Une population mixte de Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii et "heilmannii Helicobacter" dans la muqueuse gastrique d'un cat

domestiques Une population mixte de Helicobacter pylori, Helicobacter
bizzozeronii et "Helicobacter heilmannii
" dans la muqueuse gastrique d'un chat domestique Contexte
Résumé
la présence de Helicobacter
au sein de la muqueuse gastrique est responsable de la production de pathologie chez de nombreuses espèces animales, y compris l'homme. Comme il a été montré humains pour abriter un grand nombre des mêmes espèces bactériennes que les carnivores domestiques, préoccupés par leur potentiel zoonotique n'a cessé de croître. Helicobacter pylori
, un cancérigène de classe 1 responsable des cas de gastrite et le cancer gastrique chez l'homme, produit une pathologie similaire chez les carnivores pour animaux de compagnie et est considéré comme un exemple de anthroponosis. Le cas présenté ici fait référence à un de 13 ans de race mixte castré chat femelle vu à l'autopsie.
Constatations
échantillons d'estomac ont été analysés pour la présence d'Helicobacter spp. par la cytologie, histopathologie et PCR. atrophie légère muqueuse a été observée dans le fond et de l'antre, tandis que lymphoplasmocytaire infiltrats indication contraire dans la lamina propria de l'antre. Helicobacter
-comme les organismes ont été observés dans le corps et de l'antre, occupant des glandes muqueuses gastriques et de surface. Il était possible de détecter Helicobacter spp., H. pylori
, H. heilmannii
et H. bizzozeronii
dans le fond, du corps et de l'antre par PCR, alors que dans l'antre des échantillons de PCR ont été positifs pour les Conclusions de H. pylori
.
La femelle stérilisée à l'étude pourraient représenter soit une population encore non décrit des chats domestiques infectés par H. pylori
ou un cas de anthroponosis.
Mots-clés histopathologie PCR zoonose Gastrite
Feline Helicobacter Constatations Contexte
Helicobacter pylori
est un gram négatif, uréase positif, les bactéries spiralées classé par l'Organisation mondiale de la santé comme un cancérigène de classe 1 comme sa relation avec gastrite humaine et le cancer gastrique a été fermement établi [1]. La majorité des 32 espèces décrites à ce jour sont des microorganismes entériques de mammifères, tandis que 12 espèces sont des habitants gastriques. Quatre espèces sont maintenant considérés comme communs dans la muqueuse gastrique des carnivores domestiques,
, Helicobacter bizzozeronii
, Helicobacter de la
, "heilmannii Helicobacter" de Helicobacter
types 1, 2 et 4 [2, 3], tandis que le rôle des
H. Bilis comme un organisme gastrique primaire reste discutable. Bien que le rôle pathogène de ces espèces dans la gastrite et /ou cancer gastrique n'a pas encore été fermement établie chez les animaux [4, 5], les félins semblent être beaucoup plus sensibles alors canines [6]. fibroses gastrique et l'atrophie ont été liés à
infection chez les chats H. [7] alors que la présence de follicules lymphoïdes et l'inflammation ont été liés à Helicobacter spp. et "H. heilmannii "senso lato
colonisation [8, 9].
Il a été suggéré que, les humains de façon similaire à H. pylori
infectés, la présence de H. heilmannii
pourrait jouer un rôle dans alimentaire félin lymphome [10]. Il y a plusieurs raisons de la préoccupation croissante en ce qui concerne le potentiel zoonotique de ces bactéries [11]. Tout d'abord, les humains ont été montré pour abriter des espèces autres que H. pylori
avec des conséquences pathologiques; d'autre part, aucune source environnementale de ces bactéries a été trouvé; et enfin, les études épidémiologiques ont montré un lien entre le contact des animaux et de l'infection [12]. Bien que H. pylori
produit une pathologie similaire chez les carnivores de compagnie et chez l'homme, cette espèce n'a pas encore été trouvé dans les populations de carnivores domestiques normaux [13, 14], ce qui rend ces cas de bons exemples de anthroponosis [4, 6, 13]. Cependant, Buczolits et al. [15] ont identifié deux séquences de -comme les organismes de Helicobacter 100% identique à H. pylori
dans la muqueuse gastrique des canines, ré-allumer le débat sur le rôle des carnivores de compagnie dans la transmission de cette bactérie humains. Le présent ouvrage décrit la présence de H. pylori
dans une population mixte des espèces Helicobacter dans la muqueuse gastrique d'un chat à poils courts domestique.
Présentation de cas
A 13 ans, race mixte castré femelle chat avec une histoire de tumeurs mammaires et un épanchement pleural, euthanasiés à la demande des propriétaires, a été présenté pour la nécropsie au Département de pathologie de la Faculté de médecine vétérinaire, Université de Lisbonne. L'estomac a été ouverte le long de la grande courbure, une brosse cytologique a été effectuée et quatre biopsies d'épaisseur totale où obtenus à partir du fond, du corps et de l'antre pour l'histopathologie et analyses PCR. cytologies Brush où obtenus en utilisant, simples boucles utilisation d'inoculation stériles et colorées au May-Grünwald-Giemsa. Une biopsie de chaque région gastrique a été stocké dans 10% de formaline pour le traitement de l'histologie. Un échantillon combiné, comprenant un échantillon de chaque région, et les biopsies restantes des trois régions ont été conservés congelés à -80 ° C, jusqu'à l'extraction d'ADN avec Qiagen DNeasy® Blood & Kit de tissus, selon les instructions du fabricant. Les réactions de PCR pour spp. de
Helicobacter, H. pylori
, H. de la
, H. heilmannii
, H. bizzozeronii
, H.
et H. bilis
ont été effectuées comme décrit précédemment [3, 7, 16 à 19], à l'aide FidelTaq ™ MasterMix (USB® Produits - Affymetrix, Inc.). Les souches de référence H. pylori
CCUG 17874 T,
ATCC H. 49179, H. bizzozeronii
CCUG 35045,
CCUG H. 37845, H. Bilis
ATCC 51630 et H. heilmannii de l'ADN (aimablement fourni par le professeur KW Simpson) ont été utilisés comme témoins positifs. Biopsies pour histopathologie ont été noyées dans des blocs de paraffine, traitées et colorées à l'hématoxyline et de l'éosine et avec Giemsa.
Sur la base des normes de l'Association mondiale vétérinaire Petit animal histopathologiques [20], l'atrophie légère muqueuse a été observée dans le fond et de l'antre, tandis que modérée infiltrats lymphoplasmocytaire ont été notées dans la lamina propria de l'antre. Helicobacter
-comme les organismes ont été observés dans le corps et de l'antre, occupant des glandes muqueuses gastriques et de la surface (figure 1A), où la colonisation a été classée comme légère. Brush cytologie était positive dans le fond et le corps (figure 1B), mais négative dans l'antre. PCR effectuée en utilisant l'ADN extrait de l'échantillon combiné était positif pour Helicobacter spp, H. pylori
, H. heilmannii
et H. bizzozeronii
, originaires de 1200 pb, 298 pb, 580. -bp et amplicons 420 pb, respectivement (figure 2). Lors d'un essai individuel, les trois régions ont été positifs pour spp. De
Helicobacter, H.
et H. bizzozeronii
, alors que seulement l'antre était positif pour H. pylori
. Figure 1 bactéries en spirale, en conformité avec Helicobacter spp. trouvé dans l'estomac (A) dans la muqueuse de la surface. 1000x. Giemsa. (B) et une brosse cytologique de la région rétinienne. 1000x. Mai-Grünwald-Giemsa. (photographies originales).
Figure 2 réactions PCR. échelle moléculaire dans la voie 1 et 14 (Hyperladder II ™ Bioline); les contrôles négatifs dans la piste 2, 5, 8 et 11; Des témoins positifs à Helicobacter s spp. (Piste 3 en utilisant
ATCC H. 49179), H. pylori
(ligne 6), H. heilmannii
type 2 (ligne 9), H. bizzozeronii
(420 pb, piste 12); résultats de l'échantillon H.
spp (1200 pb, piste 4), H. pylori
(298 pb, piste 7), H. heilmannii
(580 pb, piste 10) et H. bizzozeronii Conclusions de
(420 pb, de la voie 13).
La présence d'un Helicobacter de population mixte a été décrit précédemment dans les biopsies gastriques félin [21]. Notre constatation de l'atrophie légère muqueuse est compatible avec d'autres études [6, 22]; Cependant Simpson et al. [7] liée changements dans l'architecture de la muqueuse gastrique avec la présence de H. de la
, une espèce ne trouve pas dans ce chat. H. heilmannii
a été montré pour modifier l'architecture gastrique, mais à travers la prolifération épithéliale et une hyperplasie folliculaire lymphoïde [9], pas atrophie. Il est cependant possible que la présence de H. pylori et H.
bizzozeronii
a modifié le pouvoir pathogène de H. heilmannii
comme décrit pour les infections mixtes de H. bizzozeroniiI /H. felis
[11]. Le fait que le fond de l'oeil et de l'antre ont été les régions les plus touchées sont compatibles avec les autres résultats [8] et, bien que non caractéristique, la présence d'inflammation dans le sinus maxillaire est similaire à celle observée chez les félins infectés expérimentalement par H. pylori
[ ,,,0],21].
la présence de H. pylori
dans la muqueuse gastrique des félins a été seulement rapporté dans un éleveur commercial particulier [23], mais pas dans les populations errants et domestiques [13, 14, 24]. La femelle stérilisée à l'étude pourrait représenter une population encore non décrit des chats domestiques infectés par H. pylori
ou un cas de anthroponosis, comme hypothèse par certains auteurs [4, 5, 13]. Considérant la capacité d 'H. pylori
pour survivre dans l'eau [25] et la tendance à garder les chats en plein air intérieur /au Portugal, la colonisation de cet animal par une source d'eau contaminée doit également être envisagée. Il n'a pas été possible de déterminer si les co-habitants humains étaient H. pylori
positif ou si l'animal a eu accès à l'extérieur.
La présence de H. heilmannii
chez les chats a été liée à diverses altérations de la muqueuse gastrique [9] et lymphome digestif [10]. Jergens et al. [22] ont montré que le traitement conduit à l'amélioration des signes cliniques de la gastrite et de la clairance bactérienne, bien que les signes histologiques de gastrite demeurent, ce qui suggère une relation de cause à effet similaire à celui observé chez H. pylori
humains infectés [16]. Cependant, comme d'autres études ne pouvaient pas en évidence une telle relation, d'autres facteurs tels que l'effet des infections mixtes et la possibilité de virulence de la souche dépendante, devraient être envisagées. La présence d'une infection mixte de H.
et H. pylori
, que l'on trouve dans ce chat, pourrait expliquer le développement de la pathologie chez certains animaux et non pas dans d'autres infectées uniquement avec H. heilmannii
. modèle de distribution Compte tenu de H. pylori
focal [6], la petite taille de l'échantillon normalement obtenue par endoscopie et même la biopsie [21] peut expliquer le taux élevé de résultats négatifs pour H. pylori
.
Le rôle joué par Helicobacter
dans la gastrite féline, associée ou non à un lymphome, reste controversée. Plusieurs facteurs, tels que les espèces de Helicobacter de la présente, la virulence de la souche, et la prédisposition génétique de l'animal, devraient être étudiés plus, afin de mieux comprendre leur relation à la maladie clinique.
Abréviations
PCR:
réaction en chaîne par polymérase

ADN: acide désoxyribonucléique
Bp:
paires de bases .
Déclarations de les Remerciements
Les auteurs tiennent à remercier CIISA /JVM pour leur soutien financier (projet PEST-OE /AGR /U10276 /2014, financé par FCT), le professeur Kenneth W. Simpson pour le genre don de H. heilmannii
ADN utilisé comme témoin positif pour la PCR, le professeur Maria Conceição Peleteiro pour ses conseils d'experts, ainsi que et Tec. Sandra Carvalho pour son aide avec histopathologie et Tec. Carla Carneiro pour son aide dans le laboratoire de bactériologie.
Auteurs fichiers originaux soumis pour les images
Voici les liens vers les auteurs originaux soumis les fichiers pour les images. de fichier d'origine pour la figure 1 13620_2014_80_MOESM2_ESM.tif Auteurs '13620_2014_80_MOESM1_ESM.tif Auteurs fichier d'origine pour la figure 2 Intérêts concurrents
Les auteurs déclarent qu'ils ont aucun conflit d'intérêts. Les contributions de
Auteurs
RCT identifié le patient, collectées les échantillons gastriques et effectué cytologie de brosse. RCT et MO effectuées les processus de laboratoire qui ont permis le traitement des échantillons pour les analyses PCR. HP a effectué l'histopathologie. RCT et CLV ont été impliqués dans l'acquisition de données, l'analyse et l'interprétation et la rédaction du manuscrit. MMREN a participé à la révision du manuscrit, ce qui contribue à son contenu intellectuel. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.

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