Vznik a identifikácia králičím modelu peritoneálnej karcinosou od žalúdka cancer

zriadenia a identifikácia králičím modelu peritoneálnej karcinosou z rakoviny žalúdka
abstraktné
pozadia
Žalúdočné rakoviny peritoneálnej karcinosou je bežným klinickým problémom, ale existujú no vhodné veľké zvieracie modely sa tento problém študovať. Táto štúdia bolo vytvoriť stabilnú králičie peritoneálnej karcinosou modeli rakoviny žalúdka pomocou VX2 nádor, a analyzovať klinicko-patologické rysy
metódy
VX2 nádor bol implantovaný do 36 novozélandských králikov spôsobov: 3. Laparotomické ortotopická injekcie rakovinové bunky do submukóznu vrstvy žalúdka (skupina a), laparotomické implantáciu nádorového tkaniva do väčšej omentum bezprostredne pod žalúdočnej dutine (skupina B), a perkutánna injekcia nádorových buniek priamo do peritoneálnej dutiny (skupina C), 12 králikov v každej skupine. Zvieratá boli starostlivo sledované a detailné štúdie klinicko-patologické boli vykonané.
Výsledky
miery úspešnosti tvorby peritoneálnej karcinosou boli 100% (12/12), 91,7% (11/12) a 58,3% (7 /12), v tomto poradí, pre skupiny a, B a C (p = 0,019, a v porovnaní s C, P = 0,077, B proti C, P = 0,500, a v porovnaní s B, Fisherov presný test). Dva týždne po rakovine submukóznu buniek injekciu v skupine A, ulcerózna žalúdočné rakovina peritoneálnej karcinosou ukázalo typickú VX2 nádorové patológie, s rozšírenými intraperitoneálne metastatických uzlíkov, krvavých ascitu a zreteľný pľúcnych metastáz. Klinicko-patologický priebeh vzor bol veľmi podobné ako u pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka s peritoneálnej karcinosou. Skupiny B a C vykazovali podobnú štruktúru progresie rakoviny, ale
menej agresívne. Závery
Prvá veľká zvierací model peritoneálnej karcinosou z karcinómu žalúdka bola preukázaná laparotomické ortotopické injekciu nádorových buniek VX2 do submukóznu vrstvy žalúdka , poskytuje vhodnejšie model pre chirurgické intervenčných štúdiách. Tieto klinicko-patologické rysy tohto modelu sa podobajú ľudským peritoneálnej karcinomatózu.
Pozadie
lokomotívou regionálne progresie The gastrointestinálnych a gynekologických nádorov často vedie k peritoneálnej karcinosou (PC), ktorý je charakterizovaný prítomnosťou nádorových uzlíkov rôzneho veľkosť, počet a rozmiestnenie na povrchu peritoneálnej, s veľmi zlou prognózou a medián prežitia menej ako 6 mesiacov [1, 2]. Súčasná liečba takéhoto počítače sú systémovou chemoterapii, najlepšie podporovať starostlivosť a paliatívnej liečby, bez nádeje na vyliečenie. Za účelom riešenia tohto problému nová liečebná metóda s názvom cytoreduktívnej chirurgický zákrok (CRS) plus Hypertermická intraperitoneálna chemoterapia (hipec) bol vyvinutý v priebehu posledných dvoch desaťročí, pričom výhody chirurgického zákroku znížiť viditeľnú nádorovú záťaž, a regionálne Hypertermická chemoterapie vykoreniť mikrometastatické [3-6].
aj keď klinické štúdie vykonané postupuje, niektoré experimentálnych zvieracích modeloch počítačov tiež boli vyvinuté, vrátane myších modelov a modelov potkanov s cieľom vyhodnotiť účinnosť a nežiaduce účinky experimentálnych protokolov hipec [7-10]. Hoci také malé zvieracie modely sú použiteľné v experimentálnych štúdiách, je technicky obtiažne vykonávať operácie na malých zvierat kvôli malej veľkosti tela a jemné hemodynamických podmienok. Veľké zviera, ako je prasa bol tiež použitý pre testovanie farmakokinetiky hipec, ale zvieratá boli použité zdravé ošípané skôr ako ošípané s počítačom [11]. Z tohto dôvodu, veľké zviera PC modelu vhodnejšie pre chirurgické intervenčných štúdiách je žiaduce. Tu sme správu o modeli králičie PC na rakovinu žalúdka, s klinicko-patologické rysy napodobniť pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka.
