Стойкие колонизация H. Pylori в раннем возрасте приобретения у мышей, связанных с повышенной желудочной сиалированного Льюиса X, ИЛ-10, но ниже, интерферон γ-expressions

Стойкие Г. пилори
колонизация в раннем возрасте приобретения у мышей, связанных с повышенной желудочной сиалированного Льюиса X , IL-10, но ниже, интерферон гамма выражения
Аннотация
фон
хеликобактерной
инфекции менее распространены в детском возрасте. Это исследование подтверждено ли темпы хеликобактерной
колонизации зависят от разных возрастов приобретения, и коррелируют с различными желудочными антигенов Льюиса или цитокинами выражений после хеликобактерной
приобретения.
Методы
Мы применили молодой (7-дневного возраста) мышей C57BL /6 группа (п = 50) и взрослых (6-недельных) мышей C57BL /6 группа (п = 50). В каждой группе 30 мышей заражали с хеликобактерной
и 20 мышей служили в качестве контроля наивным. Успех антихеликобактерной
колонизации была оценена на 2 й неделе и 8 й недели, соответственно. Интенсивность Льюиса х, сиалилированы Льюис х (сиалил-Le х), и цитокин выражения, включая TNF-alpha, IFN-gamma, IL-6, IL-10, и IL-1, были иммунохимически окрашена и сортовой.
Результаты
на 2 й недели после того, как хеликобактерной
вызов, темпы колонизации H. Pylori
были похожи между молодых мышей и группой взрослых мышей (89 % против 100%, P &
ГТ; 0,05). Тем не менее, на 8 й недели, H. Pylori
скорость колонизация была достоверно ниже в группе молодых мышей, чем в группе взрослых мышей (53% против 95%, p = 0,003
). На 8 й неделе, молодых мышей с сохранением H. Pylori
колонизации была выше сиалил-Ле х, выше, IL-10, и ниже IFN-γ, чем у мышей, которые потеряли колонизация в течение 2 й к 8 й неделе (P &
ЛТ; 0,05).
Заключение
сохранением хеликобактерной
колонизации может быть приобретение возраста определителя обработать. После того, как H. Pylori
экспозиции в раннем возрасте приобретения, принимающей ответ с более высокой сиалил-Ле х и IL-10, но с более низким IFN-gamma коррелирует с последующим сохранением H. Pylori
колонизация.
Введение
хеликобактерной
инфекция может вызвать хронический гастрит и даже язвенную болезнь у детей и взрослых [1, 2]. В эпидемиологических исследованиях сероположительность антихеликобактерной
было показано, что у детей меньше, чем у взрослых [3, 4]. Последующее исследование когорты показало, что самый высокий уровень сероконверсии происходит в раннем детстве и постепенно уменьшается с возрастом [3]. Некоторые исследования предполагают, что раннее приобретение H. Pylori
инфекции в детстве, возможно, привести к последующей потере колонизации [3-6]. Однако точные правила в пределах детей, чтобы определить, либо потерю или сохранение H. колонизации пилори
после раннего приобретения остается не известным.
Группой крови связывания адгезин (Baba) антихеликобактерной
селективно связывается к фукозилированные антигена Льюиса (Le б) клетки желудка, опосредующего тяжелую бактериальную колонизацию [7-9]. Другая кислота-связывающий Адгезиновая сиаловой (SabA) антихеликобактерной
связывается с желудочной сиалированного Льюиса х антигена (сиалил-Ле х) в качестве альтернативы помощь упорную колонизацию после хронического воспаления [10], и особенно становится важным когда Ле антигену хозяина отсутствует или слабый [11]. Наше недавнее исследование показало что H. Pylori
-infected дети имели значительное увеличение сиалил-Le х, но не Ле Ь выражение [12]. Таким образом, интересно проверить, является ли сохранение раннего приобретения антихеликобактерной
