PLoS ONE: Konjugert linolsyre tilskudd under en fettrik diett modulerer magen Protein Expression og tarm Microbiota i voksen mus

Abstract

magetarmkanalen utgjør en fysiologisk grensesnitt integrere nærings og microbiota-vert metabolisme. Konjugerte linolsyrer (CLA) er rapportert å bidra til redusert kroppsvekt og fett laksen. Modulering av kosten CLA av mage proteiner relatert til energihomeostase eller bakterieflora kan være involvert, selv om dette ikke har blitt tidligere analysert. Dette er undersøkt i denne studien, som tar sikte på å understreke de potensielle mekanismer for CLA som bidrar til kroppsvekt regulering. Voksne mus ble matet enten en vanlig fett (NF, 12% kJ innhold som fett) eller en høy-fett (HF, 43% kJ innhold som fett) diett. I det sistnevnte tilfelle halvparten av dyrene mottok daglig oralt tilskudd av CLA. Uttrykk og innhold av magen proteiner og spesifikke bakteriepopulasjoner fra blindtarm ble analysert. CLA-tilskudd var assosiert med en økning i magen protein uttrykk, og utøvde en prebiotisk virkning på både bacteroidetes /Prevotella Hotell og Akkermansia muciniphila
. Men CLA-tilskudd var ikke i stand til å overstyre de negative effektene av HF diett på Bifidobacterium
spp., Som ble redusert i både HF og HF + CLA grupper. Våre data viser at CLA er i stand til å modulere mage protein uttrykk og utøve en prebiotisk effekt på spesifikke tarmbakteriearter

Citation. Chaplin A, Parra P, Serra F, Palou A (2015) konjugert linolsyre Tilskudd etter en High-Fat Diet modulerer magen Protein Expression og tarm Microbiota i voksne mus. PLoS ONE 10 (4): e0125091. doi: 10,1371 /journal.pone.0125091

Academic Redaktør: Marià Alemany, Fakultet for biologi, SPANIA

mottatt: 03.02.2015; Godkjent: 13 mars 2015; Publisert: 27 april 2015

Copyright: © 2015 Chaplin et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres

Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer

Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av tilskuddet AGL2012-33692 og EU-finansiert prosjekt (BIOCLAIMS FP7-244995). Forfatterne gruppen mottar økonomisk støtte fra Instituto de Salud Carlos III, Centro de INVESTIGACION BIOMEDICA en Red Fisiopatología de la Obesidad y Nutricion, CIBERobn. Forfattere tilhører Nutrigenomics-gruppen, som ble kåret til "Group of Excellence" for CAIB og støttet av "Direcció Generelt d'Universitats, Recerca jeg transferencia del Coneixement" av Regional Government (CAIB) og Feder midler (EU). AC er støttet av en PhD fellesskap av Conselleria d'Educació, Cultura jeg Universitats, styrer de les Illes Balears, et prosjekt som er cofinanced av European Social Fund. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer

Innledning

Fedme er i ferd med å vokse til en epidemi rente, ansett som en stor helsetrussel rundt om i verden, og som resulterer i en økt risiko for diabetes mellitus type II, enkelte typer kreft, fatty leversykdom, høyt blodtrykk, hjerte- og karsykdommer og økt dødelighet. Til tross for store forskningsinnsatsen på effekten av kosthold, mosjon, utdanning, kirurgi eller medisinsk behandling, er det fortsatt ingen langsiktig løsning for å effektivt hindre eller motvirke fedme [1].

Kostholds konjugerte linolsyrer (CLA) refererer til en blanding av geometriske og posisjonelle isomerer av linolsyre med konjugerte dobbeltbindinger som finnes hovedsakelig i drøvtyggende kjøtt og melkeprodukter i [2]. Økende forskning har vist at isomerene cis
-9, trans
-11-CLA og trans
-10, cis
-12-CLA spesielt har en viktig rolle i reguleringen av kroppsvekt og kroppsfett i både dyr [3-9] og menneske [10-13] studier, etter

