Antimikrobiell aktivitet, akut toxicitet och cellskyddande effekt av crassocephalum vitellinum (Benth.) S. Moore extrakt i en råtta etanol-HCI magsår model

antimikrobiell aktivitet, akut toxicitet och cellskyddande effekt av crassocephalum vitellinum (Benth.) S. Moore extrakt i en råtta etanol-HCI magsår modell Bild Sammanfattning
bakgrund Review, en dekokt av Crassocephallum vitellinum
(Benth.) S. Moore (Asteraceae) används i Kagera att behandla magsår. Denna studie syftar till att utvärdera en vattenetanolextrakt av flygbilder delar av anläggningen för säkerhet och effekt.
Metoder Review, en 80% etanolextrakt av C. vitellinum
vid doser på 100, 200, 400 och 800 mg /kg kroppsvikt utvärderades för förmågan att skydda Sprague Dawley-råttor från surgjord sårbildning etanol gastric i jämförelse med 40 mg /kg kroppsvikt pantoprazol. Extraktet och dess diklormetan, etylacetat, och vatten fraktioner utvärderades också för akut toxicitet i möss, artemia toxicitet och antibakteriell aktivitet mot fyra gramnegativa bakterier; Escherichia coli
(ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385), Vibrio cholera
(kliniskt isolat), och Streptococcus faecalis
(kliniskt isolat). Grupperna av fytokemikalier som finns i extraktet bestämdes också.
Resultat
etanolextrakt av C. vitellinum
dosberoende skyddade råtta magslemhinnan mot etanol /HCl förolämpning till högst 88,3% vid 800 mg /kg kroppsvikt, vilket ger samma skyddsnivå som med 40 mg /kg kroppsvikt pantoprazol. Extraktet uppvisade svag antibakteriell aktivitet mot S. typhi Mössor och E. coli
, medan dess etylacetat, diklormetan och vattenfraktioner uppvisade svag aktivitet mot K. lunginflammation, S. typhi, E. coli Mössor och V. cholera
. Extraktet var icke-toxiska för möss upp till 5000 mg /kg kroppsvikt, och den totala extraktet (LC 50 = 37,49 | ig /ml) och den vattenhaltiga (LC 50 = 87,92 | ig /ml), etyl acetat (LC 50 = 119,45 ng /ml) och diklormetan fraktioner (88,79 pg /ml) uppvisade låg toxicitet mot Artemia. Phytochemical screening visade att extraktet innehåller tanniner, saponiner, flavonoider, och terpenoider.
Slutsats
Resultaten stöder krav från traditionella healers som ett avkok av C.vitellinum
har antimagsårsaktivitet. Mekanismen för cytoprotektion är ännu inte fastställts men fenolföreningar som finns i extraktet kan bidra till dess skyddsåtgärder. Dock är dosen ger gastro-skydd hos råtta för stora för att översättas till klinisk tillämpning; alltså bioanalys guidad fraktione att identifiera aktiva föreningen /s eller fraktioner behövs, och användningen av mer magsår modeller för att bestämma mekanismen för den skyddande verkan.
Nyckelord
crassocephalum vitellinum
Traditionell medicin Gastric cytoprotektion Antimicrobial Akut, toxicitet bakgrund
Kagera har en kultur rik på traditionell medicin praktiken, men majoriteten av växter som används i den här regionen är dåligt dokumenterade och har ännu inte utvärderats beträffande säkerhet och effekt. Crassocephallum vitellinum
(Benth.) S. Moore (ASTERACEAE); Synonym: Gynura vitellina
Benth är bland växter som används i Bukoba för behandling av magsår [1]. Antenn delar av C. vitellinum
kokas med vatten och den resulterande avkok tas regelbundet för hantering av magsår [1]. Rapporter från andra områden visar att anläggningen i Kenya används för behandling av magsjuk komplikationer, malaria och mun infektioner hos barn [2], medan i Zaire bladen bränns med de hos den odlade yam och askan matas till scarification för behandling av svullna ben [3]. I södra Rwanda C.vitellinum
används som en lever botemedel som så småningom har kopplats till sina antioxiderande egenskaper [4, 5]. Ett utdrag av växt skyddade råttor mot paracetamol inducerad levertoxicitet, och dessutom vänt barbiturat inducerade sömn i marsvin [4]. Bladen används för behandling av kvinnlig sterilitet, stark feber, dysmenorré, förstoppning, barnsjukdomar och underlätta befrielse av placenta [4]. Filtratet av krossade blad och blommor av växten i kombination med de Plantago palmata
Hoof.f., Vernonia auriculifera
Hiern och Kapkrusbär
L. används för behandling av kikhosta [6], medan bladen används för hantering av anorexi [7] och för mödravårds [8]. Bladen används inom veterinärmedicinen för behandling av mastit, feber och för att underlätta laktation och aktivitet har kopplats till flavonoid innehåll av bladen [9]. Antioxidant och antibakteriella aktiviteten hos de eteriska oljor av flygbilder delar av anläggningen rapporterades nyligen [10]. I flyktingläger i Tanzania, traditionella healers använder bladen av C. vitellinum Idéer för förstoppning och abort [11] .De blad används också av Haya människor att behandla gonorré [1].
