PLoS One: Elektroakupunktúrája at ST36 javítja gyomor kiürülését és a mentések Networks a kötőszöveti sejtek Cajal gyomrában Diabetikus Rats

absztrakt katalógusa

kiürülése a kötőszöveti sejtek Cajal (ICC) hitelesítették a gyomorban a cukorbetegek . Bár elektroakupunktúra (EA) a ST36 hatékony terápia szabályozni gyomormotilitási, a mechanizmusok EA meg ST36 gyomorürülésre és hálózatok ICC még tisztázásra szorul. A program célja, tanulmány volt, hogy vizsgálja meg a hatását EA gyomorürülésre és a változtatások az ICC hálózatok. A patkányokat véletlenszerűen osztottuk be a kontroll, diabetikus patkányoknak (DM), diabetikus patkányok színlelt EA (DM + SEA), a diabetikus patkányok alacsony frekvenciájú EA (DM + LEA) és a diabetikus patkányok nagyfrekvenciás EA csoportok (DM + HEA). A kifejezés a c-kit minden rétegében gyomor fal mértük Western-blottal. Elterjedése ICC azonosítottunk immunfestést a c-kit és Ki67 az apoptózis ICC vizsgáltuk TUNEL festéssel. Az eredmények a következők voltak: (1) A gyomor kiürülését súlyosan késleltetett a DM csoportban, de felgyorsult a LEA és HEA-csoport, különösen a LEA csoport. (2) Az expressziós a c-kit egyes fázist csökkentett látszólag a DM csoportban, hanem a felfelé szabályozott a LEA és HEA-csoport. (3) Bőséges elszaporodtak ICC (c-kit + /Ki67 +) képező bokros hálózatok c-kit + sejteket figyeltünk meg a LEA és HEA-csoport, míg az apoptotikus sejtek (c-kit + /TUNEL +) alig készített a LEA és HEA-csoport . Együttesen, az alacsony és magas frekvenciájú EA át ST36 megmenteni a sérült hálózatok ICC gátlása révén apoptózis és fokozza a proliferációt a gyomorban a diabéteszes patkányok, ami javított a gyomor kiürülését.

bevezető hivatkozás: Chen Y, Xu JJ Liu S, Hou XH (2013) Elektroakupunktúrája meg ST36 javítja gyomor kiürülését és a mentések Networks a kötőszöveti sejtek Cajal gyomrában diabéteszes patkányokban. PLoS ONE 8 (12): e83904. doi: 10,1371 /journal.pone.0083904 katalógusa

Szerkesztő: Yvette Tache, University of California, Los Angeles, Amerikai Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: augusztus 9, 2013; Elfogadva: november 8, 2013; Megjelent: december 31, 2013 katalógusa

Copyright: © 2013 Chen et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Finanszírozás: A munka részben támogatták a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (No. 30670775, 81270458 számú). Nincs szükség további külső finanszírozásra kapott ebben a vizsgálatban. A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

fajtái gasztrointesztinális motilitási rendellenességek kezdve funkcionális diszpepszia gastroparesisnek súlyosan befolyásolja az életminőséget betegek évtizedes diabetes mellitus [1]. Gastroparesis, azzal jellemezve, késleltetett gyomorürülés, akkor fordul elő akár 30% az egyének 1. típusú diabétesz [2]. Habár a különböző terápiás beavatkozások és gyógyszeres kezelés és néhány nem gyógyszeres kezeléseket kipróbáltak, a gyógyító hatások gastroparesisben sem kielégítő. Katalógusa

Az akupunktúra már empirikusan kezelésére használják gyomor-bélrendszeri rendellenességek keleti országokban évezredek. Elektroakupunkturája (EA), amely egy módosítását hagyományos akupunktúra, jobban megfelel a klinikai és alapvető tudományos kutatási beállításokban a reprodukálhatóság. Zusanli katalógusa (ST36) gyakori acupoint gyakran kezelésére használják gyomor-bélrendszeri betegségek. Az utóbbi években, a hatásait EA at ST36 a gyomor motilitásra már értékelték számos tanulmány. Állatok számára, az EA a ST36 jelentősen megnövekedett gyomor motilitás éber patkányokban és javított késleltetett gyomorürülés STZ-indukált diabeteses patkányoknál [3], [4]. Sőt, az embereknél, az EA a ST36 felgyorsult a gyomor kiürülését, és könnyített a diszpepsziás tünetek funkcionális diszpepszia betegek és diabéteszes egyének gastroparesis [5], [6]. Bár ezekben a vizsgálatokban csak az alacsony frekvenciájú EA fogadták, nagyfrekvenciás EA is jelentette, hogy támogassák a nyelőcső és vastagbél disztális mozgékonyságát állatokban [7], [8]. Így a hatások a különböző frekvenciájú EA a gyomor motilitás és az azok hátterében felhívni az emberek figyelmét. Katalógusa

