PLoS ONE: Mangiferin sumažina skrandžio opos Išemija /reperfuzija Rats: dalyvavimas PPAR-gama, NF-κB ir Nrf2 /HO-1 signalinė kelius

Anotacija

Mangiferin (MF), A iš Mangifer indica xanthonoid, buvo įrodyta, kad sekreciją ir antioksidacinėmis gastritas poveikį nuo įvairių skrandžio opa modelius; Tačiau, jo molekulinė mechanizmas anksčiau nebuvo išaiškintas. Todėl, šio tyrimo tikslas buvo išbandyti savo moduliacinį poveikį keletą signalo perdavimo kelių naudojant išemija /reperfuzinės modelį pirmą kartą. Gyvūnai buvo gydomi MF, omeprazolio (OMP), ir transporto priemonės. Mechanistinis tyrimai parodė, kad MF tarpininkaujant jos gastritas poveikį iš dalies per paskatinti iš Nrf2, HO-1 ir PPAR-gama išraišką kartu su downregulating kad NF-κB. Keista, kad MF poveikis, ypač didelėmis dozėmis, viršijo tarpininkaujant OMP išskyrus Nrf2. Molekulinės rezultatai buvo atsispindi nuo biomarkeriai išmatuotų, kur antioksidantas poveikis MF buvo pasireiškia didinant bendrą antioksidacinį pajėgumą ir glutationo, be to, normalizuoti malondialdehido lygį. Be to, MF sumažėjo I /R sukeltos azoto oksido pakilimas, poveikį, kad buvo geriau nei OMP. Serume, MF, dozės priklausomai nuo, sustiprintos endotelio azoto oksido sintazę, o sumažino indukuojamą isoformai. Dėl priešuždegiminio poveikio MF, ji sumažino serumo lygį IL-1β ir SE-selektino, poveikį, kuris rodė ant audinių lygio myeloperoxidase, neutrofilų infiltracija žymeklį. Be to, MF turėjo žinutę antiapoptotic charakterį pasireiškiantis kėlimo Bcl-2 lygį ir sumažinti, kad iš kaspazės-3 susijusios su vaisto doze tvarka. Kaip Apibendrinant, užsiminė, gastritas mechanizmai MF tarpininkaujant, iš dalies, moduliavimo oksidacinio streso, uždegimas ir apoptozės galbūt per Nrf2 /HO-1, PPAR γ /NF-κB signaliniai keliai.

citavimo : Mahmoudas-Awny, M, ATTIA AS Abd-Ellah MF El-Abhar SS (2015) Mangiferin sumažina skrandžio opos išemijos /reperfuzija Rats: dalyvavimas PPAR-gama, NF-κB ir Nrf2 /HO-1 signalinė kelius. PLoS ONE 10 (7): e0132497. Doi: 10,1371 /journal.pone.0132497

redaktorius: Ashrafą B. Abdel-Naim, Farmacijos fakultetas Ain Shams universitetas, Egiptas

Įstojo: Kovo 18, 2015 m Priėmė: Gegužės 15, 2015 m Paskelbta: Lie 21, 2015

Visos teisės saugomos: © 2015 Mahmoudas-Awny et al., Tai atviros prieigos straipsnis platinama pagal Creative Commons Attribution licencija, kuri leidžia nevaržomai naudotis, paskirstymo ir dauginimąsi bet kokioje laikmenoje sąlygomis, su sąlyga, kad pirmasis autorius ir šaltinis įskaitomos

Duomenų Prieinamumas: Visi susiję duomenys yra per popieriaus

finansavimas:.. autoriai neturi paramą ar finansavimą pranešti

konkuruojančių interesų. autoriai pareiškė, kad nėra konkuruojantys interesai egzistuoja

Įvadas

per skrandžio opa blogybė klestėjimas upshots susirinko į nelaimės tarp destruktyvus ir apsauginių renginių pusiausvyrą. Oksidacinis stresas yra pagrindinis veiksnys, kad gimdo skrandžio opa ir rezultatus laisvųjų radikalų (FRS) perprodukcijos [1]. Skrandžio išemijos /reperfuzijos formulė (I /R) archetipas imituoja stresas-sukeltas skrandžio opa, tokiu atveju, padidėjęs FRs, azoto oksido (NO), leukocitų adhezijos molekulė "E-selektino" [2], neutrofilų infiltracija [3], ir redokso disbalansas [4] vaidina svarbų vaidmenį savo patogenezėje. Be to, atominės faktoriaus kapa B (NF-κB), redokso jautrus transkripcijos faktorius, turi lemiamą vaidmenį I /R traumos [5]. Ji reguliuoja kelių genų, susijusių su uždegimu ir ląstelių traumos, pavyzdžiui, interleukino (IL) -1β, -6, korinio adhezijos molekulių ir indukuojamo azoto oksido sintazės (iAOS) išraiška. Kita vertus, keletas veiksnių, tarpininkauja jų gastroprotection nuo oksidacinio sužalojimų sumažinti uždegiminį atsaką, jie apima peroksisomų proliferatoriaus aktyvuojamų receptorių (PPAR) -γ [6, 7] ir heamoxygenase-1 (HO-1) [8]. Pastaroji yra sužadinamoji izoformos HO, kad reaguoja į įtempiai, pavyzdžiui, oksidacinio streso ir jis lieka plačiai vertinama kaip apsauginis mechanizmas nuo oksidacinio audinių traumos [9].

