Смешанная популяция Helicobacter Pylori, хеликобактером bizzozeronii и "Helicobacter heilmannii" в слизистой оболочке желудка домашней кошки

Смешанная популяция Helicobacter Pylori, хеликобактер bizzozeronii
и "хеликобактер heilmannii
" в слизистой оболочке желудка домашней кошки
Аннотация
Справочная информация
Присутствие хеликобактером
в слизистой оболочке желудка отвечает за выработку патологии у многих видов животных, включая человека. Так как люди, как было показано укрывать многие из тех же видов бактерий как домашних плотоядных, беспокойство по поводу их зоонозных потенциал растет. Хеликобактерной
, класс 1 канцероген ответственность за случаи гастрита и рака желудка у людей, производит подобную патологию в домашних плотоядных и считается примером антропоноз. Дело здесь представлены относится к 13-летний смешанной породы стерилизовать женской кошки видели на аутопсии.
Результаты
образцов Желудок анализировали на наличие Helicobacter
SPP. по цитологии, гистопатологии и ПЦР. Мягкий атрофии слизистой оболочки наблюдалась в глазном дне и антрума, в то время как lymphoplasmocytic инфильтраты, где было отмечено в собственной пластинке слизистой оболочки антрального отдела. Хеликобактер
-как организмы были обнаружены в корпусе и антрума, занимающее желудочных желез и слизистой поверхности. Удалось обнаружить Helicobacter
SPP., H. Pylori
, H. heilmannii
и H. bizzozeronii
в фундус, корпус и антрума с помощью ПЦР, в то время как в антральном ПЦР образцы были положительными для H. Pylori
.
Выводы
The стерилизовать женщина изучаемом может представлять либо еще не-описана популяция домашних кошек, инфицированных H.pylori,
или случай антропоноз.
Ключевые слова
Feline хеликобактером
зоонозам Гастрит PCR гистопатология выводов
Фон
хеликобактерной
является грамотрицательной, уреазы положительный, спиральные бактерии классифицируются Всемирной организацией здравоохранения в качестве 1-го класса канцероген, как его отношение к человек гастрит и рак желудка было твердо установлено [1]. Большинство из 32 видов, описанных на сегодняшний день являются кишечно микроорганизмы млекопитающих, в то время как 12 видов обитателей желудка. Четыре вида в настоящее время считается распространенным в слизистой оболочке желудка домашних плотоядных, Helicobacter фелис ​​
, хеликобактер bizzozeronii
, Helicobacter Salomonis
"хеликобактер heilmannii"
типы 1, 2 и 4 [2, 3], в то время как роль
H. Bilis "в качестве основного организма желудка остается под вопросом. Хотя патогенная роль этих видов в гастрита и /или рака желудка еще предстоит утвердиться в домашних животных [4, 5], кошачьих, как представляется, гораздо более восприимчивы, то клыки [6]. Желудочный фиброзы и атрофия были связаны с Г.фелис ​​
инфекции у кошек [7] в то время как наличие лимфоидных фолликулов и воспаления были связаны с Helicobacter
SPP. и "H. heilmannii "Senso Лято
колонизация [8, 9].
Было высказано предположение, что, подобно H. Pylori
инфицированных людей, наличие H. heilmannii
может играть определенную роль в кошачьей алиментарно лимфома [10]. Есть несколько причин растущей озабоченности в отношении зоонозных потенциала этих бактерий [11]. Во-первых, люди, как было показано укрывать, отличных от H. Pylori видов
с патологическими последствиями; Во-вторых, ни один источник окружающей среды для этих бактерий не обнаружено; и, наконец, эпидемиологические исследования показали связь между животным контактом и инфекции [12]. Несмотря на то, H. Pylori
производит аналогичную патологии у домашних плотоядных животных и у людей, этот вид еще можно найти в нормальных популяциях домашних плотоядных [13, 14], что делает эти случаи хорошими примерами антропоноз [4, 6, 13]. Тем не менее, Buczolits и др. [15] определили две последовательности из Helicobacter
-подобных организмов 100% идентична H. Pylori
в слизистой оболочке желудка клыков, повторное разжигание дебаты о роли домашних плотоядных в передаче этой бактерии к люди. Настоящая работа описывает наличие H. Pylori
в смешанной популяции Helicobacter
видов в слизистой оболочке желудка отечественного короткого волос кошки.
Клинический случай
13-летний смешанной породы стерилизовать кошку с историей опухоли молочной железы и плеврит, умерщвляют по желанию владельцев, был представлен на аутопсии в патологию отделение факультета ветеринарной медицины университета Лиссабона. Желудок был открыт вдоль большой кривизны, кисть цитологии была выполнена, и четыре полных толщины биопсий, где полученные из фундус, корпус и антрального для гистопатологии и ПЦР анализы. Кисть cytologies, где полученные с использованием стерильных, одиночные петли использование инокуляции и окрашивали мае-Grünwald-Гимзе. Одна из биопсии из каждой области желудка хранили в 10% формалине для гистологии. Объединенный образец, состоящий из одного образца из каждого региона, а остальные биопсию из трех областей продержали в замороженном состоянии при температуре -80 ° С до экстракции ДНК с Qiagen DNeasy® Blood &Amp; Tissue Kit, в соответствии с инструкциями изготовителя. ПЦР-реакции для Helicobacter
SPP.
, H. Pylori,
Г.фелис ​​
, H. heilmannii
, Х. bizzozeronii
Х. Salomonis
и H. Bilis
были выполнены, как описано ранее [3, 7, 16-19], с использованием FidelTaq ™ Mastermix (USB® Продукты - Affymetrix, Inc.). Эталонные штаммы H. Pylori
CCUG 17874 T, Г.фелис ​​
ATCC 49179, H. bizzozeronii
CCUG 35045, Х. Salomonis
CCUG 37845, H. Bilis
ATCC 51630 и H. heilmannii
ДНК (любезно предоставленный проф кВт Simpson) использовали в качестве положительного контроля. Биопсия для гистопатологии были вложены в парафиновые блоки, обработанные и окрашивали гематоксилином и эозином и Гимза.
На основе гистологических стандартов Всемирной мелких животных ветеринарная ассоциация [20], мягкий атрофии слизистой оболочки наблюдалась в глазном дне и антрума, в то время как умеренные lymphoplasmocytic инфильтраты были отмечены в собственной пластинке слизистой оболочки антрального отдела. Хеликобактер
-как организмы были обнаружены в корпусе и антрума, занимающее желудочных желез и поверхности слизистой оболочки (рис 1А), где колонизация была классифицирована как мягкая. Кисть цитологии был положительным в глазном дне и корпуса (рис 1б), но отрицательный результат в антральном. ПЦР проводили с использованием ДНК, выделенной из объединенной выборки был положительным для Helicobacter
SPP., H. Pylori
, H. heilmannii
и H. bizzozeronii
, происходящий 1200 п.н., 298 п.н., 580 -BP и 420 п.о. ампликонов, соответственно (рисунок 2). При проведении испытания в индивидуальном порядке, в трех регионах были положительными хеликобактером
SPP.
, Х. heilmannii
и H. bizzozeronii
, в то время как только Антрум был положительным для H. Pylori
. Рисунок 1 Спиральные бактерии, в соответствии с Helicobacter SPP. в желудке (а) на поверхности слизистой оболочки. 1000x. Гимза. (Б) и щетка цитологии области глазного дна. 1000x. Май-Грюнвальд-Гимза. (Оригинал фотографии). Рисунок 2
ПЦР реакции. Молекулярный лестница в полосе 1 и 14 (Hyperladder II ™ Bioline); отрицательный контроль в полосе 2, 5, 8 и 11; Положительный контроль хеликобактером
SPP. (Дорожка 3 с использованием Г.фелис ​​
ATCC 49179), H. Pylori
(дорожка 6), Х. heilmannii
тип 2 (дорожка 9), Х. bizzozeronii
(420 п.н., дорожка 12); Результаты выборки H.
SPP (1200 п.н., полоса 4), H. Pylori
(298 п.н., дорожка 7), Х. heilmannii
(580 п.н., дорожка 10) и H. bizzozeronii
(420 п.н., дорожка 13).
Выводы
присутствии Helicobacter
смешанной популяции было описано ранее в кошачьих желудочных биопсий [21]. Наше открытие легкой атрофии слизистой оболочки согласуется с другими исследованиями [6, 22]; Однако Симпсон и др. [7] связаны изменения в архитектуре слизистой оболочки желудка с наличием Г.фелис ​​
, биологический вид не найден в этой кошки. H. heilmannii
Было показано, что изменить архитектуру желудка, а через эпителиальной пролиферации и лимфоидной фолликулярной гиперплазии [9], не атрофируются. Вполне возможно, однако, что наличие H. Pylori
и H. bizzozeronii
изменили патогенную емкость H. heilmannii
как описано для смешанных инфекций H. bizzozeroniiI /H. Felis
[11]. Тот факт, что на глазном дне и Антрум были наиболее пострадавших регионах согласуется с другими результатами [8], и, хотя и не характерно, наличие воспаления в антральном аналогична той, которая содержится в кошачьих, экспериментально зараженных H. Pylori
[ ,,,0],21].
Частота случаев H. Pylori
в слизистой оболочке желудка кошачьих было только сообщено в конкретном коммерческом селекционера [23], но не в бродячих и домашних популяциях [13, 14, 24]. Стерилизована самка при исследовании может представлять либо еще не-описана популяция домашних кошек, инфицированных H.pylori,
или случай антропоноз, как и предполагалось некоторыми авторами [4, 5, 13]. Принимая во внимание способность H. Pylori
's, чтобы выжить в воде [25], а также тенденция к поддержанию в помещении /на открытом воздухе кошек в Португалии, колонизация этого животного через загрязненного источника воды также должны быть рассмотрены. Не было возможности определить, были ли человеческие коллеги жители H. Pylori
положительный или если животное имело открытый доступ.
Присутствие H. heilmannii
у кошек было связано с различными изменениями в слизистой оболочке желудка [9] и алиментарный лимфома [10]. Jergens и др. [22] показали, что лечение приводит к улучшению гастрита клинических признаков и бактериального клиренса, хотя гистологические признаки гастрита остаются, что свидетельствует о причинно-следственной связи, аналогичной видели в H. Pylori
инфицированных людей [16]. Тем не менее, как и другие исследования не могли доказательства, такие отношения, другие факторы, такие как воздействие смешанных инфекций и возможность напряжения зависимой вирулентности, следует рассмотреть. Наличие смешанной инфекции H. heilmannii
и H. пилори
, как найти в этой кошки, может объяснить развитие патологии у некоторых животных, а не в других инфицированных только с H. heilmannii
. С учетом
фокусного картина распределения H. Pylori [6], малый размер выборки обычно получают с помощью эндоскопии и даже биопсии [21] может объяснить высокую частоту отрицательных результатов для H. Pylori
.
Роль, которую играет по Helicobacter
в кошачьей гастрита, связанного или не связанного с лимфомой, остается спорным. Несколько факторов, таких как вида Helicobacter
настоящее время, вирулентность штамма, а генетическая предрасположенность животного, следует провести дальнейшее расследование для того, чтобы лучше понять их отношение к клинической болезни.
Сокращения
ПЦР:
полимеразная цепная реакция


ДНК:
дезоксирибонуклеиновой кислоты


Bp:
Base-пары .


декларациях
Благодарности
авторы хотели бы поблагодарить CIISA /FMV за финансовую поддержку (Проект PEST-ОЕ /AGR /U10276 /2014, финансируемого FCT), профессор Кеннет У. Симпсон за любезное пожертвование H. heilmannii
ДНК, используемой в качестве положительного контроля для ПЦР, профессор Мария Консейсау Peleteiro за ее советы экспертов, а также и Tec. Сандра Карвалью за ее помощь с гистопатологией и Tec. Карла Карнейро за ее помощь в лаборатории бактериологии.
Авторов оригинальные представленные файлы для изображений изображения Ниже приведены ссылки на авторов оригинала, представленных файлов для изображений. "Исходный файл для фигурного 1 13620_2014_80_MOESM2_ESM.tif Авторского 13620_2014_80_MOESM1_ESM.tif авторов исходного файла для фигурного 2 конкурирующими интересами
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов. Вклад
Авторского
RCT выявленных пациента, собранные желудочные образцы и проводили кисти цитологии. RCT и МО проводят лабораторные процессы, позволившие обработку образцов для ПЦР-анализа. HP выполняется гистопатологии. RCT и CLV были вовлечены в сбор данных, анализа и интерпретации и составлении рукописи. MMREN участвовал в пересмотре рукописи, внося свой вклад в его содержание. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• В исследовании-Band: желудочного шунтирования или регулируемые хирургии полосы желудка для лечения патологиче…
• микроРНК подпись, связанная с исход у больных раком желудка после chemotherapy