intersticiális sejtek Cajal (ICC), jól megalapozott, mint a pacemaker előállításának és szaporításának lassú hullámok, jelentősége nőtt szabályozásában gasztrointesztinális motilitás több évtizede [9]. Három altípusát ICC intramuszkuláris ICC (ICC-IM), myenterikus ICC (ICC-MY) és a nyálkahártya alatti ICC (ICC-SM) formában ép hálózatok gyomorfal [10]. Hálózatok ICC nem statikus még fiziológiás körülmények között; apoptózis és transzdifferenciációval vezet ICC veszteség, míg az ICC is vissza lehet állítani proliferáció feltöltését őssejtek és a növekvő túlélési [11], [12]. Kiterjedt vizsgálat dokumentálta, hogy a veszteséget és kárt okozott a ICC rendezetlen gasztrointesztinális motilitás állatkísérletekben és cukorbetegeknél [13] - [15]. Nemrégiben további vizsgálatok szerint az EA megkönnyítette a növekedés vastagbél ICC lassú tranzit székrekedés patkányok és patkányok enteroenterostomy [16], [17]. A nemrégiben készült tanulmány azt is bizonyította, hogy az EA a ST36 helyreállíthatja károsodott ICC a vastagbélben a diabéteszes patkányok [18]. Eközben azt illeti, hogy az EA támogatni proliferációját és gátolja az apoptózist az agysejtek a hippocampus [19], [20]. Azonban van egy üres hatásaival kapcsolatos EA meg ST36 ICC diabéteszes gastroparesis, és a mechanizmus, hogy a proliferáció és az apoptózis ICC van szó. Katalógusa

Tehát a célkitűzése, hogy volt, hogy: 1) értékeli a hatások a különböző frekvenciájú EA gyomorürülésre; 2) hatásának vizsgálata EA meg ST36 ICC hálózatok diabéteszes patkányokban; 3) igazolnia kell, hogy a proliferációja és az ICC is részt vettek. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

Etikai nyilatkozat katalógusa

A patkányok emberi gondoskodás és ez tanulmányt végeztünk szigorúan összhangban ajánlásainak az útmutató az ápolási és a laboratóriumi állatok felhasználását a National Institutes of Health, minden művelet által elfogadott etikai irányelvek a Animal Care and Use Committee Tongji Medical college, Huazhong Egyetem Természettudományi és Technológiai.

Állatok

hím Sprague-Dawley-patkányokat lemérjük, 250-300 g választottak ki a jelen tanulmányban. A patkányokat nyert kísérlet Animal Center Tongji Medical College (Huazhong Egyetem Természettudományi és Technológiai, Wuhan, Kína) és tartott rendes laboratóriumi körülmények között (22 ° C, 12/12 órás fény-sötét ciklus) táplálékhoz való szabad hozzáférést és steril vízben. Egy hét után az adaptív etetés, állatokat hivatalosan elfogadott a kísérleteink. Katalógusa

Diabetikus modell katalógusa

Miután éjszakai koplalás, de vízhez való szabad hozzáférés, a modellek jöttek létre egyetlen intraperitoneális injekcióban streptozotocin a patkányokat (STZ, 60 mg /kg, azaz 1 ml /100 g testsúly; Alexis Biochemicals, San Diego, CA, USA), frissen oldott 20 mM citrát pufferrel (pH = 4,5; Sigma, St. Louis, MO, USA) . A kontroll csoport injektáltunk azonos térfogatú citrát pufferben. Minden patkányokat ugyanolyan állapotban, a víz megvonása 4 óra, de ad libitum etetés katalógusa. Egy héttel az injekció beadása után, a cukorbetegség is megerősítette különböző idő mérésével glükóz egy csepp teljes vért kapott szúrja a farokvégződés edény. A vércukor szintje ≥16.7 mmol /l vettük szabvány sikeres modell. Vércukor vetítették pontosan az injekció beadása előtt és az 1., 4. és 8. hét után az injekciót. Továbbá, fogyás, vízivás és polyuria voltak további mutatók bizonyítják, sikeres ösztönzés a diabéteszes patkányok. Katalógusa

Kísérleti protokollok

A patkányokat véletlenszerűen öt csoportba (10 patkány minden csoportban), beleértve a kontroll , diabéteszes csoportban (DM), diabetikus patkányok sham EA-csoport (tengeri, csak akupunktúra nélkül elektromos áram, 30 perc /d), diabéteszes patkányok alacsony frekvenciájú EA-csoport (LEA, 10 Hz, 1-3 mA, 30 perc /d ) és a diabéteszes patkányok nagyfrekvenciás EA-csoport (HEA, 100 Hz-es, 1-3 mA, 30 perc /nap). EA végrehajtották akupunktúrás ST36 egy elektromos stimulátor (G6805-2A; Shanghai Huayi orvosi eszköz Factory, Shanghai, Kína) a mindennapi 8 héten át. Az elektromos áram alakult szerint kissé remegő az alsó végtagok. Ahhoz, hogy a célból, hogy megszüntessük a befolyása a stressz, az állatokat szabadon mozoghatnak, a saját burkolat alatt az EA eljárást.