Denna studie gjordes för att utvärdera effekten av ett extrakt av de ovanjordiska delar för skydd mot surgjord etanol inducerade magsår i Spague Dawley. Extraktet testades även med avseende på antibakteriell aktivitet. Phytochemical screening gjordes för att bestämma grupper av föreningar som förekommer i extraktet, medan akut toxicitet i möss och prov artemia dödlighet gjordes för att fastställa säkerhet av extraktet.
Metoder
Material
tryptonsojabuljong köptes från HIMEDIA® (HiMedia Laboratories Pvt Ltd, Mumbai, Indien, p-
jodnitrotetrazolium klorid (INT) från Sigma® (sigma- Aldrich®, St Louis, USA), pantoprazol (frystorkat pulver för intravenös injektion, sats nr JKJ 3534D och tillverkas av Sun Pharmaceutical Industries Ltd, Halol-Baroda Highway, Halol-389.350, Gujarat, Indien.), var anskaffas från ett lokalt apotek. Etanol (absolut) köptes från Fluka Chemie GmbH (Sigma-Aldrich®, Zwijndrecht, Nederländerna ), medan dimetylsulfoxid (DMSO) köptes från Sigma® (Poole, Dorset, UK). cyklofosfamid, NEOPHOS 500® (CIPLA Ltd, MIDC Boisar, Indien) köptes från en lokal apotek i Dar es Salaam, Tanzania. Escherichia coli
(ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385), Vibrio cholerae
(kliniskt isolat), och Klebsiella pneumoniae
(kliniskt isolat) erhölls från avdelningen för mikrobiologi och immunologi, Muhimbili universitet för hälsa och Allied Sciences (MUHAS). Artemian ägg köptes från vattenbruk Innovations (Grahamstown 6140, Sydafrika) var och havssalt beredd lokalt genom avdunstning vatten som samlats in från Indiska oceanen, längs Dar es Salaam kusten.
Insamling av växtmaterial
antenn delar av Crassocephallum vitellinum
(Benth.) S. Moore (ASTERACEAE) samlades av en erfaren botanist, Mr. Haji O. Selemani av Botaniska institutionen vid universitetet i Dar es Salaam och rabatt prov nr. MH 164.569 hålls vid Herbarium för Institute of Traditional Medicines, Muhimbili University of Health and Allied Sciences.
Beredning av växtextrakt
lufttorkade växtmaterial maldes till pulver med hjälp av en växt fräsmaskin. Växtmaterialet var uppblötta i 80% etanol vid rumstemperatur under 24 h och filtrerades genom Whatman nr 1 filterpapper. Detta förfarande upprepades 3 gånger för att säkerställa fullständig extraktion av växtmaterial. Det poolade extraktet koncentrerades genom indunstning under reducerat tryck i en rotationsindunstare vid 40 ° C. Extraktutbytet var 31 g från 292 g torrt växtmaterial (10,62%).
