Aanhoudend lage expressie van hZip1 in mucinous carcinomen van de eierstok, colon, maag en lung

aanhoudende lage expressie van hZip1 in mucinous carcinomen van de eierstok, colon, maag en longen
Abstracte achtergrond
Mucineuze carcinomen uit verschillende organen zijn morfologisch vergelijkbaar en misschien gelijkenissen delen op moleculair en biochemische niveau dat hun pathogenese en de invloed van het management kan verlichten. De bij de pathogenese van mucinous carcinomen factoren onbekend; die waarschijnlijk een bijdrage aan het huidige gebrek aan biomarkers voor detectie. Omdat zink veranderingen betrokken zijn bij sommige kankers bijvoorbeeld prostaat; onderzochten we de mogelijkheid van een vergelijkbare rol in mucinous carcinomen.
Methods
Het doel van het huidige werk is om de expressie van hZip1 bestuderen door immunohistochemie in mucinous carcinomen in vergelijking met niet-neoplastische epitheel en conventionele carcinomen. Tissue microarray glaasjes met mucineus carcinomen van de eierstok (n
= 35), colon (n
= 51), maag (n
= 32) en de longen (n
= 21) werden gebruikt.
Resultaten
hZip1 toonden aanhoudend lage expressie in mucinous opzichte van ovariële sereuze carcinomen en normaal weefsel (P Restaurant < 0,05), colon adenocarcinoom en de normale slijmvlies (P Restaurant < 0,001), en maagdarmkanker en de normale epitheel (P Restaurant < 0,05). hZip1 toonde ook lage expressie in de longen mucinous carcinomen.
Conclusies
hZip1 consequent in mucinous carcinomen wordt verlaagd uit een verscheidenheid van organen. Ondanks het feit dat deze voorlopige bevindingen zijn waarschijnlijk niet van veel diagnostische betekenis te zijn, deze bevindingen suggereren dat hZip1 speelt een fundamentele rol in de carcinogenese van mucinous tumoren.
Sleutelwoorden
Zinc transporter hZip1 Mucineuze carcinomen Ovarium Colon Maag Lung Achtergrond
Klinische studies en experimenteel bewijs hebben vastgesteld dat zink stelselmatige afgenomen prostaat adenocarcinoom in vergelijking met normale prostaat. De Zip1 zink opname transporter, naast andere leden van het zink transporter genen verantwoordelijk voor de opname en accumulatie van zink uit de circulatie in de normale klieren tegen de concentratiegradiënt. De kwaadaardige prostaat klieren vertonen een neerwaartse regulatie van Zip1, gewoonlijk een alom tot expressie gebracht eiwit expressie die de opname en accumulatie van zink intracellulair [1-4] zal elimineren.
In tegenstelling tot de bovengenoemde rol van zink in de prostaat, de rol van hZip1 expressie in adenocarcinomen van andere organen niet eerder is uitvoerig onderzocht. Een dergelijke afdoende achtergrond bestaat voor epitheliale eierstokkanker bijvoorbeeld die wordt beschouwd als een van de minst begrepen van alle grote menselijke [5] maligniteiten. Identificatie van de belangrijkste initiële veranderingen bij eierstokkanker kan de ontwikkeling van betere methoden voor vroegtijdige diagnose, door de ontdekking van epitheliale eierstokkanker biomarkers te vergemakkelijken, en de ontwikkeling van meer optimale therapeutische benaderingen die belangrijkste moleculaire pathways richten [6].
Er is bewijs dat zink als een potentiële tumor suppressor middel en ZIP1
transporteur als een tumorsuppressorgen in sommige epitheliale eierstokkanker betrekking. Lightman et al. vertoonde een zeer significante afname van het zinkgehalte van kwaadaardige eierstokweefsel in vergelijking met hun niet-neoplastische tegenhangers [7]. Bae et al. bleek dat zink behandeling van OVCAR-3-cellen oefent tumor suppressor effecten met verhoogde apoptose [8]. De OVCAR-3 is een humaan ovariumcarcinoom cellijn die werd gevestigd door de maligne ascites van een patiënt met slecht gedifferentieerde "papillair adenocarcinoom" van de eierstok [9]. Een significante correlatie tussen een afname van bloed en hoofdhuid haren zinkgehalte met een verhoogde incidentie van eierstokkanker gemeld [7, 10]. Deze voorlopige gegevens maken het redelijk te verwachten dat er een verschil in het zinkgehalte tussen kwaadaardige en niet-kwaadaardige cellen die gerelateerd kan zijn aan verandering van het zink opname transporter; vermoedelijk Zip1.