Metódy
zvierat
tridsaťšesť novozélandských bielych králikov, 18 samcov a 18 samíc, telesná hmotnosť medzi 2,5 ~ 3,0 kg, boli získané zo zvierat biologickej bezpečnosti v Level 3 laboratória na Animal experimentálnej časti mesta Wuhan University (Animal Study Certificate SCXK 2003 - 0004). Zvieratá boli umiestnené jednotlivo a nechá voľný prístup k štandardnej laboratórnej potrave a vode, rovnako ako 12 hodín svetla a tmy za deň. Štúdia zviera protokol bol schválený Welfare zvierat výborom Centra.
Kmeň nádoru a príprava nádorových buniek
karcinómu Rabbit VX2 bola použitá pre stanovenie rakoviny žalúdka s PC v tejto štúdii. Nádor VX2 je transplantovateľných králik karcinóm dlaždicových buniek, vyznačujúci sa tým, rýchly rast nádoru a metastáz skoro, vzniknutá z papilomavírusu-indukovanej Rous a spolupracovníci [12]. Nádor bol udržiavaný postupným in vivo
transplantáciu do zadnej nohy 2 nosných králikov použitých pre každý priechod.
Keď nádor VX2 vzrástla na asi 1 cm v priemere na nosnej králika, zviera bolo anestéziu ucha žily injekcia 3% pentobarbitalu sodného (30 mg /kg). Potom, čo kožné a dezinfekciu, nádor bol vyrezaný z nosného králika a umiestni sa do ľadovej 0,9% roztoku chloridu sodného. Nádorové tkanivo bolo mleté ​​do približne 1,0 ~ 2,0 mm 3 fragmenty a suspenduje v 2 ml fyziologického roztoku, potom sa dostávajú do 2 ml vstrekovacie trysky. Iné nádorové tkanivá o 3,0 ~ 5,0 mm 3 boli umiestnené do homogenizátora vložený v ľadovom kúpeli, ku ktorej bolo pridané 3 ml ľadovo chladného fyziologického roztoku a suspenzie nádorových buniek bola vykonaná, s koncentráciou nádorových buniek sa upraví na 5 × 10 10 fľaštička buniek /l.
Výstavba rakoviny žalúdka s počítačom
Všetci králiky mali hladovaniu cez noc pred experimentom, ale voda bola daná ad libitum
. Po randomizácii boli zvieratá anestéziu ušné žily injekciou 3% pentobarbitalu sodného (30 mg /kg). Brušný koža bola čistiť a dezinfikovať. Boli prijaté tri prístupy ku konštrukcii králičie modely PC, 12 zvierat pre každú skupinu. Skupina A submukóznu inokulácii nádorových buniek: od A v strednej čiare incízie 3 cm dlhé bolo vyrobené začína 2 cm pod xyphoid a hornej časti brucha bola otvorená. Žalúdok bol vystavený, 0,1 ml nádorových buniek (5 x 10 10 fľaštička buniek /L) sa vstrekuje do submukóznu vrstvy žalúdka (Obrázok 1), a to prostredníctvom serózna vrstvou a svalovej vrstvy, miesto vpichu sa stlačené po dobu 1 minúty, aby vstrekované nádorové bunky na svojom mieste, a brucho bol uzavretý s dvojitou vrstvou 3-o Vicryl prerušený steh. Skupina B nádorového tkaniva implantácie: Rez bol rovnaký ako v skupine A. Keď bol žalúdok vystavená, malý kúsok čerstvej nádorového tkaniva asi 1,0 mm 3 bol implantovaný do väčšieho omentum bezprostredne pod žalúdočnej dutine, a rana bola uzavretá. Skupina C perkutánna injekciu nádorových buniek: Po kožné, 0,1 ml nádorových buniek (5 x 10 10 fľaštička buniek /ul) sa priamo vstrekuje do hornej časti brušnej dutiny, a miesto injekcie bolo stlačené po dobu 1 min. Po inokulácii nádoru, penicilín G, v dávke 100000 IU /deň bola injekčne intramuskulárne do každého zvieraťa po dobu 3 dní. Všetky zvieratá boli dať intravenózna rehydratácia tekutín so 100 ml 0,9% fyziologického roztoku. Obrázok 1 Konštrukcia králičieho peritoneálnej modelu karcinosou na rakovinu žalúdka. Keď bol králik žalúdka vystavená v celkovej anestézii, 16 G ihla bola zavedená do Serózna a svalovej vrstvy do submukóznu vrstvy žalúdka, a 0,1 ml nádorových buniek (5 x 1010 fľaštička buniek /L) boli injikované a injekčné miesto bolo stlačené po dobu 1 minúty, aby sa nádorové bunky na svojom mieste (pozri text pre podrobný opis). pozorovanie
