Anti-ulcerogent aktivitet av roten bark ekstrakt av det afrikanske gullregn "Cassia sieberiana" Hotell og dens effekt på antioksidant forsvar systemet hos rotter
Abstract
Bakgrunn
Til tross for den utbredte bruken av røtter Cassia sieberiana
i å håndtere flere helsemessige forhold, inkludert magesår sykdom, det er lite vitenskapelige data å støtte rasjonelle phytotherapeutics som en anti-sår agent. Dette papiret rapporterer en evaluering av in vivo
antioksidant egenskaper av en vandig rot bark ekstrakt av C. sieberiana
i eksperimentelle magesår rotter i et forsøk på å belyse virkningsmekanismen.
Metoder
Fisher 344 (F
344) rotter mottok forbehandling av C. sieberiana
rotbarken ekstrakt (500, 750, og 1000 mg /kg kropps wt.) i 7 dager, hvoretter det ble induksjon av gastrisk skade med absolutt etanol. Den midlere sårindeks (MUI) ble beregnet, og serum total antioksidant nivå bestemt. Gastrisk slimhinnevevet ble fremstilt og aktiviteten av de enzymer superoksid dismutase (SOD), katalase (CAT), glutationperoksidase (GPX) og myeloperoksidase (MPO) ble målt sammen med nivået av lipid hydroperoksider (LPO). Statistisk forskjell mellom behandlingsgruppene ble analysert ved hjelp av enveis variansanalyse (ANOVA) etterfulgt av Dunnetts post hoc t
test. Statistisk signifikans ble beregnet til P < 0.05.
Resultater
administrasjon av etanol utløst alvorlig akutt magesår og forbehandling med C. sieberiana
root bark ekstrakt vesentlig og doseavhengig beskyttet mot denne effekten. Roten bark extract også avhengig av dose og betydelig hemmet etanol indusert reduksjon i aktivitetsnivået i enzymer SOD, CAT og GPX. Ekstraktet også hemmet etanol-induserte reduksjon i nivået av serum total antioksidant kapasitet. Økningen i etanol-indusert LPO nivå og MPO aktivitet var også signifikant og doseavhengig inhibert av rotbarken ekstrakt
. Konklusjoner
gastro-cytobeskyttende effekt, inhibering av reduksjon i aktiviteten av gastriske anti-oksiderende enzymer og MPO så vel som inhibering av mave LPO nivå antyder at ett av de anti-ulcer-mekanismer for C. sieberiana
er den anti-oxidant egenskap.
nøkkelord
magesår Cassia sieberiana
Superoxide dismutase Katalase glutationperoksidase Lipid hydroperoxide Myeloperoxidase Bakgrunn
magesår sykdom (GUD) er et vanlig problem i mage-tarmkanalen med økende forekomsten og utbredelsen skyldes ulike faktorer, blant annet utstrakt bruk av ikke-steroide antiinflammatoriske midler (NSAIDs). GUD er rapportert å påvirke om lag 14,5 millioner mennesker over hele verden med en dødelighet på rundt 4.08 million [1]. Selv om etiologien av magesår er fortsatt debattert, er det akseptert at magesår er utløst av en ubalanse mellom faktorer som skader og de som beskytter magen. Mucosal skade, et første skritt i magesår utvikling, har vært kjent for å være på grunn av hypersekresjon av HCl til og med H +, K + - ATPase handling [2], husing av H. pylori
på skadede mucin lag [3], blokaden av cyklooksygenase-enzymsystemet av NSAIDs [4], og oksidativt stress av reaktive oksygenarter.
reaktive oksygenarter (ROS) og frie radikaler spiller en viktig rolle i patogenesen av flere human sykdommer omfattende GUD [5, 6]. Forskjellige studier har også vist at de endogene anti-oksiderende forsvars enzymer spiller en hovedrolle i å eliminere ROS og frie radikaler som genereres fra virkningen av faktorer som skader i magesekken. En tilnærming for å styre GUD, derfor, er gjennom scavenging av ROS og stimuleringen av de endogene anti-oksiderende enzymer i magen i tillegg til de andre tilnærminger som inhibering av gastrisk H +, K + - ATPase og eliminering av H. pylori
bruk av antibiotika.