In de huidige classificaties van ovariële tumoren, worden mucinous tumoren geclassificeerd als oppervlakte epitheliale tumoren. Primaire mucinous tumoren van de eierstok worden ingedeeld in benigne, borderline, of kwaadaardige categorieën, afhankelijk van hun histopathologische kenmerken. De neoplastische cellen kunnen van gastro-intestinale type endocervicale type of mengsels van beide celtypen die bestaan ​​in de seromucinous tumoren [11] zijn. Primaire invasieve mucinous carcinomen van de eierstok zeer ongebruikelijk goed voor slechts 3-10% van ovariële epitheliale tumoren en metastatische tumoren, meestal uit het maagdarmkanaal (GIT), komen vaker [12, 13]. Daarom is de mogelijkheid dat een slijmerige tumor in de eierstok metastatische plaats van primaire ovariumcarcinoom altijd moet nemen. Gemeenschappelijke primaire sites GIT, vooral de dikke darm [14], appendix [15, 16] en alvleesklier [17] en minder vaak maag- [18]. Endocervicale adenocarcinomen tijd tot tijd aan de eierstok [19].
Onze hypothese was dat mucinous carcinomen, ongeacht verschillende organen ter kan overeenkomsten in de moleculaire en biochemische niveau, die zich uiten in vergelijkbare morfologie bij verschillende anatomische plaatsen delen. De anatomische site zal uiteraard de chirurgische aanpak bepalen; echter kunnen de moleculaire en biochemische eigenschappen nuttiger de ontwikkeling en samenstelling van adjuvante behandelingsprotocollen zijn.
In dit verslag tonen wij voor het eerst een consistent patroon van lage expressie van het eiwit in hZip1 mucinous carcinomen van verschillende organen, zoals de eierstok, colon, maag en longen. De hierin gepresenteerde indirect bewijs ondersteunt de waarschijnlijkheid dat ZIP1
gen is een essentiële stap in de ontwikkeling van neoplasmen mucineuze.
Resultaten
Lage expressie van hZip1 in ovariële carcinomen mucinous versus hoge expressie in ovariële carcinomen sereuze
de gemiddelde leeftijd van de patiënten met ovariumcarcinoom was 51,4 (bereik van 22-81) jaar. Tissue microarray (TMA) bestaande uit 17 normaal eierstokweefsel, die allemaal sterk (3+) positief voor hZip1 waren. Zestig procent (21/35) van mucinous carcinomen waren negatief (0) of zwak (1+) positief hZip1 (fig. 1a). Daarentegen hZip1 expressie was matig (2+) sterk (3+) positief in 91% (138/152) van sereuze carcinomen (fig. 1b). De expressie van hZip1 was significant lager bij ovariële carcinomen mucinous tegenover sereus carcinoom (1,3 versus 2,6, P < 0,001) en normaal eierstokweefsel (P = 0,015) (figuur 1c.). Fig. 1 hZip1 expressie in mucineuze en niet- mucineus carcinomen van ovarium, colon, maag en longen. IHC analyse werd uitgevoerd op tissue microarray dia bestaat uit 35 mucinous ovariële carcinomen, 152 sereuze ovariale carcinomen, 51 colon carcinomen slijmerige, 129 conventionele colon adenocarcinoom, maag- 31 mucineus carcinomen, 4 conventionele gastrische adenocarcinomen en 21 pulmonaire mucineuze carcinomen. een vertegenwoordiger van de negatieve ovariële mucinous carcinoma in vergelijking tot sterk positief sereus carcinoom case voor hZip1 eiwit b. c Schematische weergave van de gemiddelde hZip1 IHC scores in de normale ovariële, mucinous en sereuze carcinomen. d Vertegenwoordiger zwak positieve colon mucinous carcinoma in vergelijking met sterk positief conventionele colon adenocarcinoom case voor hZip1 eiwit e. f Schematische weergave van de gemiddelde hZip1 IHC scores in normale colon epitheel, mucinous en conventionele colon adenocarcinomen. g Vertegenwoordiger negatieve maag mucinous carcinoma in vergelijking met h sterk positief conventionele adenocarcinoom case voor hZip1 eiwit. i Schematische weergave van de gemiddelde hZip1 IHC scores in de normale maagslijmvlies, mucinous en conventionele maag adenocarcinomen. j Vertegenwoordiger zwak en k sterke positieve pulmonale mucinous carcinoom gevallen voor hZip1 eiwit. ZIP1 eiwit werd gevisualiseerd met behulp van DAB met hematoxyline tegenkleuring. Pijlen toonde de negatieve /zwak positieve mucinous carcinoma cellen. * Er is statistisch significant verschil
Er was een statistisch significant lagere expressie van hZip1 in laaggradige sereuze vergelijking tot hoogwaardige sereuze carcinomen (P < 0,05). Ook was er een lagere expressie van hZip1 in laaggradige vergelijking tot hoogwaardige ovariële carcinomen mucineus (P = 0,6). Er was geen verband tussen klinische fase en hZip1 IHC score.
