Ausschöpfung vun interstitial Zellen vun Cajal (Sanktioune) an de Mo vun Diabetiker Patienten zertifizéiert ass . Wann um ST36 electroacupuncture (W) eng efficace Behandlung ass gastric motility ze regléieren, bleiwen d'Mechanisme vun MOL op ST36 op gastric emptying an Netzwierker vun Sanktioune opgekläert ze ginn. D'Ziel vun dëser Etude huet d'Auswierkunge vun MOL op gastric emptying an op de Restaurant vun Sanktioune Netzwierker ze ermëttelen. Also huet an der Kontroll zoufälleg zockerkrank deër (DM), zockerkrank deër mat Geldstrof MOL (DM + Flugstonnen), zockerkrank deër mat niddereg Frequenz MOL (DM + LEA) an Diabetiker deër mat héijer Frequenz MOL Gruppen (DM + erhëtzt). Den Ausdrock vun c-Kit vun all Layer vun gastric Mauer war duerch westlech blotting évaluéieren. D'Verbreedung vun Sanktioune war vun immunolabeling vun c-Kit an Ki67 als apoptosis vun Sanktioune identifizéiert vun TUNEL staining iwwerpréift huet. D'Resultater goufen wéi follegt: (1) Gastric emptying Foul am DM Grupp Verspéidung huet, mee am LEA an erhëtzt Grupp, virun allem am LEA Grupp denke. (2) Den Ausdrock vun c-Kit vun all futti war anscheinend an der DM Grupp reduzéiert, mä och an der LEA an erhëtzt Grupp weider-reegelen. (3) Naomie proliferated Sanktioune (c-Kit + /Ki67 +) grënnen buuschtege Netzwierker mat c-Kit + Zellen sech am LEA an erhëtzt Grupp observéiert, iwwerdeems de apoptotic Zellen (c-Kit + /TUNEL +) sech kaum vun der LEA an erhëtzt Grupp Arc . Zesummen, héich an héich Frequenz MOL op ST36 Rettungsplang der beschiedegt Netzwierker vun Sanktioune vun der apoptosis inhibiting an der Verbreedung vun de Mo. vun Diabetiker deër Tempo, an eng verbessert gastric emptying doraus VerfÜgung
Fro:. Chen Y, Xu JJ , Liu S, Hou XH (2013) Electroacupuncture um ST36 Ameliorates Gastric Emptying a Marine Netzwierker vun Interstitial Zellen Cajal am Mo vun Diabetiker Also. PLoS NËMMEN 8 (12): e83904. Doi: 10.1371 /journal.pone.0083904 VerfÜgung
Redakter: Yvette Tache, Universitéit vu Kalifornien, Los Angeles, Vereenegt Staate vun Amerika VerfÜgung
Arnaque: 9. August 2013; Akzeptéiert: 8. November 2013; Publizéiert: 31. Dezember 2013 zu
Copyright: © 2013 Chen et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung
Funding:. D'Aarbecht war deelweis duerch Subventioune vun der National Natural Science Foundation of China (Nr 30670775, Nr 81270458) ënnerstëtzt. Nee zousätzlech externen Finanzéierung gestoppt, fir dat ze studéieren. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung
Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung
Arte vun gastrointestinal motility Entwécklungsstéierungen rangéiert vun funktionell dyspepsia zu gastroparesis Foul d'Liewensqualitéit vun de Patiente mat Joerzéngten vun Zockerkrank Afloss [1]. Gastroparesis, vun verspéiten gastric emptying charakteriséiert, existeiert bis zu 30% vu Persounen mat Typ 1 Diabetes [2]. Obwuel verschidde therapeutesch Interventiounen dorënner pharmazeuteschen Behandlung an e puer Net-Drogenofhängeger Behandlungen probéiert hunn, bleiwen d'curative Effekter fir gastroparesis versprach. VerfÜgung
Akupunktur haut zum benotzt gouf fir Dausende vu Joren gastrointestinal Entwécklungsstéierungen an orientaleschen Länner unzegesin. Electroacupuncture (W), déi eng Modifikatioun vun traditionell Akupunktur ass, ass méi gëeegent fir de Medeziner an elementar Fuerschung Astellunge fir seng reproducibility. Zusanli VerfÜgung (ST36) ass eng gemeinsam acupoint dacks benotzt fir gastrointestinal Krankheeten Plëséier. An de leschte Joer, hunn d'Auswierkunge vun MOL op ST36 op gastric motility goufen an ville Studien bewäert. Fir Déieren, bei ST36 MOL vill gastric motility zu bewosst deër fräi a verbessert gastric zu STZ-entschlof zockerkrank