Pysyvät Helikobakteeri kolonisaation alussa hankinta iässä hiiret liittyvät korkeammat mahalaukun sialyloiduilla Lewis x, IL-10, mutta pienempi interferoni-γ expressions

pysyviä H. pylori
kolonisaation alussa hankinta iässä hiiret liittyvät korkeammat mahalaukun sialyloiduilla Lewis x , IL-10, mutta pienempi interferoni-γ ilmaisuja
tiivistelmä
tausta
helikobakteeri
infektio on harvinaisempaa lapsuudessa. Tämä tutkimus validoitu onko määrien helikobakteeri
kolonisaation riippuvat eri hankinta ikäisiä, ja korreloivat eri mahalaukun Lewis antigeenejä tai sytokiinin ilmaisuja jälkeen helikobakteeri
hankinta. Tool Menetelmät
Olemme soveltaneet nuori (7 päivän ikäiset) C57BL /6-hiiret (n = 50) ja aikuisten (6 viikon ikäisiä) C57BL /6-hiiret (n = 50). Kussakin ryhmässä 30 hiiret altistettiin helikobakteeri
ja 20 hiirtä toimi naiivi valvontaa. Onnistuminen Helikobakteeri
kolonisaation arvioitiin 2 nd viikolla ja 8 th viikko, vastaavasti. Intensiteetti Lewis x sialyloidun Lewis x (sialyyli-Le x), ja sytokiinin ilmaisuja, kuten TNF-α: n, IFN-γ, IL-6, IL-10 ja IL-1β, olivat immunokemiallisesti värjätään ja arvostellaan.
tulokset
2 nd viikon kuluttua helikobakteerin
haaste, kolonisaatio hinnat helikobakteeri
oli samanlainen nuorten hiirten ryhmä ja aikuisten hiirten ryhmässä (89 % vs. 100%, P
> 0,05). Kuitenkin 8 th viikolla helikobakteeri
kolonisaation osuus oli merkitsevästi alhaisempi nuorten hiirten ryhmässä kuin aikuisten hiirten ryhmässä (53% vs. 95%, P
= 0,003). On 8 th viikko, nuori hiiriä pysyvyys H. pylori
kolonisaatiota oli korkeampi sialyyli-Le x, suurempi IL-10, ja alemman IFN-γ kuin hiirillä, jotka menettivät kolonisaation aikana 2 toinen on 8 th viikko (P
< 0,05).
Päätelmä
pysyvyys helikobakteeri
siirtokuntien voisi olla hankinta-ikä tekijä käsitellä asiaa. Sen jälkeen Helikobakteeri
altistumisen varhaisessa hankinta iästä, isännän reaktion, jolla on korkeampi sialyyli-Le x ja IL-10, mutta alempi IFN-γ korreloi seurauksena pysyvyys helikobakteeri
kolonisaation.
Johdanto
helikobakteeri
infektio voi aiheuttaa krooninen gastriitti ja jopa mahahaavan sekä lapsilla että aikuisilla [1, 2]. Epidemiologisissa tutkimuksissa seropositiivisuus Helikobakteeri
on osoitettu olevan vähemmän lapsilla kuin aikuisilla [3, 4]. Seurantatutkimus kohortti tutkimus osoitti, että suurimman vaikutuksen serokonversiota esiintyy varhaislapsuudessa ja vähitellen heikkenee iän [3]. Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että varhainen hankinta helikobakteeri
infektio lapsuudessa saattaa mahdollisesti johtaa myöhemmin menetys kolonisaation [3-6]. Kuitenkin tarkka asetukset sisällä lapset määritellä joko menetys tai jatkumisen helikobakteeri
kolonisaation jälkeen hankkiminen varhaisessa vaiheessa on edelleen huonosti tunnettuja.
Veriryhmä sitova adhesiini (Baba) H.pylorin
sitoutuu selektiivisesti että fukosyloituja Lewis antigeeni (Le b) mahalaukun solujen välittämisessä raskas bakteerikolonisaatiota [7-9]. Toinen siaali- happoa sitova adhesiini (Saba) H.pylorin
sitoutuu mahalaukun sialyloitunut Lewis x antigeeni (sialyyli-Le x) vaihtoehtoisesti avustava jatkuva siirtokuntien jälkeen krooninen tulehdus [10], ja erityisesti tulee tärkeä kun Le b antigeeni isäntä on poissa tai heikko [11]. Meidän tuore tutkimus paljastaa, että H. pylori
infektoiduista lapsilla oli merkittävää lisäystä sialyyli-Le x, mutta ei Le b ilmaisun [12]. On siis mielenkiintoista tarkistaa, onko pysyvyys hankkiminen varhaisessa vaiheessa H. pylori
lapsuudessa saattaa liittyä kanssa vaihteleva isännän vasteet mahalaukun tulehdus tai epiteelin Sialyloinnin mukauttaa Saba helikobakteeri
.