Miután az egymást követő beavatkozás 8 hétig, a patkányok minden csoportban vizsgáltuk a gyomor kiürülését. Aztán megöltük, és példányai antrumból gondosan kapunk. Mindegyik minta volt osztva több darabból, egy viszonylag kis ont -80 ° C-on Western blot analízis után rétegek frissen leválasztott és egy darab helyeztük 2,5% -os glutáraldehid elektronmikroszkópiához, és a többi fixáltuk Zamboni fixáló (2 % paraformaldehidet és 1,5% telített pikrinsav-oldatot 0,1 M foszfát-puffer-oldattal (PBS, pH 7,4) immunfluoreszcens festéssel.

mérése gyomorürülés

gyomorból való kiürülése volt módosítva végezzük leírtak korábban [21]. A vizsgálati étkezés tartalmazó fenol vörös (0,5 mg /ml), mint indikátor és karboximetil-cellulóz (15 mg /ml) a folyamatosan kevert, majd tartott 37 ° C-on. Miután az élelmiszer-megfosztott éjszakán a patkányokat kapott 2 ml fenol piros étkezés keresztül adagoljuk, gyomorszondán át tűvel. harminc perccel később az állatokat gyorsan leöltük nyaki diszlokáció. az egész gyomrot eltávolítjuk gondosan ligálás után a cardia és a pylorus, majd a gyomor nyitva volt, és annak tartalmát öntjük egy kémcsőbe, és mossuk 40 ml desztillált vízben. A kísérlet végén, NaOH-oldatot (20 ml, 1 M) adtunk mindegyik csőbe, hogy fejlesszék a maximális intenzitás a színe. Az a minta abszorbanciáját leolvassuk 560 nm-en spektrofotométerrel (Hitachi U-2900) volt, hogy tükrözze az összeget a fenolvörös maradék a gyomorban. A gyomor kiürülésének sebességét szerint számítottuk a következő képlet: gyomorból való kiürülése (%) = 100 x (1 - X /Y), X jelentése abszorbancia fenolvörös gyűjtött a gyomor állatok leöltük 30 perc után a teszt étkezés. Y jelentése abszorbancia fenolvörösoldatot felépült a gyomor kontroll állat azonnal meghalt beadása után próbaétkezést. Katalógusa

Western blot katalógusa

friss mintákat a gyomor antrumból volt tűzve egy SYLGARD edénybe, és az egyes fázist levált gondosan éles boncolás eltávolítása után a nyálkahártya. A rendszer segítségével a Hegyes csipesz és mikrosebészeti ollóval boncoló mikroszkóp alatt, rétegek ICC-SM, ICC-IM és az ICC-MY kapunk. Minden manipulációk végeztük a jégen, hogy elkerüljék a fehérje veszteséget. És aztán mintákat ICC-SM, ICC-IM és az ICC-my tároltuk -80 ° C-on.

A frissen fagyasztott mintákat zúzott a sejtszuszpenziót és homogenizáljuk RIPA-pufferben (Upstate, Temecula, CA , USA) proteáz inhibitor (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA). Az elegyet centrifugáljuk 12000 g-vel 10 percig 4 ° C-on, és a felülúszókat összegyűjtöttük, mint a teljes fehérje. A fehérje koncentrációját határoztuk meg a Bradford módszerrel. Ezt követően, ekvivalens 50 mg extrahált fehérjék fokozatosan egymástól 10% -os nátrium-dodecil-szulfát poliakrilamid gél elektroforézis (SDS-PAGE), és PVDF membránra (Millipore, Bedford, MA, USA). Majd blokkoló nemspecifikus kötődés foltok 5% -os zsírtalan tejport tartalmazó Tris-pufferelt sóoldatban, amely 0,1% Tween 20-at (TBST) szobahőmérsékleten 1 órán, ezek a membránokat primer antitest anti-c-kit (1:200 Santa Cruz Biotechnoiogy, Inc.) egy éjszakán át 4 ° C-on együtt nyúl anti-egér aktin (1:400, santa Cruz Biotechnology, Inc.) szolgált a belső kontroll. Három mosás után TBST-vel, a membránokat inkubáltuk HRP-kapcsolt másodlagos antitesttel (HRP-kapcsolt nyúl anti-kecske és HRP-kapcsolt kecske anti-egér, 1:5000) 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Követte három mosás a TBST, a sávokat láthatóvá kémiai reakcióval fokozott kemilumineszcencia szerrel (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ), és a blotot autoradiográfiával. Denzitometriát analízist Mennyiség One szoftvert (Bio-Rad műszaki szolgálatához, Version 4.6.2). Katalógusa