Cassia sieberiana product: (Cassia kotschyana
Oliv .; Fam. Caesalpinaceae), er en savanne tre som vokser til ca 15 m høy og er vanligvis ganske dyrket på grunn av sin attraktive blomstre og nysgjerrige frukt (ofte referert til som den afrikanske gullregn). C. sieberiana
har et meget bredt spekter av fytoterapeutiske søknad i Ghana inkludert bruk av sine røtter i forvaltningen av brokk, spedalskhet, dårlig fordøyelse og magesår [7]. Studier av Nartey et al. [8] rapporterte at den vandige rotbarken ekstrakt av C. sieberiana
besitter gastro-cytobeskyttende, anti-sekretoriske og sår helbredende egenskaper med forslaget om at dens anti-ulcerogene aktivitet kan skyldes hemming av H + K + - ATPase protonpumpe og økt aktivitet av mage anti-oksidative enzymer. I en annen studie av Nartey et al. [9], ble det vandige rotbarken ekstrakt vist å ha in vitro
frie radikaler, dvs og anti-oksiderende egenskaper og kan stimulere produksjonen av gastrisk mucosal prostaglandiner E 2, og I 2. Hensikten med denne studien var derfor å vurdere den gastro-cytobeskyttende effekt av rotbarken ekstrakt av C. sieberiana
sammenlignet med ranitidin i en modell av etanol-indusert ulcus hos rotter, og til å fremkalle den underliggende in vivo
anti-oksidative mekanismer. For dette formål, ble rollen til rotbarken ekstrakt i oksidativt stress studert ved å måle forandringer i aktivitetsnivået av superoksid dismutase (SOD), katalase (CAT) og glutation-peroksydase (GPX). I tillegg er den totale antioksidant kapasitet på blodserum, graden av lipidperoksydasjon (LPO) og aktiviteten av myeloperoksidase (MPO) som en markør av neutrofil infiltrering av mage homogenatene ble også målt.
Methods
Utarbeidelse av rot bark ekstrakt
Friske røtter C. sieberiana plakater (Cassia kotschyana Oliv
.) ble hentet fra den begrunnelse av University of Ghana, autentiserte på Ghana herbarium og forberedt som tidligere beskrevet av Nartey et al. [8]. Kort sagt ble hakkede friske rot barken av C. sieberiana product: (750 g) jordet og blandet med 1 liter vann og hensatt i 24 timer. Den resulterende blanding ble fordampet under redusert trykk med en rotasjonsfordamper ved 30 ° C, og konsentratet frysetørket for å gi fast materiale som ble lagret ved 4 ° C og anvendt innen 4 uker etter produksjon
. Dyr
Fisher 344 (F 344) rotter med vekt på 230,3 ± 14,5 g (gjennomsnitt ± SD) av begge kjønn ble benyttet for studiene. De ble reist på standard laboratorie diett (GAFCO, Tema, Ghana). Den dyreforsøk er beskrevet i denne studien ble godkjent av vitenskapelige og tekniske komité av Noguchi Memorial Institute for Medical Research (NMIMR) ved Universitetet i Ghana og ble gjennomført i samsvar med internasjonalt anerkjente prinsipper for forsøksdyr bruk og omsorg.
kjemikalier og reagenser
enzymimmunoassay kits for total anti-oksidanter (Varenummer: 709001) lipid hydroperoksid-LPO (Varenummer: 705002), superoksid dismutase-SOD (Varenummer 706002), katalase-CAT (Varenummer 707002) og glutationperoksidase-GPX (Varenummer 703102), ble hentet fra Cayman Chemical Company (Ann Arbor, USA). Protein Assay Kit (Varenummer 704002) ble også hentet fra Cayman Chemical Company (Ann Arbor, U.S.A.). Alle andre kjemikalier og reagenser ble oppnådd fra Sigma-Aldrich Chemical Company, St. Louis, Missouri, USA
Administrasjon av plante ekstrakt og induksjon av magesår
Ulike konsentrasjoner av C. sieberiana