Vienas iš transkripcijos reguliatoriai HO-1 yra branduolinė faktorius-E2 susijusių faktorius-2 (Nrf2) [9], kuris yra lokalizuotas citoplazmą esant normalioms sąlygoms ir sąveikauja su Keap1 (molekulinė jutiklis cisteino-daug baltymų KELCH-kaip ECH, jungiančių baltymų 1) turi būti greitai skaldo pagal ubikvitino-proteasomos kelias [10, 11]. Priešingai, pagal oksidacinio streso sąlygomis, Keap1 oksiduojasi ir Nrf2 ubiquitination nuleista [11], išlaisvinant, todėl Nrf2 iš Keap1. Nrf2 tada pernešamas į branduolį pririšti su antioksidanto reagavimo elementas taikinio geno promotoriaus [12, 13] kelia tiesioginį transactivation iš koduojančių genų ekspresiją. Šie genai yra daug fermentų antioksidantas ir detoksikuojanti genus, pavyzdžiui, glutationo (GSH) peroksidazės /reduktazės Ho-1 ir GSH S-transferazės [14].

Mangiferin (MF) bei natūraliai glucosylxanthone, turi gastroprotektinio poveikis , per
jo sekreciją ir antioksidantų veiklą, patikrintam įvairių gyvūnų modeliais skrandžio opų [15], bet ne I /R modelis, kuris yra dabartinio darbo tikslas. MF buvo pranešta, kad tarpininkauti savo antioksidacinį aktyvumą įvairių lygių oksidacinio seka. Ji generuoja MF fenoksi radikalus ir jungiasi prie metalo jonų (Fe ^{2 + /3 +) į stabilios MF-geležies komplekso forma, kuri neleidžia hidroksilo kartos (OH) radikalai ir /arba okso-ferryl grupės ir scavenges lipidų peroksi /alkoksi radikalų, taip, išlaikyti ląstelių oksidacijos-antioksidantas pusiausvyrą [16]. Nepaisant išsamių korinio reakcijų aprašytų Tačiau molekulinės signalizacijos keliai nebuvo sprendžiamos anksčiau.}

Dėl molekulinio lygio, šis tikslas buvo įvertinti galimą dalyvavimą Nrf2 /HO-1, PPAR, ir NF -κB signalizacijos kelius į gastritas poveikio MF, be kitų biologiniai žymenys būtų apibrėžti galimus gastritas mechanizmus naudojant hipoksijos /reoxygenation modelį.

medžiagos ir vartojimo metodas

Gyvūnai

Vyras Wistar žiurkių, sveriančios 180-220 g (tyrimų institutas oftalmologijos, Giza, Egiptas) buvo laikomi per 12 h šviesos /tamsiai ciklai, pastovus aplinkos sąlygų ir buvo išlaikyta tinkama mityba čiau ir vandens, iki soties
. Prieš eksperimentuoti (24 val) visi gyvūnai buvo laikomi atskirai pločio tinklelio dugno narveliai ir pasninkavo. Gyvūnai buvo tvarkomos pagal gaires dėl gyvūnų priežiūrai ir naudojimui komiteto Farmacijos fakulteto Kairo universiteto, Kairas, Egiptas patvirtintų (leidimo numeris: PT 575). Visi chirurginiai procesai buvo atliekami pagal tiopentalio anestezijos ir buvo dedamos visos pastangos, kad kuo mažiau kentėtų.

Vaistai

Mangiferin [MF] buvo įsigytas iš Sigma-Aldrich Chemical Company (St Louis, MO, JAV) ir omeprazolas [OMP] iš Chemo SA (Luganas, Šveicarija). Visi kiti chemikalai ir naudojami reagentai buvo analiziškai gryni. MF ir OMP ištirpinti druskos tirpalu, kurį reikia sušvirkšti į pilvaplėvės ertmę.

