PLoS ONE: povišene razine interleukina-32 Izraz je povezan s Helicobacter pylori Related gastritis

Sažetak pregled

Pozadina pregled

interleukin-32 (IL-32) je nedavno otkrio proupalnih citokina sudjeluje u upalnim bolestima. Ispitali smo ekspresiju IL-32 i njegovo reguliranje mehanizma u upalnom odgovoru bolesnika s Helicobacter pylori pregled ( H. pylori pregled) infekcije. pregled

Dizajn i metode

IL-32 mRNA i proteina izraz u želučanim tkiva utvrđena je na temelju kvantitativne real-time PCR i imunohistokemijski. Regulacija IL-32 u ljudskom epitel stanične linije želuca AGS istraživana je različitim stimulacija citokina i drugu H. pylori pregled soj infekcija. pregled

Rezultati pregled

Želučani IL-32 mRNA i proteina izraz su povišene u bolesnika s H. pylori
infekcija i pozitivno povezana s gastritisom. U H. pylori pregled -infected pacijenata, razina mRNA za IL-32 je također povezana s tim proupalnih citokina IL-1 i TNF-a. In vitro pregled IL-1β i TNF-α može pojačanog IL-32 mRNA i proteina u AGS stanicama, što je ovisno o signalnom putu NF-kB. Regulacija IL-32 ekspresije u odgovoru na H. pylori pregled -infection može biti oslabljen pomoću neutralizirajuća antitijela da blokiraju IL-1 i TNF-a. Štoviše, H. pylori pregled -infected AGS stanice također inducirana IL-32 mRNA i proteina, koja je ovisna o CagA. pregled

Zaključci pregled

IL-32 razina povišena u bolesnika s H , pylori
infekcije i njegov izraz je regulirano proupalnih podražaja, što ukazuje da IL-32 može imati ulogu u patogenezi H. pylori
su povezane s gastritisom pregled

Izvor. Peng L-s, Zhuang Y, Li W-H, Zhou Y-Y, Wang T-t, Chen N, et al. (2014) Povišeni interleukin-32 Izraz je povezan s Helicobacter pylori
su povezane s gastritis. PLoS ONE 9 (3): e88270. doi: 10,1371 /journal.pone.0088270 pregled

Urednik: Ivo G. Boneca, Institut Pasteur Pariz, Francuska pregled

Primljeno: 24. kolovoz 2013; Prihvaćeno: 8. siječanj 2014. Objavljeno: 14. ožujak 2014 pregled

Copyright: © 2014 Peng i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ovo djelo bio podržan od dotacija iz Medical Science projektom usavršavanja mladih iz kineske narodne oslobodilačke vojske (13QNP108) i Nacionalni Basic Research programa Kine (973 programa, br 2009CB522606). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

Helicobacter pylori pregled ( H. pylori pregled) je gram-negativna, microaerophilic bakterija koja naseljava želudac od oko 50% stanovništva u svijetu. Stalno infekcije H. pylori pregled uzrokuje kronične i uporni gastritis i povećava rizik od peptički ulkus i karcinom želuca. pregled

H. pylori pregled -infected želučane sluznice je karakterizirana infiltracijom imunoloških stanica i proizvodnje upalnih faktora. Th1 i Th2 odgovora su izvijestili da posreduje imuni odgovor na H. pylori
i Th1 odgovor smatra se da je dominantna [1]. Zatim indukcija Th17 odgovora u H. pylori pregled -infected želudac je potvrđeno [2]. Osim Th1, Th2 i Th17 stanice, regulatorne T stanice (Tregs) također igraju važnu ulogu u H. pylori pregled su povezane s gastritisom [3]. U međuvremenu, proinflammtory citokini kao IL-1, TNF-a i IL-6, također se pokazalo da povišeni u H. pylori pregled -infected želuca [4], a ovi citokini mogu utjecati na T stanice imunog odgovora kod upalnih bolesti, što upućuje da upalni čimbenici mogu biti presudna u H. pylori pregled povezani s grupom želuca Upala. Međutim, točan mehanizam procesa još nije u potpunosti razjašnjen. Pregled

