Jatkuvasti alhaiset ilmentyminen hZip1 vuonna mucinous karsinoomat munasarja, paksusuoli, vatsan ja keuhkojen
tiivistelmä
tausta
mucinous karsinoomat eri elimet ovat morfologisesti samanlaisia ja saattaa samanlaisiksi molekyylitasolla ja biokemialliset tasoja, jotka voivat valaista heidän synnyssä ja vaikuttaa hallintaan. Tekijöitä mukana patogeneesiin mucinous karsinoomien ei vielä tunneta; joka on todennäköisesti yksi tekijä nykyisen niukasti biomarkkereiden havaitsemiseen. Koska sinkki muutoksia sekaantuneet joidenkin syöpien esim eturauhas-; arvioimme mahdollisen vastaavan roolin mucinous karsinoomia. Tool Menetelmät
tavoitteena nykyinen työ on tutkia ilmaus hZip1 immunohistokemiallisesti vuonna mucinous karsinoomia verrattuna ei-neoplastisia epiteelin ja tavanomaisten karsinoomat. Tissue microarray dioja sisältävä mucinous karsinoomat munasarja (n
= 35), paksusuoli (n
= 51), vatsa (n
= 32) ja keuhkojen (n
= 21) käytettiin.
tulokset
hZip1 osoittivat pysyviä heikkoa ilmentymistä mucinous verrattuna munasarjojen serous karsinoomat ja normaalin kudoksen (P
< 0,05), koolonadenokarsinoomasolulinjalla ja normaali limakalvo (P
< 0,001), ja mahalaukun adenokarsinoomaa ja normaali epiteelin (P
< 0,05). hZip1 osoitti myös heikkoa ilmentymistä keuhkojen mucinous karsinoomia.
Johtopäätökset
hZip1 johdonmukaisesti vähentynyt mucinous karsinoomien useista elimiä. Huolimatta siitä, että nämä alustavat havainnot eivät todennäköisesti paljon diagnostista merkitystä, nämä havainnot viittaavat siihen, että hZip1 on keskeinen rooli syövän synnyn ja mucinous kasvaimia.
Avainsanat
Sinkki transporter hZip1 mucinous karsinoomat munasarjan Colon Vatsa Lung Background
Kliiniset tutkimukset ja kokeellista näyttöä on todettu, että sinkki tasot ovat jatkuvasti vähentynyt eturauhasen adenokarsinooma verrattuna normaaliin eturauhasen rauhaset. Zip1 sinkki ottoa transporter, lisäksi muiden jäsenten sinkin kuljettajan geenejä, vastaa ottoa ja kertymistä sinkin verenkierrosta normaalissa rauhaset vastaan pitoisuus kaltevuus. Pahanlaatuisen eturauhasen rauhaset näytteille alas säätely Zip1, normaalisti ilmentyy kaikkialla proteiini, lauseke, joka poistaa omaksumista ja sinkin kertyminen solun sisään [1-4].
Toisin kuin edellä mainittu rooli sinkin eturauhasen, The rooli hZip1 ilmentymisen adenokarsinoomat muiden elinten ei ole aikaisemmin kattavasti tutkittu. Mitään tällaista ratkaisevia tausta olemassa epiteelin munasarjasyövän esimerkiksi jota pidetään yhtenä vähiten ymmärretty kaikkien tärkeimpien ihmisen maligniteettien [5]. Tunnistaminen tärkeimmistä alkuperäisen muutoksia munasarjasyöpä voivat helpottaa parempien menetelmien kehittämistä varhaisen diagnoosin kautta löytö epiteelin munasarjasyövän biomarkkereita, ja kehittämään enemmän optimaalisen hoitomenetelmät että tavoite avain molekyyli polkuja [6].