Įsiurbimo skrandžio gleivinės išemijos /reperfuzijos (I /R), ir gydymo

I /R modelis buvo atlikta pagal anksčiau metodo aprašyta Kotani et al. [17] su tam tikrais pakeitimais. Trumpai, pagal Thiopental anestezijos (50 mg /kg kūno svorio, i.p), žiurkės gliuteninė arterijų buvo užkimštas 30 min., Po to, kai kurie reperfuzijos buvo leista 72 val pagal declamping arterijas. Žiurkės buvo skirta į 5 grupes (n = 7-9); gyvūnai, pirmosios grupės gavo fiziologiniu tirpalu ir celiakija arterija buvo tvarkomi be suveržimo tarnauti kaip nevykusios valdomas kontroline grupe. Žiurkių šių grupių buvo atliktas I /R; neapdorotas (antrasis) grupė, buvo suleistas druskos tirpalas ir buvo pažymėta kaip teigiama kontrolė (I /R), o kiti 3 grupės buvo gydomi, su MF (10 mg /kg kūno svorio; MF _{10; trečios grupės), MF ( 20 mg /kg kūno svorio; MF 20; ketvirta grupė), ir OMP (20 mg /kg kūno svorio; OMP 20; penktoji grupė). Visi gydymas buvo padaryta 30 min. prieš operaciją ir 3 dienas po reperfuzijos.}

histopatologiniai tyrimai

Skrandžio nuo trejus reprezentatyvius gyvūnų kiekvienoje grupėje, iš karto buvo panardintas į 10% formalino ir druskos, įterptųjų parafinu ir 5μm skyriuose buvo parengta, tamsintas hematoksilinu ir eozinu (H & E), ir tiriami mikroskopiškai

biocheminiai tyrimai

Tuo reperfuzijos metu ir pagal giliai eterio anesteziją pabaigoje, kraujo buvo surinkta iš. jungo venos paruošti serumai, tada gyvūnai buvo numarinti ir skrandžio buvo pašalintų, atidarytas išilgai didesnio kreivumo, ir skalaujami ledinio fiziologiniu tirpalu. Iš bendrojo gleivinės pažeidimas (opa indeksas) apimtis buvo įvertintas ir išreikštas kaip opos ilgių per skrandį sumą mm [18]. Trumpai tariant, apšviesta didintuvai (3x) buvo naudojamas matuoti ilgo pažeidimų (mm) liaukinio pilvo dalyje ilgį, o petechea pažeidimai buvo skaičiuojami ir kiekvieno penkerių pažeidimai atstovavo 1 mm opa.

Apie 50 mg skrandžio gleivinės buvo panardintas naktį RNR vėliau tirpalas, laikomas -80 ° C iki kiekybinė realaus laiko PGR (KRL-PGR) kiekybinio. Likusi gleivinė buvo atsisakyta išjungti ir homogenizuoti ledinio tirpalo (MLS-120, Lenkija), naudojant maksimalų greitį 1 min. Homogenatas centrifuguojamas 5000 apsisukimų per minutę 5 min, esant 4 ° C, o atsiradusios supernatantų, buvo laikomi aliquotes ir saugomi -80 ° C iki skrandžio parametrų nustatymo.

įvertinimas homogenato /serumo parametrų naudojant ELISA technika

Homogenatas /serume šiais parametrais buvo vertinami naudojant atitinkamus ELISA rinkiniai kaip skliausteliuose.. IL-1β, sE-selektinas (Abcam Inc, Kembridžas, Jungtinė Karalystė, Kačių Nr ab100768 ir ab171334, atitinkamai), iAOS, eNOS (EIAab, Uhanas, Kinija, Kačių Nr E0837r ir E0868r, atitinkamai), B ląstelių leukemija /limfoma-2 (BCL-2;. USCN gyvenimas Mokslas Inc, Uhanas, Kinija, Kačių Ne. E90778Bo) ir kaspazės-3 (Cusabio Biotech Co, Uhanas, Kinija, Kat. Nr CSB-E08857r). Kiekvienas biologinis buvo perdirbtas pagal gamintojo numatytas procedūras. Serumas viso antioksidantas talpa (BLSK) buvo matuojamas naudojant Benzie ir Starin [19] metodą. Trumpai, geležies tripyridyltriazine (Fe ^{3 + -TPTZ) kompleksas buvo sumažintas iki juodojo forma pagal antioksidantų mėginyje esančių prie rūgščioje pH, siekiant gauti intensyvus mėlyna spalva, kuri gali būti nustatomo pagal absorbcijos pokyčius esant 593 nm bangos ilgiui. Pokytis yra tiesiogiai susijęs su kombinuoto arba visos galios sumažinimą, elektronų dovanojančioje nefermentinių antioksidantų, esančių į reakcijos mišinį. BLSK lygis buvo išreikštas mikromolių /l.}

Vertina skrandžio veiklos /turinio myeloperoxidase (MPO), malondialdehido (MDA), redukuoto glutationo (GSH) ir viso azoto oksido (NOx).