IL-32 je novootkrivena proupalni citokin proizveden imune stanice (NK stanice, T stanice, monocite) i ne-imunih stanica (stanice endotela , epitelne stanice) [5] - [7]. To je bio izvorno klonirana kao gen inducirane IL-2 i zove NK-4, ali je njegova funkcija bila nepoznata sve do 2005. [5], [8]. Postoji šest izrezane varijante uključujući IL-32α, β, γ, δ, ε, a ζ i raznolike uloge potencijalno igraju svojim različitim izoformi. Međutim, specifični receptor za IL-32 nije bio otkriven, ali neutrofila proteinaze 3 veže za IL-32 s visokim afinitetom [9]. IL-32 igra važnu ulogu u različitim upalnim poremećajima i njegova ekspresija je pokazano da korelira s ozbiljnosti bolesti u reumatskog artritisa, Crohnove bolesti i atopijski dermatitis, [10] - [12]. Štoviše, IL-32 je implicirano u nekim zaraznim bolestima, uključujući H. pylori pregled infekcija [13] - [16]. Međutim, povezanost između IL-32 izražavanja i H. pylori pregled induciranu gastritisa i njegova točna regulacija mehanizam uključujući i da li Autocontrol /parakrine učinci na ekspresiju IL-32 mogu biti uključeni u proces je i dalje nepoznat. pregled

U ovom istraživanju, otkrio je IL -32 izraz u uzorka biopsije bolesnika s H. pylori
infekcije i analizirati odnos između želuca IL-32 razine i ozbiljnosti upale sluznice. Nakon toga, istraživali smo utjecaj proupalnih podražaja i H. pylori
infekcije na IL-32 ekspresije u ljudskim epitel staničnim linijama želuca. Naši rezultati pokazuju da je IL-32 može biti uključen u patogenezu H. pylori pregled su povezane s gastritisom. pregled

materijali i postupci

Izjava Etika pregled

Ljudska želučane sluznice biopsije su prikupljeni rutinskim endoskopije na Xinqiao bolnici Vojnomedicinsku Sveučilišta Trećeg , Krv je dobiven iz istog predmeta koji su bili podvrgnuti endoskopiju za H. pylori
Serološki test. Istraživanje je odobrilo Etičko povjerenstvo Xinqiao bolnice, treće Vojnomedicinsku Sveučilišta. Pismeni informirani pristanak dobiven je od svakog ispitanika pregled

Tema pregled

Želučani tkiva i krvi su prikupljeni od 54 ispitanika. (Muško /žensko = 27/27; prosječna dob 47 ± 1,2 godina) s H. pylori
infekcije koji su bili podvrgnuti endoskopiju pri Xinqiao bolnici Vojnomedicinsku Sveučilišta Trećeg. H. pylori pregled infekcija je potvrdio brzi ureaza testom, serološkog testa, ^{13C-urea izdisajni test i histologiju. Pacijenti su klasificirani kao H. pylori
pozitivan ako dva od četiri testa bila pozitivna. Normalni želučani tkiva iz 47 ispitanika (muško /žensko = 23/24; prosječna dob 47 ± 1,3 godina). Koji su negativni rezultati za sva četiri testa su bili upisani kao kontrole pregled}

uzorka biopsije i histologija Procjena pregled

Bioptati su uzeti iz predmeta na svakom endoskopije. Jedan odmah zamrznute u tekućem dušiku i pohranjeni na -80 ° C za ekstrakciju RNA. Ostatak uzorka biopsije su fiksirane u formalinu i uklopljene u parafin. Hematoksilin-eozinom (H &E) obojeni dijelovi su pregledane dva iskusna histopatologa. Histološka ozbiljnost gastritis je ocijenjena od normalne do teške temelji na gustoći infiltracije mononuklearnih i polymorphnuclear stanice prema utvrđenim kriterijima [17], [18].

Kultura Cell pregled

želuca epitelnog linija AGS (ATCC, American Type Culture Collection) se kultiviraju na 37 ° C i 5% CO _{2 u Ham F12 (Hyclone, Logan, UT, USA), koji sadrži 10% fetalnog telećeg seruma (FCS). AGS Stanice su stavljene u šest jažica u gustoći od 1 x 10 ^{6 stanica /jažici i stimulirane s 10 ng /ml TNF-a i /ili 10 ng /ml IL-1 (Peprotech, Rocky Hill, NJ , USA); Stanice su sakupljene u naznačenim vremenima, za analizu IL-32 mRNA i proteina. Za signalnog slijeda Test inhibicije, NF-kB inhibitor (BAY 11-7082), MEK1 /2 inhibitora (U0126), p38 /MAPK inhibitora (SB203580), JNK inhibitora (SP600125), JAK inhibitora I (sve na 10 mM i sve Calbiochem, San Diego, CA, USA) ili DMSO vozila (Sigma, Saint Louis, MO, USA) su dodani u kulturi stanica 1 sat prije stimulacije citokina. pregled}}

