Antioxidant og gastriske cytobeskyttende prostaglandiner egenskaber Cassia sieberiana
rødder bark ekstrakt som en mavesårshæmmende agent
Abstrakt
Baggrund
Cassia sieberiana
er en savanne træ med en bred fytoterapeutiske anvendelse, herunder brug af sine rødder i forvaltningen af forskellige mave lidelser, herunder mavesår, mavesmerter og fordøjelsesbesvær. Formålet med undersøgelsen er at vurdere antioxidant, gastrisk cytobeskyttende prostaglandiner, sekretorisk phospholipase
2, sieberiana fytokemiske og akut toksicitet egenskaber Cassia
rødder bark ekstrakt i et forsøg på at retfærdiggøre sine fytoterapeutiske applikationer i mavesår.
Metoder
Antioxidant og radikaler aktiviteter rødder bark ekstrakt af Cassia sieberiana
blev analyseret. Serum sekretorisk phospholipase 2 (SPLA 2) koncentration og aktivitet og dannelsen af maveslimhinden prostaglandiner E 2 (PGE 2), og I 2 (BGB 2) Der blev også vurderet. Sammenligninger mellem midler blev udført under anvendelse af variansanalyse (ANOVA) efterfulgt af Students Standard Newman-Keuls post hoc
analyse for at bestemme statistisk signifikans. P < 0,05 blev anset for signifikant.
Resultater
Ekstraktet blev fundet at besidde betydelige jern reducerende antioxidant effekt og kan opfange hydroxylradikaler. Ekstrakten også besidder DPPH fjernelsesaktivitet, kan chelatere ferroion og en dosisafhængig beskyttende virkning mod lipidperoxidation og dannelse af frie radikaler. Prostaglandin undersøgelser viste, at rødderne bark ekstrakt dosisafhængig øget gastrisk slimhinde PGE 2 og BGB 2 niveauer og også faldt serum SPLA 2 aktivitet. Phytochemical analyser tyder på, at rødderne ekstrakt indeholder polyhydroxyl /phenoliske stoffer. Akut toksicitet viste ingen tegn på toksicitet op til et dosisniveau på 2000 mg /kg legemsvægt po
Konklusioner
C. sieberiana
rødder ekstrakt besidder betydelig antioxidant og gastriske cytobeskyttende prostaglandin egenskaber samt serum sekretorisk phospholipase A 2-inhiberende aktivitet, der kan skyldes dets indhold af polyhydroxy og /eller phenoliske stoffer. Dette kan begrunde dets anvendelse som et mavesårshæmmende agent i traditionel medicin i Vestafrika.
Baggrund
Cassia sieberiana
er en savanne træ med en bred anvendelse, herunder etnofarmakologiske brug af sine rødder i forvaltningen af forskellige mave lidelser, herunder mavesår, mavesmerter og fordøjelsesbesvær [1]. På Center for Videnskabelig Forskning i Plant Medicine (CSRPM) i Ghana, er en vandig suspension af den pulveriserede rødder bark bruges til at styre abdominal kolik og smerter forbundet med leddene. Tidligere undersøgelser har vi udført indikerede, at den vandige rødder bark ekstrakt af C. sieberiana
besidder anti-ulcerogene egenskaber mod mavesår induceret af forskellige metoder [2].
Blandt de forskellige faktorer er impliceret i patofysiologien af mavesår sygdom de roller, som endogen dannelse af prostaglandiner (PG'er) og frie radikaler spillede [3]. Frie radikaler spiller fundamentale roller i mange fysiologiske reaktioner. På grund af deres høje reaktivitet, har de været impliceret i årsagen til nogle degenerative sygdomme, herunder stress, NSAID og H. pylori
inducerede mavesår [4, 5]. De har vist sig at mediere mikro-kar forstyrrelser, der går forud stress, NSAID eller iskæmisk reperfusion inducerede gastriske mucosale skader og også i pylorus ligation model af mavesår [5, 6]. Desuden undersøgelser har vist, at visse antioxidanter også forhindre mavesår [7-9].
PG'er, en familie af lipidforbindelser afledt fra arachidonsyre pathway medierer en lang række fysiologiske funktioner, herunder modulering af inflammation og gastrointestinal mucosal forsvar . Overfladisk skade på maveslimhinden er kendt for at udløse en akut inflammatorisk respons, kendetegnet ved stigningen i blodgennemstrømningen, samt ved plasma ekssudation og rekruttering til slimhinden af leukocytter [10]. Mens den akutte inflammatoriske respons til formål at reducere slimhinde skade, der er omstændigheder, hvor denne respons kan dysreguleret og kan bidrage til mucosale skade [11]. De store prostaglandiner produceret af menneskelige og gnaver maveslimhinden er PGE 2 og BGB 2, og disse PG accelerere sårheling i både eksperimentelle dyremodeller og i mennesker [12, 13]. Den dobbelte bidrag PS til inflammation og slimhinde forsvar udgør en udfordring for udviklingen af anti-inflammatoriske lægemidler.
Fosfolipider også spille en vigtig rolle i bevarelsen af gastrointestinal homeostase [14]. Phospholipase A 2 (PLA 2), et enzym er i stand til at hydrolysere membranphospholipider, hvilket i nærvær af høj gastrisk surhedsgrad fører til mucosale skader. PLA 2 medieret hydrolyse af membranlipider resulterer i membranen forstyrrelse, celle degranulering og afisolering af celleoverfladereceptorer fører til mavesår. Høje koncentrationer af PLA 2 er rapporteret i gastrisk mucosa [15] og PLA 2-inhibitorer er kendt for at modulere proton konduktans over cellemembraner [16] og dermed kan tilbyde gastrisk slim beskyttelse mod enzymatisk nedbrydning. Som et resultat af vores tidligere undersøgelse af phytoterapeutiske evne rødder bark af C. sieberiana
som et anti-ulcerogene middel, blev denne undersøgelse udført for at vurdere anti-oxidative (in vitro
) og gastrisk mucosal prostaglandin egenskaber af rødder bark ekstrakt af planten.
Metoder
Udarbejdelse af rødder bark ekstrakt
Friske rødder C. sieberiana
(Cassia kotschyana Oliv
.) blev opnået fra hensynet til University of Ghana. Anlægget blev identificeret og autentificeret på Ghana Herbarium, University of Ghana, Ghana. Det hakkede friske rødder bark (750 g) blev jordforbundet og blandet med 1 I vand og henstod natten over. Den resulterende sammenkogt blev inddampet under reduceret tryk ved 30 ° C, og koncentratet frysetørres til opnåelse fast materiale. Den frysetørrede rødder bark ekstrakt blev opbevaret ved 4 ° C og anvendt inden for 4 uger produktion.
Dyr Salg hanmarsvin, der vejer 318 ± 30,3 g (gennemsnit ± standardafvigelse) blev anvendt for prostaglandin-studier. De blev foder primært på bladene af Panicum maksimum
(Elephant græs) suppleret med standard laboratorie kost (GAFCO, Tema, Ghana). Fisher 344 (F 344) rotter med en vægt 230,3 ± 14,5 g (gennemsnit ± standardafvigelse) af begge køn blev anvendt til de akutte undersøgelser oral toksicitet. De blev også rejst på standard laboratorie kost (GAFCO, Tema, Ghana). Den dyreforsøg er beskrevet i denne undersøgelse blev godkendt af Etisk og protokol Review Committee of Noguchi Memorial Institute for Medical Research ved University of Ghana og blev gennemført i overensstemmelse med internationalt anerkendte principper for forsøgsdyr brug og pleje.
Kemikalier og reagenser
L-ascorbinsyre (LAA) blev opnået fra Sigma Chemical Company, St. Loius, USA Alle reagenserne til de antioxiderende studier blev opnået fra Fluka Chemie, Schweiz. De enzymimmunoassay kits til prostaglandin E 2 (CatȂ.010) og prostaglandin I 2 (analyseret som 6-keto PGF 1α, Catȃ.211) samt sekretorisk phospholipase 2 ( human type IIa, Catɉ000) og sekretorisk phospholipase 2-aktivitet (type IIa, Cat˽.001) blev opnået fra Cayman Chemical Company (Am Arbor, USA). Arachidonsyre, reduceret glutathion (GSH) og bovint serumalbumin (BSA) blev opnået fra Sigma Chemical Company (St. Louis, MO, USA). Salg In vitro
antioxidant undersøgelser
Alle reagenserne til antioxidant studier blev fremstillet i deioniseret vand for at fjerne forurening af metalioner. Total phenoliske koncentrationer blev bestemt som beskrevet af AOAC [17]. Samlede reducerende evne af planteekstraktet blev bestemt ved metoden ifølge Yildirim et al. [18]. DPPH radikaler aktivitet blev bestemt ved metoden ifølge Zhu et al. [19]. Antioxidant aktivitet i en hæmoglobin-induceret linolsyre system rødder ekstrakten blev bestemt ved en modificeret fotometri fremgangsmåde som beskrevet af Kuo et al. [20]. Hydroxyl fjernelsesaktivitet blev målt ved at undersøge konkurrencen mellem deoxyribose og ekstraktet for hydroxylradikaler dannet fra Fe 3 + /ascorbat /EDTA /H 2O 2-system [21]. Ferroion chelaterende virkning blev bestemt ifølge fremgangsmåden ifølge Dinis et al. [22]. Disse assays blev udført tre gange og L-ascorbinsyre (LAA) blev anvendt som positiv kontrol.
Gastriske prostaglandiner undersøgelser
Administration af planteekstrakt
Forskellige koncentrationer af rødderne udtrække 250 mg /kg, 500 mg /kg og 750 mg /kg legemsvægt, suspenderet i vand (som bærer) i et samlet volumen på 2,0 ml blev administreret oralt til tre grupper af marsvin, der består af 5 dyr per gruppe. Behandlingen blev gentaget hver 24 timer i 28 dage i træk. Kontrolgruppen modtog bæreren i stedet for rødderne ekstrakt.
Blodprøvetagning
En dag efter administration af den sidste dosis af planteekstraktet blev hvert dyr bedøvet ved anvendelse natriumpentobarbiton (60 mg /kg legemsvægt, ip ). En samlet volumen på 5 ml blod blev opnået fra hver anæsteserede dyr ved hjertepunktur og en prøve på 100 pi fortyndes 1 i 9 under anvendelse forkølet 25 mM Tris-HCI. Denne del blev anvendt til bestemmelse af serum sekretorisk phospolipase koncentration A 2 (SPLA 2). En anden portion af den opnåede Blodet fik lov til at størkne, og serummet anvendt til at estimere SPLA 2-aktivitet og proteinindhold. Proteinindholdet i serum blev bestemt ved Folin-Lowry-metoden [23].
Eicosanoid biosyntese og assay
kortvarigt efter euthanizing dyrene, maven blev skyllet i præ-kølet 0,15 M KCI og derefter homogeniseret under anvendelse af 0,25 M sucrose-10 mM Tris-HCI (pH 7,5). Homogenatet blev centrifugeret ved 10.000 g i 20 minutter ved 4 ° C, og supernatanten centrifugeres igen ved 105.000 g i 60 minutter ved 4 ° C. Pelleten blev homogeniseret i 0,1 M K 2PO 4 buffer (pH 7,6). Den eicosanoider prostaglandin E 2 (PGE 2) og prostaglandin I 2 (BGB 2) (analyseret som 6-keto PGF 1α) blev biosyntetiseres hjælp GSH som co-faktor i cyclooxygenase-reaktionen. Reaktioner blev afsluttet efter 5 minutter under anvendelse af 100 pL af 1,0 M citronsyre og analyseret med ELISA-kit fra Cayman Chemical Company (Am Arbor, USA).
