. det synes derfor sandsynligt, at en del af vækststimulerende virkninger af IL-1β skyldes en autokrin mellemmand virkning af GM-CSF. Der er begrænsede tidligere data tyder på, at GM-CSF stimulerer udbredelsen af ​​ikke-hæmatopoietiske celler; Dippold et al
viste, at exogent GM-CSF stimulerede væksten af ​​to ud af to kulturer afledt af gastriske carcinomer og to ud af ni pancreas carcinoma cellelinier [33, 34]. i modsætning til den aktuelle undersøgelse, autokrine produktion af GM-CSF var imidlertid ingen påviselige.
Gastric epitelceller også producere IL-8 som respons på IL-1β [31]. Men i dette modelsystem, IL-8 alene havde ingen pro-proliferativ virkning og neutralisering af IL-8 påvirkede ikke den stimulerende virkning af IL-1β. Derfor er det usandsynligt, at IL-8 har en autokrin rolle i væksten-stimulerende virkning af IL-1β. Det er muligt, at andre cytokiner produceret af mavens epitelceller i respons på IL-1β, kunne H. pylori eller Salg andre inflammatoriske fornærmelser også spille en rolle som autokrine eller parakrine mediatorer af vækst. Det er for nylig blevet rapporteret, at en anden C-X-C kemokin, GRO /CINC-1, som også opreguleret i H. pylori
infektion stimuleret proliferation i rotte gastriske epitelceller [35]. Den rolle, som disse andre potentielle autokrine mediatorer fortjener yderligere undersøgelse.
Resultaterne af inhibitoren undersøgelser tyder på, at tyrosinkinaseaktivitet er væsentlig for den vækstfremmende virkning af IL-1β i AGS celler. Tyrosinkinaseinhibitoren genistein afskaffet stimulerende virkning af IL-1β. IL-1β vides at aktivere en overflod af intracellulære signalveje [31, 36-39], men i den nuværende situation synes der at være et absolut krav til signalering via en tyrosinkinase, efterfølgende på receptoraktivering.
Mitogen -aktiverede protein kaskade er en velkarakteriseret pathway mediere cellevækst-stimulerende virkninger af mange vækstfaktorer og hormoner. Hæmning af ERK-vejen, med MEK-inhibitor PD 98059, som forhindrer aktivering af ERK'er ved phosphorylering, havde en signifikant inhiberende virkning mod den stimulerende virkning af IL-1β. Dette antyder, at aktivering af ERK-vejen er vigtig ved mediering af vækststimulerende virkninger af IL-1β. Aktivering af MAP-kinase kaskader, herunder P42 og P44 ERK veje og p46JNK og p55JNK c-Jun NH 2-terminale kinaser af IL-1β er blevet påvist i rotte gastriske epitelceller [41, 42], men den funktionelle betydning disse veje blev ikke undersøgt. Aktivering af ERK'er og JNK'erne blev inhiberet af genistein [41], i overensstemmelse med følgeslutning af den aktuelle undersøgelse, at MAPK'er ligge nedstrøms for tyrosin aktivitet i IL-1β-induceret signalering. Men i den aktuelle undersøgelse PD 98059 ikke fuldstændig at afskaffe den stimulerende virkning af IL-1β, hvilket antyder, at alternative veje, aktiveret efterfølgende på tyrosinkinaseaktivitet, også spille en rolle i signalering af de proliferative responser på IL-1β. Yderligere undersøgelser er i gang på nuværende tidspunkt at undersøge disse.
Der er modstridende data vedrørende de direkte virkninger af IL-1β om gastrisk epitelproliferation. Selv om den nuværende undersøgelse og undersøgelsen af ​​Fan et al
hjælp stimuleret-leukocyt konditionerede medier viste øget proliferation af den humane AGS cellelinie [14], andre har vist inhibering af serum, TGF-α og EGF-stimuleret proliferation i RGM1 rotte gastriske epitelceller af IL-1β [41, 42]. Tominaga et al