Immunfluoreszcenciás tanulmányok katalógusa

A teljes kelők festés készítmények, a gyomor-ben nyílt, és néhányszor leöblítjük szor PBS-sel. A gyomor antrum volt tűzve egy SYLGARD edénybe, és elérte a 150% az eredeti méretét, majd rögzíteni Zamboni fixáló 24 órán át szobahőmérsékleten. A rögzített szöveteket PBS-sel mostuk, majd a nyálkahártya eltávolítjuk éles boncolás. ICC-SM helyüket a nyálkahártya alatti felület a körkörös izomrétegben, az ICC-IM összevegyülve között simaizomsejtek és az ICC-my együtt myenterikus ideg plexus gondosan elő finom hegyes csipesz és mikrosebészeti ollókat egy boncoló mikroszkóp alatt.

A immunfestést eljárások kimutatására ICC hálózatok és proliferációját a korábban leírt [22]. Ki67, a nukleáris protein során kifejtett minden aktív fázisai sejt, és eltűnt a nyugalmi cella került alkalmazásra, hogy észleli a proliferatív ICC [23]. Mosás után hatszor PBS-sel 1 órán, szövetek inkubáltuk 5% normál szarvasmarha szérum tartalmazó PBS-ben 0,3% Triton X-100-at (PBST) 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd primer antitesttel inkubáltuk c-kit (1:100; santa Cruz, CA, USA) és a Ki67 (1:100; ABCAM, Cambridge, UK) éjszakán át 4 ° C-on. Öblítés után PBST-ben, 30 percig, a immunreaktivitás detektáltuk Alexa Fluor 594 konjugált másodlagos ellenanyaggal (szamár anti-kecske IgG, 1:100) és Alexa Fluor 488 konjugált másodlagos ellenanyaggal (szamár anti-RABIT IgG, 1:100) 37 ° C-on 1 órán át, majd az öblítés PBS-ben háromszor 30 percig, és inkubáltuk DAPI-t (0,1 mg /ml; Sigma, St. Louis, MO, USA), 30 percig, mint a nukleáris számláló foltot. PBS-ben öblítettük kétszer, szöveteket kibontakozott a dián. A konfokális lézer pásztázó mikroszkópot (Nikon, Japán) alkalmaztunk, hogy megvizsgálja a immunolabeled szövetekben. Annak érdekében, hogy valamennyi szinten a pozitívan festődő sejtek és folyamatok optimális Z egymásra konfokális képek állapították meg 5 nm időközönként. Katalógusa

Az apoptózis az ICC észleltek TUNEL címkézés, az apoptózis kimutatására Kit (Roche, Németország). Egész szerelhető preparátumokat primer antitesttel inkubáltuk c-kit (1:100; Santa Cruz, CA, USA) egy éjszakán át 4 ° C-on és a szekunder antitesttel (Alexa Fluor 594 szamár anti-kecske IgG, 1:100) 37 ° C-on 30 percig keverjük. Under párásított és sötét körülmény, a szöveteket inkubáltuk TUNEL reakció puffert (címkézés oldat: enzimoldatot = 09:01) 37 ° C-on 1 órán át. Miután háromszor mostuk 30 percig, hogy távolítsa el nem kapcsolódó fluoreszcein-dUTP-vel és inkubáltuk DAPI, mint egy nukleáris számláló folt, a mintákat alatt megfigyeljük konfokális lézer pásztázó mikroszkópot.

Elektronmikroszkópos

Miután a nyálkahártya eltávolítjuk, példányainak antrum merítettük egy fixáló oldatban 2,5% -os glutáraldehiddel 4 ° C-on 2 órán át. Aztán, hogy öblítjük 0,1 M PBS kétszer 20 percig, utólag fixáljuk 1% OsO _{4 (pH 7,4) 1 órán, dehidratált osztályozott alkohol, pontosítani propilén-oxid és a beágyazott Epon A lapos formák. Ultravékony metszeteket kapjuk ultramikrotómmal (Leica ULTRACUTU, Németország), és megfestettük ólom-citráttal 10 percig megtekintése előtt egy transzmissziós elektronmikroszkóp (Tecnai G ^{212, FEI, Hollandia).}}