Secretorv phospholipase A2 koncentration og aktivitet
Secretorv phospholipase 2-koncentration og sekretorisk phospholipase 2 aktivitet i serum blev analyseret ved hjælp af kits (Catɉ000 og Cat˽.001 henholdsvis) fra Cayman Chemical Company (Am Arbor, USA).
phytochemical analyser
Standard phyto-kemiske tests blev anvendt til påvisning af tanniner, saponiner, flavonoider og anthraquinoner i ekstrakten [24]. Tyndtlagskromatografi blev også udført på planteekstraktet ved hjælp af forskellige systemer mobil fase og silicagel 60F 254 som den stationære fase. Kromatogrammerne udviklet, blev betragtet under dagslys, UV-lys og fordampet iod. De opløste komponenter under UV-lys blev behandlet med 0,1 mM FeCl 3.
Akut toksicitet
Akut oral toksicitet blev udført som pr OECD-423 retningslinjer (akut oral toksicitet-akut giftige klasse metode). SPF F 344 rotter af enten udvalgt ved stikprøver teknik sex blev fastet natten over med vand ad libitum
hvorefter ekstrakterne (opløst i vand) blev indgivet oralt ved gastrisk instillation begyndende fra en dosis på 5 mg /kg legemsvægt. Rotterne blev observeret for død inden for 48 timer efter ekstrakt administration og overlevende dyr observeret i 14 dage for vægtændringer, sløvhed og adfærdsmæssige ændringer. Hvis mortalitet ikke blev observeret, blev proceduren gentaget med højere doser, såsom 50, 300 og 600 op til 2000 mg /kg legemsvægt.
Statistiske analyser
Sammenligninger mellem midler blev udført under anvendelse af variansanalyse (ANOVA) efterfulgt af Studerende Standard Newman-Keuls post hoc
analyse for at bestemme statistisk signifikans. P < 0,05 blev anset for signifikant.
Resultater
Antioxidant undersøgelser
Mængde samlede phenolforbindelser
Analyser af et beløb på 200 ug frysetørret ekstrakt af C. sieberiana
gav 75,32 ± 0,52 af galliske syreækvivalenter af polyphenoler. Derfor samlede phenolforbindelser udgjorde 37,66 ± 0,27% af C. sieberiana
rødder bark ekstrakt.
Reduktion magt
reducerende effekt af rødderne ekstrakt af C. sieberiana
og LAA som reference forbindelsen, er vist i Figur 1. Grafen viser, at den reducerende effekt øges med stigende koncentration af C. sieberiana
eller LAA op til en koncentration på 0,8 mg /ml, hvorefter der ikke var nogen yderligere stigning i reducerende effekt med stigende koncentration af C. sieberiana
ekstrakt eller LAA. Analyse af data viste, at under en koncentration på 0,6 mg /ml for både C. sieberiana
og LAA, var signifikant højere koncentration af C. sieberiana
end LAA kræves for at producere den samme absorbans. Koncentrationerne at nå et absorbans enhed på 700 nm var 0,28 ± 0,03 mg /ml for C. sieberiana
0,26 ± 0,02 mg /ml for LAA. Figur 1 Reduktion magt C. sieberiana rødder bark ekstrakt. L-ascorbinsyre (LAA) blev anvendt som en referenceforbindelse. Resultaterne er middelværdier ± SEM af n = 3.
DPPH radikaler aktivitet
I den aktuelle undersøgelse fjernende aktiviteter af DPPH udøves af C. sieberiana
og LAA viser et lineært respons kurve (Figur 2) og IC 50 estimeret for C. sieberiana
LAA var 0,095 ± 0,006 mg /ml og 0,06 ± 0,004 mg /hhv ml. Dette signifikant forskellige IC 50 værdien af den rå ekstrakt var imidlertid 63,2%, som af LAA. Figur 2 DPPH radikaler aktivitet af C. sieberiana rødder bark ekstrakt. L-ascorbinsyre (LAA) blev anvendt som en referenceforbindelse. Resultaterne er middelværdier ± SEM af n = 3.
scavenging virkning på hydroxylradikal
I denne undersøgelse rødderne ekstrakt var i stand til at opnå en 62% maksimal fjernelsesaktivitet når koncentrationen var over 10 mg /ml (Figur 3 ). Alligevel LAA havde omkring 70% fjernende aktivitet ved lav koncentration på 0,02 mg /ml. IC 50 estimeret for C. sieberiana
var 0,04 ± 0,006 mg /ml, mens der for LAA var 0,01 ± 0,002 mg /ml. Figur 3 hydroxylradikal fjernelsesaktivitet af C. sieberiana rødder bark ekstrakt. L-ascorbinsyre (LAA) blev anvendt som en referenceforbindelse. Resultaterne er middelværdier ± SEM af n = 3.
Antioxidant aktivitet i en hæmoglobin-induceret linolsyre systemet
Som vist i Figure4 antioxidantaktiviteten var dosisafhængig og nåede et plateau (ca. 77-87% inhibering), når koncentration af C. sieberiana
oversteg 0,06 mg /ml. Dette resultat indikerer, at antioxidant aktivitet af C sieberiana
er kun omkring 17%, som af LAA som vist ved peroxidation i nærvær af 1 mM linolsyre. IC 50 estimeret for C. sieberiana
var 0,012 ± 0,004 mg /ml, og at for LAA var 0,006 ± 0,002 mg /ml. Figur 4 Antioxidant aktivitet af C. sieberiana rødder bark ekstrakt mod linolsyre peroxidation induceret af hæmoglobin. L-ascorbinsyre (LAA) blev anvendt som en referenceforbindelse. Resultaterne er middel ± SEM af n = 3.
Jern ion chelerende effekt
ferroion chelaterende aktivitet af C. sieberiana
rødder ekstrakt viser en lineær respons kurve og graf analyse viser IC 50 estimering var 3,20 ± 0,24 mg /ml for C. sieberiana
0,28 ± 0,024 mg /ml for LAA (Figure5). Figur 5 ferroion chelaterende virkning af C. sieberiana rødder bark ekstrakt. L-ascorbinsyre (LAA) blev anvendt som en referenceforbindelse. Resultaterne er gennemsnit ± SEM af n = 3.
PGE2, PGI2 og sPLA2 undersøgelser
Daglig administration af rødderne ekstrakt i 28 dage producerede en dosisafhængig stigning i mængderne af maveslimhinden PGE 2 og 6- keto PGF 1α syntetiseret (tabel 1). Sammenlignet med kontrollen, PGE 2 steg med 37,7% i ekstrakten lav dosis (250 mg /kg legemsvægt), 64,7% i ekstraktet medium dosis (500 mg /kg legemsvægt) og 82,4% i ekstrakten høj dosis (750 mg /kg legemsvægt). Alle doser af rødderne ekstrakt fremstillet betydelige stigninger i 6-keto PGF 1α med 28,3% i den lave dosis, 61,7% på mellemlang dosis og 88,6% i den høje dose.Table en Virkning af rødder bark ekstrakt af C . sieberiana på slimhinder PGE 2 og 6-keto PGF 1 a niveauer og serum sPLA2 aktivitet i marsvin
Behandling
Dosis (mg /kg)
PGE2 (pg /mL) ( Middelværdi ± SEM)
6-keto PGF1α (pg /ml) (Middelværdi ± SEM)
sPLA2activity (nmol /min /ml) (Middelværdi ± SEM)
Kontrol
køretøj
0,17 ± 0,02
2.10 ± 0,19
26,44 ± 0,69
Uddrag
250
0,23 ± 0,01 *
2,69 ± 0,08 *
20,84 ± 0,65 ‡
"
500
0,28 ± 0,02 †
3,39 ± 0,34 *
18,16 ± 0,68 ‡
"
750
0,31 ± 0,02 ‡
3,95 ± 0,19 ‡
10.52 ± 0,52 ‡
* p < 0,05, til statistisk signifikant i forhold styre
† p <.; 0,01, statistisk signifikant i forhold til kontrol
‡ p <.; 0,001, statistisk signifikant i forhold til kontrol.
Oral administration af rødderne ekstrakt også produceret en signifikant hæmning af serum SPLA 2 aktivitet, men ingen signifikant ændring i mængden af serum SPLA 2 protein. Sammenlignet med kontrollen, den lave dosis producerede 21,2% nedgang, mens mediet dosis og den høje dosis producerede 31,3% og 60,2% fald i serum SPLA 2-aktivitet henholdsvis.
Phytochemical screening
phytochemical screening afslørede tilstedeværelse af saponiner, flavonoider, anthraquinoner og garvesyre i rødderne ekstrakt. Tyndtlagschromatografi afsløret af deres reaktion med FeCl 3 og deres fluorescens i UV-lys indikerede, at rødderne ekstrakt indeholder flavonol /flavonoid /flavon eller beslægtede forbindelser med polyhydroxy og /eller phenolgrupper.
Akut toksicitet
I F 344 rotter af begge køn, har ekstrakterne (5-2000 mg /kg, po) givet som en enkelt dosis ikke producerer nogen tegn på akut toksicitet. Ingen dødelighed blev observeret i løbet af undersøgelsen periode på 14 dage og ved obduktion, blev der ikke observeret grove ændringer i indvoldene i de behandlede grupper.
Diskussion
Den foreliggende undersøgelse blev foretaget for at undersøge antioxidant og gastriske cytobeskyttende prostaglandin egenskaber af vandige rødder ekstrakt af C. sieberiana
, som vi tidligere havde demonstreret at have anti-ulcerogene egenskaber. Mavesår er en multifaktoriel sygdom og blandt de forskellige egenskaber impliceret i patofysiologien er den rolle af frie radikaler spiller. Dermed antioxidanter, som kan bekæmpe frie radikaler forventes at helbrede eller forebygge gastriske ulcera. Adskillige fremgangsmåder er udviklet til at måle effektiviteten af antioxidanter fokuserer på forskellige mekanismer oxidanten forsvarssystem. I de fleste af systemerne, uanset den faktisk i den oxidative kæde, hvor antioxidantvirkning måles, er de fleste ikke-enzymatisk anti-oxidativ aktivitet medieret af redoxreaktioner. De redoxpotentialer af forbindelser er relateret til deres antioxidantaktivitet mod frie radikaler, såsom peroxyl eller hydroxylradikaler, som har flere positive redoxpotentialer [25]. Som vist i Figur 1 den reducerende effekt forøges som ekstraktet koncentrationen steg angiver nogle forbindelser i rødderne ekstrakten var begge elektrondonorer og kunne reagere med frie radikaler for at omdanner dem til mere stabile produkter at afslutte radikale kædereaktioner. Dette resultat viser, at selv om den reducerende evne af LAA var lidt højere det ikke var signifikant forskellig fra den af C. sieberiana
(p 0,05). De signifikante reduktion beføjelser recoded derfor foreslået, at rødderne ekstrakt af C. sieberiana
ville have betydelig antioxidant handling, som senere blev bekræftet af sin latrintømning virkning af frie radikaler genereret af DPPH.
I løsning, DPPH genererer frie radikaler, hvis ulige elektroner bliver parret ud i nærvær af en hydrogendonor. Den DPPH radikale har været meget anvendt til at teste de frie radikaler opfangningsevne af forskellige naturlige produkter og er blevet accepteret som en model forbindelse til frie radikaler oprindelse i lipider [26]. I DPPH assay jo lavere IC 50, jo bedre er det i stand til at fjerne de radikale, især peroxyradikaler som er formeringsvirksomhederne af auto-oxidation af lipidmolekyler og derved bryde den fri radikal kædereaktion. Ligesom den reducerende evne, på IC 50 af 0,075 ± 0,006 mg /ml, den DPPH fjernelsesaktivitet af den rå ekstrakt var 63,2%, som af LAA hvilket indikerer, at rødderne ekstraktet indeholder forbindelser, som har stærke antioxidant egenskaber. Hydroxylgruppe er den vigtigste bidragyder til vævsbeskadigelse. Deoxyribose metode anvendes til bestemmelse af hastighedskonstanterne for reaktioner, der involverer hydroxylradikaler. Reaktionen involverer inkubation af en blanding af FeCl 3-EDTA, H 2O 2 og ascorbat med deoxyribose i phosphatpuffer (pH 7,4). Hydroxylradikalerne genereret fra blandingen angreb deoxyribose og resultere i en række reaktioner, der forårsager dannelsen af MDA. En hydroxyl radikal scavenger tilsættes til reaktionsblandingen vil derfor konkurrere med deoxyribose for tilgængeligheden af hydroxylradikaler, hvorved mængden af MDA dannet. I denne undersøgelse rødderne ekstrakt af C. sieberiana
var i stand til at opnå en 62% maksimal fjernelsesaktivitet indikerer, at den indeholder stoffer, som hæmmer hydroxyl fjernelsesaktivitet.
Lipidperoxidation er blevet impliceret i patogenesen af forskellige sygdomme, herunder mavesår sygdom i både mennesker [27] og forsøgsdyr [28]. Det er velkendt, at bio-enzymer er meget modtagelige for lipidperoxider, hvilket anses for at være udgangspunktet for mange degenerative processer. Dette resultat indikerer, at antioxidant aktivitet af C sieberiana
er kun omkring 17%, som af LAA som vist ved peroxidation i nærvær af 1 mM linolsyre som signifikant lavere sammenlignet med LAA. Det chelaterende evne ekstrakt måler, hvor effektivt de forbindelser i den kan konkurrere med FerroZine for Fe 2+. Den Fe 2 + -ferrozine kompleks har maksimal absorbans ved 562 nm og et stort fald i absorbans indikerer stærk chelaterende magt. Ved at danne en stabil Fe 2+ chelat, en ekstrakt med høj chelaterende effekt reducerer den frie Fe 2+ koncentration således formindsker omfanget af Fenton reaktion, som er impliceret i mange sygdomme. Resultaterne indikerer, at det rå rødder ekstrakt kan chelatere fri Fe 2+.
Observerede antioxiderende aktivitet er vigtigt, fordi frie radikaler har været impliceret at mediere i stress, NSAID og H. Pylori
inducerede mavesår [ ,,,0],5, 29]. Neutrofil tilslutning til endotelet i gastrisk mikrocirkulationen har også vist sig at være kritisk i mucosal skade i dyr og sådan adhærens menes at befri oxygenradikaler, hvilket resulterer i frigivelse af proteaser og blokerer kapillar blodstrøm eller forårsager lipidperoxidation og skadelige cellemembraner [ ,,,0],30]. Derfor rapporterede antiulcervirkning af rødder ekstrakt af C. sieberiana
kunne skyldes til dels, at den stærke reduktion og antioxidant egenskaber.
Fytokemiske analyse opdaget alkaloider, saponiner, anthraquinoner, tanniner og flavonoider i C. sieberiana
rødder ekstrakt. TLC pletter afsløret af deres omsætning med ferrichlorid og deres fluorescens under UV-lys viste, at flavonol /flavonoid /flavon eller beslægtede forbindelser med polyhydroxy og /eller phenolgrupper udgjorde større kemiske stoffer i rødderne ekstrakt. Beviser for forekomsten af flavonol /flavonoid /flavon eller en beslægtet forbindelse med polyhydroxy og /eller phenolgrupper er i overensstemmelse med den betydelige antioxidant virkning af rødderne ekstrakt. Flavonoider eller polyphenolforbindelser udøver antioxidant aktioner ved scavenging frie radikaler, chelaterende metalioner eller inhibering enzymsystemer, der genererer frie radikaler. Adskillige undersøgelser viste, at flavonoider fra forskellige planter er angiveligt i stand til at forhindre forekomsten af mavesår. Dette kan ske gennem en stigning i mængderne af neutrale glycoproteiner og i prostaglandin koncentrationer, og hæmning af histamin sekretion fra mastceller ved hæmning af histidin decarboxylase, og dermed reducere stimulation af H 2-receptorer, eller ved udskillelse af prostaglandin-lignende forbindelser [31]. En anden mulig virkningsmekanisme for at hæmme ulcus forekomster er ved at sænke pepsin sekretion og aktivitet. Desuden har flere undersøgelser citeret af Middleton og Kandaswami [32], viser, at visse flavonoider har anti-ulcus aktivitet med nogle har direkte beskyttelse mucosal aktivitet svarende til den for prostaglandiner. Dette antyder, at flavonoider og /eller polyphenoler kan være ansvarlige for de rapporterede gastrisk slim beskyttelse og anti-ulcus-egenskaber af rødder bark ekstrakt af C. sieberiana
.
Den store prostaglandiner produceret af human og gnaver maveslimhinden er PGE 2 og BGB 2 som er vasodilatorer i den gastrointestinale slimhinde [11]. De vasodilatoriske egenskaber af disse to molekyler kan øge slim produktion og reducere syre og pepsin niveauer i maven og derved yde et vigtigt bidrag til maveslimhinden forsvar og lette reparation af allerede eksisterende sår i den gastrointestinale slimhinde [33, 34]. De foreliggende resultater viser, at signifikant dosis-afhængig stigning i maveslimhinden PGE 2 og BGB 2 (82,4% og 88,6% i den høje dosis) i fravær af inducerede mavesår er en indikator for anti- ulcerogene aktivitet af rødder bark ekstrakt. Disse resultater bekræfter en tidligere undersøgelse [2] om de anti-ulcerogene egenskaber af rødder barkekstrakt som viste, at dets gastrisk cytobeskyttende virkning i rotter signifikant reduceret med forbehandling med indomethacin, et NSAID prostaglandin-inhibitor.
Inflammatoriske proces der opstår under mavesår er også kendt for at være et centralt element i slimhinde forsvar mod eksogene og endogene faktorer. Men mens den akutte inflammatoriske respons til formål at reducere mucosal skade, nogle af de inflammatoriske mediatorer frigivet øge tilbøjeligheden af maven skader induceret af NSAID eller andre topiske irriterende stoffer, og bidrager derved til dannelsen af mucosal skade under visse omstændigheder [11 ]. Flere af disse inflammatoriske mediatorer, herunder histamin, tumornekrosefaktor-α, blodplade-aktiverende faktor, interleukin-1, interleukin-8 og leukotrien B 4 har vist sig at være nedreguleret ved endogen dannelsen af prostaglandiner [11]. Desuden prostaglandiner er også kraftige inhibitorer af leukocyt vedhæftning til det vaskulære endotel, som er kendetegnende for inflammation, at leukocyt vedhæftning, der forekommer i mave mikrocirkulationen efter administration af et NSAID kan forhindres ved prostaglandin administration [35, 36]. Det er bydende nødvendigt at bemærke, at aktiverede inflammatoriske celler kan også være potentielle kilder til frie radikaler [37], som forværre den beskadigede maveslimhinden. Dette kan være en potentiel virkningsmekanisme for anti-oxidanter som anti-ulcerogene agenter
rødder ekstrakt viste ikke nedgang i SPLA 2-protein.; dog enzymatisk aktivitet af SPLA 2 i serum blev bestemt inhiberet. Således kan virkningen være på enzym-substrat niveau muligvis ved afstumpning SPLA 2 interaktion med sine substrater end på syntesen af SPLA 2. Det var forventet, at stimuleringen af endogene generation af maveslimhinden PGE 2 og BGB 2 vil blive kombineret med en stigning af arachidonsyre signalering som følge af stimuleret SPLA 2. Stimulering af endogen generation af maveslimhinden PGE 2 og BGB 2 trods hæmning af serum SPLA 2 er interessant. Et vigtigt spor kan ligge i det faktum, at undersøgelsen målte SPLA 2 i serummet og ikke i maven homogenatet dermed er det muligt ekstrakten udøver sin virkning selektivt ved de to forskellige steder på grund af de forskellige isoformer af SPLA <