Lage expressie van hZip1 in mucinous carcinomen versus hoge expressie in conventionele adenocarcinoom van de colon
De gemiddelde leeftijd van de patiënten met colon carcinomen was 57,4 (bereik van 20-90 ) jaar. TMA bestaat uit 12 normaal colon weefsel, waarvan 83% (10/12) was matig (2+) sterk (3+) positief voor hZip1. Vijfenvijftig procent (28/51) van mucinous carcinomen waren negatief (0) of zwak (1+) positief hZip1 (fig. 1d). In tegenstelling hZip1 uitdrukking was matig (2+) sterk (3+) positief in 96% van de conventionele colon adenocarcinoom (124/129) gevallen (afb. 1e). De gemiddelde expressie van hZip1 was significant lager bij mucineus colon carcinomen (1,7) vergeleken met conventionele colon adenocarcinomen (2,8) en normale colon mucosa (2,2) (P
< 0,001). (Fig. 1F)
hZip1 expressie was verminderd als functie van toenemende graad in zowel mucineuze en niet- mucineuze tumoren van het colon zonder statistisch significant verschil. Er was geen verband tussen de klinische fase en hZip1 IHC scores.
Lage expressie van hZip1 in mucinous carcinomen versus hoge expressie in conventionele adenocarcinoom van de maag
De gemiddelde leeftijd van patiënten met maag- carcinomen was 56 (range van 22-78 ) jaar. TMA bestaat uit 5 normale gastrische epitheel allemaal sterk (3+) positief voor hZip1 waren. Tweeëntwintig procent (7/32) van mucinous carcinomen waren negatief (0) of zwak (1+) positief hZip1 (fig. 1G). In tegenstelling tot alle conventionele adenocarcinoom gevallen (n =
4) waren sterk (3+) positief voor hZip1 (afb. 1 uur). De expressie van hZip1 was significant lager in de maag mucinous carcinomen in vergelijking met conventionele adenocarcinoom (2,2 versus 3; P
<0,05). En de normale gastrische epitheel (P
= 0,027) (fig. 1i)
de gemiddelde score van hZip1 was significant lager in hoogwaardig mucinous carcinomen van de maag in vergelijking met hun lage rang tegenhangers (1,9 versus 2,7, p Restaurant < 0,01). Er was geen verband tussen klinische fase en hZip1 IHC score.
Lage expressie van hZip1 in mucinous longcarcinomen
De gemiddelde leeftijd van de patiënten met pulmonale mucinous carcinomen was 55,1 (bereik van 38-71) jaar. TMA bestaat uit 21 pulmonaire mucineuze carcinomen, waarvan 1, 3, 4 en 13 gevallen waren negatief (0), 1+, 2+ en 3+ positief voor hZip1 eiwitexpressie, respectievelijk met een gemiddelde score van 2,4. Normaal longweefsel epitheel in aangrenzende secties sterk (3+) drukt hZip1 (fig. 1j en k). Er was geen verband tussen klinische fase en hZip1 IHC scores.
