PLOS ONE: La quitinasa niveles de mRNA por PCR cuantitativa utilizando el ADN Individual Estándar: Ácido mamíferos quitinasa es una transcripción mayor en el estómago de ratón

Extracto

Las quitinasas hidrolizar el β-1-4 glicosídicos de la quitina, un componente estructural principal de hongos, crustáceos e insectos. Aunque los mamíferos no producen quitina o su sintasa, expresan dos quitinasas activas, chitotriosidasa (Chit1) y quitinasa ácida de mamíferos (AMCase). Estos quitinasas de mamíferos han atraído considerable atención debido a su aumento de la expresión en los individuos con un número de condiciones patológicas, incluyendo la enfermedad de Gaucher, enfermedad de Alzheimer y el asma. Sin embargo, queda por determinar la contribución de estas enzimas a la fisiopatología de estas enfermedades. La cuantificación de los niveles de ARNm y Chit1 AMCase y la comparación de los niveles con los niveles de referencia genes conocidos pueden generar información útil y relevante biomédico. En el principio, hemos establecido un sistema de PCR cuantitativa en tiempo real que utiliza el ADN estándar producido por ligación de los fragmentos de ADNc de los genes diana. Este sistema nos permitió cuantificar y comparar los niveles de expresión de las quitinasas y los genes de referencia en la misma escala. Se encontró que la AMCase ARNm se sintetiza a niveles extraordinariamente altos en el estómago del ratón. El nivel de este mRNA en el estómago de ratón era de 7 a 10 veces mayor que los niveles de los genes de limpieza y fue comparable a la que el nivel del ARNm para pepsinógeno C (progastricsin), un componente principal de la mucosa gástrica. Por lo tanto, AMCase ARNm es una transcripción importante en el estómago del ratón, lo que sugiere que las funciones AMCase como una enzima digestiva que descompone la quitina polimérica y como parte de la defensa del huésped contra los patógenos que contienen quitina en los contenidos gástricos. Nuestra metodología es aplicable a la cuantificación de los ARNm de múltiples genes a través de múltiples muestras utilizando la misma escala

Visto:. Ohno, M Tsuda K, M Sakaguchi, Sugahara Y, Oyama F (2012) quitinasa niveles de mRNA por Cuantitativa PCR utilizando el ADN individual Estándar: Ácido mamíferos quitinasa es una transcripción mayor en el estómago de ratón. PLoS One 7 (11): e50381. doi: 10.1371 /journal.pone.0050381

Editor: Dominik Hartl, Universidad de Tübingen, Alemania

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