в детском возрасте может быть связано с переменными ответов хозяевах воспаления желудка или эпителиального сиалилирования адаптировать SABA антихеликобактерной
.
с взрослых мышей C57BL /6 старше шести недель возраста, штаммы клинической H. Pylori
может успешно колонизировать большую часть мышей в течение более шести месяцев [13, 14]. Хронический H. Pylori
инфекция приводит к различным типа Th1 преобладающих желудочных воспалений с переменными провоспалительных и Th1-доминантных реакций цитокинов типа между различными хостами [15-18]. Соответственно, нынешнее исследование, направленное сначала проверить, является ли сохранение H. Pylori
колонизации может быть процессом, определяющим приобретение возраста. Кроме того, в этом исследовании сделана попытка ответить ли переменная сиалил-Ле х и воспалительные выражения цитокина после хеликобактерной
вызов может определить упорную колонизацию антихеликобактерной
инфекции, особенно у мышей, получающих проблема раннего приобретения.
материалы и методы
мыши группы и H. пилори
изолирует для вызова эксперимента
в данном исследовании использовали 100 мышей C57BL /6 (50 семь-дневных молодых мышей и 50 шесть -недельный-старый взрослых самцов мышей), в том числе 60 в экспериментальной группе оспариваемой с 1-го типа, SabA-инфицированной H. Pylori
клинический изолят (HP 625) и 40 в наивных управления. Умножений H. Pylori
изоляты были применены с тем же самым способом, как нашего предыдущего исследования мышей модели для достижения плотности 0,8 × 10 8 КОЕ /мл. [19]. Для экспериментальной группы, бактерии суспензии 0,1 мл для молодых мышей и 0,5 мл для взрослых мышей вводили перорально засевают в течение трех дней подряд, соответственно. Десять каждого из молодых и взрослых мышей контрольной группы были умерщвлены на 2 й и 8 й недели. В экспериментальных мышей, десять каждый из молодых и взрослых мышей при й 2-й неделе и 20 каждый из молодых и взрослых мышей на 8 й недели после прививки были умерщвлены с помощью интраперитонеальной инъекции пентобарбитала ( 150-200 мг /кг). Выделенные желудки были врезаны вдоль больших и малых искривлений на две половины. Одна половина была формалином встраиваемый для гистологии и Льюиса антиген экзаменов. Другая половина сразу же помещали в буфере, замораживали на сухом льду и хранили при -80 ° С для цитокина обследования. H. пилори
инфекция была доказана с помощью экспресс-теста мочевины и гистологическое исследование.
Желудочный гистологию мышей
Два исследователя в том числе один патологоанатом, не подозревая о демографических данных и результатов колонизации, анализировали гистологию желудка. Применяя метод нашей предыдущей модели мышей [19], гистологические параметры, в том числе хеликобактерной
плотности (диапазон 0-4), острый воспалительный счет (AIS, диапазон 0-3), хроническое воспаление балла (СНГ, диапазон 0-3), атрофические изменения (AT, диапазон 0-1), и кишечная метаплазия (IM, диапазон 0-3) оценивали топографически над антрума, корпус и кардии, соответственно. Система классификации антихеликобактерной
плотности используется следующим образом: 0, не обнаружено бактерий; 1, умеренный уровень колонизации бактерий и не обнаруженных в каждом желудочной склепе; 2, мягкий уровень колонизации бактерий, обнаруженных в большинстве крипт присутствующих; 3, от умеренной до тяжелой колонизации во всех склепов; и 4, тяжелая колонизация со всеми крипт плотно упакованы с бактериями. Результаты, представленные представляют собой среднее значение колонизации для каждой группы. Общее Н. Pylori