on näyttöä, joka liittyy sinkin mahdollisena tuumorisuppressori ainetta ja ZIP1
transporter kuin tuumorisuppressorigeenin joissakin munasarjan epiteelin syövät. Lightman et ai. osoittivat erittäin merkittävää laskua sinkkipitoisuus pahanlaatuinen munasarjakudoksen verrattuna niiden ei-neoplastisia kollegansa [7]. Bae et al. osoittivat, että sinkki hoito OVCAR-3 solujen kykenee tuumorisuppressoriproteiinia vaikutuksia voimistunutta apoptoosia [8]. OVCAR-3 on ihmisen munasarjan epiteelin syövän solulinja, joka perustettiin siitä maligni askites potilaan huonosti eriytetty "papillaarinen adenokarsinooma" munasarja [9]. Merkittävä korrelaatio pienentää veren ja päänahan-hiusten sinkin säätäminen käytettäessä lisääntymistä munasarjasyövän on raportoitu [7, 10]. Nämä alustavat tiedot tekevät kohtuullista odottaa, että on olemassa ero sinkki tasojen pahanlaatuisten ja ei-pahanlaatuisten solujen jotka voivat liittyä muutoksiin sinkin oton kuljettaja; oletettavasti Zip1.
Nykyisessä luokitukset munasarjan kasvaimet, mucinous kasvaimet luokitellaan pinta epiteelikasvaimet. Ensisijainen mucinous on kasvaimia munasarjoissa luokitellaan hyvänlaatuinen, rajatapaus tai pahanlaatuinen luokkiin riippuen niiden histopatologisia ominaisuuksia. Neoplastiset solut voivat olla maha-tyyppi, endocervical tyyppi, tai seoksia, sekä solutyyppejä, joita esiintyy seromucinous kasvaimissa [11]. Ensisijainen invasiivisia mucinous karsinoomat munasarja ovat erittäin harvinaisia, mikä on vain 3-10% kaikista munasarjojen epiteelin kasvaimissa, ja etäpesäkkeitä, yleisimmin ruoansulatuskanavassa (GIT), ovat yleisempiä [12, 13]. Siksi mahdollisuus, että mucinous kasvain munasarjassa on metastaattinen sijaan ensisijainen munasarjasyöpäpotilailla aina on tutkita. Yhteiset ensisijainen sivustot ovat GIT, erityisesti paksusuolessa [14], liite [15, 16], ja haima [17] ja harvemmin vatsaan [18]. Endoservikaalisia adenokarsinomia joskus levitä munasarja [19].
Oletimme, että mucinous karsinoomat, riippumatta eri elin sivuston, saattaa samanlaisiksi molekyylitasolla ja biokemiallisia tasoja, joita ilmenee samanlaisia morfologialtaan eri anatomisia sivustoja. Kyseisessä kehon ilmeisesti sanelee kirurginen lähestymistapa; kuitenkin, molekyyli- ja biokemiallinen ominaisuudet saattavat olla käyttökelpoisia kehitettäessä ja koostumus adjuvanttia hoitomenetelmistä.
Tässä raportissa, osoitamme ensimmäistä kertaa, vakiintunut alhainen ilmentymisen hZip1 proteiinin mucinous karsinoomia alkaen eri elimissä, kuten munasarjojen, paksusuolen, mahalaukun ja keuhko. Todisteet esitetään tässä epäsuorasti tukee todennäköisyydellä ZIP1
geeni on olennainen askel kehittämisessä mucinous kasvaimet.
