Antimikrobiel aktivitet, akut toksicitet og cytobeskyttende effekt af Crassocephalum vitellinum (Benth.) S. Moore ekstrakt i en rotte ethanol-HCI mavesår model
abstrakt
Baggrund
En afkog af Crassocephallum vitellinum
(Benth.) S. Moore (Asteraceae) anvendes i Kagera at behandle mavesår. Denne undersøgelse har til formål at evaluere en vandig ethanol ekstrakt af overjordiske dele af planten for sikkerhed og virkning.
Metoder
En 80% ethanolekstrakt af C. vitellinum
ved doser på 100, 200, 400 og 800 mg /kg legemsvægt blev evalueret for evnen til at beskytte Sprague Dawley-rotter fra forsuret ethanol gastrisk ulceration i sammenligning med 40 mg /kg legemsvægt pantoprazol. Ekstrakten og dens dichlormethan, ethylacetat, og vandige fraktioner blev også vurderet for akut toksicitet i mus, saltopløsning rejer toksicitet og antibakteriel aktivitet over fire Gram-negative bakterier; Escherichia coli
(ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385), Vibrio kolera
(klinisk isolat), og Streptococcus faecalis
(klinisk isolat). Grupperne af fytokemikalier stede i ekstraktet blev også bestemt.
Resultater
ethanolekstrakt af C. vitellinum
dosisafhængigt beskyttet rotte maveslimhinden mod ethanol /HCI fornærmelse til maksimalt 88,3% ved 800 mg /kg legemsvægt, giver det samme beskyttelsesniveau som med 40 mg /kg legemsvægt pantoprazol. Ekstrakten udviste også svag antibakteriel aktivitet mod S. typhi
og E. coli
, mens dens ethylacetat, dichlormethan og vandige fraktioner udviste svag aktivitet mod K. pneumonia, S. typhi, E. coli
og V. kolera
. Ekstrakten var ikke-toksiske for mus på op til 5000 mg /kg legemsvægt, og den samlede ekstrakt (LC
50 = 37,49 ug /ml) og den vandige (LC 50 = 87.92 ug /ml), ethyl acetat (LC 50 = 119,45 ug /ml) og dichlormethan fraktioner (88,79 ug /ml) viste lav toksicitet mod Saltsøkrebs. Phytochemical screening viste, at ekstraktet indeholder tanniner, saponiner, flavonoider, og terpenoider.
Konklusion
Resultaterne understøtter krav fra traditionelle healere som et afkog af C.vitellinum
har mavesårsmedicin aktivitet. Mekanismen for cytobeskyttelse er endnu ikke fastlagt, men de phenoliske forbindelser, der findes i ekstrakten kan bidrage til sine beskyttende foranstaltninger. Men den dosis, der giver mave-beskyttelse i rotten er for stor til at blive oversat til klinisk anvendelse; således bioassay guidet fraktionering at identificere aktive forbindelser /s eller fraktioner er behov, og brug af flere mavesår modeller til at bestemme mekanismen for beskyttende foranstaltninger.
