En blandet befolkning av Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii og "Helicobacter heilmannii" i mageslimhinnen av en huskatt

En blandet befolkning av Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii Hotell og "Helicobacter heilmannii
" i mageslimhinnen av en huskatt
Abstract
Bakgrunn
Tilstedeværelsen av Helicobacter
i mageslimhinnen er ansvarlig for å produsere patologi i mange dyrearter, inkludert menneske. Siden mennesker har vist seg å huse mange av de samme bakteriearter som innenlandske rovdyr, har bekymring over deres zoonotiske potensial vært økende. Helicobacter pylori
, en klasse en kreftfremkallende ansvarlig for tilfeller av gastritt og magekreft hos mennesker, produserer lignende patologi i dyre rovdyr og regnes som et eksempel på anthroponosis. Saken her presenteres refererer til en 13 år gammel blandingshund sterilisert hunnkatt sett ved obduksjon.
Funn
Mageprøvene ble analysert for forekomst av Helicobacter
spp. ved cytologi, histopatologi og PCR. Mild mukosal atrofi ble observert i fundus og antrum, mens lymphoplasmocytic infiltrerer der det er angitt i lamina propria i antrum. Helicobacter
-lignende organismer ble observert i corpus og antrum, opptar mage kjertler og overflateslimhinnen. Det var mulig å påvise Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii Hotell og H. bizzozeronii
i fundus, corpus og antrum av PCR, mens i antrum PCR prøvene var positive for H. pylori
.
Konklusjoner
sterilisert hunn under studien kan representere enten en ennå un-beskrevet befolkning på huskatter infisert med H. pylori
eller et tilfelle av anthroponosis.
nøkkelord
Feline Helicobacter
zoonose gastritt PCR histopatologiske funn
Bakgrunn
Helicobacter pylori
er en gram negativ, urease positive, spiral bakterier klassifisert av Verdens helseorganisasjon som en klasse 1 kreftfremkallende som sitt forhold til menneskelig gastritt og magekreft har blitt etablert [1]. De fleste av de 32 arter som er beskrevet hittil er enteriske mikroorganismer av pattedyr, mens 12 arter er gastrisk innbyggere. Fire arter er nå anses å være vanlig i mageslimhinnen av innenlandske rovdyr, Helicobacter felis
, Helicobacter bizzozeronii
, Helicobacter salomonis
, "Helicobacter heilmannii"
type 1, 2 og 4 [2, 3], mens rollen til H. Bilis '
som en primær gastrisk organisme forblir tvilsom. Selv om patogene rolle disse artene i gastritt og /eller magekreft har ennå ikke godt etablert i kjæledyr [4, 5], kattedyr synes å være mye mer utsatt da hjørnetenner [6]. Gastric fibroser og atrofi har vært knyttet til H. felis
infeksjon hos katter [7] mens tilstedeværelse av lymfoide follikler og betennelser har vært knyttet til Helicobacter
spp. og "H. heilmannii "senso lato
kolonisering [8, 9].
Det har vært antydet at på samme måte H. pylori
infiserte mennesker, tilstedeværelse av H. heilmannii
kan spille en rolle i feline fordøyelses lymfom [10]. Det er flere årsaker til den økende bekymring om zoonotiske potensialet av disse bakteriene [11]. For det første, mennesker har vist seg å huse andre enn H. arter pylori
med patologiske konsekvenser; for det andre, har ingen miljø kilde for disse bakterier er funnet; og til slutt, har epidemiologiske studier har vist en sammenheng mellom dyr kontakt og infeksjon [12]. Selv H. pylori
produserer lignende patologi i dyre rovdyr og i mennesker, denne arten har ennå ikke funnet i norske rovdyrbestander normale [13, 14], noe som gjør disse tilfellene gode eksempler på anthroponosis [4, 6, 13]. Imidlertid Buczolits et al. [15] har identifisert to sekvenser fra Helicobacter
-lignende organismer 100% identisk med H. pylori
i mageslimhinnen hjørnetenner, re-kindling debatten om rollen som kjæledyr rovdyr i overføring av denne bakterien til mennesker. Dette arbeidet beskriver tilstedeværelsen av H. pylori
i en blandet befolkning av Helicobacter
arter i mageslimhinnen av en innenlandsk kort hår katt.
Saksframlegget, En 13 år gammel blandingshund sterilisert hunnkatt med en historie av brystsvulster og pleuravæske, avlives på eiernes forespørsel, ble presentert for obduksjon for patologi Avdeling for fakultet for veterinærmedisin, Universitetet i Lisboa. Magen ble åpnet langs den store kurvatur, børste cytologi ble utført og fire fulle tykkelse biopsier der hentet fra fundus, corpus og antrum for histopatologi og PCR-analyser. Brush cytologies der oppnådd ved bruk av sterile, single bruk inokulasjon sløyfer og farget med May-Grünwald-Giemsa. En biopsi fra hver mage-regionen ble lagret i 10% formalin for histologisk bearbeiding. En kombinert prøve, omfattende en prøve fra hver region, og de gjenværende biopsier fra de tre regionene ble holdt frosset ved -80 ° C, inntil DNA-ekstraksjon med Qiagen DNeasy® Blood &Co. Tissue Kit, i henhold til produsentens instruksjoner. PCR reaksjoner for Helicobacter
spp.
, H. pylori
, H. felis
, H. heilmannii
, H. bizzozeronii
, H. salomonis Hotell og H. bilis
ble utført som tidligere beskrevet [3, 7, 16-19], ved bruk av FidelTaq ™ MasterMix (USB® Products - Affymetrix, Inc.). Referansestammer H. pylori
CCUG 17874 T, H. felis
ATCC 49179, H. bizzozeronii
CCUG 35045, H. salomonis
CCUG 37845, H. Bilis
ATCC 51630 og H. heilmannii
DNA (vennlig levert av professor KW Simpson) ble brukt som positive kontroller. Biopsier for histopatologi ble integrert i parafinblokker, behandlet og farget med Hematoxylin og eosin og med Giemsa.
Basert på World Small Animal Veterinary Association histopatologiske standarder [20], mild slimhinnene atrofi ble observert i fundus og antrum, mens moderat lymphoplasmocytic infiltrerer ble registrert i lamina propria av antrum. Helicobacter
-lignende organismer ble observert i corpus og antrum, opptar mage kjertler og overflateslimhinnen (figur 1A), hvor kolonisering ble klassifisert som mild. Brush cytologi var positiv i fundus og corpus (figur 1B), men negativ i antrum. PCR utføres ved hjelp av DNA ekstrahert fra den kombinerte prøven var positiv Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii Hotell og H. bizzozeronii
, med opprinnelse 1200 bp, 298-bp, 580 -bp og 420-bp amplikonene, henholdsvis (figur 2). Når testet individuelt, de tre regionene var positiv Helicobacter
spp.
, H. heilmannii Hotell og H. bizzozeronii
, mens bare antrum var positivt for H. pylori
. Figur 1 Spiral bakterier, i samsvar med Helicobacter spp. finnes i magesekken (A) i overflaten mucosa. 1000x. Giemsa. (B) og børste cytologi av fundus-regionen. 1000x. May-Grünwald-Giemsa. (Oversettelse av originale fotografier).
Figur 2 PCR reaksjoner. Molekylær stigen i spor 1 og 14 (Hyperladder II ™ Bioline); negative kontroller i felt 2, 5, 8 og 11; positive kontroller Helicobacter
spp. (Spor 3 ved bruk av H. felis
ATCC 49179), H. pylori plakater (spor 6), H. heilmannii
type 2 (spor 9), H. bizzozeronii plakater (420 bp, lane 12); prøveresultatene H.
spp (1200-bp, kjørefelt 4), H. pylori plakater (298-bp, lane 7), H. heilmannii plakater (580-bp, lane 10) og H. bizzozeronii product: (420 bp, lane 13).
Konklusjoner
tilstedeværelsen av en Helicobacter
blandet befolkning har tidligere blitt beskrevet i feline mage biopsier [21]. Vår funn av mild mukosal atrofi er i samsvar med andre studier [6, 22]; imidlertid Simpson et al. [7] knyttet endringer i arkitekturen i mageslimhinnen med tilstedeværelse av H. felis
, en art som ikke finnes i denne katten. H. heilmannii
har vist seg å endre gastrisk arkitektur men gjennom epitelproliferasjon og lymfoid hyperplasi follikulær [9], ikke bli svekket. Det er imidlertid mulig at nærværet av H. pylori
og H. bizzozeronii
forandret den patogene evne av H. heilmannii
som beskrevet for blandede infeksjoner av H. bizzozeroniiI /H. felis product: [11]. Det faktum at fundus og antrum var de mest aktuelle regionene er forenlig med andre funn [8], og, selv om det ikke er karakteristisk, tilstedeværelse av betennelse i antrum er lik den som finnes i kattedyr eksperimentelt infisert med H. pylori product: [ ,,,0],21].
forekomsten av H. pylori
i gastrisk mucosa av kattedyr er bare rapportert i en bestemt kommersiell oppdretter [23], men ikke i spredt og innenlandske populasjoner [13, 14, 24]. Den sterilisert hunn under studien kunne representere enten en ennå un-beskrevet befolkning på huskatter infisert med H. pylori
eller et tilfelle av anthroponosis, som en hypotese av noen forfattere [4, 5, 13]. Vurderer H. pylori
evne til å overleve i vann [25] og tendensen til å holde innendørs /utendørs katter i Portugal, må koloniseringen av dette dyret gjennom en forurenset vannkilde også vurderes. Det var ikke mulig å bestemme hvorvidt humane co-innbyggerne var H. pylori
positiv eller hvis dyret hadde utendørs tilgang.
Tilstedeværelsen av H. heilmannii
hos katter har vært knyttet til forskjellige endringer i gastrisk mucosa [9] og fordøyelses lymfom [10]. Jergens et al. [22] har vist at behandlingen fører til forbedring av gastritt kliniske tegn og bakteriell klaring, selv om histologiske tegn på gastritt fortsatt, noe som tyder på en årsakssammenheng lignende som hos H. pylori
infiserte mennesker [16]. Men som andre studier ikke kunne bevis slike forhold, kan andre faktorer som for eksempel effekten av blandingsinfeksjoner og muligheten for belastning avhengige virulens, bør vurderes. Tilstedeværelsen av en blandet infeksjon av H. heilmannii
og H. pylori
, som finnes i denne katt, kan forklare utviklingen av patologien i noen dyr og ikke i andre infisert bare med H. heilmannii
. Gitt H. pylori er
focal distribusjon mønster [6], den lille utvalgsstørrelse vanligvis oppnås gjennom endoskopi og selv biopsi [21] kan forklare den høye frekvensen av negative resultater for H. pylori
.
Rolle av Helicobacter
i feline gastritt, forbundet eller ikke med lymfom, er fortsatt kontroversielt. Flere faktorer, såsom arten av Helicobacter
til stede, virulensen av stammen, og den genetisk predisposisjon av dyret, bør undersøkes nærmere for bedre å forstå deres relasjon til klinisk sykdom.
Forkortelser
PCR:
Polymerase kjedereaksjon
bilder DNA:
deoksyribonukleinsyre
bilder Bp:
basepar .
Erklæringer
takk
forfatterne ønsker å takke CIISA /FMV for sin økonomiske støtte (Prosjekt Pest-OE /AGR /U10276 /2014, finansiert av FCT), professor Kenneth W. Simpson for den typen donasjon av H. heilmannii
DNA brukes som en positiv kontroll for PCR, professor Maria Conceição Peleteiro om råd hennes ekspert, samt og Tec. Sandra Carvalho for hennes assistanse med histopatologi og Tec. Carla Carneiro for hennes assistanse i bakteriologi laboratoriet.
Forfatternes opprinnelige innsendte filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes opprinnelige innsendte filer for bilder. 13620_2014_80_MOESM1_ESM.tif Forfatteroriginalfilen for figur 1 13620_2014_80_MOESM2_ESM.tif Forfatteroriginalfilen for figur 2 konkurrerende interesser
Forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende interesser.
Forfatternes bidrag
RCT identifisert pasienten, samlet mage prøver og utført børste cytologi. RCT og MO utført laboratorie prosesser som tillot at behandling av prøver for PCR-analyser. HP utførte histopatologi. RCT og CLV var involvert i datainnsamling, analyse og tolkning og utarbeidelsen av manuskriptet. MMREN var involvert i revisjon av manuskriptet, som bidrar til sin intellektuelle innhold. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Den By-Band studie: gastric bypass eller justerbar mage bandet kirurgi for å behandle sykelig fedme. Studieprotokoll for et multisenter randomisert kontrollert studie med en intern pilot phase
• miRNA signatur knyttet til utfallet av mage kreftpasienter følgende chemotherapy