Tulokset
Alhainen ilmentyminen hZip1 munasarjasyöpää mucinous karsinoomia vastaan voimakasta ilmentymistä munasarjojen serous karsinoomia
Keski-ikä potilailla, joilla munasarjakarsinoomat oli 51,4 (valikoima 22-81) vuotta. Tissue mikrosiru (TMA) koostuu 17 normaalin munasarjakudoksen, jotka kaikki olivat vahvasti (3+) positiivinen hZip1. Kuusikymmentä prosenttia (21/35) on mucinous karsinoomien olivat negatiivisia (0) heikko (1+) positiivinen hZip1 (Fig. 1a). Sen sijaan, hZip1 ilme oli kohtalaisen (2+) vahvasti (3+) positiivinen 91% (138/152) ja vakavien karsinoomien (Fig. 1b). Ilmentyminen hZip1 oli merkitsevästi pienempi munasarjasyövän mucinous karsinoomia verrattuna vakavasta karsinooma (1,3 vs. 2,6; P < 0,001) ja normaalin munasarjakudoksen (P = 0,015) (Kuva. 1 c). Kuva. 1 hZip1 ilmentyminen mucinous ja ei-mucinous karsinoomien munasarja-, paksusuoli-, vatsa- ja keuhkoissa. IHC analyysi tehtiin kudosten microarray dioja koostuu 35 munasarjojen mucinous karsinoomat, 152 munasarjojen vakavien karsinoomat, 51 paksusuolen mucinous karsinoomat, 129 tavanomainen paksusuolen adenokarsinooman, 31 mahalaukun mucinous karsinoomat, 4 tavanomainen mahalaukun adenokarsinooman ja 21 keuhkojen mucinous karsinoomat. Edustavan negatiivinen munasarjojen mucinous carcinoma verrattuna b voimakkaasti positiivinen serous karsinooma tapauksessa hZip1 proteiinia. c Kaavio keskimääräinen hZip1 IHC tulokset normaalissa munasarja-, mucinous ja serous karsinoomat. d edustaja heikko positiivinen paksusuolen mucinous karsinooma verrattuna e voimakkaasti positiivinen tavanomainen koolonadenokarsinoomasolulinjalla tapauksessa hZip1 proteiinia. f Kaavio keskimääräinen hZip1 IHC tulokset normaalissa paksusuolen epiteelin, mucinous ja tavanomainen paksusuolen adenokarsinooman. g Edustavia negatiivinen mahalaukun mucinous karsinooma verrattuna h voimakkaasti positiivinen tavanomainen mahalaukun adenokarsinooman tapauksessa hZip1 proteiinia. i kaavio, jossa keskimääräinen hZip1 IHC tulokset normaalissa mahan limakalvoa, mucinous ja tavanomainen mahalaukun adenokarsinooman. j edustaja heikko ja k vahva positiivinen keuhkojen mucinous karsinooma tapauksissa hZip1 proteiinia. ZIP1 proteiini visualisoitiin käyttäen DAB hematoksyliinillä vastavärinä. Nuolet osoitti negatiivista /heikko positiivinen mucinous syöpä soluja. * On tilastollisesti merkitsevä ero
oli tilastollisesti merkitsevästi vähemmän ilmentymistä hZip1 in huono laatu vakavasta verrattuna korkealuokkaisesta vakavasta karsinoomat (P < 0,05). Lisäksi oli alhaisempi ilmaus hZip1 in huono laatu verrattuna high grade munasarjojen mucinous karsinoomat (P = 0,6). Ei ollut yhdistyksen välillä kliinisessä vaiheessa ja hZip1 IHC tulokset.
Alhainen ilmentyminen hZip1 vuonna mucinous karsinoomia vastaan voimakasta ilmentymistä tavanomaisten adenokarsinooma
keski-ikä potilailla, joilla on paksusuolen karsinooman oli 57,4 (alue 20-90 ) vuotta. TMA kattaa 12 normaalin koolonkudoksessa joista 83% (10/12) oli kohtalaisen (2+) vahvasti (3+) positiivinen hZip1. Viisikymmentä-viisi prosenttia (28/51) on mucinous karsinoomien olivat negatiivisia (0) heikko (1+) positiivinen hZip1 (Fig. 1 d). Sen sijaan, hZip1 ilme oli kohtalaisen (2+) vahvasti (3+) positiivinen 96% tavanomaisten koolonadenokarsinoomasolulinjalla (124/129) tapauksessa (Fig. 1 e). Keskimääräinen ekspressio hZip1 oli merkitsevästi pienempi paksusuolen mucinous karsinoomissa (1,7) verrattuna paksusuolen tavanomaisen adenokarsinoomat (2,8) ja normaalin paksusuolen limakalvon (2,2) (P
< 0,001) (Fig. 1 f).
HZip1 ilmentyminen väheni funktiona kasvava luokka sekä mucinous ja ei-mucinous paksusuolen ei ollut tilastollisesti merkitsevää eroa. Ei ollut yhdistyksen välillä kliinisessä vaiheessa ja hZip1 IHC tulokset.
