Uma população mista de Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii e "Helicobacter heilmannii" na mucosa gástrica de um cat

doméstico uma população mista de Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii
e "Helicobacter heilmannii
" na mucosa gástrica de um gato doméstico da arte abstracta
Fundo
a presença de Helicobacter
dentro da mucosa gástrica é responsável pela produção de patologia em muitas espécies de animais, incluindo o homem. Dado que os seres humanos têm sido mostrados para abrigar muitas das mesmas espécies bacterianas como carnívoros domésticos, a preocupação com o seu potencial zoonótica tem vindo a crescer. Helicobacter pylori
, um carcinogéneo da classe 1 responsável por casos de gastrite e câncer gástrico em humanos, produz patologia semelhante nos carnívoros de companhia e é considerado um exemplo de antroponose. O caso apresentado refere-se a uma gata de 13 anos, raça misturada castrado visto na necropsia.
Achados
amostras estomacais foram analisados ​​quanto à presença de Helicobacter
spp. por citologia, histopatologia e PCR. atrofia da mucosa leve foi observada na região do fundo e antro, enquanto linfoplasmocitária infiltra onde indicado na lâmina própria do antro. Helicobacter
-como organismos foram observados no corpo e antro, ocupando glândulas mucosas gástricas e superfície. Foi possível detectar a Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii
e H. bizzozeronii
no fundo do útero, corpo e antro por PCR, enquanto que no antro amostras de PCR foram positivos por H. pylori
.
Conclusões
A fêmea esterilizada em estudo poderia representam tanto uma população ainda sem descrito de gatos domésticos infectados com H. pylori
ou um caso de antroponose.
Palavras-chave
Feline Helicobacter
Zoonoses Gastrite PCR Histopatologia achados
Fundo
Helicobacter pylori
é uma bactéria gram negativa, urease positiva, bactérias espirais classificada pela Organização Mundial de Saúde como um carcinogéneo da classe 1 como sua relação com a gastrite e câncer gástrico humano tem sido firmemente estabelecida [1]. A maioria das 32 espécies descritas até à data são microrganismos entéricos de mamíferos, enquanto que 12 espécies são habitantes gástricas. Quatro espécies são agora considerados a ser comum na mucosa gástrica de carnívoros domésticos, Helicobacter felis
, Helicobacter bizzozeronii
, Helicobacter salomonis
, "Helicobacter heilmannii"
tipos 1, 2 e 4 [2, 3], enquanto o papel de 'H.
Bilis como um organismo gástrico primário permanece questionável. Embora o papel patogênico dessas espécies em gastrite e /ou câncer gástrico ainda não foi firmemente estabelecida em animais de estimação [4, 5], felinos parecem ser muito mais suscetíveis, em seguida, caninos [6]. fibroses atrofia gástrica e têm sido associados a infecção por H. felis
em gatos [7], enquanto a presença de folículos linfóides e inflamação foram relacionadas com Helicobacter
spp. e "H. heilmannii "senso lato
colonização [8, 9].
Sugeriu-se que, os seres humanos de modo semelhante a H. pylori
infectadas, a presença de H. heilmannii
poderia desempenhar um papel em alimentar felino linfoma [10]. Há várias razões para a preocupação crescente em relação ao potencial zoonótico destas bactérias [11]. Em primeiro lugar, os seres humanos têm sido mostrados para abrigar diferentes de espécies H. pylori
com consequências patológicas; Em segundo lugar, nenhuma fonte ambiental por estas bactérias foi encontrado; e, por último, os estudos epidemiológicos têm mostrado uma ligação entre o contacto infecção animal e [12]. Embora H. pylori
produz patologia semelhante nos carnívoros de companhia e em seres humanos, esta espécie ainda não foi encontrado em populações de carnívoros domésticos normais [13, 14], tornando estes casos bons exemplos de antroponose [4, 6, 13]. No entanto, Buczolits et ai. [15] identificaram duas sequências de Helicobacter
-como organismos 100% idêntico ao H. pylori
na mucosa gástrica dos caninos, re-acender o debate sobre o papel de carnívoros de companhia na transmissão dessa bactéria humanos. O presente trabalho descreve a presença de H. pylori
em uma população mista de Helicobacter
espécies na mucosa gástrica de um gato de curto cabelo doméstico. Apresentação
caso
uma raça mista de 13 anos gato fêmea esterilizada com uma história de tumores mamários e derrame pleural, sacrificados a pedido dos proprietários, foi apresentado para necropsia no Departamento da Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade de Lisboa Patologia. O estômago foi aberto ao longo da curvatura maior, citologia foi realizada e quatro biópsias de espessura total, onde obtidos a partir do fundo, corpo e antro para histopatologia e PCR analisa. citologias escova onde obtidos utilizando, loops uso de inoculação única, estéreis e corados com May-Grünwald-Giemsa. Uma biópsia a partir de cada região gástrica foi armazenada em 10% de formalina para histologia de processamento. Uma amostra combinada, compreendendo uma amostra de cada região, e os restantes biópsias das três regiões foram mantidas congeladas a -80 ° C, até que a extracção do ADN com DNeasy® Qiagen Blood & Kit de tecido, de acordo com as instruções do fabricante. As reações de PCR para Helicobacter
spp.
, H. pylori
, H. felis
, H. heilmannii
, H. bizzozeronii
, H. salomonis Comprar e H. Bilis
foram realizados como previamente descrito [3, 7, 16-19], utilizando FidelTaq ™ MasterMix (USB® produtos - Affymetrix, Inc.). cepas de referência H. pylori
CCUG 17874 T, H. felis
ATCC 49179, H. bizzozeronii
CCUG 35045, H. salomonis
CCUG 37845, H. Bilis
ATCC 51630 e H. heilmannii
ADN (gentilmente cedido pelo Professor KW Simpson) foram utilizados como controlos positivos. Biópsias para histopatologia foram encaixados em blocos de parafina, processados ​​e corados com hematoxilina e eosina e com Giemsa.
Com base nos padrões Small World Veterinary Association animal histopatológicos [20], atrofia da mucosa leve foi observada no fundo e antro, enquanto moderada infiltrados linfoplasmocitário foram anotados na lâmina do antro. Helicobacter
-como organismos foram observados no corpo e antro, ocupando glândulas mucosas gástricas e superfície (Figura 1A), onde a colonização foi classificada como leve. Escova de citologia foi positiva no fundus e corpus (Figura 1B), mas negativa no antro. PCR realizada utilizando DNA extraído da amostra combinada foi positivo para Helicobacter
spp, H. pylori
, H. heilmannii Comprar e H. bizzozeronii
, originários de 1200 pb, 298 pb, 580. -bp e amplicões de 420 pb, respectivamente (Figura 2). Quando testados individualmente, as três regiões foram positivos para Helicobacter
spp.
, H. heilmannii Comprar e H. bizzozeronii
, enquanto apenas o antro foi positivo para H. pylori
. A Figura 1 bactérias espirais, de acordo com Helicobacter spp. encontrado no estômago (A) na superfície mucosa. 1000x. Giemsa. (B) e citologia da região de fundo de olho. 1000x. May-Grunwald-Giemsa. (As fotografias originais).
Figura 2 reacções de PCR. escada molecular na pista 1 e 14 (Hyperladder II ™ Bioline); controlos negativos na pista 2, 5, 8 e 11; controlos positivos Helicobacter
spp. (Pista 3 usando H. felis
ATCC 49179), H. pylori
(pista 6), H. heilmannii
tipo 2 (pista 9), H. bizzozeronii
(420 pb, pista 12); Os resultados da amostra H.
spp (1.200 pb, pista 4), H. pylori
(298 pb, pista 7), H. heilmannii
(580 pb, pista 10) e H. bizzozeronii
(420 pb, pista 13).
Conclusões
A presença de um Helicobacter
população mista foi previamente descrito em biópsias gástricas felinos [21]. A nossa descoberta de atrofia da mucosa leve é ​​consistente com outros estudos [6, 22]; No entanto Simpson et ai. [7] ligada alterações na arquitectura da mucosa gástrica com a presença de H. felis
, uma espécie não encontrado nesta gato. H. heilmannii
foi mostrado para alterar a arquitetura gástrico mas através da proliferação epitelial e hiperplasia folicular linfóide [9], não atrofiar. É possível, contudo, que a presença de H. pylori e H.
bizzozeronii
alterou a capacidade patogénica da H. heilmannii
como descrito para as infecções mistas de H. bizzozeroniiI /h. felis
[11]. O facto de que o fundo do útero e antro eram as regiões mais afectadas é consistente com outros achados [8] e, embora não seja característica, a presença de inflamação no antro é semelhante ao encontrado em felinos infectados experimentalmente com H. pylori
[ ,,,0],21].
a ocorrência de H. pylori
na mucosa gástrica de felinos só foi relatada em um criador comercial particular, [23], mas não em populações de rua e domésticos [13, 14, 24]. A fêmea esterilizada em estudo poderia representar uma população ainda sem descrito de gatos domésticos infectados com H. pylori
ou um caso de antroponose, como hipótese por alguns autores [4, 5, 13]. Considerando a capacidade da H. pylori
para sobreviver em água [25] e a tendência para manter os gatos indoor /outdoor em Portugal, a colonização deste animal através de uma fonte de água contaminada também devem ser considerados. Não foi possível determinar se a co-habitantes humanos foram H. pylori
positivo ou se o animal teve acesso ao exterior.
A presença de H. heilmannii
em gatos tem sido associada a várias alterações na mucosa gástrica [9] e linfoma alimentar [10]. Jergens et ai. [22] demonstraram que o tratamento leva à melhoria dos sinais clínicos gastrite e depuração bacteriana, embora os sinais histológicos de gastrite permanecem, o que sugere uma relação causal semelhante ao observado em H. pylori
humanos infectados [16]. No entanto, tal como outros estudos não poderia evidenciar essa relação, outros factores, tais como o efeito de infecções mistas e a possibilidade da estirpe de virulência dependentes, deve ser considerado. A presença de uma infecção mista de H. heilmannii Comprar e H. pylori
, como encontrado neste gato, poderia explicar o desenvolvimento da patologia em alguns animais e não em outros infectados apenas com H. heilmannii
. Dada
padrão de distribuição focal da H. pylori [6], o pequeno tamanho da amostra, normalmente obtido através da endoscopia e mesmo biópsia [21] pode explicar a alta taxa de resultados negativos para H. pylori
.
O papel desempenhado por Helicobacter
na gastrite felino, associada ou não com linfoma, permanece controverso. Vários fatores, tais como as espécies de Helicobacter
presente, a virulência da estirpe, e a predisposição genética do animal, deve ser investigado, a fim de melhor compreender a sua relação com a doença clínica.
Abreviações
PCR:
de reação em cadeia da polimerase

DNA: ácido desoxirribonucléico

BP:
pares de bases .
Declarações
Agradecimentos
Os autores gostariam de agradecer CIISA /FMV pelo apoio financeiro (Projeto de pragas-OE /AGR /U10276 /2014, financiado pela FCT), Professor Kenneth W. Simpson para a doação tipo de H. heilmannii
DNA usado como um controle positivo para PCR, Professor Maria Conceição Peleteiro para ela conselhos de especialistas, bem como e Tec. Sandra Carvalho por sua assistência com histopatologia e Tec. Carla Carneiro por sua assistência no laboratório de bacteriologia.
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Os autores declaram que não têm interesses conflitantes. contribuições
dos autores
RCT identificados o paciente, coletadas as amostras gástricas e realizada citologia. RCT e MO realizados os processos de laboratório que permitiram o processamento de amostras para análises de PCR. HP realizou o exame histopatológico. RCT e CLV estavam envolvidos na aquisição de dados, análise e interpretação ea elaboração do manuscrito. MMREN estava envolvido na revisão do manuscrito, contribuindo para o seu conteúdo intelectual. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.

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