zvierat a patologické štúdie
po operácii, denné pozorovanie bola vykonaná u každého králika kontrolovať príjem potravy, aktivity, a akékoľvek abnormality, ako je hnačka a dehydratácii. Telesná hmotnosť sa merala každé 3 dni a bol zaznamenaný prirodzený vývoj progresie ochorenia. Aby sa získal podrobný opis postupného vývoja karcinómu žalúdka PC, eutanázia bola vykonaná na 3 králikoch v skupine A na konci týždňov 1, 2, 3 a 4 tým, že predávkovanie injekcií 3% pentobarbitalu sodného cez ušné žily , U zvierat v skupinách B a C, eutanázia bol vykonaný rovnako pri prehliadke nevykazovali zjavné známky úzkosti a odpadu, v súlade s pokynmi UKCCCR pre zaobchádzanie so zvieratami v experimentálnej neoplázie [13]. Posmrtné patologické vyšetrenia súčasťou hrubej patológie ako je veľkosť nádoru a distribúciou; miestna nádorové vlastnosti rakovinou žalúdka, vrátane tvorby vredu, obštrukcie a perforácie; zvláštnosti peritoneálnej karcinosou ako sú krvavé ascites, diskrétne alebo súvislých nádorových uzlíkov na pobrušnici, rakovinových zmien vo väčšom omentum a črevné obštrukciou; metastázy do dôležitých orgánov, ako pečene, nadobličiek, pankreasu a pľúc. Všetky podozrenia na organ tkanivá boli odobraté vzorky na rutinné histopathology štúdii so sekciami farbených hematoxylínom a eosínu (HE škvrny).
Štatistická analýza
telesná hmotnosť a hmotnosť nádoru boli vyjadrené ako priemer ± smerodajná odchýlka (m ± SD). Metastázy v oblasti brucha a krvavé ascites boli zaznamenané ako sporáky a mediány. Verzia SPSS štatistický softvérový balík 10.0 (SPSS Inc., Chicago Il, USA) bol použitý pre analýzu, s obojstranným testu a P < 0,05 bola považovaná za štatisticky významné.
Výsledky
Úspech modelu PC Zoznam Stavebníctvo vo výške 36 zvierat používaných pre modelový PC stavbu, operácia bola úspešná v 33 králikov a 3 zvieratá uhynuli 3 dni po operácii. Zo 3 smrťou, 1 králik v skupine C zomrel rozptýlených peritonitídy v deň 3, pretože perkutánna injekcia bola omylom do tenkého čreva; a 1 králik každý v skupinách B a C zomrel kongestívneho srdcového zlyhania v deň 2 z dôvodu rýchleho rehydratáciu kvapaliny. Ďalších 3 králiky v skupine C nevyvíjal počítač z neznámych dôvodov. Miera úspešnosti bola 100% (12/12) v skupine A, 91,7% (11/12), v skupine B a 58,3% (7/12) v skupine C (p = 0,019, A proti C; P = 0,077, B oproti C. P = 0.500, a oproti B, Fisherov presný test) rast
nádoru a jeho vplyvu na zvieratách
Po injekcii rakovinových buniek do žalúdka submukóze v skupine a, nádor preukázal zrýchlený rast. Veľkosti nádorov boli (0,028 ± 0,012) cm 3, (1,183 ± 0,148) cm 3 a (7,706 ± 1,629) cm 3, v uvedenom poradí, na konci týždňov 1, 2, a 3 . zvieratá ukázala progresívne zníženie telesnej hmotnosti, z (2,48 ± 0,21) kg pred uvedením do prevádzky až (2,45 ± 0,21) kg na týždeň 1, (2,24 ± 0,19) kg v týždni 2, (2,02 ± 0,18) kg na 3. týždni a (1,81 ± 0,1) kg na 4. týždni spolu so zmenami telesnej hmotnosti, kŕmenie a celkový zdravotný stav zvierat zhoršil postupne.