Denne studien ble gjennomført for å ytterligere karakterisere virkningene av CLA på kroppsvekt ledelse, ved å ta opp visse aspekter som så vidt vi vet ikke har blitt studert før. Mage-tarmkanalen er den største endokrine av kroppen og er ansvarlig for konvertering av mat til energi, er metabolsk svært aktiv og hjem til billioner av mikrober [14, 15]. Magen er en av de første områder i magetarmkanalen som svarer til matinntak. Det syntetiserer proteiner som har en viktig rolle i energibalanse og har vist seg å være modulert ved hjelp av diett [16-21]. En annen interessant komponent er caecum innhold, som havner en stor mengde bakterier som utfører en rekke funksjoner som er involvert i regulering av energi, som for eksempel behandling av ikke-fordøyelige polysakkarider, metabolisme av proteiner, syntese av vitaminer og produksjon av energi [22- 25]. Emerging bevis tyder på at tarmfloraen kan være involvert i fedme [26-28], og at fettrik diett særlig kunne bidra til modulering av denne bakteriesamfunnet [29-33]. Derfor, rollen av mat i å endre gut microbiota mot en mer fordelaktig profil er av stor interesse [34].

Totalt streker dette viktigheten av samspillet mellom mat og de ulike komponentene i mage-tarmkanalen. Målet var å studere potensialet for CLA i reguleringen av både magen protein expression og spesifikk gut bakteriearter i overvektige mus under en HF kosthold.

Materialer og metoder

Dyr

Mann C57BL /6J mus fra Charles River (Barcelona, ​​Spania) som veier 21 ± 0,1 g (5 uker gamle) ble plassert under standardbetingelser i bur i grupper på 4-5 og holdt i en 12-timers lys: mørke syklus ved 22 ° C med mat og vann ad libitum
. Merdene var Makrolon type III (Tecniplast, Biosis Biologiske Systems S.L.) og sengetøy var Ultrasorb granspon (Panlab S.L.U). Sengetøy ble endret ukentlig. Etter mottak, ble dyrene akklimatisert seg en uke og delt inn i grupper som sikrer lik vekt gjennomsnittet. Maten ble endret to ganger i uken, og inntak og kroppsvekt ble registrert hver tredje dag gjennom hele forsøket [35]. Dyret protokollen følges i denne studien ble gjennomgått og godkjent av Bioetisk Utvalget ved Universitetet i Balearene (godkjenning 13 ^{th februar 2006) og Universitetet retningslinjer for bruk og stell av forsøksdyr ble strengt fulgt. Alle forsøk ble gjennomført for å redusere lidelse.}

Mus ble delt inn i tre behandlingsgrupper (n = 8). Alle dietter ble fremstilt av Research dietter (Inc, New Brunswick) og presentert som pellets til dyrene. Detaljert sammensetning av disse dietter kan finnes i tabell S1. Mus mottok en av de følgende dietter for 54 dager: en standard normal-fett diett (NF), inneholdende 12% kJ innhold som fett, anvendt som kontroll, eller en høy-fett diett (HF), som inneholdt 43% kJ innhold så fett. Dietter var basert på standard gnager diett AIN-76A. Derfor er de to diettene inneholdt lik andel av protein (20% kJ innhold) og karbohydrat ble anvendt for å justere energiinnhold. Således inneholdt NF diett 40% (w /w) sukrose og HF 35% (vekt /vekt). Deretter ble en daglig dose av CLA gis til halvparten av de dyrene som fikk den HF-dietten. Tonalin (vennligst tilveiebrakt fra Cognis) ble anvendt som supplement CLA, som gir 6 mg av CLA /dag (21.4 nmol /isomeren /dag), gitt som en oral sonde. Tonalin TG 80, avledet fra saflorolje, er sammensatt av triacylglyceroler som inneholder ca. 80% CLA med et 50:50 forhold av de aktive CLA-isomerer cis
-9, trans
-11 og trans
-10, cis
-12. Ved slutten av eksperimentet ble kroppsvekt ikke forskjellig mellom HF og CLA-gruppe, mens kroppsfett var statistisk lavere i CLA dyr. Komplett sett med data, inkludert vekten av dyr, kroppsfett (dag 40) og estimert matinntak har tidligere blitt publisert [35].

Offer og prøvetaking

Sacrifice av alle dyr ble gjennomført ut innenfor dyrefasiliteter, som ved begynnelsen av lys syklus og etter 10 h fra mat deprivasjon. Dyrene ble bedøvet med en intraperitoneal injeksjon består av en blanding av xilacine (10 mg /kg kroppsvekt) og ketamin (100 mg /kg kroppsvekt). Organer og prøver av interesse ble skåret ut og veid (mage og blindtarm). Magen ble åpnet og innsiden ble skrapt for å samle slimhinnen. Caecum ble også skåret opp og innholdet oppsamlet. Alle vev ble skylt med saltvann som inneholder 0,1% dietylpyrokarbonat (Sigma, Madrid, Spania) og snap-frosset ved -80 ° C.