iš MPO (V /gM), iš audinių neutrofilų infitration persekiotoją veikla buvo vertinama pagal "Bradley et al. [20]. Metodas yra pagrįstas matavimo vandenilio peroksido-priklauso nuo oksidacijos o-dianisidine, katalizuoja MPO, kuris sukelia junginio formavimo eksponuoti padidinti absorbciją prie 460 nm bangos ilgiui. Kaip lipidų peroksidacijos tiobarbitūro rūgšties reaguojančios medžiagos (TBARS), atstovaujama advokatų MDA indeksą, buvo siekiama nustatyti oksidacijos žalą, po Mihara ir Uchiyama [21] metodas. MDA-TBA adukto vystosi rausvos spalvos, kuri buvo išgauti n-butanolio ir išmatuotas dviem bangų ilgių, ty
., 520 ir 535nm. Aprašytas metodas Ahmed et al. [22] buvo priimta siekiant įvertinti nebaltyminių sulfhidrilines grupes (daugiausia GSH) reaguojant su Ellman reagentu po nusodinti baltymų SH-grupes. Reakcija su Ellman reagentu sudarė stabilią geltoną spalvą 5 merkapto-2-nitrobenzoinės rūgšties, kuri buvo išmatuota kolorimetriškai ne 412 nm (mg /GM).

skrandžio gleivinės NO gamybai buvo apskaičiuota netiesiogiai kaip nitrito /nitratų koncentracijos atsižvelgiant į Miranda et al metodu. [23], kur vanadžio trichlorido buvo naudojami siekiant sumažinti nitrato į nitrito. Rožinė azo dažai, pagamintas būdu pagal nitrito reakcijos su salicilo, sulfanilo rūgštį, paskui iš vėlesnio movai su N- (1-naftil) -ethylenediamine buvo matuojamas kolorimetriškai 540 nm ir NOx kiekis buvo išreikštas mikromolių /gm.

kiekybinis realiu laiku (RT), -PCR

viso RNR buvo išskirta iš skrandžio gleivinės naudojant Tiesiog p, viso RNR ekstrakcijos rinkinio (BioFlux, Hangzhou, Kinija). Gautos RNR grynumas buvo patikrinta spectrophoto-metrinė ne 260/280 nm bangos ilgiui. Lygios sumos RNR (0,368 mikrogramų) buvo retrotranscribed į pirmojo kryptis papildomą DNR (cDNR) 37 ° C temperatūroje 50 min. naudojant 200 V /iL M-MuLV atvirkštinio transkriptazės (SibEnzyme, Novosibirskas, Rusija), 1 mikrol atsitiktinių heksamerinių (Qiagen, LRS Laboratories, Inc. Korėja) ir 0,1 m DDT A 50 iL reakcijos mišinio. Įvertinti antioksidantų ir uždegimo susijusių tikslinių genų ekspresiją, AT-PGR buvo atliekama naudojant SYBR žalia PCR Master Mix (Qiagen), kaip aprašyta gamintojo. Trumpai tariant, per 25 iL reakcijos tūrio, 5 įxL kDNR buvo įtraukta 12,5 įxL 2x SYBR žalia master mix ir 2,5 įxL (2,5 mkm) kiekvieno gruntu. Pradmens sekos buvo: PPAR-γ prasminį pradmenį, 5'-GCGGAGATCTCCAGTGATATC-3 '; Priešprasminis gruntas 5'-TBS GCGACTGGGACTTTTCT-3 "; NF-κB 65 psl jausmas gruntas 5'-TGCAGAAAGAAGACATTGAGGTG-3 "; Priešprasminis gruntas 5'-AGGCTAGGGTCAGCGTATGG-3 "; Nrf2 jausmas gruntas 5'-ATGGCC ACACTTTTCTGGAC-3 "; Priešprasminis gruntas 5'-AGATGTCAAGCGGGTCACTT-3 '; HO-1 jausmą gruntas 5'-CGTGCAGAGAATTCTGAGTTC-3 "; Priešprasminis gruntas 5'-AGACG CTTTACGTAGTGCTG-3 "; ir gliceraldehido-3 fosfato dehidrogenazės (GAPDH) prasminį pradmenį, 5'-GGGCAGCCCAGAACATCA-3 '; Priešprasminis gruntas 5'-TGACCTTG CCCACAGCCT-3 '. PGR reakcijos vietoje 15 min, esant 95 ° C, norint aktyvuoti HotStarTaq DNR polimerazės, ir po to 94 ° C temperatūroje, naudojant 45 ciklų 15 sek (denatūravimo), 55 ° C temperatūroje 30 sek (atkaitinimo), ir 72 ° C temperatūroje 30 sek (prailginimo ). Santykinis išraiška buvo skaičiuojamas nuo 2 ^{-ΔΔCT formulę [24].}

Statistinė analizė

Duomenų buvo išreikštas vidutinis ± S.E.M 7-9 gyvūnams. Statistinių palyginimai tarp priemonių buvo atliekami naudojant vieną pusę dispersinė analizė (ANOVA), po to studentas-Newman-Keuls testą. Statistinis reikšmingumas skirtumas buvo svarstomas P
< 0,05.