Alhainen ilmentyminen hZip1 vuonna mucinous karsinoomia vastaan voimakasta ilmentymistä tavanomaisten adenokarsinoomat mahalaukun
keski-ikä potilailla, joilla mahakarsinoomat oli 56 (välillä 22-78 ) vuotta. TMA koostuu 5 normaali mahalaukun epiteelin jotka kaikki olivat vahvasti (3+) positiivinen hZip1. Kaksikymmentäkaksi prosenttia (7/32) ja mucinous karsinoomien olivat negatiivisia (0) heikko (1+) positiivinen hZip1 (Fig. 1 g). Sen sijaan kaikki tavanomaiset adenokarsinooma tapauksissa (n
= 4) olivat voimakkaasti (3+) positiivinen hZip1 (Fig. 1 h). Ilmentyminen hZip1 oli merkitsevästi pienempi maha- mucinous karsinoomia verrattuna perinteisiin mahalaukun adenokarsinooman (2,2 vs. 3; P
< 0,05) ja normaali mahalaukun epiteelin (P
= 0,027) (Kuva. 1 i).
keskimääräinen pisteet hZip1 oli merkitsevästi pienempi korkealaatuista mucinous karsinoomat mahan verrattuna niiden huono laatu kollegansa (1,9 vs. 2,7, p
< 0,01). Ei ollut yhdistyksen välillä kliinisessä vaiheessa ja hZip1 IHC tulokset.
Alhainen ilmentyminen hZip1 vuonna mucinous keuhko-
keski-ikä potilailla, joilla on keuhkojen mucinous karsinoomien oli 55,1 (valikoima 38-71) vuotta. TMA koostuu 21 keuhkojen mucinous karsinoomat, joista 1, 3, 4 ja 13 tapausta olivat negatiivisia (0), 1+, 2+, ja 3+ positiivinen hZip1 proteiinin ilmentymisen, vastaavasti keskiarvopistemäärällä 2.4. Normaali keuhko epiteelin viereisissä kohdissa vahvasti (3+) ilmaisee hZip1 (Fig. 1 j ja k). Ei ollut yhdistyksen välillä kliinisessä vaiheessa ja hZip1 IHC tulokset.
Taulukossa 1 esitetään yhteenveto tuloksista hZip1 proteiinin ilmentymisen normaalissa kudoksessa, mucinous ja ei-mucinous karsinoomien munasarja-, paksusuoli-, vatsa- ja lung.Table 1 hZip1 ilmentymisen normaalissa , mucinous ja ei-mucinous karsinoomien munasarja-, paksusuoli-, vatsa- ja keuhkojen
Diagnosis
hZip1 IHC pisteet
Yhteensä
Negatiivinen
1 +
2+
3+
munasarjan
Normaali
0
0
0
17 (100%)
17
mucinous karsinoomat
15 (43%) B-6 (17%) B-3 (9%)
11 (31%) B 35
seroosit karsinoomat
1 (0,7%)
13 (9%)
32 (21%) B 106 (70%) B 152
Colon
Normaali
0
2 (17%) B-6 (50%) B-4 (33%) B 12
mucinous karsinoomat
3 (6%)
25 (49%)
7 ( 14%) B 16 (31%) B 51
adenokarsinoomat
1 (1%) B 4 (3%)
15 (12%) B 109 (84% ) B 129
Vatsa
Normaali
0
0
0
5 (100%) B 5
mucinous karsinoomat
0
7 (22%) B 12 (37%) B 13 (41%) B 32
adenokarsinooman
0
0
0
4 (100%)
4
Lung
Normaali
0
0
0
21 (100%) B 21
mucinous karsinoomat
1 (5%) B 3 (14%) B-4 (19%) B 13 (62%) B 21
keskustelu
pääsääntöisesti, mucinous karsinoomat edustavat pientä osaa kasvaimien eri elimissä noin 3-10% joukossa munasarjojen kasvaimet, 7% kaikista paksusuolen ja peräsuolen syöpiä, 1,5% mahakarsinoomat, ja hyvin harvoin keuhkoissa [12, 20]. Verrattuna perinteisiin adenokarsinoomat, mucinous kasvaimet yleensä liittyy kanssa nuorena, kehittynyt kasvain vaiheessa ja erillisten molekyylien malleja, kuten mikrosatelliittien epävakaus ja mutaatioita BRAF ja KRAS
geenejä [21, 22].
