Terápiás hatása intratumorális injekciót dendritikus sejtek lokálisan recidiváló gyomorrák: a esetismertetés

Terápiás hatása intratumorális injekciót dendritikus sejtek lokálisan recidiváló gyomorrák: a esetismertetés katalógusa Abstract
Egy 80 éves férfi egy története gyomorrák és a tüdő emphysema ment távolabbi gastrectomián gyomorrák 1997. 2010-ben, egy endoszkópos vizsgálat során a depressziós típusú elváltozás a szóbeli oldalán az anasztomózis, amely diagnosztizáltak pecsétgyûrûsejtes adenocarcinoma. Sebészi kezelése tartották, de elutasították, mert az elzáródásos és korlátozó légúti eseményeket. Kemoterápia véget ért, mert a mellékhatások. Endoscopy arra használták, hogy kezelje intratumorális injekciót dendritikus sejtek (DC-k) megcélzó szintetizált peptideket a Wilms-tumor 1 (WT1) és mucin 1, sejtfelszíni társult (MUC1). Immunhisztokémiai elemzést a tumor minták jelzett pozitivitást WT1 és MUC1. Egy hónap után hét ciklus DC volna beadni (az 2010. november április 2011), nincs gyanús elváltozások nyilvánvalóak voltak, és a biopszia eredménye normális volt. A beteg már a gyógyulás 30 hónap. Intratumorális injekciót dendritikus megmutatta terápiás hatásait ebben a beteg, aki nem megy endoszkópos nyálkahártya alatti boncolás vagy műtét. Katalógusa Kulcsszavak katalógusa dendritikus sejt WT1 MUC1 Immunterápia és visszatérő gyomorrák Háttér katalógusa gyomorrák a második leggyakoribb oka a rákkal összefüggő halálozás világszerte [1]. Bár a műtét végleges kezelés gyomorrák, alternatív terápiás módszerek közé endoszkópos nyálkahártya alatti boncolás (ESD), kemoterápia és sugárkezelés. Katalógusa Nemrég arról számoltak be, hogy a fele az összes rosszindulatú daganatok fordulnak elő idősebb betegeknél több mint 70 éve [2 ]. A krónikus obstruktív tüdőbetegség (COPD), amelyet az jellemez, levegőáramlás korlátozottsága, az is gyakori az idős egyének [3]. Egyes esetekben, a standard terápiát a rosszindulatú nem alkalmas, mert a jelenléte a COPD. Sakai és mtsai katalógusa. [4] azt mutatta, hogy a COPD független kockázati tényezője intra- és posztoperatív pulmonalis eseményeket. Ezen túlmenően, Dimopoulou munkatársai katalógusa. [5] számolt be, hogy egyes rákellenes gyógyszerek indukálnak pulmonalis toxicitást. Például, paclitaxel, docetaxel, és irinotekán számoltak okoznak nem-specifikus interstitialis pneumonitis. Egyes esetekben, a minimálisan invazív terápia szükséges lehet idős betegek COPD.
A dendritikus sejtek (DC-k) között antigénprezentáló sejtek, amelyek specializált megindítására irányuló T-sejt-immunitás [6, 7]. DC-alapú immunterápia, amely megcélozza szintetizált peptideket a közelmúltban használják különböző rosszindulatú folyamatok, köztük a gyomorrák [8-11]. A megfelelő kiválasztása szintetizált peptidek szükséges, hogy fokozza a terápiás hatását DC-alapú immunterápia a gyomorrák. 2009-ben a rák antigén rangsorolása projekt a National Cancer Institute rangsorolt ​​Wilms tumor 1 (WT1) és mucin 1, sejtfelszíni társult (MUC1), mint a legmagasabb és a második legmagasabb elsőbbségi antigének, illetve [12]. Immunhisztokémiai vizsgálatok szerint (IHC), a kifejezések WT1 és MUC1 a gyomor rákos találták, hogy 42-53% [13] és 93% [14], ill.