Statisztikai elemzés

Immunfuoreszcens festés elemzés gyomor antrum minden egyes kísérleti állat mintát veszünk ugyanazon a helyen a gyomor. ICC által elismert c-kit immunreakciót és jelenléte bőséges celluláris folyamatokat. Az egyre szaporodó és apoptotikus ICC azonosítottuk a c-kit immunreakciót és Ki67 /TUNEL festett mag csatolva c-kit pozitív membrán szerkezetek. Tíz mez®kre (× 200 nagyítás, 0,2607 mm ^{2) per egész szerelhető készítmény vettünk fényképekhez c-kit pozitív sejtek, c-kit + /Ki67 + és c-kit + /TUNEL + jelölt sejteket. Ezek a fényképek is alkalmazunk, hogy értékelje a vastagsága a rétegek minden verem segítségével a DAPI jelölt atommagok, mint a marker a felső és alsó határértékei a rétegeket. A számok a c-kit pozitív sejtek, a c-kit /Ki67 és a c-kit /TUNEL kettős jelölt sejteket megszámoltuk az Image-ProPlus 5.0 (Media Cybernetics). Az összes adatot átlag ± SEM. Legalább tíz víziók vettünk minden állatnál. A varianciaanalízist (ANOVA) és Student-féle t-tesztet alkalmaztunk, hogy összehasonlítsuk a különbségek a különböző csoportok között. P-érték kevesebb, mint 0,05 vették statisztikailag szignifikáns különbség. Katalógusa}

Eredmények katalógusa

Testtömeg és vércukorszint katalógusa

A 8 hetes, baleseti halál történt a DM csoportban (két patkányok) és az SKV csoport (egy patkány). A patkányokat átvizsgáljuk az azonos kiindulási testtömeg a csoportok között (1. táblázat). Végén a 1, 4 és 8 hét, a testsúly, a DM csoportban szignifikánsan csökkent a kontrollhoz képest ( p
= 0,009, 0,000 és 0,000). Nem volt szignifikáns különbség a tenger és a DM csoportban ( P katalógusa > 0,05). Azonban, ellentétben a DM csoportban, a testsúly emelkedett volt a LEA csoportban 8 hét ( P
< 0,001), és HEA csoport 4 és 8 héttel ( p
= 0,003, P katalógusa < 0,001 külön). katalógusa

Mivel a 2. táblázatban látható, nem figyeltek meg különbséget a kiindulási vércukorszint a csoportok között. A cukorbeteg modellek jöttek létre sikeresen a magas vércukorszint, a DM csoportban, mint a kontroll a végén 1, 4 és 8 hét (mind p
< 0,001). Eközben a vércukorszintet a SEA, LEA és HEA csoportokat nem változott szignifikánsan a DM csoportban (összes P katalógusa > 0,05). Katalógusa

hatásai EA gyomorürülésre

az 1. ábra szerint a hatását EA meg ST36 gyomorürülésre a különböző csoportokban. A gyomor kiürülését a DM csoportban drámaian késleltetett ellentétben a kontroll ( P
= 0,012). Összehasonlítva a DM csoportban SEA nem volt szignifikáns hatása a gyomor kiürülését ( P katalógusa = 0,338), de LEA és HEA jelentősen felgyorsította a késedelmes gyomorürülés származó 43,96 ± 5,02% és 69,72 ± 3,02% és 59,06 ± 3,70% ( P katalógusa < 0,001 és P = 0,013 katalógusa -kal). Összehasonlítás a LEA és HEA-csoport, a statisztikai szignifikancia el ( P katalógusa = 0,04), ami, hogy a hatás a LEA nyilvánvalóan meghaladta a HEA. Katalógusa

hatásai EA a kifejezés c -KIT

tól 2.ábra, a kifejezés a c-kit minden rétegében gyomor fal mértük. ICC-IM, c-kit a DM csoportban nyilvánvalóan csökkent a kontrollhoz képest (0,47 ± 0,04 vs. 0,69 ± 0,05, P katalógusa = 0,001). Fordítva, Lea and HEA drámaian fokozott expressziójának c-kit összehasonlítva a DM csoportban (0,65 ± 0,04 vs 0,47 ± 0,04, P
= 0,004; 0,66 ± 0,03 vs 0,47 ± 0,04, P
= 0,002, sorrendben). Az ICC-MY, a kifejezés a c-kit szignifikánsan csökkent a DM csoportban, szemben a kontroll (0,57 ± 0,04 vs 0,83 ± 0,05, P
< 0,001). De volt szignifikáns különbség a két elérni a LEA és HEA csoportban, mint a DM csoportban (0,78 ± 0,05 vs. 0,57 ± 0,04, P katalógusa = 0,002; 0,76 ± 0,04 & 0,57 ± 0,04, P
= 0,004, sorrendben). Az ICC-SM, a c-kit a DM csoportban nyilván csökkentette alapján normális szintre (0,56 ± 0,03 vs 0,77 ± 0,04, P
= 0,001). Következetesen, Lea and HEA nyilvánvalóan fokozott expressziójának c-kit összehasonlítva a DM csoportban ( p
= 0,003, és a p
= 0,007). Azonban nem volt szignifikáns különbség a tenger és a DM csoportban ICC-IM, ICC-MY és az ICC-SM ( P katalógusa = 0,597, P katalógusa = 0,853 és P katalógusa = 0,172). katalógusa