Eriyttäminen primääri munasarjojen mucinous karsinooma peräisin etäpesäkkeitä muiden elinten enimmäkseen liite ja colorectum voidaan haastavaa [13, 23]. Tämä erottelu on keskeinen ja kliinistä merkitystä sillä hoitomenetelmistä yleensä räätälöidään kunkin elimen päällä. Esimerkiksi platina-pohjainen taksaani aineita käytetään hoidettaessa ensisijainen munasarjakarsinoomat toisin fluorourasiili, joka on tärkein kemoterapeuttinen aine, jota käytetään metastaattisen munasarja peräisin colorectum [24, 25].
Varten kasvaimen pitää mucinous syöpä sijaan perinteisen adenokarsinooma riippuu elin päällä ja luokittelujärjestelmiä. Munasarjojen mucinous karsinoomat osoittavat näkyvään määriä solunsisäistä musiinia yli 90% tuumorisolujen [11]. Sen sijaan, peräsuolen mucinous karsinooma on määritelty, jos vähintään 50% kasvaimen tilavuuden koostuu ekstrasellulaarisen musiinia [26]. Mucinous karsinoomat ovat eroavat perinteisistä ja sinettisormus karsinoomia eri elimissä erityisiä molekyyli muutoksiin ja kliinisiin tuloksiin [25]. Yhteiset ominaisuudet välillä munasarjojen ja peräsuolen mucinous karsinoomat sisältää muita yleisemmin klo nuorempina ja suurempi kasvaimen kokoisista esitys. Sen sijaan suurempi osuus munasarjojen mucinous karsinoomien verrattuna vakavien karsinoomat diagnosoidaan alhaisella vaiheessa, kun peräsuolen mucinous karsinoomat näyttävät yhtä todennäköisesti kuin ei-mucinous karsinoomien esittää pienellä vaiheessa [23, 27, 28].
yli 2 vuotta sitten, Lightman et ai. [7] ilmoitetaan alhainen seerumin ja kasvainkudoksen sinkin, jos potilaalla on "pahanlaatuisia munasarjojen kasvaimia". Kuitenkin tässä julkaisussa ei mainita, millaisia munasarjojen kasvaimia mukana tutkimuksessa eikä paljon kliinisiä tietoja toimitettiin [7]. Suhteellisen viime aikoina, Bae et al. [8] kertoi, että hoito OVCAR-3 (pahanlaatuiset munasarjojen solulinja) ja NOSE (normaali munasarjan solulinja) sinkki-sitraatti yhdiste lukemiin aiheuttama sinkin kertyminen lisää entisessä solulinjassa kuin jälkimmäinen. Tämä johti lasku solujen määrä ja aktiivisuus M-aconitase in OVCAR-3 voimistunutta apoptoosia. Tekijät päättelivät, että altistuminen korkeille sinkki estää leviämisen OVCAR-3-soluissa [8]. OVCAR-3 solulinja käyttämä Bae et al. on ihmisen munasarjan epiteelin syövän solulinja, joka on perustettu päässä pahanlaatuiset vesivatsat potilaan huonosti eriytetty "papillaarinen adenokarsinooma" eikä mucinous munasarjasyöpä [8, 9]. Enemmän mekaaniset tutkimukset mieluiten mucinous munasarjasyöpäsolulinjoihin mm, RMUG-L, RMUG-S, MN-1, OMC-1 ja MCAS [29] suositellaan tutkimaan edelleen rooli sinkki ja kuljettajat synnyssä ja ainakin teoriassa, vaikutus hallinta mucinous karsinoomien.
Me ja muut toteaa kiistattomasti sinkkitasot ja hZip1 kuljettaja ovat merkittävästi vähentyneet eturauhasen adenokarsinooman. Taustalla ja tukevat todisteet ovat täysin ja laajasti esitetty useissa ja raporttien [1-4]. Tämä kannusti meitä laajentamaan tutkimuksen haastavassa mucinous karsinoomien eri elimissä ja verrata hZip1 ilmaisun mucinous vs. ei mucinous karsinoomat joissakin näissä elimissä.