плотность (THPD) была определена как сумма плотностей, полученных из антрального отдела, корпус и кардии, и, таким образом, в диапазоне от 0 до 12. Общий острый (ТАИС) и хроническим (ВСТК) оценки воспалительного были также сумма баллов из трех местах (диапазон 0-9).
Бактериальные инфекции H.pylori,
была определена как наличие каких-либо бактерий в желудочном участках, в то время как мыши, считались не смогли засевать, когда бактерии не были замечены в гистологии и отрицательным для теста CLO.
иммуногистохимического окрашивания и подсчета очков в желудочном экспрессии Льюиса
иммунное желудка образцов для антигенов Льюиса проводили с помощью авидин-биотин-пероксидаза технику с векторною Ms.OM Иммунологический Kit. Первичный моноклональное антитело (анти-Le х, Signet Laboratories, Inc., Dedham, MA) был выбран для обнаружения желудка Le х антигенов [11, 12]. К тому же Le х антиген окрашивание, моноклональное антитело против сиалил-Le х (мышь IgM MAB2096, Chemicon International, Inc., Temecula, CA) был использован [12]. Сайты неспецифического связывания насыщали 2-2,5% бычьего сывороточного альбумина. Для каждого участка желудка, интенсивность Le х (диапазон 0-5) и сиалил-Le х (диапазон 0-4) был забит в соответствии с топографией окрашивания (рисунок 1). Общая желудочная Льюиса интенсивность антигена для Le х и сиалил-Le х была сумма антрума, корпус и кардии (диапазон 0-15 в Ле х и 0-12 в сиалил-Le х). Рисунок 1 Иммуногистохимическое (IHC) окрашивание и градация Льюиса х (Le х), и сиалил-Льюис х (sialyl- Le х) антигены показаны для желудочных биопсий мышей (200 ×). Окрашивание IHC показали отрицательный для двух антигенов Льюиса и был передан как оценка 0. Для Lex, оценка 1 (A): скудное окрашивание (&л; 5% в париетальных клетках глубоких желез; оценка 2 (B): глубокие железы 5 -50% окрашивание и слабый; балл 3 (C): глубокие железы > 50% окрашивание и сильный; оценка 4 (D): целый пласт глубоких желез с поверхностным эпителием окрашивания, без выражения слизи; оценка 5 (E): вся . слой с выражением слизи Для sialyl- Lex, оценка 1 (F): только поверхность слизи положительный; оценка 2 (G): слизь и верхний эпителий; балл 3 (H): верхний эпителий и глубокие железы (главные клетки &лт; 50% .); 4 балла (I): верхний эпителий и глубокие железы (главные клетки ≥ 50%)
иммуногистохимического окрашивания и скоринг для экспрессии цитокинов
замороженном секций (4 мкм) сушат при комнатной температуре в течение 2 ч, и фиксировали 3,7% формальдегидом в течение 1 мин. После промывания PBS дважды, образцы фиксировали холодным ацетоном и затем промывают PBS. Мышь Ig, блокирующий реагент (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) использовали для блокирования сайты неспецифического связывания. Антитела анти-мышиных моноклональных (TNF-a, IL-6, IL-10, IL-1, и IFN-gamma) и кроличьи антитела против мышиных поликлональных антител (IL-1β) использовали в качестве первичного антитела. ПХ полимерный конъюгат широкий спектр (Zymed Laboratories Inc. South San Francisco, CA, USA) использовали в качестве 2 го антитела. Комплект АЕС был использован для иллюстрации пятно. Интенсивность каждого цитокина оценивали в соответствии с распределением положительных окрашивания клеток на эпителий (диапазон 0-3), а на компонентах собственной пластинке слизистой оболочки, в том числе матрицы, полиморфно-клетки, лимфоциты и фиброцитами (Таблица 1) .table 1 Подсчет очков цитокин выражений на желудочном эпителии и собственной пластинке слизистой оболочки.
<й>
оценка