Infekcija AGS stanica s H. pylori

H. pylori
soj 11637 i njegova Izogena CagA negativni mutirani soj (CagA ^{- soj) uzgojeni na infuziju pločama moždano-srčani sadrži 10% krvi zec na 37 ° C u microaerophilic uvjetima (5% O _{2 , 10% CO 2, 85% N 2). H. pylori pregled je ispran kulturi ploče s PBS i centrifugirana na 2500 × g tijekom 5 minuta, a zatim je ponovno suspendiran u PBS-u optičkom kvantifikaciju gustoće pri 600 nm (1 OD 600 = 1 × 10 9 H. pylori pregled /ml). Mnogostrukosti infekcije (MOI) od 1, 10 i 100 je korišten za infekciju AGS stanica. Za neutralizirajući testovi, neutralizirajuća protutijela protiv TNF-a (nTNF-a, 1 ug /ml, Biolegend) ili IL-1 (nil-1B, 1 ug /ml, eBioscience) se doda u sukulture sustavu. Pregled}}

RNA i kvantitativna real-time PCR pregled

RNA je ekstrahirana iz uzorka biopsije ili stanica po Trizol reagent® (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) i natrag-transkribirati na cDNA pomoću ReverTra Ace (Tovobo, Osaka, Japan). Kvantitativno u realnom vremenu provedena je PCR sustavom nadzora iQ5 (Bio-Rad, USA). PCR primeri su dizajnirani kako bi prijeći granicu eksona-intron i koristi za otkrivanje mRNA ekspresiju IL-32, TNF-α, IL-1β i β-aktin i njihove sekvence su: IL-32, naprijed, 5 ' -ACGACTTCAAAGAGGGCTACC-3 '; obrnuti, 5'-GCCTCGGCACCGTAATCCAT-3 '; TNF-α, naprijed, 5'-TCTCTAATCAGCCCTCTGGC-3 '; natrag, 5'-ATGAGGTACAGGCCCTCTGA-3 '; IL-1β, naprijed, 5'-GTTCTTTGAAGCTGATGGCC-3 '; natrag, 5'-GTGGTCGGAGATTCGTAGCT-3 '; β-aktin, naprijed, 5'-TTCCTTCCTGGGCATGGAGTCC-3 '; natrag, 5'-TGGCGTACAGGTCTTTGCGG-3 '. β-aktin korištena je kao interna kontrola. Relativna ekspresija gena je izračunata kao višestruki promjene od strane ΔΔCt metodom. Pregled

Imunohistokem pregled

Četrdeset parafin uklopljenih uzorci su izrezati na 5-ĩm sekcije. Nakon deparafmizirani i hidratiziranom, odjeljci u citratnom puferu (pH = 6,0) se podvrgava toplinskoj inducirane pronalaženje antigen je u mikrovalnoj pećnici i obrađena s 3% -tnim vodikovim peroksidom. Nakon inkubacije sa zečjim anti-humanim IL-32 (Abcam, MA, USA) preko noći na 4 ° C, stakalca su tretirani s peroksidaza-konjugiranog sekundarnog protukunićjim protutijelom (Zhongshan Golden mosta Biotech., Beijing, Kina) i zatim supstrata 3,3'-diaminobenzidin tetrahidroklorida (DAB). Izotipa odgovarajućih antitijela korištena je kao negativna kontrola. Slike su skupljene na mikroskop opremljen s digitalnim fotoaparatom Nikon Eclipse 80ĩ (Tokio, Japan). Za polu-kvantitativno analize imunohistokemijski, svaki dio je izabran za procjenu IL-32 imunobojanja u želučanom tkivu i ocijenjena je kako slijedi: 0, nema rezultat ekspresije; rezultat 1, niski izraz; zabiti 2, srednji izraz; rezultat 3, jaku ekspresiju. pregled