Rezultatai

poveikis MF ir OMP nuo I /R sukelta opa puslapis

MF dozės priklausomai, uždraudė I /R sukelta skrandžio žala, kaip pateikė vertybių opa indeksą (1 lentelė) ir MF _{efektas 20 buvo panaši į siūlo OMP 20.}

poveikis MF ir OMP ant mRNR ekspresijos antioksidantų genų

Kaip parodyta pav 1A ir 1B, prisitaikanti atsakas į I /R traumos buvo matyti į Nrf2 ir HO-1 mRNR, kuri paaiškina priežastis padidėjusi GSH lygio neapdorotas I /R grupės ląstelę. Šie iRNR upregulations buvo dar ryškus veikiamai grupei, nukreipta, todėl į antioksidantų galia MF.

poveikis MF ir OMP ant redokso parametrų

Kaip pateikti 2 ir 3 lentelėse I /R įžeidimas sukėlė į oksidacinio /nitrosative statuso disbalansą. Bangą MDA lygio (182%) ir NOx gamybą (187,6%), lygiagrečiai su 5.1 raukšlės padidinti iAOS, buvo suvokiama I /R neapdorotas grupei. Priešingai, I /R žalos perpus naudingą Enos ir sumažino BLSK (69,7%), palyginti su placebu grupei. Visi šie pakitimai buvo grįžtamąja OMP, o taip pat MF, priklausomai nuo dozės, būdu. Beveik visų parametrų MF _{20 turėjo svarbų poveikį. Dėl GSH, I /R modelis, netikėtai, pakilęs jį 32%, poveikį, kurį dar labiau sustiprina įvairių narkotikų režimų.}

poveikis MF ir OMP ant mRNR ekspresijos PPAR-gama ir NF -κB genai

Kaip parodyta pav 1C, gyvūnai, I /R žalos atskleidė reikšmingą sumažėjimą skrandžio išraiška priešuždegiminis PPAR-gama (25% nevykusios lygmuo), su ryškiai padidėjusia tuo, kad iš priešuždegiminiais faktoriaus NF-κB (11,9 kartų) (pav 1D). Įdomu tai, kad MF elgiamasi grupės galėjome kovoti su I /R susijusių pasekmių pagal dozės lygį išbandyta. OMP, kita vertus, parodė mažesnį poveikį nei MF darė NF-κB, bet nepakeitė sumažėjęs PPAR gama.

poveikis MF ir OMP skrandžio uždegiminių citokinų ir neutrofilų infiltracija

4 lentelė vaizduoja I /R tarpininkaujant skrandžio blogybių, kuri pablogino uždegiminių biologinius žymenis. Ji sustiprintu koncentraciją serume IL-1β, SE-selektino, ir skrandžio MPO veiklos 5,2, 5,6, ir 2.2 raukšlės, atitinkamai, kaip, palyginti su klastotė valdomas valdymo grupę. Visi šie pakeitimai buvo žymiai sustabdyta Gydymo MF priklausomai nuo dozės. Nepaisant to, MF _{20 poveikis pakeistas, kad tarpininkaujant etalono OMP. Šios pastabos rodo, kad MF gali moduliuoti uždegiminių citokinų ir neutrofilų verbavimu sušvelninti I /R sukeltos žalos.}

poveikis MF ir OMP nuo apoptozės biologiniai žymenys

Kaip pateikti 4 lentelėje, I /R įžeidimas sukėlė apoptozę skrandžio gleivinės kaip matyti iš 6.85 raukšlės padidėjimo kaspazės-3 lygiu. Tame pačiame kontekste, I /R sumažino anti-apoptozės persekiotoją Bcl-2 (59%) lygį. Tačiau administracija MF, priklausomai nuo dozės būdu buvo sustabdyta šių pakeitimų žymiai, poveikiai, kurie pralenkė tarpininkaujant OMP.

