Las alteraciones de la E-cadherina y β-catenina en el cáncer gástrico

Las alteraciones de la E-cadherina y β-catenina en el cáncer gástrico
Resumen Antecedentes
Francia El complejo de E-cadherina-catenina desempeña un papel crucial en la adhesión célula-célula epitelial y en el mantenimiento de la arquitectura del tejido. Perturbación en la expresión o función de este complejo resulta en la pérdida de adhesión intercelular, con la consiguiente posible la transformación celular y la progresión tumoral.
Métodos
Se estudiaron las alteraciones de E-cadherina y β-catenina en un conjunto de 50 primaria Los tumores gástricos mediante el uso de análisis de pérdida de heterocigosidad (LOH), la detección de mutaciones de genes, la detección de transcritos aberrantes e inmunohistoquímica (IHC).
resultados
una alta frecuencia (75%) de LOH se detectó en 16q22.1 que contiene e locus -cadherin. Tres casos (6%) mostraron la mutación sin sentido idéntico, A592T. Esta mutación no es probable que contribuya fuertemente a la carcinogénesis del cáncer gástrico, debido a una baja frecuencia (1,6%) de esta mutación también se encontró en 187 individuos normales. También se detectó una frecuencia baja (0,36%, 0%) de esta mutación en 280 tumores de mama y otros tumores, incluyendo 444 colon y el recto, pulmón, endometrio, ovario, testículos, riñón, carcinomas de tiroides y sarcomas, respectivamente. También se analizaron los ARNm aberrantes E-cadherina en los tumores gástricos y se encontró que 7 tumores (18%) tuvieron ARNm aberrantes además del mRNA normal. Estos mRNAs aberrantes pueden producir moléculas anormales E-cadherina, lo que resulta en débil adhesión célula-célula y el comportamiento invasivo de las células de carcinoma. La reducción de expresión de E-cadherina y β-catenina se identificó a la frecuencia de 42% y 28%, respectivamente. Especialmente, 11 tumores (22%) mostraron tinción citoplásmica positiva para β-catenina IHC. Se encontró una asociación entre la reducción de la expresión de E-cadherina y β-catenina. Por otra parte, se detectó una asociación entre la reducción de la expresión de E-cadherina y histotype difusa.
Conclusión
Nuestros resultados apoyan la hipótesis de que las alteraciones de E-cadherina y β-catenina juegan un papel en el inicio y la progresión del cáncer gástrico .
Antecedentes
e-cadherina (120 kDa; cromosoma 16q) es una cadherina clásica y forma el componente funcional clave de las uniones de adherencia entre las células epiteliales [1]. Se ve obligada a través de una serie de proteínas undercoat, las cateninas (α, beta y gamma) en el citoesqueleto de actina [1]. Esta conexión entre cadherinas transmembrana y los filamentos de actina del citoesqueleto es necesario formar adhesión célula-célula fuerte. Se requiere catenina complejo para el mantenimiento de adhesión intercelular normal, - un E-cadherina intacta. A la luz de esto, varios grupos han propuesto que en los carcinomas, funciones de E-cadherina como una molécula supresor de la invasión de tal manera que permita su pérdida o mejora de la invasión de los tejidos normales adyacentes. Los estudios inmunohistoquímicos en los cánceres humanos, incluyendo el cáncer gástrico, con frecuencia han demostrado que una proporción de los carcinomas invasivos y los carcinomas in situ
muestran niveles aberrantes de E-cadherina y /o expresión catenina en comparación con su tejido normal relacionada [2-4] . En general, E-cadherina y tinción catenina es fuerte en los cánceres bien diferenciados que mantienen su adhesividad celular y son menos invasivos, pero se reduce en los tumores pobremente diferenciados que han perdido su adhesión célula-célula y mostrando un fuerte comportamiento invasivo [2, 3].
E-cadherina está implicada en la inhibición por contacto del crecimiento celular mediante la inducción de la detención del ciclo celular [5]. Tiene la capacidad para inhibir la proliferación celular mediante la regulación al alza de p27 involucrado en la regulación del ciclo celular [5], aunque el mecanismo por el que la E-cadherina regula p27 todavía no está claro. Por lo tanto, E-cadherina, describe generalmente como un supresor de la invasión [6], puede actuar como un importante supresor de crecimiento /proliferación.
Una función importante de β-catenina en la señalización celular, se ha dilucidado [7]. En ausencia de una señal mitótica de fuera de la célula, β-catenina es secuestrada en un complejo con el producto poliposis adenomatosa coli (APC), un gen de la serina treonina glucógeno sintetasa quinasa (GSK-3β) y un axina adaptador de proteínas (o una conductin homólogo), lo que permite la fosforilación y la degradación de β-catenina libre por el sistema de ubiquitina-proteasoma [8]. Cuando una señal mitótica es entregado por la vía Wnt, por asociación de la familia Wg /Wnt de glicoproteínas secretadas y su receptor de membrana frizzled, que conduce a la activación de la proteína disheveled (DSH), que se reclutó a la membrana celular. El DSH activado regula a la baja el complejo de proteínas, por lo que ya no puede fosforilar β-catenina, que a continuación, no se degrada. La liberación de β-catenina del complejo de fosforilación y degradación promueve la estabilización de β-catenina y la señalización. Esto se traduce en un aumento de la libre citosólica β-catenina, que se transloca al núcleo y se une directamente los factores de transcripción Lef y Tcf, que conduce a la activación de la expresión génica. Por lo tanto β-catenina desempeña funciones distintas en la adhesión célula-célula E-cadherina mediada y en la señalización Wnt [8].
Pérdida del locus E-cadherina en el brazo largo del cromosoma 16 (16q22) se produce en el estómago (24 %), hepatocelular (50%), de mama lobular (50-100%) y esófago (66%) carcinomas [4, 9-12]. Ha habido varios informes sobre las mutaciones del gen E-cadherina en los cánceres humanos [13]. En los tumores pobremente diferenciados, como el cáncer de mama lobular y el cáncer gástrico de tipo difuso, las mutaciones de E-cadherina juegan un papel importante en el desarrollo de tumores [14, 15]. Varios estudios han descrito mutaciones en la línea germinal en el gen de la E-cadherina en las familias con un tipo difuso hereditario del cáncer gástrico [16, 17]. Sólo una minoría de los cánceres gástricos puede explicarse por mutaciones de E-cadherina. mutaciones somáticas frecuentes de gen β-catenina se han encontrado en pequeños adenomas colorrectales y cáncer gástrico de tipo intestinal [18, 19]. La mayoría de las mutaciones implicadas la pérdida de serinas o treoninas de la región de la fosforilación de GSK-3β. alteraciones genéticas en β-catenina abolición de adhesividad célula-célula se han observado en dos líneas celulares de cáncer gástrico, HSC39 y 40A; ambos derivan de la misma carcinoma de células en anillo de sello del estómago y muestran un patrón de crecimiento difuso [20, 21]. Esta mutación da como resultado una β-catenina truncada que carece de la región de interacción con β-catenina. La transfección de estas líneas celulares con los de tipo salvaje β-catenina restaura la adhesividad celular [21].
Aquí, se realizó la cadherina E y beta-catenina mutación génica y análisis de la expresión de una serie de 50 tumores gástricos primarios con el fin de entender mejor la implicación de las alteraciones de la e-cadherina y β-catenina en la carcinogénesis del cáncer gástrico.
Materiales y métodos las muestras