Rastové charakteristiky peritoneálnej karcinosou vo zvieracom modeli
charakteristiky nádoru v skupine a boli starostlivo zaznamenané , Jeden týždeň po submukóze injekcii nádorových buniek, a mnoho malých, pevných a transparentné uzliny sa začala rozvíjať na väčšie omentum a dutine žalúdka. Nebola pozorovaná žiadna ascites. O dva týždne neskôr, uzlíky na väčšie omentum začal zlúčiť do súvislých masy, bez discernable demarcations s žalúdkom. Hmota na žalúdočnej steny rástla väčšie a vyčnieva do dutiny brušnej tvoriť typické rakoviny ulceróznej (obrázok 2). Bol asi 5 ml krvavých ascitu v brušnej dutine. O tri týždne neskôr, mnoho uzlíky sa začala formovať v hrubého a retroperitonea. Konfluentní hmotnosť na väčšiu omentum začal napadnúť pečeň a uzavrite žalúdka (obrázok 3). Často žalúdka hmotnosť a väčšiu omentum hmota zlúčené do jedného veľkého nádoru bloku. Krvavé ascites by mohli dosiahnuť až 100 ml. Došlo tiež určité množstvo tekutiny akumulácie v perikardu. Mnoho uzliny boli vidieť na brušnej stene. Žiadne uzliny boli pozorované v pľúcach. O štyri týždne neskôr, početné nádorové uzliny boli pozorované v pľúcach, pečeni, nadobličky, tenkého čreva, hrubého čreva a priečne močového mechúra. Brušná stena bola úplne napadnutá nádorom. Nádory v skupinách B a C vykazovali podobné rastové charakteristiky. Obrázok 2 Rabbit rakovina žalúdka v skupine A. Dva týždne po submukóznu naočkovaní nádorových buniek VX2, patologické štúdie po eutanázii zvieraťa ukazuje typický ulceróznej rakovinu žalúdka (šípka) na Novom Zélande králika.
Obrázok 3 Rabbit PC model žalúdočné pôvodu zo skupiny A. Tri týždne potom, čo bola VX2 bunky karcinómu vstrekuje do submukóznu vrstvy žalúdka, splývajúce hmoty nádoru na väčšie omentum zapuzdrený žalúdočnej steny (čierna šípka) a pečene (žltá šípka).
Histopatologické charakteristiky VX2 králičieho PC
Všetky skúmané vzorky nádorových prinieslo rozsiahle invazívne rast a deštrukciu tkaniva. Nádory, na väčšie zakrivenie žalúdočné dutine, prenikol slizničnej vrstvu za vzniku vredov. Mikroskopický pohľad mohol nájsť rakovinové hniezda prenikajúce celú žalúdočnej steny s typickými invázie do svalovej vrstvy a žalúdočných žliaz (Obrázok 4A). Nádorové bunky sú guľaté, oválne alebo atypické morfológia s mnohými patologickými mitotických obrázkoch (Obrázok 4B). Tam bolo tiež nápadné lymfocyty, plazmatické bunky a iné zápalové bunky infiltrácie. Obrázok 4 Histopatológia králičieho modelu karcinómu žalúdka s PC, 2 týždne po VX2 buniek karcinómu boli injikované do submukóznu vrstvy žalúdka v nádorových bunkách A. VX2 skupiny napadol celú žalúdočnej steny (4a, x 100, HE škvrny) a ukázalo mnoho patologické mitotické postavy (4B x 200, HE škvrna)
. Hlavné črty tohto králičím modelu počítača pred rakovinou žalúdka by mohli byť zhrnuté v tabuľke 1.Table 1 charakteristiky nádoru z troch rôznych prístupov naočkovaní

Skupina A
skupiny B
skupiny C
technickú funkciu
laparotomické ortotopická
nádorové bunky injekcie do žalúdka submukóze
laparotomické ortotopická
nádorové tkanivo naočkovaní pod žalúdočnej dutine
perkutánna injekcia nádorových buniek do pobrušnice
Úspešnosť
100% (12/12)
91,7% (11/12)
58,3% (7/12)
hlavnými patologickými udalosti
Rapid progresie nádoru vedúce k syndrómu dychovej tiesne, rozptýlené zápal pobrušnice v dôsledku perforácie žalúdka nádoru, črevné obštrukciu, zlyhanie obličiek
rýchla progresia nádoru čo má za následok črevnej obštrukcie, rýchla progresia nádoru zlyhaním obličiek
čo má za následok črevnej adhézie prekážku, zlyhanie obličiek
makroskopické patológie
ulcerózna rakovinou žalúdka s PC, ascitom
ulcerózna rakovinou žalúdka s PC, ascitom
PC bez žalúdočného vredu, ascites
histopathology
Prienik rast rakovinových bunkových hniezd napadajúce okolité štruktúry, nádorové nekrózy v centrálnej zóne nádoru
Výhody
najviac podobá klinickú rakovinou žalúdka s PC
technicky menej ťažké
technickej jednoduchosti
Nevýhody
technicky obtiažne
nie je to presne napodobniť rakoviny žalúdka s PC
Chybné injekcie do čriev
diskusiu
PC predstavuje vážny klinický napadnúť pri liečbe gastrointestinálnych a gynekologických nádorov. V karcinómu žalúdka, PC je častou akcie s 15% až 50% alebo viac pacientov s PC na chirurgické prieskumu, najmä v prípade, že je Serózna zapojenie nádorom [14-16]. Dokonca aj po kuratívnej resekcii rakoviny žalúdka, PC zostáva hlavným problémom pooperačné recidívy. Kórejský štúdie u 500 pacientov s karcinómom žalúdka liečených pomocou normalizovaného radikálnej gastrektómii a lymphadectomy, zistili, že do 5 rokov pridanie gastrektómii, PC je najčastejšou vzor (51,7%), z rakoviny recidívy [17]. Ďalšie randomizovaná prospektívna štúdia v Japonsku tiež zistil, peritoneálnej recidíve je najčastejšou udalosť (15,8%) pri 3 roky 530 pacientov liečených vysoko štandardizovaným liečebným gastrektómii [18]. Prospektívnej talianska štúdie u 200 pacientov zistené, že pri priemernej dobe sledovania 42,3 mesiacov, PC tvorili 32,9% z recidívy [19]. Ďalšie taliansky štúdie s 441 pacientmi s rakovinou žalúdka ukázal 17% PC opakovania pri strednej dobe sledovania 48 mesiacov [20]. Z tohto dôvodu, a synchrónny metachronní PC je najdôležitejším problémom žalúdočné recidívy rakoviny a metastáz. Taký žalúdočné PC je spojená so zlou prognózou s mediánom prežitia v rozmedzí 1-1.6 mesiacov [21, 22] až 3,1-9měsíce [1, 15]. Ako ich správne uvedené, je riziko peritoneálnej opätovného výskytu karcinómu žalúdka je obzvlášť vysoké u pacientov s difúznou zmiešané nádorov a infiltrácie serózna blany, proti ktorému operácie sám, bez ohľadu na to, ako radikálne, môže ponúknuť malú možnosť vyliečenia [20]. Z tohto dôvodu sa vyžadujú nové komplexné liečebné stratégie.
Klinické štúdie naznačujú, že CRS plus hipec mohol dosiahnuť dobrú účinnosť u vybraných pacientov s PC. Pokiaľ je nám známe, že sú 4 inštitucionálnej štúdie CRL navyše hipec u pacientov s karcinómom žalúdka, 2 retrospektívnu (42 a 26 pacientov, v uvedenom poradí) [3, 23] 1 potenciálnym (49 pacientov) [4] a referenčná nerandomizovaných ( 34 pacientov) štúdie [24]. Medián prežitia sa pohybovala od 6,6 mesiacov [24], 8 mesiacov [23] na 10-11 mesiacov [3, 4] a prežitie 5 rokov pohybovala v rozmedzí od 6% [3, 25] 16% [4]. Tieto klinické štúdie sú založené na nehomogénnych a neštandardné skupín pacientov. Aby bolo možné objektívne zhodnotiť viac také ošetrenie, je nutné, aby túto spôsob liečby za experimentálnych podmienok.
Boli vytvorené malé zvieracie modely počítača, vrátane holých myší modely a modely potkanov [26-29]. Vo väčšine z týchto zvieracích modelov, rakovinové bunky sa injekčne priamo do pobrušnice, čo bude mať za následok rozsiahle PC včas [25, 30-32]. Všetky tieto malé zvieracie modely sú vhodné len pre samotnú hipec, pretože malá veľkosť tela a obmedzený prívod krvi nemôže stať väčších chirurgických zákrokov. Zriadenie veľké zvieracom modeli počítača z rakoviny žalúdka je nevyhnutná pre experimentálne štúdie testovanie CRS a hipec.