Meidän uusi havainto tässä raportissa on, että hZip1 osoittivat johdonmukaisesti heikkoa ilmentymistä mucinous karsinoomat munasarja-, paksusuoli-, vatsa- ja keuhkojen ilman yhdistyksen välillä kliinisessä vaiheessa ja hZip1 tulokset missään mucinous kasvaimia. Mielenkiintoista tunnistimme alhainen ilmentyminen hZip1 vuonna mucinous karsinoomia vs. ei mucinous olevista kolmesta elimissä suoritimme vertailusta, nimittäin; munasarjojen, paksusuolen ja vatsan.
Erityisesti hZip1 ilmentyy voimakkaasti kaikissa tapauksissa normaalin munasarjakudoksen ja oli kohtalaisen vahvasti positiiviseen 91% vakavasta karsinoomien. Sen sijaan 60% munasarjojen mucinous karsinoomien olivat negatiivisia heikko positiivinen hZip1 ilmaisua. Toinen mielenkiintoinen havainto on se, että siellä oli tilastollisesti merkitsevästi vähemmän ilmentymistä hZip1 in huono laatu munasarjojen vakavasta verrattuna korkealaatuista vakavasta syöpä. Vaikka se ei ollut tilastollisesti merkitsevä, silti hZip1 ilme oli pienempi huono laatu verrattuna high grade mucinous karsinoomat. Nämä havainnot saattavat osoittaa, että ylempään palkkaluokkaan munasarjojen kasvaimet voivat hankkia erilaisia mekanismeja kerääntyä enemmän sinkkiä katkaisemalla estävää mekanismeja alas ilmentävät sinkki kuljettaja hZIP1
geeni, tai ehkä muut jäsenet sinkin kuljetuksesta geeniperheen.
skenaario oli sama paksusuolen ja mahakarsinoomat alhainen ilmentyminen hZip1 vuonna mucinous carcinoma versus voimakasta ilmentymistä tavanomaisten adenokarsinooman näissä kahdessa elimissä. Paksusuolen ja mahalaukun, 55% ja 22% mucinous karsinoomien olivat negatiivisia heikosti positiivinen hZip1, vastaavasti. Sen sijaan, hZip1 ilme oli kohtalaisen vahvasti positiivinen 96% ja 100% tavanomaisten adenokarsinoomia vastaavasti paksusuolessa ja vatsaan. Määrä tavanomaisia mahalaukun adenokarsinooman sisältyvät TMA oli pieni (n = 45). Toisin munasarjojen karsinoomat, hZip1 ilmentyminen väheni funktiona kasvava luokka sekä mucinous ja ei-mucinous paksusuolen ja mahalaukun. Tämä havainto voivat johtaa eri mekanismeja syövän etenemisen suhteen sääntelyn sinkkipitoisuus jotka tarvitsevat enemmän mekaaniset tutkimukset. Keuhkoissa, myös tunnistettu alhainen ilmentyminen hZip1 keuhkojen mucinous karsinoomia. Valitettavasti ja koska YK-saatavuuden tavanomaisten keuhkoadenokarsinooma TMA dioja, emme verrata ilmaus hZip1 vuonna mucinous ja perinteisen keuhkojen karsinoomat.
Johtopäätökset
hZip1 ilmentyminen näyttää olevan jatkuvasti vähentynyt mucinous karsinoomien useista elinten suhteessa ei-neoplastisten kudosten näissä elimissä. Kuitenkin hZip1 on myös vähentynyt funktiona kasvava luokka sekä mucinous ja ei-mucinous kasvaimia paksusuolen ja mahalaukun. Nämä havainnot viittaavat siihen, että hZip1 on keskeinen rooli syövän synnyn ja joissakin elimissä, jotka korostuu erityisesti mucinous kasvaimia. Lisätutkimukset ovat tarpeen tarkasti määritellä tämän tehtävän. Kuitenkin käytännössä, ei juurikaan arvoa alhainen ilmentyminen hZip1 varten erotusdiagnoosia mucinous karsinoomien. Tool Menetelmät
kudossiruina (TMA) B Kaikki toimenpiteet suoritettiin soveltuvien lakien ja vakiintuneiden ohjeiden hyväksynnällä Institutional Review board. TMA dioja ostettiin USA Biomax (Rockville, MD) käytettiin tässä tutkimuksessa. Munasarja TMA dia koostuu 35, 152, 11 ja 6 tulkittavia mucinous karsinoomat, munasarja- vakavien karsinoomat, syöpä viereiseen normaaliin kudokseen ja normaali (ei-pahanlaatuinen) kudoksiin, vastaavasti yhdessä kudoksessa ytimen per tapaus. Ei tiedetä, jos mucinous karsinoomien sisältyvät TMA on munasarjojen kasvaimia ovat ensisijaisen munasarjojen alkuperää tai etäpesäkkeitä. Colon TMA dia koostuu 51, 129 ja 12 tulkittavia mucinous karsinoomat, tavanomaiset adenokarsinoomien ja normaalia kudosta, vastaavasti yhdessä kudoksessa ytimen per tapaus. Vatsa TMA dia koostuu 32 tulkittavia mucinous karsinoomat, 4 tavanomaisia adenokarsinoomien ja 3 jättämisten pahanlaatuisten normaalia ja 2 kasvaimen vieressä normaali mahan kudoksen kahdennettu ydintä kohden tapauksessa. Lung TMA dia koostuu 21 tulkittavissa mucinous karsinoomien yhdessä kudoksessa ytimen per tapaus.