root bark extract (oppløst i vann som bærer) ble administrert ved oral føring til de forskjellige dyregrupper (seks dyr pr gruppe) med 12 timers intervaller i et totalvolum på 2 ml i 7 dager. Konsentrasjonen av anlegget ekstrakt ble fastsatt basert på tidligere rapport fra Nartey et al. [8]. En time etter den siste administrering av rotbarken ekstrakt og etter faste over natten, mottok dyrene absolutt etanol (1 ml /200 g kroppsvekt) ved den samme rute [10]. En time etter administrering av etanol, ble dyrene avlivet og blodet oppsamlet ved hjertepunksjon. Serum ble separert og anvendt for bestemmelse av total antioksidant kapasitet. Magesekkene ble deretter fjernet, skåret opp langs den store kurvatur og skylles forsiktig med lunkent vann. Deretter ble den mageslimhinnen observert for lesjoner ved hjelp av et forstørrelsesglass og alvorlighetsgraden av slimhinnelesjoner skåret i henhold til fremgangsmåten ifølge Marhueda et al. [11]. Kjøretøyet (vann) og ranitidin (50 mg /kg kroppsvekt) ble administrert på samme måte som C. sieberiana
rotbarken ekstrakt. Såret poengsum for hvert dyr ble bestemt, og gjennomsnittlig sår indeks (MUI) og prosentvis hemming for hver gruppe beregnes slik: MUI
=
Total
sår
scorer
Antall
av
rotter
sårdannelse product: (1) %
Hemming
=
MUI
av
etanol
behandlet
-
MUI
av
ekstrakt
forbehandlet
UI
av
etanol
behandlet
×
100 product: (2) Samlet antioksidant kapasitet
kapasitet av de totale anti-oksidanter i serumet ble analysert i henhold til instruksjonene fra Cayman Chemical Company (Ann Arbor, USA). I korthet blodet ble tillatt å koagulere i 30 minutter og deretter sentrifugert ved 2000 g i 15 min ved 4 ° C. Den resulterende supernatanten ble analysert for totalt antioksidant kapasitet ved bruk av Cayman anti-oxidant analysesett (Varenummer 709001).
Bestemmelse av LPO nivåer og anti-oksiderende enzymer aktiviteter
I andre sett av eksperimenter, etter eutanasi magene ble raskt fjernet, renset i fosfatbufret saltvann (PBS, pH 7,4) og veiet. Magesekkene ble deretter homogenisert og sentrifugert i henhold til standard prosedyrer ved anvendelse av ELISA-kit fra Cayman Chemical Company (Ann Arbor, USA) og supernatanten ble analysert i henhold til instruksjoner for bestemmelse av LPO (Varenummer 705 002), og aktiviteten av den anti-oksiderende enzymer SOD (Varenummer 706002), CAT (Varenummer 707002) og GPX (Varenummer 703102). Protein nivåer ble anslått av protein analysesett (Varenummer: 704002) fra Cayman Chemical Company (Ann Arbor, USA).
Bestemmelse av myeloperoxidase (MPO) aktivitet
I et annet sett av forsøket, rett etter eutanasi magene var raskt fjernet, homogenisert (1:10 vekt /volum) i 0,5% hexadecyltrimethyl ammoniumbromid (Sigma-Aldrich Chemical Company, USA) i 50 mmol kaliumfosfatbuffer (pH 6,0) og analysert ved metoden til Bradley et al. [12] som beskrevet av Tariq et al. [1. 3]. MPO-aktivitet i mage-vev ble uttrykt som pmol /min /mg vev.
Statistisk analyse
Sammenligninger mellom middel ble utført ved anvendelse av enveis variansanalyse (ANOVA) etterfulgt av Dunnetts post hoc t-test for å bestemme
statistisk signifikans. P < 0,05 ble betraktet som signifikant.
Resultater
Anti-ulcer-aktivitet
følge av effekten av etanol på sårindeks er vist i Tabell 1. Behandling av rotter med absolutt etanol produsert store magesår i kjertelslimhinnen magen i alle kontrolldyrene. Gjennomsnittlig sår indeks (MUI) ble funnet å være 8,00 ± 0,37 i kontrolldyrene (tabell 1). Forbehandling av rotter med C. sieberiana
rotbarken ekstrakt i doser på 500 mg /kg (MUI, 5,83 ± 0,31), 750 mg /kg (MUI, 4,00 ± 0,37), og 1000 mg /kg (MUI, 1,170 ± 0,17) i 7 dager, signifikant og doseavhengig inhiberte dannelsen av gastriske lesjoner (p < 0,001). Det var 27,50%, 50,00% og 85,38% beskyttelse i CS-500, CS-750 og CS-1000 gruppene henholdsvis (figur 1). Det var ingen signifikant forskjell (p 0,05) i sår-inhibering mellom ranitidin-forhåndsbehandlede kontrollgruppen (81,25%) og CS-1000 gruppe (85,38%) Tabell 1 Effekt av C. sieberiana (CS) rotbarken ekstrakt på. sår indeksen i etanolinduserte magesår rotter
Behandling
Dose (mg /kg kropps vekt.)