poveikis MF ir OMP skrandžio histopatologinių pokyčių

Gerėjanti poveikis skirtingų narkotikų režimų apie tirtų biologinių žymenų buvo toliau patvirtina pateiktus 2 pav histologinių išvadas Paveikslėlyje skrandžio gleivinės mikrofotografijos, kurie rodo [A] normalus skrandžio gleivinės (MU), po gleivine (cm) ir muscularis ( ml) architektūra nevykusios valdomas žiurkės skyriuje. [B] I /R skyriai buvo parodyta, sloughed gleivinę (M), juxtraposed su pagrindinės hemoragija (juoda rodyklė), [C] sunkus kraujagyslių perkrovos (V), židinio uždegiminių ląstelių infiltracijos (M), daugiausia kaip neutrofilų, ir edema (O) į submucosa. [D] MF _{10 SKIRSNIS divulges tik spūstis gleivine kraujagyslių (V), kuriems yra lengvas uždegiminių ląstelių infiltracija (geltona rodyklė) ir /ar pabrinkimas. Kita vertus, [E] MF 20 skiltyje, panašus į Sham-valdomas kontrolė, rodo normalų sveika histologinės struktūros, išskyrus labai švelniu kraujagyslių perkrovos (v) submucosa; MF 20 poveikis pakeistas, kad [F] OMP, kur perpildytos kraujagyslės (V) ir edema po gleivine sluoksnis vis dar aptinkama OMP skyriuose.}

Diskusijos

Nors ankstesni tyrimai užfiksavo, antioksidantas [15], ir anti-uždegiminių [25] gebėjimus MF, tačiau nė vienas iš jų išaiškino potencialius molekulinius kelius dalyvauja taisymas sutrikdyti redokso /uždegiminių sistemas. Taigi, šiame darbe mes patikrino skrandžio gleivinės išraišką Nrf2 /HO-1 suprasti, jei tai signalizacijos kelias yra įtrauktas į MF antioksidantas mechanizmą. Be to, tyrimas orientuojasi į NF-κB ir PPAR-gama išraišką, taip pat ištirti kai kurių galimų MF priešuždegiminis molekulinės mašinos.

Mūsų Signalinių tyrimai parodė, kad I /R gerokai aktyvinama mRNR Nrf2 ir HO-1, pabrėžiant galimą prisitaikanti poveikio organizmą nuo I /R kenkia įžeidimą; šios išvados imituoti, kad visos ir bendradarbiais [26] tinklainės I /R modelį. Glaudesnis HO-1 baltymo ekspresija, reglamentuoja Nrf2 [27], gali atsirasti kaip atsakas į oksidacinio streso [28] ir uždegiminėms ligoms ir yra plačiai priimta kaip apsauginis mechanizmas nuo oksidacinio audinių sužalojimo [9], faktus, kurie palaiko mūsų išvadas. MF, kita vertus, patvirtino savo antioksidacinį poveikį, toliau iškeldamas Nrf2 ir HO-1, rezultatus, kurie buvo įrašyti anksčiau į poveikį kepenims, modelio [29] išraiška. Kiek mums žinoma, ši išvada yra pirmasis tiesioginis įrodymų už gastritas vaidmenį MF per Nrf2 /HO-1 antioksidantas keliu į I /R sukelta opa modelį.

antioksidantas pobūdis MF buvo toliau reiškiasi čia jos sugebėjimas kovoti su I /R sukeltas padidėjęs lipidų peroksidų [30] ir BLSK sumažėjo [31]. Tačiau I /R ir MF į GSH poveikis parodė tą patį modelį pastebėtas Nrf2 ir HO-1 išraiškos, kur aš /R sukelia subtilų, dar gerokai pakyla GSH, padarinio, kad buvo dar padidintos MF [32] , Šis veiksmas, atkreipia dėmesį į galimą kompensacinio atsakas į I /R traumos ir nuorodos GSH su Nrf2 /HO-1 signalinio kelio, kaip palaikoma iki šiol iki Das et al. [29]. Tarp GSH ir Nrf2 koreliacija gali būti susiję su molekuliniu kryžminio aptarimas tarp aktyvinama Nrf2 ir γ-glutamylcysteine ​​ligaze [10, 33], fermentas, kad katalizuoja greitį ribojantis žingsnis GSH sintezę [34]. Be to, HO-1 antioksidantas vaidmuo kyla iš gebėjimo pagreitinti PRO-oksidantas hemo į geležies, biliverdinas ir anglies monoksido [35] suskirstymas; biliverdinas tada konvertuoti į bilirubino, kuris veikia kaip antioksidantas prieš lipidų peroksidacijos [36].