Immunohistokemia (IHC) B hZip1 proteiinin ilmentyminen määritettiin IHC käyttäen anti-hZip1 vasta-standardin protokolla [1, 4]. Lyhyesti, TMA dioja poistettiin parafiini ksyleenillä ja rehydratoitiin inkuboimalla pitoisuuksien alentamista etanolia. Antigeeni haku suoritettiin kuumentamalla 10 mM Tris-EDTA: ta (10 mM Tris-emästä, 1 mM EDTA ,, 0,05% tween 20, pH9.0) puskurissa 98 ° C: ssa 20 minuutin ajan, IHC värjäys suoritettiin inkuboimalla liukuu 5% BlokHen (AvasLabs, Tigard, Oregon), jota seurasi inkubointi yön yli 4 ° C: ssa hZip1 vasta-aineen 5%: BlokHen seurasi inkubointi piparjuuren peroksidaasilla leimattua vuohen anti kanan IgY sekundaarisen vasta-ainetta laimennoksena 1: 200 (AvesLabs, Tigard , Oregon). Väri kehitettiin DAB + kromogeenisubstraattia ja hematoksyliinillä käytettiin vastavärinä.
Kaikki leikkeet tutkittiin Olympus (BX53) mikroskoopilla. Kuvat tulokset käsiteltiin cellSens Standard XV kuvankäsittely ohjelmisto (Olympus of the Americas, Center Valley, PA). IHC pisteytys suoritettiin hallituksen sertifioitu anatominen patologi (MMD). Ulkonäkö ja sytoplasman liittyvät hZip1 immuno-positiivisuus Rauhasten epiteelisolujen käytettiin pisteytys kuten aiemmin on kuvattu [1, 4]. Kasvaimen värjäytymisen intensiteetti oli semikvantitatiivisesti pisteytettiin negatiivinen (ei värjäystä), heikko (1+) (< 10%), kohtalainen (2 +) (10-50%) ja vahva (3+) (> 50%) positiivinen riippuen on positiivisten solujen prosenttiosuuden.
tilastollinen analyysi
keskiarvot hZip1 ilmaisun eri luokkiin analysoitiin Studentin t
-testi. IHC tulokset katsottiin nimellinen selvittää merkitys. P
≤ 0,05 pidettiin merkittävänä.
Lyhenteet
IHC:
immunohistokemia
TMA:
Tissue mikrosirujen
hZip1:
Human sinkki transporter jäsen 1
julistukset
Kiitokset
työtä rahoittaa kliinisen ja translaatiotutkimuksen parannuksen palkinnon Patologian osasto , mikrobiologian ja immunologian MM Desouki.
kilpailevat edut
kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole kilpailevia intressejä.
Tekijät osuudet
MMD ja OF tutkimukseen osallistui suunnitteluun ja tietojen tulkinta. MMD, RBF ja LC osallistui tietojen luomiseen. MMD suunniteltu Tutkimuksen suoritti analyysin immunohistokemiallisella merkkejä ja suorittaa tilastollinen analyysi. Kaikki kirjoittajat laadittu, lue ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.