Tabel 1 vat de resultaten van hZip1 eiwitexpressie in normaal weefsel, mucineuze en niet-mucineus carcinomen van ovarium, colon, maag en lung.Table 1 hZip1 expressie in normale , mucinous en non-mucinous carcinomen van de eierstok, colon, maag en longen
Diagnose
hZip1 IHC score
Totaal
Negatief
1 +
2+
3+
Ovarium
Normal
0
0
0
17 (100%)
17
Mucineuze carcinomen
15 (43%)
6 (17%)
3 (9%)
11 (31%)
35
sereuze carcinomen
1 (0,7%)
13 (9%)
32 (21%)
106 (70%)
152
Colon
Normal
0 Pagina 2 (17%)
6 (50%) verhuur 4 (33%)
12
Mucineuze carcinomen
3 (6%)
25 (49%)
7 ( 14%)
16 (31%)
51
Adenocarcinomen
1 (1%) verhuur 4 (3%)
15 (12%)
109 (84% )
129
Maag
Normal
0
0
0
5 (100%)
5
Mucineuze carcinomen
0
7 (22%)
12 (37%)
13 (41%)
32
Adenocarcinomen
0
0
0 verhuur 4 (100%)
4
Lung
Normal
0
0
0
21 (100%)
21
Mucineuze carcinomen
1 (5%)
3 (14%) verhuur 4 (19%)
13 (62%)
21
Discussie
Als algemene regel geldt, mucinous carcinomen vertegenwoordigen een kleine fractie van tumoren in verschillende organen met ongeveer 3-10% bij ovariële gezwellen, 7% van alle darmkankers, 1,5% van maag- carcinomen en zelden in de longen [12, 20]. Vergeleken met conventionele adenocarcinomen, mucineuze tumoren meestal geassocieerd met jonge leeftijd, gevorderde tumor stadium, en verschillende moleculaire patronen, zoals microsatelliet instabiliteit en mutaties van BRAF en KRAS
genen [21, 22].
Differentiatie van primaire ovariële mucinous carcinoom van uitzaaiingen van andere organen meestal blinde darm en dikke darm kan worden uitdagend [13, 23]. Dit onderscheid is cruciaal en klinische betekenis aangezien behandelingsprotocollen neiging te worden aangepast aan elk orgaan plaats. Bijvoorbeeld platina gebaseerde taxaan middelen worden gebruikt bij de behandeling van primaire ovariumcarcinoom in tegenstelling tot fluorouracil die de belangrijkste chemotherapeutisch middel voor metastatisch carcinoom in de eierstok afkomstig van de colorectum [24, 25].
Voor een tumor worden beschouwd mucinous carcinoma in plaats van een conventionele adenocarcinoom is afhankelijk van orgel ter plaatse en classificatiesystemen. Ovariale carcinomen mucinous vertonen opvallende hoeveelheden intracellulaire mucine in meer dan 90% van tumorcellen [11]. Daarentegen wordt colorectaal carcinoom mucineus gedefinieerd als ten minste 50% van het volume van de tumor bestaat uit extracellulair mucine [26]. Mucineuze carcinomen verschillen van conventionele en zegelring carcinomen in verschillende organen met specifieke moleculaire wijzigingen en klinische resultaten [25]. Gemeenschappelijke kenmerken tussen de eierstokken en colorectale mucinous carcinomen omvatten hogere prevalentie op jongere leeftijd en grotere grootte van de tumor bij presentatie. Daarentegen een groter deel van ovariële carcinomen mucinous tegenover sereuze carcinomen gediagnosticeerd voordelig stadium, met colorectale carcinomen mucineus lijken even waarschijnlijk als niet-slijmerige carcinomen presenteren voordelig fase [23, 27, 28].
meer dan 2 decennia geleden, Lightman et al. [7] gerapporteerd lage serum en tumorweefsel zink bij patiënten met "kwaadaardige ovariumtumoren". Echter in deze publicatie niet vermeld wat voor soort ovariumtumoren werden opgenomen in de studie en weinig klinische gegevens verstrekt [7]. Relatief recent, Bae et al. [8] gemeld dat behandeling van OVCAR-3 (maligne ovarium cellijn) en de neus (normale ovarium cellijn) met zink-citraat verbinding lood zink geïnduceerde accumulatie meer de voormalige cellijn dan de laatste. Dit resulteerde in een afname van het aantal cellen en de activiteit van M-aconitase in OVCAR-3 met een verhoogde apoptose. De auteurs concludeerden dat blootstelling aan hoge concentraties zink voorkomt de proliferatie van OVCAR-3 cellen [8]. De OVCAR-3 cellijn gebruikt door Bae et al. een menselijke epitheliale eierstokkanker cellijn die werd gevestigd door de maligne ascites van een patiënt met slecht gedifferentieerde "papillair adenocarcinoom" plaats mucinous ovariumcarcinoom [8, 9]. Meer mechanistische studies voorkeur met mucinous ovarium carcinoma cellijnen, bijvoorbeeld, RMUG-L, RMUG-S, MN-1, OMC-1 en MCB [29] wordt aanbevolen om de rol van zink en transporteurs verder in de pathogenese en minstens theoretisch, invloed beheer van mucinous carcinomen.