aikuisten C57BL /6-hiirten yli kuuden viikon iässä, kliinisen helikobakteeri
kannat voivat menestyksekkäästi asuttaa useimmat hiiriä yli kuusi kuukautta [13, 14]. Krooninen Helikobakteeri
infektio johtaa erilaisiin Th1-tyypin hallitseva mahalaukun tulehdukset vaihteleva proinflammatoristen ja Th1-hallitseva tyyppi sytokiinivasteita eri isännät [15-18]. Siten nykyinen Tutkimuksen tavoitteena oli ensin tarkistaa, onko pysyvyys helikobakteeri
siirtokuntien voisi olla hankinta-ikä tekijä prosessi. Lisäksi tämä tutkimus on yrittänyt vastata, onko muuttuja sialyyli-Le x ja tulehduksellinen sytokiini ilmaisuja jälkeen H. pylori
haaste voi määrittää jatkuva kolonisaatiota H. pylori
-infektion, erityisesti saaneista hiiristä haaste varhaisesta.
Materiaalit ja menetelmät
hiiret ryhmissä ja helikobakteeri
isolaatteja altistumistutkimuksessa
tutkimuksessa käytettiin 100 C57BL /6-hiirten (50 seitsemän päivän ikäiset nuoret hiiret ja 50 kuusi -week-vuotias aikuinen mies hiiriä), mukaan lukien 60 koeryhmässä altistettiin tyypin 1, saba-positiivinen helikobakteeri
kliininen isolaatti (HP 625) ja 40 naiivi valvontaa. Kertolaskut on H. pylori
isolaatteja levitettiin samalla menetelmällä kuin edellisessä hiirimallissa tutkimus saavuttaa tiheys 0,8 x 10 8 CFU /ml. [19]. Kokeellinen ryhmä, bakteereja suspensio 0,1 ml nuorille hiirille ja 0,5 ml aikuisen hiiriä annettiin oraalisesti ympättiin kolmena peräkkäisenä päivänä, vastaavasti. Kymmenen kukin nuorten ja aikuisten hiirten kontrolliryhmässä lopetettiin 2 nd ja 8 th viikko. Kokeellisessa hiiret, kymmenen kullakin nuorten ja aikuisten hiiriin 2 nd viikko ja 20 kukin nuorten ja aikuisten hiiriin 8 th viikko istuttamisen jälkeen uhrattiin intraperitoneaalisena injektio pentobarbitaalia ( 150-200 mg /kg). Eristetty mahat viiltää pitkin enemmän ja vähemmän curvatures kahtia. Toinen puoli formaliinilla upotettu histologiaa ja Lewis antigeenin tutkimukset. Toinen puoli pantiin välittömästi puskuriin, jäädytettiin kuivalla jäällä, ja säilytettiin -80 ° C: ssa sytokiinin tutkimista. Helikobakteeri
infektio osoitettiin nopea urean testi ja histologinen tutkimus.
Mahalaukun histologia hiirien
Kaksi tutkijat joista yksi patologi, tietämätön demografiset tiedot ja kolonisaatio tuloksia, analysoi mahan histologia. Soveltamalla menetelmää edellisessä hiirimallissa [19], histologinen parametrit, mukaan lukien H. pylori
tiheys (vaihteluväli 0-4), akuutti tulehduksellinen pisteet (AIS, alue 0-3), krooninen tulehdus pisteet (CIS, alue 0-3), atrofinen muutos (AT, alue 0-1), ja suoliston metaplasiaa (IM, alue 0-3) arvioitiin topografialtaan yli antrumiin, corpus ja cardia, vastaavasti. Luokitusjärjestelmä H.pylorin
tiheys käytettiin seuraavasti: 0, ei bakteerit havaittu; 1, lievä taso kolonisaation ja bakteereja ei havaittu kaikissa mahalaukun kryptassa; 2, lievä taso bakteerikannasta bakteerien havaittu useimmissa kryptissa läsnä; 3, kohtalainen tai raskas kolonisaation kaikissa kryptissa; ja 4, vakava bakteerikannasta kaikki crypts tiheään täynnä bakteereja. Esitetyt tulokset ovat keskiarvo kolonisaation kullekin ryhmälle. Koko Helikobakteeri
tiheys (THPD) määriteltiin summa tiheydet saatu antrumiin, corpus ja cardia, ja näin vaihtelivat 0: sta 12 yhteensä akuutti (TAIS) ja krooninen (TCIS) tulehduksellinen tulokset oli myös summa pisteet kolmesta paikoista (0-9).
bakteeritartunta helikobakteeri
määriteltiin läsnäolo bakteerit mahan osissa, kun taas hiiret katsottiin jättäneen inokuloitavien kun mitään bakteereja nähtiin histologisesti ja negatiivinen CLO testissä.
immunohistokemiallinen värjäys ja pisteytys mahalaukun Lewis ilmentymisen
immunoväriäys mahalaukun yksilöitä varten Lewis antigeenejä suoritettiin käyttäen avidiini-biotiini-peroksidaasi tekniikka vektorilla Ms.OM Immunodetektioon Kit. Ensisijainen monoklonaalinen vasta-aine (anti-Le x, Signet Laboratories, Inc., Dedham, MA) valittiin havaita mahalaukun Le x antigeenejä [11, 12]. Lisäksi Le x antigeeni värjäystä, monoklonaalinen vasta-aine vastaan ​​sialyyli-Le x (hiiri IgM MAB2096, Chemicon International, Inc., Temecula, CA) käytettiin [12]. Epäspesifinen sitoutuminen sivustoja kyllästettiin 2-2,5% naudan seerumialbumiinia. Jokaisen mahan päällä, intensiteetti Le x (0-5) ja sialyyliryhmiä-Le x (alue 0-4) pisteytettiin mukaan topografia värjäyksen (kuvio 1). Yhteensä mahalaukun Lewis antigeenin intensiteetti Le x ja sialyyliryhmiä-Le x oli summa antrumiin, corpus ja cardia (alue 0-15 Le x ja 0-12 in sialyyliryhmiä-Le x). Kuva 1 Immuunihistokemialliset (IHC) värjäystä ja pisteytys Lewis x (Le x), ja sialyyli-Lewis x (sialyl- Le x) antigeenejä on esitetty mahalaukun koepaloja hiirten (200 x). IHC värjäys osoitti negatiivista kahdelle Lewis antigeenejä ja kutsuttiin pisteet 0. Lex, pisteet 1 (A): vähäistä värjäytymistä (< 5% parietaalisoluihin syvistä rauhaset, pisteet 2 (B): syvä rauhaset 5 -50% värjäys ja heikko, pisteet 3 (C): syvä rauhaset > 50% värjäys ja vahva, pisteet 4 (D): koko kerros syvä rauhasten kanssa pintaepiteelissä värjäystä, ei limaa ilmaisu; pisteet 5 (E): koko kerros limaa ilme. Saat sialyl- Lex, pisteet 1 (F): vain pintaa lima positiivinen, pisteet 2 (G): limaa ja ylempi epiteelin, pisteet 3 (H): ylempi epiteelin ja syvä rauhaset (pääsoluissa < 50% ); pisteet 4 (I): ylempi epiteelin ja syvä rauhaset (pääsoluissa ≥ 50%).
immunohistokemiallinen värjäys ja pisteytys sytokiinien ilmentymisen
jääleikkeille (4 pm) kuivattiin huoneenlämmössä 2 tuntia, ja kiinnitettiin 3,7% formaldehydillä 1 min. Kun oli pesty kahdesti PBS: llä, näytteet fiksoitiin kylmällä asetonilla ja pestiin sitten PBS: llä. Hiiren Ig Blocking Reagent (VECTOR Laboratories, Burlingame, CA, USA) käytettiin estämään epäspesifisten sitoutumiskohtien. Rotan anti-hiiri-monoklonaaliset vasta-aineet (TNF-α, IL-6, IL-10, IL-1β, ja IFN-γ) ja kanin anti-hiiri-polyklonaalista vasta-ainetta (IL-1β) käytettiin primaarisena vasta-aineena. HRP-polymeeri-konjugaattia laaja kirjo (Zymed Laboratories Inc. South San Francisco, CA, USA) käytettiin 2 toinen vasta-aine. AEC kit käytettiin havainnollistamaan tahra. Intensiteetti kunkin sytokiinin pisteytettiin mukaan jakeluun positiivista värjäytymistä solujen epiteelin (vaihteluväli 0-3), sekä lamina proprian komponentteja, kuten matriisi, polymorfonukleaariset solut, lymfosyytit, ja fibrosyyttien (taulukko 1) .table 1 pisteytys sytokiinien lausekkeita mahalaukun epiteelin ja lamina propria.

Pisteet

0
1
2
3
epiteelin
Negative
Alle 33%
33% -67%
yli 67%
Products proprialle
Matrix
Absence
Presence
lymfosyyttien
Absence
Presence
Fibrocyte
Absence
Presence
Neutrofiilien
Absence
Presence
kvantitatiivinen pisteytys kunkin sytokiinin on epiteelin oli seuraava: viereen 1: positiivinen värjäytyminen sytoplasmaan epiteelisolujen vain ylemmällä 1/3 osa epiteelin; pisteet 2: ylä- ja keskiosa epiteelin (1 /3-2 /3); Pisteet: 3: koko kerros epiteelin (> 2/3). Positiivinen värjäytyminen Kunkin sytokiinin on lamina propriassa (lymfosyytit, fibrosyyttien, ja neutrofiilit) tarkoittaa oli yli viisi positiivisten solujen suuren tehon näkökenttä on mikroskooppinen tutkimus.
Tilastollinen analyysi
Pearsonin χ 2 testiä käytettiin testaamaan eron kolonisaation hinnat välillä koe- ja kontrolliryhmissä hiirillä. Histologinen parametrit, Lewis antigeenejä, ja sytokiinin ilmaisuja verrattiin Fisherin testi eri alaryhmiin. Friedmanin testiä käytettiin testaamaan ero helikobakteeri
tiheys on antrumiin, corpus ja vatsan sydämessä kussakin hiiri. Kaikki testit arvioitiin kaksisuuntaisia ​​ja p
arvo < 0.05 otettiin merkittävä.
Tulokset
hinnat onnistuneen helikobakteeri
kolonisaatio hiirissä erilaisilla hankinnan ikäisiä
Sitä 2 nd viikon kuluttua helikobakteerin
haaste, helikobakteeri
kolonisaatio onnistui 89% (8/9) nuorten hiirten ryhmässä ja 100% (10/10) aikuisten hiirten ryhmässä. Sen sijaan on 8 th viikon kuluttua helikobakteerin
haaste, kolonisaatio oli merkitsevästi pienempi nuorten hiirillä kuin että aikuisten hiirillä (53% vs. 95%, P
= 0,003 ). Niille hiiriä onnistunut kolonisaatio joko 2 nd tai 8 th viikko, tiheydet H. pylori
oli tasavälein antrumiin, corpus ja cardia sekä nuorten ja aikuisten hiirten ( P
> 0,05).
ikävakioidun mahalaukun Lewis antigeenin ja sytokiinien lausekkeita naiivi hiiret
Kun naiivi hiiret sekä nuorten ja aikuisten ryhmien ilmauksia Le x ja sialyl- Le x olivat heikko mahalaukkua. Kuitenkin asteittainen lisääminen koko intensiteetti Le x ja sialyyliryhmiä-Le x ilmaisuja on esitetty ikään välein (kuvio 2A & 2B). Tällainen kasvu saavutti tasanteen kronologisesta iästä lähellä 5 viikkoa. Tällä 2 nd viikolla ja 8 th viikon kuluttua helikobakteerin
haaste, Le x ilmaisut eivät olleet erilaisia ​​välillä siirtomaita ja valvonta hiiret sekä nuorten ja aikuisten ryhmiä. Kuva 2 Intensiteetti mahalaukun Lewis antigeenejä aiemmin hoitamattomilla hiirillä eri-ikäisten elämää (A) Lewis x (B) sialyyli-Lewis x.
Intensiteetti mahalaukun sytokiiniekspressiota vaihtelivat eri ikäisiä hiirien ja sijainti. Sillä proinflammatoristen sytokiinien, ei ollut positiivinen värjäykset TNF-α: n ja IL-6: pintaepiteelissä tahansa naiivi hiirillä. Positiivinen värjäykset TNF-α ja IL-6 on lymfosyyttien, fibrosyyttien, ja neutrofiilit yli lamina propria olivat merkittävästi korkeampia hiirillä vuotiaiden ≥ 5 viikkoa kuin vuotiaista < 5 viikkoa (P
< 0,01; kuvio 3A &3B). Positiivinen värjäytyminen IL-1β pääasiassa löytyy epiteelin ja ilmaisi varhain hiirillä vuotiaiden < 5 viikkoa. Nopeus positiivista värjäytymistä IL-1β neutrofiilien oli suurempi hiirillä vuotiaiden ≥ 5 viikkoa kuin vuotiaista < 5 viikkoa (P
< 0,05, kuvio 3C). Kuvio 3 Mahalaukun sytokiinien lausekkeita epiteelin ja lamina propria välillä naiiveja hiiriä ikäisten ≥ 5 viikkoa < 5 viikkoa. (A) Kasvaimen nekroottinen alfan (TNF-α), (B) interleukiini-6 (IL-6), (C) interleukiini-1 beeta (IL-1β), (D) interferoni-gamma (IFN-γ), ja (E ) interleukiini-10 (IL-10).
alussa elämän hiiret, positiivinen IFN-γ-värjäys oli useimmissa löytyy epiteelin ja matriisi, koska intensiteetti positiivinen IFN-γ-värjäys väheni iän jälkeen ≥ 5 viikkoa (P
< 0,01, kuvio 3D). Kuitenkin merkittävästi korkeampi positiivisen IFN-γ värjäys lymfosyyteissä ja fibrosyyttien oli esitetty hiirillä vuotiaiden ≥ 5 viikkoa kuin vuotiaista < 5 viikkoa (P
< 0,01).
