Effekt av Flabellaria paniculata Cav. extrakt på magsår i rats

Effekt av Flabellaria paniculata
Cav. extrakt på magsår hos råttor Bild Sammanfattning
Bakgrund
Bladen och roten av Flabellaria paniculata
(malpighiaceae) används ofta vid behandling av sår och sår i nigerianska folkmedicinen. Syftet med denna studie var att jämföra effekten av etanol utdrag ur bladen (FPL) och rot (FPR) F. paniculata
magsår hos råttor.
Metoder
Effekten av FPL och FPR (100, 200 och 400 mg /kg) utvärderades i etanol och indometacin magsårsmodeller. Kontrollgrupper för FPL och FPR behandlades oralt med 3% Tween 20 och destillerat vatten respektive. FPL undersöktes ytterligare i pylorus ligering modell. Misoprostol och cimetidin användes som referens
Resultat
FPL avsevärt. (P < 0,05) reducerade magsår med 82,22% och 67,32% i etanol och indometacin-inducerad ulcer modeller på 100 mg /kg respektive medan FPR (100, 200 och 400 mg /kg) inte utöva betydande effekt i de två modellerna. I pylorus-ligering modell, FPL utövade en signifikant förebyggande antimagsårseffekt såsom indikeras genom reduktion av gastrisk volym vid 200 och 400 mg /kg doser. Endast 400 mg /kg av extraktet utövade en signifikant minskning av sårindex vid jämförelse med kontrollgruppen. Oralt LD 50 av FPL uppskattades till 4570 mg /kg medan den för FPR var 2754 mg /kg. LD 50 i intraperitoneal injektion uppskattades till 1202,26 och 1380,38 mg /kg för FPL och FPR respektive. Den phytochemical Undersökningen visade att båda extrakt har triterpenoids och saponin, medan närvaron av flavonoider detekterades endast i FPL.
Slutsatser
Resultaten av denna studie visade att FPL och inte FPR är effektiv mot experimentellt inducerade magsår. Närvaro av varierande fytokemiska beståndsdelar påverkas förmodligen de farmakologiska skillnader mellan de två extrakten.
Nyckelord
Flabellaria paniculata
Cav Malphighiaceae antiulcus Etanol-inducerat sår Indomethacin-inducerad ulcus Pylorus ligering-inducerad ulcus Akut toxicitet Bakgrund
öka konsumtionen av alkohol och icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel (NSAID) och olämpliga dieter har bidragit till den växande sår etiopathology runt om i världen. magsår anses därför en sjukdom i modern tid i samband med allt vanligare missbruk och stressig livsstil [1]. Förutom behandling med syntetiska droger eller förändringar i vardagen, såsom kost och motion, andra intressanta alternativ, särskilt i utvecklingsländer, är användningen av naturläkemedel och beredningar.
Släktet Flabellaria
inkluderar en variabel art och är allmänt distribueras i tropiska Afrika, i skogen, i synnerhet längs floder. Flabellaria paniculata
Cav. (Malpighiaceae) är en klättrande buske, ca 3-15 m hög [2]. Lamina av bladen är i stort sett elliptisk, ovala eller sällan lansettlika och bladskaft är mellan 1-2,5 cm lång.
Bladen och rot av denna växt säljs och ordineras som ingredienser i naturmedel vid behandling av sår och sår om växtbaserade bås i Lagos metropol, Nigeria (informell undersökning). Bladen används också i Ghana om sår och som ett ecbolic i Elfenbenskusten [2]. Sårläkningen och antibakteriella egenskapen av bladet har rapporterats [3, 4]. Denna studie var utformad för att göra en jämförande studie av antimagsårsaktivitet blad (FPL) och rot (FPR) extrakt av F. paniculata hotell med syfte att fastställa vilka av dessa extrakt är mer effektiv som ett antiulcusmedel.
Metoder
kemikalier och läkemedel sälja The följande läkemedel och kemikalier användes: Absolut etanol, kloroform, indometacin (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO, USA); Misoprostol (Cytotec® tablett, läkemedelsföretag, Tyskland), cimetidin (Cetilab-400®, betar Pharmaceutical, Indien), Tween 20, uretan (Aldrich Chemical Co. Ltd, Gillingham Dorset, England).
Försöksdjur
vuxna albino råttor och möss av båda könen (100-150 g och 16-30 g respektive) köptes från försöksdjurs Centre, Redeemer University, Ogun staten och upprätthålls i Animal House College of Medicine, University of Lagos, Nigeria. De inhystes i burar och placeras på standard pellets (djurfoder PLC, Ikeja, Lagos, Nigeria) och fick fri tillgång till rent vatten. Varje djur identifierades genom kropps märken med 1% pikrinsyra lösning. De hölls i välventilerade rum med 12/12 h ljus /mörker och rumstemperatur. Djur anskaffades två veckor före experimenten för att acklimatisera med laboratoriemiljön. De experimentella metoder som används i denna studie överensstämmer med de amerikanska National Institutes of Health riktlinjer för vård och användning av försöksdjur i biomedicinsk forskning [5] och godkändes av utskottet för etik inom djurförsöks av College of Medicine, University of Lagos, Lagos , Nigeria.
växtmaterial sälja The växtmaterial samlades från Ilaro, Egbado i Ogun State, Nigeria, i juli 2010. anläggningen proverna bestyrkas av Mr TK Odewo av herbarium enheten Botaniska institutionen, University of Lagos . Rabatt prov (LUH 2778) deponerades i herbarier av Botaniska institutionen och Institutionen för farmakognosi, Lagos universitet.
Beredning av extrakt
Bladen lufttorkades medan roten skars i bitar och torkas i ugn vid 45 ° C. De torkade proverna maldes i en enhetlig pulver med hjälp av Christy och Norris 8 'Lab Milling Machine (serienummer 50158). De pulverformiga proverna (500 g) var uppblötta med absolut etanol (1,5 L) under 48 timmar vid rumstemperatur med konstant skakning. Därefter tillsattes de resulterande extrakten filtrerades över Whatman nr 1 papper och filtratet indunstades till torrhet under vakuum på rotationsindunstare (Heidolph-Rotacool, Tyskland) vid 38 ° C.
Fytokemiska analys
Preliminär fytokemiska screening och tunna skiktskromatografi (TLC) användes för att utvärdera den kemiska sammansättningen av FPL och FPR råextrakt [6]. FPL eluerades med hexan: etylacetat (17: 3), medan FPR eluerades med butanol: ättiksyra: vatten (4: 1: 5) och avslöjade med reagens specifika kromoforer, Dragendorff för alkaloid; anisaldehyd för terpenoider och järnklorid för fenolföreningar.
tester av akut toxicitet
För bedömning av akut toxicitet, var manliga och kvinnliga möss delades in i grupper om 5 djur vardera. FPL och FPR extrakt gavs p.o. vid doser av 50 till 5000 mg /kg och i.p. vid doser på 50 till 2000 mg /kg. Kontrollgrupperna erhöll 3% Tween 20 och destillerat vatten (5 ml /kg, p.o.) respektive. Mortaliteten inom 24 h period bestämdes och LD 50 uppskattas genom dos-probit-analys-metoden log [7] med användning av GraphPad Prism mjukvara.
Antimagsårs assay
Etanol, indometacin och pylorus-ligering användes som ulcerogen agenter i denna studie. Den antiulcus potential extrakten testades vid tre doser (100, 200 och 400 mg /kg). Upplösning av de torkade extrakten i en gemensam fordonet var en utmaning; Därför har två negativa kontroller användes; destillerat vatten (5 ml /kg) för FPR-extrakt behandlade gruppen och 3% Tween 20 för FPL-extrakt behandlade gruppen. Misoprostol och cimetidin (100 mg /kg) användes som referensläkemedel. Alla läkemedel och extrakt administreras oralt.
Etanol inducerade magsår
Anti-ulcerogen effekt av FPL och FPR extrakt undersöktes först i etanol-inducerad modell sår [8]. Råttor fick fasta i 24 h före administreringen av drogerna och extrakt. På dagen för experimentet, mottog grupper 1-6 (FPL och FPR behandlad grupp) 100, 200 och 400 mg /kg av extrakten (po), grupp 7 och 8 erhöll 3% Tween 20 och destillerat vatten, medan misoprotol ( 100 mg /kg) administrerades oralt under den nionde gruppen. Efter 1 h var samtliga djur ges 1 ml absolut etanol genom oral sondmatning. En timme efter administreringen av etanol, avlivades djuren under eteranestesi. Magen hos varje råtta avlägsnades och öppnades längs den större kurvaturen och tvättades i fysiologisk saltlösning. För mätning av bruttogastriska slemhinneskada var nyligen utskuren mage som platt och slemhinneskada sedan gjorde. Antalet och svårighetsgraden av erosioner var värderade med hjälp av poäng enligt nedan: 0 = ingen skada, 0,5 = Blödning, en = 1-3 små lesioner < 10 mm längd, 2 = 1-3 stora skador > 10 mm längd, 3 = 1-3 förtjockade lesioner, 4 = mer än 3 små skador, 5 = mer än 3 stora skador, 6 = mer än 3 förtjockade lesioner [9]. Resultaten uttrycktes som sårindex (UI). Den procentuella skydd även beräknas med följande formel: Pr otection %
=
UI kontroll -
UI behandlad grupp UI kontroll x
100
Indometacin - inducerad modell
experimentet utfördes i enlighet med metoden av Ezike et al. [10] med några modifikationer. Fyrtiofem fastande djur användes i nio grupper om fem djur vardera. Grupperna 1-6 (FPL och FPR behandlad grupp) erhöll 100, 200 och 400 mg /kg av extrakten (po), grupp 7 och 8 erhöll 3% Tween 20 och destillerat vatten, medan misoprotol (100 mg /kg) administrerades oralt för nionde gruppen. Efter en timme, fick alla djur indometacin 40 mg /kg oralt. Avlivades råttorna med eteranestesi efter sex timmars drogbehandling. Magarna isolerades, tvättades försiktigt med normal saltlösning och skars upp längs den större krökningen. Slemhinneskada ades sedan scored som tidigare nämnts.
Pylorus ligering (PL) -inducerad sår
läkemedel administrerades under en period av 5 dagar genom oral sondmatning och råttorna hölls under 18 h fastande [11]. Djuren bedövades med användning av uretan (5 ml /kg, i.p.), fram buken öppnades och pylorus-ligering gjordes utan att orsaka någon skada på sin blodtillförsel. Djuren berövas vatten under den postoperativa perioden [12]. Efter 6 timmar tillsattes magar dissekerades ut och skars upp längs den större krökningen och magsår poängsattes i den glandulära delen av magen. Volymen av magsaft (ml) och pH-värden bestämdes. Den totala syrasekretionen i magsaften supernatanten bestämdes genom titrering till pH 7,0, med användning av en 0,01 N NaOH-lösning och fenolftalein som indikator.
Statistisk analys
Resultaten analyserades med användning av GraphPad Prism version 5,0 programvara och Students t
-test användes för att jämföra medelvärdena mellan grupperna. Signifikansnivån sattes till p < 0.05.
Resultat
phytochemical analys
Preliminär analys av den kemiska sammansättningen av FPL och FPR extrakt avslöjade närvaron av terpenoider, tanniner och saponiner medan alkaloid inte detekterades i båda extrakten. Flavonoid detekterades endast i bladet, medan antrakinon var närvarande i roten och inte i bladet.
Akut toxicitetstest
Vid högre doser, de flesta djur uppvisade ökad andningsfrekvens, hypoaktivitet, aptitlöshet, och dyspné innan döden. Den orala undersökningen av akut toxicitet producerad LD 50 värden av 4570 och 2754 mg /kg p.o. för FPL och FPR respektive vid 24 timmar. Med avseende på i.p. rutt, ingen död registrerades mellan 50 och 100 mg /kg, medan dödligheten var 100% vid den högsta dosen av 2000 mg /kg för både FPL och FPR. LD 50 uppskattades till 1202,26 och 1380,38 mg /kg i.p. för FPL och FPR respektive.
Effekt på akuta gastriska mukosala lesioner inducerade av etanol
Effekten av oralt administrerat FPL och FPR på gastrisk skada inducerad av absolut etanol visas i tabell 1. Oral administrering av absolut etanol till styr djur (3% Tween 20 för FPL och destillerat vatten för FPR) producerade flera mukosala lesioner i råttmage i form av hemorragiska strimmor med sårindex av 3,00 ± 0,81 och 4,8 ± 0,73 respectively.Table 1 Effekt av F. paniculata blad ( FPL) och rot (FPR) extraherar på etanol-inducerade magsår
Behandling
Dos (mg /kg)
magsårs~~POS=TRUNC
% Skydd

Kontroll (3% Tween 20) -
3,00 ± 0,81 -
FPL
100
0,53 ± 0,37 *
82,22
200
1,25 ± 0,63 *
58.33
400
1,73 ± 1,24
42,22
Kontroll (vatten) -
4,8 ± 0,73 -
FPR
100
3,67 ± 0,67
23,61
200
3,8 ± 0,62
20,83
400
3,6 ± 0,81
25,00
Misoprostol
100
0,3 ± 0,68 *
93,75
resultaten är medelvärdet ± SEM för 5 djur /grupp. * Signifikant skild från kontroll vid p < . 0,05
FPL (100, 200 och 400 mg /kg) hämmade sårbildning med 82, 58 respektive 42%, med 100 mg /kg dos visar den högsta hämning som är statistiskt (p < 0,05) skiljer sig från kontroll (tabell 1). FPR (100, 200 och 400 mg /kg) gav en svagare inhibering av gastrisk lesion med% inhibition av 23, 20 och 25 respektive. Hämningen bland dessa dosgrupper var inte statistiskt signifikant (p > 0,05). Misoprostol, den positiva kontrollen, erbjöd också signifikant skydd (93% inhibition) mot etanol inducerade magsår och effekten var högre än för FPL och FPR.
Effekt på akut magslemhinnan skador inducerade av indometacin
behandling med FPL (100, 200 och 400 mg /kg) och misoprostol (100 mg /kg) reducerade sårindex jämfört med kontrollen (tabell 2). Liknar etanolmodellen, en signifikant skydd (67%) (p < 0,05) registrerades för FPL vid 100 mg /kg. FPR å andra sidan visade mycket svag aktivitet med ingen hämning registreras för 200 och 400 mg /kg doses.Table 2 Effekt av F. paniculata blad (FPL) och rot (FPR) extraherar på indometacin framkallat magsår
Behandling
vid Dos (mg /kg)
Magsårsindex
% Skydd
Kontroll (3% Tween 20) -
5,1 ± 0,56
-
FPL
100
1,67 ± 1,08 *
67,32
200
2,5 ± 1,14
50,98
400
2,33 ± 0,49 *
54,24
Kontroll (destillerat vatten) -
2,92 ± 0,71 -
FPR
100
2,08 ± 0,96
28,57
200
4,5 ± 0,82
0,00
400
3,08 ± 0,95
0,00
Misoprostol
100
0,2 ± 0,48 *
93,14
resultaten är medelvärde ± SEM för 5 djur /grupp. * Signifikant skild från kontroll vid p < . 0,05
Effekt av FPL extrakt på pylorus ligering inducerade magsår
Uppgifterna om antiulcerogena aktivitet både FPL och FPR i etanol och indometacin inducerade modeller tyder på att FPR misslyckats med att minska mag skador inducerade av dessa modeller; Därför var FPR upphörde med.
Effekten av fem dagars behandling med FPL och cimetidin på pylorus ligation inducerad gastrisk skada hos råttor visas i tabell 3. Ytterligare uppgifter om volym, pH och surhetsgrad magsaft presenteras också . Förbehandling med FPL visade en dosberoende antimagsårseffekt som var signifikant (p < 0,05) endast vid 400 mg /kg dos i jämförelse med 3% tween 20 behandlade gruppen. FPL-behandlade gruppen (100 och 200 mg /kg) visade signifikant reduktion (p < 0,05) i volymen av magsyrasekretion. Total syrahalt magsaft minskade också, men inte statistiskt signifikant. Det fanns ingen signifikant förändring (p > 0,05) i pH av både extraktet och cimetidine.Table 3 Effekt av FPL extrakt på pylorus ligation inducerad magsår
Behandling
Dos (mg /kg)
vid Magsårsindex
% Inhibition
Magsaft (ml)
gastric pH
magsyran (mekv /l) katalog
Kontroll (3% Tween 20) -
1,81 ± 0,5 -
0,95 ± 0,11
2,89 ± 0,28
11,04 ± 1,76
FPL
100
1,19 ± 0,26
34,7
0,72 ± 0,21
2,61 ± 0,41
7,17 ±
0,61 200
0,69 ± 0,17
61,9
0,50 ± 0,13 *
2,64 ± 0,19
7,30 ± 0,75
400
0,37 ± 0,25 *
79,6
0,22 ± 0,05 *
3,10 ± 0,21
6,30 ± 1,41
Cimetidin
100
0,62 ± 0,42
42,9
0,86 ± 0,18
3,22 ± 0,33
9,6 ± 0,71
resultaten är medelvärde ± SEM för 5 djur /grupp. * Signifikant skild från kontroll vid p < 0.05.
Diskussion
Magsår är en mycket utbredd gastrointestinal sjukdom, som kännetecknas av störningar i slemhinnans integritet tillskrivas olika aggressiva faktorer (syra, pepsin, stress, Helicobacter pylori, Köpa och NSAID) och defensiva faktorer ( slem, bikarbonat, blodflöde och prostaglandiner) [13]. Olika terapeutiska medel inklusive växtextrakt används för att hämma magsyrasekretion eller för att öka försvarsmekanism mukosalt genom att öka slemproduktion, stabiliserande ytan epitelceller eller interferera med PGs syntes [14]. Denna studie jämför antiulcusaktivitet av etanolextrakt av FPL och FPR i etanol och indometacin modeller. Etanol inducerade modellen används för att screena läkemedel för cellskydd medan indometacin-inducerad magsår modellen visar både cytoprotektion och magsyrasekretion [15]. Dessutom undersöktes effekten av FPL i pylorus ligering modell utvärderas. Denna studie är den första dokumentation om antimagsårsaktivitet av denna växt.
Etanol anses vara en av de medel som inducerar mer intensiva magsår eftersom det främjar allvarliga störningar i magslemhinnan [16]. Etanol inducerar sår genom reduktion av gastrointestinala blodflöde och slemproduktion i magsäckens lumen, en minskning av endogena glutation och prostaglandin nivåer och en ökning av ischemi, gastrisk vaskulär permeabilitet, syra "back diffusion", histaminfrisättning, utflöde av natrium och kalium, inflöde av kalcium, generering av fria radikaler och produktion av leukotriener [17]. I denna modell, FPL reducerade utvecklingen av etanol inducerade magsår, med aktivitet högst vid en dos av 100 mg /kg. Hämningen var 82%, medan misoprostol visade 93% sår inhibering vid jämförelse med kontrollen. Denna observation indikerar gastric cellskyddande effekt av FPL. FPR å andra sidan misslyckades med att inhibera etanol inducerade magsår på råttor.
Icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel såsom indometacin är vanligen använda farmakologiska medel. De inducerar magsår på grund av minskning av endogena prostaglandinsyntesen som är känt för att vara cellskyddande i magslemhinnan [18]. Jämfört med kontroll administrering av FPL hämmade ulcerös skada, med den högsta hämningen noterats för 100 mg /kg dos medan FPR extrakt inte visade någon signifikant aktivitet i denna modell. Denna observation visar att FPL extrakt kan ha skyddat magslemhinnan genom att öka prostaglandinsyntesen och bekräftade den cytoprotektiva effekten av FPL extrakt.
Med tanke på de data som erhållits från etanol och indometacin sår modeller, observationen att svaret av extrakten minskade med ökad dosen är i linje med resultaten av studier på vissa andra växter som rapporterats av andra författare [19-22]. Ett sådant fenomen mindre respons vid högre dos är inte ovanligt med inhemska växter och denna iakttagelse kan bero på "terapeutiskt fönster" effekt som föreslås av Tripathi [23] och Zakaria et al. [24]. Med andra ord kan det vara så att, har effekten av extraktet nått sin maximala nivå vid en dos av 100 mg /kg, den lägsta dosen, som användes i denna studie.
Pylorus ligering är en viktig procedur som visar den möjliga ändringar av parametrarna för maginnehållet t.ex. volym magsaft, total syrahalt och pH [25]. Sår orsakade av pyloric ligering beror på ökad ackumulering av magsyra och pepsin, som leder till autodigesion av magslemhinnan [26]. Hämning av magsyra är en av de viktiga skyddsfaktorer, eftersom överväldigande av mucosal försvarsmekanismer av syranivån leder till sårbildning [27]. I denna modell, endast 400 mg /kg av extraktet utövade en signifikant minskning av sårindex vid jämförelse med kontrollgruppen. FPL utövade en signifikant förebyggande antiulcus effekt i pylorus-ligerad modell såsom indikeras genom reduktion av gastrisk volym vid 200 och 400 mg /kg doser. Dessa resultat tyder på att extraktet störde matsmältnings effekten av ackumulerade magsaft. Magsyrasekretion stimuleras av histaminfrisättning från enterochromaffin-liknande celler i oxyntic körtlar; gastrin, släpptes från G-celler i pyloric magkörtlar och acetylkolin, som frigörs från postganglionära enter neuroner [28]. Minskningen av gastrisk surhet och gastrisk sekretoriska volym kunde tillskrivas antihistamin effekt, eftersom antihistaminläkemedel såsom cimetidin block H 2-receptorer i magen och därigenom minska surheten hos magsaften [27].
Orala vägen LD 50 av FPL uppskattades till 4570 mg /kg medan den för FPR var 2754 mg /kg. LD 50 i intraperitoneal injektion uppskattades till 1202,26 och 1380,38 mg /kg för FPL och FPR respektive. Baserat på toxicitet rating diagram [29] och Hodge och Stemer skala [30]; extrakten kan klassificeras som något giftigt vid oral behandling och intraperitoneal injektion. Även akut toxicitet är en korttidsstudie och det inte dokumentera eventuella toxicitet grov organ, därmed finns det behov av att genomföra en toxicitetsstudie av extrakten lång sikt.
Närvaron av terpenoider, tanniner och saponiner detekterades i FPL och FPR extrakt medan flavonoider var endast närvarande i FPL. Barros et al. [31] rapporterade att fenolföreningar har en antiulcerogena effekt relaterad till cellskyddande aktivitet. Dessutom har flavonoider, såsom quercetin rapporterats att förhindra gastriska mukosala lesioner i olika experimentella modeller genom att öka mängden av neutrala glykoproteiner [32, 33]. Flavonoider har rapporterats skydda magslemhinnan mot skador genom att öka den mukosala prostaglandin innehåll och genom att inhibera histaminutsöndring från mastceller genom inhibering av histidindekarboxylas [34]. Saponiner och triterpenoids har rapporterats ha antimagsårsaktivitet i flera experimentella modeller av bildandet av skyddande slem på magslemhinnan och även skydda slemhinnan från sura effekter genom att selektivt hämma prostaglandin [35, 36]. Dessutom har tanniner visat för utfällning microproteins på platsen för sår och bildar därigenom ett ogenomträngligt skyddande hinna över fodret för att förhindra adsorption av giftigt ämne därigenom förhindra angrepp av proteolytiskt enzym. Dessa växtbeståndsdelar som föreligger i FPL kan vara ansvarig för den observerade aktiviteten.
Slutsats
Föreliggande studie visade att FPL var effektivare mot experimentellt inducerade magsårsmodeller. Detta kan motivera dess användning och validerade införandet av anläggningen i folk preparat för gastrointestinala åtgärder i södra västra delen av Nigeria. Dessa resultat ger grund för vidare studier på FPL. Detaljerad histologisk bedömning kommer att ingå i uppföljningsstudie på FPL, inklusive bioaktiviteten styrd fraktione att bestämma bioaktiva principen (er) i anläggningen.
Förklaringar
Bekräftelse
Författarna vill tacka prof . Adeyemi Egunyomi som underlättat insamling av anläggningen. Tekniskt bistånd från Mr Wale Lasore är mycket uppskattat. Detta arbete stöddes av bidrag från University of Lagos (CRC NO. M2010 /03).
Konkurrerande intressen
Författarna förklarar att de inte har några konkurrerande intressen.

• Gastric utlopp obstruktion på Bugando Medical Centre i nordvästra Tanzania: en prospektiv granskning av 184 fall
• Prognostisk betydelse för Cdx2 immunhistokemisk uttryck i magcancer: en meta-analys av publicerade litteraturer