<й>
0

1

2 3

эпителии
Отрицательный
Менее 33%
33% -67%
Более 67%
Propria
Lamina Матрица

Отсутствие
присутствия


лимфоцитов Отсутствие
Присутствие
Fibrocyte

Отсутствие
Присутствия
Нейтрофильная

Отсутствие
Присутствие
количественного озвучивание каждого цитокина на эпителий распределились следующим образом: 1 балла: положительное окрашивание в цитоплазме эпителиальных клеток только на верхней 1/3 часть эпителия; 2 балла: на верхней и средней части эпителия (1 /3-2 /3); оценка 3: на весь слой эпителия (&GТ; 2/3). Положительное окрашивание каждого цитокина на собственной пластинке слизистой оболочки (лимфоциты, фиброцитами и нейтрофилы) означает, что было больше, чем пять положительных клеток в высокой мощности поля зрения в микроскопическом исследовании.
Статистический анализ
х Пирсона 2 тест был использован для того чтобы испытать разницу скоростей между колонизация экспериментальных и контрольных мышей. Гистологические параметры, антигены Льюиса и выражения цитокина сравнивали с помощью точного критерия Фишера для различных подгрупп. Тест Фридман был использован для того чтобы испытать разницу плотности H. пилори
между антрума, корпус и кардиального отдела желудка у каждой мыши. Все тесты были оценены двумя хвостами и значение р
&л; 0,05 принималась значимыми.
Результаты
Скорости успешной хеликобактерной
колонизации у мышей с различными возрастными приобретения
На 2 й неделе после того, как H. пилори
вызов, H. Pylori
колонизация была успешной в 89% (8/9) молодых мышей группы и 100% (10/10) группы взрослых мышей. В отличие от этого, на 8 й недели после того, как хеликобактерной
вызов, скорость колонизации была значительно ниже у молодых мышей, чем у взрослых мышей (53% против 95%, p = 0,003
). Для тех мышей с успешной колонизации либо на 2 й или 8 й недели, плотность H. Pylori
были равномерно распределены по антрума, Corpus, и кардии в обоих молодых и взрослых мышей ( P
> 0,05)
Повозрастные желудка Льюиса антигена и цитокинами выражения в наивных мышей
В наивных мышей обоих молодых и взрослых групп, выражения Ле х и sialyl-. Le х были слабыми на антрума желудка. Тем не менее, постепенное увеличение суммарной интенсивности Le х и сиалил-Le х выражения была раскрыта в приращений возраста (рис 2A &Amp; 2B). Такое увеличение достигало плато от хронологического возраста в районе 5 недель. На 2 й недели и 8 й недели после хеликобактерной
вызов, Ле х выражения не отличались между колонизацией и контрольных мышей в обоих молодых и взрослых групп. Рисунок 2 Интенсивность желудочной Льюиса антигенов в простых мышей на разных возрастов жизни (А) Льюиса х, (б) сиалил-Льюиса х.
Интенсивность желудочной экспрессии цитокина варьировалась между различными временами мышей и местоположения. Для провоспалительных цитокинов, не было никаких положительных окрашивание ФНО-альфа и IL-6 на поверхностном эпителии в любом из нативных мышей. Положительные окрашивание ФНО-альфа и IL-6 на лимфоцитах, фиброцитами и нейтрофилы над собственной пластинке слизистой оболочки были значительно выше у мышей в возрасте ≥ 5 недель, чем те, в возрасте ≪ 5 недель (P &
л; 0,01; Фиг.3А &Amp; 3B). Положительное окрашивание IL-1, в основном, находится на эпителии и выразил рано у мышей в возрасте < 5 недель. Скорость положительного окрашивания IL-1 на нейтрофилы была выше у мышей в возрасте ≥ 5 недель, чем в возрасте &л; 5 недель (P &
л; 0,05; Рисунок 3C). Рисунок 3 Желудочный цитокина выражения на эпителии и собственной пластинке слизистой оболочки между наивных мышей в возрасте ≥ 5 недель и &ЛТ; 5 недель. (А) Опухоль некротический фактор альфа (TNF-α), (B), интерлейкин-6 (ИЛ-6), (С), интерлейкин-1 бета (IL-1), (D), гамма-интерферона (ИФН-γ), и (Е ) интерлейкин-10 (ИЛ-10).
в начале жизни у мышей, положительный ИФН-γ окрашивание было в большинстве найденных на эпителии и матрицы, а интенсивность положительного IFN-gamma окрашиванием уменьшилось после того, как возраст ≥ 5 недель (P &
л; 0,01, рис 3D). Тем не менее, значительно более высокий уровень положительного IFN-гамма окрашивания на лимфоциты и фиброцитами была раскрыта в мышей в возрасте ≥ 5 недель, чем в возрасте &ЛТ; 5 недель (P
≪ 0,01).
В отличие от тяжелой IFN-gamma окрашиванием на эпителий в раннем периоде жизни мышей, ИЛ-10, как правило, отрицательным на эпителии. Положительное окрашивание IL-10 была выше на лимфоциты и фиброцитами у мышей в возрасте ≥ 5 недель, чем в тех, в возрасте &л; 5 недель (P &
л; 0,05; Рисунок 3E).
Мыши гистологии и экспрессия антигена Льюиса после хеликобактерной инфекции