Western blot pregled

Stanice su isprane u ledeno hladnom PBS-u, a zatim prekinuta u puferu za liziranje (20 mM Tris, pH 7,5, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1% Triton X-100, 2,5 mM natrijev pirofosfat, 1 mM glicerofosfat, 1 mM Na3VO4, 1 ug /ml leupeptina i inhibitor proteaze). Koncentracija proteina je mjerena pomoću kompleta ispitivanjem BCA proteina (boster, Wuhan, Kina). Stanični lizati su razdvojeni 12% SDS-PAGE i prenesen u polivinilidenfluorid membrane. Membrane su blokirane tijekom 1 sata s 3% albumina goveđeg seruma u Tris-puferiranoj slanoj-Tween pri sobnoj temperaturi i zatim inkubirani preko noći na 4 ° C sa zečjim anti-humanim IL-32 (Abcam, MA, USA) i mišjeg anti- humanog β-aktin ((Tianjin Sungene Biotech Co., Ltd, Kina), peroksidaza-konjugiranog sekundarnog antitijela korištena u skladu sa instructures proizvođača. proteini interesa su vizualizirani pomoću Supersignal® West Dura Trajanje supstrat (Thermo, IL , USA). pregled

Statistička analiza pregled

Svi rezultati su prikazani kao srednja vrijednost ± standardna pogreška srednje vrijednosti (SEM), te statistička analiza je provedena pomoću GraphPad Prism 5.0 Software. razlike između dvije . skupine su analizirani korištenjem Mann-Whitney u test i više grupa te su analizirani pomoću jednosmjerne analize varijance (ANOVA), kada su otkrivene varijance, Spearmanov korelacije je korišten za procjenu stupnja povezanosti varijabli P '. 0.05 je smatrana statistički značajna. pregled

Rezultati pregled

Povišeni IL-32 mRNA Razina Otkrivene bolesnika s H. pylori pregled Infekcija pregled

Kako bi se ispitalo da li IL-32 je uključen u patogenezu H. pylori
uzrokuje gastritis, prvo odrediti ekspresiju IL-32 mRNA u želučanom biopsijom uzorka od ispitanika sa i bez H. pylori
infekcije. Kao što je prikazano na slici. 1A, IL-32 je izraz lica bio je značajno viši u H. pylori
pozitivnih uzoraka nego u H. pylori pregled -negativno uzorci (P < 0.001). Za procjenu da li je ekspresija IL-32 je u vezi sa stupnjem upale u H. pylori pregled -infected želučani uzorci, podijelili smo uzorke u normalnim i blagim, umjerenim i teškim gastritisa skupine na temelju procjene histologiju kako je opisano u Materijali i metode. Rezultati su pokazali da je razina IL-32 mRNA u H. pylori pregled pozitivnih uzoraka pozitivno korelirane sa stupnjem želučane upale (Sl. 1B). Osim toga, razina IL-32 mRNA također je pokazala pozitivnu korelaciju s TNF-a i razine IL-1β mRNA (sl. 1 C). Pregled

Povećana IL-32 Ekspresija proteina u bolesnika s H. pylori pregled Infekcija pregled

Kako vizualizirati IL-32 ekspresiju u želučanom biopsijom uzorka, imunohistokemijski bojenje IL-32 je provedeno na parafin-ugrađen tkiva. Kao što je prikazano na slici. 2B, neki od IL-32 koje proizvode stanice detektirane su u H. pylori pregled -negativno želučani tkiva, dok je u H. pylori pregled pozitivnih želučani tkiva, primijetili smo da IL-32 ekspresija proteina je značajno povećao (Sl. 2c). Osim toga, polu-kvantitativna procjena IL-32 imunoreaktivnost je potvrdio da je ekspresija IL-32 u želučanim tkivima H. pylori pregled -infected pacijenata na razini proteina je također značajno povećana u usporedbi s onima u H. pylori pregled -negativno želučani tkiva i na blagoj gastritis. pregled

IL-32 mRNA i proteina Razina su regulirano TNF-a i IL-1β pregled

Budući da smo otkrili pozitivnu korelaciju između IL -32 razine mRNA i stupanj želučane upale u želučanim tkiva i korelacije između IL-32 mRNA i IL-1 i TNF-α mRNA, regulacija proupalnih citokina na IL-32 mRNA ekspresije istraživana je u AGS stanica. Kao što je prikazano na slici. 3A, poslije tretmana sa citokinima 24 sata, IL-32 razine mRNA znatno doreguliran: 5.0 ± 0.5 puta od TNF-a, 6,9 ± 0,5 puta od IL-1, i 11.2 ± 1.4 puta od IL-1 i TNF-α. Ovaj učinak bio je u potpunosti ovisna o NF-kB signalnog puta, kao prethodne obrade sa NF-kB inhibitor BAY 11-7082, ali ne i JNK, p38 /MAPK, MEK1 /2 ili JAK /STAT signalni inhibitori inhibirao indukciju IL-32 mRNA nakon stimulacije TNF-a ili IL-1 (Sl. 3c). Nadalje, Western blot je potvrdio da IL-32 na razini proteina i izazvana je TNF-a i /ili IL-1β stimulacije je ovisila o NF-kB signalizacije (sl. 3B i D). Potom smo ispitivali može li TNF-α ili IL-1β je bio uključen u H. pylori
inducira povećanje ekspresije IL-32 izražavanja. AGS stanice su zaražene s H. pylori pregled i istovremeno pomiješa s neutraliziranje antitijela za blokiranje TNF-a ili IL-1. Kao što je prikazano na slici. 3E, H pregled . pylori pregled induciranu IL-32 ekspresija proteina je značajno smanjena korištenjem navedene citokine blokiranje antitijela. pregled