Be taisymas pasipiktinimas redokso statusą, MF išplėtė savo įtakos galėjo atsirasti nitrosative stresą, taip pat. MF priešinosi I /R poveikį Taigi Eno /iAOS, kur jis atkūrė steigiamojo fermento eNOS [37] veiklą ir sumažino kenksmingų indukuojamą izoformos [38] lygiais. Todėl tikimasi, kad padidėjusi IAOS į neapdorotas grupės yra atsakinga už pertekliaus lygį NOx, kuris pakenktų skrandžio gleivinės vientisumą per
jo sąveika su superoksido anijonų ir peroksinitritas [39] formavimui. Pastarasis yra stiprus laisvųjų radikalų, kad perturbs ląstelių makromolekulių per lipidų peroksidacijos, tiesioginis mitochondrijų funkcija sutrikusi, slopindamas membranos Na ^{+ /K + - ATPazės veikla ir oksidacinis baltymų modifikacijos [40]. Priešingai,, MF-tarpininkaujant gamyba NOx gali būti valdomas iš atkurtos eNOS, o ne iNOS, remti, tokiu būdu, antioksidantas /laisvųjų radikalų neutralizavimo savybės MF [16]. Apsauginis NE malšina laisvuosius radikalus, atitinkamai išsaugojimo GSH skrandžio gleivinės; GSH veikia ir kaip nukleofilinio sugėriklis superoksidų ir kaip į GSH peroksidazės tarpininkaujant sumažinti vandenilio peroksido [41] kofaktorius.}

žalingo įvykiai, kurie seka įvesties /R įžeidimas yra padidėjęs spaudai prouždegiminių tarpininkų ir įdarbinimas leukocitų, be nerimą oksidacinio /nitrosative mechanizmų [42]. Atsižvelgiant į dabartinę studijų MF patvirtinti savo priešuždegiminiu /imuninė-moduliacinį poveikį, kuris buvo dokumentuota anksčiau [25, 43], slopindamas IL-1β [43], E-selektino [25] ir neutrofilų infiltracija [44] ir kituose skirtingi modeliai. Šis poveikis gali būti iš dalies susiję MF-moduliacinį pokyčių molekulinio lygio. MF sukeltas genų ekspresiją PPAR-gama, kartu su patronuojančios uždegiminės transkripcijos faktoriaus /tarpininko NF-κB downregulation, trukdo, tad aš /R poveikį. Ankstesni tyrimai, pranešė, kad I /R žalingas poveikis yra sąlygotas dalies , per
slopina PPAR gama iRNR [7, 45], kuris yra transkripcijos faktorius, kuris veikia kaip įtakingo pleiotropic reguliatorius anti-uždegimas, antioksidantas, ir fagocitq tarpininkaujant valymas procesai. Be savo tiesioginio genomo poveikio, PPAR buvo nustatyta, kad bendrauti neigiamai su kitais transkripcijos faktorių, kaip NF-κB, kuris paremtas daug aspektų priešuždegiminis /imunomoduliacinis poveikis PPAR [25, 46], faktus, tonas su mūsų išvadomis. Be to, glaudesnis išraiška PPAR buvo pranešta, kad slopina NOx /iAOS gamybą [47], siūlymas, todėl prašymas dėl MF slopinamos į iAOS paaiškinimas. PPAR taip pat trukdo makrofagų varoma citokinus ir leukocitų adhezijos molekulių, kaip matyti čia, iš dalies , per
slopina genų ekspresiją NF-κB [25, 48]. Be to, MF buvo pranešta, kad sumažinti PMNs prie endotelio sukibimą ir saugoma nuo jų infiltracija į skrandžio audinio [49], kartu su PPAR-gama ir NF-κB išraiškos moduliavimą. Šie duomenys paremti mūsų, e-selektinas iAOS ir MPO, kaip minėta anksčiau. Be to, MF sukeltos HO-1 ląstelę gali racionalizuoti priešuždegiminiu charakterį MF, per
jo pašalinis anglies monoksido, kuris suteikia priešuždegiminį turtą [50]. Siekiant šio tikslo, eksperimentiniai rezultatai mūsų tyrime nustatyti dar gastritas mechanizmus tiek molekulių ir ląstelių lygį, pagal kurį MF saugomų skrandžio gleivinę nuo I /R sukeltos traumos. Šie rezultatai patvirtina su ankstesnių tyrimų išvadas eksperimentinio kolito modelį [51, 52], ir pin žemyn priešuždegiminį poveikį MF.

Anksčiau Wu et al., [53] pranešė, kad PPAR γ raiška taip pat apsaugo mitochondrijų membranos potencialą ir apsaugo apoptozę iki upregulating į anti-apoptozinių BCL-2 šeimos baltymų ekspresiją. Panašiai, anglies monoksido, Ho-1 aktyvumo pašalinis produktas, suteikia anti-aprotoninį aktyvumą up-reguliavimo anti-apoptozės molekulės Bcl-2, ir į apačią-reguliavimo proapoptozinis signalo Bax [54]. Duomenų dabartinės tyrimas parodė, kad I /R sukelta skrandžio žalos yra susijęs ir su apoptozės kaip liudija pažymėtoje mažinimo BCL-2 [55] ir kaspazės-3 [56] aukštį, o MF grįžo I /R indukuotų apoptozė pagal dozės priklausomo fasadams BCL-2 lygiu, ir mažinimas kaspazės-3 lygiu. MF anti-aprotoninis poveikis sutampa su Ghosh et al rezultatus. [38] ir gali būti priskirtas prie MF-tarpininkaujant ląstelę PPAR-gama ir /arba HO-1 mRNR lygių

Visi šie duomenys buvo dar atsispindi nuo histologinių pokyčių.; I /R įžeidimas sukėlė praliejimo dėl epitelio apsauginiu sluoksniu ir lėmė pagrindinės kraujavimo su žymiu spūsčių kraujagyslių kartu su uždegiminių ląstelių infiltracija plonų sluoksnių Propria, tačiau šis poveikis žymimų kraujotaką nutraukti, kuris buvo kartu su edema. Kraujagyslių užsikimšimas gali atsirasti nuo vazokonstriktoriumi endotelino-1 skrandžio audinio [57] fasadams, padidėjo leukocitų infiltracija [58], ir /ar sumažėjęs aktyvumas Taigi Eno patvirtinama dabartinio tyrimo. Taigi, aš /R nebuvo pridėtas tik laisvųjų radikalų susidarymą, bet ir su aiškia sumažėjimas endogeninių antioksidantų lygį ir padidinti infiltracija uždegiminėmis ląstelėmis, pakeitimų, kurie buvo trukdo mf, ypač esant didelei dozei, kur normalus histologinis buvo pastebėta, struktūra.

dėl ataskaitinių narkotikų OMP, kuris daro savo gastritas poveikį jo antioksidantas, antiapoptotic [59], ir priešuždegiminių [60] veiksmų, nepriklausančių rūgšties slopinimo [61], mes apibrėžtos čia pateikta molekulinių įvykių, kurie prisideda prie šių poveikių. Šiame tyrime mes dokumentais, kad OMP antioksidacinį poveikį, patvirtintos slopina lipidų peroksidacijos ir didinti gynybos biologinius žymenis, tarpininkaujant , per Viesbutis The Nrf2 /HO-1 signalizacijos keliu. OMP taip pat slopina uždegimą skatinančių citokinų IL-1β, taip pat neutrofilų sukibimą ir infiltracija, kaip pavaizduota mažinant SE-selektino lygį ir MPO veiklą, atitinkamai. Nors OMP downregulated apie NF-κB išraišką, tačiau jis negalėjo kovoti su I /R poveikį PPAR-gama, leidžia manyti, kad anti-uždegiminių /imuninė-moduliacinį poveikis OMP kyla iš slopina NF-κB genų ekspresiją, ir galbūt kitos mechanizmus, bet ne, kad PPAR-gama.

Nors OMP poveikis Nrf2 išraiškos viršijo MF _{20, dar priešais buvo akivaizdu nuo HO-1 ir GSH, neatitikimo, kuris gali būti susiję su jų poveikiu NF-κB. Pastarasis buvo įrodyta veikti kaip neigiamas reguliatorius su Nrf2 keliu konkuruojančių su juo jungiasi prie transkripcijos bendrai aktyvatoriaus CREB surišančio baltymo (CBP), o taip pat skatinti bendrai slopinančioje Histonas deacetilazės 3 privalomas (HDAC3) į antioksidantas reagavimo elemento (ARE) [62]; Šie poveikiai gali sulėtinti Nrf2 tarpininkaujant transkripciją savo tolesnių tikslų.}

Be to, antiapoptotic nuosavybė OMP rėmėsi ne tik nuo jos gebėjimo padidintas antiapoptotic baltymų lygį, BCL-2 arba sumažinti į lygį apoptozės žymeklis, kaspazės-3, kaip nustatėme, šiame tyrime, bet taip pat dėl ​​oksidacinio DNR pažeidimai [59] sumažinimo.

Galiausiai, galima daryti išvadą, kad į gastritas poveikį MF, ypač dozėmis, 20 mg /kg kūno svorio, gali būti priskirta prie Nrf2 /HO-1 antioksidantas keliu, PPAR-γ priešuždegiminių kelias per
downregulating NF-κB ir didinti antiapoptotic baltymų aktyvinimo Bcl- 2 ir mažėja kaspazė-3. Visi šie mechanizmai pagaliau palaikyti normalią skrandžio gleivinės barjero vientisumas.

• PLoS ONE: Dvikryptis Crosstalk tarp streso sukeltos skrandžio opos ir depresijos pagal lėtinis stresas
• PLoS ONE: Aukštos Mobilumas Grupė dėžutė 1 Slopina skrandžio opos gydymas per Toll-tipo receptorių 4 ir receptorius Išplėstinė Glycation End Products