Mean sår indeksen [Resultat 0-10] (Mean ± SEM)
Baseline (intakt) -
-
Sår kontroll
Vehicle
8,00 ± 0,37
CS-ekstrakt
500
5,80 ± 0.31a
"
750
4,00 ± 0.37b, c
"
1000
1,17 ± 0.17b, d
Ranitidine
50
1,50 ± 0.22b
en p < 0,05 sammenlignet med sår kontroll; b p < 0.001 sammenlignet med sår kontroll; c p < 0,05 sammenlignet med CS-500; d p < 0,01 sammenlignet med CS-750; Verdier er gjennomsnitt ± SEM av 6 dyr. Statistisk signifikans ble bestemt ved en-veis analyse av varians (ANOVA) etterfulgt av Dunnetts post hoc t
test.
Figur 1. Effekt av C. sieberiana (CS) rotbarken ekstrakten på magesår inhibering i F 344 rotter.
lipidperoksidasjon indeks
Tabell 2 viser at behandling av dyr med absolutt etanol induserte dannelsen av betydelige mengder (p < 0,001) av LPO fra 2,85 ± 0,17 nmol /mg protein i referanse (intakte) til 8,34 ± 0,13 nmol /mg protein i sår kontroll. Administrasjon av planteekstrakten signifikant (p < 0,001) inhiberte genereringen av lipid hydroperoksyder på en doseavhengig måte. Den høye dosen av C. sieberiana plakater (CS-1000) hemmet generering av LPO fra 8,34 ± 0,13 nmol /mg protein i sår kontrollen til 3,13 ± 0,13 nmol /mg protein som var betydelig høyere (p < 0,001) enn effekten av ranitidin (5,09 ± 0,06 nmol /mg protein) .table 2 effekt av C. sieberiana (CS) rot bark extract på lipidperoksidasjon indekser i etanolinduserte magesår rotter
Behandling
Dose ( mg /kg kroppsvekt)
LPO (nmol /mg protein)
MPO (mikromol /min /mg vev)
Baseline (intakt) Anmeldelser -.
2,85 ± 0,17
2,80 ± 0,20
Sår kontroll
Vehicle
8,34 ± 0.13a
9,20 ± 0.26a
CS-ekstrakt
500
6,68 ± 0,11 b
6,13 ± 0.27b
"
750
5,30 ± 0.15b, c
4,49 ± 0.12b, f
"
1000
3,13 ± 0.17b, d
3,27 ± 0.10b, d
Ranitidine
50
5,09 ± 0.06b, e
4,22 ± 0.08b, e
en p < 0.001 sammenlignet med baseline; b p < 0.001 sammenlignet med sår kontroll; c p < 0.001 sammenlignet med CS-500; d p < 0.001 sammenlignet med CS-750; e p < 0.001 sammenlignet med CS-1000; f p < 0,05 sammenlignet med CS-500; Verdier er gjennomsnitt ± SEM av 6 dyr. Statistisk signifikans ble bestemt ved en-veis analyse av varians (ANOVA) etterfulgt av Dunnetts post hoc t
test
MPO aktivitet
Tabell 2 viser at aktiviteten av mave MPO betydelig høyere (p < 0,001). fra 2,80 ± 0,20 umol /min /mg vev i referanse (intakte) gruppe til 9,20 ± 0,26 umol /min /mg vev når rottene ble administrert etanol. Forbehandling med forskjellige doser av ekstraktet signifikant (p < 0,001) attenuert etanol-induserte økning av gastrisk MPO aktivitet i rotter på en doseavhengig måte som var tilsvarende effekten av ranitidin. Men virkningen av den høye dosen av C. sieberiana
rotbarken ekstrakt (CS-1000) (3,27 ± 0,10 umol /min /mg vev) var signifikant høyere (p < 0,001) enn den til ranitidin (4,22 ± 0,08 umol /min /mg vev), referanse anti-sår middel.