H. pylori pregled induciranu IL-32 Expression pregled

Kako bi se dodatno proučavanje izravnog učinka H. pylori
na ekspresiju IL-32 u želučanim epitelnim stanicama, AGS stanice su zaražene s H. pylori
na moi od 1, 10 i 100. Kao što je prikazano na slici. 4A i B, IL-32 mRNA i proteina u serumu je porasla nakon što je H. pylori infekcije
na način ovisan o dozi. Potom smo analizirali li H. pylori pregled strain razlike će doprinijeti različitoj ekspresiji IL-32. Stanice su zaražene s H. pylori 11.637 pregled procijediti i CagA ^{- naprezanje. Iako CagA - soj infekcija blago povećao ekspresiju IL-32 u AGS stanica, indukcija IL-32 mRNA i na razini proteina po CagA - soj infekcija bila je značajno niža nego u H. pylori 11.637 pregled soj infekcije (Sl. 4C i D). pregled}

Rasprava pregled

U ovom istraživanju smo primijetili da želuca IL-32 bila je značajno povišena u bolesnika s H , pylori
infekcije na oba mRNA i proteina. Povećana razina IL-32 mRNA korelira s ozbiljnosti želučane upale. Osim toga, razina IL-32 mRNA također su u korelaciji s TNF-a i razine IL-1β mRNA u H. pylori- pregled pozitivne želučane uzorka biopsije i bilo koji od dva citokina može pojačanog IL-32 mRNA i proteina. Nadalje, utvrdili smo da H. pylori infekcija pregled želučanih epitelne stanične linije također je izazvao IL-32 mRNA i proteina. Ovi rezultati pokazuju da je IL-32 vjerojatno sudjeluje u želučanom upalom u bolesnika s H. pylori infekcija pregled. pregled

IL-32 bio je nedavno opisan kao proinflammtory faktor uključen u mnoge upalne poremećaje kao što su kronična rinosinusitis, uvjet uglavnom uzrokovane gram pozitivnih bakterija infekcije [19], [20]. Povišene razine IL-32 tada je bio prijavljen u HCV i HBV-zaražen jetru i dovesti u vezu s težinom upale jetre i fibroze [15], [21]. U ovom istraživanju, pokazali smo da IL-32 na razini mRNA je značajno povišene u bolesnika s H. pylori
infekcije, a visoka korelacija između IL-32 mRNA i želučane upale je također, što upućuje da je IL-32 može igrati važnu ulogu u H. pylori- pregled zaraženo želudac. Osim toga, imunohistokemija je korišten za otkrivanje izvora IL-32 i pokazali su da IL-32 je izražen u epitelnim stanicama želuca i njegova vrlo ekspresija opažena je kod H. pylori-
pozitivne želučane tkiva. Zbog IL-32 nađeno je da inducira proizvodnju IL-8 u želučanom epitelnih stanica te inhibiraju proangiogenic faktor VEGF sekrecije od bronhijalne epitelne stanice [16], [22], a također promatrati IL-32 razine mRNA u pozitivnoj je korelaciji s IL-8 ekspresije (podaci nisu prikazani). Razumno je da IL-32 utječu na funkciju želuca epitelnih stanica u H. pylori- pregled zaražene želudac. pregled