Karcinómu VX2 je králik nádor epiteliálneho pôvodu, so sídlom od papilloma vírusu vyvolané Rous a spolupracovníci [12]. Vyznačujúci sa tým, rýchly rast nádoru a skoré metastázy, tento nádor je veľmi malígny a môžu byť transplantované allogeneously takmer kdekoľvek na králikoch. Aj keď VX2 je karcinóm dlaždicových buniek, model, ktorý sa môže líšiť od adenokarcinómu, bol použitý v mnohých experimentálnych štúdií na hlave a krku [33-36], rakovina pľúc [37], rakoviny pažeráka [38, 39], prsníka rakovina [40], rakoviny žalúdka [41, 42], rakoviny pečene [43, 44], rakovina hrubého čreva [45, 46], rakoviny obličiek [47-49], rakoviny močového mechúra [50], nádor kostí [51] a jednoduché peritoneálnej Karcinomatóza [52]. V tejto štúdii sme skonštruovali králičie model rakovinou žalúdka s PC. Naše výsledky ukazujú, že ortotopická inokulácii nádorových buniek do žalúdka je najvhodnejšie metódou, čo má za následok typické ulcerózna rakovinou žalúdka a progresívne PC, všetko je k dispozícii podobný priebeh klinicko-patologická pacientov s rakovinou žalúdka. V porovnaní, perkutánna injekcia nádorových buniek do brušnej dutiny, môže dôjsť k poraneniu čriev omylom. Č ulcerózna rakovina žalúdka by mohla byť indukovaná, a rýchlosť nádor brať je nízka. Tieto výsledky podporujú názor, že ortotopická modelu nádoru je výhodné pre štúdium nádorových biologické správanie a intervencie [53]. Prirodzená histórie tohto modelu je asi 4 týždne, vrátane neidentifikovateľnom fáze v prvom týždni, klinickom štádiu v druhom týždni, zrýchlené fáze PC v treťom týždni a terminálnom štádiu vo štvrtom týždni. Typickými rysy sú PC peritoneálnej rakovina konkrécií rôznych veľkostí počas celého brušnej dutine, "omentum torte", črevnej obštrukcie a krvavých ascitu. Koniec prvého týždňa by mohlo byť považované za skoré osobnom počítači, pričom na konci druhého týždňa ako pokročilé PC. Preto by špecifická liečba prístupy by mohli byť navrhnuté tak, aby zamerať buď predčasné PC alebo pokročilý PC.
Závery
králičím modelu rakoviny žalúdka s počítačom bol zriadený injekčným vstrekovaním rakovinových buniek VX2 do submukóznu vrstvy žalúdka. Tento model sa vyznačuje typickým ulcerózna rakovinou žalúdka s progresívnym počítačom, takže je vhodnejšie pre chirurgické intervenčných štúdia na vyhodnotenie CRS a hipec proti žalúdočným PC.
Poznámky
Lie-Jun Mei, Xiao-Jun Yang prispeli tiež pre toto . práca
deklarácia
Poďakovanie
Táto práca bola podporovaná nadácie pre Autor Národný vynikajúcu dizertačnej práce z Číny (č FANEDD-200464); Science fond pre tvorivej výskumnej skupiny Národná prírodná Science Foundation Číny (No. 20621502, 20921062).
Autori ďalej len "pôvodné predložený súbory obrazov
Nižšie sú uvedené odkazy na autorov pôvodnej predložených súborov pre obrázky. "Pôvodný súbor pre Obrázok 1 12885_2009_1923_MOESM2_ESM.jpeg autorského 12885_2009_1923_MOESM1_ESM.jpeg autorov pôvodného súboru na obrázku 2 12885_2009_1923_MOESM3_ESM.jpeg autorského pôvodného súboru pre Obrázok 3 12885_2009_1923_MOESM4_ESM.jpeg autorského pôvodného súboru na Obrázok 4 pôvodného súboru 12885_2009_1923_MOESM5_ESM.pdf autorského na obrázku 6 konkurenčné záujmy
autori vyhlasujú, že nemajú žiadne protichodné záujmy.

• Dávke závislé inhibícia žalúdočnej zranenia vodíkom v alkalickom elektrolyzovanou pitnej vode
• Vyšetrenie koní žalúdočných žliaz lézií pre baktérie, vrátane Helicobacter spp fluorescenčnej in situ hybridizácia