Toisin raskaan IFN-γ värjäytymisen epiteelin varhaisten hiirten, IL-10 on yleensä negatiivinen epiteelin. Positiivinen värjäytyminen IL-10 oli suurempi lymfosyyteissä ja fibrosyyttien hiirillä vuotiaiden ≥ 5 viikkoa verrattuna vuotiaiden < 5 viikkoa (P
< 0,05, kuvio 3E).
Hiiret histologian ja Lewis antigeeniekspressiota jälkeen helikobakteeri
infektio
Sitä 2 nd viikon kuluttua helikobakteerin
haaste, helikobakteerin
-colonized nuorten hiirillä näytti olevan hienoinen korkeampi korkea TCIS (pisteet ≥ 4) kuin kontrolli hiiret (88% vs. 50%, P
= 0,15), mutta tällaiset marginaalinen merkitys ei esitetty aikuisten hiirillä (30% vs. 30%, P
= 1,00). Lisäksi nuorten hiirten ryhmässä, hiiret jatkuva siirtokuntien on 8 th viikko oli ilmeisesti korkeampi korkea TCIS kuin hiiret, jotka menettivät siirtokuntien (40% vs. 11%, P
= 0,30) . On 2 nd viikon kuluttua helikobakteerin
haaste, prosenttiosuus kolonisoitu nuorten hiirten, joilla on korkea intensiteetti sialyyli-Le x lauseke (pisteet ≥ 7) oli pudonnut verrattuna kontrolliryhmän hiirillä (25% vs. 60%, P
= 0,19). Tällainen pudotus ei ollut ilmeistä sen 8 th viikko (100% vs. 90%, P
> 0,05) ja aikuisten hiirten 2 nd viikko (90% vs. 100 %, P
> 0,05) ja 8 th viikko (58% vs. 60%, P
> 0,05) jälkeen helikobakteeri
haasteita.
Mahalaukun sytokiinien ilmentymisen jälkeen helikobakteeri
infektio
Sitä 2 nd viikon kuluttua helikobakteerin
haaste, nuorten hiirten onnistunut kolonisaatio oli merkitsevästi suurempi intensiteetti IL-6 fibrosyyttien (75% vs. 0 %, P
= 0,002) ja matriisi (75% vs. 20%, P
= 0,05), mutta alempi IFN-γ (0% vs. 100%, P
< 0,001) on matriisi kuin naiivi valvontaa (taulukko 2). Myös aikuisten hiirten, hiirten menestyksekkään siirtokuntien ilmoitettiin olevan alhaisempi IFN-γ ilme fibrosyyttien kuin kontrolli hiiret (30% vs. 90%, P
= 0,02) .table 2 Mahalaukun sytokiini ilmaisuja 2. viikolla nuorten ja aikuisten hiirten kanssa pysyviä helikobakteeri
kolonisaation ja naiivi kontrollihiirten.


Young hiiret
Aikuisten hiirten
parametri (%)
Colonized
(n = 8)

Ohjaus
(n = 10)
P
arvo
Colonized
(n = 10)
Ohjaus
( n = 10)
P
Arvo
IL-6 *
Matrix
75
20
0,05
70
30
NS
lymfosyyttien
50
10
NS
60
70
NS
Fibrocyte
75
0
0,002
80
50
NS
Neutrofiilien
37,5
20
NS
20
70
0,07
TNF-α *
Matrix
87.5
70
NS
80
90
NS
lymfosyyttien
62,5
40
NS
90
90
NS
Fibrocyte
87,5
40
0,07
100
90
NS
Neutrofiilien
12,5
10
NS
30
40
NS
IL-1β
epiteelin ≥ 2
100
70
NS
100
90
NS
Matrix
a25
0
NS
100
80
NS
lymfosyyttien
25
20
NS
30
0
NS
Fibrocyte
a25
60
NS
100
100
NS
IFN-γ
epiteelin ≥ 2
0
30
NS
10
0
NS
Matrix
0
100
< 0,001
40
20
NS
Lymfosyyttien
0
0
NS
10
30
NS
Fibrocyte
12.5
10
NS
30
90
0,02
Neutrophil
0
0
NS
10
20
NS
IL-10*
Matrix
a25
60
NS
100
80
NS
Lymfosyyttien
25
20
NS
60
60
NS
Fibrocyte
a37.5
50
NS
100
80
NS
Neutrofiilien
12,5
0
NS
10
20
NS
CIS: krooninen tulehduksellinen pisteet; AIS: akuutti tulehduksellinen pisteet. *: Asuttivat keinoin hiiriä infektoidaan helikobakteeri
kanssa onnistunut kolonisaatio (positiivinen urea testi ja histologia) on uhri. a: P
arvo < 0,01; b: P
arvo ≤ 0,05 nuorilla ja aikuisten siirtomaita hiirillä. NS: ei merkitystä. * Merkitty tämän parametrin, epiteelin on melko heikko tällaisiin sytokiinien on immunohistokemiallisesti värjäystä.
On 8 th viikon kuluttua helikobakteerin
haaste, määrien korkea TNF-α (100% vs. 20%, P
= 0,02) on matriisi ja korkea IL-1β (100% vs. 20%, P
= 0,02) on fibrosyyttien olivat korkeammat nuorten hiirten pysyviä kolonisaation kuin kontrolliryhmässä hiirillä ( taulukko 3). Aikuisen hiiriä onnistunut kolonisaation, hinnat korkeat IFN-γ (30% vs. 100%, P
= 0,003), IL-10 (20% vs. 100%, P
= 0,001) ja IL-6 (50% vs. 100%, P
= 0,03) on fibrosyyttien olivat myös huomattavasti alemmat kuin valvonta naiivi hiiret. Oli kuitenkin yleisempää colonized aikuisissa hiirissä kuin kontrollihiirillä on korkeampi IFN-γ (80% vs. 40%), IL-10 (80% vs. 40%), ja IL-6 (80% vs. 30%) on matrix.Table 3 sytokiini ilmaisuja 8. viikolla nuorten ja aikuisten hiiriä pysyviä ja menetti helikobakteeri
kolonisaation ja naiivi kontrollihiirten.


Young hiiret
Aikuisten hiirten
muuttujat (% )
pysyviä asuttaminen
(n = 5)
kadonnut asuttaminen
(n = 4)
Ohjaus
(n = 10)

P
† arvo
Pysyvä asuttaminen
(n = 10)
Ohjaus
(n = 10)
P
arvo
IL-6 *
Matrix
100
80
50
NS
80
30
NS
lymfosyyttien
25
60
50
NS
70
70
NS
Fibrocyte
100
80
70
NS
50
100
0,03
Neutrofiilien
0
20
50
NS
20
70
NS
TNF-α *
Matrix
100
100
20
NS
100
60
NS
lymfosyyttien
100
80
60
NS
90
90
NS
Fibrocyte
100
100
70
NS
100
80
NS
Neutrofiilien
25
20
60
NS
10
40
NS
IL-1β
epiteelin ≥ 2
100
80
70
NS
100
80
NS
Matrix
75
40
30
NS
100
80
NS
Lymfosyyttien
50
60
0
NS
50
60
NS
Fibrocyte
100
60
20
NS
100
100
NS
Neutrofiilien
0
0
20
NS
0
10
NS
IFN-γ
epiteelin ≥ 2
0
80
20
0,048
30
0
NS
Matrix
75
100
40
NS
80
40
NS
lymfosyyttien
75
60
40
NS
30
50
NS
Fibrocyte
75
100
50
NS
30
100
0,003
Neutrophil
0
0
40
NS
20
0
NS
IL-10*
Matrix
100
20
70
0.048
80
40
NS
Lymfosyyttien
100
20
70
0,048
40
50
NS
Fibrocyte
100
60
70
NS
20
100
NS
Neutrofiilien
50
0
10
NS
0
10
NS
†: merkitys oli verrataan nuorten hiirten pysyviä ja menetti kolonisaatio. * Merkitty tämän parametrin, epiteelin on melko heikko tällaisiin sytokiinien on immunohistokemiallisesti värjäystä.
Korkeampi sialyyli-Lex rinnalla korkeamman IL-10, mutta pienempi INF-γ H. pylori
kolonisaation
On 2 nd viikolla asuttivat nuorten hiirten ei ollut merkittävää eroa intensiteetin sialyyli-Le x ilmaisua kuin kontrolli hiiret (P
> 0,05). Kuitenkin 8 th viikon kuluttua helikobakteerin
haaste, nuoret hiiret pysyviä kolonisaation oli korkeampi ilmeinen sialyyli-Le x lauseke (pisteet ≥ 7) kuin hiirillä, jotka menettäneet pesäkkeiden (100% vs. 56%, P
= 0,03). Näyttelyiden lisäksi korkeampaa sialyyli-Le x lauseke (pisteet ≥ 7), kaikki jatkuvasti H. pylori
-colonized nuorten hiirillä merkitsevästi rinnakkain alemman IFN-γ ja korkeamman IL-10 ilmaisuja kuin ne hiiret, jotka olivat menettäneet jatkuva siirtokuntien sen 8 th viikko (taulukko 4, 100% vs. 0%, P
= 0,008) .table 4 matala mahalaukun IFN-γ (pisteet ≤ 1) ilme epiteelin rinnalla korkean sialyyli-Lex (pisteet ≥ 7) ja IL-10 (molemmilla matriisi ja lymfosyytit) korreloi jatkuviin bakteerikolonisaatiota varhaisesta iästä hiirillä.
