absztrakt katalógusa
Az emésztőrendszer állatok úgy van kialakítva, hogy az elsődleges forrása az élelmiszer, hogy optimalizálja az erőforrások és az energia-bevitel. Mérsékelt denevérfajok főként táplálkoznak ízeltlábúak. Ezek tartalmazzák az energiában gazdag szénhidrát kitin, amely nem emészthető az endogén enzimek egy tipikus emlős gyomor-bél traktusban. Azonban a gyomor-bél traktus a denevérfajok kell igazítani a diétát, és képes megemészteni kitin. Feltételeztük, hogy az (I) európai vespertilionid denevér fajok az emésztő enzim kitináz, és hogy a (II) a chitinolytic aktivitás található, a bélben, amint azt találtuk az észak-amerikai denevér faj. A gyomor-bél hét denevérfaj ( Pipistrellus pipistrellus katalógusa, Plecotus auritus katalógusa, Myotis bechsteinii katalógusa, Myotis nattereri katalógusa, Myotis daubentonii Citation: Strobel S, Roswag A, Becker NI, Trenczek TE, Encarnação JA (2013) rovarevő denevérek Digest kitin a gyomorban használata savas emlős kitináz. PLoS ONE 8 (9): e72770. doi: 10,1371 /journal.pone.0072770 katalógusa Vágó: François Blachier, National Institute of Research agronómiai, Franciaország katalógusa Beérkezett: március 26, 2013; Elfogadva: július 12, 2013; Megjelent: szeptember 3, 2013 katalógusa Copyright: © 2013 Strobel et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa Forrás: A szerzők nincs támogatás vagy támogatási jelenteni. katalógusa Érdekütközés: a szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. katalógusa Bevezető katalógusa az állatok lenyelik és megemésztik élelmiszerek biztosítása folyamatos működését a belső anyagcsere lefedésével, például az energia, fehérje és vitamin követelményeknek [1]. A többlépcsős folyamat az emésztés magában mechanikai, kémiai és enzimatikus lépések konvertáló tápanyagok [2]. Denevérfajok magas tömeges fajlagos energiaigény miatt a kis méret és a képesség, hogy repülni aktívan [3], [4]. Repülő állatok, élelmiszer kell feldolgozni gyorsan csökkenti az energia iránti kereslet okozta megnövekedett repülési tömeg [2]. Európai denevérfajok egy étrend, amely elsősorban az ízeltlábúak [5]. Ezek rövid retenciós idők [6], de a magas hatékonyabbá teszi az emésztést. [7] Ez azt sugallja, hogy a gasztrointesztinális (GI) traktus erősen illeszkednek a diéta, mivel ez megemészti ízeltlábúak gyorsan és alaposan. Ezért lehet érvelni, hogy az európai denevérfajok függ ízeltlábú-specifikus emésztőenzimek. Mivel ízeltlábúak állhat akár 75% kitin (energia-tartalom 21,2 kJ /g, [8]), akkor nagyon valószínű, hogy a BAT fajok képesek megemészteni chitinous anyag, mint már kimutatták más gerincesekben, mint például a zöld gyík ( Lacerta viridis katalógusa), a Fekete rigó ( Turdus merula katalógusa), és a vörös róka ( vulpes vulpes katalógusa) [9], [10]. katalógusa kitin is lebomlik kitinázok (EC 3.2.1.14), valamint néhány lizozimek (EC 3.2.1.17) [11], [12]. Emlősökben csak két kitinázok azonosítottak: kitotriozidáz enzim szintjét és savas emlős kitináz (AMCase) [13], mindkettő sorolják endochitinases [14]. Kitotriozidáz enzim szintjét főleg által szekretált fagociták és cselekmények ellen kitin-kórokozókat tartalmazó [15]. AMCase eddig csak azonosították egereken (Mus musculus), a makákók (Macaca fascicularis) és emberekben [16], [17]. Ez nagymértékben expresszálódik a gyomorban és a tüdő, jelezve egy kettős emésztési és immunológiai funkció [16], [17]. Chitinolytic aktivitás szintén származhatnak endogén enzimek, az elfogyasztott táplálékot jelen a gyomor-bél traktusban, vagy mikroorganizmusok által termelt enzimek [18], [19]. Chitinolytic aktivitást a GI traktusban találtak számos rovarevő denevérfajokra [8], [9]. Azonban, nincs ismeretek a megfelelő enzimet. Jeuniaux [9] igazolta chitinolytic tevékenység a tápcsatorna a Rhinolophus ferrumequinum katalógusa, az európai denevérfajok a család Rhinolophidae. Whitaker és munkatársai. [8] kimutatták chitinolytic tevékenység a tápcsatorna az észak-amerikai vespertilionid denevérfaj a nemzetségek Myotis katalógusa, Eptesicus katalógusa, nycticeius katalógusa, Lasiurus katalógusa Pipistrellus katalógusa és Lasionycteris katalógusa. Ezek izolált kitináz termelő baktériumok törzsek a bélből, mint a forrás a chitinolytic aktivitást. Ezzel szemben, a Jeuniaux [9] találtak bizonyítékot chitinolytic aktivitás a gyomor nyálkahártya a gyomor a Rhinolophus ferrumequinum Feltételezésünk szerint az (I) európai rovarevő denevér faj a család Vespertilionidae rendelkeznek chitinolytic tevékenységet a tápcsatorna, mint ahogy azt az észak-amerikai rovarevő denevérek [8], valamint egy európai denevérfaj család Rhinolophidae [9] és (ii) a chitinolytic tevékenység található, a belekben, mint már látható észak-amerikai fajok [8]. Ebben a tanulmányban található chitinolytic aktivitást és azonosítani a megfelelő enzim AMCase alkalmazásával enzim vizsgálat, immun és immunhisztokémia. Katalógusa Anyagok és módszerek katalógusa Etikai nyilatkozat katalógusa Minden személy élt ebben a vizsgálatban meghalt önkéntes rehabilitációs központokban a denevérek. Szállították őket az önkéntesek nélkül bármilyen visszatérítést. A német állatvédelmi törvény (TSchG 4.§ (3) bekezdés), valamint a szövetségi természetvédelmi törvény (alpontja §45 (4) bekezdése) nincs szükség engedélyre dolgozni tetemek. Az egér gyomor volt maradványa egy tanulmány Anatómiai Intézetének és Sejtbiológiai a Justus-Liebig-Egyetem Giessen-ben jóváhagyott, a regionális tanács (No. V54-19C20 /15C Giessen 20/23 400AZ). Állat nem ölték meg a jelen tanulmány. Katalógusa Tissue tároló katalógusa A hasított tárolták azonnal a halál után -20 ° C-on. Denevérek szállították jégen azaz fagyott a University of Giessen. A hasított testek tároltuk legfeljebb hat hónapig -80 ° C-on, amíg szövet előkészítése. Makro- és mikroszkópos megfigyelések igazolták a nagyon jó megőrzése szervek és sejtek készült enzimatikus és szövettani vizsgálatokat a szövetek lehetséges. Katalógusa Tissue készítmény katalógusa tetemeit hét rovarevő denevérek jelei nélkül rothadás ( Pipistrellus pipistrellus katalógusa ( n katalógusa = 14), Plecotus auritus katalógusa ( n katalógusa = 3), Myotis bechsteinii katalógusa ( n katalógusa = 1), Myotis nattereri katalógusa ( n katalógusa = 3), Myotis daubentonii katalógusa ( n katalógusa = 2) Myotis Myotis katalógusa ( n katalógusa = 1) és a Nyctalus leisleri katalógusa ( n katalógusa = 1)) alkalmaztunk ebben a vizsgálatban (1. táblázat) . Megnyitása után a hasfal, a GI traktust eltávolítottuk, mossuk 0,9% NaCl, és szárítjuk szűrőpapírra. A GI traktus volt osztva a nyelőcső, gyomor, duodenum, jejunum /ileum, ileum /vastagbél és a vastagbél /végbél után Ishikawa és munkatársai. [23], és lemérjük a digitális mérleg (EW2200-2NM, pontosság: 0,01 g; Kern & Sohn GmbH, Balingen, Németország). Ezen túlmenően, a gyomor egy Mus musculus katalógusa (törzs C57BL /6, fekete 6; N készítése oldható fehérje frakciók katalógusa tápcsatorna szegmensei nem rögzített, friss példányai P. pipistrellus katalógusa ( n katalógusa = 11), P. auritus katalógusa ( n katalógusa = 3), M. bechsteinii katalógusa ( n katalógusa = 1), M. nattereri katalógusa ( n katalógusa = 3), M. daubentonii katalógusa ( n katalógusa = 2), M. myotis katalógusa ( n katalógusa = 1) és a N. leisleri katalógusa ( n katalógusa = 1), és a gyomrában M. musculus méréséhez chitinolytic aktivitás, agaróz gél lemezeket készítünk által leírt Zou, Nonogaki & Welbaum [24] bizonyos módosításokkal. Foszforsavval duzzasztott kitin összekeverésével állítottuk elő 10 g kitin származó rák kagyló (Roth, Németország), 100 ml 85% -os foszforsavat, és inkubáltuk 48 órán át 4 ° C-on. Ezután 2 liter hideg csapvizet adtunk hozzá, és az így kapott szűrőlepényt mossuk, amíg a pH 6,5 eléréséig [25], [26]. Agarózt (1,6%) feloldunk inkubációs pufferben (pH = 5,0) [24] egy mikrohullámú sütőben, és lehűtjük 50-60 ° C-on. Ezután a foszforsavval duzzasztott kitin (0,5%) adtunk hozzá, és 10 ml ilyen szuszpenzióhoz pipettázunk 85 mm-es Petri-csészékbe. A polimerizálás után 4 mm átmérőjű lyukakat vágtunk az agaróz és a gél darabokat eltávolítjuk egy vízsugár-szivattyút. liofilizált por szabványos kitináz származó Serratia marcescens katalógusa (5 U; Sigma-Aldrich, Németország) oldunk 1 ml inkubációs puffert, mint a standard törzsoldat. Egy ismert koncentrációjú standard kitináz-t adunk az egyes lemezekhez, mint referencia és inkubációs puffert használtunk negatív kontrollként. Először is, a 6 ul mintát minden oldatot pipettáztunk lyukanként, majd a lemezeket inkubáltuk 20 percig szobahőmérsékleten, hogy lehetővé tegye a minták diffundálni az agar. Ezután egy további L mintát adunk az egyes lyukakhoz, és a lemezeket inkubáltuk szobahőmérsékleten 20 percen keresztül, majd 37 ° C-on 20 órán át. Agarose lemezeket ezután megfestjük 0,1% Calcofluor (Calcofluor világosító M2R; Sigma, MO, USA) 10 percig, és desztillált vízzel mossuk, 2 órán át. Litikus zóna tettük láthatóvá UV átvilágítás, majd fényképezett. Átmérőjét litikus zóna mértük GIMP (version 2.6.11; www.gimp.org). Egy referencia hígítási sorozat a kitináz törzsoldat inkubáiópuffert enzim aktivitása által kiszámított zónaátmérő versus logaritmusát a koncentráció és a variáció között lemezeket ját belső kitináz- alkalmazott szabványok az egyes Petri-csészébe. Katalógusa Ahhoz, hogy elemezni enzimaktivitás különböző pH-értékeken, gél lemezeket készítünk, mint korábban, de különböző pH-értékeken (pH = 4,0, pH = 5,0, pH = 6,0, pH = 7,0 és pH = 8,0). A felülúszókat a gyomor, duodenum, jejunum /ileum, ileum /vastagbél és a vastagbél /végbél egyetlen személy a P. pipistrellus katalógusa használtunk. A litikus zóna tettük láthatóvá UV átvilágítás és elemzett, mint korábban. Ezen túlmenően, pH-értékek a GI traktus szakaszok öt egyének P. pipistrellus katalógusa mértük többszínű kódolt pH-papír (pH 0,0-6,0: Acilit, pontosság 0,5 pH 6,5-10,0: Speciális indikátor pontosság 0,3, Merck). katalógusa Expression kitináz a tápcsatorna Western blot analízissel. katalógusa Western blot vizsgálatot végeztünk, hogy azonosítsák és biokémiai keresse kitináz- a tápcsatorna európai denevérfajok és kizárják chitinolytic tevékenység okozta lizozim. Felülúszóit szövetminta hat denevérfaj (GI traktus szakasz minták (gyomor, duodenum, jejunum /ileum, ileum /vastagbél és vastagbél /végbél): P. Pipistrellus katalógusa ( n = 2 katalógusa ) P. auritus katalógusa ( n katalógusa = 2), M. nattereri katalógusa ( n katalógusa = 1), M. Myotis katalógusa ( n katalógusa = 1) és a N. leisleri katalógusa ( n katalógusa = 1); további gyomor minták: P. pipistrellus katalógusa ( n katalógusa = 9), M. nattereri katalógusa ( n katalógusa = 1), M. daubentonii katalógusa ( n katalógusa = 2) bekezdés), valamint a gyomor egy M. musculus a felülúszókat az egyes 750 ug szöveti elegyítünk 01:01 2 × SDS gél-pufferrel, és melegítjük 95 ° C-on 3 percig. Az egyes minták 15 ul vetettük alá 12% -os elválasztógél és 5% dúsítógélbe. Az elektroforézist végeztünk redukáló körülmények feszültségen 100 V Az elválasztott fehérjéket elektroblottoltuk 1 órán át állandó áramerősséggel 0,8 mA /cm 2 PVDF membránokon. A blotokat blokkoltuk 5% zsírmentes szárított tej Tris pufferolt sóoldatban (TBS, pH = 7,5), amely 0,1% Tween 20-at (Roth) 1 órán inkubálás előtt egy nyúl poliklonális ellenanyaggal szemben az N-terminális savas kitináz ( AVIVA Systems Biology, CA, USA; hígított 1:1000 tartalmazó TBS 1% BSA), 4 ° C-on egy éjszakán át. Mosás után TBS, amely 0,05% Tween 20-at és 0,1% BSA-t, a membránokat 1 órán át inkubáltuk alkalikus foszfatázzal konjugált kecske poliklonális antitest nyúl IgG-t (H &L) (Roth, nyúl elleni-AP 4751; hígított 1:7500 TBS, amely 1% BSA). A blotokat négyszer mossuk és az antitest kötődését tettük láthatóvá inkubációval, bromochloroindoyl foszfát (Bethesda Research Laboratories, MD, USA) és nitroblue-tetrazólium szubsztrát (Biotech Trade & Service GmbH, Németország) szerint a Harlow és Lane [30]. immunhisztokémia. katalógusa lokalizálni AMCase sejtszinten, immunhisztokémiai analízist tápcsatorna szegmensében P. pipistrellus katalógusa ( n katalógusa = 3). A GI traktus alkatrészek fixáltuk 4% paraformaldehidet tartalmazó foszfát-pufferolt sóoldattal (pH 7,0) 24 órán előtt mostuk 4 × 1 H TBS-sel. Ezután a szövetet blokkok dehidratáltuk egy fokozatos etanol sorozat (30%, 50%, 70%, 90%, 100%), és végül paraffinba ágyaztuk. A paraffin blokkokat szakaszokra vágjuk 4-9 jim vastagságú segítségével szánkó mikrotom (Leitz, Németország) és egy éjszakán át szárítottuk. Ahhoz, hogy hozzáférhető antigén kötőhelyeket, szöveti metszeteket predigested pepszinnel (Sigma) után Goto et al. [27]. A metszeteket mossuk 0,01% Tween 20 TBS-ben. A nemspecifikus helyeket blokkoljuk 5% kecske szérummal (Merck) 3% -os BSA-val (AppliChem, Németország). A metszeteket kitéve a nyúl poliklonális antitest ellen irányuló N-terminális savas kitináz (AVIVA Systems Biology; hígított 