Zmiešaná populácia Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii a "Helicobacter heilmannii" v žalúdočnej sliznici mačky domáce

Zmiešaná populácia Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii stroje a "Helicobacter heilmannii
" v žalúdočnej sliznici mačky domáce
abstraktné
pozadia
Prítomnosť Helicobacter
v žalúdočnej sliznici je zodpovedný za výrobu patológie v mnohých živočíšnych druhov, vrátane človeka. Vzhľadom k tomu, ľudia Ukázalo sa skrývajú mnoho z rovnakých druhov baktérií, ako domácich mäsožravcov, znepokojenie nad ich zoonotic potenciál rastie. Helicobacter pylori
, trieda 1 karcinogén zodpovedný za prípadov gastritídy a rakoviny žalúdka u ľudí, produkuje podobnú patológiu v spoločenských zvierat šeliem a je považovaný za príklad anthroponosis. Prípad tu prezentované odkazuje na 13 rokov starý zmiešané plemeno spayed samica mačky vidieť pri pitve.
Zistenie
vzoriek žalúdka boli analyzované na prítomnosť Helicobacter
spp. podľa cytológie, histopatológie a PCR. Mierne slizničnej atrofia bola pozorovaná vo fundu a dutine, zatiaľ čo lymphoplasmocytic preniká je uvedené inak v lamina propria antra. Helicobacter
-ako organizmy boli pozorované v korpuse a dutine, ktorá zaberá žalúdočné žľazy a povrch sliznice. To bolo možné detekovať Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii stroje a H. bizzozeronii
vo fundu, korpus a antra pomocou PCR, pričom v dutine PCR vzoriek bolo pozitívnych pre H. pylori
.
závery
spayed samica v rámci štúdie by mohli predstavovať buď doteraz un-opísal populácie domácich mačiek infikovaných H. pylori
alebo prípadu anthroponosis.
kľúčové slová
mačacie Helicobacter
Zoonóza Gastritída PCR histopatológie nálezy
pozadí
Helicobacter pylori
je gram negatívne, pozitívne ureáza, špirálové baktérie klasifikované Svetovou zdravotníckou organizáciou ako trieda 1 karcinogén ako jeho vzťahu k ľudský gastritída a rakovina žalúdka bola pevne stanovená [1]. Väčšina z 32 druhov opísaných doposiaľ sú enterickej mikroorganizmy cicavcov, zatiaľ čo 12 druhy sú žalúdočné obyvateľov. Štyri druhy sú teraz považované za bežné v žalúdočnej sliznici domácich mäsožravcov Helicobacter felis
, Helicobacter bizzozeronii
Helicobacter Salomonis
, "Helicobacter heilmannii"
typy 1, 2 a 4 [2, 3], zatiaľ čo úloha H. bilis '
ako primárny žalúdočným organizmom je sporná. Hoci patogénne úloha týchto druhov v žalúdku a /alebo rakovinu žalúdka ešte musí byť pevne usadený v domáce zvieratá [4, 5], mačkovité šelmy sa zdajú byť oveľa náchylnejšie potom očné zuby [6]. Žalúdočné fibrózy a atrofia boli spojené s H. felis infekcie u mačiek
[7], zatiaľ čo prítomnosť lymfatických folikulov a zápalu boli v súvislosti s Helicobacter
spp. a "H. heilmannii "senso lato
kolonizácie [8, 9].
Bolo navrhnuté, že, podobne ako H. pylori
infikovaných ľudí, prítomnosť H. heilmannii
by mohol hrať úlohu v mačacej alimentárnou lymfóm [10]. Existuje niekoľko dôvodov pre rastúce obavy ohľadom zoonotického potenciálu týchto baktérií [11]. Po prvé, ľudia bolo preukázané, že prístavu iné ako H. pylori druhov
s patologickými dôsledkami; Po druhé sa zistilo, že žiadny zdroj ochranu životného prostredia pre tieto baktérie; a napokon, epidemiologické štúdie preukázali spojenie medzi kontaktom zvierat a infekcie [12]. Aj keď H. pylori
vytvára podobnú patológiu spoločenských mäsožravcov a u človeka, tento druh doteraz sa nachádza v normálnej populácie domácich mäsožravých [13, 14], čo tieto prípady dobré príklady anthroponosis [4, 6, 13]. Avšak, Buczolits et al. [15] identifikovali dve sekvencie z Helicobacter
-ako organizmy 100% identická s H. pylori
v žalúdočnej sliznici očné zuby, re-podpaľ diskusiu o úlohe spoločenských šeliem v prenose tejto baktérie do ľudí. Súčasná práca popisuje prítomnosť H. pylori
v zmiešanej populácii Helicobacter
druhov v žalúdočnej sliznici domácej krátke vlasy mačka.
Case prezentácie
13 rokov starý zmiešané plemeno spayed samica mačka s históriou prsných nádorov a pleurálneho výpotku, utratených na žiadosť vlastníkov, bol predložený na pitve do patológie oddelenia fakulty veterinárneho lekárstva na univerzite v Lisabone. Žalúdok bol otvorený pozdĺž veľkého zakrivenia, štetka cytológie bola vykonaná a štyri plné hrúbke biopsia, kde získané z fundusu, korpus a antra pre histopathology a PCR analýzy. Brush cytologies kde získané pomocou sterilnej, jednorazový inokulácii, slučiek a zafarbené May-Grünwald-Giemsa. Jeden z biopsie každého žalúdočného regiónu bol uložený v 10% formalínu pre spracovanie histológie. Kombinovaný vzorka, ktorá obsahuje jedna vzorka z každého regiónu a zostávajúce biopsia z týchto troch regiónov boli udržiavané v zmrazenom stave pri teplote -80 ° C, kým extrakciu DNA s Qiagen DNeasy® Blood & Tissue Kit, podľa návodu výrobcu. PCR reakcia Helicobacter
spp.
H. pylori
, H. felis
H. heilmannii
, H. bizzozeronii
, H. Salomonis stroje a H. bilis
boli vykonané ako bolo predtým popísané [3, 7, 16 až 19], za použitia FidelTaq ™ Mastermix (USB® Products - Affymetrix, Inc.). Referenčné kmene H. pylori
CCUG 17874 T, H. felis
ATCC 49179, H. bizzozeronii
CCUG 35045, H. Salomonis
CCUG 37845, H. Bilis
ATCC 51630 a H. heilmannii
DNA (láskavo poskytol Prof. KW Simpson) boli použité ako pozitívne kontroly. Biopsia pre histopathology boli zasadený uprostred parafínové bloky, spracované a zafarbené hematoxylínom a eosínu a Giemsa.
Na histopatologických noriem Svetovej Small Animal Veterinary Association [20], mierne slizničnej atrofia bola pozorovaná vo fundusu a antra základe, zatiaľ čo mierne lymphoplasmocytic infiltráty bolo uvedené v lamina propria antra. Helicobacter
-ako organizmy boli pozorované v korpuse a dutine, ktorá zaberá žalúdočné žľazy a povrch sliznice (obrázok 1A), kde bola kolonizácia klasifikovaná ako mierne. Kefa cytológie bol pozitívny vo fundusu a korpusu (obr 1B), ale negatívne v dutine. PCR vykonávaná s použitím DNA extrahované z kombinovaného vzorky bolo pozitívnych na Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii stroje a H. bizzozeronii
, pochádzajúce z 1200 bp, 298 bp, 580 -bp a 420-bp produkty PCR, respektíve (obrázok 2). Pri testovaní individuálne, vo všetkých troch regiónoch bolo pozitívnych na Helicobacter
spp.
, H. heilmannii stroje a H. bizzozeronii
, zatiaľ čo iba antra bol pozitívny na H. pylori
. Obrázok 1 Špirála baktérie, v súlade s Helicobacter spp. našiel v žalúdku (A) v povrchovej sliznici. 1000x. Giemsa. (B) a kefa cytológie regiónu fundu. 1000x. May-Grünwald-Giemsa. (Originálne fotografie).
Obrázok 2 PCR reakcie. Molekulárna rebrík v dráhe 1 a 14 (Hyperladder II ™ Bioline); negatívne kontroly v dráhe 2, 5, 8 a 11; pozitívne kontroly Helicobacter
spp. (Dráha 3 s použitím H. felis
ATCC 49179), H. pylori
(dráha 6), H. heilmannii
typ 2 (pruh 9), H. bizzozeronii
(420-bp, lane 12); Výsledky vzoriek H.
spp (1200 bp, dráha 4), H. pylori
(298 bp, dráha 7), H. heilmannii
(580 bp, dráha 10) a H. bizzozeronii
(420-bp, riadok 13).
Závery
prítomnosti Helicobacter
zmiešané populácie bol už skôr opísaný v mačacích žalúdočných biopsiách [21]. Naše zistenia miernej slizničné atrofia je v súlade s inými štúdiami [6, 22]; Avšak Simpson et al. [7] spojené zmeny v architektúre žalúdočnej sliznice s prítomnosťou H. felis
, o druhy, ktoré nie sú nájdené v tejto mačky. H. heilmannii
bolo preukázané, že meniť žalúdočné architektúru, ale skrze epitelové proliferácie a lymfoidné folikulárnej hyperplázia [9], nie je atrofia. Je však možné, že prítomnosť H. pylori a H. bizzozeronii
zmenený Patogénne schopnosti H. heilmannii
, ako je popísané pre zmiešané infekcie H. bizzozeroniiI /H. felis
[11]. Skutočnosť, že fundus a Antrum boli najviac postihnuté oblasti je v súlade s ďalšími nálezmi [8], a, aj keď nie charakteristické, prítomnosť zápalu v dutine je podobné tomu, ktoré v mačkovitých šeliem experimentálne infikovaných H. pylori [
,,,0],21].
výskyt H. pylori
v žalúdočnej sliznici mačkovitých šeliem bola označená len k určitej obchodnej chovateľa [23], ale nie v bludných a domácich obyvateľstva [13, 14, 24]. Spayed samica v skúmaní môže predstavovať buď doteraz un-popísaný populácie domácich mačiek infikovaných H. pylori
alebo prípad anthroponosis, ako predpokladali niektorí autori [4, 5, 13]. Vzhľadom k tomu, H. pylori
's schopnosť prežiť vo vode [25] a tendencia k udržaniu vnútornej /vonkajšej mačky v Portugalsku, musí byť tiež považovaná za kolonizáciu tohto zvieraťa prostredníctvom kontaminovanej zdroja vody. Nebolo možné určiť, či ľudské ko-obyvatelia boli H. pylori
pozitívne alebo v prípade, že zviera malo prístup do vonkajších priestorov.
Prítomnosť H. heilmannii
u mačiek bol spojený s rôznymi zmenami v žalúdočnej sliznici [9] a tráviaceho traktu lymfóm [10]. Jergens et al. [22] ukázali, že liečba vedie k zlepšeniu gastritídy klinických príznakov a bakteriálne vôle, aj keď histologické známky gastritídy naďalej, čo naznačuje príčinnú súvislosť podobný tomu, ktorý je vidieť na H. pylori
infikovaných ľudí [16]. Avšak, ako iné štúdie nemohol dôkazy, ako vzťah, je potrebné zvážiť ďalšie faktory ako vplyv zmiešaných infekcií a možnosťou kmeňa závislé virulenciu. Prítomnosť zmiešané infekcie H. heilmannii stroje a H. pylori
, ktoré možno nájsť v tejto mačky, by mohlo vysvetliť vývoj patológie u niektorých zvierat, a nie v iných infikovaných iba H. heilmannii
. Vzhľadom k tomu,
fokálna distribúcia vzor H. pylori [6], malá veľkosť vzorky bežne získava endoskopie a dokonca biopsia [21] môže vysvetliť vysokú mieru negatívnych výsledkov za H. pylori
.
Úlohu Helicobacter
v mačacom žalúdku, spojený alebo nie s lymfómom, zostáva kontroverzný. Niekoľko faktorov, ako sú druhy Helicobacter
súčasnej dobe je virulencie kmeňa, a genetická predispozícia zvieraťa, by sa mala ďalej skúmaná, aby sa lepšie pochopiť ich vzťah k klinického ochorenia.
Skratky
PCR:
polymerázovej reťazovej reakcie
DNA:
kyselina deoxyribonukleová
BP:
párov báz .
deklarácia
Poďakovanie
autori by radi poďakovali CIISA /FMV za finančnú podporu (Project Pest-OE /AGR /U10276 /2014, financovaný FCT), profesor Kenneth W. Simpson za darovanie druhu H. heilmannii
DNA použitá ako pozitívna kontrola pre PCR, profesor Maria Conceição Peleteiro za jej odbornú pomoc, rovnako ako aj Tec. Sandra Carvalho za jej pomoc s histopathology a TEC. Carla Carneiro za jej pomoc pri bakteriológie laboratóriu.
Autorov pôvodné predloženej súbory obrazov
Nižšie sú uvedené odkazy na autorov pôvodnej predložených súborov pre obrazy. "Pôvodný súbor pre Obrázok 1 13620_2014_80_MOESM2_ESM.tif autorského 13620_2014_80_MOESM1_ESM.tif autorov pôvodného súboru na obrázku 2 protichodnými záujmami
Autori vyhlasujú, že nemajú žiadne protichodné záujmy. Príspevky
autorov
RCT zistených pacienta, zhromaždené žalúdočné vzorkovaniu a kefy cytológia. MRC a MO vykonali laboratórne procesy, ktoré povolenej spracovanie vzoriek pre PCR analýzy. HP vykonal histopatológie. MRC a CLV boli zapojení do získavania dát, analýzu a interpretáciu a príprave rukopisu. MMREN sa podieľala na revíziu rukopis, prispievať k jeho intelektuálny obsah. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Štúdia pásmo: žalúdočné bypass alebo nastaviteľná žalúdočné kapely chirurgie na liečbu morbídnej obezity: Protokol štúdie pre multicentrickej randomizovanej kontrolovanej štúdie s v…
• miRNA podpis spojená s výsledkami u pacientov s karcinómom žalúdka nasledujúcich chemotherapy