Kvantifisering av mage leptin og ghrelin

Magen slimhinnene var homogenisert ved 4 ° C i 1: 3 (vekt /volum) PBS (mM: 137 NaCl, 2,7 KCl, 10 fosfatbuffer, pH 7,4) og sentrifugert ved 7000 x g
i 2 min ved 4 ° C. Totalt protein ble bestemt etter fem gangers fortynning av supernatanten med PBS ved anvendelse av Bradford-metoden [36]. Gastrisk leptin ble bestemt i den første homogenatet med en mus leptin enzym-bundet immunosorbent assay (ELISA) sett (R &D Systems, Minneapolis, MN). Ghrelin besluttsomhet i magen ble utført i henhold til [37]. Mage homogenatet ble blandet med 10 volumdeler 1 M eddiksyre inneholdende 20 mM HCl, kokt i 20 minutter og sentrifugert ved 7000 x g
i 2 minutter ved 4 ° C. Supernatanten ble lyofilisert og resuspendert i PBS. Ghrelin konsentrasjon i magen ble deretter bestemt ved hjelp av en mus ghrelin enzym immunsorbent analyse (EIA) kit (Phoenix Europa, Karlsruhe, Tyskland).

RNA isolering, retrotranscription og real-time qPCR

Total RNA ekstraksjon fra magen ble gjennomført med Tripure Reagens (Roche Diagnostic Gmbh, Mannheim, Tyskland) i henhold til produsentens instruksjoner. Isolert RNA ble kvantifisert ved hjelp av Nanodrop ND-1000 spektrofotometer (Nanodrop Technologies Inc., Wilmington, DE, USA) og dens integritet ble bekreftet ved hjelp av agarosegel-elektroforese.

Prøver ble retrotranscribed og real-time PCR ble utført for analysen av mage proteiner. I korthet ble 0,25 ug av total RNA (i et endelig volum på 5 ul) ble denaturert ved 65 ° C i 10 min og deretter reverstranskribert til cDNA ved anvendelse av MuLV revers transkriptase (Applied Biosystems, Madrid, Spania) ved 20 ° C i 15 min, 42 ° C i 30 min, og en avsluttende trinn av 5 min ved 95 ° C i en termosykler (Applied Biosystems 2720 termosykler, Madrid, Spania).

Hver PCR ble utført med fortynnet cDNA templat, forover og bakover primere (5 pm hver) og Power SYBR Grønn PCR Master Mix (Applied Biosystems, CA, USA). Primere ble utformet og innhentet fra Sigma Aldrich Química SA (Madrid, Spania) og sekvenser er beskrevet i Tabell 1. Real-time PCR ble utført ved hjelp av Applied Biosystems StepOnePlus real-time PCR Systems (Applied Biosystems) med følgende mal: 10 min ved 95 ° C etterfulgt av en total av 42 temperatursykluser (15 s ved 95 ° C og 1 min ved 60 ° C). For å verifisere renheten av produktene forsterkede, ble en smeltekurve produsert etter hver kjøring i henhold til produsentens instruksjoner. Terskelen syklus (Ct) ble beregnet ved instrumentets programvare (StepOne Software v2.0), og den relative ekspresjon av hvert gen ble beregnet som en prosentandel av NF-mus ved hjelp av to ^{-ΔΔCt metoden [38]. Beta-aktin ble brukt som referanse genet.}

Bakteriell profilering av qPCR

Totalt bakterielt DNA ble ekstrahert fra omtrent 50 mg av blindtarmen som prøver å bruke E.Z.N.A. Krakk DNA kit (Omega Biotek, GA, USA). DNA-konsentrasjonen ble bestemt ved anvendelse av et Nanodrop ND-1000 spektrofotometer (Nanodrop Technologies Inc., Wilmington, DE, USA) og dets integritet bekreftet ved agarosegel. Vurdering av tilstedeværelsen og relative mengde av bakteriearter ble bestemt ved å måle DNA overflod av 16S rRNA gensekvensene ved qPCR med Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System (Applied Biosystems), etter tidligere beskrevne protokoller [39, 40]. Spesifikke primere for Clostridium coccoides
, Clostridium leptum Hotell og Lactobacillus
spp. (Firmicutes representanter ); Bacteroides /Prevotella plakater (bacteroidetes); Bifidobacterium
spp. (Aktinobakterier); Akkermansia muciniphila plakater (verrucomicrobia spinosum); Enterobacteriaceae plakater (Proteobacteria); og Totalt Bakterier
ble hentet fra Sigma (Madrid, Spania). Total Bakterier
refererer til et bredt spekter universell primer som gjenkjenner den konserverte regionen av 16S rRNA-gen som koder for et bredt spekter av bakteriearter, og ble brukt til å normalisere analysen til total bakteriell DNA. Sekvenser er beskrevet i tabell 2. Terskel syklusen ble beregnet ved hjelp av to ^{-ΔΔCt metoden [38], og relativ bakterieinnhold og folde endring (FC) ble beregnet (Log _{22 -ΔΔCt). Verdier ble normalisert med gjennomsnittet av NF-gruppen.}}

Statistisk analyse

Data er presentert som gjennomsnitt ± SEM. Likestilling av avvik mellom gruppene ble vurdert av Levene test. Når homogeniteten av varianser ble antatt, er en-veis ANOVA brukes til å bestemme betydningen av de forskjellige parametrene mellom grupper. Hvis det var en signifikant forskjell, ble en Bonferroni-test benyttet for å bestemme hvor forskjellen lå og for å korrigere for multiple testing. Når homogenitet av avvik ikke ble antatt, data ble log transformert. Lineære sammenhenger mellom sentrale variabler ble testet ved hjelp av Pearsons korrelasjonskoeffisienter. Terskel av betydning ble satt til P < 0,05. Analysen ble utført ved hjelp av SPSS program for Windows versjon 21.0 (SPSS, Chicago, IL, USA).

Resultater

CLA tilskudd modulerer uttrykk for regulatoriske proteiner i magen

uttrykk av proteiner assosiert til energiomsetning og regulering av matinntak ble bestemt i mus magen. Leptin mRNA-ekspresjon i HF-gruppen ble ikke forandret, men leptin protein ble øket hos disse dyrene (2-fold vs. NF, p = 0,003). På den annen side, kosttilskudd med CLA forårsaket en 6-ganger høyere ekspresjon av leptin mRNA (sammenlignet med NF, p = 0,001), som var i overensstemmelse med høyere innhold av gastrisk leptin (2-fold, p = 0,014 vs NF ) (figur 1A). CLA-matet dyrene også utstilt økt ghrelin mRNA uttrykket (3 ganger, p = 0,006 vs.NF), men ingen endringer ble sett blant grupper av ghrelin protein (fig 1B).

Videre CLA-tilskudd var assosiert til øket ekspresjon av alle mage proteiner analysert og statistisk signifikans ble oppnådd i tilfelle av resistin (retn) (3-fold, p = 0,026), G-protein-koblet reseptor 39 ( GPR39) plakater (4-fold , p = 0,001), Glucagon ( GCG) plakater (2 ganger, 0,001) og glukagon reseptor ( Gcgr) plakater (5-fold, p = 0,011) (figur 1C).

blindtarm microbiota moduleres av CLA

for ytterligere å se på effekten av CLA, ble blindtarm innhold av mus analysert for å bestemme bakteriearter potensielt knyttet til fedme og energiomsetning. En betydelig økning i bakterielt DNA cøkum innhold ble observert i mus foret med en diett HF (3 ganger vs. NF, p = 0,032), som ble redusert med CLA-tilskudd, og viste ingen forskjeller i forhold til NF dyr (figur 2A). Dette ble fulgt av forskjeller i tarmen bakterieflora sammensetning.

Ingen statistisk signifikante endringer ble funnet om firmicutes innhold under de forskjellige kosttilskudd behandlinger (Fig 2B). HF fôring var hovedsakelig knyttet til en nedgang i Bifidobacterium
spp. (P = 0,009 vs. NF, med en fold endring (Logg _{2 FC) av -3,07). CLA tilskudd ikke motvirke denne reduksjonen, presentere lignende verdier (p = 0,034 vs. NF; -2,18 Logg 2 FC) (figur 2C). I motsetning til dette dyr som fikk CLA viste en signifikant økning i to bakteriearter av interesse: Bacteroides /Prevotella plakater (p = 0,021 vs NF; 1,30 Log 2 FC) (figur 2D) og A
. muciniphila
, noe som dramatisk økt sammenlignet med både NF (p = 0,014; 4,33 Logg 2 FC) og HF (p = 0,002) (figur 2E). Ingen vesentlige endringer på Enterobacteriaceae
profil ble sett (figur 2F).}

blindtarm microbiota korrelerer med kroppsvekt og kroppsfett

Vi neste testet hypotesen om at overflod av spesifikke bakterie artene i muse blindtarm innholdet kan være knyttet til modulering av kroppsvekt og kroppsfett. På den ene siden, C
. coccoides plakater (r = 0,433, p = 0,044) og C
. leptum plakater (r = 0,488, p = 0,021), begge tilhører den firmicutes 'gruppe, viste positive korrelasjoner med kroppsvekt. Bacteroides /Prevotella
viste også en positiv korrelasjon (r = 0,581, p = 0,006) med kroppsvekt. På den andre siden ble kroppsfett negativt korrelert med Bifidobacterium
spp. (R = -.547, p = 0,008). Korrelasjonsmatrisen er presentert i tabell 3.

Diskusjoner

Denne studien gir bevis for at CLA tilskudd under en HF diett har en merkbar effekt på bestemte områder av mage-tarmkanalen hos mus, ved å øke mage protein uttrykk og ved å fremme en prebiotisk effekt på tarmfloraen. Tatt i betraktning at mage-tarmkanalen integrerer samspillet mellom mat, bakterieflora og metabolske effekter på verten, kan disse resultatene være relevant for utviklingen av vekten forvaltningsstrategier, siden CLA er forbindelser som brukes for reduksjon av fettmasse hos mennesker [10-13] .

Gut hormoner skilles ut i magen som svar til matinntak og spiller en nøkkelrolle i signalematinntaket til hjernen [41]. Leptin og ghrelin utgjør to av de mest studerte proteiner som er involvert i energimetabolisme, idet begge er utskilt i relevant mengde av mageslimhinnen [42-47]. I samsvar med leptin mRNA-nivåer, ble høyere gastrisk proteininnhold også observert, noe som er i overensstemmelse med den økte plasma leptin som beskrives i disse dyrene [35]. Det har tidligere vært beskrevet at høy-fett mating stimulerer mave leptin signalveien [44], en effekt som ikke kan motvirkes ved CLA, og vil bidra til delvis forklare hvorfor ingen forskjeller ble sett av matinntaket i denne eksperimentelle oppstilling [35 ]. På den annen side, er ghrelin-genet en gut orexigenic hormon som hovedsakelig reguleres ved å mate [48], og selv om mRNA-ekspresjon økes med CLA, protein ghrelin nivåer ble ikke endret. Avvik observert mellom mRNA-ekspresjon og proteinnivåer ville være knyttet til tilstedeværelsen av døgnvariasjoner rytmer er beskrevet for både ghrelin og leptin i det gastriske miljø som gir mulighet for en bedre metabolsk kontroll [49]. I tillegg til disse hoved mage proteiner, analyserte vi ghrelin o-acyltransferase ( Mboat4)
, resistin og GPR39
, samt glukagon, somatostatin og deres reseptorer, proteiner som også er involvert i energibalanse og har blitt beskrevet i den gastriske slimhinne [50-56], selv om deres potensial i vekt ikke har blitt grundig undersøkt. I denne sammenheng Mboat4
var av spesiell interesse fordi det er enzymet som er ansvarlig for acylering av ghrelin [56] og aktiveres av lipider som virker som acylerings- substrater [57]. Interessant, alle av proteinene analysert viste økt ekspresjon med CLA-tilskudd, noe som tyder på at CLA-isomerer er spesielt avføles av genene som koder for mage-proteiner som reagerer på matvare signaler.

I tillegg til de ovennevnte effekter, CLA fremmet endringer i gut microbiota av nedre del av mage-tarmkanalen. I de senere årene har det blitt foreslått at overvektige stater er det en økt forholdet mellom firmicutes til bacteroidetes samt tap av bakteriell mangfold [26-28] Selv i dag mer fokus blir satt på bakteriearter for verts metabolisme karakterisering som ny data dukke (omtalt i en fersk gjennomgang [58]). Verken CLA-tilskudd eller HF diett alene var forbundet med endringer blant bakteriearter i firmicutes 'phylum. Men HF fôring senket Bifidobacterium
spp., I samsvar med tidligere dyrestudier [59-62], en reduksjon som ikke ble motvirket av CLA. Vurderer tilskudd var ikke i stand til å re-etablere normal kroppsvekt [35], en positiv sammenheng med kroppsvekt ble funnet for både C
. coccoides Hotell og C
. leptum
, etter avtale med potensielle negative rolle disse bakteriearter på fedme [33, 63, 64], samt en negativ korrelasjon med Bifidobacterium
spp., En forening som har også tidligere blitt funnet i både dyremodeller og humane studier [60-63].

i motsetning indusert CLA en prebiotisk effekt i supplert dyr. Bacteroides /Prevotella
er en bakteriearter er kjent for å bruke kosttilskudd polysakkarider i en prebiotisk måte [65]. En bemerkelsesverdig økning ble funnet etter CLA tilskudd som tyder på at CLA var i stand til å gi en prebiotisk effekt. Dette støttes av en meget høy induksjon av A
. muciniphila
vekst av CLA. Tilstedeværelsen av denne mucin-nedbrytende bakteriearter, som ligger i det slimlaget, er forbundet til en sunn slimhinnen og er generelt redusert hos overvektige tilstander [66-68]. Everard et al. [69] har nylig vist at oligofruktose gjenoppretting A
. muciniphila
innhold hos overvektige dyr, og dette er forbundet med en forbedring av deres metabolske profilen. Derfor er økt i blindtarmen innhold på A
. muciniphila
finnes under CLA tilskudd tyder på at denne forbindelsen ble utøve en prebiotisk virkning på denne bakteriearter også. Så vidt vi vet, er dette den første bevis på en CLA-prebiotisk effekt favoriserer den spesifikke veksten av potensielt gunstige bakteriearter i tarmen. Men denne økningen i både Bacteroides /Prevotella Hotell og A
. muciniphila
var ikke nok til å tillate en full gjenoppretting siden disse dyrene forbli overvektige [35]. Vi kan ikke utelukke at en høyere CLA dose og /eller lengre behandling, som er vanligvis forbundet med en slankere fenotype [70], ville føre til en enda større økning i A
. muciniphila
innhold og har mer signifikante effekter på metabolske parametre. Dette ville passe med den nedre induksjon av A
. muciniphila
funnet i denne studien sammenlignet med andre [69, 71].

Totalt våre data viser at mage-tarmkanalen er et første området for handling av de bioaktive isomerer av CLA, stand å modulere mage responser samt bakterieflora-host metabolisme. Vi kan ikke utelukke muligheten samspillet mellom mage miljø og bakterievekst forbundet til mat signaler som følger CLA inntak. Men CLA indusert ekspresjon av gener som koder for mage proteiner knyttet til regulering av energibalanse og utøvde en prebiotisk effekt på utvalgte bakteriearter. Vekst av potensielt gunstige bakteriearter, spesielt bacteroidetes /Prevotella Hotell og A
. muciniphila
, tyder CLA ensidige prebiotisk effekt, noe som kan bidra til en sunnere metabolsk profil. Videre og grundige undersøkelser av hvordan spesifikke diettbehandlinger påvirke spesifikke fysiologiske komponenter, for eksempel mage-tarmkanalen, vil bidra til å belyse deres innvirkning på spesifikke forhold som fedme, og utvikle effektive kroppsvekt forvaltningsstrategier.

Hjelpemiddel Informasjon
S1 Table. Detaljert sammensetningen av dietter
Sammensetning av normal og høy fett dietter brukes gjennom hele forsøket
Doi:.. 10.1371 /journal.pone.0125091.s001 plakater (DOCX)

Takk

Vi takker Sarah Laraichi (Laboratory of kalorimetri og materialer, fakultet for biovitenskap, Abdelmalek Essaâdi University, 93030 Tétouan, Marokko) for hennes hjelp med dyret omsorg og prøvetaking under sitt opphold i vårt laboratorium.

• PLoS ONE: The Influence of Langvarig acetylsalicylsyre Tilskudd-Induced gastritt på neurochemistry av det sympatiske nerveceller Leverer Prepyloric Region av svinekjøtt magen
• PLoS ONE: Heading mot riktig retning-løsningspakke for endoskopisk submucosal Tunneling Reseksjon i Stomach