deër [3], [4] emptying Verspéidung. Desweideren, an de Mënschen, bei ST36 MOL gastric emptying denke an erliichtert dyspeptic Symptomer funktionell dyspepsia Patienten an Diabetiker Persounen mat gastroparesis [5], [6]. Obwuel an dës Studien nëmmen héich Frequenz MOL adoptéiert gouf, war héich Frequenz MOL och esophageal an distal Colon motility an Déieren [7], [8] Rapport ze förderen. Sou, zéien d'Auswierkunge vun verschidden Frequenz MOL op gastric motility an der Basisdaten Mechanismen Leit d'Opmierksamkeet. VerfÜgung Interstitial Zellen vun Cajal (Sanktioune), wéi pacemakers gutt etabléiert generéieren an lues Wellen propagating, hunn verdengten Bedeitung vun gastrointestinal Regulatioun motility iwwer puer Joerzéngten [9]. Dräi bestemmt vun Sanktioune dorënner intramuscular Sanktioune (Sanktioune-IM), myenteric Sanktioune (Sanktioune-MENG) an submucosal Sanktioune (Sanktioune-SM) Form intakt Netzwierker an der gastric Mauer [10]. Netzwierker vun Sanktioune sinn net statesch och zu gestallt Konditiounen; apoptosis an transdifferentiation Féierung ze Sanktioune Verloscht, iwwerdeems Sanktioune kann och aus Stammzellen a waarden Iwwerliewe [11], [12] andeem Prolifératioun, replenishment restauréiert ginn. Extensiv Studien hunn dokumentéiert datt Verloscht a Schued vun Sanktioune Venen gastrointestinal motility zu Déiereschutz Modeller a Patienten mat Diabetes [13] ëmmer - [15]. Viru kuerzem, am Rapport weider Studien dass MOL d'Erhéijung vun colonic Sanktioune zu luesen oennert Majo deër an deër der enteroenterostomy vereinfacht [16], [17]. Eis rezent Etude bewisen, och dass MOL op ST36 leider Sanktioune vun de Colon vun Diabetiker deër restauréiert konnt [18]. Mëttlerweil gëtt et Suergen, datt MOL Prolifératioun gefördert a vun der Hippocampus apoptosis vum Gehir Zell inhibited [19], [20]. Mä et ass eng eidel iwwer d'Auswierkunge vun MOL op ST36 op Sanktioune vun Diabetiker gastroparesis an de Mechanismus ob der Verbreedung an apoptosis vun Sanktioune implizéieren VerfÜgung Dofir, d'Ëmsetze vun dëser Etude fir sech:. 1) diskutéieren d'Auswierkunge vun verschidden Frequenz MOL op gastric emptying; 2) z'ënnersichen d'Auswierkunge vun MOL op ST36 op Sanktioune Netzwierker an Diabetiker deër; 3) zertifiéieren ob der apoptosis an Prolifératioun vu Sanktioune Équipe huet. VerfÜgung IFLA- Ausso VerfÜgung D'deër scho mënschlech Betreiung an dëser Etude streng an Aklang duerchgefouert mat de Recommandatiounen am Guide fir d'Fleeg an Uwendung vun schafft Déieren vun der National Instituter vun Gesondheet, mat all Operatiounen vun der ethesch Normen vun der Déierefrënn Care an Benotzt Comité vun Tongji medezinesch Uni, Huazhong Universitéit vu Wëssenschaft an Technologie guttgeheescht. Déieren VerfÜgung Männlech Sprague-Dawley deër gewien 250-300 g an de Grëff ze studéieren ausgewielt goufen. Also goufen aus der fonnt Déieren Center vun Tongji Medical College (Huazhong Universitéit vu Wëssenschaft an Technologie, Wuhan, China) an huet ënner normal Labo Konditiounen (22 ° C, 12/12 h Liicht-donkel Zyklus) mat gratis Zougang zu Liewensmëttel kritt an steril Waasser. No enger Woch vun de Lycée erofzesetzen, sech Déieren offiziell an eisem Experiment adoptéiert. VerfÜgung zockerkrank Modell VerfÜgung der Nuecht fasting awer gratis Zougang zu Waasser, huet de Modeller mat enger eenzeger intraperitoneal Sprëtz vun streptozotocin gegrënnt an deër (STZ, 60 mg /kg, dh 1 ml /100 g Kierpergewiicht; Alexis Biochemicals, San Diego, CA, USA), frësch an 20 mm citrate gefiermt Léisung opgeléist (pH 4.5; Fläch, St Louis, MO, USA) . D'Kontroll Grupp war mat gläicher Volume vun citrate gefiermt heijen. All deër goufen an der selwechter Conditioun, mat Waasser Entzuch fir 4 h waren awer ad libitum