Poveikis Interlukin-1β dėl gausėjančių skrandžio epitelinių ląstelių culture

Poveikis Interlukin-1β dėl gausėjančių skrandžio epitelinių ląstelių kultūros pervežimas tezės
Background
Helicobacter pylori pervežimas yra pagrindinis rizikos veiksnys plėtojant ne-CARDIA skrandžio vėžio. Padidėjęs platinimo skrandžio gleivinės yra H. pylori
infekcijos požymis. Gleivinės interkeukin-1β gamyba padidėjo H. pylori
infekcijos ir IL-1β genotipų susijęs su padidėjusia PRO-uždegiminių veiklos yra rizikos veiksniai skrandžio vėžio vystymąsi. IL-1β poveikis skrandžio epitelio ląstelių proliferaciją buvo nagrinėjami šiame tyrime.
Metodai
AGS ląstelės buvo auginamos su IL-1β. DNR sintezė ASSED iki [ 3H] timidino ir bendra gyvų ląstelių skaičių BY MTT.
Rezultatai
IL-1β dozė priklausomai padidėjo DNR sintezę ir ląstelių skaičių. Patobulinta proliferacija buvo užblokuotas interleukino-1 receptorių antagonistas. Papildymas neutralizavimo antikūnų prieš GM-CSF sumažėjo IL-1β stimuliuojamos platinimu 31 ± 4%. GM-CSF vien gerokai paskatino platinimu. Papildymas ar neutralizuojant IL-8 neturėjo bazinei ar IL-1β stimuliuojamos platinimo poveikį. Tirozino kinazės inhibitorius genisteinas visiškai užblokuotas IL-1β stimuliuojama platinimu ir slopinamas neląstelinio signalo susiję kinazės keliu su PD 98059 slopino IL-1β skatino platinimo 58 ± 5%.
Išvados
IL-1β stimuliuoja proliferaciją in skrandžio epitelio ląstelės. Autokrining stimuliacija GM-CSF prisideda prie šio proliferacinės atsaką. Signalizavimo per tirozino kinazės aktyvumo yra labai svarbus mitogeninę atsakas į IL-1β. Ekstraląstelinė signalas susijusių kinazės kelias dalyvauja, bet nėra būtinas ir baigiant tolesniu signalizacijos. IL-1β gali prisidėti prie hiperproliferacija matė H. pylori-
užkrėsto skrandžio gleivinę, ir dalyvauti kancerogeninio procese.
Background
Helicobacter pylori
yra manoma, kad pagrindinis Etiologinė veiksnys iš ne CARDIA skrandžio adenokarcinoma plėtra. Didelio masto epidemiologinius tyrimus patvirtino tvirtą ryšį tarp Helicobacter pylori infekcijos
ir tiek vėžiu [1-3] ir anksčiau histologinio etapais, atrofijos ir žarninės metaplazijos [4, 5]; kurie abu padidinti vėliau neoplastinės transformacijos riziką. Gyvūnų modeliai taip pat parodė, kad H. pylori
svarbą skrandžio kancerogenezėje [6, 7]. Padidėjęs normos platinimu skrandžio gleivinės yra būdinga H. pylori
infekcija [8-11] ir hiperproliferacija per atsiranda virškinimo trakto būti žymeklis vėliau piktybinės kaitos [12]. Iš padidintą platinimo priežastis nėra aiški, tačiau padidintos normos sumažinti iki normalaus su klirensas infekcijos [8, 13]. Nors hypeprproliferation yra tipiškas in vivo, UAB, tyrimai bandymų H. poveikį pylori
arba jos produktai In vitro
parodė prieštaringus rezultatus, tiek tvirtesnio [14, 15] ir sumažėjo [16-18] platinimu pranešė. Tai įmanoma, kad kiti komponentai uždegiminio atsako būdingi H. pylori
užkrėstą gleivinę gali būti bent iš dalies atsakingi už vairavimo padidėjusį ląstelių proliferaciją.