serum samlet anti-oxidant kapasitet
resultatene i figur 2 viser effekten av behandlinger på total antioksidant kapasitet i serum. Analyse av resultatene viser at ubehandlede dyr indusert med magesår viste en signifikant reduksjon (p < 0,001) i serum totale anti-oksidanter (1,93 ± 0,07 pmol /mg protein) når sammenlignet med det intakte gastriske slimhinne (4,76 ± 0,04 umol /mg protein). Dyr forbehandlet med ranitidin og ekstrakt ved de tre testede doser, ble en signifikant doseavhengig økning i samlet serum anti-oksidanter. Denne forbedringen er størst (4,77 ± 0,07 mikromol /mg protein) i gruppen som fikk høy dose C sieberiana
root bark extract (CS-1000). Pre-behandling av dyr med ranitidin, standard anti-ulcus legemiddel viste betydelig lavere totalt serum-anti-oxidant kapasitet sammenlignet med CS-1000 (p 0,01). Figur 2 Effekt av C. sieberiana (CS) planteekstrakt på serum total antioksidant kapasitet i F 344 rats.a p < 0,001 sammenlignet med baseline (intakt); b p < 0,001 sammenlignet med sår kontroll; c p < 0,05 sammenlignet med CS-500; d p < 0,001 sammenlignet med CS-750; e p < 0,01 sammenlignet med CS-1000; Verdier er gjennomsnitt ± SEM av 6 dyr. Statistisk signifikans ble bestemt ved en-veis analyse av varians (ANOVA) etterfulgt av Dunnetts post hoc t
test.
SOD-aktivitet
Resultatene i figur 3 representerer effekten av forskjellige behandlinger på SOD-aktivitet. Analyse av figuren viser at aktiviteten av SOD ble signifikant redusert (p < 0,001) i gastrisk mucosa fra dyr eksponert til etanol (Sår kontroll) (2,56 ± 0,11 U /mg protein), sammenlignet med den respektive verdien i intakte gastriske slimhinnen (baseline) (5,80 ± 0,06 U /mg protein). Forbehandling av rotter med C. sieberiana
i 7 dager viste en doseavhengig signifikant (p < 0,001) inhibering av effekten av etanol i avtagende SOD. Forbehandling med ranitidin viste også en signifikant (p < 0,001) inhibering av effekten av etanol på gastrisk mucosal SOD, men dette var lavere (p 0,01) enn virkningen av CS-1000. Figur 3 Effekt av C. sieberiana (CS) planteekstrakt på slimhinnene superoksid dismutase aktivitet i F 344 rats.a p < 0,001 sammenlignet med baseline (intakt); b p < 0,001 sammenlignet med sår kontroll; c p < 0,001 sammenlignet med CS-500; d p < 0,001 sammenlignet med CS-750; e p < 0,01 sammenlignet med CS-1000; Verdier er gjennomsnitt ± SEM av 6 dyr. Statistisk signifikans ble bestemt ved en-veis analyse av varians (ANOVA) etterfulgt av Dunnetts post hoc t
test.
CAT-aktivitet
Resultatene av effekten av forskjellige behandlinger på katalaseaktivitet er vist i figur 4. aktiviteten av katalasen i mageslimhinnen i betydelig grad varieres etter etanolbehandling, reduseres fra 7,67 ± 0,16 nmol /min /mg protein i referanse (intakte) gruppe til 4,64 ± 0,08 nmol /min /mg protein i gruppen eksponert mot etanol (Sår styre ). Figur 4 viser også at forbehandling av dyrene med forskjellige doser av rotbarken ekstrakt i 7 dager inhiberte signifikant effekt av etanolen på CAT på en doseavhengig måte. Rotter administrert 1000mg /kg bd. vekten av ekstraktet betydelig økt (p < 0,001) CAT-aktivitet fra 4,64 ± 0,08 nmol /min /mg protein i sår kontrollen til 7,76 ± 0,08 nmol /min /mg protein i CS-1000. Denne økningen i CAT-aktiviteten var signifikant høyere (p < 0,001) enn det som er registrert for ranitidin (6,27 ± 0,05 nmol /min /mg protein). Figur 4 Effekt av C. sieberiana (CS) planteekstrakt på slimhinnene katalase aktivitet i F 344 rats.a p < 0,001 sammenlignet med baseline (intakt); b p < 0,01 sammenlignet med sår kontroll; c p < 0,001 sammenlignet med sår kontroll; d p < 0,01 sammenlignet med CS-500; e p < 0,001 sammenlignet med CS-750; f p < 0,001 sammenlignet med CS-1000; Verdier er gjennomsnitt ± SEM av 6 dyr. Statistisk signifikans ble bestemt ved en-veis analyse av varians (ANOVA) etterfulgt av Dunnetts post hoc t
test.