Sytokiiniekspressioanalyysi (%)
Colonization nuorten hiirten
OR (95% CI)
P
arvo *

Pysyvä (n = 4)
kadonnut (n = 5)


Low IFN-γ
100
20
0,2 (0,1-1,2)
0,048
korkea IL-10
100
0 -
0,008
Low IFN-γ ja korkea sialyyliryhmiä -Lex
100
0 -
0,008
Low IFN-γ ja korkea IL-10
100
0 -
0,008
OR : pariton suhde; CI: luottamusväli; *: Fisherin testiä
Taulukossa 5 on esitetty pisteytystä IFN-γ on epiteelin ja IL-10 matriisi ja lymfosyyttien välistä hiiriä pysyviä ja menetti kolonisaatiota klo 8 th viikon kuluttua helikobakteerin
haaste. Yksikään nuori hiirten pysyviä bakteerikolonisaatiota oli IFN-γ ilme epiteelin, mutta oli selvää IL-10 lausekkeen matriisi ja lymfosyyttien verrattuna hiiriin ilman colonization.Table 5 pisteet IFN-γ on epiteelin ja IL -10 matriisin ja lymfosyyteillä 8. viikon kuluttua helikobakteerin
haaste nuorten hiirten ja ilman pysyviä kolonisaatio.



Score IL-10
Hiiret nro
Colonization
Score IFN-γ on epiteelin

matriisi
päälle lymphocyte

1
Yes
0
1
1
2
Yes
0
1
1
3
Yes
0
1
1
4
Yes
0
1
1
5
No
1
0
0
6
No
2
1
0
7
No
2
0
0
8
No
2
0
0
9
No
2
0
1
Keskustelu
hankinta helikobakteeri
pääasiassa esiintyy lapsuudessa ja spontaani eliminointi infektio esiintyy yleensä pienten lasten [3-6, 20]. Tässä tutkimuksessa C57BL /6 aikuinen hiirillä oli suotuisa helikobakteeri
asuttaminen nopeudella isolaattien vaihtelevat yli 80%, mikä on yhteensopiva aiempien raporttien [13, 14]. Tämä korkea kolonisaatio kurssi aikuisten hiirillä on myös yhteensopiva tukea siihen, että myöhäinen hankinta helikobakteeri
aikuisen ihmisen potilailla yleensä johtaa krooniseen kolonisaation [20]. Lisäksi verrattuna 2 toinen viikko nuoria hiirillä Helikobakteeri
hankinta, asuttaminen korko on 8 th viikolla oli 53%, mikä tukee tätä spontaani eliminointi helikobakteeri
todella tapahtuu varhaisesta iästä hiirillä. Niinpä tässä tutkimuksessa tulisi olla omaperäinen esitellä hiirimallissa suunniteltu vahvistamaan, että olisi tappio helikobakteeri
kolonisaation jälkeen aikaisemman hankinnan H. pylori
, joka matkii kliiniset löydökset nuorilla lapset.
Aiempi tutkimus on osoittanut, että intensiteetti mahalaukun Le x positiivisesti lisäys iän ihmisellä [12]. Kuitenkin niille, joilla ei helikobakteeri
infektio, ilmaus sialyyli-Le x mahalaukun epiteelin on heikko tai puuttuu dyspepsiapotilaat lapsilla ja aikuisilla [12]. Yhteensopiva ihmisiin, intensiteetti mahalaukun sialyyli-Le x hiirien myös positiivisesti korreloi lisäys iässä (kuvio 2B). Tällainen toteamus hiirillä on myös yhteensopiva rotan tutkimus, joka paljastaa ikään liittyvään lisäys Glykosyloinnin maksan kudoksissa [21]. Lisääntyvä mahalaukun sialyyli-Le x ilmaisun jälkeen helikobakteeri
infektio on raportoitu ihmisillä ja reesusapinoilla [9-12]. Kuitenkin meidän hiirillä tutkimuksessa intensiteetin laskua mahalaukun sialyyli-Le xwas esitetty helikobakteerin
infektoituihin nuorten hiirillä, mutta ei aikuisen hiiren sen 2 nd viikko, verrattuna kontrollihiirillä. Enemmän silmiinpistävän, on 8 th viikon kuluttua helikobakteerin
hankinta, tällainen lasku sialyyli-Le x katosi sekä asuttaneet nuorten ja aikuisten hiirillä, joka oli täysin sialyloiduilla mahalaukun limakalvo. Tämä havainto viittaa siihen, että H. pylori
haaste olisi osallistuttava häiritä ikääntymiseen liittyvien kypsymisen käyrä Sialyloitumisen nuoressa hiirillä. Lisäksi se viittaa epäsuorasti siihen, että muutokset sialyyli-Lewis antigeenin nuorissa hiirissä olisi korreloi voimakkaasti pysyvyys tai menetykseen helikobakteeri
kolonisaation.
Tässä eläinmallissa, varhainen helikobakteeri
hankinta aiheutti suuremman CIS kuin valvonnan 2 nd viikko (87,5% vs. 50%, P
= 0,15), mutta ei 8 th viikko (40% vs. 30%, P
= 0,36) jälkeen helikobakteeri
haaste. Olettaen, että tiheä tulehdus aiheuttaa enemmän vakavia kliinisiä oireita, tämä histologia muutos voi korreloida meidän aikaisempia havaintoja, helikobakteeri
infektio voi aiheuttaa lyhytaikaisia ​​vatsakipu lapsilla, vaikkakin yleensä ratkaistu seurannassa [22]. Koskevat sekä kliininen tarkkailu ja in vivo hiirimallissa tiedot, helikobakteeri
hankinta lapsilla yleensä esittelee itsestään rajoitettu jatko tulehduksessa.
Jälkeen helikobakteeri
infektio, eri isäntä vasteet mahalaukun sytokiinejä voitaisiin mahdollisesti liittyvän erilaisiin kliinisiin tuloksiin [14, 18, 23, 24]. Tässä tutkimuksessa naiivi hiiret havaittiin säännöllisesti IL-1β ja IFN-γ ilmaisuja (kuvio 3C & 3D) on mahalaukun epiteelin, joka on yhdenmukainen aiemman raportin ihmisellä [15]. Meidän hiiret Tutkimus osoitti ikäkohtainen sytokiinin ilmentymistä mahan epiteelin (IFN-γ) ja lamina propria (IL-6, TNF-α: n, IFN-γ: n ja IL-10). Johtuen ikävakioidun vasteen sytokiinien, Tutkimuksemme tukee, että pitäisi olla erilainen naiiveja immuunivasteiden välillä lapsille ja aikuisille.
Perusteella immunohistokemiallinen tutkimus, tämä tutkimus vahvisti, että proinflammatoristen sytokiinien ilmeet mahan lamina propria voisi muuttaa sekä 2 nd ja 8 th viikon kuluttua helikobakteeri
haaste [25, 26]. Sekä hiirillä ja ihmisillä, mahalaukun sytokiinivasteita H.pylorin
infektio on osoitettu olevan Th1-hallitseva, koska taso IFN-γ lisääntyy helikobakteeri
infektoiduista aiheita verrattuna kontrolleihin [15, 18, 23, 27]. Korkea INF-γ tason syyksi kuin tunnusmerkki helikobakteeri
-aiheiset gastriitti, varsinkin krooninen tulehdus ja mahdollisesti johtuvan kuin suojaava rooli vastaan ​​helikobakteeri
kolonisaation [16-18, 28]. Kuten taulukosta 3, me paljastaa, että nuoret hiiriä menetys kolonisaatio oli korkeampi IFN-γ ilme epiteelin kuin hiiret pysyviä kolonisaatio (P
= 0,048). Tämä havainto on sopusoinnussa ihmisen sairastaville lapsille, jotka osoittivat, että lapset helikobakteeri
infektio oli alhaisempi pitoisuus IFN-γ kuin ei-tartunnan ehkäiseminen [29]. Tämä data hiirissä viittaavat siihen, että voi olla olemassa merkittävä korrelaatio kolonisaation menetys, kun on olemassa suuri ilmentyminen IFN-γ. Siksi pitäisi olla huolissaan kartoittaa eri isännän vasteen IFN-γ, joka voi liittyä olla eri H. pylori
infektion tuloksia lapsilla.
IL-10 on Th2 sytokiini, ja voi laukaista korvaavat asetuksen jälkeen Th1 muutos, jonka H. pylori
haaste suojata mahalaukun limakalvon [13, 15, 23, 27]. Näin ollen, se ei ole niin silmiinpistävää havainnollistamiseksi merkittävä kasvu IL-10 ilmentyminen nuoret hiiret pysyviä kolonisaation (taulukko 3). Kuten on esitetty taulukossa 4, nuoret hiiret, joilla on alhainen IFN-γ on epiteelin on pysyvyys H. pylori
kolonisaatio oli 100% rinnakkain, joilla on korkea IL-10-ilmentymisen matriisin ja lymfosyytit.

• Gastriitti cystica profunda uusiutumisen jälkeen kirurgisen resektion: 2-vuoden seurannassa
• Lauren luokittelu yhdistettynä HER2 tila on parempi ennustetekijä Kiinan mahasyöpäpotilaista