Daugiapotencinės Pro-uždegiminių citokinų interleukino-1β turi pagrindinį vaidmenį H. pylori
indukuotų gleivinės uždegimas patogenezė. IL-1β genų ekspresijos ir baltymų produkcija padidėja H. pylori
infekcijos ir sumažinti su sėkmingo likvidavimo [19, 20]. Iš IL-1β genotipo polimorfizmo susijusio su padidintu IL-1β gamybai buvimas buvo susijęs su reikšmingu rizikos padidėjimu skrandžio vėžio ir priešvėžiniai pažeidimai [21, 22]. Interleukino-1β yra stiprus inhibitorius skrandžio rūgšties sekrecijos ir ji yra hipotezę, kad pagerintas IL-1β atsakas keičia skrandžio infekcijos topografiją ir tokiu būdu skatina uždegimą ir vėlesnį atrofiją skrandžio korpuso [23, 24]. Galimybė, kad IL-1β pati varo padidėjo platinimu skrandžio epitelinių ląstelių nėra visiškai ištirtas. Pakeitimas skrandžio platinimą IL-1β gali prisidėti prie kancerogeninio proceso, be to būtų galima nustatyti poveikį rūgšties sekrecijos. Todėl buvo įvertintas tiesioginis poveikis IL-1β skrandžio epitelio proliferacija.
Mitogenu aktyvuoto proteino kinazės (MAPK) kaskadomis yra gerai būdingas keliai transdukavimą signalus iš ląstelių paviršiaus iki branduolio. Šeima apima skirtingus pogrupius; ekstraląstelinei signalo susijusių kinazės (ERKs), C-Birželio NH 2-terminalų kinazės (JNKs) ir p38 MAPK [25]. Į ERKs yra aktyvuota iš ekstraląsteliniuose įvairius dirgiklius, ir tarpininkauti PRO antiproliferacinės poveikį hormonų ir augimo faktorių [26, 27] skaičius. Aktyvinimas fosforilinimo dvejopo specifiškumo baltymų kinazės (ŽEMĖLAPIS kinazės kinazės (MAPKK)) (taip pat žinomas kaip MEK), tai leidžia savo ruožtu aktyvuoti serino-treonino kinazės baltymų, žinomas kaip ERKs šeimą. Savo ruožtu ERKs fosforilinti daug ląstelių baltymų, įskaitant transkripcijos faktorių, todėl turi pagrindinį vaidmenį dauginimo mitogeninis signalus. Atitinkamai MAP-kinazės keliu tarpininkaujant atsakymus į IL-1β vaidmuo buvo įvertintas.
Metodai
Mobilusis kultūra
žmogaus AGS skrandžio karcinoma ląstelių linijos buvo įsigytas iš Europos surinkti gyvūninės kilmės ląstelių kultūrų (Porton žemyn, Jungtinė Karalystė). Ląstelės buvo auginamos vienasluoksnę kultūros RPMI 1640 terpėje, papildytoje 100 mikrogramų /ml penicilino, 100 mikrogramų /ml streptomicino, 100 mikrogramų /ml gentamicino, 2,5 mikrogramai /ml amphoteracin B ir 10% serumas iš veršiuko embriono. Ląstelės buvo auginamos 75 cm 2 audinio kultūros kolbos 37 ° C 5% CO 2 ir 95% oro atmosferoje ir passaged kas 5-7 dienas.
Platinimu tyrimai
[ 3H] timidino. Ląstelės buvo auginamos terpėje, kurių sudėtyje yra 10% serumas iš veršiuko embriono, padengtą į 24-duobučių lėkštelėse ne 10 5 ląstelių /gerai ir leidžiama pridėti naktį. Po plovimo su žiniasklaida be serumo, ląstelės buvo inkubuojami serumo neturinčioje terpėje, turinčioje 0,2 mM nežymėto timidino už 24 valandų atsižvelgiant į didėjančią koncentracijos IL-1β buvimą, IL-8 arba GM-CSF. DNR sintezė buvo įvertintas matuojant [ 3H] timidino į trichloracto rūgšties (TCA) nusodintas medžiagos [28]. [ 3H] timidino (0,1 μCi /ml, 10 Ci /mmol) 2 valandas prieš pasibaigiant 24 valandų gydymo kurso pabaigos. Ląstelės buvo plaunama du kartus terpėje serumo neturinčioje pašalinti neturinčių juridinio asmens statuso [ 3H] timidino, ir DNR nusodinama su 5% TBS, esant 4 ° C temperatūroje 15 minučių. tada metu nuosėdos du kartus praplaunamos 95% etanolio, ištirpinta 1 ml NaOH, ir analizuojami skystosios scintiliacijos. Rezultatai išreikštas proc valdymo Nestimuliuotų [ 3H] timidino (vidurkis ± SN) 4-6 skirtingų eksperimentų, kurių kiekvienas atlieka tris kartus. Už augimo slopinimo aptikimo, ląstelės buvo inkubuojamos su kurių konkrečiai MEK inhibitoriaus PD 98059 (25 pM) [29], IL-1 receptorių antagonistas (500 ng /ml) [30] arba neutralizuojančių antikūnų prieš, anti-GM-CSF (5 mikrogramai /ml) arba anti-IL-8 (10 mikrogramai /ml). Inhibitoriais ar antikūnai buvo pridėta 30 minučių prieš citokinų.
Ląstelių augimą
Iš viso gyvų ląstelių skaičių buvo vertinami pagal modifikuotą MTT (3- [4,5-dimetiltiazol-2-il] -2,5 difenilo tetrazolim bromidas tyrimas) [31]. Ląstelės buvo padengtas į 24-duobučių lėkštelėse į terpę, turinčią 10% serumas iš veršiuko embriono. Po prijungimo nakties, vidutinės buvo pakeistas į 1% serumas iš veršiuko embriono papildyta laikmenoje ir buvo pridėta didėjančių koncentracijų IL-1β. Ląstelės buvo auginamos 48 valandas ir tada vidutinės buvo pašalintas ir švieži RPMI 1640 terpėje, turinčioje 0,5 ng /ml buvo įtraukta MTT. Ląstelės buvo inkubuojamos 37 ° C temperatūroje 3 valandas. tada vidutinės buvo pašalintas ir 0,04 M HCl izopropanolio buvo įtraukta į išgauti sumažintą formazano. lėmė Gautas optinis tankis, esant 550 nm bangos ilgiui.
Cheminės medžiagos ir reagentai
rekombinantinis žmogaus IL-1β ir IL-8 buvo įsigytas iš Sigma (Poole, UK) rekombinantinio žmogaus GM-CSF ir IL-1 receptorių blokatoriais, anti-GM-CSF ir anti-IL-8 buvo iš R ir D sistemas (Abingdon, Jungtinė Karalystė). Apsaugos 95.059 buvo nuo CalBiochem (Nottingham, Jungtinė Karalystė). RPMI 1640 buvo iš Gibco BRL (Paisley, Jungtinė Karalystė) ir visi kiti reagentai buvo iš Sigma. Koncentracijos inhibitoriai, vartojami paimti iš gamintojų duomenis ir paskelbtais duomenimis. Nuo 500 ng /ml IL-1ra gebėjimas panaikinti 10 ng /ml IL-1β-stimuliacija IL-8 sekrecijos AGS ląstelių buvo patvirtinta. Iš anti-GM-CSF veiksmingumas 5 mikrogramai /ml antikūnų panaikinti GM-CSF (1 ng /ml) sukeltas AGS ląstelių proliferacija buvo patvirtinta.
Statistika
citokinų skatino rezultatus, kur, lyginant su kontrolinės Nestimuliuotų ląstelių tą pačią 24-šulinėlių plokštelės. Duomenys buvo palyginti pagal vieną pusę dispersinė analizė ir Stjudento t-testas nustatyti, statistinį reikšmingumą. Kiekvienas eksperimentas kaip pakartotas tris kartus 4-6 kartus. Rezultatai išreiškiami kaip vidurkis ± standartinis nuokrypis. Skirtumai su P verčių < 0,05 buvo laikomas reikšmingu.