hatásai EA ICC hálózatok katalógusa

Alternations ICC hálózatok különösen ICC morfológiájának és sűrűség volt látható a 3. ábrán. Nem volt szignifikáns különbség a rétegek vastagsága a csoportok között. Kapcsolódó simaizomsejtek, c-kit-immunreaktivitást ICC-IM volt megfigyelhető az izom rétegek, megmutatva, hogy az ICC-IM volt két poláris folyamatokat alkotó mobilhálózaton a kontroll csoportban. A DM csoportban, a hosszú folyamatait ICC-IM károsodott látszólag, és a sűrűsége a c-kit pozitív sejt azután vákuumban mintegy 50% -át a normál kontroll ( P
< 0,001). Összehasonlítva a DM csoportban nem volt szignifikáns változás volt megfigyelhető az SKV csoport. Ugyanakkor egy szinte érintetlen mobilhálózat tettük a LEA és HEA-csoport és a sűrűsége a c-kit pozitív ICC-IM csaknem helyreállt a normális szintre (mindkét P katalógusa < 0,001, míg a DM csoportban ).

ICC-MY kanyargós körül myentericus plexus voltak között található a hosszanti és a körkörös simaizom réteg. Multipoláris ICC-my számos ágakat képező érintetlen mobilhálózaton egyértelműen azt mutatta, a kontroll csoportban. A DM csoportban, a c-kit + sejtekben megjelent karcsú sejttesttel és töredezett folyamatok, és a sűrűsége ICC-MY nyilvánvalóan csökkent ( P katalógusa < 0,001). Az SKV csoport, sűrűsége ICC-MY nem változtatta meg lényegesen, mint a DM csoportban ( P katalógusa = 0,762). Ugyanakkor egy szinte érintetlen mobilhálózat létezett körül myentericus plexus és az ICC-MY sűrűségű részben visszaállt a LEA és HEA-csoport (mind P katalógusa < 0,001, míg a DM csoportban). Katalógusa

hatásai EA apoptózis ICC katalógusa

az apoptózist az ICC-t TUNEL címkézés annak megállapítására, hogy az apoptózis részt hiány ICC cukorbetegség (4. ábra). E az egész tartó előkészületek a kontroll, kevés számú mag az ICC festettünk TUNEL módszerrel izomréteg, myenterikus réteg és nyálkahártya alatti réteg. Rengeteg c-kit + /TUNEL + ICC-IM, ICC-MY és az ICC-SM volt megfigyelhető a DM csoportban (18,48 ± 1,88 mm ^{-2, 26,51 ± 1,87 mm -2 és 12.03 ± 1.27 mm -2-kal). A c-kit + mobilhálózatok hiányosak voltak, és az apoptózis ICC bemutatott rövidített eljárások kevesebb ágak. Nagyszámú c-kit + /TUNEL + sejteket is árvíz minden réteg az SKV csoport. Az végrehajtása LEA és HEA, apoptotikus kit + sejteket alig találtunk ICC-IM (1,79 ± 0,33 mm -2 és 2,05 ± 0,30 mm -2), ICC-MY (2,24 ± 0,40 mm -2 és 2,48 ± 0,40 mm -2) és az ICC-SM (1,09 ± 0,25 mm -2 és 1,39 ± 0,20 mm -2). A mobiltelefon hálózatok által feltárt c-kit immunfestés kimutatta a nagy sűrűségű és vastagságú celluláris folyamatok a LEA és HEA-csoport. Katalógusa}

hatásai EA elterjedése ICC katalógusa

A megnövekedett számú ICC a LEA és HEA-csoport, Ki67 ICC mutattunk, hogy felfedje az elterjedése ICC a három réteg (5. ábra). A kontroll csoportban, számos c-kit /Ki67 kettős jelölt sejteket figyeltünk meg ICC-IM (8,82 ± 1,02 mm ^{-2), ICC-my (10,64 ± 0,92 mm -2) és az ICC -SM (4,67 ± 0,96 mm -2). Száma ICC törött ágak feltűnően csökkent, és a hálózatok nagyon ritka, kevés osztódó sejtek, mind a DM és az SKV csoport. Azonban a LEA és HEA-csoport, a c-kit /Ki67 kettős jelölt sejtek ICC-IM jellemezte szorosan szomszédos sejttestek és viszonylag bipoláris folyamatok és az átlagos sűrűség elérte a 18,37 ± 1,60 mm -2 és 15,27 ± 1,81 mm 2 (mindkettő P katalógusa < 0,001). Hasonlóképpen, a bőséges c-kit + /Ki67 + ICC-MY a LEA és HEA-csoport (mind P katalógusa < 0,001) alkotó ép hálózatok c-kit + sejtekben végzett egy kerek sejt test és hosszú, karcsú folyamatokat. ICC-SM kíséretében ép hálózata ICC sűrűsége osztódó sejtek a LEA és HEA csoport viszonylag magasabb, szemben a DM csoportban ( P katalógusa = 0,016 és P
= 0,003). katalógusa}

hatásai EA ultrastrukturális elváltozások ICC katalógusa

Tipikus ultrastruktúrális tulajdonságait ICC által feltárt transzmissziós elektronmikroszkópos (6. ábra). A kontroll csoportban, ICC-IM és az ICC-MY gazdag jól kidolgozott sejtorganellumoké hosszabbítani hosszú folyamat, amely a mitokondriumok, és durva és sima endoplazmatikus retikulum. A polimorf ICC-SM található a nyálkahártya alatti felszínén körkörös izom réteg magasabb volt elektron-sűrű citoplazmában számos mitokondrium és az endoplazmás retikulum. A DM-csoport, a drámai számának csökkenése az ICC sérült ultrastrukturális jellemzői vizsgáltuk elektronmikroszkóppal. Ezek a sejtek duzzadt mitokondriumok, megzavarta cristaed és sűrített kromatin megmutatta hiányos membrán és lerövidíti folyamatokat. Ezek a változások is látható az SKV csoport. A LEA és HEA csoport száma ICC volt szignifikáns növekedés és szorosan kötődnek az idegrostok és simaizom sejtek alkotó szinaptikus struktúra és gap junction. Tiszta mitokondriumok címer, rendezett elosztott durva endoplazmatikus retikulum és riboszóma részecskéket tekinthető klasszikus jellemzői ICC-IM, IM-MY és az ICC-SM. Katalógusa

Vita katalógusa

A jelen tanulmányban úgy találta, hogy az alacsony és magas frekvenciájú EA meg ST36 elnyomta az apoptózist ICC és az aktivált elterjedése ICC gyomrában STZ-indukált diabéteszes patkányokban. Ennek eredményeként, a mentés ICC hálózatok járt egy megelőzésére hatása késleltetett gyomor kiürülését.

, mint egy hatékony eljárást kevesebb mellékhatással, EA együtt akupunktúra és elektromos áram stimulálása helyett kézi manipulációkat fokozatosan által elfogadott Nyugati országok. ST36 az egyik leggyakrabban használt pont, gasztrointesztinális rendellenességek kezelésére, azzal indikációk többek között: gyomortáji fájdalom, hányinger, hányás, étvágytalanság és hasi puffadás. Ezzel párhuzamosan a korábbi vizsgálat kimutatta, EA meg ST36 növelheti a vastagbél hajtási mozgás, de nem figyeltek csoportban EA meg nem acupoints. Késleltetett gyomorürülés közös jellegét diabéteszes betegek gastroparesist és egyben a legfontosabb tényező, amely hozzájárul a tünetek a gastroparesis. Az elmúlt évtizedekben, kísérletek éber patkányokban azt mutatták, hogy alacsony frekvenciás EA (10 Hz) jelentősen felgyorsult gyomorürülés [3], [24], [25]. Továbbá, a 100 Hz-EA hatékony volt, hogy hatására a felszabadulását dinorphin és szerotonin, hogy analgéziát indukáljunk [26]. Bár a magas frekvenciájú EA (100 Hz) is beszámoltak, hogy támogassák a nyelőcső és a disztális vastagbél mozgékonyságát állatokban [7], [8], a hatását a 100 Hz EA a gyomor motilitásra már alig vizsgálták. Így paraméterek (10 és 100 Hz) EA választottak szerint az előzetes kísérletek jelezték stimuláló hatása a gyomor-bélrendszeri motilitás. Eredményeink igazolták, hogy mind az alacsony frekvenciájú EA (10 Hz) és nagyfrekvenciás EA (100 Hz) at ST36 szignifikánsan javította késleltetett gyomorürülés diabéteszes patkányokban, és az eredmény azt is kimutatta, hogy a hatás az alacsony frekvenciájú EA több volt drámai, mint a magas frekvencia EA.

Számos tanulmány igazolta, hogy az ICC fontos szerepet játszik a szabályozás a gyomor perisztaltika, egy fő meghatározója gyomorürülés [27], [28]. ICC létezik különböző rétegeiben gyomor antrumból formájában hálózatok in vivo katalógusa, a megváltozott ICC hálózatok értékesen figyelembe kell venni. Számának csökkentése és morfológiai változások ICC-MY és az ICC-IM a gyomorban diabéteszes egerek mutatták ki egy korábbi tanulmány [14]. Hasonlóképpen, jelentős veszteség ICC-IM és az ICC-SM antrumban STZ-indukált diabeteses patkányoknál volt megfigyelhető, de az ICC-my nem befolyásolta szignifikáns, kivéve a veszteséget összeköttetések ideg szerkezetek [15]. Ezek a különbségek a megállapítások Ebben a két vizsgálatban valószínűleg társított állatfajok. Egy tanulmány a 28 beteg gastroparesis, csökkentett számú ICC találtak a plexus myentericus által teljes vastagságú antrális biopsziák [29]. Eredményeink azt mutatták, hogy az ICC-IM, ICC-MY és az ICC-SM az antrumban STZ-indukált diabéteszes patkányokat drasztikusan csökkent alapján technikája western blot és immunofluoreszcens festéssel is, valamint a sérült szerkezet ICC-ben kimutatta, transzmissziós elektronmikroszkóppal . Szerencsére úgy tűnik, hogy az alacsony frekvenciájú EA javítja a kifejezés ICC vastagbélben a lassú tranzit székrekedés patkányok [17]. Továbbá, a korábbi tanulmány azt sugallja, hogy mind alacsony, mind magas frekvenciájú EA visszaállítja a kifejezés a ICC vastagbél diabéteszes patkányok [18]. Azonban azokban vizsgálatok során kivizsgálják a megváltoztatásához az ICC egésze és a hatások a különböző frekvenciájú EA ICC a gyomorban nem tisztázott. Így a hatások a különböző frekvenciájú EA három altípusát ICC a gyomorban, beleértve ICC-IM, ICC-MY és az ICC-SM volt a hangsúly a jelen tanulmány. Eredményeink azt mutatták, hogy ez a kifejezés ICC a három réteget feltűnően mentettek alacsony és magas frekvenciájú EA, ami arra utal, hogy az alacsony és magas frekvenciájú EA felújított hálózatok ICC-IM, ICC-MY és az ICC-SM és további hozzájárulhat a visszanyert gyomor kiürülését. katalógusa

Érdemes megjegyezni, hogy az egyensúlyt ICC hálózatok alapvetően az határozza meg proliferációja és az ICC [11], [12]. Ezért a lehetséges mechanizmus a gyomor motilitás és a hatások ICC hálózatok EA a ST36 kutatták át érzékeli a változásokat a proliferáció és az apoptózis ICC. Nemrégiben apoptotikus sejthalál tűnik, hogy egy folyamatban lévő ICC hálózatok és a szint apoptózist az egészséges vastagbél azt jelzi, hogy ezek a sejtek folyamatosan meg kell regenerálni fenntartásához ép hálózatok [12]. Emellett, az eredmények a kifejlett tengerimalac jelezte, hogy a bél ischaemia és reperfúziós sérülés vezetett számának csökkenése ICC keresztül apoptózis, amely hozzájárulhat a gasztrointesztinális motilitási rendellenességek [30]. Sőt, egy friss jelentés azt mutatta, hogy az EA terápia csökkentette az apoptotikus százalékos substantia nigra sejtek a Parkinson patkányok [31]. Ez a tanulmány egyértelműen megfogalmazta, hogy az apoptotikus ICC TUNEL módszer volt árvíz ICC hálózatok diabéteszes patkányok gyomor- és feltételezi, hogy kimerülése ICC hálózatok is vezethet gyomormotilitási rendellenességek. De beavatkozása révén alacsony és magas frekvenciájú EA stimuláció, TUNEL + mag alig találni, ami arra utal, apoptózis ICC csökkent az alacsony szinten, mint a normális. Katalógusa

elterjedése is egy fő szabályozó fenntartani hálózatok ICC. Korábbi eredmények azt mutatták, hogy elterjedése részt a helyreállítási ICC, ha már egyszer elvesztette a felnőtt állatokban [32], [33].

• PLoS One: önbevalláson gyomorémelygést az utasok Cruise-alapú és a szárazföldi Package Holidays
• PLoS One: nikotin csillapítja aktiválása Tissue Resident makrofágok egér gyomor keresztül β2 nikotin acetilkolin receptor