Intratumorális beadás használatával DC fagocitózis potenciális kedvező lehetőség [15]. Mi használt esophagogastroduodenoscopy (EGD) beadására intratumorális injekciót dendritikus pulzált WT1 és MUC1. Katalógusa Esetismertetés
Egy 80 éves férfi egy története gyomorrák és a tüdő emphysema ment Billroth I távolabbi gasztrektómiának korai gyomorrák 1997-ben 2005-ben és 2009-ben előterjesztett egy endoszkópos nyálkahártya rezekció helyi gyomorrák kiújulás (jól differenciált csöves adenokarcinóma). 2010 májusában, ő ment a nyomon követés EGD, hogy kiderült, a depressziós típusú elváltozás (10 × 18 mm-es) a testen gyomor mellett az anasztomózis (O) (1a ábra). A szövettani elemzése biopsziás minták kiderült pecsétgyûrûsejtes adenocarcinoma (2a ábra-a "). A CT-vizsgálat nem mutatott ki áttétet. Bár teljes eltávolítását a gyomor maradék egy potenciálisan kuratív terápia, ez a műtét nem hajtottunk végre a figyelmet a beteg tüdő diszfunkció, amely tartalmazza obstruktív és restriktív tüdőbetegségek (vitálkapacitás (VC): 2,12 l;% VC: 71,9%; kénytelen kilégzési térfogat 1,0 másodperc: 42,9%). A beteg 50 éves történetében a dohányzás. ESD ellenjavallt volt, mert a rák volt a differenciálatlan típus. Ezért a kezelés TS-1 (tegafur, gimeracil és oteracil kálium; Taiho Pharmaceutical Co., Ltd., Tokyo, Japán) indult 2010 augusztusában négy hét után TS-1 ügyintézés, a kezeléssel kapcsolatos anorexia (grade 2; közös terminológia kritériumai mellékhatások, 4.0 verzió) volt megfigyelhető, és így a kemoterápiát függeszteni a beteg kérésére. 1. ábra Esophagogastroduodenoscopy (EGD) képeket. (A, b) Típus 0-lic elváltozás (10 × 18 mm-es) a test a gyomor közelében anastomosis régió (O) az oltás előtt (a). A gyomorrák visszafejlődött egy jelentéktelen elváltozás után egy hónappal az utolsó kezelési ciklus (b). A nyilak jelzik a helyét a rák.
2. ábra szövettani elemzése biopsziás mintában. Hematoxilin-eozin (H &E) festéssel (AA ", FF"), és immunhisztokémiai soros szakaszok a szövetek a Wilms-tumor 1 (WT1) (BB ", gg") és a mucin 1, sejtfelszíni társult (MUC1) ( cc "hh"). (A-A ", F-F") H &E festés előtt és az oltás után. H &E festés mutatja pecsétgyûrûsejtes sejtek szöveti az oltás előtt (a-a "). Egy hónappal az utolsó adagolás után, patológiai vizsgálat felfedve normális luminális epithelialis sejtek (F-F "). (B-b ", G-G") Festés WT1 előtt és az oltás után. A mintákat pozitívnak WT1 mintegy 60% -a sejtek oltás előtt a tumor helyén (b-b "), és a figyelemre méltó csökkenését WT1 pozitivitás megerősítette a vakcinálás után (G-G"). (C-C ", H-H") festés A MUC1 előtt és az oltás után. Mintegy 70% -a tumorsejtek volt pozitív MUC1 vakcinálás előtt (C-C "), és a MUC1 volt festődés normál mirigyek csak az oltás után (F-F"). Immunhisztokémiai festéssel a CD4 + és CD8 + T-sejtek a biopsziás mintákban. Soros szakaszok a szövetek használt H &E festés elkészített és festettük a CD4 és CD8 (D, E, I, J). (D-D ", I-I") festés a CD4 előtt (D-D ") és a vakcinálás után (i-i"). (E-e ", j-j") Festés CD8 előtt (e-e ") és az oltás után (j-j"). CD4 + és CD8 + T-sejtek gyakrabban figyeltek meg normális gyomor- szövetekben az oltás után, mint volt megfigyelhető a daganatos szövetekben vakcinálás előtt. (Nagyítás: a-j 4 ×, a'-j '10 ×, a "-j" 20 ×).
A módszereket használtak DC előállítására már korábban leírták [16]. A DC-ket pulzáltunk fő hisztokompatibilitási komplex (MHC) -I-korlátozott WT1 peptid antigének szerint a páciens humán leukocita antigén (HLA) -A mintát (HLA-A 2402; CYTWNQMNL (mutáns WT1 peptid, Neo-MPS, San Diego , Kalifornia, Amerikai Egyesült Államok) és a MUC1 hosszúságú peptidet (30-mer 20 mg /ml; TRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAP- GSTAP; Greiner Japán, Tokyo, Japán)). A DCS segítségével jellemeztük áramlási citometriával, hogy azok elérték a tipikus fenotípusát érett dendritikus. A felületi molekulák, amelyek által expresszált dendritikus határoztuk meg. A fenotípus CD14 - /alacsony /HLA-DR + /HLA-ABC + /CD80 + /CD83 + /CD86 + /CD40 + /CCR7 + tartották, hogy meghatározza az érett dendritikus. A DC-ket krioprezervált napjáig beadás. A DC-szuszpenzió-ját össztérfogatra 1,0 ml sóoldattal.
Hat hónappal a gyomor rák kiújulásának már diagnosztizálták, intratumorális injekcióval DC-ket beadni EGD között 2010 novembere és 2011. április Ezt a kezelést által jóváhagyott intézményi felülvizsgálati testület a Isoukai (jóváhagyási szám: 26-1), és az alapján végeztük el a Helsinki Nyilatkozatban. katalógusa Védőoltás ismételtük hét alkalommal 2-8 hetes időközönként (körülbelül 2,99 × 10 7 sejt /injekció, az első négy oltásokat kéthetes időközönként, és az utolsó három vakcinálás négy-nyolc hetes időközönként). A tűt használtak (átmérő 25 G, hossz: 4 mm) beadására DC négy submucosalis réteg szerte a tumor. Ezt követően, mi adjuk OK432 (1-3KE) feloldunk 0,5 ml sóoldatban két helyen a nyálkahártya alatti réteg körül a daganat. DC-terápia jól tolerálható volt, és az egyetlen kezeléssel összefüggő nemkívánatos esemény volt a láz, a testhőmérséklet több mint 38 ° C-on két nap után a negyedik vakcinálás. Egy hónap telt el az utolsó beadás a gyomorrák találták visszafejlődik teljesen (1b ábra). A kórszövettani vizsgálat a biopsziás minták nem mutattak pecsétgyûrûsejtes sejtek (ábra 2f-f "). A 30 hónapon DC-alapú immunterápia, nem patológiás kiújulás figyeltek meg. Laboratóriumi feltüntetett adatok csökkenést karcinoembrionális antigén és szénhidrát antigén 19-9 szintje után DC-terápia, ami csökkent 8,2-6,8 ng /ml (normál tartomány: < 5,0 ng /ml) és 33,2-24,7 U /mL (normál tartomány: < 37,0 U /ml), illetve.
IHC a WT1 (Monoclonal 6 F-H2, Dako Cytomation, Carpinteria, Kalifornia, Amerikai Egyesült Államok) [13] és a MUC1 (Becton Dickinson Lab-ware; Franklin Lakes, New Jersey, Amerikai Egyesült Államok) végeztük a korábban leírtak [17], néhány módosítással. IHC eredménye pozitív WT1 mintegy 60% -a pecsétgyűrű-sejtek az oltás előtt (2b-b "); Azonban a festődő sejtek száma pozitív feltűnően csökkent a vakcinálás után (ábra 2g-G "). Mintegy 70% -a sejt pozitív volt az MUC1 vakcinálás előtt (ábra 2C-C "). A vakcinálás után átalakítás megerősítette a helyén a rosszindulatú sejtek, és a MUC1 pozitivitás volt megfigyelhető csak normál mirigyek (2H ábra-H ").
Nem növekszik az arányok a CD4 + és CD8 + T-sejteket észleltünk a perifériás vérben, értékelés alapján elvégzett előtt és vakcinálás után (CD4 + T-sejtek: 43,9-42,5%; CD8 + T-sejtek: 29,3-25,5%). Másrészt, a CD4 + és CD8 + T-sejtek gyakrabban figyeltek meg a normál gyomor szöveti vakcinálás után (ábra 2i-i ", JJ") volt, mint megfigyelhető a tumor szövetekben, mielőtt oltás (2D, ábra-d ", EE").
A gyakorisága WT1-specifikus citotoxikus T-limfociták (CTL-ek) fokozott 0,03-0,08%. Az alkalmazott módszert írtak le a korábbi jelentésben [16]. 31 hónappal Az utolsó vakcinálás után, a szintek WT1-specifikus CTL-ek magas maradt (0,10%) (3a ábra-C). Ábra 3 Elemzés a Wilms tumor 1 (WT1) -specifikus citotoxikus T-limfociták (CTL-ek). (A) Mielőtt védőoltás. (B) az oltás után. (C) 31 hónappal a végső oltást. WT1-specifikus CTL szintek vakcinázás előtt nőtt 0,03 (a) 0,08% a végső oltás (B). 31 hónappal Az utolsó vakcinálás után, WT1-specifikus CTL-szintek nőtt 0,10% (C).
Megbeszélés
Ebben az esetben korlátozó tüdőbetegség vezetett az elsődleges onkológus hogy válasszák kemoterápia helyett műtét. Azonban a betegnél elviselhetetlen kemoterápia által okozott anorexia, ami szükségessé a kezelés megszakítását. Mivel néhány korábbi vizsgálatok azt mutatták, hogy a DC immunterápia lehet biztonságosan alkalmazható rákos betegek, mint a minimálisan invazív kezelés [8, 9, 18], mi választottuk ezt terápia betegünk. A közvetlen injektálása dendritikus tumorokba vizsgálták klinikai vizsgálatokban, beleértve a hepatoma [19], hasnyálmirigyrák [20], és a gyomorrák [21]. Wen és mtsai katalógusa. [22] képest a terápiás immunitás által elért számos módok DC injektálással, beleértve az intratumorális, intranodal, intravénás és szubkután injekciók egerekben. A túlélési arányokat a drámaian nőtt vakcinázás intratumorális injekció útján, összehasonlítva injekciók végezzük más módszerek. Pellegatta munkatársai katalógusa. [23] beszámolt arról, hogy összehasonlítva más módszerek, intratumorális injekció dendritikus növelheti tumorellenes hatékonyságát azáltal, hogy megváltoztatja a intratumorális környezet és a növekvő T-sejt által közvetített immunválasz. Ebben az esetben, a megnövekedett WT1-specifikus CTL-szintet figyeltek meg, miután DC immunterápia, jelezve, hogy a DC-k bemutatott WT1 a naiv CD8 + T-sejtek egy pontos módon. Javasoljuk, hogy a gyomorrák lehet jól jelzi a közvetlen befecskendezés a DS és a megfelelő injekció helyét lehet kiválasztani élő képalkotás EGD.
Éretlen DC-alkalmazott közvetlen injekció a korábbi vizsgálatokban, mert a fagocita képességnek tartották, hogy felülmúlja az érett DC-k [24]. Azonban, az éretlen DC kimutatták, hogy indukálja a tolerancia és az antigén-specifikus gátlása effektor T-sejt-funkció [25, 26]. Drutman és Trombetta [27] kimutatta, hogy érett DC megtartotta nagymértékben képes megragadni oldható antigéneket. Továbbá antigének által internalizált érett DC-ket hatékonyan bemutatásra MHC-II-sejtek és a határokon bemutatott MHC-I sejteket. De Vries és mtsai katalógusa. [28] kimutatták, hogy érett DC hatékonyan vándorolnak a T-sejt-lakott területeken a nyirokcsomók a melanomás páciensek. Együttesen ezek az eredmények azt sugallják, hogy érdemes lehet használni érett dendritikus közvetlen injekciót daganatok.
IHC eredménye WT1 és MUC1 jelzett jelentős változások az oltás után. A mucin egy nagy molekulatömegű glikoprotein, amely fontos szerepet játszik védelmében a gyomor-bél traktus epithelium és normális körülmények között jelen bőségesen a luminális felületén különböző szekréciós epiteliális sejtekben. A mag peptidek tandem ismétlés domén elfedi a normális sejtekben, és ki vannak téve a rákos sejt-asszociált mucinok. CTL-ek A MUC1 csak támadás a rákos sejteket kitett tandem ismétlődő dómén [29]. Ebben az esetben a MUC1-pozitív sejtek voltak jelen a felületen a pecsétgyûrûsejtes adenokarcinóma vakcinálás előtt (ábra 2C-C "); azonban MUC1-pozitív sejteket csak megerősítette normál lumen hámsejtek után DC immunterápia, mint vártuk (ábra 2h-h "). katalógusa Következtetések katalógusa Legjobb tudomásunk szerint ez az első jelentés a terápiás hatás a DS, hogy a cél szintetizált peptidek beteg gyomorrák, aki nem megy ESD vagy műtéttel gyógyítható. katalógusa Hozzájárulás katalógusa biztosítottunk pontos magyarázattal a terápia a beteg és családja. Ők írásos beleegyező nyilatkozatban közzétételére a jelen ügy jelentést és bármely azt kísérő képeket. Egy példányát az írásbeli beleegyezése megtekinthető az Editor-in-Chief a folyóirat. Katalógusa Szerzők információ
MK igazgatója Seren Klinikán. MN személyzet asszisztens Tanszékén gasztrointesztinális sebészet, Kanagawa Cancer Center, a rendező a Seren Clinic, és a professzor a Immunológiai Tanszék, Szent Marianna University School of Medicine. TS, AC, és az AN volt a személyzet asszisztensek Seren Klinikán. MO, SS, YY, YS, és az NS is professzorok minden egyetemen. Katalógusa rövidítések katalógusa COPD: katalógusa A krónikus obstruktív tüdőbetegség
CTL:
citotoxikus T-limfociták
DC: katalógusa dendritikus sejt
EGD: katalógusa Esophagogastroduodenoscopy Matton
HLA: katalógusa humán leukocita antigén
IHC: katalógusa immunhisztokémia
MUC1: katalógusa mucin 1 , sejtfelszíni kapcsolódó
WT1: katalógusa Wilms tumor 1.
nyilatkozatok katalógusa Köszönetnyilvánítás katalógusa elismerjük a beteg, aki beleegyezett, hogy részt ebben a vizsgálatban, és az ő elsődleges onkológusok. Ez a tanulmány nem kapott anyagi támogatást. Katalógusa Szerzők eredeti beküldötteknek képeket
alábbiakban a linkeket a szerzők eredeti beküldötteknek képeket. 12957_2014_1883_MOESM1_ESM.tif A szerzők eredeti fájlt az 1. ábra szerinti 12957_2014_1883_MOESM2_ESM.tif A szerzők eredeti fájl 2. ábrán 12957_2014_1883_MOESM3_ESM.tif A szerzők eredeti fájl 3. ábra Érdekütközés
A szerzők nincsenek pénzügyi vagy személyes kapcsolatot az emberekkel, vagy szervezetekkel, amelyek nem megfelelően befolyása ebben a munkában. katalógusa szerzôk hozzájárulása katalógusa MK és MN terveztek és a tanulmányi és összegyűjtött, összeszerelve, elemezni, és értelmezte az adatokat. TS, AC, AN, MO, SS, YY, YS és NS értelmezni az adatokat. MK és MN írta a kéziratot, és jóváhagyta a végleges kéziratot. Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. Katalógusa

• Összehasonlítása jobb és rosszul differenciált lokálisan előrehaladott gyomorrák preoperatív kemoterápia: Retrospektív, összehasonlító vizsgálatban egyetlen harmadlagos ellátás instit…
• Összefüggés a nagyító keskeny sávban képalkotó és kórszövettani a gyomor kiálló /vagy polypoid elváltozások: kísérleti megvalósíthatósági trial