Test för antimagsårsaktivitet
Både manliga och kvinnliga Sprague Dawley vägande 100-188 g användes. Råttorna fick fasta i 36 timmar men fick fri tillgång till dricksvatten. Trettio råttor slumpmässigt i 5 grupper om 6 råttor vardera. Råttorna i grupp ett (lösningsmedelskontroll) var fördoserad oralt med 5 ml /kg kroppsvikt av en% tween 80 i normal saltlösning; råttor i grupp två var fördoserad oralt med 40 mg /kg kroppsvikt pantoprazol (positiv kontroll), och råttor i grupp 3, 4 och 5 var pre-doserades oralt med 200, 400 och 800 mg /kg kroppsvikt lösning av C . vitellinum
extrahera en timme före oral administrering av 5 ml /kg kroppsvikt av den ulcerogena blandning. Den ulcerogena blandningen innehöll 80% etanol, 5% klorvätesyra och 15% destillerat vatten. Djuren avlivades genom eteranestesi 4 h efter administration av surgjord etanol. Magarna avlägsnades, skars upp längs den större kurvaturen, tvättades med normal saltlösning och observerades för allvarligheten av sår. Graden av sår (magsår index) graderades enligt en metod som tidigare beskrivits av Shay och medarbetare [12] enligt följande: 0 = inga lesioner (normal mage); 0,5 = hyperemi (rödfärgning); 1 = blödnings fläckar, 2 = 1-5 små sår; 3 = många små sår, 4 = många små och stora sår; 6 = magen full av sår tillsammans med perforeringar. Procentuella skydd beräknades genom jämförelse med den obehandlade kontrollgruppen procentuella skydd [12] =
100
-
Mean
ulcus
Index
av
behandlas
grupp
Mean
sår
index
av
kontroll
grupp
×
100
Statistisk analys
resultaten uttrycks som medelvärde ± standardavvikelse (SD). Resultaten av medel sårindex jämfördes med användning av icke-parametriska Kruskal-Wallis test.
Test för antibakteriell aktivitet
Testorganismer
Fyra gram-negativa bakterier (enterobactericeae) nämligen Escherichia coli, Salmonella typhi, Vibro cholera
och Klebsiella pneumonea
användes, som erhölls från avdelningen för mikrobiologi och immunologi, Muhimbili University of Health and Allied Sciences.
Fastställande av minsta hämmande koncentration (MIC) katalog minsta hämmande koncentrationer ( MIC) bestämdes med användning av mikroutspädnings metod [13]. En stamlösning av extraktet framställdes genom upplösning av 100 mg av 80% etanolextrakt i 1 ml DMSO (100 mg /ml). Var och en av de 96 brunnars mikrotiterplattor först förladdad med 100 pl av tryptisk sojabuljong följt av tillsats av 100 pl av extraktet in i de första brunnarna i raderna för att göra en total volym av 200 ul i de första brunnarna. Efter noggrann blandning 100 pl överfördes från den första raden brunnar i nästa rad brunnar. Förfarandet upprepades i följd till den sista brunnen vid bottnen där 100 | il kastades. Därefter 100 | il av bakteriesuspensionen (0.5Mac Farland standard grumlighet) sattes sedan till varje brunn för att göra en slutlig volym av 200 | j, l i varje brunn. Gentamicinsulfat (100 | j, g /ml) användes som en standard drog. Rader som innehåller buljong, var DMSO och bakterier ingår som negativa kontroller (lösningsmedelskontroll) och rader som innehåller buljong och bakterier endast ingick i syfte att se om det fanns bakterietillväxt eller inte (tillväxtkontroll). Plattorna inkuberades sedan vid 37 ° C under 24 h. Efter inkubation i 24 h, vid 37 ° C, 40 pl 0,02% p-jodnitrotetrazolium (INT) kloridlösning tillsattes till varje brunn följt av inkubation under 1 h vid 37 ° C. Bakterietillväxt indikerades genom en förändring i färg till rosa i brunnarna. Frånvaron av bakterietillväxt indikerades genom ingen färgförändring hos färgämnet. testa första koncentration vid vilken ingen bakterietillväxt skedde togs som MIC.
Artemia dödlighet
testa artemia dödlighet (BST) användes för att förutsäga närvaron i extraktet av cytotoxisk aktivitet [14] . Lösningar av extraktet gjordes i DMSO vid koncentrationer som sträcker sig från 8 till 240 | ig /ml och inkuberades i dubbla injektionsflaskor med artemia larver. Tio artemia larver placerades i var och en av de dubbla flaskor. Kontroll artemia larver placerades i en blandning av artificiellt havsvatten (3,8 g /I havssalt) och DMSO endast. Efter 24 h naupliuslarverna undersöktes mot en upplyst bakgrund, och det genomsnittliga antalet levande larver i varje duplikat flaska bestämdes. Den genomsnittliga procentuella dödligheten plottades mot logaritmen av koncentrationer och den koncentration som dödar femtio procent av larverna (LC 50) bestämdes från grafen [15].
