Anti-ulcerogena aktiviteten av roten bark extrakt av den afrikanska laburnum "Cassia Sieberiana" och dess effekt på antioxidant försvarssystem hos råttor

Anti-ulcerogena aktiviteten av roten bark extrakt av den afrikanska laburnum "Cassia Sieberiana" Köpa och dess effekt på antioxidant försvarssystem hos råttor Bild Sammanfattning
Bakgrund
Trots den utbredda användningen av rötter Cassia sieberiana
hantera flera hygienkrav inklusive magsår, det finns lite vetenskapliga data för att stödja rationella phytotherapeutics som ett anti-magsårsmedel. Detta dokument redovisar en utvärdering av in vivo
antioxidant egenskaper av en vatten rot bark extrakt av C. sieberiana
i experimentella magsårs råttor i ett försök att belysa dess verkningsmekanism.
Metoder
Fisher 344 (F 344) råttor fick förbehandling av C. sieberiana
rotbarken extrakt (500, 750, och 1000 mg /kg kroppsvikt.) i 7 dagar, varefter det inte fanns induktion av gastrisk skada med absolut etanol. Medelvärdet sårindex (MUI) beräknades och serum total antioxidant nivån bestämdes. Gastric slemhinnevävnader framställdes och aktivitetsnivå enzymerna superoxiddismutas (SOD), katalas (CAT), glutationperoxidas (GPx) och myeloperoxidas (MPO) mättes tillsammans med nivån på hpidhydroperoxider (LPO). Statistisk skillnad mellan behandlingsgrupperna analyserades med användning av envägsanalys av varians (ANOVA) följt av Dunnetts post hoc t
test. Statistisk signifikans beräknades till P < 0.05.
Resultat
administration av etanol utlöste svår akut magsår och förbehandling med C. sieberiana Känner bark extrakt avsevärt och dosberoende skydd mot denna effekt. Roten bark extrakt dos också beroende och signifikant mindre etanolen inducerade minskningen i aktivitetsnivåer enzymerna SOD, CAT och GPX. Extraktet hämmade också den etanol-inducerade minskning i nivån av total serum antioxidant kapacitet. Ökningen av etanol-inducerad LPO nivå och MPO-aktivitet var också signifikant och dosberoende hämmas av roten bark extrakt.
Slutsatser
gastro-cellskyddande effekt, hämning av minskad aktivitet av gastriska antioxidant enzymer och MPO liksom inhibering av gastrisk LPO nivå antyder att en av de mot magsår mekanismer av C. sieberiana
är den anti-oxidant egendom.
Nyckelord
magsår Cassia sieberiana
Superoxiddismutas Katalas glutationperoxidas Lipid hydroperoxid Myeloperoxidas bakgrund
magsår sjukdom (GUD) är ett vanligt problem av mag-tarmkanalen med ökande incidens och prevalens skrivas olika faktorer såsom den utbredda användningen av icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel (NSAID). GUD har rapporterats påverka ca 14,5 miljoner människor i världen med en dödlighet på cirka 4.080.000 [1]. Även om etiologin av magsår är fortfarande diskuteras, är det accepterat att magsår utlöses av en obalans mellan faktorer som skador och de som skyddar magen. Mucosal skada, ett första steg i magsår utveckling, har varit kända för att bero på hyper av HCl genom H +, K + - ATPas åtgärd [2], hyser av H. pylori
på skadade mucin skiktet [3], blockaden av cyklooxygenas enzymsystemet av NSAIDs [4], och oxidativ stress genom reaktiva syrespecies.
reaktiva syrespecies (ROS) och fria radikaler spelar en viktig roll i patogenesen för flera humana sjukdomar inkluderande GUD [5, 6]. Olika studier har också visat att de endogena antioxidantförsvars enzymer spelar en huvudroll i att eliminera ROS och fria radikaler som genereras från inverkan av faktorer som skadar magen. Ett tillvägagångssätt för att hantera GUD därför är genom den eliminerande av ROS och stimulans av de endogena antioxiderande enzymer i magen förutom de andra metoder som inhiberingen av gastrisk H +, K + - ATPas och eliminering av H. pylori
med antibiotika.
Cassia sieberiana
(Cassia kotschyana
Oliv .; Fam. Caesalpinaceae), är en savann träd som växer till ca 15 m lång och är vanligen ganska odlas på grund av dess attraktiva blossom och nyfikna frukter (vanligen kallat den afrikanska laburnum). C. sieberiana
har ett mycket brett spektrum av fytoterapiska ansökan i Ghana, inklusive användningen av sina rötter i hanteringen av bråck, spetälska, matsmältningsbesvär och magsår [7]. Studier av Nartey et al. [8] rapporterade att vatten roten bark extrakt av C. sieberiana
besitter gastro-cellskyddande, anti-sekretoriska och magsår läkande egenskaper med förslaget att dess anti-ulcerogen aktivitet kan bero på hämning av H + K + - ATPas protonpumps och ökad aktivitet av gastriska antioxidativa enzymer. I en annan studie av Nartey et al. [9], vatten rot bark extrakt visat sig ha in vitro
fria radikaler och antioxiderande egenskaper och kan stimulera produktionen av gastrointestinala prostaglandiner E 2 och jag 2. Syftet med denna studie var därför att bedöma den gastro-cytoprotektiva effekten av rotbarken extrakt av C. sieberiana
i jämförelse med ranitidin i en modell av etanol-framkallat magsår hos råttor och att framkalla det underliggande in vivo
anti-oxidativa mekanismer. För detta ändamål, var rollen av roten bark extrakt i oxidativ stress studerades genom att mäta förändringar i aktivitetsnivåer av superoxiddismutas (SOD), katalas (CAT) och glutationperoxidas (GPx). Dessutom den totala antioxidant kapacitet på blodserum, graden av lipidperoxidation (LPO) och aktivitetsnivån av myeloperoxidas (MPO) som en markör för neutrofil infiltrering i magen homogenat mättes också.