GPX aktivitet
Effekten av ekstraktet og ranitidin, en referanse-forbindelse på aktiviteten av GPX finnes vist i figur 5. Figuren viser at administreringen av etanol betydelig redusert (p < 0,001) aktiviteten av GPX fra 3,75 ± 0,16 nmol /min /mg protein i referanse (intakte) til 1,57 ± 0,16 nmol /min /mg protein i sår kontroll. Alle tre doser av C. sieberiana
inhiberte signifikant effekt av etanol på GPX sammenlignet med sår kontroll. CS-1000 lyktes i å indusere en signifikant forbedring (p < 0,001) i GPX-aktivitet sammenlignet med sår kontroll og denne effekten var lignende, men signifikant høyere (p 0,01) til den av ranitidin. Figur 5 Effekt av C. sieberiana (CS) planteekstrakt på slimhinnene glutationperoksidase aktivitet i F 344 rats.a p < 0,001 sammenlignet med baseline (intakt); b p < 0,01 sammenlignet med sår kontroll; c p < 0,001 sammenlignet med sår kontroll; d p < 0,01 sammenlignet med CS-500; e p < 0,05 sammenlignet med CS-750; f p < 0,01 sammenlignet med CS-1000; Verdier er gjennomsnitt ± SEM av 6 dyr. Statistisk signifikans ble bestemt ved en-veis analyse av varians (ANOVA) etterfulgt av Dunnetts post hoc t
test.
Diskusjon
Magesår sykdom er en multi-faktoriell sykdom og den betydelige rolle som spilles av reaktive oksygenforbindelser og frie radikaler [5] i løpet av sin patogenesen er godt eksperimentert både menneskelige og forsøksdyr [14]. Administreringen av absolutt etanol i induksjon av magesår i eksperimentelle rotter er en av flere metoder som benyttes ved vurdering av mage-cyto-beskyttende virkning av anti-ulcer-midler. Den skadelige effekten av absolutt etanol i magen som et resultat av overfladisk aggressiv nekrose på grunn av økt lipidperoksidasjon omfatter også forskjellige mediatorer som lipoksygenase, cytokiner [15], og overdreven dannelse av oxygen-avledede fri radikaler [16].
fore~~POS=TRUNC liggende~~POS=HEADCOMP studie ble foretatt for å undersøke den in-vivo
antioksiderende effekt av rotbarken ekstrakt av C. sieberiana
i en modell av etanol-induserte magesår hos rotter. Resultatene av denne studien viser at oral administrering av C. sieberiana
rotbarken ekstrakt hadde en signifikant og doseavhengig økning av MUI inhibering (prosent) mot etanolinduserte gastriske lesjoner (figur 1). Sammenlignet med de ubehandlede sår kontrolldyrene, ved hemming av gastrisk ulcus var 27,50%, 50,00% og 85,38%, respektivt for dyr forbehandlet med 500 mg /kg, 750 mg /kg og 1000 mg /kg kroppsvekt av C. sieberiana
. Disse dataene tyder på at C. sieberiana
rot bark extract besitter sterke mage-cytoprotective egenskaper mot etanolinduserte magesår. Dette er i samsvar med tidligere rapporter at roten bark extract besitter anti-ulcerogene egenskaper i andre indusert magesår dyremodeller [8] og støttes av hemming av nedgang på de anti-oksidative enzymer SOD, CAT og GPX.
