PLoS ONE: Insektsätande fladdermöss Digest Chitin i magen användning av sura Däggdjur Kitinas

Abstrakt

mag-tarmkanalen av djur är anpassat till deras främsta källan till mat för att optimera resursanvändningen och energiintag. Tempererade fladdermusarter i huvudsak livnär sig på leddjur. Dessa innehåller den energirika kolhydrater kitin, som är svårsmälta för de endogena enzymerna i en typisk däggdjurs mag-tarmkanalen. Dock bör mag-tarmkanalen av fladdermusarter anpassas till deras diet och kunna smälta kitin. Vi antar att (i) Europeiska vespertilionid fladdermusarter har mag enzymet kitinas och att (ii) kitinolytiska aktiviteten ligger i tarmen, som har visat sig för nordamerikanska fladdermusarter. De magtarmkanalen sju fladdermusarter ( Pipistrellus Pipistrellus
, Plecotus auritus
, Myotis bechsteinii
, Myotis nattereri
, Myotis daubentonii
, myotis myotis,
och Nyctalus leisleri
) testades med avseende på kitinolytisk aktivitet genom diffusion assay. Magtarmkanalen av P. Pipistrellus
, P. auritus
, M. nattereri
, M. Myotis, Mössor och N. undersöktes leisleri
var för sura däggdjurs kitinas genom Western blot-analys. Vävnadssektioner av mag-tarmkanalen av P. Pipistrellus
var immunohistokemiskt analyseras för att lokalisera den sura däggdjurs kitinas. Kitinolytisk aktivitet detekterades i magen på alla fladdermusarter. Western blot-analys bekräftade den sura däggdjurs kitinas i magen prover. Immunohistokemi av P. Pipistrellus
magtarmkanalen indikerade att sura däggdjurs kitinas ligger i magen främsta celler vid basen av mag körtlar. Sammanfattningsvis europeiska vespertilionid fladdermusarter har sura däggdjurs kitinas som produceras i de gastriska körtlar i magen. Därför magtarmkanalen av insektsätande fladdermusarter utvecklats en enzymatisk anpassning till deras diet

Citation. Strobel S, Roswag A, Becker NI, Trenczek TE, Encarnação JA (2013) Insektsätande fladdermöss Digest Chitin i magen Använda sura Mammalian Kitinas. PLoS ONE 8 (9): e72770. doi: 10.1371 /journal.pone.0072770

Redaktör: François Blachier, National Institute of jordbruksforskning, Frankrike

emottagen: 26 mars 2013; Accepteras: 12 juli 2013. Publicerad: 3 september 2013

Copyright: © 2013 Strobel et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit

Finansiering:. Författarna har inget stöd eller finansiering för att rapportera

konkurrerande intressen:.. författarna har deklarerat att inga konkurrerande intressen finns

Introduktion

Djur måste svälja och smälta maten för att säkerställa kontinuerlig drift av sin interna metabolism genom att täcka, till exempel, sin energi, protein och krav vitamin [1]. Den flerstegsprocess för matsmältning omfattar mekaniska, kemiska och enzymatiska steg för att omvandla näringsämnen [2]. Fladdermusarter har en hög mass specifik efterfrågan på energi på grund av sin ringa storlek och förmågan att flyga aktivt [3], [4]. I flygande djur, behöver mat som skall behandlas snabbt för att minska efterfrågan på energi som orsakas av ökad flyg massa [2]. Europeiska fladdermusarter har en diet som huvudsakligen består av artropoder [5]. De har korta retentionstider [6], men en högeffektiv matsmältnings [7]. Detta tyder på att deras gastrointestinal (GI) tarmkanalen är mycket anpassade till deras diet eftersom det smälter leddjur snabbt och grundligt. Därför kan man hävda att de europeiska fladdermusarter är beroende av leddjur specifika matsmältningsenzymer. Eftersom leddjur består av upp till 75% kitin (energiinnehåll 21,2 kJ /g, [8]), är det mycket troligt att fladdermusarter kan smälta chitinous material, som har visats i andra ryggradsdjur såsom Europeiska grön ödla ( Lacerta viridis
), den gemensamma koltrast ( Turdus merula
) och den röda räven ( Vulpesvulpes
) [9], [10].

Kitin kan brytas ned av kitinaser (EG 3.2.1.14) och vissa lysozymer (EC 3.2.1.17) [11], [12]. Hos däggdjur har bara två kitinaser identifierats: chitotriosidasaktivitet och sura däggdjurs kitinas (AMCase) [13], som båda klassificeras som endochitinases [14]. Chitotriosidasaktivitet huvudsakligen utsöndras av fagocyter och agerar mot kitin-innehållande patogener [15]. AMCase har hittills endast identifierats hos möss (Mus musculus), makaker (Macaca fascicularis) och människor [16], [17]. Det är mycket uttrycks i magen och lungorna, vilket tyder på en dubbel mag och immunologisk funktion [16], [17]. Kitinolytisk aktivitet kan även härröra från endogena enzymer, intagen föda som föreligger i mag-tarmkanalen, eller enzymer producerade av mikroorganismer [18], [19].

kitinolytisk aktivitet i mag-tarmkanalen har visat sig i flera insektsätande fladdermusarter [8], [9]. Det finns emellertid ingen kunskap om det motsvarande enzymet. Jeuniaux [9] verifierade kitinolytisk aktivitet i mag-tarmkanalen av Rhinolophus ferrumequinum
, ett europeiskt fladdermusarter i familjen Rhinolophidae. Whitaker et al. [8] visade kitinolytisk aktivitet i mag-tarmkanalen hos nordamerikanska vespertilionid fladdermusarter av släktena Myotis
, Eptesicus
, nycticeius
, Lasiurus
, Pipistrellus Köpa och Lasionycteris
. De isolerade kitinas-producerande bakteriestammar från tarmen som en källa för kitinolytisk aktivitet. I motsats härtill Jeuniaux [9] fann bevis för kitinolytisk aktivitet i magslemhinnan av magsäcken hos Rhinolophus ferrumequinum
medan tarmen uppvisade ingen kitinolytiska aktiviteten. Men Buchholz, Wells & Conaway [20] inte kunde upptäcka någon kitinas i insektsfladdermusarter Pipistrellus subflavus Köpa och Myotis grisescens
. Förutom kitinaser, vissa lysozymer kan lösa kitin [11], [12]. Till exempel, Phillips, Weiss & Tandler [21] detekterade lysozym i spottkörtlar hos insektsätande fladdermusarter och spekulerade att det skulle kunna fungera som en kitinolytisk enzym i saliven. Emellertid lysozymer är huvudsakligen anti-bakteriell och är en viktig del av immunsystemet [22] eller för rötning av bakterier i idisslare [12].

Vår hypotes är att (i) Europeiska insektsätande fladdermöss arter av familjen Vespertilionidae har kitinolytisk aktivitet i mag-tarmkanalen, som har visats för nordamerikanska insektsfladdermusarter [8] och ett europeiskt fladdermusarter av familjen Rhinolophidae [9] och (ii) kitinolytiska aktiviteten ligger i tarmen, vilket har varit visas i nordamerikanska arter [8]. I denna studie, vi ligger kitinolytisk aktivitet och identifierade motsvarande enzym som AMCase med hjälp av en enzymanalys, immunoblotting och immunohistokemi.

Material och metoder

Etik uttalande

Alla personer som används i denna studie dog vid frivilliga rehabiliteringscenter för fladdermöss. De levererades av frivilliga utan någon form av återbetalning. Enligt den tyska djurskyddslagen (TSchG §4 (3)) och naturskyddslagen Federal (BNatSchG 45 § (4)) ingen tillstånd krävs för att arbeta på slaktkroppar. Musen magen var en kvarleva av en studie från Institutet för anatomi och cellbiologi vid Justus-Liebig-universitetet i Giessen som godkändes av det regionala rådet (nr V54-19C20 /15C Giessen 20/23 400AZ). Inget djur dödades inom ramen för denna studie.

Tissue lagrings

slaktkroppar lagrades omedelbart efter döden vid -20 ° C. Fladdermöss levererades på is dvs. fryst till universitetet i Giessen. Slaktkroppar lagrades under högst sex månader vid -80 ° C tills vävnad förberedelse. Makro- och mikroskopiska observationer verifierat mycket bra bevarande av organ och celler som gjorde enzymatiska och histologiska undersökningar av vävnaderna möjligt.

Tissue förberedelse

slaktkroppar av sju insektsätande fladdermusarter utan några tecken på förruttnelse ( Pipistrellus Pipistrellus
( n
= 14), Plecotus auritus
( n
= 3), Myotis bechsteinii
( n
= 1), Myotis nattereri
( n
= 3), Myotis daubentonii
( n
= 2) , myotis myotis
( n
= 1) och Nyctalus leisleri
( n
= 1)) användes i denna studie (Tabell 1) . Efter att ha öppnat den abdominala väggen, var Gl-kanalen avlägsnades, tvättades med 0,9% NaCl, och torkades på filterpapper. Mag-tarmkanalen delades in i matstrupe, magsäck, tolvfingertarmen, jejunum /ileum, ileum /colon och kolon /rektum efter Ishikawa et al. [23] och vägdes på en digital skala (EW2200-2NM, noggrannhet: 0,01 g; Kern & Sohn GmbH, Balingen, Tyskland). Dessutom magen på en Mus musculus
(stam C57BL /6, Black 6; n
= 1). Användes som en positiv kontroll för AMCase detektering genom western blotting

Beredning av lösliga proteinfraktioner

mag-tarmkanalen segment av icke-fast, färska prover av P. Pipistrellus
( n
= 11), P. auritus
( n
= 3), M. bechsteinii
( n
= 1), M. nattereri
( n
= 3), M. daubentonii
( n
= 2), M. Myotis
( n
= 1) och N. leisleri
( n
= 1) och magen på M. musculus
individuellt maldes i en mortel och mortelstöt med extra ren havssand (Merck, Tyskland) och 0,9% NaCl (standardiserad vävnadsbelopp: 1 ml per 100 mg vävnad). Homogenaten inkuberades över natten vid 4 ° C [10] och därefter centrifugerades (20 min, 3500 g, 4 ° C). Supernatanterna förvarades vid -20 ° C tills vidare analys

Fastställande av kitinolytisk aktivitet

För att mäta kitinolytisk aktivitet, agarosgel plattor framställd såsom beskrivits av Zou, Nonogaki &. Welbaum [24] med vissa modifieringar. Fosforsyra svullen kitin framställdes genom blandning av 10 g kitin från krabba skal (Roth, Tyskland) med 100 ml 85% fosforsyra och inkuberades under 48 h vid 4 ° C. Därefter 2 L kallt kranvatten tillsattes och den resulterande kakan tvättades, tills pH 6,5 uppnåddes [25], [26]. Agaros (1,6%) löstes upp i inkubationsbuffert (pH 5,0) [24] i en mikrovågsugn och kyldes till 50-60 ° C. Efteråt, var fosforsyra svälld kitin (0,5%) tillsattes och 10 ml av denna suspension pipetterades i 85-mm petriskålar. Efter polymerisation ades brunnarna 4-mm-diameter stansade i agarosen och gelstycken avlägsnades med användning av en vatten-strålpump

Lyofiliserat pulver av standard kitinas från Serratia marcescens
(5 U.; Sigma-Aldrich, Tyskland) löstes i 1 ml inkubationsbuffert som standardstamlösning. En känd koncentration av standard kitinas tillsattes till varje platta som referens och inkubationsbuffert användes som negativ kontroll. Först framställdes 6 pl-prover av varje lösning pipetter per brunn, varefter plattorna inkuberades under 20 min vid rumstemperatur för att tillåta proverna att diffundera in i agar. Sedan en ytterligare L prov sattes till varje brunn och plattorna inkuberades vid rumstemperatur under 20 min följt av inkubation vid 37 ° C under 20 h. Agarosplattor färgades sedan med 0,1% kalkofluor (Calcofluor Brightener M2R; Sigma, MO, USA) under 10 minuter och tvättades med destillerat vatten under 2 h. Lytiska zoner visualiseras med UV-genomlysning och sedan fotograferas. Diametrar lytiska zoner uppmättes med hjälp av GIMP (version 2.6.11, www.gimp.org). Med hjälp av en referensutspädningsserie av kitinas stamlösningen med inkubationsbuffert enzymaktiviteter beräknades genom zondiametern kontra logaritmen av koncentration och variation mellan plattorna justerades till interna kitinas standarder som används på varje petriskål.

Att analysera enzymatisk aktivitet vid olika pH-värden, var gelplattor ställdes som tidigare men med olika pH-värden (pH 4,0, pH 5,0, pH 6,0, pH 7,0 och pH 8,0). Supernatanter av magen, tolvfingertarmen, jejunum /ileum, ileum /colon och kolon /rektum från en individ av P. Pipistrellus
användes. De lytiska zoner visualiseras med UV-genomlysning och analyserades som tidigare. Dessutom, pH-värden av mag-tarmkanalen delarna av fem personer i P. Pipistrellus
mättes med hjälp av multikodade pH-papper (pH 0,0-6,0: Acilit, noggrannhet 0,5; pH 6,5-10,0: Special indikatorn noggrannhet 0,3, Merck).

Uttryck av kitinas i mag-tarmkanalen

Western blot-analys.

Western blotting utfördes för att identifiera och biokemiskt lokalisera kitinas i mag-tarmkanalen europeiska fladdermusarter och utesluta kitinolytisk aktivitet som orsakas av lysozymer. Supernatanter av vävnadsprover från sex fladdermusarter (mag-tarmkanalen sektionsprover (mage, duodenum, jejunum /ileum, ileum /kolon och kolon /ändtarm). P Pipistrellus
( n
= 2 ), P. auritus
( n
= 2), M. nattereri
( n
= 1), M. myotis
( n
= 1) och N leisleri
( n
= 1), ytterligare magen prover:.. P Pipistrellus
( n
= 9), M. nattereri
( n
= 1), M. daubentonii
( n
= 2)) och magen på en M. musculus
användes som en positiv kontroll [27] underkastades natriumdodecylsulfat-polyakrylamid-elektrofores (SDS-PAGE) (Laemmli [28] ändrats efter Sambrook, Fritsch & Maniatis [29]).

supernatanter av vardera 750 ^ g vävnad blandades 01:01 i 2 × SDS-gel-laddningsbuffert och värmdes till 95 ° C under 3 min. Av varje prov, var 15 mikroliter utsattes för en 12% upplösande gel och 5% uppstaplingsgelen. Elektrofores utfördes under reducerande betingelser vid en spänning på 100 V. De separerade proteinerna elektro under 1 timme vid en konstant ström på 0,8 mA /cm ^{2 på PVDF-membran. Blottarna blockerades med 5% fettfri torrmjölk i tris-buffrad saltlösning (TBS, pH 7,5) innehållande 0,1% Tween 20 (Roth) under 1 timme innan inkubation med en kanin-polyklonal antikropp riktad mot den N-terminala av sur kitinas ( AVIVA systembiologi, CA, USA; utspätt 1:1000 i TBS innehållande 1% BSA) vid 4 ° C över natten. Efter tvättning med TBS innehållande 0,05% Tween 20 och 0,1% BSA, inkuberades membranen under 1 h med alkaliskt fosfatas-konjugerad get-polyklonal antikropp mot kanin-IgG (H & L) (Roth, Anti Kanin-AP 4751; utspätt 1:7500 i TBS innehållande 1% BSA). Blottarna tvättades fyra gånger och antikroppsbindning visualiserades genom inkubering med bromochloroindoyl fosfat (Bethesda Research Laboratories, MD, USA) och nitroblå tetrazolium substrat (Biotech Trade & Service GmbH, Tyskland) enligt Harlow och Lane [30]}

Immunohistokemi.

för att lokalisera AMCase på cellnivå, var immunohistokemisk analys på mag-tarmkanalen segment av P. Pipistrellus
( n
= 3). Gl-kanalen delar fixerades i 4% paraformaldehyd i fosfatbuffrad koksaltlösning (pH 7,0) under 24 h innan de tvättades fyra × 1 h med TBS. Då vävnadsblock dehydratiserades i en graderad etanolserie (30%, 50%, 70%, 90%, 100%) och slutligen in i paraffin. De paraffinblock skars i sektioner av 4-9 um tjocklek med hjälp av en släde mikrotom (Leitz, Tyskland) och torkades över natten. För att få tillgängliga antigenbindningsställen, var vävnadssnitt predigested med pepsin (Sigma) efter Goto et al. [27]. Snitten tvättades med 0,01% Tween 20 i TBS. Ospecifika ställen blockerades med 5% getserum (Merck) i 3% BSA (AppliChem, Tyskland). Sektionerna exponerades för kanin-polyklonal antikropp riktad mot den N-terminala av sur kitinas (AVIVA systembiologi; utspätt 1:200 i TBS innehållande 1% BSA) i en fuktig kammare. Obundna antikroppar avlägsnades genom tvättning med TBS, före den sekundära antikroppen (ChromeoTM 546, Abcam, UK; utspätt 1:2500 i 0,5% BSA i TBS) applicerades. För kärn motfärgning sektioner inkuberades med 0,05% 4 ', 6-diamidino-2-fenylindol (DAPI) (AppliChem). Efter en sista sköljning med TBS, var sektionerna monteras med 1,4-diazabicyklo [2.2.2] oktan-lösning (DABCO) (Sigma). För styrning av autofluorescens och bindande specificiteten för antikropparna sektionerna bearbetades med fluorescein isotiocyanat (FITC) -märkt sekundär antikropp men utan primär antikropp. Sektionerna utvärderades med hjälp av ett fluorescensmikroskop (Olympus BX60 F-3, Olympus Optical Co LTP, Tyskland).

Resultat

kitinolytisk aktivitet

Vi kunde upptäcka kitinolytisk aktivitet i magen prover av alla personer (t ex Fig. 1) och i tjocktarmen /rektum prov av en M. Myotis, M. nattereri Mössor och N. leisleri
vardera (Tabell 2). Ingen kitinolytiska aktivitet kunde mätas i tolvfingertarmen, jejunum /ileum eller ileum /kolon prover. Den kitinolytiska aktiviteten i magen proverna var högst mellan pH 5,0 och pH 6,0 (Fig. 2). Stödja våra tidigare resultat, ingen kitinolytiska aktivitet detekteras i andra delar av mag-tarmkanalen, oavsett pH-värdet. Medelvärdet pH-värdet i mag-tarmkanalen av P. Pipistrellus
( n
= 5) var 5,6 ± 0,2 i magen, 7,0 ± 0,3 i tolvfingertarmen, 7,1 ± 0,2 i jejunum /ileum, 7,0 ± 0,2 i ileum /kolon och 7,0 ± 0,5 i kolon /rektum.

Uttryck av kitinas i mag-tarmkanalen

Western blot-analys av M. musculus
magen visade ett karakteristiskt band vid en relativ molekylvikt av 46 k, vilket indikerar närvaron av AMCase. Vidare i alla magen prover av P. Pipistrellus, P. auritus, M. nattereri
, M. myotis
och N. leisleri
en klar proteinband vid 46 k identifierades (för representativa Western blot bilder, se fig. 3 för Pipistrellus Mössor och fig. 4 för Plecotus, Myotis Mössor och Nyctalus
). Detta protein band detekterades inte i matstrupen, tolvfingertarmen, jejunum /ileum, ileum /colon eller kolon /rektum prover av fladdermusarter (Fig. 3). Alla immunohistokemiska resultat kontrollerades för autofluorescens och ospecifik bindning av det sekundära FITC-kopplade antikroppen. Magen sektioner var positiva för anti-AMCase antikroppsmärkning, medan det i matstrupen, tolvfingertarmen, jejunum /ileum, ileum /kolon och kolon /rektum sektioner ingen bindning detekterades. I magen sektioner var anti-AMCase märkning begränsas till botten av mag körtlar längs magslemhinnan runt DAPI-färgade cellkärnor (Fig. 5).

Diskussion

Vi antar att europeiska insektsätande fladdermusarter i familjen Vespertilionidae har matsmältningsenzym kitinas. Denna hypotes bekräftades genom närvaron av kitinolytisk aktivitet i magen på de studerade arterna. Vidare, en sann kitinas, mera speciellt AMCase, kunde biokemiskt identifieras i samtliga magen prover. Aktiva kitinaser är vanliga och konserverat bland däggdjur [14]. plats och funktion AMCase skiljer sig dock mellan arter och är inte helt löst [31].

Vi antar vidare att kitinolytiska aktiviteten ligger i tarmen, särskilt i tunntarmen, eftersom det är plats där huvud enzymatisk nedbrytning och absorption äger rum [32]. Våra resultat bekräftade inte denna hypotes som kitinolytisk aktivitet lokaliserades främst i magen och för tre personer vid låga aktivitetsnivåer i tjocktarmen /ändtarmen. Den stora variationen av kitinolytiska aktiviteten i de studerade individer kan orsakas av varierande mag aktivitet av individer vid tidpunkten för dödsfallet. Detta stöds av olika mängder mat som finns i de gastrointestinala trakter. Den kitinolytiska aktiviteten i magen prover men inte i kolon /rektum prover kunde spåras tillbaka till aktiviteten hos AMCase och inte en lysozym genom western-blotting. Aktiviteten av bat AMCase var optimalt mellan pH 5,0 och pH 6,0. Dessa pH-nivåer är jämförbara med den sura miljön i magen på insektsätande fladdermusarter, mätt i föreliggande studie och rapporteras av Naumova och Zharova [33]. Detta är en första indikation för den biologiska relevansen av AMCase under matsmältningen i denna del av Gl-kanalen. Dock bör ytterligare experiment som matsmältningseffektivitetsförsök utföras för att testa om aktiviteten hos AMCase utgör en biologisk betydelse för kitin matsmältning. AMCase har en dubbel funktion i immunitet och nedbrytning av kitin-innehållande organismer [34], [35]. Till exempel, är humant AMCase inte anpassad till den sura miljön i magen, till skillnad från den AMCase hittades i möss [31]. Magen AMCase av M. musculus
innehåller aminosyrasubstitutioner som är nödvändiga för anpassningen till den sura miljön i magen [31]. Vidare Boot et al. [17] visade att AMCase mRNA av M. musculus
finns bara i magen. Om dessa aminosyrasubstitutioner finns i AMCase av fladdermusarter återstår att visa.

immunhistokemiska resultaten från denna studie stöder lokalisering av AMCase i magen av fladdermusarter, i synnerhet i magsäckens körtlar i slemhinnan . Dessutom fann vi att enzymet var belägen i eller runt de viktigaste cellerna ligger vid foten av mag körtlar, som tidigare visats för magen AMCase av M. musculus
[27], [31], [34]. Chief celler utsöndrar matsmältningsenzymer [36] som finns i de många cytoplasmiska granuler [37]. Ett vanligt enzym som produceras av denna gastric celltyp är pepsinogen, en föregångare till det proteolytiska enzymet pepsin [38]. Goto et al. [27] visade att produktionsanläggningen i magen AMCase av M. musculus
är i dessa sekretoriska granuler. Därför är det högst troligt att AMCase också utsöndras av gastriska huvudcellerna i fladdermusarter. Detta strider mot resultatet av Whitaker et al. [8], som uppgav att kitinas i fladdermusarter produceras av kitinas producerande bakteriestammar (mestadels av familjen Enterobacteriaceae) i tarmen. Det är känt att tarmbakterier producerar kitinas att tillfredsställa sina egna näringsbehov [39]. Emellertid kan kitinas producerande enterobakterier också hittas i de gastrointestinala områdena av däggdjur som inte livnär sig på chitinous material [19]. Detta tyder på att det inte finns något nära samband mellan kitin matsmältning och kitinolytisk bakterier. I denna studie var låg kitinolytisk aktivitet mätt i inälvorna av endast ett fåtal individer, och ingen AMCase kunde detekteras när separera tarmen från magen. Detta enstaka kitinolytisk aktivitet kan förklaras av transport av AMCase produceras i magen in i tarmen med maten, som diskuteras av Suzuki et al. [34] och Boot et al. [17]. Dessutom kan den låga kitinolytisk aktivitet i tarmen orsakas av kitinas-producerande enterobakterier [8]. Emellertid skulle kvantifiering av dessa bakterier behövas för att kontrollera att delta i kitin nedbrytning av dessa symbionter. Därför är det troligt att kitin i insektsätande fladdermusarter klyvs av en kombination av endogena mage AMCase och kitinas utsöndras av tarmbakterier, som föreslogs för M. musculus
[17]. Denna studie visar tydligt att de europeiska insektsätande fladdermöss av familjen Vespertilionidae har matsmältningsenzymet AMCase. Vi visade att detta enzym är aktiv och som ligger i magen, särskilt i eller kring de viktigaste celler vid basen av mag körtlar.

Tack till

Vi tackar E. Mühlbach, R. Keil N. Dittrich och S. Wiegand för djurproverna och Y. Kühnel, C. von Bredow, A. Diebel och däggdjur Ekologigruppen för deras hjälp.

• PLOS ONE: Sonic Hedgehog medierar spridning och rekrytering av transformerade mesenkymala stamceller till Stomach
• PLOS ONE: villkorligt uttryck av Wnt9b i Six2-positiva celler stör mage och njure Function