Una población mixta de Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii y "heilmannii Helicobacter" en la mucosa gástrica de un gato doméstico

Una población mixta de Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii
y "Helicobacter heilmannii
" en la mucosa gástrica de un gato doméstico
Resumen Antecedentes

La presencia de Helicobacter Bienvenidos en la mucosa gástrica es responsable de la producción de la patología en muchas especies animales, incluido el hombre. Dado que los humanos han demostrado que el puerto muchas de las mismas especies bacterianas como carnívoros domésticos, la preocupación por su potencial zoonótico ha ido creciendo. Helicobacter pylori
, un carcinógeno de clase 1 responsable de los casos de gastritis y cáncer gástrico en los seres humanos, produce la patología similar en carnívoros de compañía y se considera un ejemplo de anthroponosis. El caso que aquí se presenta se refiere a una gata de 13 años de raza mixta esterilizados visto en la necropsia.
Hallazgos
muestras de estómago se analizaron para determinar la presencia de Helicobacter spp
. por citología, histopatología y PCR. se observó atrofia de la mucosa leve en el fondo de ojo y el antro, mientras linfoplasmocítico infiltra en donde se indique en la lámina propia del antro. Helicobacter
se observaron organismos -como en el corpus y el antro, ocupando las glándulas gástricas y la mucosa superficial. Fue posible detectar Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii
y H. bizzozeronii
en el fundus, cuerpo y antro por PCR, mientras que en el antro muestras de PCR fueron positivos para H. pylori
.
Conclusiones México La hembra esterilizada en estudio podría representar una población todavía no-descrita de gatos domésticos infectados con H. pylori
o un caso de anthroponosis.
Palabras clave
felina Helicobacter
Zoonosis Gastritis PCR Histopatología los hallazgos
Antecedentes
Helicobacter pylori
es un gram-negativas, ureasa positivo, bacterias espirales clasificado por la Organización Mundial de la Salud como un carcinógeno de clase 1 como su relación con gastritis humano y el cáncer gástrico se ha establecido firmemente [1]. La mayoría de las 32 especies descritas hasta la fecha son microorganismos entéricos de mamíferos, mientras que 12 especies son habitantes gástricos. Cuatro especies se consideran ser común en la mucosa gástrica de los carnívoros domésticos, Helicobacter felis
, Helicobacter bizzozeronii
, Helicobacter salomonis
, "Helicobacter heilmannii"
los tipos 1, 2 y 4 [2, 3], mientras que el papel de
H. bilis 'como un organismo gástrico primario sigue siendo cuestionable. Aunque el papel patogénico de estas especies en la gastritis y /o cáncer gástrico aún no se ha establecido firmemente en animales domésticos [4, 5], felinos parecen ser mucho más susceptibles a continuación, caninos [6]. fibrosis y atrofia gástrica se han relacionado con la infección por H. felis
en los gatos [7], mientras que la presencia de folículos linfoides y la inflamación han sido relacionadas con Helicobacter spp
. y "H. heilmannii "en sentido lato
la colonización [8, 9].
Se ha sugerido que, de manera similar a los humanos H. pylori
infectados, la presencia de H. heilmannii
podrían desempeñar un papel en digestivo felino linfoma [10]. Hay varias razones para la creciente preocupación sobre el potencial zoonótico de estas bacterias [11]. En primer lugar, los seres humanos han demostrado que el puerto especies distintas de H. pylori
con consecuencias patológicas; en segundo lugar, se ha encontrado ninguna fuente ambiental para estas bacterias; y, por último, los estudios epidemiológicos han demostrado un vínculo entre el contacto de los animales y la infección [12]. Aunque H. pylori
produce la patología similar en carnívoros de compañía y en los seres humanos, esta especie aún no se ha encontrado en poblaciones de carnívoros domésticos normales [13, 14], por lo que estos casos buenos ejemplos de anthroponosis [4, 6, 13]. Sin embargo, Buczolits et al. [15] han identificado dos secuencias de Helicobacter
-como organismos 100% idéntica a H. pylori
en la mucosa gástrica de los caninos, vuelva a encender el debate sobre el papel de los carnívoros de compañía en la transmisión de esta bacteria a los seres humanos. El presente trabajo describe la presencia de H. pylori
en una población mixta de Helicobacter
especies en la mucosa gástrica de un gato de pelo corto nacional.
Presentación del caso
A 13 años de edad, de raza mixta esterilizados gata con antecedentes de tumores mamarios y derrame pleural, la eutanasia a petición de los propietarios, se les practicó la necropsia al Departamento de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad de Lisboa Patología. El estómago se abrió a lo largo de la curvatura mayor, se realizó la citología de cepillo y cuatro biopsias de espesor completo, donde obtienen del fundus, cuerpo y antro para histopatología y análisis de PCR. citologías cepillo sido obtenidos mediante bucles uso de inoculación estériles individuales, y se tiñeron con May-Grünwald-Giemsa. Una biopsia de cada región gástrica se almacenó en 10% de formalina para el procesamiento de la histología. Una muestra combinada, que comprende una muestra de cada región, y las biopsias restantes de las tres regiones se mantuvieron congeladas a -80 ° C, hasta la extracción de ADN con Qiagen DNeasy® Blood & Kit de tejido, de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Las reacciones de PCR para Helicobacter spp
.
, H. pylori
, H. felis
, H. heilmannii
, H. bizzozeronii
, H. y H. salomonis
Bilis
se realizaron como se describe anteriormente [3, 7, 16-19], utilizando FidelTaq ™ Mastermix (USB® Productos - Affymetrix, Inc.). Cepas de referencia H. pylori
CCUG 17874 T, H. felis
ATCC 49179, H. bizzozeronii
CCUG 35045, H. salomonis
CCUG 37845, H. bilis
ATCC 51630 y H. heilmannii
ADN (amablemente proporcionado por el profesor Simpson KW) se utilizaron como controles positivos. Las biopsias para histopatología se incrustan en bloques de parafina, se procesan y se tiñeron con hematoxilina y eosina y con Giemsa.
Sobre la base de las normas de la Asociación Mundial Veterinaria de Animales Pequeños histopatológicos [20], se observó atrofia de la mucosa suave en el fondo de ojo y el antro, mientras moderada infiltrados linfoplasmocítico se observaron en la lámina propia del antro. Helicobacter
se observaron -como organismos en el corpus y el antro, ocupando glándulas gástricas y la mucosa de la superficie (Figura 1A), donde la colonización se clasificó como leve. Cepillo de citología fue positiva en el fundus y el cuerpo (Figura 1B), pero negativo en el antro. PCR realizada utilizando ADN extraído de la muestra combinada fue positivo para Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii
y H. bizzozeronii
, originario de 1200 pb, 298 pb, 580 -Bp y 420 pb amplicones, respectivamente (Figura 2). Cuando se probó de forma individual, las tres regiones fueron positivos para Helicobacter spp
.
, H. heilmannii
y H. bizzozeronii
, mientras que sólo el antro fue positivo para H. pylori
. Figura 1 bacterias espirales, en consonancia con Helicobacter spp. encontrado en el estómago (A) en la mucosa de la superficie. 1000x. Giemsa. (B) y la citología por cepillado de la región del fondo de ojo. 1000x. May-Grünwald-Giemsa. (Las fotografías originales).
Figura 2 reacciones de PCR. escalera molecular en el carril 1 y 14 (Hyperladder II ™ Bioline); controles negativos en el carril 2, 5, 8 y 11; controles positivos Helicobacter
spp. (Carril 3 usando H. felis
ATCC 49179), H. pylori gratis (carril 6), H. heilmannii
tipo 2 (carril 9), H. bizzozeronii gratis (420 pb, carril 12); resultados de la muestra H.
spp (1.200 pb, carril 4), H. pylori gratis (298 pb, carril 7), H. heilmannii gratis (580 pb, carril 10) y H. bizzozeronii
(420 pb, carril 13).
Conclusiones México La presencia de una población mixta de Helicobacter
se ha descrito anteriormente en biopsias gástricas felinos [21]. Nuestro hallazgo de atrofia de la mucosa leve es consistente con otros estudios [6, 22]; sin embargo Simpson et al. [7] vinculado cambios en la arquitectura de la mucosa gástrica con la presencia de H. felis
, una especie que no se encuentran en este gato. H. heilmannii
se ha demostrado que altera la arquitectura gástrico sino a través de la proliferación epitelial y la hiperplasia folicular linfoide [9], no atrofia. Sin embargo es posible que la presencia de H. pylori y H. bizzozeronii