О 2-й недели после того, как H. пилори
отводом, H. Pylori
-colonized молодых мышей, казалось, немного более высокий уровень высокой ВСТК (оценка ≥ 4), чем у контрольных мышей (88% против 50%, P = 0,15
), но такое маргинальное значение не раскрывается у взрослых мышей (30% против 30%, p = 1,00
). Кроме того, в группе молодых мышей, мышей с постоянной колонизации на 8 й неделе была, очевидно, более высокий уровень высоких ВСТК, чем у мышей, которые потеряли колонизационную (40% против 11%, p = 0,30
) , На 2-й недели после хеликобактерной
вызов, процент колонизированных молодых мышей, имеющих высокую интенсивность сиалил-Le х выражение (оценка ≥ 7) снизилась по сравнению с контрольной группы мышей (25% против 60%, p = 0,19
). Тем не менее, такое падение не было видно на 8 й недели (100% против 90%, p
> 0,05) и с взрослых мышей на 2 й недели (90% против 100 %, P
> 0,05) и 8 й недели (58% против 60%, P &
Гт. 0,05) после того, как H. Pylori
проблем
Желудочный выражение цитокины после того, как H. Pylori
инфекция
о 2-й недели после хеликобактерной
вызов, молодой мыши с успешной колонизации, имели значительно более высокую интенсивность IL-6 на фиброцитами (75% против 0 %, P = 0,002
) и матрица (75% против 20%, p = 0,05
), но ниже, IFN-γ (0% против 100%, P &
л; 0,001) на матрица, чем наивных управления (таблица 2). Кроме того, у взрослых мышей, мышей с успешной колонизации были раскрыты, чтобы иметь более низкий уровень IFN-γ экспрессии на фиброцитами, чем у контрольных мышей (30% против 90%, P = 0,02
) .table 2 цитокин желудка выражения на 2-ой недели молодых и взрослых мышей со стойкими H. Pylori
колонизация и наивным контрольных мышей.
<й>
<й>
молодых мышей

взрослых мышей

Параметр (%)

Обсемененная
(п = 8) <бр>
управления
(п = 10)

P
значение

Обсемененная
(п = 10)

управления
( п = 10)

P
Значение

IL-6 *
Матрица
75
20
0,05
70
30
NS
лимфоцит
50
10
NS
60
70
NS
Fibrocyte
75
0
0,002
80
50
NS
нейтрофильных

20 37,5
NS
20
70
0,07
TNF-α *
Матрица <бр> 87,5
70
NS
80
90
NS
лимфоцит
62,5
40
NS
90
90
NS
Fibrocyte
87,5
40
0,07
100
90
NS
нейтрофильных
12,5
10
NS
30 <бр> 40
NS
IL-1β
Эпителий ≥ 2
100
70
NS
100
90
NS
Матрица
a25 0

NS
100
80
NS
лимфоцит
25
20
NS
30
0
NS <бр> Fibrocyte
a25
60
NS
100
100
NS
IFN-γ
Эпителий ≥ 2
0
30
NS
10
0
NS
Матрица
0
100
&л; 0.001
40
20
NS
Лимфоцит
0 0

