Persistante colonisation par H. pylori en âge d'acquisition rapide de souris liées avec une plus grande gastrique sialylé Lewis x, de l'IL-10, mais des expressions de l'interféron-γ inférieur

H. pylori
colonisation persistante de l'âge de l'acquisition précoce de la souris en rapport avec gastrique plus sialylé Lewis x, IL-10, mais des expressions d'interféron-γ inférieurs
Résumé de l'arrière-plan
H. pylori infection
est moins répandue dans l'enfance. Cette étude validée si les taux de H. pylori
colonisation dépendent de différents âges d'acquisition, et en corrélation avec les différents antigènes gastriques de Lewis ou des expressions de cytokines après H. pylori acquisition
.
Méthodes
Nous avons appliqué une jeune (7-day-old) C57BL /6 groupe de souris (n = 50) et des adultes (6-week-old) C57BL /6 groupe de souris (n = 50). Dans chaque groupe, 30 souris ont été provoquées par H. pylori
et 20 souris ont servi de contrôle aussi naïf. Le succès de H. pylori
la colonisation a été évaluée sur la 2 ème semaine et 8 e semaine, respectivement. L'intensité de la Lewis x sialylées Lewis x (sialyl-Le x) et des cytokines expressions, y compris le TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 et IL-1β, sont immunochimiquement colorées et Résultats de gradient.
sur la 2 e semaine après H. pylori
défi, les taux de H. pylori
de colonisation étaient similaires entre le jeune groupe de souris et le groupe des souris adultes (89 % contre 100%, P
> 0,05). Cependant, sur la 8 e semaine, le pylori
taux de colonisation H. était significativement plus faible dans le groupe des jeunes de souris que dans le groupe des souris adultes (53% vs 95%, P = 0,003
). Le 8 e semaine, les souris jeunes avec une persistance de H. pylori
colonisation était supérieur sialyl-Le x plus élevée d'IL-10 et l'IFN-γ inférieurs à ceux des souris qui ont perdu la colonisation au cours de la 2 e à la 8 e semaine (P
< 0,05).
Conclusion
la persistance de H. pylori
colonisation pourrait être un facteur déterminant l'acquisition d'âge processus. Après l'exposition de H. pylori à un âge précoce d'acquisition, la réponse de l'hôte avec un plus haut sialyl-Le x et l'IL-10, mais l'IFN-γ est corrélée inférieure à la persistance consécutive de H. pylori
Présentation
Helicobacter pylori
l'infection de la colonisation. peut provoquer une gastrite chronique et la maladie de l'ulcère gastro-duodénal, même chez les enfants et les adultes [1, 2]. Dans les études épidémiologiques, la séropositivité de H. pylori
a été montré pour être moins chez les enfants que chez les adultes [3, 4]. Une étude de cohorte de suivi a montré que la plus forte incidence de la séroconversion se produit dans la petite enfance et diminue avec l'âge [3] progressivement. Plusieurs études ont suggéré que l'acquisition précoce de l'infection de H. pylori dans l'enfance peut éventuellement conduire à une perte subséquente de la colonisation [3-6]. Cependant, les réglementations exactes au sein des enfants afin de déterminer soit la perte ou la persistance de H. pylori
colonisation après l'acquisition précoce demeure pas bien connue.
Une adhésine de liaison du groupe sanguin (BABA) de H. pylori
se lie sélectivement à l'antigène fucosylé Lewis (le b) des cellules gastriques médiation d'une colonisation bactérienne lourde [7-9]. L'autre adhésine de liaison aux acides sialique (SABA) de H. pylori
se lie à l'antigène x Lewis sialylé gastrique (sialyl-Le x) aider alternativement la colonisation persistante après une inflammation chronique [10], et devient particulièrement important lorsque le le b antigène de l'hôte est absent ou faible [11]. Notre étude récente révélé que H. pylori des enfants infectés par avaient une augmentation significative du sialyl-Le x, mais pas Le b expression [12]. Il est donc intéressant de vérifier si la persistance de l'acquisition précoce de H. pylori
dans l'enfance pourrait être lié avec les réponses de l'hôte variables d'inflammation gastrique ou de sialylation épithéliale pour adapter le SabA de H. pylori
.