VerfÜgung erofzesetzen. Eng Woch no der Sprëtz, Diabetis war zu verschiddene Kéier confirméiert duerch Zocker an enger Lëscht vu ganzt Blutt kritt Moosse vun der Tipp vun Schwäif Zuchstreck puncturing. A Bluttzocker Niveau vun ≥16.7 mmol /L war als Standard fir erfollegräich Modell geholl. Bluttzocker war punctually ier d'Sprëtz an den 1., 4. a 8ten Woch no der Sprëtz opgefouert. Ausserdeem, Gewiichtsverloscht, polydipsia an polyuria sech weider Indicateuren der erfollegräich inducement vun Diabetiker Grenzwäerter ze Beweiser. VerfÜgung hun Ëmwelt- VerfÜgung Also waren an fënnef Gruppen zoufälleg (10 deër all Grupp), dorënner och d'Kontroll , zockerkrank Grupp (DM), zockerkrank deër mat Geldstrof MOL Grupp (Sea nëmmen Akupunktur ouni elektresche Stroum, 30 min /d), zockerkrank deër mat niddereg Frequenz MOL Grupp (LEA, 10 Hz, 1-3 MA, 30 min /d ) an Diabetiker deër mat héijer Frequenz MOL Grupp (erhëtzt, 100 Hz, 1-3 MA, 30 min /d). (; Shanghai Huayi Medical Instrument Factory, Shanghai, China G6805-2A) alldeeglechen fir 8 Wochen MOL war um acupoint ST36 mat elektresch stimulator ëmgesat. Den elektresche Stroum war no etabléiert ze liicht vun den ënneschte fofzeng Diiren. Fir den Zweck vun eliminéiert den Afloss vun Stress erreechen, goufen Déieren erlaabt fräi an hir eegen casing während der MOL Prozedur ze plënneren. VerfÜgung No successive Interventioun vun 8 Wochen, vun deër vun all Grupp fir gastric emptying getest goufen. Dunn huet si geaffert, an uplanzen vun antrum sech opmierksam kritt. All specimen war an e puer Deeler opgedeelt, eng relativ kleng eent war bei -80 ° C fir westlech blotting Analyse gespäichert der décker frësch ugebauten an engem Stéck war an 2,5% glutaraldehyde fir Elektronen microscopy gesat, an de Rescht sech zu ZAMBONI d'fixative fix (2 % paraformaldehyde an 1,5% Boverie picric Seier Léisung vun 0,1 M phosphate gefiermt Léisung (PBS, PH 7.4) fir immunofluorescence staining. VerfÜgung Kilometréierung vun gastric emptying VerfÜgung gastric emptying vun enger Verännerung Leeschtung war ëmschriwwen virdrun [21]. Den Test Iesse mat phenol rout (0,5 mg /ml) als Luucht an carboxymethylcellulose (15 mg /ml) war ëmmer géinteneen an dann op 37 ° C ofgehalen. No Liewensmëttel-entzu Iwwernuechtung, deër dobäi waren 2 ml phenol rout Iesse via engem gavage Nol verwalt. Drëssegjärege Minutt méi spéit, Déieren déi cervical dislocation séier geaffert huet. de ganze Mo genau no ligation um Cardia an pyloric, geläscht an duerno de Mo. war oppen an hir Inhalter sech an engem Test Rouer dann an mat 40 ml destilléiert Waasser gewäsch. Um Enn vun der Experimenter, NaOH Léisung (20 ml, 1 M) war fir all Rouer notéiert de Maximum intensiv Faarf ze entwéckelen. D'absorbance vun der Prouf bei 560 nm mat engem spectrophotometer liesen (HITACHI, U-2900) war de Montant vun phenol nozedenken rout am Mo. bleiwen. Den Taux vun gastric emptying war no folgend Formule berechent: Gastric emptying (%) = 100 × (1 - X /Y), stellt X absorbance vun phenol rout vum Mo vun Déieren gesammelt geaffert 30 min nom Test Iessen. Y duerstellt absorbance vun phenol rout vum Mo vun Kontroll Déier wéint ëmbruecht direkt no der Administratioun vun der Test Iessen. VerfÜgung Western Blotting VerfÜgung Fresh Echantillon vun gastric antrum zu engem Sylgard Plat bereien sech an all Layer war vun spatzen dissection der Entféierung vun der mucosa virsiichteg ugebauten. Mat der Hëllef vun labber-dodrun Pincette an microsurgical Schéier ënnert engem dissecting microscope, Schichten vun Sanktioune-SM, Sanktioune-IM a Sanktioune-MENG kritt huet. All d'manipulations sech op d'Äis gemaach fir d'FAQ Verloscht verhënneren. An dann en Echantillon vun Sanktioune-SM, Sanktioune-IM a Sanktioune-MENG sech bei -80 ° C gespäichert. VerfÜgung Fresh-gefruer Echantillon sech an der Zell Ophiewe Blesséierter an homogenized zu Ripa Respektiv (Upstate, Temecula, CA USA,) mat protease inhibitor (Fläch chemesche Co., St Louis, MO, USA). D'Mëschung war fir 10 min bei 12000 g centrifuged bei 4 ° C, an der supernatants sech den ganzen FAQ gesammelt. D'FAQ Konzentratioun war vun der Bradford Method alles. Duerno, huet equivalents vun 50 mg vun ofgebaut Proteinen Rhythmus vun 10% Natrium dodecylsulfate polyacrylamide gelies electrophoresis (SDS-PAGE) getrennt a transferéiert ze PVDF Membran (Millipore, Bedford, MA, USA). Duerno ëmmer nonspecific bindend Flecken mat 5% nonfat dréchen Mëllech an Tris-gefiermt Salins mat 0,1% Tween 20 (TBST) bei Raumtemperatur fir 1 h, goufen dës Schläimhait mat Primärschoul antibody zu Anti-c-Kit incubated (1:200, Santa Cruz déi, INC) Iwwernuechtung bei 4 ° C mat Kanéngchen anti-Maus Actin (1:400, Santa Cruz déi, INC) als déi intern Kontroll. No dräi Mëtten mat TBST, déi incubated Schläimhait mat HRP-Hausnummeren Secondaire antibody (HRP-Hausnummeren Kanéngchen anti-Geess a HRP-Hausnummeren Geess anti-Maus, 1:5000) fir 1 h bei Raumtemperatur. Duerno mat dräi Mëtten vun TBST, goufen d'Bands vum chemesche Reaktioun mat verstäerkte chemiluminescence Agent (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ) visualized an der blot war bis autoradiography ënnerworf. Densitometry Analyse war quantitativ One Software (Bio-Rad techneschen Service Chiffer, Version 4.6.2) gesuergt. VerfÜgung Immunofluorescence Studien VerfÜgung Fir ganzt-Montéierung staining unzegoen, huet de Mo opgemaach a verschidden rinsed Mol mat PBS. Gastric antrum gouf zu engem Sylgard Plat bereien an zu 150% vun hirem Original Gréisst gespaant, an dann mat ZAMBONI d'fixative fir 24 h bei Raumtemperatur fest. Déi fix Stoffer sech mat PBS zou an dann war d'mucosa vun spatzen dissection geläscht. Sanktioune-SM um submucosal Uewerfläch vun der kreesfërmeg Muskel futti Wëllt, Sanktioune-IM intermingling ënnert glat Muskel Zellen a Sanktioune-MENG zesumme mat myenteric Nerve plexus virsiichteg mat bereet labber-dodrun Pincette an microsurgical Schéier ënnert engem dissecting microscope. VerfÜgung D'immunostaining Prozeduren fir z'entdecken Sanktioune Netzwierker an Prolifératioun virdru beschriwwen hunn [22]. Ki67, engem nuklearen FAQ während all déi aktiv Phasen vun Zell ausgedréckt an wäitgehend an der Rou Zell, gouf de proliferative Sanktioune [23] z'entdecken applizéiert. Nom Wäschen sechs Mol mat PBS fir 1 h, goufen Stoffer mat 5% normal Bovine serum vun PBS mat 0.3% Triton X-100 (PBST) fir 1 h bei Raumtemperatur incubated an duerno mat der Primärschoul antibody c-Kit incubated (1:100 Nuecht op 4 ° C Abcam, Cambridge, UK);; Santa Cruz, CA, USA) an Ki67 (1:100. No an PBST falsch fir 30 min, war d'immunoreactivity benotzt Alexa Fluor 594-conjugated Secondaire antibody (Esel IgG anti-Geess, 1:100) fonnt ginn an Alexa Fluor 488-conjugated Secondaire antibody (Esel anti-rabit IgG, 1:100) bei 37 ° C fir 1 h, duerno zu PBS dräimol fir 30 min, an incubated mat DAPI (0,1 mg /ml; Fläch, St Louis, MO, USA) do falsch fir 30 min wéi engem nuklearen Konter stain. Rinsed vun PBS zweemol, goufen Stoffer op eng Rutsch matt. A confocal Laser Scannen microscope (Nikon, Japan) benotzt gouf de immunolabeled Stoffer ze iwwerpréifen. Fir all d'Niveaue vun positif Kierchefënster Zellen a Prozesser ze gehéieren, déi optimal Z stacking vun confocal Biller gouf um 5 μm Intervalle virbereet. VerfÜgung Apoptosis vun Sanktioune mat TUNEL Etikette fonnt goufen, eng apoptosis erkennen Kit (Roche, Däitschland). Nuecht op 4 ° C an engem Lycée antibody (Alexa Fluor 594 Esel anti-Geess IgG, 1:100) bei 37 ° C; ganzt-Montéierung Preparatiounen sech mat der Primärschoul antibody c-Kit (Santa Cruz, CA, USA 1:100) incubated fir 30 min. bei 37 ° C fir 1 h: Ënnert engem humidified an donkel Fall, goufen d'Stoffer mat TUNEL Reaktioun Prellbock (Aktivitéit Léisung = 9:1 Etikette Léisung) incubated. No Katakombe dräimol fir 30 min mat DAPI wéi engem nuklearen Konter stain gebonne fluorescein-dUTP an incubated ze protégéieren, déi uplanzen goufen ënner engem confocal Laser Scannen microscope observéiert. VerfÜgung Elektronen microscopy VerfÜgung Nom mucosa geläscht, uplanzen vun antrum sech zu engem fixative Léisung vun 2,5% glutaraldehyde bei 4 ° C fir 2 h Beweegung. Dann, si mat 0,1 M PBS zweemol fir 20 min rinsed waren, post-fix an 1% OsO 4 (pH 7.4) fir 1 h, léif mat graded Alkohol, an propylene It Souzesoen an Ënnerbewosstsinn Epon flaach molds benotzt. Ultrathin Sektiounen mat engem ultramicrotome kritt huet (Leica ULTRACUTU, Däitschland), an Kierchefënster mat der citrate fir 10 min ier mat engem Transmissioun Elektronen microscope ukuckt (Tecnai G statistique Analyse VerfÜgung fir immunofluorescence staining Analyse, gastric antrum aus all experimentell Déier an der selwechter Plaatz vun de Mo. anerer. Sanktioune war vun c-Kit immunoreactivity an der Präsenz vun räich bewosst Prozesser unerkannt. Proliferating an apoptotic Sanktioune sech duerch c-Kit immunoreactivity an Ki67 /TUNEL Kierchefënster Keimzell enclosing mat c-Kit positive Membran Strukturen identifizéiert. Zéng ënnerschiddleche Beräicher (× 200 Vergréisserung, 0,2607 mm Body Gewiicht an Bluttzocker Niveau VerfÜgung No 8 Wochen, ongewollte Doud Doudesfäll am DM Grupp (zwou deër) an am Mier Grupp (ee Grenzwäerter). D'deër sech fir déi selwecht baseline Kierpergewiicht ënnert de Gruppen (Table 1) opgefouert. Um Enn vun 1, 4 an 8 Wochen, Gewiicht vun der DM Grupp ofgeholl huet vill mat der Kontroll Verglach ( P VerfÜgung = 0,009, 0,000 an 0,000). Et war kee groussen Ënnerscheed tëscht dem Mier an DM Grupp ( P VerfÜgung > 0,05). Mä am Géigesaz zu der DM Grupp, war d'Gewiicht vun der LEA Grupp op 8 Wochen nik ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) an erhëtzt Grupp op 4 an 8 Wochen ( P VerfÜgung = 0,003, P VerfÜgung &si besteet;. 0,001 getrennt) VerfÜgung Als zu Table 2 gewisen, goufen an der baseline Bluttzocker Niveau ënner de Gruppen keng Ennerscheeder bemierken. D'zockerkrank Modeller waren erfollegräich mam héich Bluttzocker Niveau vun der DM Grupp gegrënnt Verglach mat der Kontroll um Enn vun 1, 4 an 8 Wochen (all P VerfÜgung &Si besteet; 0.001). Mëttlerweil, huet de Bluttzocker Niveauen am Mier, LEA an erhëtzt Gruppen net vill geännert Verglach mat der DM Grupp (all P VerfÜgung > 0,05). VerfÜgung Effects vun MOL op gastric emptying Fig.1 zougedréckt d'Auswierkunge vun MOL op ST36 op gastric emptying an verschidden Gruppen. D'gastric emptying vum DM Grupp war am Géigesaz zu der Kontroll ( P VerfÜgung = 0,012) dramatesch Verspéidung. Am Verglach mat den DM Grupp, déi Flugstonnen keen groussen Effet op de gastric emptying ( P VerfÜgung = 0.338), mee LEA an erhëtzt denke mat Ofstand déi verspéiten gastric vun 43,96 ± 5,02% emptying zu 69,72 ± 3,02% an zu 59,06 ± 3,70% ( P VerfÜgung &Si besteet; 0,001 an P VerfÜgung = 0,013, bzw.). Vergläich tëschent dem LEA an erhëtzt Grupp, huet statistesch Bedeitung erreecht ( P VerfÜgung = 0.04), representéiert, datt den Effet vu LEA iwwerschratt selbstverständlech dass vun erhëtzt. VerfÜgung Effects vun MOL op den Ausdrock vun c -kit VerfÜgung vun Fig.2, den Ausdrock vun c-Kit vun all Layer vun war gastric Mauer évaluéieren. An Sanktioune-IM, c-Kit vun der DM Grupp ofgeholl huet selbstverständlech mat der Kontroll (0.47 ± 0,04 vs 0.69 ± 0,05, P VerfÜgung = 0.001) am Verglach. Ëmgedréit, LEA an erhëtzt verstäerkte Trainer den Ausdrock vun c-Kit Verglach mat der DM Grupp (0.65 ± 0,04 vs 0,47 ± 0,04, P VerfÜgung = 0,004; 0,66 ± 0,03 vs 0,47 ± 0,04, P Effects vun MOL op Sanktioune Netzwierker VerfÜgung Alternations vun Sanktioune Netzwierker besonnesch Sanktioune Wirklechkeet an d'Dicht vun Fig.3 gewisen huet. Et war kee groussen Ënnerscheed vun den Schichten deck ënnert d'Gruppen. Verbonne mat fléissenden Muskel Zellen, c-Kit immunoreactivity fir Sanktioune-IM zu de Muskel Schichten observéiert war, weist, dass Sanktioune-IM zwee polare Prozesser haten eng bewosst Reseau an d'Kontroll Grupp ze grënnen. An der DM Grupp, huet de laang Prozesser vun Sanktioune-IM leider scheinbar an der Dicht vun c-Kit positive Zell war bis ongeféier 50% vun normal Kontroll reduzéiert ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.001). Am Verglach mat den DM Grupp, war kee groussen Changement am Mier Grupp bemierken. Allerdéngs war eng schéin intakt bewosst Reseau an d'LEA an erhëtzt Grupp visualized an d'Dicht vun c-Kit positive Sanktioune-IM bal zu der normaler Niveau restauréiert (souwuel P VerfÜgung &Si besteet; 0,001, am Verglach mat den DM Grupp ). VerfÜgung Sanktioune-MENG ronderëm d'myenteric plexus opgeriicht tëscht longitudinal an kreesfërmeg glat Muskel Schichten etabléiert huet. Multipolar Sanktioune-MENG mat villen Secteuren eng intakt bewosst Reseau administrativ waren an der Kontroll Grupp kloer gewisen. An der DM Grupp, c-Kit + Zellen wossten mat slender Zell Kierper a Broch Prozesser, an d'Dicht vun Sanktioune-MENG war selbstverständlech ofgeholl ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.001). Am Mier Grupp, goufen d'Dicht vun Sanktioune-MENG net vill mat der DM Grupp ( P VerfÜgung = 0.762) am Verglach verännert. Allerdéngs gouf eng bal intakt bewosst Reseau ronderëm d'myenteric plexus an de Sanktioune-MENG Dicht deelweis an der LEA an erhëtzt Grupp wéint (souwuel P VerfÜgung &Si besteet; 0,001, am Verglach mat den DM Grupp) VerfÜgung <. h3> Effects vun MOL op apoptosis vun Sanktioune VerfÜgung apoptosis vun Sanktioune war vun TUNEL Etikette fonnt fir festzestellen, ob apoptosis an hunn d'Sanktioune vun Diabetiker (Fig.4) Équipe war. Vun ganzt-Montéierung Préparatiounen vun der Kontroll, puer Käre vun Sanktioune sech duerch TUNEL Method am Muskel futti, myenteric Layer an submucosa futti Kierchefënster. Vill vun c-Kit + /TUNEL + Sanktioune-IM, Sanktioune-MENG a Sanktioune-SM waren an der DM Grupp (18.48 ± 1,88 mm Effects vun MOL op Prolifératioun vu Sanktioune VerfÜgung Opgrond vun der geklommener Zuel vu Sanktioune vun der LEA an erhëtzt Grupp, war Ki67-positiv Sanktioune d'Prolifératioun vu Sanktioune vun der dräi Schichten (Fig.5) opgedeckt fonnt. An der Kontroll Grupp, eng Zuel vun c-Kit /Ki67 duebel Bezeechnung Zellen sech am Sanktioune-IM (8.82 ± 1,02 mm Effects vun MOL op ultrastructural hire Restaurant vu Sanktioune VerfÜgung onmarkéierte ultrastructural Charakteristiken vun Sanktioune vun Transmissioun Elektronen microscopy (Fig.6) opgedeckt goufen. An der Kontroll Grupp, Sanktioune-IM a Sanktioune-MENG räich vum Gutt-entwéckelt Zell organelles laang Prozesser wouvun Mitochondrie, an haarde a glat endoplasmic reticulum verlängert. Polymorphic Sanktioune-SM um submucosal Uewerfläch vun kreesfërmeg Muskel futti wellkomm zougedréckt héich Elektronen-dichten Zytoplasma, vill Mitochondrie an endoplasmic reticulum. An der DM Grupp, engem dramatical Ofsenkung vun der Zuel vun Sanktioune mat beschiedegt ultrastructural Fonctiounen war vun Elektronen microscopy iwwerpréift. Dës Zellen mat drëm Mitochondrie, erofgaangen cristaed an kondenséiert chromatin zougedréckt onkomplett Membran a Prozesser méi kuerz. Dës Ännerungen décidéiert