alteró la capacidad patogénica de H. heilmannii
como se describe para infecciones mixtas de H. bizzozeroniiI /H. felis
[11]. El hecho de que el fondo de ojo y el antro eran las regiones más afectadas es coherente con otros resultados [8] y, aunque no característica, la presencia de inflamación en el antro es similar a la encontrada en los felinos infectados experimentalmente con H. pylori
[ ,,,0],21]. Francia el ocurrencia de H. pylori
en la mucosa gástrica de los felinos sólo se ha informado en un criador comercial particular, [23] pero no en poblaciones callejeros y domésticos [13, 14, 24]. La hembra esterilizada en estudio podría representar una población todavía no-descrita de gatos domésticos infectados con H. pylori
o un caso de anthroponosis, como hipótesis por algunos autores [4, 5, 13]. Teniendo en cuenta la capacidad de H. pylori de búsqueda: 's para sobrevivir en agua [25] y la tendencia de mantener los gatos interiores /exteriores en Portugal, la colonización de este animal a través de una fuente de agua contaminada también debe ser considerado. No fue posible determinar si cohabitantes humanos eran H. pylori
positivo o si el animal tenía acceso al exterior. México La presencia de H. heilmannii Hoteles en gatos se ha relacionado con diversas alteraciones en la mucosa gástrica [9] y el linfoma alimentario [10]. Jergens et al. [22] han demostrado que el tratamiento conduce a la mejora de los signos clínicos gastritis y la eliminación de bacterias, aunque los signos histológicos de gastritis permanecen, lo que sugiere una relación causal similar a la observada en H. pylori
humanos infectados [16]. Sin embargo, como otros estudios no pudieron evidenciar tales relaciones, otros factores tales como el efecto de infecciones mixtas y la posibilidad de virulencia dependiente de la tensión, deben ser considerados. La presencia de una infección mixta de H. heilmannii
y H. pylori
, como se encuentra en este gato, podría explicar el desarrollo de la patología en algunos animales y en otros no infectados solamente con H. heilmannii
. Dada
patrón de distribución focal de H. pylori [6], el tamaño pequeño de la muestra obtiene normalmente a través de la endoscopia y biopsia incluso [21] puede explicar la alta tasa de resultados negativos para H. pylori
. México La función desempeñada por Helicobacter
en la gastritis felino, asociado o no con el linfoma, sigue siendo controvertido. Varios factores, tales como las especies de Helicobacter
la actualidad, la virulencia de la cepa, y la predisposición genética del animal, deben investigarse más a fondo con el fin de comprender mejor su relación con la enfermedad clínica.
Abreviaciones
PCR: reacción en cadena de la polimerasa


ADN: ácido desoxirribonucleico

BP:
pares de bases .
Declaraciones
Agradecimientos
Los autores desean agradecer a CIISA /FMV por su apoyo financiero (Proyecto de plagas-OE /AGR /U10276 /2014, financiado por FCT), el profesor Kenneth W. Simpson para el tipo de donación de H. heilmannii
ADN utilizado como control positivo para la PCR, la profesora Maria Conceição Peleteiro por su asesoramiento de expertos, así como y Tec. Sandra Carvalho por su ayuda en la histopatología y Tec. Carla Carneiro por su ayuda en el laboratorio de bacteriología.
Los autores originales presentados archivos de imágenes
A continuación se presentan los enlaces a los archivos de los autores presentados original para imágenes. 'archivo original de la figura 1 13620_2014_80_MOESM2_ESM.tif autores 13620_2014_80_MOESM1_ESM.tif Autores archivo original para la figura 2 Conflicto de intereses México La autores declaran que no tienen intereses en competencia.
contribuciones de los autores
ECA identificado el paciente, recogidas las muestras gástricas y realizado la citología por cepillado. RCT y MO llevaron a cabo los procesos de laboratorio que permitían el procesamiento de muestras para los análisis de PCR. HP lleva a cabo la histopatología. ECA y CLV estaban involucrados en la adquisición de datos, análisis e interpretación y la redacción del manuscrito. MMREN participó en la revisión del manuscrito, contribuyendo a su contenido intelectual. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

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