NS
10
30
NS
Fibrocyte
12.5
10
NS
30
90
0,02
Neutrophil
0
0
NS
10
20
NS
IL-10*
Matrix
a25
60
NS
100
80
NS
Лимфоцит
25
20
NS
60
60
NS
Fibrocyte
a37.5
50
NS
100
80
NS
нейтрофильных
12,5
0
NS
10
20
NS
СНГ: хронический воспалительный счет; AIS: острые воспалительные счет. *: Колонизировали средства мышей, инфицированных H. Pylori
с успешной колонизации (положительный тест на мочевину и гистологии) на жертву. а: Р значение
&л; 0,01; B: P значение
≤ 0,05 между молодыми и взрослыми колонизированных мышей. NS: не имеет значения. * Указывается по этому показателю, эпителий достаточно слабый для такого цитокина на иммуногистохимического окрашивания.
На 8 й недели после того, как хеликобактерной
вызов, темпы высокой TNF-alpha (100% vs. 20%, Р = 0,02
) на матрице и высокой IL-1 (100% против 20%, p = 0,02
) на фиброцитами были у молодых мышей с персистирующей колонизации выше, чем у контрольных мышей ( Таблица 3). Для взрослых мышей с успешной колонизации, темпы высокой IFN-gamma (30% против 100%, p = 0,003
), ИЛ-10 (20% против 100%, p = 0,001
) и IL-6 (50% против 100%, p = 0,03
) на фиброцитами были также значительно ниже, чем у контрольных мышей наивных. Тем не менее, все чаще и чаще в колонизированными взрослых мышей, чем у контрольных мышей, имеют более высокий IFN-gamma (80% против 40%), IL-10 (80% против 40%), и IL-6 (80% по сравнению с 30%) на matrix.Table 3 цитокина выражения на 8-й неделе молодых и взрослых мышей с постоянными и потеряли H. Pylori
колонизация и наивным контрольных мышей.
<й>
<й>
молодых мышей

взрослых мышей

переменные (% )

Стойкие колонизация
(п = 5)

Проиграл колонизация
(п = 4)

управления
(п = 10) <бр>
P
† значение

Стойкие колонизация
(п = 10)

управления
(п = 10)

P <бр> значение

IL-6 *
Матрица
100
80
50
NS
80
30
NS
Лимфоцит <бр> 25
60
50
NS
70
70
NS
Fibrocyte
100
80
70
NS
50
100
0,03
нейтрофильных 0

20
50
NS
20
70
NS
TNF-α *
Матрица
100
100
20
NS
100
60
NS
лимфоцит
100
80
60
NS
90
90
NS
Fibrocyte
100
100
70
NS
100
80
NS
Нейтрофильная
25
20
60
NS
10
40
NS
IL-1β
Эпителий ≥ 2
100
80
70
NS
100
80
NS
Матрица
75
40
30
NS
100
80
NS
лимфоцит
50
60
0
NS
50
60
NS
Fibrocyte
100
60
20
NS
100 100

NS
Нейтрофильная
0 0

20
NS
0
10
NS
IFN-γ
Эпителий ≥ 2
0
80
20
0,048
30
0
NS
Матрица
75
100
40
NS
80
40
NS
лимфоцит
75
60
40
NS
30
50
NS
Fibrocyte
75
100
50
NS
30
100
0,003
Neutrophil
0
0
40
NS
20
0
NS
IL-10*
Matrix
100
20
70
0.048
80
40
NS
Лимфоцит
100
20
70
0,048
40
50
NS
Fibrocyte
100
60
70
NS
20
100
NS
нейтрофильных
50
0
10
NS
0
10
NS
†: значение сравнивали между молодыми мышами с персистирующей и потерянной колонизации. * Указывается по этому показателю, эпителий достаточно слабый для такого цитокина на иммуногистохимического окрашивания.
Высшее сиалил-Lex сосуществует с более высоким IL-10, но ниже INF-гамма для H. Pylori
колонизация
На 2 й неделе, колонизировали молодых мышей не было существенной разницы в интенсивности сиалил-Le х экспрессии, чем у контрольных мышей (P &
GT; 0,05). Тем не менее, на 8 й недели после того, как H. пилори
вызов, молодых мышей с постоянной колонизации имели более высокий уровень наглядной х выражение сиалил-Le (оценка ≥ 7), чем у мышей, потерял колонизация (100% против 56%, p = 0,03
). В дополнение к показу более высокий уровень сиалил-Le х выражение (оценка ≥ 7), все упорно H. Pylori
-colonized молодых мышей значительно сосуществовали с более низким IFN-gamma и высших IL-10 выражений, чем те мыши, которые потеряли постоянную колонизацию на 8 й недели (таблица 4, 100% против 0%, P = 0,008
) .table 4 низкий желудочной IFN-γ (оценка ≤ 1) выражение, стоящее эпителий сосуществующих с высокой сиалил-Lex (оценка ≥ 7) и IL-10 (как на матрице и лимфоцитов) коррелировала с постоянной бактериальной колонизации в раннем возрасте приобретения мышей.
выражение цитокина (%)