den endogene antioksidant enzymer SOD, CAT og GPX i mage mucus er en nøkkelkomponent i celle forsvarssystem mot reaktive oksygenforbindelser. SOD katalyserer dismutering av O 2 - til H 2o 2 som deretter ryddet vekk av CAT og GPX. Aktiviteten av GPX fører til eliminering av lipid hydroperoksyder og følgelig spiller en viktig rolle i cellebeskyttelse [17]. Således kan inhibering av aktiviteten til disse enzymene i den gastriske slimhinne ved etanol resultere i akkumulering av hydrogenperoksyd med påfølgende oksidasjon av lipider som til slutt vil føre til tap av membranintegritet. Resultatene fra denne studien viser at etanol administrasjon betydelig redusert (p < 0,001) aktivitetene til SOD, CAT og GPX og også serum total antioksidant kapasitet sammenlignet med de un-sårdannelse baseline dyr. Denne observasjonen ble gjort 1 time etter absolutt etanol administrasjon. En reduksjon av SOD, CAT og GPX aktivitet i mageslimhinnen hos rotter som utsettes for etanol fører til akkumulering av ROS og følgelig til en økning i lipid-peroksydasjon konsentrasjon og følgelig en økt mucosal skade som fremgår av økningen i MUI. Disse observasjonene bekrefter funnene i flere studier, som rapporterte endringer i antioksidant enzymaktivitet i etanol eksponerte dyr [18-22]. Den doseavhengige inhibering av etanol-indusert reduksjon i aktivitet i mage-SOD, CAT og GPX når dyrene hvor forbehandlet med C. sieberiana
indikerer at rotbarken ekstrakt inneholder bioaktive stoffer som kan stimulere aktiviteten av den endogene gastrisk antioksidant enzymsystem. Den induserte aktiviteten av antioksidant forsvar ble støttet av en økning i serum total antioksidantkapasitet, reduksjon i lipid hydroperoksider (LPO) og hemming av myeloperoxidase (MPO) aktivitet.
Induced SOD, CAT og GPX aktiviteter forklarer nedgangen i LPO fra 8,34 ± 0,13 nmol /mg protein i sår kontrollen til 3,13 ± 0,13 nmol /mg protein i CS-1000 som er i sammenheng med vedlikehold av baseline (intakte) enzym aktivitet av SOD, CAT og GPX (p > 0,05) . Den gastro-cytobeskyttende effekt av rotbarken ekstraktet ble også ledsaget av hemming av etanol-indusert økning i MPO fra 9,20 ± 0,26 umol /min /mg vev i sår kontrollen til 3,27 ± 0,10 umol /min /mg vev i CS-1000 . MPO analyse er mye brukt som en indeks av nøytrofile infiltrasjon i ulike magesår modeller [23-25]. Nøytrofiler er hoved inflammatorisk celletype infiltrering av skadde mucosa følgende eksponering til etanol [26] og strategier for å motvirke infiltrasjon og /eller aktivering av nøytrofile celler er blitt vist å beskytte dyrene mot mavesår [27]. Effekten av C sieberiana
til å inhibere økning av MPO-aktivitet kan derfor være relatert til dets gastro-cytobeskyttende evne. Denne hemming av nøytrofile aktiveringen er i overensstemmelse med tidligere studier at roten bark ekstrakt har anti-inflammatorisk egenskaper [9, 28].
In-vivo
antioksidant eiendom C. sieberiana
rotbarken ekstrakt demonstrert i denne undersøkelsen kan være på grunn av tilstedeværelsen av flavonol /flavonoid /flavon eller beslektede forbindelser med polyhydroksy og /eller fenolgrupper som vi tidligere hadde påvist ved fytokjemisk analyse [9]. Videre studier vi tidligere utført [9] vist at TLC spots avslørt av fluorescens under UV-lys og deres reaksjon med jernklorid foreslå at flavonol /flavonoid /flavone eller relaterte forbindelser med polyhydroksylavere og /eller fenoliske grupper utgjorde store kjemiske stoffer i roten bark extract . Flavonoider eller polyphenolic stoffer slukke ROS, chelatere metallioner og regenerere membranbundne anti-oksidanter, og det er vist at stoffer med anti-oksiderende egenskaper, slik som polyfenoliske forbindelser, kan beskytte mot mage-skadelige effekter forårsaket av etanol [29-35 ].
Konklusjon
som konklusjon, de foreliggende resultater antyder at den gastro-cytobeskyttende effekt av C. sieberiana
rotbarken ekstrakt mot slimhinneskade indusert ved etanol kan bli mediert i det minste delvis ved dets evne til å stimulere og dermed opprettholde baseline aktivitetsnivå slimhinne antioksidant enzymer som SOD, CAT og gpx som utgjør endogene åtseletere av ROS. Denne virkning understøttes ved den økning av serum total antioksydant nivå og inhibering av økningen i LPO i tillegg til inhibering av MPO enzymaktiviteten for å opprettholde dem i nærheten av basalnivået
Forkortelser
CS.:
Cassia sieberiana
CAT:
Catalase
F344:
Fisher 344
GPX:
glutationperoksidase
LPO:
Lipid hydroperoxide
MPO: