PLOS NËMMEN: Insectivorous Fliedermais erbléckt Chitin am Mo. Ausschöpfung dono Mammalian Chitinase

Wat VerfÜgung

D'gastrointestinal TRACT vun Déieren ass op sechste Quell vu Liewensmëttel ugepasst un Ressource benotzen an Energie ofgeroden optimiséieren. Marchandise Fliedermaus Arten friesse meeschtens op arthropods. Dës enthale der Energie-räiche rechnen chitin, déi fir de endogenous Enzymen vun engem typesche mammalian gastrointestinal TRACT indigestible ass. Mä, soll d'gastrointestinal TRACT vun Fliedermaus Aarten ze hir Ernährung adaptéiert ginn a konnt ginn chitin zu erbléckt. Mir Hypothes, datt (i) Europäescher vespertilionid Fliedermaus Aarten hunn d'digestive Aktivitéit chitinase an datt (II) de chitinolytic Aktivitéit ass am Daarm läit, wéi huet fir North American Fliedermaus Arten fonnt ginn. D'gastrointestinal tracts vun siwen Fliedermaus Aarten ( Pipistrellus pipistrellus VerfÜgung, Plecotus auritus VerfÜgung, Myotis bechsteinii VerfÜgung, Myotis nattereri VerfÜgung, Myotis daubentonii
, myotis myotis, VerfÜgung a Nyctalus leisleri VerfÜgung) huet fir chitinolytic Aktivitéit vun Diffusion assay getest. Gastrointestinal tracts vun P. pipistrellus VerfÜgung, P. auritus VerfÜgung, M. nattereri VerfÜgung, M. myotis, VerfÜgung a N. leisleri VerfÜgung sech fir dono mammalian chitinase duerch westlech blot Analyse iwwerpréift. Ray Rubriken vun der gastrointestinal TRACT vun P. pipistrellus VerfÜgung sech immunohistochemically der dono mammalian chitinase Geldautomat ze analyséieren. Chitinolytic Aktivitéit war an der Mamm vun all Fliedermaus Arten fonnt. Western blot Analys confirméiert de dono mammalian chitinase am Mo. Echantillon. Immunohistochemistry vun der P. pipistrellus VerfÜgung gastrointestinal TRACT uginn, datt dono mammalian chitinase am Mo. Chef Zellen op der Basis vun der gastric Glands etabléiert ass. Zu der Konklusioun, hunn europäesche vespertilionid Fliedermaus Arten dono mammalian chitinase datt am gastric Glands vun de Mo. produzéiert gëtt. Dofir, Perséinlechkeeten der gastrointestinal tracts vun insectivorous Fliedermaus Arten en enzymatic Upassung un hir Nahrung VerfÜgung

Fro:. Strobel S, Roswag A, Becker NI, Trenczek TE, Encarnação JA (2013) Insectivorous Fliedermais erbléckt Chitin am Mo. Ausschöpfung dono Mammalian Chitinase. PLoS NËMMEN 8 (9): e72770. Doi: 10.1371 /journal.pone.0072770 VerfÜgung

Redakter: François Blachier, National Institut vun Agronomic Fuerschung, Frankräich VerfÜgung

Arnaque: 26. Mäerz 2013; Akzeptéiert: 12 Juli, 2013; Publizéiert: September 3, 2013 VerfÜgung

Copyright: © 2013 Strobel et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Funding:. D'Auteuren hu keng Ënnerstëtzung oder Fonge fir Rapport VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. d'Auteuren, datt keng Competitioun Interessen existéieren deklaréiert hunn VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

hunn Déieren Liewensmëttel ze schléckt an erbléckt d'ze garantéieren kontinuéierlech Funktionéiere hir intern ukuerbelt vun Eechenholz, zum Beispill, hir Energie, FAQ a Vitamin Ufuerderunge [1]. Der Multi-Etapp Prozess vun unzereegen ëmfaasst mechanech, chemesch an enzymatic Schrëtt fir Ëmrechnung nährstoffaarme [2]. Fliedermaus Aarten hunn e masseräichen-spezifesch Energie Nofro wéinst hirer klenger Gréisst an d'Fähegkeet aktiv ze fléien [3], [4]. An Teppech Déieren, brauch Liewensmëttel séier d'Energie Nofro duerch fräi fléie Mass [2] ëmmer ze reduzéieren huet misse verschafft ginn. Europäesch Fliedermaus Aarten hunn e Regime aus Kannerbetreiung vun arthropods [5]. Si hu kuerz Reklassement Mol [6] mä en héije digestive Effizienz [7]. Dëst deit drophin, datt hir gastrointestinal (gi) TRACT héich hir Ernährung ugepasst ass well et arthropods séier a grëndlech digests. Dofir, kéint et gewinnt sinn, datt europäesch Fliedermaus Arten hänkt op Glidderfüssler-spezifesch digestive Enzymen. Zanter arthropods bis zu 75% chitin aus (Energie Inhalt 21,2 Wandjann /g, [8]), et ass duerchaus plausibel datt Fliedermaus Arten chitinous Material ze erbléckt si kënnen, wéi nach an anere vertebrates wéi d'europäesch gréng Eidechs Gewise ginn ( Lacerta VIRIDIS VerfÜgung), der gemeinsamer Märel ( Turdus merula VerfÜgung) an de roude Fuuss ( Vulpes Vulpes VerfÜgung) [9], [10]. VerfÜgung

Chitin kann duerch chitinases (CE 3.2.1.14) an e puer lysozymes (CE 3.2.1.17) [11], [12] deforméiert ginn. An Mamendéieren, hunn nëmmen zwou chitinases identifizéiert ginn: chitotriosidase an dono mammalian chitinase (AMCase) [13], souwuel vun deem wéi endochitinases séiert ginn [14]. Chitotriosidase ass haaptsächlech duerch phagocytes an Akte géint chitin-haltege pathogens [15] secreted. AMCase huet sou wäit nëmmen gouf an Mais (Mus musculus), macaques (Macaca fascicularis) a Mënschen [16], [17] identifizéiert. Et ass héich an de Mo a haett ausgedréckt, engem Ofwaassersystem digestive an immunological Funktioun besot [16], [17]. Chitinolytic Aktivitéit kann stamen och vum microorganisms produzéiert aus endogenous Enzymen, ingested Liewensmëttel an der gi TRACT, oder Enzymen [18], [19]. VerfÜgung

Chitinolytic Aktivitéit am gi TRACT huet zu puer insectivorous Fliedermaus Arten fonnt ginn [8], [9]. Mä, et ass kee Wëssen iwwer de jeeweilegen Aktivitéit. Jeuniaux [9] ubelaangt chitinolytic Aktivitéit am gi TRACT vun Rhinolophus ferrumequinum VerfÜgung, eng europäesch Fliedermaus Arten vun der Famill Rhinolophidae. Whitaker et al. [8] bewisen chitinolytic Aktivitéit am gi TRACT vun North American vespertilionid Fliedermaus Arten vun der genera Myotis VerfÜgung, Eptesicus VerfÜgung, Nycticeius VerfÜgung, Lasiurus VerfÜgung , Pipistrellus VerfÜgung a Lasionycteris VerfÜgung. Si isoléiert chitinase-produzéiert Bakterien analyséieren vum Daarm als Quell fir d'chitinolytic Aktivitéit. Am Géigesaz, Jeuniaux [9] fonnt Beweiser vun chitinolytic Aktivitéit am gastric mucosa vun de Mo. vun Rhinolophus ferrumequinum VerfÜgung hierkommen Daarm kee chitinolytic Aktivitéit Schatzkummer. Allerdéngs, Buchholz, Wells & Conaway [20] konnt kee chitinase an der insectivorous Fliedermaus Arten entdecken Pipistrellus subflavus VerfÜgung a Myotis grisescens VerfÜgung. Nieft chitinases, sinn e puer lysozymes gebass chitin [11], [12] ze verbidden. Zum Beispill, Phillips, Weiss & Tandler [21] fonnt lysozyme zu salivary Glands vun insectivorous Fliedermaus Aarten a spekuléiert, datt et esou eng chitinolytic Aktivitéit an de Spaut handelen kéint. Allerdéngs, lysozymes sinn haaptsächlech Anti-bakteriell a sinn e wichtege Bestanddeel vun der immun System [22] oder fir Verdauung vun Bakterien am ruminants [12]. VerfÜgung

Mir hypothesize datt (i) Europäescher insectivorous Fliedermaus Arten vun der Famill Vespertilionidae besëtzen chitinolytic Aktivitéit am gi TRACT, wéi huet fir North American insectivorous Fliedermaus Arten [8] an eng europäesch Fliedermaus Arten vun der Famill Gewise ginn Rhinolophidae [9] a (II) de chitinolytic Aktivitéit ass am Daarm läit, wéi schonn huet dës Distanz an North American Arten [8]. An dëser Etude, läit mir chitinolytic Aktivitéit an identifizéiert den entspriechende Aktivitéit als AMCase eng Aktivitéit assay, immunoblotting an immunohistochemistry benotzt. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

IFLA- Ausso VerfÜgung

All Individuen benotzt dës Etude ass um fräiwëlleg Rééducatioun Centrë fir Fliedermais. Si waren déi Fräiwëlleg, ouni all Zort vun Remboursement geliwwert. Laut der däitscher Déierenschutzorganisatiounen Act (TSchG §4 (3)) an zu der Bundesrepublik Natur- Act (BNatSchG §45 (4)) ass keng Autorisatioun gefrot op carcasses ze schaffen. D'Maus Mo. war e Rescht vun enger Etude vum Institut vun Anatomie an Zell Biologie am Justus-Liebig-Universitéit vun Gießen déi déi regional Gemengerot (Nr V54-19C20 /15C Gießen 20/23 400AZ) abruecht huet. Nee Déier fir d'Ziler vun dëser Etude ëmbruecht. VerfÜgung

Ray Stockage VerfÜgung

Carcasses sech direkt nom Doud bei -20 ° C gespäichert. Fliedermais sech op Äis geliwwert i.e. un der Universitéit vun Gießen gefruer. D'carcasses sech fir e Maximum vu sechs Méint bei -80 ° C bis Otemschwieregkeeten Virbereedung gespäichert. Macro- an microscopic Observatioune Fra d'ganz gutt Erhalen vun Organer a Zellen datt enzymatic an histological Examen vu Stoffer méiglech gemaach. VerfÜgung

Ray Virbereedung VerfÜgung

Carcasses vun siwen insectivorous Fliedermaus Arten ouni Unzeeche vun putrefaction ( pipistrellus pipistrellus VerfÜgung ( n VerfÜgung = 14), Plecotus auritus VerfÜgung ( n VerfÜgung = 3), Myotis bechsteinii VerfÜgung ( n VerfÜgung = 1), Myotis nattereri VerfÜgung ( n VerfÜgung = 3), Myotis daubentonii VerfÜgung ( n VerfÜgung = 2) , Myotis myotis VerfÜgung ( n VerfÜgung = 1) a Nyctalus leisleri VerfÜgung ( n VerfÜgung = 1)) waren an dëser Etude (Table 1 benotzt) . No der postwendend misse Mauer Ouverture, war de gi TRACT mat 0,9% NaCl geläscht, gewäsch, an op filter Pabeier gedréchent. Déi gi TRACT war an der esophagus, Mo, Ausléiser, jejunum /ileum, ileum /Colon an Colon /rectum der Ishikawa et al ënnerdeelt. [23] an op engem digitale Skala gewien (EW2200-2NM, Genauegkeet: 0,01 g; Kern & Sohn GmbH, Balingen, Däitschland). Zousätzlech, de Mo vun engem Mus musculus VerfÜgung (Deformatioun C57BL /6, Black 6; n VerfÜgung = 1). War als positive Kontroll fir AMCase Detectioun vum südwestlechen blotting benotzt VerfÜgung

Virbereedunge soluble FAQ ufale VerfÜgung

gi TRACT Segmenter vun Net-fix, frësch uplanzen vun P. pipistrellus VerfÜgung ( n VerfÜgung = 11), P. auritus VerfÜgung ( n VerfÜgung = 3), M. bechsteinii VerfÜgung ( n VerfÜgung = 1), M. nattereri VerfÜgung ( n VerfÜgung = 3), M. daubentonii VerfÜgung ( n VerfÜgung = 2), M. VerfÜgung myotis ( n VerfÜgung = 1) a N. leisleri VerfÜgung ( n VerfÜgung = 1) an de Mo vun M. musculus VerfÜgung goufen individuell Buedem zu engem Zement an pestle mat extra-reng Mier Sand (Merck, Däitschland) an 0,9% NaCl (standardiséierte Otemschwieregkeeten Montant: 1 ml pro 100 mg Otemschwieregkeeten) weider. D'homogenates sech Nuecht op 4 ° C [10] an dann centrifuged (20 min, 3500 g, 4 ° C) incubated. D'supernatants sech bei -20 ° C bis weideren Analyse huet VerfÜgung

Entschlossenheet vun chitinolytic Aktivitéit VerfÜgung

chitinolytic Aktivitéit, agarose gelies Placke bereet waren ze moossen wéi vun Zou, Nonogaki &beschriwwen. Welbaum [24] mat e puer Ännerungen. Säin Seier drëm chitin war bei 4 ° C fir 48 h duerch Vermëschung 10 g chitin aus wëllen Deckelen (Roth, Däitschland) mat 100 ml 85% Säin Seier an incubated virbereet. Dunn 2 L kal fléissendem Waasser dobäi an de schéine Kuch Katakombe war bis pH 6,5 erreecht gouf [25], [26]. Agarose (1,6%) war an incubation Prellbock (pH 5.0) [24] zu enger Schleck erëm Uewen an Iwwerleeungen zu 50-60 ° C opgeléist. Uschléissend gëtt, war d'Säin Seier drëm chitin (0,5%) ugebaut an 10 ml vun dëser Ophiewe war pipetted an 85-mm Petri Platen. No gekräizt, ware 4-mm-Duerchmiesser Wells an der agarose a gelies Stécker ausgepöppelt huet mat enger Waasser-Jet Pompel geläscht VerfÜgung

Lyophilized Pudder vun Standard chitinase vun Serratia marcescens VerfÜgung (5 U. Fläch-Aldrich, Däitschland) war an 1 ml incubation gefiermt wéi de Standard Bourse Léisung opgeléist. Eng bekannt Konzentratioun vu Standard chitinase war fir all zappen dobäi als Referenz an incubation gefiermt als negativ Kontroll benotzt gouf. Éischt, 6 μL Echantillon vun all Léisung sech pro gutt pipetted, no deem de Placke fir 20 min bei Raumtemperatur incubated sech Echantillon ze erlaben an déi aal bis diffusen. Dunn war en zousätzlech L Prouf gutt un all derbäi a Placke waren fir 20 min duerch incubation bei 37 ° C fir 20 h duerno bei Raumtemperatur incubated. fir 10 min an Katakombe mat destilléiert Waasser fir 2 h; Agarose Placke waren da mat 0,1% calcofluor (Fläch, MO, USA Calcofluor Brightener M2R) geschriwwen. Lytic Zonen sech mat UV transillumination visualized an dann fotografeschen. Duerchmiesser vun lytic Zonen waren gemooss mat GIMP (Versioun 2.6.11; www.gimp.org). eng Referenz dilution Serie vun der chitinase Bourse Léisung mat incubation gefiermt Aktivitéit Aktivitéiten benotzt Zone Duerchmiesser versus uräicheren vun Konzentratioun an Variant tëscht Placke waren ugepasst fir intern chitinase Standarden benotzt op all Petri Plat berechent huet. VerfÜgung

enzymatic Aktivitéit ze analyséieren bei verschiddene pH Wäerter, gelies Placke waren virbereet wéi virdrun, mä mat verschiddene pH Wäerter (pH 4.0, pH 5.0, pH 6.0, pH 7.0 an pH 8.0). Supernatants vun de Mo, Ausléiser, jejunum /ileum, ileum /Colon an Colon /rectum vun engem eenzelne vun P. pipistrellus VerfÜgung sech benotzt. D'lytic Zonen sech mat UV transillumination an analyséiert wéi virun visualized. Zousätzlech, PH Wäerter vun der gi TRACT Rubriken vun fënnef Persounen vun P. pipistrellus VerfÜgung benotzt multicolor-kodéiert pH Pabeier gemooss (pH 0.0-6.0: Acilit, Genauegkeet 0,5; pH 6.5-10.0: Special Luucht, Genauegkeet 0.3; Merck). VerfÜgung

Expression vun chitinase am gi TRACT VerfÜgung

Western blot Analyse. VerfÜgung

Western blotting war standing ze identifizéieren an biochemically chitinase am gi TRACT vun europäeschen Fliedermaus Arten Geldautomat an chitinolytic Aktivitéit vun lysozymes ëmmer vir. Supernatants vun Otemschwieregkeeten Echantillon aus sechs Fliedermaus Aarten (gi TRACT Rubrik Echantillon (Mo, Ausléiser, jejunum /ileum, ileum /Colon an Colon /rectum):. P pipistrellus VerfÜgung ( n VerfÜgung = 2 ), P. auritus VerfÜgung ( n VerfÜgung = 2), M. nattereri VerfÜgung ( n VerfÜgung = 1), M. myotis VerfÜgung ( n VerfÜgung = 1) a N leisleri VerfÜgung ( n VerfÜgung = 1); zousätzlech Mo. Echantillon:.. P pipistrellus VerfÜgung ( n VerfÜgung = 9), M. nattereri VerfÜgung ( n VerfÜgung = 1), M. daubentonii VerfÜgung ( n VerfÜgung = 2)) an de Mo vun engem M. musculus VerfÜgung als eng positiv Kontroll benotzt [27] zu Natrium dodecyl sulfate-polyacrylamide electrophoresis ënnerworf waren (SDS-PAGE) (Laemmli [28] geännert der Sambrook, Fritsch & Maniatis [29]). VerfÜgung

Supernatants vun all 750 μg Otemschwieregkeeten huet fir 3 min 1:1 zu 2 × SDS gelies-Luede gefiermt a gehëtzter bis 95 ° C gemëscht. Vun all Prouf, war 15 μL zu engem 12% Léisung gelies a 5% stacking gelies ënnerworf. Electrophoresis war ënner reduzéieren Konditiounen op engem Volt 100 V. De getrennt Proteinen fir 1 h waren electroblotted op engem konstante Stroum vun 0,8 MA /cm 2 op PVDF Schläimhait duerchgefouert. D'blots sech mat 5% Nët-Fett gedréchent Mëllech an Tris gefiermt Salins (TBS, pH 7.5) mat 0,1% Tween 20 (Roth) fir 1 h virun incubation mat enger Kanéngchen polyclonal antibody ausernee géint d'N-Uschloss vun dono chitinase gespaart ( AVIVA Wunnengen Biologie, CA, USA; verdënntem 1:1000 zu TBS mat 1% BSA) bei 4 ° C Iwwernuechtung. (; L H &) (Roth, Anti Kanengchen-AP 4751; No mat TBS wäschen 0,05% Tween 20 an 0,1% BSA wouvun, goufen d'Schläimhait fir 1 h mat alkaline phosphatase-conjugated Geess polyclonal antibody zu Kanéngchen IgG incubated verdënntem 1:7500 zu TBS mat 1% BSA). D'blots sech véier Mol gewäsch a antibody bindend war vun incubation mat bromochloroindoyl phosphate (Bethesda Research Laboratoiren, MD, USA) an nitroblue tetrazolium Realitéiten visualized (Biotech Trade & Service GmbH, Däitschland) no Harlow an Lane [30]

Immunohistochemistry. VerfÜgung

AMCase op der bewosst Niveau, immunohistochemical Analyse iwwert gi TRACT Segmenter vun P standing fir localize war. pipistrellus VerfÜgung ( n VerfÜgung = 3). Déi gi TRACT Deeler sech fir 24 h zu 4% paraformaldehyde zu phosphate-gefiermt Salins (pH 7.0) fix ier se 4 × 1 h mat TBS gewäsch huet. Dunn huet sech de Otemschwieregkeeten Bleck léif an enger graded Ethanol Serie (30%, 50%, 70%, 90%, 100%) a schliisslech zu paraffin Ënnerbewosstsinn. D'paraffin Bleck waren an Rubriken vun 4-9 μm deck Géigewier engem Sledge microtome (LEITZ, Däitschland) benotzt an huet Iwwernuechtung gedréchent. Fir zougänglech antigen bindend Siten, Otemschwieregkeeten Rubriken sech mat pepsin (Fläch) predigested der Goto et al kréien. [27]. De Rubriken huet mat 0,01% Tween 20 an TBS gewäsch. Nonspecific Siten sech mat 5% Geess serum (Merck) an 3% BSA (AppliChem, Däitschland) gespaart. D'Sektiounen sech un d 'Kanéngchen polyclonal antibody ausernee géint d'N-Uschloss vun dono chitinase ausgesat (AVIVA Wunnengen Biologie; 1:200 zu TBS mat 1% BSA verdënntem) an engem moist ëmkomm. Unbound antibodies sech duerch wäschen mat TBS geläscht, ier de Lycée antibody (ChromeoTM 546, Abcam, UK; 1:2500 vun 0,5% BSA zu TBS verdënntem) applizéiert gouf. Fir nuklear counterstaining Rubriken huet mat 0,05% 4 'incubated, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) (AppliChem). No engem Finale do falsch mat TBS, huet de Rubriken mat 1,4-diazabicyclo schéi [2.2.2] octane Léisung (DABCO) (Fläch). Fir Kontroll vun autofluorescence a verbindlech Spezifizitéit vun der antibodies de Rubriken mat fluorescein isothiocyanate verschafft goufen (FITC) Fortgeschratten Secondaire antibody mä ouni Primärschoul antibody. De Rubriken huet mat enger fluorescence microscope bewäert (Olympus BX60 F-3; Olympus Optical Co LTP, Däitschland). VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

Chitinolytic Aktivitéit VerfÜgung

Mir kënnen sech chitinolytic z'entdecken Aktivitéit an der Mo. Echantillon vun all Persounen (zB Figebam. 1) a vun de Colon /rectum Prouf vun eent, M. myotis, M. nattereri VerfÜgung a N. leisleri VerfÜgung all (Table 2). Nee chitinolytic Aktivitéit konnt an der Ausléiser, jejunum /ileum oder ileum /Colon Echantillon gemooss ginn. D'chitinolytic Aktivitéit am Mo. Echantillon war héchste tëscht pH 5.0 an pH 6.0 (Figebam. 2). Ënnerstëtzen eis virdrun Resultater, war kee chitinolytic Aktivitéit vun den anere Regioune vun der gi TRACT, egal PH fonnt. Déi heeschen PH vum gi TRACT vun P. pipistrellus VerfÜgung ( n VerfÜgung = 5) war am Mo. 5,6 ± 0,2, 7.0 ± 0.3 vun der Ausléiser, 7.1 ± 0,2 an der jejunum /ileum, 7.0 ± 0,2 an der ileum /Colon an 7.0 ± 0,5 an de Colon /rectum. VerfÜgung

Expression vun chitinase am gi TRACT VerfÜgung

Western blot Analyse vun den M. musculus VerfÜgung Mo. weisen eng charakteristesch Band op engem relativ molekulare Gewiicht vun 46 h, beweist d'Präsenz vun AMCase. Ausserdeem, an all Mo. Echantillon vun P. pipistrellus, P. auritus, M. nattereri VerfÜgung, M. myotis VerfÜgung, an N. leisleri VerfÜgung eng kloer FAQ Band um 46 h identifizéiert huet (fir Vertrieder westlech blot Biller, gesinn Figebam. 3 fir Pipistrellus VerfÜgung an Figebam. 4 fir Plecotus, Myotis VerfÜgung a Nyctalus VerfÜgung). Dëst FAQ Band war am esophagus, Ausléiser, jejunum /ileum, ileum /Colon oder Colon /rectum Echantillon vun der Fliedermaus Aarten (Figebam. 3) net fonnt. All waren immunohistochemical Resultater kontrolléiert fir autofluorescence an unspecific vun der Première FITC-kräftegen antibody obligatoresch. Mo. Rubriken sech positiv fir anti-AMCase antibody Etikette hierkommen an der esophagus, Ausléiser, jejunum /ileum, ileum /Colon an Colon /rectum Sektiounen net bindend festgestallt gouf. An de Mo. Rubriken, war anti-AMCase Etikette bis ënnen vun der gastric Glands limitéiert laanscht de gastric mucosa ronderëm d'DAPI-Kierchefënster Zell Kären (Figebam. 5). VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Mir Hypothes dass europäesch insectivorous Fliedermaus Arten vun der Famill Vespertilionidae hunn d'digestive Aktivitéit chitinase. Dës Hypothes war vun der Präsenz vun chitinolytic Aktivitéit an d'Mamm vun der studéiert Arten confirméiert. Ausserdeem, engem richtegen chitinase, méi speziell AMCase, biochemically zu all Mo. Echantillon identifizéiert ginn hätt. Aktiv chitinases sinn gemeinsam an ënnert Mamendéieren conserved [14]. Allerdéngs, ënnerscheeden der Plaz a Funktioun vun der AMCase ënnert Naturschutz an sinn net komplett geléist [31]. VerfÜgung

Mir Hypothes weider, datt d'chitinolytic Aktivitéit am Daarm wellkomm ass, virun allem an de klenge Daarm, wéi et der gëtt Site wou den Haaptgrond enzymatic unzereegen an Tellur Plaz hëlt [32]. Eis Resultater confirméieren rauszesichen dëser Hypothes wéi chitinolytic Aktivitéit en der huet haaptsächlech an de Mo a fir dräi Persounen an niddreg Aktivitéit Niveau vun de Colon /rectum. Déi héich Verännerlechkeet vum chitinolytic Aktivitéit am studéiert Persounen kéint vun verännerlech digestive Aktivitéit vun Individuën an der Zäit vun den Doud verursaacht ginn. Dëst ass duerch verschidden Deeler vun Liewensmëttel an der gi tracts fonnt ënnerstëtzt. D'chitinolytic Aktivitéit am Mo. Echantillon awer net zu Colon /rectum Echantillon Originen an d'Aktivitéit vun der AMCase an net zu engem lysozyme duerch westlech-blotting ginn hätt. Der Aktivitéit vun Fliedermaus AMCase war optimal tëscht pH 5.0 an pH 6.0. Dës pH Niveau sinn ähnlech wéi déi dono MILIEU an der Mamm vun insectivorous Fliedermaus Arten wéi am Moment studéieren gemooss an Untersuchungshaft vun Naumova an Zharova [33]. Dëst ass eng éischt Indikatioun fir de biologeschen Relevanz vun AMCase während unzereegen an dësem Deel vun der gi TRACT. Allerdéngs, weider Experimenter wéi digestive Effizienz Prozesser soll zu Test gehaal ginn, wann d'Aktivitéit vun AMCase enger biologescher Bedeitung fir chitin unzereegen fällt. AMCase huet eng duebel Funktioun vun excellence an Verdauung vun chitin-haltege Organismen [34], [35]. Zum Beispill, ass mënschlech AMCase net un der dono Ëmwelt an de Mo. ugepasst, am Géigesaz zu der AMCase zu Mais fonnt [31]. De Mo AMCase vun M. musculus VerfÜgung enthält Auswiesselungen Aminosaier, datt fir d'adaption fir d'dono MILIEU vun de Mo [31] néideg sinn. Ausserdeem, Boot et al. [17] bewisen, dass d'AMCase mRNA vun M. musculus VerfÜgung ass nëmmen am Mo. fonnt. Wann dës Aminosaier Auswiesselungen an der AMCase vun Fliedermaus Arten präsent sinn Iwwerreschter gewise gin. VerfÜgung

D'immunohistochemical Resultater vun dëser Etude ënnerstëtzt d'Lokalisatioun vun AMCase am Mo vun Fliedermaus Arten, besonnesch an der gastric Glands vun der mucosa . Doriwwer eraus, hunn mir datt d'Aktivitéit am oder ronderëm de Chef Zellen op der Basis vun der gastric Glands läit matzen war, wéi virdrun fir de Mo AMCase vun M gewise gouf. musculus VerfÜgung [27], [31], [34]. Chief Zellen secrete digestive Enzymen [36] déi vun de Medien cytoplasmic granules etabléiert ginn [37]. Eng gemeinsam Aktivitéit vun dëser gastric Zell Typ produzéiert gëtt pepsinogen, e Virleefer vun der proteolytic Aktivitéit pepsin [38]. Goto et al. [27] bewisen, dass d'Produktioun Site vun Mo. AMCase vun M. musculus VerfÜgung ass an dëse secretory granules. Dofir, et ass Wahrscheinlechkeet dass AMCase och vun gastric Chef Zellen zu Fliedermaus Arten secreted ass. Dat ass contraire zu de Resultater vun Whitaker et al. [8], dohinnergestallt deen dat chitinase zu Fliedermaus Arten duerch chitinase-produzéiert Bakterien analyséieren produzéiert gëtt (meeschtens vun der Famill Enterobacteriaceae) am Daarm. Et ass bekannt, datt intestinal Bakterien chitinase produzéiere hir eege muss erfëllen [39] zu zefridden. Allerdéngs, chitinase-produzéiert enterobacteria kann och am gi tracts vun Mamendéieren fonnt ginn, datt op chitinous Material feed do net [19]. Dëst deit drophin, datt et keng Verbindung tëscht chitin unzereegen an chitinolytic Bakterien ass. An dëser Etude, war niddereg chitinolytic Aktivitéit gemooss am intestines vun nëmmen e puer Persounen, an hätt kee AMCase festgestallt ginn, wann déi Daarm vun de Mo. ofgetrennt. Dëst heiansdo chitinolytic Aktivitéit kann am Mo an der Daarm mat de Liewensmëttel produzéiert vum Transport vun der AMCase erklärt ginn, wéi déi vun Suzuki et al diskutéiert. [34] an Boot et al. [17]. déi niddreg chitinolytic Aktivitéit am Daarm vun chitinase-produzéiert enterobacteria verursaacht ginn [8] kann Zousätzlech. Allerdéngs wier waren quantification vun deene Bakterien d'Participatioun vun chitin Verdauung vun dësen symbionts fir z'iwwerpréiwen. Dofir, et ass plausibel datt chitin zu insectivorous Fliedermaus Arten duerch eng Kombinatioun vun endogenous Mo. AMCase an chitinase vun intestinal Bakterien secreted verdaut ass, wéi war fir M ugeholl. musculus VerfÜgung [17]. Dës Etude beweist kloer dass europäesch insectivorous Fliedermais vun der Famill Vespertilionidae der digestive Aktivitéit AMCase hunn. Mir weisen dass dës Aktivitéit aktiv ass an an de Mo läit, besonnesch am oder ronderëm de Chef Zellen op der Basis vun der gastric Glands. VerfÜgung

Arbeschterlidder VerfÜgung

Mir Merci E. Mühlbach, R. Duílio , N. Dittrich an S. Wiegand fir d'Déier Echantillonen an Y. Kühnel, C. von Bredow, A. Diebel an der Mammalian Ökologesch Group fir hier Hëllef. VerfÜgung

• PLOS NËMMEN: Sonic Däreldéier Mediates d'Zouhuelen an Recruitment vun entsti Mesenchymal Stammzellen fir de Mo
• PLOS NËMMEN: Conditionnel Expression vun Wnt9b zu Six2-Positiv BTS desorganiséieren Mo an Niere Funktioun