Колонизация молодых мышей

OR (95% ДИ)

P значение
*

<й>
Persistent (п = 4) завод
Потерянных (п = 5)

<й>
<й>
низкий IFN-gamma
100
20
0.2 (0.1-1.2)
0,048
High IL-10
100
0
-
0,008
низкий IFN-gamma и высокой сиалил -Lex
100
0
-
0,008
низкий IFN-γ и высоким IL-10
100
0
-
0,008
ИЛИ : отношение шансов; CI: доверительный интервал; *: Точный тест
Таблица 5 Фишера показывает озвучивание IFN-gamma на эпителии и IL-10 на матрице и лимфоцитов у мышей с постоянными и потерянной колонизации в 8 й неделе после хеликобактерной <бр> вызов. Ни один из молодых мышей с персистирующей бактериальной колонизации не имели экспрессию IFN-gamma на эпителии, но имели очевидные IL-10 экспрессию на матрице и лимфоцитов по сравнению с мышами, не colonization.Table 5 Счет IFN-gamma на эпителии и IL -10 на матрице и лимфоцитов на 8-й неделе после H. Pylori
вызов в молодых мышей с и без постоянной колонизации.
<й>
<й>
<й>
Суммарная оценка IL-10

Mice No.

Колонизация

Суммарная оценка IFN-gamma на эпителии

на матрице бесплатно на lymphocyte

1
Yes
0
1
1
2
Yes
0
1
1
3
Yes
0
1
1
4
Yes
0
1
1
5
No
1
0
0
6
No
2
1
0
7
No
2
0
0
8
No
2
0
0
9
No
2
0
1
Обсуждение
Приобретение хеликобактерной
в основном происходит в детстве и спонтанное устранение инфекции обычно происходит у детей младшего возраста [3-6, 20]. В этом исследовании, C57BL /6 взрослых мышей имели благоприятный H. Pylori
скорость колонизационную изолятов в диапазоне более чем на 80%, которая совместима с предыдущими отчетами [13, 14]. Этот высокий уровень колонизации у взрослых мышей также совместим поддержать тот факт, что поздно приобретение H. Pylori
у взрослых больных людей, как правило, приводит к хронической колонизации [20]. Кроме того, по сравнению с 2 й недели после того, как молодых мышей хеликобактерной
приобретения, скорость колонизации в 8 й неделе составила 53%, что подтверждает, что спонтанное устранение хеликобактерной <бр> на самом деле происходит во время раннего возраста приобретения мышей. Таким образом, данное исследование должно быть оригинальными, чтобы ввести модель мыши, предназначенный для подтверждения того, что должно быть потеря H. Pylori
колонизации после ранее приобретения H. Pylori
, которая точно имитирует клинические результаты у молодых детей.
Наше предыдущее исследование показало, что интенсивность желудочной Le х положительно связана с приростом возраста у человека [12]. Тем не менее, для тех, кто без хеликобактерной
инфекции, экспрессия сиалил-Le х на желудочный эпителий слаба или отсутствует в диспептических детей и взрослых [12]. Совместимость с людьми, интенсивность желудочной сиалил-Le х мышей также положительно коррелирует с приращением возраста (Фигура 2В). Такой вывод у мышей также совместим с исследования на крысах, который раскрыт связанное с возрастом приращение гликозилирования в тканях печени [21]. Увеличение желудка сиалил-Le х выражение после хеликобактерной
инфекции было сообщено в организме человека и обезьян макак [9-12]. Тем не менее, в нашем исследовании мышей, снижение интенсивности желудочного сиалил-Le xwas раскрыта в H. Pylori
-infected молодых мышей, но не у взрослых мышей на 2-й недели, по сравнению с управляющие мышей. Более поразительно то, что на 8 й недели после хеликобактерной
приобретения, такое уменьшение сиалил-Le х исчез в обоих колонизированных молодых и взрослых мышей, которые имели полностью сиалилированы слизистую оболочку желудка. Этот факт позволяет предположить, что H. пилори
вызов должен быть вовлечен нарушить связанные с возрастом созревания кривой сиалилирования у молодых мышей. Кроме того, это косвенно свидетельствует о том, что изменения антигена сиалил-Льюиса у молодых мышей должна быть тесно связана с сохранением или потерей хеликобактерной