Rezultatai
poveikis IL-1β apie [3H] timidino
Interleukinas-1β sukelia nuo dozės priklausomą padidinti DNR sintezę, matuojant timidinfosforilazė steigimo. Kaip parodyta 1 paveiksle, didelė stimuliacija buvo pastebėtas su 1-100 ng /ml IL-1β. Maksimalus stimuliacija 52 ± 6% daugiau nei kontrolės buvo pastebėtas su 10 ng /ml. Tuo didesnė dozė 100 mg /ml buvo šiek tiek mažiau veiksmingas skatinant proliferaciją. 1 pav poveikis IL-1β ant [3H] timidino į skrandžio epitelio AGS ląsteles, buvo gydomi Didinamos koncentracijos IL-1β 24 valandas ir DNR sintezei įvertino [3H] timidino. Rezultatai išreikštas reiškia ± standartinis nuokrypis. * P
< 0,01 vs kontrolės
poveikis IL-1β apie ląstelių skaičių
DNR sintezės padidėja IL-1β buvo išversta į absoliutų padidėjimą gyvų ląstelių skaičių. Kaip parodyta 2 paveiksle, IL-1β padidėjo ląstelių skaičių nuo dozės priklausomu būdu, panašiu į ON [ 3H] timidino poveikį. Maksimali stimuliacija vėl buvo pastebėtas 10 ng /ml IL-1β, kurie gamina 22 ± 5% didesnė bendra ląstelių skaičių. 2 pav poveikis IL-1β apie ląstelių skaičių skrandžio epitelio ląsteles, buvo gydomi Didinamos koncentracijos IL-1β 48 valandas ir viso gyvų ląstelių skaičių įvertino MTT. Rezultatai išreikštas reiškia ± standartinis nuokrypis. * P
< 0,01, lyginant su kontrole
poveikio citokinų slopinimas ar antagonizmo apie IL-1β-stimuliacija platinimu
Pirminis ląstelių su interleukino-1 receptorių antagonistas panaikino stimuliuojamasis poveikis IL-1β nuo [ 3H] timidino (3 paveikslas). Ankstesni tyrimai parodė, kad IL-1β gali įjungti skrandžio epitelio ląsteles, įskaitant AGS ląstelių, išskirti kitus citokinus, ypač interleukino-8 ir granuliocitų-makrofagų kolonijas stimuliuojantis faktorius (GM-CSF) [31, 32]. Todėl tolesni tyrimai, siekiant įvertinti, ar stimuliavimo veiksmai IL-1β buvo tarpininkaujant vieną iš šių dviejų citokinų. Neutralizuodamas antikūnus arba IL-8 arba GM-CSF neturėjo Nestimuliuotų [ 3H] timidino poveikis. Neutralizacija IL-8 neturėjo IL-1β-stimuated augimo, bet anti-GM-CSF antikūnų sumažinto IL-1β stimuliuojamos platinimo poveikį pagal 31 ± 4% (p
< 0,01) (3 pav.) 3 pav poveikis citokinų slopinimo dėl IL-1β-stimuliacija [3H] timidino į skrandžio epitelinių ląstelių AGS ląstelių buvo gydomi 10 ng /ml IL-1β už 24 valandas plius arba interleukino-1 receptoriaus antagonisto (IL-1ra 500 ng /ml), neutralizuoja anti-IL-8 antikūnas (10 mikrogramų /ml) ar neutralizavimui anti-GM-CSF antikūnas (5 mikrogramų /ml). DNR sintezė buvo įvertintas [3H] timidino. Rezultatai išreikštas reiškia ± standartinis nuokrypis. * P
< 0,01 vs IL-1β stimuliacija nesant inhibitorius.
Poveikis GM-CSF dėl gausėjančių
atsižvelgiant į rezultatus, gautus su anti-GM-SCF antikūnų, tiesioginės augimą stimuliuojantį veiksmus GM-CSF buvo išnagrinėti. GM-CSF turėjo stiprus ekonomikos augimo stimuliuojantį veiksmų AGS ląstelių: smarkiai sustiprės [ 3H] timidino buvo vertinamas visais koncentracija (0,001-100 ng /ml) GM-CSF. GM-CSF pati pasirodė būti daugiau stiprus stimuliatorius nei IL-1β; Maksimalus stimuliacija 108 ± 17% aukščiau kontrolės buvo pastebėtas su 100 ng /ml GM-CSF (4 paveikslas). Slopinantis veiksmų anti-GM-CSF antikūno buvo patvirtinta panaikinimo augimo stimuliavimo veiksmų 1 ng /ml GM-CSF (duomenys neparodyta). Ankstesni tyrimai parodė, kad IL-1β stimuliuojama GM-CSF spaudai panašiomis