Metoder
Beredning av rot bark extrakt
Färska rötter C. sieberiana
(Cassia kotschyana Oliv
.) erhölls från grunderna för University of Ghana, bestyrkta i Ghana herbarium och framställdes som tidigare beskrivits av Nartey et al. [8]. I korthet innebar detta hackad färsk rot bark av C. sieberiana
(750 g) jordad och blandas med 1 liter vatten och fick stå i 24 timmar. Den resulterande soppa indunstades under reducerat tryck med rotationsindunstare vid 30 ° C och koncentratet frystorkades för att ge fast material, som lagrades vid 4 ° C och användes inom 4 veckors produktion.
Djur
Fisher 344 (F 344) råttor som vägde 230,3 ± 14,5 g (medelvärde ± SD) av båda könen användes för studierna. De har uppkommit på standardlaboratoriediet (GAFCO, Tema, Ghana). Den djurförsök som beskrivs i denna studie har godkänts av den vetenskapliga och tekniska kommittén för Noguchi Memorial Institute for Medical Research (NMIMR) vid universitetet i Ghana och genomfördes i enlighet med internationellt vedertagna principer för användning i laboratorier djur och omsorg.
kemikalier och reagens sälja The enzymimmunoanalys kit för totala antioxidanter (Post˅.001), lipid peroxid-LPO (Postˁ.002), superoxiddismutas-SOD (Post˂.002), katalas-CAT (Post˃.002) och glutationperoxidas-GPx (punktʿ.102), erhölls från Cayman Chemical Company (Ann Arbor, USA). Proteinanalyssats (punktˀ.002) erhölls också från Cayman Chemical Company (Ann Arbor, U.S.A.). Alla andra kemikalier och reagens erhölls från Sigma-Aldrich Chemical Company, St. Louis, MO, USA
Administration av växtextrakt och induktion av magsår
Olika koncentrationer av C. sieberiana
root bark extrakt (upplöst i vatten som vehikel) administrerades genom oral sondmatning till de olika djurgrupperna (sex djur per grupp) vid 12 timmars intervall i en total volym av 2 ml under 7 dagar. Koncentrationen av växtextraktet bestämdes baserat på den tidigare rapport av Nartey et al. [8]. En timme efter den sista administreringen av roten bark extrakt och efter fasta över natten, erhöll djuren absolut etanol (1 ml /200 g kroppsvikt) via samma väg [10]. En timme efter administreringen av etanol, fick djuren avlivas och blod uppsamlas genom hjärtpunktion. Serum separerades och användes för bestämning av den totala antioxidant kapacitet. Magarna avlägsnades sedan, uppskuren längs den större krökningen och spolas försiktigt med ljummet vatten. Därefter magslemhinnan observerats för lesioner med hjälp av ett förstoringsglas och svårighetsgraden av de mukosala lesioner skårade i enlighet med metoden av Marhueda et al. [11]. Fordonet (vatten) och ranitidin (50 mg /kg kroppsvikt) administrerades på liknande sätt som den C. sieberiana
rotbark extrakt. Såret betyget för varje djur bestämdes och medelvärdet sårindex (MUI) och procent hämning för varje grupp beräknas på följande sätt: MUI
=
Totalt
sår
score
Antal
av
råttor
såriga
(1) %
Inhibition
=
MUI
av
etanol
behandlas
-
MUI
av
extrakt
förbehandlade
UI
av
etanol
behandlas
×
100
(2) Total antioxidant kapacitet
kapacitet av den totala anti-oxidanter i serum analyserades enligt instruktioner från Cayman Chemical Company (Ann Arbor, USA). I korthet blodet tilläts att koagulera under 30 min och centrifugerades därefter vid 2000 g under 15 min vid 4 ° C. Den resulterande supernatanten analyserades för total antioxidant kapacitet med användning av Cayman antioxidant analyskit (Post˅001).
Bestämning av LPO nivåer och antioxidant enzymer aktiviteter
I andra uppsättning experiment efter eutanasi magarna avlägsnades snabbt, sköljdes i fosfatbuffrad saltlösning (PBS, pH 7,4) och vägdes. Magarna sedan homogeniseras och centrifugeras enligt standardprocedurer med användning av ELISA-kit från Cayman Chemical Company (Ann Arbor, USA) och supernatanten analyserades enligt instruktioner för bestämning av LPO (punktˁ.002) och aktiviteten hos de antioxiderande enzymer SOD (punkt˂.002), CAT (punkt˃.002) och GPX (punktʿ.102). Proteinnivåer uppskattades av proteinanalysutrustningar (Postˀ.002) från Cayman Chemical Company (Ann Arbor, USA).
Fastställande av myeloperoxidas (MPO) aktivitet
I en annan uppsättning experiment, omedelbart efter dödshjälp Magarna snabbt avlägsnades, homogeniserades (1:10 vikt /volym) i 0,5% hexadecyltrimetylammoniumbromid (Sigma- Aldrich Chemical Company, USA) i 50 mmol kaliumfosfatbuffert (pH 6,0) och analyserades medelst metoden enligt Bradley et al. [12] såsom beskrivits av Tariq et al. [13]. MPO-aktivitet i gastriska vävnader uttrycktes som

• Somatiska ramskiftningsmutationer i Bloom syndrom BLM gen är vanliga i sporadiska gastric karcinom med mikro mutator phenotype
• Lactobacillus acidophilus lindrar H. pylori-inducerad gastrisk inflammation genom att inaktivera Smad7 och NFkB pathways