Klasična želuca Upala s H. pylori pregled infekcija može biti pod utjecajem infiltracije imune stanice i upalne citokine, kasnije može sadržavati novootkrivenog IL-32 [19] - [22]. U našem istraživanju, otkrili smo da in vitro TNF-α i /ili IL-1β stimulira AGS stanice u povećanju IL-32 mRNA i proteina, koji podržava pozitivnu korelaciju između IL-32 i TNF-a i IL-1β in vivo , Međutim, Th17 citokina (IL-17A, IL-17F, IL-6), Th2 citokina IL-4, Tregs citokina TGF-β1 i Th1 citokina IFN-y sve nije inducirala IL-32 mRNA i proteina u našem sustavu, iako su svi relevantni vrste i citokini imune stanice su prijavili da se infiltriraju H. pylori- pregled zaraženo želuca (vidi Sliku S1). Ovi rezultati sugeriraju da je IL-32 vjerojatno je proizvedena prije infiltracije tih stanica, koji je podržan od strane izvješću da IL-32 izaziva dendritičke stanice sazrijevanje i promiče PH1 i Th17 polarizaciju [23]. Štoviše, indukcija IL-32 mRNA i proteina pomoću TNF-a ili IL-1 je bio blokiran inhibitora NF-kB U 11-7082, što ukazuje da Molekulski mehanizam u pozadini ovog postupka vjerojatno NF-kB ovisna. Zanimljivo je da koristite neutraliziranje antitijela za blokiranje TNF-a ili IL-1 i usporedo s H. pylori pregled infekcija, primijetili smo da IL-32 razina proteina je značajno smanjen. Dakle, naši rezultati ukazuju da su epitelne citokini (TNF-α i IL-1β), odgovor na H. pylori pregled infekcije su važni za regulaciju IL-32 ekspresiju. pregled

Naši rezultati također pokazuju da je IL-32 mRNA i proteina na razini povećani su na način ovisan o dozi slijedeći H. pylori
infekcije, što sugerira da je učinak H. pylori pregled infekcija na IL32 izražavanja je izravno fiziološki. Osim toga, CagA mutacije u H. pylori pregled može značajno oslabiti ekspresiju IL-32 u AGS stanicama, što ukazuje da je H. pylori pregled induciranu IL-32 regulaciju bila ovisna o CagA. H. pylori
izražavaju proteine ​​kako bi se olakšalo patogeneze [24]. UreB je također važan virulencije protein za kolonizaciju H. pylori pregled i posreduje H. pylori pregled induciranu disfunkcija želučane barijere [25], [26]. Otkrili smo da UreB mutacije također oslabljena H. pylori
inducira IL-32 mRNA ekspresije (vidi Sliku S2). Dakle, IL-32 ekspresija uglavnom je regulirano izgon CagA u epitelnim stanicama i drugim virulencije proteine ​​također može utjecati na patogenu odgovor H. pylori
na želučane epitelnim stanicama. pregled

U zaključku, naši podaci pokazuju da IL-32 ekspresija je povišena u bolesnika s H. pylori
infekcije i u korelaciji s težinom želučane upale. Regulacija IL-32 ekspresije u odgovoru na H. pylori pregled infekcija ovisi o različitim interakciji čimbenika. Ovi podaci zajedno pokazuju da IL-32 može igrati važnu ulogu u patogenezi gastritisa uzrokovanog H. pylori
infekcije. pregled

popratne podatke
Slika S1.
AGS stanice su posađene u šest jažica u gustoći od 1 x 10 ^{6 stanica /jažici i stimulirane s 10 ng /ml Th17 citokina (IL-17A, IL-17F, IL-6), Th2 citokina IL-4, Tregs citokina TGF-β1 i Th1 citokina IFN-γ za 24 sata i stanice su sakupljane za analizu IL-32 mRNA i proteina. Podaci su srednja vrijednost ± SEM od tri odvojena pokusa i jedan predstavnik blot prikazan je pregled doi:. 10.1371 /journal.pone.0088270.s001
(TIF)
Slika S2. pregled, H. pylori pregled soj 26.695 su rasle u pločama za infuziju mozak srce koji sadrži 10% krvi kunića na 37 ° C pod microaerophilic uvjetima (5% O _{2, 10% CO 2, 85% N 2 ), a Izogena ureazu B negativna mutanta soja (UreB - soj) dobije se kao što je prethodno opisano [27]. Mnogostrukosti infekcije (MOI) od 100 se koristi za infekciju AGS i Ges-1 stanice. Stanice se prikupe za analizu IL-32 mRNA ekspresije. Podaci su srednja vrijednost ± SEM za tri odvojena pokusa. * P izvoznici < 0,05; ** P izvoznici < 0,01; *** P izvoznici < 0,001 pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0088270.s002 pregled (TIF) pregled}}

• PLoS ONE: atrofičnog gastritisa: srodnom faktor za osteoporozu kod starijih Women
• PLO Patogeni: Caveolin-1 štiti miševe od B6129 Helicobacter pylori Gastritis