sąlygomis AGS ląstelių būti maždaug 10-20 pg /taip /24 valandos [32]. Patvirtinti gautus rezultatus su anti-IL-8 antikūno rezultatus, [ 3H] timidino buvo matuojamas kaip atsakas į IL-8. Ne jų platinimo stiprinimas buvo pastebėtas bet IL-8 (0,001-100 ng /ml) koncentracijos (duomenys neparodyta). Panašiomis sąlygomis IL-1β stimuliuojama IL-8 versija yra maždaug 3000 pg /taip /24 valandos [31]. Skaičius 4 poveikis GM-CSF dėl proliferacijos skrandžio epitelinių ląstelių. AGS ląstelės buvo gydomi Didinamos koncentracijos GM-CSF už 24 val. Ląstelių proliferacija buvo vertinama [3H] timidino. Rezultatai išreikštas reiškia ± standartinis nuokrypis. * P
< 0,05, ** p
< 0,01 vs kontrolės pervežimas mechanizmas IL-1β-stimuliacija ląstelių proliferaciją Viesbutis The specifinis inhibitoriai genisteinas, kuris slopina tirozinkinazių ir PD 98059, kuris slopina ŽEMĖLAPIS kinazės kinazės (MEK), ir tokiu būdu slopina ERK-kelią, buvo naudojamas įvertinti galimą ląstelėje kelius tarpininkavimo IL-1β poveikį. Tam, kad ištirti IL-1β poveikį, kurios skiriasi nuo GM-CSF, šie eksperimentai buvo atliekami pagal su anti-GM-CSF neutralizuojančių antikūnų buvimas. Kaip parodyta 5 paveiksle, nei genisteinas, nei PD 98.059 pakeisti Nestimuliuotų [ 3H] timidino. Genisteinas visiškai panaikinta IL-1β-stimuliacija platinimu. Slopinimas MEK su PD 98059 sumažintas IL-1β stimuliuojamos platinimu 58 ± 5% (p
< 0,01) (5 paveikslas), bet ne visiškai panaikinti augimo stimuliuojantį veiksmų IL-1β. Daugiau padidėja iki supra-maksimali koncentracija PD 98050 neturėjo toliau slopina IL-1β stimuliuojamos platinimu (duomenys neparodyti). 5 paveikslas poveikis slopinamas tirozino kinazės ir MEK veikla pagal IL-1β stimuliuojamos skrandžio epitelio ląstelių proliferaciją. AGS ląstelės buvo gydomi 10 ng /ml IL-1β už 24 valandų atsižvelgiant į tirozino kinazės inhibitorius genisteinas (100 pM) arba MEK inhibitoriaus PD 98059 (25 pM) buvimą. Proliferacija buvo vertinama naudojant [3H] timidino. Tyrimai buvo atlikti su anti-GM-CSF antikūno (5 mikrogramų /ml) buvimą. Rezultatai išreikštas reiškia ± standartinis nuokrypis. * P
< 0,01 vs valdymo pulto
Diskusija pervežimas Šis tyrimas parodė, kad IL-1β padidėjo proliferaciją AGS ląsteles. Šis poveikis buvo pakeista į receptoriaus antagonisto, teigiama, kad ji tarpininkaujant per interleukino-1 receptoriaus. IL-1β skatino tiek [ 3H] timidino, kaip stimuliacijos DNR sintetinės norma ir taip pat visų ląstelių skaičių priemonę vertinant pagal MTT. Tai rodo, kad DNR sintezę IL-1β stimuliacija paversti tikru padidinti ląstelių skaičių.
Pasirodo stimuliavimo veiksmų IL-1β porcija turi būti netiesioginis. Neutralizacija GM-CSF žiniasklaidoje buvo gerokai sumažinti IL-1β stimuliuojamos platinimu. AGS ląstelės yra žinoma, kad išskirti GM-CSF, reaguojant į IL-1β [32]. GM-CSF pati buvo stiprus stimuliatorius ląstelių proliferaciją. Todėl tikėtina, atrodo, kad augimo stimuliuojančių veiksmai IL-1β yra dėl autokrino tarpininko veiksmų GM-CSF dalį. Yra nedaug ankstesnių duomenų, rodančių, kad GM-KSF stimuliuoja ne kraujodaros ląstelių proliferaciją; Dippold kt ​​
parodė, kad egzogeninė GM-CSF skatino dvi iš dviejų kultūrų, gautų iš skrandžio karcinoma ir dvi iš devynių kasos karcinoma ląstelių linijų [33, 34] augimą. Tačiau, skirtingai nuo dabartinio tyrimo autokrining gamyba GM-CSF buvo neaptikta.
