En blandet population af Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii og "Helicobacter heilmannii" i maveslimhinden af ​​en indenlandsk cat

en blandet population af Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii
"Helicobacter heilmannii
" i maveslimhinden af ​​en huskat
Abstract
Baggrund
tilstedeværelsen af ​​Helicobacter
inden maveslimhinden er ansvarlig for fremstilling patologi i mange dyrearter, herunder mennesket. Da mennesker har vist sig at harbor mange af de samme bakteriearter som kødædende husdyr, har bekymring over deres zoonotisk potentiale vokset. Helicobacter pylori
, en klasse 1 kræftfremkaldende behandle de sager, gastritis og gastrisk kræft hos mennesker, producerer lignende patologi hos kødædende selskabsdyr, og betragtes som et eksempel på anthroponosis. Sagen her præsenteres refererer til en 13-årig blandet race steriliseret hunkat ses ved obduktion.
Resultater
mave blev analyseret for tilstedeværelsen af ​​Helicobacter
spp. ved cytologi, histopatologi og PCR. Mild mucosal atrofi blev observeret i fundus og antrum, mens lymphoplasmocytic infiltrater hvor angivet i lamina propria af antrum. Helicobacter
-lignende organismer blev observeret i corpus og antrum, besætter gastriske kirtler og overflade slimhinde. Det var muligt at påvise Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii
og H. bizzozeronii
i fundus, corpus og antrum ved PCR, mens der i antrum PCR prøver var positive for H. pylori
.
konklusioner
steriliseret kvindelige undersøgte kunne repræsentere enten en endnu un beskrevne population af huskatte inficeret med H. pylori
eller et tilfælde af anthroponosis.
Nøgleord
Feline Helicobacter
Zoonosecentret Gastritis PCR histopatologi
Baggrund
Helicobacter pylori
er en gram negativ, urease positiv, spiral bakterier klassificeret af WHO som en klasse 1 kræftfremkaldende som dens forhold til menneskelig gastritis og mavekræft er blevet fast etableret [1]. Størstedelen af ​​de 32 arter, der er beskrevet til dato, er enteriske mikroorganismer af pattedyr, mens 12 arter er gastriske indbyggere. Fire arter anses nu for at være fælles i maveslimhinden af ​​kødædende husdyr, Helicobacter felis
, Helicobacter bizzozeronii
, Helicobacter salomonis
, "Helicobacter heilmannii"
type 1, 2 og 4 [2, 3], mens rollen som H. bilis '
som en primær gastrisk organisme stadig tvivlsomt. Selvom den patogene rolle af disse arter i gastritis og /eller mavekræft har endnu ikke fast etableret i kæledyr [4, 5], katte ser ud til at være langt mere modtagelige derefter hjørnetænder [6]. Gastric fibroser og atrofi er blevet forbundet med H. felis
infektion i katte [7], mens tilstedeværelsen af ​​lymfoide follikler og inflammation er relateret til Helicobacter
spp. og "H. heilmannii "senso lato
kolonisering [8, 9].
Det er blevet foreslået, at i lighed med H. pylori
inficerede mennesker, tilstedeværelsen af ​​H. heilmannii
kunne spille en rolle i felin fødemæssig lymfom [10]. Der er flere årsager til den voksende bekymring vedrørende zoonotiske potentiale af disse bakterier [11]. For det første har mennesker vist sig at havnen andre end H. arter pylori
med patologiske konsekvenser; for det andet, er fundet nogen miljømæssig kilde til disse bakterier; og endelig har epidemiologiske undersøgelser vist en sammenhæng mellem animalsk kontakt og infektion [12]. Selvom H. pylori
producerer lignende patologi hos kødædende selskabsdyr, og mennesker, denne art er endnu ikke fundet i normale indenlandske kødædende befolkning [13, 14], hvilket gør disse tilfælde gode eksempler på anthroponosis [4, 6, 13]. Men Buczolits et al. [15] har identificeret to sekvenser fra Helicobacter
-lignende organismer 100% identisk med H. pylori
i maveslimhinden af ​​hjørnetænder, re-pindebrænde debatten om den rolle, kødædende selskabsdyr i transmissionen af ​​denne bakterie til mennesker. Den nuværende arbejde beskriver tilstedeværelsen af ​​H. pylori
i en blandet population af Helicobacter
arter i maveslimhinden af ​​en indenlandsk kort hår kat.
Case præsentation
En 13-årige blandet race steriliseret hunkat med en historie af mammae tumorer og pleural effusion, aflivet ved ejernes anmodning blev forelagt for obduktion til Patologisk Institut det Naturvidenskabelige Veterinary Medicine, University of Lisbon. Maven blev åbnet langs den største krumning, børste cytologi blev udført, og fire med fuld tykkelse biopsier hvor opnået fra fundus, corpus og antrum til histopatologi og PCR-analyser. Brush cytologies hvor opnået ved hjælp af sterile, enlige brug podning loops og farvet med May-Grünwald-Giemsa. En biopsi fra hver gastrisk region blev opbevaret i 10% formalin til histologi forarbejdning. En kombineret prøve, bestående af en prøve fra hver region, og de resterende biopsier fra de tre regioner blev holdt nedfrosset ved -80 ° C, indtil DNA ekstraktion med Qiagen DNeasy® Blood & Tissue Kit ifølge producentens instruktioner. PCR reaktioner for Helicobacter
spp.
, H. pylori
, H. felis
, H. heilmannii
, H. bizzozeronii
, H. salomonis
og H. bilis
blev udført som beskrevet tidligere [3, 7, 16-19], under anvendelse FidelTaq ™ MasterMix (USB® Produkter - Affymetrix, Inc.). Referencestammer H. pylori
CCUG 17874 T, H. felis
ATCC 49179, H. bizzozeronii
CCUG 35045, H. salomonis
CCUG 37.845, H. bilis
ATCC 51.630 og H. heilmannii
DNA (venligst stillet til rådighed af professor KW Simpson) blev anvendt som positive kontroller. Biopsier til histopatologi blev indlejret i paraffinblokke, behandles og farvet med Hematoxylin og eosin og med Giemsa.
Baseret på World Small Animal Veterinary Association histopatologiske standarder [20], mild slimhinde atrofi blev observeret i fundus og antrum, mens moderat lymphoplasmocytic infiltrater blev bemærket i lamina propria af antrum. Helicobacter
-lignende organismer blev observeret i corpus og antrum, besætter gastriske kirtler og overflade slimhinde (figur 1A), hvor koloniseringen blev klassificeret som milde. Børste cytologi var positiv i fundus og corpus (figur 1b), men negativ i antrum. PCR udføres ved hjælp af DNA ekstraheret fra den kombinerede prøve var positiv for Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii
og H. bizzozeronii
oprindelse 1200-bp, 298 bp, 580 -BP og 420-bp amplikoner, henholdsvis (figur 2). Ved afprøvning individuelt, de tre regioner var positive for Helicobacter
spp.
, H. heilmannii
og H. bizzozeronii
, mens kun antrum var positiv for H. pylori
. Figur 1 Spiral bakterier, i overensstemmelse med Helicobacter spp. findes i maven (A) i overfladen slimhinde. 1000x. Giemsa. (B) og børste cytologi af fundus-regionen. 1000x. Maj-Grünwald-Giemsa. (Original fotografier).
Figur 2 PCR reaktioner. Molekylær stige i bane 1 og 14 (Hyperladder II ™ Bioline); negative kontroller i bane 2, 5, 8 og 11; positive kontroller Helicobacter
spp. (Bane 3 ved anvendelse H. felis
ATCC 49179), H. pylori
(bane 6), H. heilmannii
type 2 (bane 9), H. bizzozeronii
(420 bp, lane 12); prøveresultaterne H.
spp (1.200 bp, bane 4), H. pylori
(298-bp, bane 7), H. heilmannii
(580-bp, bane 10) og H. bizzozeronii Salg (420-bp, bane 13).
konklusioner Salg tilstedeværelsen af ​​en Helicobacter
blandet population er tidligere blevet beskrevet i feline gastriske biopsier [21]. Vores fund af mild slimhinde atrofi er i overensstemmelse med andre undersøgelser [6, 22]; men Simpson et al. [7] knyttet ændringer i arkitekturen af ​​maveslimhinden med tilstedeværelsen af ​​H. felis
, en art ikke fundet i denne kat. H. heilmannii
har vist sig at ændre gastrisk arkitektur, men gennem epitelproliferation og lymfoid follikulært hyperplasi [9], ikke atrofi. Det er muligt, dog, at tilstedeværelsen af ​​H. pylori
og H. bizzozeronii
ændret den patogene kapacitet af H. heilmannii
som beskrevet for blandede infektioner af H. bizzozeroniiI /H. felis
[11]. Den omstændighed, at fundus og antrum var de mest ramte regioner er i overensstemmelse med andre fund [8] og selvom ikke karakteristisk, tilstedeværelsen af ​​inflammation i antrum ligner den, der findes i kattefamilien eksperimentelt inficeret med H. pylori
[ ,,,0],21].
forekomsten af ​​H. pylori
i maveslimhinden af ​​kattefamilien er kun rapporteret i en bestemt kommerciel opdrætter [23], men ikke i omstrejfende og indenlandske befolkning [13, 14, 24]. Den steriliseret kvindelige undersøgte kunne repræsentere enten en endnu un beskrevne population af huskatte inficeret med H. pylori
eller et tilfælde af anthroponosis, som hypotese af nogle forfattere [4, 5, 13]. I betragtning af H. pylori
's evne til at overleve i vand [25], og tendensen til at holde indendørs /udendørs katte i Portugal, skal kolonisering af dette dyr gennem et forurenet vand kilde også overvejes. Det var ikke muligt at afgøre, om de menneskelige co-indbyggere var H. pylori
positiv eller hvis dyret havde udendørs adgang.
Tilstedeværelsen af ​​H. heilmannii
i katte har været knyttet til forskellige ændringer i maveslimhinden [9] og ernæringsmæssig lymfom [10]. Jergens et al. [22] har vist, at behandling fører til en forbedring af gastritis kliniske symptomer og bakteriel clearance, selv om histologiske tegn på gastritis tilbage, hvilket antyder en kausal sammenhæng svarende til den, set i H. pylori
inficerede mennesker [16]. Men som andre undersøgelser ikke kunne beviser sådant forhold, andre faktorer, såsom virkningen af ​​blandede infektioner og muligheden af ​​stamme afhængig virulens, bør overvejes. Tilstedeværelsen af ​​en blandet infektion af H. heilmannii
og H. pylori
, som findes i denne kat, kunne forklare udviklingen af ​​patologi i nogle dyr og ikke i andre inficerede kun med H. heilmannii
. I betragtning af H. pylori er
omdrejningspunkt fordeling mønster [6], normalt lille stikprøvestørrelse opnået gennem endoskopi og endda biopsi [21] kan forklare den høje negative resultater for H. pylori
.
Rolle af Helicobacter
i katte gastritis, forbundet eller ikke med lymfom, forbliver kontroversiel. Flere faktorer, såsom arter af Helicobacter
stede, virulens af stammen, og den genetiske disposition af dyret, bør undersøges nærmere for bedre at forstå deres relation til klinisk sygdom.
Forkortelser
PCR:
polymerasekædereaktion |
DNA:
Deoxyribonukleinsyre |
Bp:
basepar .
erklæringer
tak
forfatterne vil gerne takke CIISA /FMV for deres økonomiske støtte (Project Pest-OE /AGR /U10276 /2014 finansieret af FCT), professor Kenneth W. Simpson for den slags donation af H. heilmannii
DNA anvendt som en positiv kontrol for PCR, professor Maria Conceição Peleteiro for hendes ekspertrådgivning, samt og Tec. Sandra Carvalho for hendes hjælp med histopatologi og Tec. Carla Carneiro for hendes hjælp i bakteriologi laboratoriet.
Forfattere 'originale indsendte filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 13620_2014_80_MOESM1_ESM.tif Forfatternes oprindelige fil til figur 1 13620_2014_80_MOESM2_ESM.tif Forfatternes oprindelige fil til figur 2 konkurrerende interesser
Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende interesser.
Forfattere bidrag
RCT identificerede patienten, indsamlet mavens prøver og udført børste cytologi. RCT og MO gennemført de laboratorieundersøgelser processer, der er tilladt behandling af prøver til PCR-analyser. HP udførte histopatologi. RCT og CLV var involveret i dataopsamling, analyse og fortolkning og udarbejdelse af manuskriptet. MMREN var involveret i revision af manuskriptet, der bidrager til dens intellektuelle indhold. Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Den By-Band undersøgelse: gastric bypass eller justerbar gastrisk band kirurgi til behandling af fedme: studie protokol for en multicenter randomiseret kontrolleret forsøg med en intern pilotfase
• miRNA signatur forbundet med udfaldet af gastrisk cancer patienter efter kemoterapi