viste, at forbehandling af RGM1 celler med IL-1β i 6 timer inhiberede proliferation ved 24 timer, men den inhiberende virkning blev tabt ved 48 timer, [41]. Årsagerne til disse afvigelser er ikke klare. De kan afspejle iboende forskelle mellem cellelinierne, forskelle i aktivering og involvering af paracrine vækstfremmende veje, arter variabilitet, en effekt specifik for visse vækstfaktorer eller underliggende forskelle i biologi cellelinier afledt fra cancer (AGS) eller normal væv (RGM1). Undersøgelserne påviser inhibering af proliferation af IL-1β blev udført i nærvær af kraftige vækstfremmende stimuli (høje serum eller specifikke vækstfaktorreceptorer koncentrationer i dyrkningsmediet), whist de igangværende undersøgelser blev udført i serumfrie eller 1% serum media . Det er muligt, at de multiple signalveje, der aktiveres af IL-1β har forskellige virkninger på proliferation, den dominerende virkning afhængig af de komplekse indbyrdes forhold mellem stimuli og signalveje under forskellige omstændigheder. Pro-inflammatoriske cytokiner såsom IL-1β og TNF-α aktivere forskellige signalveje med divergerende resultater og forskellige tidspunkter kurser i gastrisk endokrine og parietalceller [37, 38, 43-46]. Yderligere undersøgelser er i gang at undersøge de specifikke roller for de forskellige signalveje i gastriske epitelceller under forskellige betingelser.
Der er nu stærke epidemiologiske data forbinder H. pylori
med gastrisk karcinom. Den kræftfremkaldende proces synes at involvere en række trin: H. pylori
induceret betændelse udvikler sig til atrofi, intestinal metaplasi, dysplasi og til sidst karcinom [47]. Tilsvarende H. pylori
infektion hos mongolske hoppemus let inducerer gastrisk atrofi og cancer [6]. Mens gastrisk carcinogenese er uden tvivl en multifaktoriel proces, der involverer patogene bakterielle og vært faktorer, herunder HLA status, kost og antioxidant status [47, 48], er det klart, at øget gastrisk epitelproliferation, især når relativt steget i forhold til apoptose, er en vigtig del af vejen [49, 50]. Øget gastrisk epitelproliferation er typisk for H. pylori
infektion; det er påviselig i alle faser af infektionen og udryddelse af infektionen reducerer spredning. Øget spredning er en vigtig markør for øget risiko for gastrointestinal adenocarcinom [12]. Mekanismerne i den forøgede proliferation forstås ikke til fulde. In vitro Salg undersøgelser afprøvning kulturer af H. pylori eller Salg vælgere har givet modstridende resultater i forskellige systemer med forskellige celletyper og bakteriestammer. Direkte stimulation af gastrisk epitelproliferation af H. pylori
er blevet rapporteret af nogle forfattere [14, 15], mens enten neutrale virkninger [15] eller øget apoptose og nedsat proliferation er blevet rapporteret af andre [16-18]. Fan et al
rapporterede, at konditionerede medier fra enten H. pylori eller
mitogenaktiveret lymfocytter direkte stimuleret AGS celledeling [14], hvilket tyder på, at det inflammatoriske respons kunne være delvis ansvarlig for forbedring af epitelproliferation. IL-1β produktion er forbedret i H. pylori
infektion og denne cytokin anses for at være centrale for reguleringen af ​​den pro-inflammatorisk reaktion i H. pylori
infektion.
IL-1β er en dyb inhibitor af mavesyresekretion in vivo
[51] og i isolerede parietalceller [37, 38]. Genetiske polymorfier af IL-1β-genklyngen forårsager øget transkriptionel aktivitet er forbundet med en øget risiko for præ-cancerøse og cancerøse histologiske forandringer hos H. pylori
infektion [21, 22]. Den generelle hypotese forklarer denne observation har været, at forøget IL-1β produktion som følge af H. pylori