Wij en anderen zekerheid kon vaststellen dat zink niveaus en hZip1 transporter aanzienlijk zijn gedaald in de prostaat adenocarcinoom. De achtergrond en het bewijsmateriaal volledig en uitgebreid gepresenteerd in diverse reviews en rapporten [1-4]. Dit moedigde ons aan om het onderzoek uit te breiden in de uitdagende mucinous carcinomen in verschillende organen en de hZip1 expressie vergelijken mucinous versus niet mucinous carcinomen in een aantal van deze organen.
Onze nieuwe bevinding in dit rapport is dat hZip1 toonde consequent lage expressie in mucinous carcinomen van ovarium, colon, maag en longen zonder associatie tussen klinische fase en hZip1 scores één der mucineuze tumoren. Interessant is dat we geïdentificeerd lage expressie van hZip1 in mucinous carcinomen versus niet mucinous die in drie orgels we de vergelijking in, namelijk uitgevoerd; eierstok, colon en maag.
bijzonder hZip1 sterk tot expressie gebracht in alle gevallen normaal eierstokweefsel en was matig tot sterk positief in 91% van sereuze carcinomen. Daarentegen, 60% van de ovariale carcinomen mucinous waren negatief zwak positief voor hZip1 expressie. De tweede interessante bevinding is dat er een statistisch significant lagere expressie van hZip1 in lage rang ovariële sereus vergelijking met hoogwaardige sereus carcinoom. Hoewel het was niet statistisch significant, was nog hZip1 expressie lager in lage rang in vergelijking met hoogwaardige mucinous carcinomen. Deze waarnemingen kunnen aangeven dat de hogere rang ovariële tumoren verschillende mechanismen kunnen verwerven om meer zink accumuleren door het uitschakelen van de remmende mechanismen die naar beneden drukken de zink transporter hZIP1
gen, of misschien andere leden van de zink-transporter gen familie.
het scenario was hetzelfde in het colon en maag carcinomen met lage expressie van hZip1 in mucinous carcinoma versus hoge expressie in conventionele adenocarcinomen in die twee orgels. In de dikke darm en maag, 55% en 22% van mucinous carcinomen waren negatief zwak positief voor hZip1 resp. Daarentegen hZip1 expressie was matig tot sterk positief in 96% en 100% van de conventionele adenocarcinomen, respectievelijk in de dikke darm en maag. Het aantal conventionele gastrische adenocarcinomen in de TMA was klein (n = 45). In tegenstelling ovariële carcinomen, werd hZip1 expressie verminderd als functie van toenemende graad in zowel mucineuze en niet- mucineuze tumoren van de colon en maag. Deze observatie kan wijzen op verschillende mechanismen betrokken bij progressie van de tumor met betrekking tot regulering van zink concentratie die meer mechanistische studies nodig. In de long, identificeerden we ook een lage expressie van hZip1 bij pulmonale mucinous carcinomen. Jammer genoeg, en als gevolg van niet-beschikbaarheid van conventionele longadenocarcinoom TMA dia's, hebben we niet vergelijken met de expressie van hZip1 in mucinous en conventionele pulmonaire carcinomen.
Conclusies
hZip1 uitdrukking lijkt te zijn consistent afgenomen mucinous carcinomen uit een verscheidenheid organen ten opzichte van niet-neoplastische weefsels in deze organen. Echter hZip1 ook af als functie van toenemende graad in zowel mucineuze en niet- mucineuze tumoren in de dikke darm en maag. Deze bevindingen suggereren dat hZip1 speelt een fundamentele rol in de carcinogenese van sommige organen met een bijzonder geaccentueerd mucineuze tumoren. Bijkomende studies zijn nodig om de aard van deze rol nauwkeurig te definiëren. Echter, de praktijk is er weinig waarde in lage expressie van hZip1 voor differentiële diagnose van mucinous carcinomen.