1:200 tartalmazó TBS 1% BSA) nedves kamrában. Nincs korlátozás antitesteket mosással eltávolítjuk, TBS, mielőtt a másodlagos antitesttel (ChromeoTM 546, ABCAM, UK; hígított 1:2500 0,5% BSA TBS-ben) került alkalmazásra. A nukleáris counterstaining metszeteket 0,05% 4 ', 6-diamino-2-fenil-(DAPI) (AppliChem). Követően a végső öblítést TBS, a metszeteket 1,4-diaza-biciklo [2.2.2] oktán-oldatot (DABCO) (Sigma). Ellenőrzésére autofluoreszcencia és kötési specifitását az antitestek a metszeteket feldolgozott fluoreszcein izotiocianáttal (FITC) jelölt másodlagos antitesttel, de nem elsődleges antitesttel. A metszeteket értékeltük fluoreszcens mikroszkóppal (Olympus BX60 F-3; Olympus Optical Co. LTP, Németország). Katalógusa Eredmények katalógusa Chitinolytic tevékenység katalógusa voltunk képesek észlelni chitinolytic aktivitás a gyomor mintákban minden egyén (például ábra. 1), és a vastagbél /végbél mintát egy, m. Myotis, M. nattereri katalógusa és N. leisleri katalógusa mindegyik (2. táblázat). Nem chitinolytic aktivitás mérhető a duodenum, jejunum /ileum vagy ileum /vastagbél mintákban. A chitinolytic aktivitás a gyomor mintákban volt a legmagasabb közötti pH 5,0 és pH 6,0 (ábra. 2). Támogatása a korábbi eredményeket, nem chitinolytic aktivitást kimutatni a többi régióban a tápcsatorna, függetlenül attól, hogy a pH-érték. Az átlagos pH-értéke a GI traktus P. Pipistrellus expressziója kitináz a GI rendszerben Western-blot-elemzés a m. musculus Feltételeztük hogy az európai rovarevő denevérek a család Vespertilionidae van emésztőenzim kitináz. Ezt a hipotézist támasztja alá a jelenléte chitinolytic aktivitás a gyomor, a vizsgált fajok. Továbbá, egy valódi kitináz, közelebbről AMCase lehetne biokémiailag azonosított valamennyi gyomor mintákban. Aktív kitinázok gyakori és megőrzött az emlősök körében [14]. Azonban a helye és funkciója a AMCase különböznek fajok, és nem teljesen megoldott [31]. Feltételezik továbbá, hogy a chitinolytic aktivitás található, a bélben, különösen a vékonybélben, mivel ez a oldal, ahol a fő enzimes emésztés és a felszívódás történik [32]. Eredményeink nem erősítették meg ezt a hipotézist, mint chitinolytic aktivitást lokalizált elsősorban a gyomorban és a három személy alacsony aktivitás szintje a vastagbélben /végbél. A nagy változékonysága chitinolytic aktivitás a vizsgált személyek által esetlegesen okozott különböző emésztési tevékenységét magánszemélyek a halál időpontjában. Ezt támasztja alá a különböző mennyiségű étel megtalálható a GI traktusban. A chitinolytic aktivitás gyomor mintákat, de nem vastagbél /végbél mintákat vezethető vissza, hogy a tevékenység a AMCase, és nem a lizozim western-blot. A tevékenység a denevér AMCase volt optimális közötti pH 5,0 és pH 6,0. Ezek pH szinten összehasonlítható a savas közeg, a gyomor rovarevő denevérek mérve a jelen tanulmány által jelentett Naumova és Zharova [33]. Ez az első jelzés a biológiai relevanciájának AMCase emésztés során ezen a részén a GI traktusban. Azonban további kísérleteket, mint az emésztési hatékonyságát próbákat kell végezni annak ellenőrzésére, hogy a tevékenység a AMCase jelent biológiai jelentősége kitin emésztést. AMCase kettős funkciója van az immunitás és az emésztés kitin tartalmú szervezetek [34], [35]. Például, az emberi AMCase nem igazodik a savas környezet a gyomorban, ellentétben a AMCase talált egerekben [31]. A gyomor AMCase a M. musculus Az immunhisztokémiai E vizsgálat eredményei alátámasztják a lokalizációját AMCase a gyomorban BAT fajok, különösen a gyomor mirigyek a nyálkahártya . Továbbá azt találtuk, hogy az enzimet és környékén található a fő sejtek található az alapja a gyomor mirigyek, amint korábban kimutatták, hogy a gyomor AMCase a m. musculus katalógusa [27], [31], [34]. Vezető sejtek szekretálnak emésztő enzimek [36], hogy található a számos citoplazmatikus granulumok [37]. Egy közös által termelt enzim ezen a gyomor sejttípus pepszinogén, egy prekurzora a proteolitikus enzim pepszin [38]. Goto et al. [27] kimutatták, hogy a termelés helyén gyomor AMCase a M. musculus Köszönetnyilvánítás katalógusa Köszönjük E. Mühlbach, R. Keil N. Dittrich és S. Wiegand az állati minták és Y. Kühnel, C. von Bredow, A. Diebel és az emlős Ökológiai csoport a segítséget. katalógusa
, Myotis Myotis, katalógusa, és Nyctalus leisleri katalógusa) teszteltünk chitinolytic tevékenység diffúziós vizsgálattal. Gyomor-bél a P. pipistrellus katalógusa, P. auritus katalógusa, M. nattereri katalógusa, M. Myotis, katalógusa, és N. leisleri
vizsgáltuk savas emlős kitináz Western blot analízissel. Tissue szakaszok a gyomor-bél traktus P. pipistrellus katalógusa arra immunohisztokémiailag elemezve, a savas emlős kitináz. Chitinolytic aktivitás kimutatható volt a gyomor összes denevér faj. Western-blot-elemzés megerősítette a savas emlős kitináz a gyomorban mintákban. Immunhisztokémia A P. Pipistrellus
gyomor-bél traktus jelezte, hogy a savas emlős kitináz található, a gyomor fő sejtek a bázis a gyomor mirigyek. Összefoglalva, az európai vespertilionid denevérfajokra savas emlős kitináz, hogy az előállított, a gyomor mirigyek a gyomor. Ezért a gyomor-bél a rovarevő denevérek fejlődött enzimatikus alkalmazkodás a diéta. Katalógusa
mivel a bélben nem mutat chitinolytic aktivitást. Azonban Buchholz, Wells & Conaway [20] nem találtunk kitináz- a rovarevő denevérek Pipistrellus subflavus katalógusa és Myotis grisescens katalógusa. Emellett kitinázok, néhány lizozimek képesek feloldódni kitin [11], [12]. Például, Phillips, Weiss & Tandler [21] kimutatható lizozim nyálmirigyek a rovarevő denevérek és gondolták, hogy működhetne chitinolytic enzim a nyál. Azonban lizozimek elsősorban anti-bakteriális és fontos része az immunrendszer [22], vagy az emésztés baktériumok kérődzőkben [12].
= 1) alkalmaztunk pozitív kontrollként az AMCase kimutatására Western-blottal.
egyenként őrölt fel egy mozsár és mozsártörő alkalmazásával extra-tiszta tengeri homok (Merck, Németország), és 0,9% NaCl (standardizált szövet mennyisége: 1 ml per 100 mg szövet). A homogenizátumokat egy éjszakán át inkubáltuk 4 ° C-on [10], majd centrifugáljuk (20 perc, 3500 g, 4 ° C). A felülúszókat -20 ° C-on, amíg a további elemzéshez.
meghatározása chitinolytic aktivitás
használunk pozitív kontroll [27] vetettük alá nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid elektroforézis (SDS-PAGE) (Laemmli [28] módosított után Sambrook, Fritsch & Maniatis [29]).
( N
= 5) volt 5,6 ± 0,2 a gyomorban, 7,0 ± 0,3 a duodenumban, 7,1 ± 0,2 a jejunumban /ileum, 7,0 ± 0,2 az ileumban /vastagbél-és 7,0 ± 0,5 a vastagbélben /végbél.
gyomor mutatott karakterisztikus sáv relatív molekulatömege 46 K, jelezve a jelenlétét AMCase. Továbbá, minden gyomor minták P. pipistrellus, P. auritus, M. nattereri katalógusa, M. Myotis katalógusa, és N. leisleri
tiszta fehérje sávot 46 k azonosítottunk (reprezentatív Western blot kép, ld. a 3. Pipistrellus katalógusa és ábra. 4. Plecotus, Myotis katalógusa és Nyctalus katalógusa). Ez a fehérje sáv nem volt kimutatható a nyelőcső, a duodenum, jejunum /ileum, ileum /vastagbél vagy a vastagbél /végbél mintákat a BAT fajok (ábra. 3). Minden immunhisztokémiai eredményeket mutatott az autofluoreszcencia és nem specifikus kötődését a másodlagos FITC-kapcsolt antitest. Gyomor szakaszok volt pozitív anti-AMCase ellenanyag címkézés, míg a nyelőcső, a duodenum, jejunum /ileum, ileum /vastagbél és a vastagbél /végbél szakaszokra kötődés nem volt kimutatható. A gyomorban szakaszok, anti-AMCase címkézés korlátozódott az alján a gyomor mirigyek mentén a gyomor nyálkahártya körül DAPI-festett sejtmagok (ábra. 5).
Discussion
tartalmaz aminosavszubsztitúciót, amelyek szükségesek az adaptáció a savas miliő a gyomor [31]. Továbbá, a Boot és mtsai. [17] kimutatták, hogy a AMCase mRNS M. musculus
csak található a gyomorban. Ha ezek a aminosavszubsztitúciók vannak jelen a AMCase BAT fajok kell még látható.
ezekben a szekréciós granulátumok. Ezért a legvalószínűbb, hogy AMCase is kiválasztódik a gyomor vezető sejtek denevér faj. Ez ellentétes az eredmények a Whitaker és munkatársai. [8], aki azt állította, hogy a kitináz denevérfaj termeli kitináz- termelő baktériumtörzsek (általában a Enterobacteriaceae család) a bélben. Ismeretes, hogy a bélbaktériumok termelnek kitináz hogy kielégítsék a saját táplálkozási követelményeknek [39]. Azonban kitináz termelő enterobaktériumokban is megtalálható a GI traktus emlősök, amelyek nem táplálkoznak chitinous anyaga [19]. Ez arra utal, hogy nincs szoros összefüggés kitin emésztést és chitinolytic baktériumok. Ebben a vizsgálatban az alacsony chitinolytic aktivitást mértünk a belekben az csak néhány egyén, és nem AMCase lehetett kimutatni, ha elválasztjuk a bélben a gyomorból. Ez alkalmi chitinolytic aktivitás lehet a magyarázata szállítása a AMCase termelt a gyomorból a bélbe az étellel, amint azt a Suzuki et al. [34] és a Boot et al. [17]. Továbbá, az alacsony chitinolytic aktivitást a bélben okozhatja kitináz-termelő enterobaktériumok [8]. Azonban számszerűsítése ezek a baktériumok lenne szükség, hogy ellenőrizze a részvétel kitin emésztés ezek szimbionta. Ezért valószínű, hogy a kitin a rovarevő denevérfajokra roncsoljuk kombinációja endogén gyomor AMCase és kitináz által szekretált bélbaktériumok, ahogy azt javasolták m. musculus katalógusa [17]. Ez a tanulmány egyértelműen bizonyítja, hogy az európai rovarevő denevérek a család Vespertilionidae van emésztőenzim AMCase. Megmutattuk, hogy ez az enzim aktív található, és a gyomorban, különösen, vagy bárhol a legfőbb sejtek az alapja a gyomor mirigyek. Katalógusa