infektion er ansvarlig for større suppression af syresekretion, hvilket igen giver mulighed for større kolonisering af syren-udskillende organ mucosa [24]. Denne større kolonisering provokerer yderligere betændelse, hvilket i sidste ende fører til tab af specialiserede syre-sekretorisk epitel (atrofi) og yderligere forstærker den onde cirkel af øget inflammation og formindsket syresekretion [52]. Gastrisk atrofi disponerer væsentligt til kræft [3]. Det antages, at atrofi i kombination med mediatorer frigivet i inflammation, såsom oxygen frie radikaler og nitrogenoxid, kost, anti-oxidant tilstand og muligvis bakteriel overvækst og generering af nitrosaminer i achlorhydric maven [53] fremme de histologiske forandringer, årsag mutageneisis og drev progression til cancer.
En alternativ, men udelukker ikke hinanden, hypotese er, at den forøgede cytokin respons direkte forbedrer epitelcelleproliferation og selv prædisponerer cancer, ud over effekterne på syresekretion. Den øgede celle omsætning af denne hyperproliferative respons ville selv gøre slimhinden mere sårbare over for mutagene virkninger af frie radikaler og andre giftige produkter genereret i achlorhydric betændelse i mave.
Andetsteds i mavetarmkanalen, har IL-1β vist sig at stimulere [ 3H] thymidin inkorporering og øge celleantallet af dyrkede humane colon subepiteliale myofibroblaster, som menes at have betydning i remodellering af slimhinden i inflammation [54]. De pro-proliferative virkninger af IL-1β i mavetarmkanalen fortjener yderligere undersøgelse, betragtning af betydningen af ​​dette cytokin i reguleringen af ​​den mucosale inflammatoriske respons.
Konklusioner
Resultaterne af den aktuelle undersøgelse tyder på, at IL-1β og GM-CSF kan direkte stimulere gastrisk epitelproliferation. Dette kan forklare de proliferative reaktioner på aircondition lymfocyt medier demonstreret af Fan et al
[14]. Forbedret epitelproliferation grund IL-1β kan medvirke til at øge risikoen for mavekræft og forstadier til kræft i H. pylori
inficerede personer med specifikke IL-1β alleler forbundet med højere produktion. IL-1β stimulerer proliferation via receptor-medieret aktivering af en tyrosinkinase pathway. Downstream signalering involverer ERK-afhængige og -uafhængige veje.
Yderligere undersøgelser vil være nødvendigt at præcisere de mekanismer, der er involveret i IL-1β-stimulation af gastrisk epitelproliferation, samt data korrelerer IL-1β genotype, IL-1β protein produktion og epitelproliferation in vivo
Disse vil komplimentere den aktuelle undersøgelse og yderligere forbedre vores forståelse af H. pylori
induceret gastrisk carcinogenese
Liste over forkortelser
EGF:..
epidermal vækstfaktor
ERK:
ekstracellulært signal relateret kinase
GM-CSF:
granulocyt-makrofag koloni stimulerende faktor

IL:
interleukin
JNK:
c-Jun NH 2-terminal kinase

MAP:
mitogen aktiveret protein
MTT - 3- [4:
5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5 diphenyl tetrazolim bromid

TCA:
trichloreddikesyre
TGF-α:.
transformerende vækstfaktor alpha

erklæringer
forfattere 'originale indsendte filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 12876_2001_21_MOESM1_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 1 12876_2001_21_MOESM2_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 2 12876_2001_21_MOESM3_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 3 12876_2001_21_MOESM4_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 4 12876_2001_21_MOESM5_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 5 konkurrerende interesser
Ingen erklæret.

• Klinisk undersøgelse af høst lymfeknuder med kulstof nanopartikler i fremskreden gastrisk cancer: et prospektivt randomiseret forsøg
• Effekt af æble cider eddike på forsinket gastrisk tømning hos patienter med type 1-diabetes mellitus: en pilot study