Methods
Tissue microarrays (TMA) Leer Alle procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de relevante wet- en institutionele richtlijnen met instemming van institutionele review board. TMA slides gekocht van US Biomax (Rockville, MD) werden gebruikt in deze studie. Eierstok TMA dia bestaat uit 35, 152, 11 en 6 interpreteerbaar mucineus carcinoom, eierstok sereuze carcinomen, kanker aangrenzend normaal weefsel en normale (niet-maligne) weefsels, respectievelijk een weefselkern per case. Het is niet bekend of de mucinous carcinomen in de TMA van de ovariële tumoren van de eierstokken oorsprong of metastatische tumoren. Colon TMA slide bestaat uit 51, 129 en 12 interpreteerbaar mucinous carcinomen, conventionele adenocarcinomen en normaal weefsel, respectievelijk in één weefsel kern per geval. Maag TMA dia bestaat uit 32 interpreteerbare mucinous carcinomen, adenocarcinomen conventionele 4 en 3 gevallen van niet-maligne en normale 2 tumor aangrenzend normaal maagweefsel in gedupliceerde kernen per case. Lung TMA slide bestaat uit 21 interpreteerbare mucinous carcinomen in één weefsel kern per geval.
Immunohistochemie (IHC)
hZip1 eiwit expressie werd bepaald door IHC gebruik van een anti-hZip1 antilichaam door standaard protocol [1, 4]. In het kort werden de objectglaasjes TMA paraffine ontdaan in xyleen en gerehydrateerd door incubatie afnemende concentraties ethanol. Antigeenterugtrekking werd uitgevoerd door verhitting in 10 mM Tris-EDTA (10 mM Tris base, 1 mM EDTA ,, 0,05% Tween 20, pH9.0) buffer bij 98 ° C gedurende 20 min, IHC kleuring werd uitgevoerd door het incuberen schuift uitgevoerd 5% BlokHen (AvasLabs, Tigard) gevolgd door incubatie overnacht bij 4 ° C met hZip1 antilichaam in 5% BlokHen gevolgd door incubatie met mierikswortelperoxidase gemerkt geit-anti chicken IgY secundair antilichaam in een verdunning van 1: 200 (AvesLabs, Tigard , Oregon). Kleur werd ontwikkeld met DAB + chromogeen substraat en hematoxyline werd gebruikt als tegenkleuring.
Alle onderdelen werden onderzocht met een Olympus (BX53) microscoop. De foto's zijn bewerkt met cellSens Standard XV Image Processing-software (Olympus Corporation of the Americas, Center Valley, PA). IHC scoren werd uitgevoerd door een raad gecertificeerd anatomische patholoog (MMD). De verschijning van cytoplasmatische membraan en bijbehorende hZip1 immuno-positiviteit van de glandulaire epitheelcellen werd gebruikt voor het scoren zoals eerder beschreven [1, 4]. Tumor kleuring intensiteit werd semiquantitatively gescoord als negatief (geen vlekken), zwak (1+) (< 10%), matig (2+) (10-50%) en sterke (3+) (> 50%) positief afhankelijk van het percentage positieve cellen.
Statistische analyse
de gemiddelde scores van hZip1 expressie in verschillende categorieën werden geanalyseerd met behulp van de Student's t
-Test. De IHC scores werden beschouwd nominale om uit te vinden betekenis. P
≤ 0.05 werd beschouwd als significant
Afkortingen
IHC.
Immunohistochemie
TMA:
Tissue microarray


hZip1:
Human zink transporter lid 1
verklaringen
Dankwoord
Dit werk wordt gefinancierd door klinisch en translationeel onderzoek enhancement award van de afdeling Pathologie , Microbiologie en Immunologie aan MM Desouki.
concurrerende belangen Ondernemingen de auteurs verklaren dat ze geen concurrerende belangen.
auteurs bijdragen
MMD en vAN namen deel aan de studie design en interpretatie van gegevens. MMD, RBF en LC deelgenomen aan de oprichting van gegevens. MMD bedacht van de studie, uitgevoerd aan de analyse van de immunohistochemische markers en uitgevoerd statistische analyse. Alle auteurs opgesteld, gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• De co-geëvolueerd Helicobacter pylori en maagkanker: drie-eenheid van bacteriële virulentie, gastheer gevoeligheid en lifestyle
• Inactivatie van Bacillus cereus vegetatieve cellen door maagzuur en gal tijdens in vitro maagdarmpassage