la incluidos en el estudio fueron 50 los tumores y las correspondientes muestras normales, de los cuales dos tumores (17 y 23) eran de la misma familia, el resto esporádica (Tabla 1). Estos casos fueron diagnosticados por el Departamento de Patología, Hospital de la Universidad de Islandia. Se obtuvo tejido recién en el día de la cirugía o a partir de material incluido en parafina. La información relativa al estado del tumor, y el grado histotype también fue adquirido desde el mismo departamento. ADN para la PCR se aisló mediante la proteinasa K tratamiento [22]. ARN para RT-PCR se extrajo usando reactivo Tri (Molecular Research Center, INC. EE.UU.). Para la mutación A592T, seleccionados 187 individuos normales, 280 de mama y otras 444 pacientes con cáncer con colon y el recto, pulmón, endometrio, ovario, testículos, riñón, carcinomas de tiroides y sarcomas. Todos los identificadores individuales se retiraron de las muestras de control antes del análisis, y los investigadores fueron así cegados a la identificación de las muestras que ya no se puede rastrear a individuos específicos. El consentimiento se presume para las muestras de los pacientes. Para los casos 294 y 728 con la mutación A592T, analizamos sus genealogías y se encontró que no hubo otros casos de cáncer en el árbol genealógico de la caja 294, pero había otros 5 casos de cáncer en el árbol genealógico de la caja 728, 2 de los cánceres de próstata, 1 piel cáncer, cáncer de pulmón y 1 1 de cáncer claro origin.Table 1 Resumen de las alteraciones de la e-cadherina y β-catenina en una serie de 50 tumores gástricos.
Tumour

Stage

Type

Grade

LOH

E-cad mutaciones del gen aberrante
ARNm
E-cad
β-cat
Muestra



en 16q22.1
y los polimorfismos y mapa de e-cad
IHC IHC


1

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