Nøgleord
Crassocephalum vitellinum
Traditionel medicin Gastric cytoprotektion Antimikrobiel Akut, Toksicitet Baggrund
Kagera regionen har en kultur rig på traditionel medicin praksis, men de fleste planter, som anvendes i denne region er dårligt dokumenteret og er endnu ikke blevet evalueret for sikkerhed og virkning. Crassocephallum vitellinum
(Benth.) S. Moore (Asteraceae); Synonym: Gynura vitellina
Benth er blandt planter, som anvendes i Bukoba til behandling af mavesår sygdom [1]. Luftdelene af C. vitellinum
koges med vand og det resulterende afkog tages regelmæssigt for forvaltning af mavesår [1]. Rapporter fra andre områder viser, at anlægget i Kenya anvendes til behandling af mave komplikationer, malaria og mund infektioner hos børn [2], mens bladene i Zaire forbrændes med dem af det dyrkede Yam og asken påføres scarifications for behandling af hævede ben [3]. I det sydlige Rwanda C.vitellinum
anvendes som hepatobeskyttende middel, der vinder været knyttet til sin antioxidant egenskaber [4, 5]. Et uddrag af anlægget beskyttet rotter mod acetaminophen induceret levertoksicitet, og derudover er det omvendt barbiturat-induceret søvn i marsvin [4]. Bladene anvendes til behandling af kvindelig sterilitet, stærk feber, dysmenoré, forstoppelse, børnesygdomme og letter udfrielse af placenta [4]. Filtratet af knuste blade og blomster af planten kombineret med de Plantago palmata
Hoof.f., Vernonia auriculifera
Hiern og Physalis peruviana
L. anvendes til behandling af kighoste [6], mens bladene anvendes til styring af anoreksi [7] og for svangreomsorg [8]. Bladene anvendes i veterinærmedicin til behandling af mastitis, feber, og for at lette amning og aktivitet er blevet forbundet med flavonoid indhold af bladene [9]. Den antioxidant og antibakterielle aktivitet af æteriske olier fra luftdelene af planten blev for nylig rapporteret [10]. I flygtningelejre i Tanzania, traditionelle healere bruger bladene af C. vitellinum
for forstoppelse og abort [11] .De Bladene bruges også af de Haya folk til at behandle gonoré [1].
Denne undersøgelse blev gjort for at evaluere effekten af et uddrag af de overjordiske dele til beskyttelse mod syrnet ethanol-induceret mavesår i Spague Dawley rotter. Ekstrakten blev også testet for antibakteriel aktivitet. Fytokemiske screening blev udført for at bestemme de grupper af forbindelser, der findes i ekstrakten, mens akut toksicitet hos mus og artemia letalitet test blev udført for at bestemme sikkerheden af ekstraktet. Salg Metoder
Materialer
Tryptone Soya-bouillon blev købt fra HIMEDIA® (Himedia Laboratories Pvt Ltd, Mumbai, Indien; p
Iodonitrotetrazolium chlorid (INT) fra Sigma (Sigma- Aldrich®, St. Louis, USA); pantoprazol (frysetørret pulver til iv injektion, batch nr JKJ 3534D og fremstillet af Sun Pharmaceutical Industries Ltd, Halol-Baroda Highway, Halol-389.350, Gujarat, Indien.), blev indkøbt fra et lokalt apotek. Ethanol (absolut) blev købt fra Fluka Chemie GmbH (Sigma-Aldrich®, Zwijndrecht, Holland ), mens dimethylsulfoxid (DMSO) blev købt fra Sigma (Poole, Dorset, UK). cyclophosphamid, NEOPHOS 500® (Cipla Ltd., MIDC Boisar, Indien) blev købt hos en lokal apoteker i Dar es Salaam, Tanzania. Escherichia coli Hotel (ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385), Vibrio cholerae
(klinisk isolat), og Klebsiella pneumoniae
(klinisk isolat) blev opnået fra Institut for Mikrobiologi og Immunologi, Muhimbili Universitet for Sundhed og allierede Sciences (MUHAS). De artemia æg blev købt fra Akvakultur Innovations (Grahamstown 6140, Sydafrika) blev og havsalt forberedt lokalt ved fordampning af vand opsamlet fra det Indiske Ocean, langs Dar es Salaam Coast.
Indsamling af plantemateriale
antenne dele af Crassocephallum vitellinum
(Benth.) S. Moore (Asteraceae) blev indsamlet af en erfaren botaniker, Mr. Haji O. Selemani af Institut for Botany, University of Dar es Salaam og gavekort eksemplar ingen. MH 164.569 holdes på det Herbarium af Institut for traditionel medicin, Muhimbili Universitet Sundhed og allierede Sciences.