Dataanalys
De genomsnittliga resultaten av artemia dödlighet mot logaritmerna av koncentrationer avsattes med hjälp av Fig P datorprogram (Biosoft Inc, USA), som också ger regressionsekvationer. Regressionsekvationerna användes för att beräkna LC 16, LC 50 och LC 84 värden. Konfidensintervall (95% Cl) beräknades sedan med användning av de tre resultaten [14, 15]. En LC 50 värde som är större än 100 mikrogram /ml ansågs utgöra en inaktiv förening eller extrakt. Testet
Akut toxicitet
Akut toxicitet gjordes enligt OECD: s riktlinjer 425 [16]. Både manliga och kvinnliga Theiller ursprungliga albino möss användes. Mössen acklimatiserades i ett luftkonditionerat rum vid 20 ° C under 7 dagar före experimentering. Före dosering med extrakt mössen svalt för 18-24 timmar med tillgång till adekvat dricksvatten, i burar med trådnätsväggar bottnar för att förhindra coprophagy. Inledningsvis en dos av 1000 mg /kg kroppsvikt administrerades till en grupp på 6 möss (3 manliga och 3 kvinnliga), och möss som observerades för tecken på omedelbar toxicitet och /eller dödsfall för 72 h. Om inga biverkningar observerades en annan grupp av tre män och tre honmöss gavs en dos av 2000 mg /kg kroppsvikt och samma iakttagelser. Om inga tecken på toxicitet eller dödsfall inträffade doser sekventiellt ökat till 3000, 4000 och 5000 mg /kg kroppsvikt, respektive. Extrakten solubiliserades i 1% tween 80 i normal saltlösning och administrerades i en enkel dos volym av 5 ml /kg kroppsvikt eller två doser av 5 ml /kg kroppsvikt, beroende på löslighet, inom ett en timmars intervall. En kontrollgrupp administrerades en enda 5 ml eller 5 ml /kg kroppsvikt av en% tween 80 två gånger för att matcha med dosen av administrerad växtextrakt.
Phytochemical screening
80% etanol-extrakt testades med avseende på närvaro av steroider, saponiner, flavonoider, terpenoider, hjärtglykosider, alkaloider och tanniner användning av standardmetoder [17, 18].
etiska clearance
Denna studie fick etiskt godkännande från Muhimbili University of Health and Allied Sciences Institutional Review Board Resultat.
antiulcusaktivitet
80% etanol-extrakt av C. vitellinum
visade en dosberoende skydd mot etanol /HCl-inducerad gastrisk ulceration. Tabell 1 visar att extraktet skyddade råttans mage från sårbildning med 55% vid en dos av 200 mg /kg kroppsvikt (P ≤ 0,001) och denna ökade till 71,7 (P ≤ 0,001) och 88,3% (P ≤ 0,001) vid 400 och 800 mg /kg kroppsvikt i jämförelse med lösningsmedels behandlade råttor, respektive. Detta var samma procentuella skydd som 40 mg /kg kroppsvikt av protonpumpshämmaren, pantoprazol. Figur 1 visar att vid 800 mg /kg kroppsvikt i magen föreföll liknande den hos råttorna som förbehandlats med 40 mg /kg kroppsvikt pantoprazol. Figur 2 visar dos-responssamband för kontroll, 400 och 800 mg /kg kroppsvikt av anläggningen extractTable ett antimagsårsaktivitet av en 80% etanolextrakt av flygbilder delar av C. vitellinum
Gruppnr

Dos extrakt (mg /kg kroppsvikt)
Medel sår index (n = 6)
% ålders skydd
en
lösningsmedelskontroll
6
0 2
200
2,7 ± 1,0
55,0 *
3
400
1,7 ± 1,4
71,7 * 4
800
0,7 ± 0,4
88,3 *
5.
40 mg /kg kroppsvikt pantoprazol
0,7 ± 0,9
88,3 *
Varje värde är ett medelvärde av resultat från 6 råttor . * = Signifikant P ≤ 0,001 jämfört med lösningsmedelskontroller.
Figur 1 fotografi som visar magen efter förolämpning med etanol /HCl (80% /5%) blandning. I (A) från råtta var fördoserad med lösningsmedlet före insult med etanol /HCl-blandningen. I (B) råttan fördoserad med 800 mg /kg kroppsvikt av 80% etanolextrakt av C. vitellinum
före exponering för den ulcerös blandningen och i (C) råttan fördoserad med 40 mg /kg kroppsvikt pantoprazol.
Figur 2 Fotografier av råtta magslemhinnan visar dosberoende effekten av C. vitellinum mot surgjord etanol sår i råtta magslemhinnan. A = lösningsmedelskontroll; B = 400 mg /kg kroppsvikt växtextrakt; C = 800 mg /kg kroppsvikt växtextrakt; D = 40 mg /kg kroppsvikt pantoprazol.
Antibakteriell aktivitet
Resultaten för antibakteriell aktivitet (tabell 2) visar att det totala extraktet hade svag aktivitet mot Salmonella typhi Mössor och Escherichia coli hotell med MIC 3,125 mg /ml. När extraktet fraktionerades till vattenhaltig, etylacetat och diklormetan fraktioner resultaten visar att etylacetatfraktionen var aktiv mot de fyra bakterier som används; dvs K. pneumoniae, S. typhi, E. Coli
och V. cholera
, och var aktiv mot fler bakterier än det totala extraktet. Både de diklormetan och etylacetatextrakten hade mycket svag aktivitet mot alla de fyra bakterier used.Table 2 Antibakteriell aktivitet av etylacetat, DCM och vattenhaltig fraktioner av C.vitellinum etanolextrakt
Gram-ve testet isolat
MIC (mg /ml) av 80% etanolextrakt och fraktioner
80% etanolextrakt (totalt)
Etylacetat (fraktion)
DCM (fraktion)
vid vattenhaltig (fraktion)
K.pneumonea
-
6,25
12,5
12,5
S.typhii
3,125
3,125
12,5
12,5
E.coli
3,125
3,125
6,25
6,25
V.cholera
-
testet 3,125
12,5
12,5
artemia dödlighet sälja The artemia testresultat (tabell 3) visar att i allmänhet den totala extraktet (LC 50 = 37,49 pg /ml) och vattenhaltig, diklormetan och etylacetatfraktionerna uppvisade alla måttligt låg artemia toxicity.Table 3 effekten C. vitellinum totala extrakt och fraktioner om artemia toxicitet
extrakt
LC50 (pg /ml) Review
95% Cl (^ g /ml)
80% etanolextrakt
37,49
27,98-50,16
vattenhaltiga fraktionen
87,92
63,71-121,33
Etyl acetat fraktion
119,45
86,56-164,84
Diklormetan fraktion
88,79
69,37-113,65
Akut toxicitet hos möss
totala extraktet upp till 5000 mg /kg kroppsvikt inte gjorde visar några tecken på toxicitet i möss och alla mössen överlevde till 28 dagar långa observationsperioden.
phytochemical screening
resultaten av phytochemical screening visar att 80% etanolextrakt av crassocephalum vitellinum
innehåller tanniner, saponiner , beror Diskussion
mekanismen för sårbildning etanol gastric flavonoider och triterpener.
att rikta toxisk effekt på epitelet leder till nekrotiska lesioner, utarmning av gastrisk mucus som bryter den mukösa barriären, öka permeabiliteten hos magslemhinnan leder till ökad läckage av vätejoner från lumen, tillbaka diffusion av syra, och minska transluminal elektrisk potentialskillnad [19-21]. Etanol orsakar också förändringar i mukosala blodflödet, förstöra mikrovaskulära och icke-vaskulära celler, mastcelldegranulering, neutophil medierad mukosal skada, och utarmning av vissa syre fri radikal-elimineringsmedel [22]. Förutom utarmning av fria radikaler, fria radikaler frigörs från metabolismen av etanol [22], och detta om förvärras ytterligare genom hämning av biosyntesen av cellskyddande prostaglandiner [23].
I denna studie pantoprazol visade en klar skyddande åtgärder mot surgjord sårbildning etanol, förmodligen tyder på rollen av magsyra i etanol-inducerad ulceration syrad gastrisk. Utseende pantoprazol behandlad råtta magslemhinnan visar en stor skillnad i brutto utseende jämfört med kontroller med lösningsmedel. Å andra sidan vattenetanolextrakt av C. vitellinum, webbkamera vid 800 mg /kg kroppsvikt, som ges samma skyddsnivå för magslemhinnan råtta (88,3%) som 40 mg /kg kroppsvikt pantoprazol. En viktig fråga här är vad som är grunden för den skyddande verkan av extraktet. Visst finns det ingen tillräckliga bevis för att tillåta oss att föreslå mekanismen för mag-skydd. Resultaten av växtkemiska screening visade att extrakt av de antenn delar av C. vitellinum
innehåller tanniner, flavonoider och terpenoider, vilka är fenoliska föreningar. Växtfenolföreningar är kända för att vara antioxidanter och fria radikaler [24]. På grund av det faktum att etanol-inducerad magsår förknippas med neutrofil medierad mucosal skada genom frisättning av fria syreradikaler, proteaser och lysosomala enzymer [22], det finns en stark indikation på att C. vitellinum
extrakt har sitt anti-ulcerogena effekten delvis på grund av närvaron av flavonoider, tanniner och terpenoider, vilka har antioxidant och fri radikal-elimineringsaktivitet. De antioxiderande egenskaper av denna anläggning har rapporterats i en annan studie
[4]. Den 80% etanol-extrakt och fraktioner uppvisade viss antibakteriell aktivitet mot fyra gramnegativa bakterier, som verkar vara högst i de etylacetatfraktionerna. Avsikten var att testa extrakt för hämmande effekt mot Helicobacter pylori
som är inblandad i magsår. Det var emellertid inte möjligt att få dessa organismer från någon kommersiell källa eller genom andra laboratorier. Det beslutades att testa extrakt mot de fyra enterobakterier att bara få indikativa resultat, men det betyder inte på något sätt att få positiva resultat är en direkt indikation på att extrakt också automatiskt skulle vara aktiv mot H. pylori
men gör tyder på att extrakt kan vara användbara för behandling av andra tarm tillstånd relaterade till infektion av dessa bakterier. Denna uppfattning stöds av en del av den traditionella medicinen användningsområden [5, 8, 9].
Extrakt av C. vitellinum
visade inga signifikanta förändringar i djurens beteende eller negativa tecken på toxicitet under efterbehandling utvärdering av mössen efter behandling med upp till 5000 mg /kg kroppsvikt, vilket tyder på att det är säkert när det administreras akut. Liknande resultat observerades i toxicitetstest artemia där både den totala extraktet och fraktioner visade minimal toxicitet.
Slutsats
Dessa resultat stöder påståendet av traditionella healers som extraktet av antenn delar av C.vitellinum
har antimagsårsaktivitet. Eftersom dosen ger maximalt skydd är mycket stor är det osannolikt att resultaten kan få omedelbar klinisk tillämpning. Även om det kan föreslås att fenolföreningar bidrar till skyddsåtgärder av extraktet, finns behov av att göra bioanalys styrd fraktione att identifiera aktiva föreningen /s eller fraktioner. Mekanismen för den skyddande verkan återstår också att bli föremål för fortsatta studier
Förkortningar
BST.
Artemia tester
CI:
Konfidensintervall
DMSO:
Dimetylsulfoxid
HCI:
Saltsyra
INT:
p-jodnitrotetrazolium
LC:
dödlig koncentration
MIC:
Minsta hämmande koncentration

OECD:.
organisationen för ekonomiskt samarbete och utveckling
förklaringar
Tack
Vi är tacksamma för Mr Didas Ngemera den traditionella healer som gav oss denna information, och Mr. Haji O. Selemani för insamling och identifiering av växtmaterialet. Denna studie har delvis finansierats av ett bidrag till eeh från den belgiska regeringen inom ramen för belgiska tekniskt samarbete.
Författarnas ursprungliga inlämnade handlingarna Images of Nedan finns länkar till författarnas ursprungliga inlämnade filer för bilder. 13104_2013_2655_MOESM1_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 1 13104_2013_2655_MOESM2_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 2 Konkurrerande intressen
Författarna har inga konkurrerande intressen för denna forskning, och dela strävanden traditionella healers av Kagera att förbättra vården tjänster i samhället
Författarnas bidrag
MJM gjorde de ethnomedical studier som dokumenterade dessa anläggningar och identifierade växter för denna studie. deltagit i rådgivning utformningen av studien, givit stöd och vägledning i laboratoriet och under förutsättning att teoretiska ledning av projektet. Han utarbetade också detta manuskript. RSON deltog i experimenten och var laboratoriet handledare för studien. Han deltog också i utformningen av studien. EEH gjorde några av experimenten, inklusive förberedelse av växtmaterial, utvinning, bioanalyser etc. under ledning av RSON som arbetade nära med honom i laboratoriet. RLAM är en co-mentor i EEH och deltagit i rådgivning designen av studien och förslag utveckling. AWK gjorde phytochemical screening experiment och experiment artemia dödlighet. Alla författarna läst och godkänt manuskriptet.

• Mångfald i bakterie-värdinteraktioner inom arten Helicobacter heilmannii egentlig bemärkelse
• Status för ventrikeltömning i nyfödda barn med mekonium färgade fostervatten: en randomiserad kontrollerad studie