Skrandžio epitelio ląstelės taip pat gamina IL-8, reaguojant į IL-1β [31]. Tačiau šis modelis sistemoje, IL-8 vien neturėjo Pro antiproliferacinės veiksmus ir neutralizuoti IL-8 nepaveikė stimuliuojantį veiksmų IL-1β. Todėl mažai tikėtina, kad IL-8 turi autokrining vaidmenį augimui stimuliuoti veiksmų IL-1β. Tai įmanoma, kad kiti gaminami skrandžio epitelinių ląstelių atsakas į IL-1β citokinai, H. pylori, arba
kitų uždegiminių įžeidinėjimų taip pat galėtų vaidinti svarbų vaidmenį kaip autokrining arba paracrine mediatorių augimą. Ji neseniai buvo pranešė, kad kita, C-X-C chemokino, GRO /CINC-1, kuris taip pat yra aktyvinama H. ​​pylori
infekcijos stimuliuojamos proliferacija, žiurkių skrandžio epitelinių ląstelių [35]. Šių kitų potencialių autokrining tarpininkų vaidmuo nusipelno tolesnio tyrimo.
Inhibitoriaus tyrimų rezultatus galima teigti, kad tirozino kinazės aktyvumas yra labai svarbus ekonomikos augimui skatinti veiksmus IL-1β į AGS ląsteles. Tirozino kinazės inhibitorius genisteinas panaikino stimuliuojantį veiksmų IL-1β. IL-1β yra žinoma, kad aktyvuoti ląstelėje signalizacijos būdus [31, 36-39] gausybė, tačiau dabartinėje situacijoje atrodo, kad absoliutus reikalavimas signalizacijai per tirozino kinazės, vėliau ant receptoriaus aktyvacija.
Mitogenas -aktyvuoto baltymų kaskados yra gerai charakterizuojamas kelias tarpinin- ląstelių augimą stimuliuojančių veiksmus daugelio augimo faktorių ir hormonų. Slopinimo ERK keliu, su MEK inhibitorių PD 98059, kuris neleidžia aktyvinti ERKs iki fosforilinimo, turėjo didelę slopinančio veiksmų prieš stimuliavimo veiksmų IL-1β. Tai rodo, kad aktyvacija ERK keliu svarbu tarpininkavimo augimo stimuliuojamasis veiksmus IL-1β. Aktyvinimas ŽEMĖLAPIS kinazės kaskadomis, įskaitant P42 ir P44 ERK kelius ir p46JNK ir p55JNK c-Birželio NH 2-terminalo kinazės IL-1β buvo įrodytas žiurkių skrandžio epitelio ląsteles [41, 42], tačiau funkcinę svarbą šių būdų nebuvo nagrinėjami. Aktyvinimas ERKs ir JNKs buvo slopinamas genisteinas [41], derančių su dabartinio tyrimo, MAPKs meluoti pasroviui tirozino aktyvumą IL-1β sukeltos signalizacijos išvadą. Tačiau dabartiniame tyrime PD 98059 nebuvo visiškai panaikinti stimuliuojantį veiksmų IL-1β, tai rodo, kad alternatyvūs keliai, aktyvuotos vėlesnis tirozino kinazės aktyvumo, taip pat vaidina vaidmenį proliferacijos atsakymų į IL-1β signalizacijos. Tolesni tyrimai vyksta šiuo metu nagrinėti jų.
Yra prieštaringų duomenų apie tiesioginius padarinius IL-1β skrandžio epitelio proliferacija. Nors dabartinės studijų ir Fan et al pervežimas naudojant stimuliuojami-leukocitų apdorotų žiniasklaidos parodė padidėjusią platinimu žmogaus AGS ląstelių linijos [14], kiti parodė, slopina kraujo serume, TGF-alfa ir EGF stimuliuojamos platinimu tyrimo RGM1 žiurkės skrandžio epitelio ląsteles, IL-1β [41, 42]. Tominaga kt
parodė, kad Paruošiamasis RGM1 ląstelių su IL-1β 6 valandas slopinamas platinimu po 24 valandų, bet slopinantis poveikis buvo prarasta 48 valandų, [41]. Šių neatitikimų priežastys nėra aiškios. Jie gali atspindėti vidinius skirtumus tarp ląstelių linijų skirtumai aktyvinimo ir dalyvavimo paracrine augimo skatinimo būdų, rūšių kintamumas, specifinis tam tikrų augimo faktorių, arba pagrindinių skirtumų ląstelių linijų, gautų iš vėžiu (AGS) ar normalu biologijos poveikį audinių (RGM1). Tyrimai įrodantys slopina proliferaciją IL-1β buvo atlikti galingų augimą skatinančių stimulų (aukštas kraujo serume ar konkrečias augimo faktoriaus koncentraciją terpėje) buvimą, Tylėti dabartiniai tyrimai buvo atlikti be serumo ar 1% serumo žiniasklaidos , Tai įmanoma, kad keli signalo perdavimo kelių aktyvinama IL-1β turi skirtingas poveikis platinimu, dominuojanti poveikis priklauso nuo sudėtingų tarpusavio ryšių dirgiklių ir signalų kelius pagal skirtingas aplinkybes. "Pro-uždegiminių citokinų, tokių kaip IL-1β ir TNF-alfa aktyvuoti skirtingas signalo perdavimo kelių su skirtingų rezultatų ir skirtingos trukmės kursus skrandžio endokrininę ir pakauškaulio ląstelių [37, 38, 43-46]. Tolesni tyrimai yra vykdomi nagrinėjant konkrečius vaidmenis įvairių signalų kelius skrandžio epitelinių ląstelių esant skirtingoms sąlygoms.
Dabar yra stiprūs epidemiologiniai duomenys susiejimas H.pylori
su skrandžio karcinoma. Dėl kancerogeninės procesas atrodo apimti keletą žingsnių: H. pylori
indukuotų uždegimas progresuoja atrofija, žarnyno metaplazijos, displazija ir galiausiai vėžio [47]. Panašiai H. pylori
infekcija mongolų smiltpelėms lengvai sukelia skrandžio atrofija ir vėžys [6]. Nors skrandžio Kancerogeninis neabejotinai yra daugiaveiksnė procesas, įtraukiant patogeninių bakterijų ir priimančiosios veiksnius, įskaitant HLA statusą, dietos ir antioksidantų statuso [47, 48], aišku, kad padidėjo skrandžio epitelio proliferaciją, ypač kai santykinai padidėjo, palyginti su apoptozės, yra svarbus dalis keliu [49, 50]. Padidėjęs skrandžio epitelio proliferacija yra tipiškas H. pylori
infekcijos; tai akivaizdus visoje visos infekcijos ir likvidavimo infekcijos stadijos sumažina platinimu. Padidėjęs proliferacija yra svarbus žymuo virškinimo trakto pavojų didina adenokarcinoma [12]. Padidėjusio platinimo mechanizmas nėra visiškai aiškus. In vitro
tyrimai testavimo kultūrų H. pylori arba
sudedamųjų dalių davė prieštaringus rezultatus skirtingose ​​sistemose, su skirtingais tipų ląstelių ir bakterijų padermių. Tiesioginis stimuliacijos skrandžio epitelio proliferacija H. pylori
buvo pranešta kai kurie autoriai [14, 15], o arba neutralių poveikį [15] arba padidėjusio apoptozės ir sumažėjo proliferacija buvo pranešta kitiems [16-18]. Ventiliatorius ir kt
pranešė, kad kondicionieriai žiniasklaida iš abiejų H. pylori arba
mitogenu aktyvuota limfocitų tiesiogiai skatino AGS ląstelių proliferaciją [14], o tai rodo, kad uždegiminis atsakas gali būti iš dalies atsakingi už epitelio proliferacija priedui. IL-1β gamyba sustiprintas H. pylori
infekcijos ir tai citokinų yra laikomas svarbiausias pro-uždegiminio atsako į H. pylori
infekcijos reglamentą.
IL-1β yra gilus inhibitorius skrandžio rūgšties sekrecijos in vivo
[51] ir atskirose pakauškaulio ląstelių [37, 38]. Genetiniai polimorfizmas IL-1β genų klasterius sukelia padidėjęs transkripcijos veikla yra susijusi su padidėjusia rizika priešvėžiniai ir vėžiniai histologinių pokyčių H. pylori pervežimas infekcijos [21, 22]. Bendras hipotezė paaiškina šią pastabą buvo, kad tvirtesnis IL-1β gamyba, atsiradusius dėl H. pylori
infekcijos yra atsakingas už didesnį slopinimo rūgšties sekreciją, o tai savo ruožtu leidžia didesnį kolonizaciją rūgšties išskiriančių kūno gleivinės [24]. Tai didesnis kolonizacija provokuoja tolesnę uždegimą, kuris galiausiai veda į praradimą specializuota rūgšties sekrecijos epitelio (atrofija) ir toliau stiprina užburtą ciklą padidėjo uždegimas ir slopina rūgšties sekreciją [52]. Skrandžio atrofija žymiai nuteikia su vėžiu [3]. Manoma, kad atrofija kartu su tarpininkais, išleistas uždegimas, pavyzdžiui, deguonies laisvųjų radikalų ir azoto oksido, dietos, anti-oksidantas valstybės ir galbūt bakterijų užaugimo ir kartos nitrozaminų į achlorhydric skrandžio [53] avansu histologinius pokyčius, sukelia mutageneisis ir vairuoti progresavimą į vėžio.
An alternatyva, bet ne viena kitai, hipotezė yra ta, kad sustiprintas citokinų atsakas tiesiogiai pagerina epitelio ląstelių proliferaciją ir pati nuteikia vėžį, be to su įtaka rūgšties sekrecijos poveikio. Padidėjęs ląstelių apyvarta šioje hiperproliferaciniam atsakymo pati padaryti gleivinė labiau pažeidžiami mutageninį laisvųjų radikalų poveikio ir kitų toksiškų produktų, atsiradusių gamybos achlorhydric uždegimas, skrandžio.
Kitur virškinimo trakto, IL-1β buvo įrodyta, kad skatinti [ 3H] timidino ir padidinti ląstelių skaičių išauginti žmogaus storosios žarnos poepitelinį miofibroblastus, kurie, kaip manoma, svarbą gleivinės remodeling uždegimas [54]. Pro antiproliferacinės poveikis IL-1β virškinimo trakte nusipelno tolesnio tyrimo, atsižvelgiant į šio citokino atsižvelgiant į gleivinės uždegiminio atsako reglamentavimo svarbą.
Išvadas
dabartinio tyrimo rezultatai rodo, kad IL-1β ir GM-KSF gali tiesiogiai stimuliuoti skrandžio epitelio proliferaciją. Tai gali paaiškinti antiproliferacinės atsakymus į sąlygotų limfocitų žiniasklaidos įrodoma ventiliatorius ir kt
[14]. Glaudesnis epitelio proliferacija dėl IL-1β gali prisidėti prie padidėjusios rizikos skrandžio vėžio ir ikivėžinius pakitimus H. pylori
-infected asmenų, turinčių specifinių IL-1β aleliai aukštesnio lygio gamybos. IL-1β stimuliuoja proliferaciją per receptoriaus medijuojamo aktyvavimo tirozino kinazės keliu. Pasroviui signalizacijos apima ERK priklausoma ir -independent keliai.
Tolesni tyrimai bus būtina patikslinti susijusius mechanizmus ir IL-1β-stimuliacijos skrandžio epitelio proliferacija, taip pat duomenų Susijusios IL-1β genotipą, baltymų gamybą IL-1β ir epitelio proliferacija in vivo
Tai bus komplimentas dabartinį tyrimą ir toliau padidinti mūsų supratimą apie H. pylori
indukuotų skrandžio kancerogenezėje
santrumpų sąrašas
EGF lėšos:..
epidermio augimo faktoriaus
ERK: Rīga, tarpląstelinio signalo susiję kinazės
GM-CSF: Rīga, granulocitų-makrofagų kolonijas stimuliuojančio faktoriaus

IL: Rīga, interleukino
JNK: Rīga, c-Birželio NH 2-terminalas kinazės

Žemėlapis:
mitogenas aktyvinto proteino
MTT - 3- [4: Rīga, 5-dimetiltiazol-2-il] -2,5 difenilo tetrazolim bromidas

TBS: Rīga, trichloracto rūgštis
TGF-α.
keičia augimo faktoriaus alfa

pareiškimai
autorių originalios pateikti failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalių pateiktų failų vaizdų. 12876_2001_21_MOESM1_ESM.pdf Autorių originalus failas 1 pav 12876_2001_21_MOESM2_ESM.pdf Autorių originalaus failo 2 pav 12876_2001_21_MOESM3_ESM.pdf Autorių originalaus failo 3 pav 12876_2001_21_MOESM4_ESM.pdf Autorių originalus failas 4 pav 12876_2001_21_MOESM5_ESM.pdf Autorių originalaus failo 5 paveiksle konkuruojančių interesų
Nėra deklaruojamos.

• Klinikinis tyrimas derliaus nuėmimo limfmazgių anglies nanodalelių išplitusiu skrandžio vėžiu: būsimasis atsitiktinių imčių
• Poveikis obuolių sidro actas uždelsto skrandžio ištuštinimą pacientams, sergantiems 1 tipo cukriniu diabetu: bandomojo tyrimo