Udarbejdelse af planteekstrakter
lufttørret plantemateriale blev formalet til pulver ved hjælp af en plante fræsemaskine. Plantematerialet blev udblødt i 80% ethanol ved stuetemperatur i 24 timer og filtreret gennem Whatman No.1 filtrerpapir. Denne procedure blev gentaget 3 gange for at sikre fuldstændig ekstraktion af plantemateriale. Den poolede ekstrakt blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk i en rotationsinddamper ved 40 * C. Ekstraktet Udbyttet var 31 g fra 292 g tør plantemateriale (10,62%).
Testning for antiulcus aktivitet
Både mandlige og kvindelige Sprague Dawley rotter med en vægt 100-188 g, blev anvendt. Rotterne blev fastet i 36 timer, men fik fri adgang til drikkevand. Tredive rotter blev tilfældigt allokeret til 5 grupper med 6 rotter i hver. Rotterne i gruppe ét (Solvent kontrol) blev præ-doseres oralt med 5 ml /kg legemsvægt af 1% Tween 80 i normalt saltvand; rotter i gruppe to blev præ-doseres oralt med 40 mg /kg legemsvægt pantoprazol (positiv kontrol), og rotter i gruppe 3, 4 og 5 blev præ-doseres oralt med 200, 400 og 800 mg /kg legemsvægt opløsning af C . vitellinum
udtrække en time før oral administration af 5 ml /kg legemsvægt af den ulcerogene blanding. Ulcerogene blandingen indeholdt 80% ethanol, 5% saltsyre og 15% destilleret vand. Dyrene blev aflivet ved etheranæstesi 4 timer efter administration af forsuret ethanol. Maverne blev fjernet, skåret op langs den største krumning, vasket med normalt saltvand og observeret for sværhedsgraden af sår. Graden af sårdannelse (mavesår indekset) blev gradueret efter en metode tidligere beskrevet af Shay og kolleger [12] som følger: 0 = ingen læsioner (normal mave); 0,5 = hyperæmi (rødfarvning); 1 = blødende pletter, 2 = 1-5 små sår; 3 = mange små sår, 4 = mange små og store sår; 6 = mave fuld af sår sammen med perforeringer. beskyttelse Procent blev beregnet ved sammenligning med den beskyttelse, ubehandlede kontrolgruppe Procent [12] =
100
-
Mean
sår
indeks
af
behandlet
gruppe
Mean
sår
indeks
af
kontrol
gruppe
×
100
Statistisk analyse
resultaterne er udtrykt som middelværdi ± standardafvigelse (SD). Resultaterne af gennemsnitlig ulcus-indeks blev sammenlignet under anvendelse af ikke-parametriske Kruskal-Wallis test.
Test for antibakteriel aktivitet
Testorganismer
Four gramnegative bakterier (enterobactericeae) nemlig Escherichia coli, Salmonella typhi, Vibro kolera
og Klebsiella pneumonea
blev brugt, som blev opnået fra Institut for Mikrobiologi og Immunologi, Muhimbili Universitet Sundhed og allierede Sciences.
Bestemmelse af mindste hæmmende koncentration (MIC)
mindste hæmmende koncentration ( MIC'er) blev bestemt under anvendelse af mikrofortynding metoden [13]. En stamopløsning af ekstrakten blev fremstillet ved at opløse 100 mg af ethanolekstrakt på 80% i 1 ml DMSO (100 mg /ml). Hver af de brønds mikrotiterplader 96 blev først indlæst med 100 pi tryptisk soja-bouillon efterfulgt af tilsætning af 100 pi af ekstrakten i de første brønde i rækkerne til et totalvolumen på 200 pi i de første brønde. Efter grundig blanding 100 pi blev overført fra den første række brønde i de næste række brønde. Fremgangsmåden blev gentaget sekventielt til den sidste brønd ved bunden, hvor 100 pi blev kasseret. Derefter blev 100 pi bakteriesuspension (0.5Mac Farland standard turbiditet) derefter tilsat til hver brønd for at gøre et endeligt volumen på 200 pi i hver brønd. Gentamicinsulphat (100 ug /ml) blev anvendt som en standard lægemiddel. Rækker, der indeholder bouillon, blev DMSO og bakterier indbefattet som negative kontroller (kontrol opløsningsmiddel) og rækker, der indeholder bouillon og bakterier kun indgik for at se, om der var bakterievækst eller ej (vækstkontrol). Pladerne blev derefter inkuberet ved 37 ° C i 24 timer. Efter inkubation i 24 timer ved 37 ° C, 40 pi 0,02% p-iodonitrotetrazolium (INT) chlorid-opløsning blev tilsat til hver brønd efterfulgt af inkubation i 1 time ved 37 ° C. Bakterievækst blev indikeret ved en ændring i farve til pink i brøndene. Fravær af bakterievækst blev indikeret ved ingen farveændring af farvestoffet. Den første koncentration, hvor der ikke bakterievækst forekom blev taget som MIC.
Saltsøkrebs dødelighed test
saltlage rejer dødelighed test (BST) blev anvendt til at forudsige tilstedeværelsen, i ekstraktet, af cytotoksisk aktivitet [14] . Opløsninger af ekstrakten blev fremstillet i DMSO ved koncentrationer i området fra 8-240 ug /ml og inkuberet i dublerede hætteglas med artemia larver. Ti artemia larver blev placeret i hver af de dublerede hætteglas. Kontrol saltlage rejer larver blev anbragt i en blanding af kunstig havvand (3,8 g /l havsalt) og DMSO alene. Efter 24 timer blev nauplii blev undersøgt mod en tændt baggrund, og det gennemsnitlige antal levende larver i hver duplo hætteglas blev bestemt. Den gennemsnitlige procentvise mortalitet blev plottet mod logaritmen af koncentrationen og koncentrationen dræbe halvtreds procent af larverne (LC 50) blev bestemt ud fra grafen [15].
Dataanalyse
De gennemsnitlige resultater af saltlage rejer dødelighed mod logaritmerne koncentrationer blev afbildet ved hjælp af fig P computerprogrammet (Biosoft Inc, USA), som også giver regression ligninger. De regression ligninger blev anvendt til at beregne LC 16, LC 50 og LC 84 værdier. Konfidensintervaller (95% CI) blev derefter beregnet under anvendelse af de tre resultater [14, 15]. En LC 50 værdi større end 100 mg /ml blev anset for at udgøre en inaktiv forbindelse eller ekstrakt.
Akut toksicitet test
Akut toksicitet blev udført i henhold til OECD-retningslinjerne 425 [16]. Både mandlige og kvindelige Theiller oprindelige albinomus blev anvendt. Musene blev akklimatiseret i en aircondition værelse ved 20 ° C i 7 dage før eksperimenter. Før dosering med ekstrakter musene blev sultet i 18-24 timer med adgang til passende drikkevand, i bure med trådnet bunde for at forhindre coprophagy. Oprindeligt en dosis på 1000 mg /kg legemsvægt blev administreret til en gruppe af 6 mus (3 mænd og 3 kvinder), og mus observeres for tegn på øjeblikkelig toksicitet og /eller død i 72 timer. Hvis der ikke blev observeret nogen toksicitet anden gruppe af 3 mænd og 3 kvinder mus fik en dosis på 2000 mg /kg legemsvægt og de samme bemærkninger. Hvis der ikke tegn på toksicitet eller død indtraf doser blev sekventielt øget til 3000, 4000, og 5000 mg /kg legemsvægt, henholdsvis. Ekstrakter blev solubiliseret i 1% Tween 80 i normalt saltvand og indgives i en enkelt volumen på 5 ml /kg legemsvægt eller to doser på 5 ml /kg legemsvægt, afhængigt af opløseligheden dosis, inden for en times interval. En kontrolgruppe blev administreret en enkelt 5 ml eller 5 ml /kg legemsvægt af 1% Tween 80 to gange for at matche med dosen af indgivet planteekstrakt.
Phytochemical screening
Ethanolekstraktet 80% blev testet for tilstedeværelse af steroider, saponiner, flavonoider, terpenoider, hjerteglykosider, alkaloider og tanniner ved hjælp af standard metoder [17, 18].
etiske clearance
Denne undersøgelse blev givet etisk clearing fra Muhimbili Universitet Sundhedsvidenskabelige og allierede Sciences Institutional Review Board .
Resultater
antiulcus aktivitet
Ethanolekstraktet 80% af C. vitellinum
viste en dosisafhængig beskyttelse mod ethanol /HCl induceret gastrisk ulceration. Tabel 1 viser, at ekstrakten beskyttet rotten maven fra ulceration med 55% ved en dosis på 200 mg /kg legemsvægt (P ≤ 0,001), og denne steg til 71,7 (P ≤ 0,001), og 88,3% (P ≤ 0,001) ved 400 og 800 mg /kg legemsvægt i forhold til opløsningsmiddel behandlede rotter henholdsvis. Dette var den samme procentvise beskyttelse som 40 mg /kg legemsvægt af protonpumpeinhibitoren, pantoprazol. Figur 1 viser, at ved 800 mg /kg legemsvægt maven syntes ligner rotterne forbehandlet med 40 mg /kg legemsvægt pantoprazol. Figur 2 viser dosis-respons-forholdet for kontrol, 400 og 800 mg /kg legemsvægt af anlægget extractTable 1 antiulcus aktivitet af et ethanolekstrakt 80% af overjordiske dele af C. vitellinum
Group No.
Dosis af ekstrakt (mg /kg legemsvægt)
Mean sår index (n = 6)
% beskyttelse alder
1
opløsningsmiddel kontrol
6
0
2
200
2,7 ± 1,0
55,0 *
3
400
1,7 ± 1,4
71,7 *
4
800
0,7 ± 0,4
88,3 *
5.
40 mg /kg legemsvægt pantoprazol
0,7 ± 0,9
88,3 *
Hver værdi er et gennemsnit af resultaterne af 6 rotter . * = Væsentlig P ≤ 0,001 sammenlignet med opløsningsmiddel kontroller.
Figur 1 fotografi, der viser maven efter spot med ethanol /HCI (80% /5%) blanding. I (A) rotten var prædoseret med opløsningsmidlet før spot med ethanol /HCl-blanding. I (B) rotte blev præ-doseret med 800 mg /kg legemsvægt af 80% ethanolekstrakt af C. vitellinum
før eksponering for ulcerativ blanding og i (C) rotte blev præ-doseret med 40 mg /kg legemsvægt pantoprazol.
Figur 2 Fotografier af rotte maveslimhinden viser den dosisafhængige effekt af C. vitellinum mod forsuret ethanol sårdannelse rotte maveslimhinden. A = Opløsningsmiddel kontrol; B = 400 mg /kg legemsvægt planteekstrakt; C = 800 mg /kg legemsvægt planteekstrakt; D = 40 mg /kg legemsvægt pantoprazol.
Antibakteriel aktivitet
Resultaterne for antibakteriel aktivitet (tabel 2) viser, at den samlede ekstrakt havde svag aktivitet mod Salmonella typhi
og Escherichia coli
med MIC af 3,125 mg /ml. Når ekstrakten blev fraktioneret til vandige, ethylacetat og dichlormethan fraktioner resultaterne viser, at ethylacetat fraktion var aktiv over for de fire anvendte bakterier; dvs. K. pneumoniae, S. typhi, E. Coli
og V. kolera
, og var aktiv mod flere bakterier end den samlede ekstrakt. Både dichlormethan og ethylacetatekstrakter havde meget svag aktivitet mod alle fire bakterier used.Table 2 Antibakteriel aktivitet af ethylacetat, DCM og vandig fraktioner af C.vitellinum ethanolekstrakt
Gram-ve test isolater
MIC (mg /ml) af 80% ethanol-ekstrakt og fraktioner deraf
80% ethanol-ekstrakt (i alt)
Ethylacetat (fraktion)
DCM (fraktion)
vandig (fraktion)
K.pneumonea
-
6,25
12,5
12.5
S.typhii
3,125
3,125
12,5
12.5
E.coli
3,125
3,125
6,25
6,25
V.cholera
-
3,125
12,5
12,5
artemia dødelighed test
den saltlage rejer testresultater (tabel 3) viser, at generelt det totale ekstrakt (LC 50 = 37,49 mg /ml) og den vandig, dichlormethan og ethylacetatfraktioner alle udstillet moderat lav artemia toxicity.Table 3 effekten C. vitellinum samlede ekstrakt og fraktioner på artemia toksicitet
uddrag
LC50 (mg /ml)
95% CI (ug /m)
80% ethanol ekstrakt
37.49
27,98-50,16
Vandig fraktion
87,92
63,71 til 121,33
Ethyl acetat fraktion
119,45
86,56 til 164,84
Dichlormethan fraktion
88,79
69,37 til 113,65
Akut toksicitet i mus
samlede ekstrakt op til 5000 mg /kg legemsvægt ikke gjorde viser nogen tegn på toksicitet til mus og alle musene overlevede til de 28 dage observationsperioden.
phytochemical screening
resultaterne af phytochemical screening viser, at ethanol-ekstrakt 80% af Crassocephalum vitellinum
indeholder tanniner, saponiner , flavonoider og triterpener.
diskussion
mekanismen ethanol gastrisk ulceration, skyldes direkte toksisk effekt på epitel fører til nekrotiske læsioner, udtømning af gastrisk slim som bryder den mucosale barriere, øger permeabiliteten af maveslimhinden fører til øget udsivning af hydrogenioner fra hulrummet, tilbagediffusion af syre, og mindske transluminal elektrisk spændingsforskel [19-21]. Ethanol forårsager også forandringer i mucosal blodstrøm, ødelægge mikrovaskulær og ikke-vaskulære celler, mastcelledegranulering, neutophil medieret mucosal skade, og udtømningen af visse oxygen frie radikaler [22]. Ud over nedbrydning af frie radikaler, er frie radikaler frigivet fra metabolismen af ethanol [22], og dette, hvis yderligere forværret af inhibering af biosyntesen af prostaglandiner cytobeskyttende [23].
I dette studie pantoprazol viste et klart beskyttende indsats mod forsuret ethanol ulceration, sandsynligvis tyder rolle af mavesyre i forsuret ethanol-induceret gastrisk ulceration. Udseende af pantoprazol behandlede rotte maveslimhinden viser en stor forskel i grov udseende sammenlignet med opløsningsmidlet kontroller. På den anden side den vandige ethanol ekstrakt af C. vitellinum, dele på 800 mg /kg legemsvægt, tillægges det samme beskyttelsesniveau for rotte maveslimhinden (88,3%) som 40 mg /kg legemsvægt pantoprazol. Et vigtigt spørgsmål her er, hvad der er grundlaget for den beskyttende virkning af ekstraktet. Ganske vist er der ikke tilstrækkelig dokumentation til at tillade os at foreslå den mekanisme af gastro-beskyttelse. Resultaterne af phytochemical screening viste, at uddrag af overjordiske dele af C. vitellinum
indeholder tanniner, flavonoider og terpenoider som er phenolforbindelser. Plant phenolforbindelser vides at være antioxidanter og frie radikaler [24]. På grund af den kendsgerning, at ethanol-induceret gastrisk ulceration er forbundet med neutrofil medieret mucosal skade gennem frigivelse af frie oxygenradikaler, proteaser og lysosomale enzymer [22], der er en stærk indikation af, at C. vitellinum
ekstrakt skylder sin mavesårshæmmende resultat til dels på grund af tilstedeværelsen af flavonoider, tanniner og terpenoider, som har antioxidant og frie radikaler aktivitet. De anti-oxidant egenskaber af denne plante er blevet rapporteret i en anden undersøgelse [4].
Ethanolekstraktet 80% og fraktioner deraf udviste nogle antibakteriel aktivitet over fire Gram-negative bakterier, hvilket synes at være højest i ethylacetat fraktioner. Det var hensigten at teste ekstrakterne for inhiberende virkning mod Helicobacter pylori
som er impliceret i peptisk ulcussygdom. Men det var ikke muligt at få disse organismer fra enhver kommerciel kilde eller gennem andre laboratorier. Det blev besluttet at teste ekstrakterne mod de fire enterobakterier at bare komme vejledende resultater, men det betyder ikke, på nogen måde, at få positive resultater er et direkte tegn på, at ekstrakterne også automatisk vil være aktive mod H. pylori
men gør antyder, at ekstrakterne kan være nyttige til behandling af andre intestinale tilstande relateret til infektion med disse bakterier. Dette begreb er støttet af nogle af de traditionelle medicin bruger [5, 8, 9].
Ekstrakt af C. vitellinum
viste ingen signifikante ændringer i dyrs adfærd eller negative tegn på toksicitet under efterbehandling evaluering af mus efter behandling med op til 5000 mg /kg legemsvægt, hvilket antyder, at det er sikkert, når det indgives akut. Lignende resultater blev observeret i saltlage rejer toksicitetstest, hvor både den samlede ekstrakt og fraktioner deraf viste minimal toksicitet.
Konklusion
Disse resultater understøtter påstanden ved traditionelle healere, at uddrag af overjordiske dele af C.vitellinum
har aktivitet mod ulcerationer. Da dosis giver maksimal beskyttelse er meget stor, er det usandsynligt, at resultaterne kan have øjeblikkelig klinisk anvendelse. Selv om det kan blive foreslået, at phenolforbindelser bidrager til de beskyttende virkninger af ekstrakt, der er nødt til at gøre bioassay guidet fraktionering at identificere aktive forbindelser /s eller fraktioner. Mekanismen for beskyttende foranstaltninger også fortsat at være et emne for yderligere undersøgelser
Forkortelser
BST:.
Artemia tests
CI:
Konfidensinterval
DMSO:
Dimethylsulfoxid
HCI:
Saltsyre
INT:
p-iodonitrotetrazolium
LC:
Dødelig koncentration
MIC:
Minimum hæmmende koncentration
OECD:.
Organisationen for økonomisk samarbejde og udvikling
erklæringer
Taksigelser
Vi er taknemmelige for Mr. Didas Ngemera den traditionelle healer, der gav os disse oplysninger, og Mr. Haji O. Selemani til indsamling og identifikation af plantematerialet. Denne undersøgelse blev delvist finansieret af en bevilling til at EEH fra den belgiske regering under paraplyen af belgiske teknisk samarbejde.
Forfattere 'originale filer indsendt til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 13104_2013_2655_MOESM1_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 1 13104_2013_2655_MOESM2_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 2 konkurrerende interesser
Forfatterne har ingen konkurrerende interesser til denne forskning, og dele forhåbninger de traditionelle healere i Kagera at forbedre sundhedsvæsenet tjenester i deres samfund
Forfattere bidrag
MJM gjorde de etnisk-medicinske undersøgelser, der dokumenterede disse planter og identificerede planterne til denne undersøgelse.; deltaget i rådgivning design af undersøgelsen, forudsat støtte og vejledning i laboratoriet og forudsat den teoretiske vejledning af projektet. Han udarbejdede også dette manuskript. RSON deltog i eksperimenterne og var laboratoriet vejleder for undersøgelsen. Han deltog også i udformningen af undersøgelsen. EEH gjorde nogle af forsøgene, herunder udarbejdelse af plantematerialet, ekstraktion, bioassays osv under vejledning af RSON der arbejdede tæt sammen med ham i laboratoriet. RLAM er en co-mentor for EEH og deltaget i rådgivning design studier og forslag udvikling. AWK gjorde fytokemiske screening eksperimenter og saltlage rejer letalitet eksperimenter. Alle forfatterne læst og godkendt manuskriptet.