колонизации.
В этой животной модели, ранняя H. Pylori
приобретение вызвало повышение СНГ, чем в контроле на 2 й недели (87,5% против 50%, p = 0,15
), но не на 8 й недели (40% против 30%, P
= 0,36) после того, как антихеликобактерную
вызов. Предполагая, что плотное воспаление вызывает более серьезные клинические симптомы, это изменение гистологии может быть соотнесена с нашими предыдущими выводами, что H. пилори
инфекция может вызвать кратковременную боль в эпигастрии у детей, хотя обычно решаются при последующем наблюдении [22]. Что касается как клиническое наблюдение и в данных мышей модельных естественных условиях, H. Pylori
приобретение у детей, как правило, представляет как самоограниченными продолжение воспаления.
После того, как H. Pylori
инфекции, различные реакции, принимающие желудка цитокины могли бы быть связаны с различными клиническими результатами [14, 18, 23, 24]. В этом исследовании было обнаружено, что наивные мышей иметь регулярный IL-1 и IFN-γ выражения (3в &Amp; 3D) на эпителий желудка, что согласуется с предыдущим докладом в организме человека [15]. В нашем исследовании мыши имели экспрессию цитокинов повозрастную на желудочном эпителии (IFN-gamma) и собственной пластинке слизистой оболочки (IL-6, TNF-α, IFN-γ и IL-10). Благодаря повозрастного реакции цитокинов, наше исследование подтверждает, что должны быть разные наивные иммунные реакции между детьми и взрослыми.
На основании иммуногистохимического исследования, проведенные исследования подтвердили, что провоспалительных цитокинов выражения на листовой пластинки желудка Propria может измениться как на 2 й и 8 й недели после того, как H. пилори
вызов [25, 26]. И у мышей, и у людей, желудочные реакции цитокинов антихеликобактерной
инфекции было продемонстрировано, что Th1-доминантному, так как уровень IFN-gamma увеличивается в H. Pylori
-infected субъектов по сравнению с контрольной группой [15, 18, 23, 27]. Высокий уровень INF-γ был приписан в качестве отличительной чертой антихеликобактерной
гастрит о связанных, особенно при хроническом воспалении и потенциально отнести в качестве защитной роли против H. Pylori
колонизации [16-18, 28]. Как показано в таблице 3, мы показал, что молодые мыши с потерей колонизации имели более высокий IFN-γ экспрессии на эпителий, чем у мышей с персистирующей колонизации (P
= 0,048). Этот вывод совместим с человеческим исследования у детей, которые показали, что дети с H. Pylori
инфекции имели более низкую концентрацию IFN-gamma, чем в неинфицированных контрольной группе [29]. Эти данные на мышах показывают, что может быть значительной корреляции с потерей колонизация сразу возникает высокий уровень экспрессии IFN-gamma. Поэтому он должен быть обеспокоен тем, чтобы рассмотреть различные реакции хоста IFN-gamma, которые могут быть связаны, чтобы иметь различные H. Pylori исходы
инфекции у детей.
IL-10 представляет собой цитокин Th2, и может быть вызвано компенсационное регулирование после сдвига Th1 с помощью H. Pylori
вызов, чтобы защитить слизистую оболочку желудка [13, 15, 23, 27]. Таким образом, он не настолько поразительно, чтобы проиллюстрировать значительное увеличение экспрессии IL-10 в молодых мышей с персистирующей колонизации (таблица 3). Как показано в таблице 4, молодых мышей с низким IFN-gamma на эпителий иметь живучесть антихеликобактерной
колонизации была 100% сосуществованию с высоким уровнем экспрессии IL-10 на матрице и лимфоцитов.

• Гастрит cystica profunda рецидивов после хирургической резекции: 2-летний период наблюдения
• Лорен классификации в сочетании со статусом HER2 является лучшим прогностическим фактором в китайских больных…