Avec adultes C57BL /6 de plus de six semaines d'âge, les souches de H. pylori cliniques peuvent coloniser avec succès la plupart des souris pendant plus de six mois [13, 14]. L'infection de la bactérie H. pylori chronique conduit à diverses inflammations gastriques prédominants de type Th1 avec des réponses de cytokines pro-inflammatoires variables et Th1 dominantes de type entre différents hôtes [15-18]. En conséquence, la présente étude vise d'abord à vérifier si la persistance de la colonisation de H. pylori pourrait être un processus déterminant l'acquisition-âge. En outre, cette étude a tenté de répondre si la variable sialyl-Le x et les expressions inflammatoires de cytokines après H. pylori
défi pourraient déterminer la colonisation persistante de H. pylori
infection, en particulier chez les souris recevant le défi de l'acquisition précoce. Matériaux et méthodes
groupes de souris et H. pylori
isolats pour l'expérience de défi
Cette étude a utilisé 100 C57BL /6 (50 sept jours anciens jeunes souris et 50 six -Week-adulte âgé de souris mâles), dont 60 dans le groupe expérimental contesté avec un type 1, clinique isolat de SabA positif H. pylori (HP 625) et 40 dans les contrôles naïfs. Les multiplications de H. pylori
isolats ont été appliqués avec la même méthode que notre précédente étude de modèle de souris pour obtenir une densité de 0,8 x 10 8 UFC /ml. [19]. Pour le groupe expérimental, une suspension de bactéries 0,1 ml pour les souris jeunes et 0,5 ml pour les souris adultes a été inoculé par voie orale pendant trois jours consécutifs, respectivement. Dix chacune des souris jeunes et adultes du groupe de contrôle ont été sacrifiés à la 2 e et la 8 e semaine. Chez les souris expérimentales, dix chacune des souris jeunes et adultes à la 2 e semaine et 20 chacune des souris jeunes et adultes à la 8 e semaine après l'inoculation ont été sacrifiés par injection intra-péritonéale de pentobarbital ( 150 à 200 mg /kg). Les estomacs isolés ont été incisés le long des courbures plus ou moins grandes en deux moitiés. Une moitié a été formaline intégré pour l'histologie et Lewis examens d'antigène. L'autre moitié a été placé immédiatement dans un tampon, congelés sur glace sèche et stockée à -80 ° C pour l'examen des cytokines. H. pylori
infection a été prouvée par un test d'urée rapide et un examen histologique.
Histologie gastrique des Deux enquêteurs de souris dont un pathologiste, ignorant les données démographiques et les résultats de la colonisation, a analysé l'histologie gastrique. En appliquant la méthode de notre modèle de souris précédente [19], les paramètres histologiques, y compris H. pylori
densité (gamme 0-4), le score inflammatoire aiguë (AIS, gamme 0-3), le score de l'inflammation chronique (CIS, plage 0-3), le changement atrophique (AT, gamme 0-1), et la métaplasie intestinale (GI, la gamme 0-3) ont été évalués topographiquement sur l'antre, corpus et du cardia, respectivement. Le système de notation de la densité de H. pylori utilisée a été la suivante: 0, aucune bactérie détectée; 1, un léger niveau de la colonisation et de bactéries non détectées dans chaque crypte gastrique; 2, un léger niveau de la colonisation par des bactéries détectées dans la majorité des cryptes présents; 3, modérée à forte colonisation dans tous les cryptes; et 4, la colonisation sévère avec tous les cryptes denses avec des bactéries. Les résultats présentés sont la valeur moyenne de la colonisation pour chaque groupe. Le H. pylori
densité totale (THPD) a été définie comme la somme des densités obtenues à partir de l'antre, corpus et du cardia, et donc varie de 0 à 12. La aiguë totale (TAIS) et chroniques (TCIS) Les scores inflammatoires ont également une somme de la moyenne à partir de trois emplacements (gamme 0-9).
infection bactérienne de H. pylori
a été définie comme la présence de bactéries dans les sections gastriques, alors que les souris ont été considérés comme ayant échoué à être inoculés quand aucune bactérie n'a été vu en histologie et négatif pour le test de CLO.
coloration immunohistochimique et la notation pour l'expression Lewis gastrique
immunocoloration de spécimens gastriques pour les antigènes de Lewis a été réalisée en utilisant la technique avidine-biotine-peroxydase avec un VECTOR Ms.OM Kit immunodétection. L'anticorps monoclonal primaire (anti-Le x, Signet Laboratories, Inc., Dedham, MA) a été sélectionné pour détecter la Le gastrique x antigènes [11, 12]. Outre Le x antigène coloration, l'anticorps monoclonal contre le sialyl-Le x (IgM de souris MAB2096, Chemicon International, Inc., Temecula, CA) a été utilisé [12]. Les sites de liaison non spécifiques ont été saturés avec de 2 à 2,5% d'albumine sérique bovine. Pour chaque site gastrique, l'intensité de Le x (0-5) et sialyl-Le x (gamme 0-4) a été marqué en fonction de la topographie de la coloration (Figure 1). Total gastrique Lewis intensité de l'antigène pour Le x et sialyl-Le x est la somme de l'antre, corpus et du cardia (gamme 0-15 Le x et 0-12 dans sialyl-Le x). Figure 1 Le immunohistochimique (IHC) coloration et le classement de Lewis x (Le x), et sialyl-Lewis x (sialyl- Le x) antigènes sont indiqués pour les biopsies gastriques de souris (200 ×). La coloration IHC a montré négatif pour deux antigènes de Lewis et a été désigné comme partition 0. Pour Lex, score 1 (A): coloration peu (< 5% dans les cellules pariétales des glandes profondes; score 2 (B): glandes profondes 5 -50% coloration et faible; score 3 (C): glandes profondes > 50% coloration et forte; score 4 (D): couche ensemble des glandes profondes avec superficielle coloration de l'épithélium, aucune expression de mucus; marquer 5 (E): toute . couche avec l'expression de mucus Pour sialyl- Lex, score 1 (F): seule surface mucus positif, score 2 (G): glaire et de l'épithélium supérieur; Note 3 (H): l'épithélium supérieur et glandes profondes (chef de cellules < 50% .); score 4 (I): l'épithélium supérieur et glandes profondes (cellules principales ≥ 50%)
coloration immunohistochimique et la notation des cytokines expression
Les coupes congelées (4 pm) ont été séchés à température ambiante pendant 2 h, et fixées avec 3,7% de formaldehyde pendant 1 min. Après lavage deux fois avec du PBS, les échantillons ont été fixées avec de l'acétone à froid, puis lavés avec du PBS. Le Ig souris réactif de blocage (VECTOR Laboratories, Burlingame, CA, U.S.A.) a été utilisé pour bloquer les sites de liaison non spécifiques. Les anticorps monoclonaux de rat anti-souris (TNF-a, l'IL-6, IL-10, l'IL-1 ß et IFN-y) et l'anticorps polyclonal anti-souris de lapin (IL-1β) ont été utilisés comme anticorps primaire. Le HRP conjugué polymère à large spectre (Zymed Laboratories Inc. South San Francisco, CA, U.S.A.) a été utilisé comme 2 e anticorps. Le kit AEC a été utilisé pour illustrer la tache. L'intensité de chaque cytokine a été évaluée en fonction de la distribution des cellules à coloration positive sur l'épithélium (plage de 0-3) et sur les composants de la lamina propria, y compris la matrice, les cellules polymorphonucléaires, les lymphocytes et les fibrocytes (tableau 1) .Tableau 1 la notation des expressions de cytokines sur l'épithélium et la lamina propria gastrique.

Note

0
1
2
3
négatif
Moins de 33%
33% -67%
Epithelium Plus de 67%
Lamina propria
Matrice
Absence
lymphocytaire
Absence de Présence
Présence
fibrocyte
Absence neutrophiles
Présence
Absence
Présence
la notation quantitative de chaque cytokine sur l'épithélium était la suivante: Note 1: coloration positive dans le cytoplasme des cellules épithéliales seulement sur la partie supérieure 1/3 partie de l'épithélium; score 2: sur la partie supérieure et au milieu de l'épithélium (1 /3-2 /3); score 3: sur la totalité de la couche de l'épithélium (> 2/3). La coloration positive de chaque cytokine sur la lamina propria (lymphocytes, fibrocytes et neutrophiles) signifie qu'il y avait plus de cinq cellules positives dans un champ de vision à l'examen microscopique de haute puissance. L'analyse statistique
de χ de Pearson 2 test a été utilisé pour tester la différence des taux de colonisation entre les souris expérimentales et de contrôle. Les paramètres histologiques, des antigènes de Lewis, et l'expression de cytokines ont été comparés avec le test exact de Fisher pour les différents sous-groupes. Le test de Friedman a été utilisé pour tester la différence de H. pylori densité
entre l'antre, corpus et cardia de l'estomac dans chaque souris. Tous les tests ont été évalués à deux tailed et une valeur p <
; Résultats de 0,05 a été considérée comme significative.
Les taux de succès H. pylori
colonisation chez des souris avec différents âges d'acquisition
Sur la 2 e semaine après H. pylori
défi, la colonisation H. pylori a réussi à 89% (09/08) du groupe de jeunes souris et 100% (10/10) du groupe des souris adultes. En revanche, le 8 e semaine après H.pylori
défi, le taux de colonisation était significativement plus faible chez les souriceaux que celle chez les souris adultes (53% vs 95%, p = 0,003
). Pour les souris avec la colonisation réussie soit sur la 2 e ou la 8 e semaine, les densités de H. pylori
ont été distribués de manière uniforme sur l'antre, corpus, et du cardia chez les souris jeunes et adultes ( P
> 0,05) gastriques Lewis antigènes et cytokines expressions chez les souris naïves de spécifiques à l'âge
Chez les souris naïve des deux jeunes et adultes groupes, les expressions de le x et sialyl-. le x étaient faibles sur l'antre gastrique. Cependant, une augmentation progressive de l'intensité totale de Le x et sialyl-Le x expressions ont été divulgués dans les tranches d'âge (figure 2A & 2B). Une telle augmentation a atteint un plateau à partir de l'âge chronologique de près de 5 semaines. A la 2 ème semaine et 8 e semaine après H. pylori
défi, le Le x expressions ne sont pas différents entre les souris colonisées et le contrôle dans les deux groupes, jeunes et adultes. Figure 2 L'intensité de Lewis gastrique antigènes chez la souris naïve à différents âges de la vie (A) Lewis x, (B) sialyl-Lewis x.
L'intensité de l'expression des cytokines gastrique varie entre les différents âges de la souris et l'emplacement. Les cytokines pro-inflammatoires, il n'y avait pas de colorations positives de TNF-α et d'IL-6 sur l'épithélium superficiel dans aucune des souris naïves. Les colorations positives du TNF-α et d'IL-6 sur les lymphocytes, les neutrophiles et les fibrocytes, au cours de la lamina propria étaient significativement plus élevés chez les souris âgées de 5 semaines ≥ que ceux âgés de < 5 semaines (P
< 0,01; Figure 3A & 3B). La coloration positive de l'IL-1β a été trouvé principalement sur l'épithélium et exprimé précocement chez les souris âgées < 5 semaines. Le taux de coloration positive de l'IL-1β sur les neutrophiles était plus élevée chez les souris âgées de ≥ 5 semaines de plus que les personnes âgées de < 5 semaines (P
< 0,05; Figure 3C). Figure 3 expressions de cytokine gastriques sur l'épithélium et la lamina propria entre les souris naïves âgés ≥ 5 semaines et < 5 semaines. (A) la tumeur nécrosée facteur alpha (TNF-α), (B), l'interleukine 6 (IL-6), (C), l'interleukine 1 bêta (IL-1β), (D), l'interféron gamma (IFN-γ), et (E ) interleukine 10 (IL-10).
dans la première vie des souris, la coloration IFN-γ positif a été dans la majorité se trouve sur l'épithélium et de la matrice, que l'intensité de coloration positif IFN-γ a diminué après l'âge ≥ 5 semaines (P
< 0,01, figure 3D). Cependant, un taux de positif coloration d'IFN-γ sur les lymphocytes et fibrocytes significativement plus élevée a été décrite dans les souris âgées de ≥ 5 semaines de plus que les personnes âgées de < 5 semaines (P
< 0,01).
Contrairement à la forte coloration IFN-γ sur l'épithélium dans la vie précoce de la souris, l'IL-10 était généralement négatif sur l'épithélium. La coloration positive de l'IL-10 est plus élevé sur les lymphocytes et les fibrocytes chez les souris âgées de 5 semaines ≥ que chez ceux âgés de < 5 semaines (P
< 0,05; Figure 3E).
Souris histologie et Lewis expression de l'antigène après H. pylori infection

Sur la 2 e semaine après H. pylori
défi, le H. pylori
colonisés par de jeunes souris semblait avoir un taux de haute TCIS légèrement plus élevé (score ≥ 4) que les souris témoins (88% vs 50%, P = 0,15
), mais cette une signification marginale n'a pas été divulgué dans les souris adultes (30% contre 30%, P = 1,00
). En outre, dans le jeune groupe de souris, les souris avec la colonisation persistante sur la 8 e semaine avait un taux de haute TCIS que les souris qui ont perdu la colonisation évidemment plus élevée (40% contre 11%, P = 0,30
) . Sur la 2 e semaine après H. pylori
défi, le pourcentage de jeunes souris colonisés ayant une forte intensité de sialyl-Le x expression (score ≥ 7) avait diminué par rapport à celui des souris témoins (25% contre 60%, P = 0,19
). Cependant, une telle baisse n'a pas été évident sur la 8 e semaine (100% contre 90%, P
> 0,05) et avec des souris adultes sur la 2 ème semaine (90% contre 100 %, P
> 0,05) et la 8 e semaine (58% contre 60%, P
>. 0,05) après les défis de H. pylori
cytokines gastrique expression après H. pylori infection de la
sur la 2 e semaine après H. pylori
défi, les jeunes souris avec la colonisation réussie a eu une intensité significativement plus élevé d'IL-6 sur fibrocytes (75% contre 0 %, P = 0,002
) et la matrice (75% vs 20%, p = 0,05
), mais l'IFN-γ plus faible (0% vs. 100%, P
< 0,001) sur la matrice que les témoins naïfs (tableau 2). Aussi chez les souris adultes, les souris avec la colonisation réussie ont été décrits comme ayant un taux d'expression de l'IFN-γ sur fibrocytes que les souris témoins (30% contre 90%, P = 0,02
) .Table 2 La cytokine gastrique expressions sur la 2ème semaine de souris jeunes et adultes avec la colonisation et de contrôle naïve des souris de la persistance de H. pylori.


paramètres de
adultes souris de jeunes souris (en%)
Colonisée (n = 8)

contrôle
(n = 10)
P
valeur
Colonisée (n = 10)
contrôle
( n = 10) Valeur
P
IL-6 *
Matrice
75
20
0,05
70
30
NS
60
70
NS
fibrocyte
75
0
0,002
50
10
les NS de lymphocytaires 20
70
0,07
TNF-α de 37,5
20
les NS de neutrophiles de 80
50
NS *
Matrice
40
les NS 80
90
NS
lymphocytaires de> 87,5
70
NS
90
90
NS
fibrocyte
87,5
40
0,07
12,5
10
les NS de neutrophiles de 100
90
NS
30
40
NS
IL-1β
Epithelium ≥ 2
100
70
100
90
NS
Matrice
a25
NS 25
20
les NS de 100
80
NS
lymphocytaires
0
NS
30
0
NS
fibrocyte
a25
60
NS
100
100
NS
IFN-γ
Epithelium ≥ 2
0
30
NS
10
0
NS
Matrice
0
100
< Lymphocytes 0.001
40
20
NS
0
0
NS
10
30
NS
fibrocyte
12,5 <30
90
0,02 de
br> 10
NS Neutrophil
0
0
NS
10
20
NS
IL-10*
Matrix
a25
60
NS
100
80
NS
Lymphocytes
25
20
NS
60
60
NS
fibrocyte
a37.5
50
NS
100
neutrophiles de 80
NS de 12,5
0
les NS
10
20
NS
CIS: partition inflammatoire chronique; AIS: Score inflammatoire aiguë. *: Des moyens colonisées des souris infectées par H. pylori
avec la colonisation réussie (test d'urée positif et histologie) sur le sacrifice. a: P
valeur < 0,01; b: P
valeur ≤ 0,05 entre les souris colonisées jeunes et adultes. NS: pas de signification. * Indiqué sur ce paramètre, l'épithélium est plutôt faible pour une telle cytokine sur coloration immunohistochimique.
Le 8 e semaine après H. pylori
défi, les taux de TNF-α élevé (100% vs. 20%, P = 0,02
) sur la matrice et de haute IL-1β (100% contre 20%, P = 0,02
) sur fibrocytes étaient plus élevés chez les jeunes souris avec la colonisation persistante que chez les souris témoins ( Tableau 3). Pour les souris adultes ayant une colonisation réussie, les taux d'IFN-γ élevé (30% contre 100%, P = 0,003
), IL-10 (20% contre 100%, P = 0,001
) et IL-6 (50% contre 100%, P = 0,03
) sur fibrocytes ont également été significativement inférieurs à ceux des souris naïves de contrôle. Néanmoins, il était plus fréquent chez les souris adultes colonisés que les souris témoins d'avoir un IFN-γ plus élevé (80% contre 40%), l'IL-10 (80% contre 40%), et l'IL-6 (80% contre 30%) sur la matrix.Table 3 les expressions de cytokine sur la 8ème semaine de souris jeunes et adultes avec persistance et perdu H. pylori
colonisation et de contrôle naïf souris.


Variables
souris adultes des jeunes souris
(% )
persistante colonisation
(n = 5)
perdu la colonisation
(n = 4)
contrôle
(n = 10)

P
† valeur
persistante colonisation
(n = 10) contrôle

(n = 10)
P
valeur
IL-6 *
80
30
NS
lymphocytaire de 100
80
50
les NS de matrice
25
60
50
NS
70
70
NS
fibrocyte
100
80
70
NS
50 20
70
NS
TNF-α *
0
20
50
les NS
100
0,03
neutrophiles Matrice
100
80
60
NS de lymphocyte de 100
60
les NS de 100
100
20
NS
90
90
NS
fibrocyte
100
100
70
NS
100
80
NS
neutrophiles
IL-1β 10
40
les NS de 25
20
60
NS
Epithelium ≥ 2
100
80
70
NS
100
80
NS
Matrice
75
40
30
NS
100
80
NS
50
60
0
les NS de lymphocytaires
50
60
NS
fibrocyte
100
60
20
NS
100
100
NS
neutrophiles
0
0
20
NS
0
10
NS
IFN-γ
Epithelium ≥ 2
0
80
20
0,048
30
0
NS
Matrice
75
100
40
75
60
40
NS
30
50
NS
80
40
NS
lymphocytaire NS 30
100
0,003 de
75
100
50
les NS de fibrocytes Neutrophil
0
0
40
NS
20
0
NS
IL-10*
Matrix
100
20
70
0.048
80
40
NS
Lymphocytes
100
20
70
0,048
40
50
NS
fibrocyte
100
60
70
NS <50
0
10
NS
0
10
NS
† de neutrophiles de br> 20
100
NS: l'importance a été comparée entre les jeunes souris avec la colonisation persistante et perdu. * Indiqué sur ce paramètre, l'épithélium est plutôt faible pour une telle cytokine sur coloration immunohistochimique.
Supérieur sialyl-Lex coexiste avec IL-10 plus élevée, mais inférieure INF-γ pour H. pylori
colonisation
Sur la 2 ème semaine, les jeunes souris colonisé avait pas de différence significative dans l'intensité de sialyl-le x expression que les souris témoins (P
> 0,05). Cependant, sur la 8 e semaine après H. pylori
défi, les jeunes souris avec la colonisation persistante avait un taux d'évident sialyl-Le x expression plus élevée (score ≥ 7) que ceux de la souris la colonisation perdue (100% contre 56%, P = 0,03
). En plus de montrer un taux plus élevé de sialyl-Le x expression (score ≥ 7), la totalité de la persistance H. pylori
jeunes souris significativement colonisés par coexisté avec l'IFN-γ inférieur et supérieur de l'IL-10 expressions que les souris qui avaient perdu la colonisation persistante sur la 8 e semaine (tableau 4, 100% contre 0%, P = 0,008
) .Table 4 A faible IFN-γ gastrique (score ≤ 1) expression sur le épithélium coexistant avec haute sialyl-Lex (score ≥ 7) et l'IL-10 (à la fois sur la matrice et lymphocytes) a été corrélée à la colonisation bactérienne persistante dans l'âge d'acquisition précoce de la souris.
expression de cytokine (%)
colonisation de
des jeunes souris OR (IC à 95%)
P
valeur *

persistante (n = 4)
Lost (n = 5)


faible IFN-γ
100
20
0,2 (0,1-1,2)
haute IL-10 de 0,048
100
0
- 0,008
Low IFN-γ et de haute sialyl -Lex
100
0
- faible IFN-γ
0,008 et haute IL-10
100
0
- 0,008
OU : odd ratio; IC: intervalle de confiance; *: Test exact
Table Fisher 5 montre le score de l'IFN-γ sur l'épithélium et l'IL-10 sur la matrice et les lymphocytes entre les souris avec la persistance et la perte de la colonisation à la 8 e semaine après H. pylori
défi. Aucune de ces souriceaux à une colonisation bactérienne persistante a l'expression d'IFN-γ sur l'épithélium mais il y avait de l'IL-10 expression évidente sur la matrice et des lymphocytes, par rapport aux souris sans colonization.Table 5 Le résultat de l'IFN-γ sur l'épithélium et de l'IL -10 sur la matrice et les lymphocytes lors de la 8e semaine après le défi de H. pylori chez les jeunes souris avec et sans la colonisation persistante.



Score de l'IL-10
Souris No.
colonisation
Score de l'IFN-γ sur l'épithélium
sur la matrice
sur lymphocyte

1
Yes
0
1
1
2
Yes
0
1
1
3
Yes
0
1
1
4
Yes
0
1
1
5
No
1
0
0
6
No
2
1
0
7
No
2
0
0
8
No
2
0
0
9
No
2
0
1
Rapport de l'acquisition de H. pylori
se produit principalement dans l'enfance et l'élimination spontanée de l'infection se produit généralement chez les jeunes enfants [3-6, 20]. Dans cette étude, les souris C57BL /6 adultes ont le taux de colonisation d'un H. pylori favorable des isolats allant à plus de 80%, ce qui est compatible avec les rapports précédents [13, 14]. Ce taux de colonisation élevé chez les souris adultes est également compatible pour soutenir le fait que l'acquisition tardive de H. pylori
chez les patients humains adultes se traduit généralement par la colonisation chronique [20]. En outre, par rapport à la 2 e semaine de jeunes souris après H. pylori acquisition
, le taux de colonisation dans la 8 e semaine était de 53%, ce qui soutient que l'élimination spontanée de H. pylori
se produit vraiment pendant l'âge d'acquisition précoce de la souris. Donc, la présente étude devrait être très originale d'introduire un modèle de souris conçu pour valider qu'il devrait y avoir une perte de la colonisation de H. pylori après une acquisition antérieure de H. pylori
, qui imite de près les résultats cliniques chez les jeunes enfants.
Notre étude précédente a montré que l'intensité de l'estomac le x est positivement liée à l'augmentation de l'âge chez l'homme [12]. Cependant, pour les personnes sans H. pylori
infection, l'expression de sialyl-Le x sur l'épithélium gastrique est faible ou manque chez les enfants et les adultes [12] dyspeptiques. Compatible avec les humains, l'intensité de l'estomac sialyl-Le x de souris est également corrélée positivement à l'augmentation de l'âge (figure 2B). Une telle constatation chez la souris est également compatible avec une étude chez le rat, ce qui a révélé une augmentation liée à l'âge de la glycosylation dans les tissus du foie [21]. L'augmentation gastrique sialyl-Le x expression après H. pylori
infection a été rapportée chez les humains et les singes rhésus [9-12]. Cependant, dans notre étude de souris, une diminution de l'intensité de l'estomac sialyl-Le xwas décrit dans le H. pylori
infectés par les jeunes souris, mais pas chez les souris adultes sur la 2 ème semaine, par rapport à les souris témoins. Plus frappant encore, le 8 e semaine après H. pylori
acquisition, une telle diminution de sialyl-Le x disparu dans les deux jeunes souris adultes et colonisés, qui avaient une muqueuse gastrique entièrement sialylé. Cette découverte suggère que H. pylori
défi devrait être impliqué de perturber la courbe de maturation liée à l'âge de sialylation chez les jeunes souris. En outre, il suggère indirectement que les modifications de l'antigène sialyl-Lewis chez les jeunes souris devraient être fortement corrélées à la persistance ou la perte de H. pylori
colonisation.
Dans ce modèle animal, début H. pylori
acquisition a provoqué une hausse de la CEI que dans les contrôles sur la 2 ème semaine (87,5% contre 50%, P = 0,15
), mais pas sur la 8 e semaine (40% contre 30%, P
= 0,36) après H. pylori
défi. En supposant que l'inflammation dense provoque des symptômes cliniques plus graves, ce changement d'histologie pourrait être corrélée à nos résultats précédents que H. pylori
infection peut causer des douleurs épigastriques à court terme chez les enfants, bien que généralement résolus au suivi [22]. En ce qui concerne à la fois l'observation clinique et les données du modèle de souris in vivo, H. pylori
acquisition chez les enfants présente habituellement comme une suite d'auto-limitée dans l'inflammation.
Après l'infection de H. pylori, les différentes réponses de l'hôte de l'estomac cytokines pourraient éventuellement être liés à différents résultats cliniques [14, 18, 23, 24]. Dans cette étude, les souris naïves ont été décelées à l'IL-1β régulière et les expressions de l'IFN-γ (figure 3C & 3D) sur l'épithélium gastrique, ce qui est conforme à un rapport précédent chez l'homme [15]. Notre étude de souris présentait une expression des cytokines spécifiques à l'âge de l'épithélium gastrique (IFN-γ) et de la lamina propria (IL-6, le TNF-α, IFN-γ et l'IL-10). En raison de la réponse spécifique à l'âge des cytokines, notre étude soutient qu'il devrait y avoir différentes réponses immunitaires naïves entre les enfants et les adultes.
Basé sur l'étude immunohistochimique, cette étude a confirmé que les expressions cytokines pro-inflammatoires sur le limbe gastrique propria pourrait changer à la fois sur la 2 e et la 8 e semaine après H. pylori
défi [25, 26]. À la fois chez la souris et chez l'homme, les réponses des cytokines gastriques de l'infection par H. pylori ont été démontrés être Th1 dominante, parce que le niveau d'IFN-γ est augmentée chez H. pylori
Les sujets infectés par rapport aux témoins [15, 18, 23, 27]. Un niveau élevé INF-γ a été attribué comme marque de H. pylori
gastrite la PI, en particulier pendant l'inflammation chronique et potentiellement attribué un rôle protecteur contre H. pylori
colonisation [16-18, 28]. Comme on le voit dans le tableau 3, on décrit que des souriceaux à une perte de la colonisation avait une expression d'IFN-γ plus élevée sur l'épithélium de la souris avec une colonisation persistante (P
= 0,048). Cette découverte est compatible avec une étude humaine chez les enfants qui ont montré que les enfants atteints d'une infection par H. pylori ont une plus faible concentration d'IFN-γ par rapport aux témoins non infectés [29]. Ces données chez la souris suggère qu'il peut y avoir une corrélation significative à la perte de la colonisation une fois qu'il ya une forte expression de l'IFN-γ. Par conséquent, il convient de se préoccuper d'étudier les différentes réponse de l'hôte de l'IFN-γ qui peut être lié à avoir des résultats H. pylori d'infection
chez les enfants.
IL-10 est une cytokine Th2, et peut être déclenchée par règlement compensatoire après un changement Th1 par le défi du H. pylori pour protéger la muqueuse gastrique [13, 15, 23, 27]. Par conséquent, il n'a pas été si frappante pour illustrer une augmentation significative de l'expression de l'IL-10 dans les souriceaux à une colonisation persistante (tableau 3). Comme on le voit dans le tableau 4, la jeune souris avec IFN-γ bas sur l'épithélium d'avoir une persistance de la colonisation H. pylori a une coexistence avec une IL-10 expression élevée de la matrice et des lymphocytes 100%. Ces données confirment une fois encore que la régulation positive de l'IL-10 dans ces souris devrait être une régulation compensatrice coexiste après une chute de l'IFN-γ pour servir un rôle protecteur de la muqueuse infectée.

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