och am Mier Grupp gesinn. An der LEA an erhëtzt Grupp, war d'Zuel vun Sanktioune bedeitendst fräi a si verbonne enk mat Nerve Faseren a glat synaptic Struktur an Schéier junctions administrativ Muskel Zellen. Kloer Mitochondrie Additioun, uerdentlecht verdeelt haarde endoplasmic reticulum an ribosomal Deelercher sech als klassesch Charakteristike vun Sanktioune-IM, IM-MENG a Sanktioune-SM gin. VerfÜgung Am Moment studéieren, mir fonnt, datt bei ST36 souwuel niddereg a héich Frequenz MOL der apoptosis vun Sanktioune an ageschalt d'Prolifératioun vu Sanktioune am Mo vun STZ-entschlof zockerkrank deër opgeléist. Als Resultat, Rettungsplang vun Sanktioune Netzwierker war op verspéiten gastric emptying mat engem bedengt Effekt assoziéiert. VerfÜgung als eng efficace Prozedur mat manner Säit Effekter, MOL kombinéiert mat Akupunktur an elektresche Stroum Stimulatioun amplaz manuell manipulations vun graduell akzeptéiert ass westlechen Länner. ST36 ass eent vun de meescht dacks benotzt Punkten gastrointestinal Entwécklungsstéierungen unzegesin, mat Indikatiounen dorënner: epigastric Péng, benotzen, iwelzeg, aarm Hausaufgabe an postwendend misse distention. Parallel huet eis virdrun Etude MOL op ST36 uginn konnt de colonic vun deem herrlechen Erhéijung awer net bei Net-acupoints am Grupp mat MOL observéiert. Verspéiten gastric emptying ass eng gemeinsam Charakter vun Diabetiker Patienten mat gastroparesis an och ee vun de grousse Faktore ze Symptomer vun gastroparesis matmaacht. Während de leschte Joerzéngten, Experimenter zu bewosst deër gewisen, datt héich Frequenz MOL (10 Hz) gastric vill denke emptying [3], [24], [25]. Ausserdeem, war 100 Hz MOL effektiv d'Verëffentlechung vun dinorphin an serotonin ze féieren analgesia zu induce [26]. Obwuel héich Frequenz MOL (100 Hz) och an Déieren esophageal an distal Colon motility ze förderen [7] gemellt gouf, [8], hunn d'Auswierkunge vun 100 Hz MOL op gastric motility seele propagéieren. Soumat huet Parameteren (10 an 100 Hz) vun MOL ausgewielt no virleefeg Experimenter stimulatory Effet vun gastrointestinal motility uginn. Eis Resultater bewisen, dass souwuel héich Frequenz MOL (10 Hz) an héich Frequenz MOL (100 Hz) op ST36 vill Verspéidung gastric verbessert an Diabetiker deër emptying, an d'Resultat verroden och dass den Effet vun niddereg Frequenz MOL méi dramatesch ass wéi déi vun héije Frequenz MOL. VerfÜgung ganz Rei Etuden bewisen hunn, dass Sanktioune eng wichteg Roll an der Regulatioun vun gastric peristalsis spillt, emptying engem grousse Projet vun gastric [27], [28]. Als Sanktioune vun verschidden Schichten vun gastric antrum an der Form vun Netzwierker existéiert zu VIVO VerfÜgung, si hire Restaurant vu Sanktioune Netzwierker valuably considéréiert gin. Reduktioun vun der Zuel an morphological Ännerunge vun Sanktioune-MENG a Sanktioune-IM am Mo vun Diabetiker Mais sech an enger viregter Etude [14] bewisen. Den Zerfall, war eng schéi Verloscht vun Sanktioune-IM a Sanktioune-SM zu antrum vun STZ-entschlof zockerkrank deër observéiert, mä Sanktioune-MENG net vill ausser e Verloscht vun Verbindunge mat Nerve Strukturen [15] betraff war. Dës Ënnerscheeder vun Conclusiounen vun dësen zwou Etuden sech warscheinlech mat Déierenaarten assoziéiert. Aus enger Etude vun 28 Patiente mat gastroparesis, war eng reduzéiert Unzuel vu Sanktioune vun der myenteric plexus vun voll-deck antral biopsies [29] fonnt. Eis Resultater weisen, dass Sanktioune-IM, Sanktioune-MENG a Sanktioune-SM an der antrum vun STZ-entschlof zockerkrank deër baséiert dramatesch reduzéiert sech op Technik vum südwestlechen blotting an immunofluorescence staining, a weider d'beschiedegt Struktur vun Sanktioune vun Transmissioun Elektronen microscopy zougedréckt war . Duerfir, ass et confirméiert, datt héich Frequenz MOL den Ausdrock vun Sanktioune vun Colon vun luesen oennert Majo deër [17] verbessert. Ausserdeem, huet eis virdrun Etude ugeholl datt béides niddereg a héich Frequenz MOL den Ausdrock vun Sanktioune vun Colon vun Diabetiker deër Restauratioun [18]. Allerdéngs, an deenen Etüden, dat se de Verfall vun Sanktioune als Ganzt an d'Auswierkunge vun verschidden Frequenz MOL op Sanktioune am Mo. hunn net opgekläert ginn. Sou, goufen d'Auswierkunge vun verschidden Frequenz MOL op dräi bestemmt vun Sanktioune am Mo. dorënner Sanktioune-IM, Sanktioune-MENG a Sanktioune-SM de Schwéierpunkt vun der presentéieren studéieren. Eis Resultater weisen, dass den Ausdrock vun Sanktioune vun der dräi Schichten Priisteramt duerch niddreg a héich Frequenz MOL gerett huet, proposéiert, datt héich an héich Frequenz MOL Netzwierker vun Sanktioune-IM renovéiert, Sanktioune-MENG a Sanktioune-SM an weider un engem wéint bäidroen kënnen gastric emptying. VerfÜgung Et ass wichteg, dass d'Gläichgewiicht vun Sanktioune Netzwierker haaptsächlech duerch apoptosis an Prolifératioun vu Sanktioune alles ass [11], [12]. Dofir, huet de méiglech bäisëtzt gastric motility an d'Effeten op Sanktioune Netzwierker vun MOL op ST36 lant duerch déi hire Restaurant vun Prolifératioun an apoptosis vun Sanktioune z'entdecken. Kuerzem, ass apoptotic Zell Doud gemellt beweist eng Dräierkoalitioun Prozess vun Sanktioune Netzwierker an de Niveau vun apoptosis an gesond Colon ze ginn, datt dës Zellen muss elo intakt Netzwierker regenerated ginn ze erhalen [12]. Nieft, Resultater vun Erwuessenen gewinnt haten uginn dass intestinal ischemia an reperfusion Verletzungen ze Reduktioun vun der Zuel vun Sanktioune duerch apoptosis Nerve déi zu gastrointestinal motility Entwécklungsstéierungen bäidroen kënnen [30]. Desweideren, engem rezenten Rapport zougedréckt datt MOL Therapie déi apoptotic Prozentsaz vun substantia Nigra Zellen am Parkinsonian deër [31] reduzéiert. Déi heiteg Etude huet kloer bezéie datt apoptotic Sanktioune vun TUNEL Methode fonnt Iwwerschwemmung zu Sanktioune Netzwierker vun Diabetiker Grenzwäerter Mo huet a spekuléieren, datt Ausschöpfung vun Sanktioune Netzer och zu gastric motility Entwécklungsstéierungen Féierung kéint. Mä duerch d'Interventioun vun niddereg a héich Frequenz MOL Stimulatioun, TUNEL + Keimzell sech kaum, fannen apoptosis vun Sanktioune suggeréiert als normal un engem niddregen Niveau reduzéiert huet. VerfÜgung Zouhuelen ass och aner Haaptgrond regulator Netzwierker vun Sanktioune ze erhalen. Virdrun Resultater hun dass Prolifératioun gewise gouf an der Relance vun Sanktioune Équipe eemol et am Erwuessenen Déieren [32] verluer war, [33].
spontan a Methode VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
= 0,002, bzw.). An Sanktioune-MENG, war den Ausdrock vun c-Kit vill am DM Grupp am Géigesaz zu der Kontroll reduzéiert (0.57 ± 0,04 vs 0,83 ± 0,05, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001). Mä groussen Ënnerscheed béid war an der LEA an erhëtzt Grupp erreecht Verglach mat der DM Grupp (0.78 ± 0,05 vs 0,57 ± 0,04, P VerfÜgung = 0,002; 0,76 ± 0,04 & 0,57 ± 0,04, P
= 0,004, bzw.). An Sanktioune-SM, war d'c-Kit vun der DM Grupp staarker op der Basis vun normalen Niveau ofgeschwächte (0.56 ± 0,03 vs 0.77 ± 0,04, P VerfÜgung = 0.001). Konsequent, fräi LEA an erhëtzt selbstverständlech d'Expressioun vun c-Kit Verglach mat der DM Grupp ( P VerfÜgung = 0,003 an P VerfÜgung = 0.007). Allerdéngs war kee groussen Ënnerscheed tëscht dem Mier an DM Grupp zu Sanktioune-IM, Sanktioune-MENG a Sanktioune-SM ( fonnt P VerfÜgung = 0,597, P VerfÜgung = 0,853 an P VerfÜgung = 0.172). VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung