Gastro och sårläkning effekter piptadeniastrum africanum på experimentellt inducerade magsår hos råttor

Gastro och sår helande effekter av piptadeniastrum africanum
på experimentellt inducerade magsår hos råttor Bild Sammanfattning
Bakgrund
Gastric magsår är en av de vanligaste sjukdomar i mag-tarmkanalen, som uppstår på grund av en obalans mellan offensiva och defensiva faktorer. Det är en sjukdom som drabbar ett stort antal människor över hela världen. Denna studie genomfördes för att utvärdera antiulcerogena och antimagsårseffekter och känna igen den grundläggande mekanismen för verkan av Piptadeniastrum africanum
stambarken extrakt.
Metoder
De vattenhaltiga och metanolextrakt av Piptadeniastrum africanum
administrerades vid doser 125, 250 och 500 mg /kg för att utvärdera deras effekter på magsår framkallad av HCI /etanolblandning, indometacin och ättiksyra i Wistar stam manliga vuxna råttor, i åldern mellan 12 och 16 veckor och väger mellan 180 och 220 g. Ranitidin, Maalox och Misoprostol användes som standardläkemedel. Histopatologisk undersökning och kväveoxid nivå genomfördes för att utvärdera den grundläggande mekanismen av verkan av Piptadeniastrum africanum
. . Phytochemical screening genomfördes för att identifiera kända fytokemikalier som finns i dessa extrakt
Resultat sälja The vatten och metanolextrakt av stambarken av Piptadeniastrum africanum
signifikant hämmade (p Hotel < 0,01) magsår inducerat av HCI /etanol till den procentsats av hämning av 81,38; 98,75 och 100% för vätskeextraktet och sedan 75,83, 89,76 och 96,52% för metanolextrakt och med indometacin-inducerade magsår, vatten och metanolextrakt av bark av Piptadeniastrum africanum
minska signifikant (p Hotel < 0,01) inducerade magsår hos råttor, med andelen bota 35,75; 52,33 och 98,58% för vattenextrakt och 33,7; 51,97; och 65,93 till metanolextraktet. Resultaten visade en signifikant minskning av sår yta i båda extrakten och ökning av kväveoxid (NO) i nivå med metanolextrakt. Vid jämförelse med metanolextrakt, vattenextrakt visade mer uttalade effekter, motsvarande procentandelar av läkning av 59. 92; 84,12 och 59,65% för vattenextrakt; och 70,43; 55,49 och 57,59% för metanolextraktet i såret inducerad av ättiksyra, alla vid respektive doser av 125, 250 och 500 mg /kg. Histopatologiska observationer visade också läkande effekt. Som sådana var båda extrakten befunnits uppvisa preventiva och kurativa effekter genom frisättning av NO och tillväxtfaktorer. Detta kan också bero på närvaron av fytokemikalier, såsom alkaloider, flavonoider, fenoler och saponiner, vilka verkar som antisekretoriska medel.
Slutsatser
Piptadeniastrum africanum
stambarken extrakt har således gastroprotektiva och sårläkning effekter, vilket skulle kunna resultera från sin verksamhet genom att stimulera viktiga cellulära mekanismer såsom migration och proliferation av epitelceller som kan ha en cellskyddande effekt genom att stimulera frisättningen av prostaglandiner. Dessa resultat krävs för att bekräfta etnofarmakologiska användning av Piptadeniastrum africanum
stambarken i behandlingen av magsår.
Nyckelord
magsår magskyddande Piptadeniastrum africanum
Bakgrund
Gastric magsår är ett av den gemensamma sjukdomar i mag-tarmkanalen, som uppstår på grund av en obalans mellan offensiven (magsyrasekretion) och defensiv (gastrointestinala integritet) faktorer [1]. Det är en sjukdom som drabbar ett stort antal människor över hela världen. De etiologiska faktorerna för denna sjukdom inkluderar: stress, rökning, näringsbrist, infektioner, täta och urskillningslösa användning av icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel (NSAID) [2]
Ett antal läkemedel inklusive protonpumpshämmare och H2-receptor. antagonister är tillgängliga för behandling av magsår, men klinisk utvärdering av dessa läkemedel har visat förekomst av återfall, biverkningar och läkemedelsinteraktioner [3]. Således finns det ett akut behov av att identifiera mer effektiv och säker antiulcusmedel. I detta sammanhang är användningen av medicinalväxter för förebyggande och behandling av olika sjukdomar i kontinuerlig expansion över hela världen [2]. För att öka användningen av växter som potentiella källor till nya läkemedel och att verka för en effektiv behandling av sjukdomar med färre biverkningar, är det nödvändigt att utföra farmakologiska och toxikologiska studier på växter som används av traditionella healers. För att bidra till detta program av studien, en växt som används vid behandling av flera sjukdomar i de centrala delarna av Kamerun fångade vår uppmärksamhet.
Detta är Piptadeniastrum africanum
tillhör familjen Mimosaceae och vars stam bark dekokt används vanligen i traditionell medicin i behandlingen av inflammation och magsår [4]. Tidigare studier har rapporterat att anläggningen har smärtstillande och antiinflammatoriska egenskaper bark [5] och fytokemikalier metanolextrakt av stammen barken visade närvaron av flavonoider och alkaloider [6], som har en betydande effekt vid behandling av magsår. Det finns dock inga rapporterade på antiulcus och antiulcerogena aktiviteter inom anläggningen uppgifter. Därför var den aktuella studien åtagit sig att utvärdera antiulcerogena och mot magsår egenskaper vatten och metanolextrakt av stam bark Piptadeniastrum africanum
. Antiulcerogena aktivitet testades genom HCI-etanol-inducerad modell och antimagsårsaktivitet utvärderades genom indometacin-inducerad och ättiksyra-inducerade modeller i råttor. Histologisk bedömning och NO-nivåer var associerade för att utvärdera den möjliga mekanismen och läkningsprocessen av anläggningen.
Metoder
Insamling och förberedelse av växtmaterial
växt som användes i denna studie är Piptadeniastrum africanum
( Hook. f.) Familje Mimosaceae skördats i de centrala delarna av Kamerun, distrikt Bokito och bestyrkt vid National Herbarium i Yaounde (Kamerun) genom en jämförelse med verifikationen prov nr 12115 /SRF. En kupong prov har deponerats vid Botany Department, University of Dschang. Den uppsamlade färsk stambarken skrotades, hackad, Framställning av vattenhaltiga extraktet
Pulveriserad Piptadeniastrum africanum
skugga torkades och grovt pulveriserade.
Stambarken (560 g) kokades i 3 liter destillerat vatten under 20 min. Avkok togs och fick svalna under 30 minuter vid rumstemperatur (24 ± 2 ° C). Avkok filtrerades genom ett Whatman filterpapper nr 1 och indunstades till torrhet i en luftugn vid 40 ° C för att ge 19,72 g av vattenhaltigt extrakt motsvarande en utvinning utbyte av 3,25%.
Extraktion av metanolen växtmaterial
200 g av stambarken pulvret indränktes med 1,5 liter metanol under 72 timmar. Filtratet koncentrerades till torrhet i en rotationsindunstare under reducerat tryck vid en temperatur av 65 ° C för att ge 18,81 g av metanolextrakt (28,08% utbyte).
Preliminär fytokemiska screening av extrakt
Kvalitativa kemiska tester genomfördes för vatten- och metanolextrakt för att identifiera de olika phytoconstituents. Vatten- och metanolextrakt gav positivt test för saponiner, tanniner, fenolföreningar, terpenoider och flavonoider [6].
Kemikalier och läkemedel
HCI, etanol, ättiksyra och Griess reagens erhölls från laboratoriedjurfysiologi och phytopharmacology vid University of Dschang. Maalox® (Aluminiumhydroxid plus magnesiumhydroxid), Ranitidine® och Misoprostol® köptes från ett apotek. Alla andra använda kemikalier och reagens var av analytisk kvalitet.
Djur
Experimenten utfördes på Wistar stam manliga vuxna råttor, i åldern mellan 12 och 16 veckor och väger mellan 180 och 220 g. Råttorna upp i djurhus av naturvetenskapliga fakulteten vid universitetet i Dschang och matas med normal laboratorieråttdiet; med foder och vatten ges ad libitum
. Innan försöksprotokoll råttorna acklimatiserades under 48 timmar till laboratorieförhållanden för att minimera någon ospecifik stress.
Alla procedurer som beskrivs i detta arbete när det gäller användningen av försöksdjur var i strikt respekt för etik när det gäller användning, den hantering och bevarande av de kamerunska flora och fauna som anges av etiska kommittén i Kamerun ministeriet för vetenskaplig forskning och teknik, vilket har antagit de riktlinjer som fastställts av Europeiska unionen på djurvård och experiment (CCE rådet 86/609).
magsårs försök
HCl /etanol-inducerade gastriska slemhinneskada
gastrointestinala lesioner inducerades hos hanråttor med hjälp av HCl /etanol-metoden beskriven i [7]. Djuren fick svälta under 48 timmar och delades upp i nio grupper bestående av sex råttor per grupp. Grupp 1 representerad den negativa kontrollgruppen, som fick 1 ml /100 g kroppsvikt destillerat vatten. Grupperna 2 och 3 representerar de positiva kontrollgrupperna vilka erhöll 1 ml /100 g kroppsvikt Maalox (50 mg /kg) och ranitidin (50 mg /kg) lösningar, respektive. Grupperna 4 till 6 mottog 1 ml /100 g kroppsvikt vattenhaltiga extraktet vid doser av 125, 250 och 500 mg /kg. Grupperna 7 till 9 mottog 1 ml /100 g kroppsvikt metanolextrakt i doser på 125, 250 och 500 mg /kg. Alla testsubstanserna administrerades oralt. En timme efter läkemedelsbehandling, 1 ml per 150 g kroppsvikt av nekrotiserande lösning (150 mM HCl i 60% etanol) gavs per os
till varje råtta. Avlivades råttorna en timme senare och magen avlägsnades och observeras med avseende på sår i den glandulära regionen. Ytarean hos varje lesion mättes och bedömdes som beskrivits av [8]. Såret index för varje råtta togs som medelvärdet sår poäng (0: ingen sår; 1: US ≤ 0,5 mm 2, 2: 0,5 mm 2 < US ≤ 2,5 2, 3 : 2.5mm 2 < US ≤ 5mm 2, 4: 5mm 2 < US ≤ 10mm 2, 5: 10mm 2 < US ≤ 15mm 2; 6: 15mm 2 < US ≤ 20mm 2, 7: 20mm 2 < US ≤ 25mm 2, 8: 25mm 2 < US ≤ 30mm 2, 9: 30mm 2 < US ≤ 35mm 2, 10. US > 35 mm 2)
procentuella såriga ytan beräknades som den totala ytan som täcks av alla skador uttryckt som en del av den totala corpus mukosal yta. De gastriska mukus i varje mage uppsamlades och vägdes. Procentandelen hämning (% I) beräknas med följande formel: $$ \\% \\ mathrm {I} = \\ left (\\ mathrm {U} \\ mathrm {S} \\ mathrm {c} \\ hbox {-} \\ mathrm {U} \\ mathrm {S} \\ mathrm {t} \\ right) \\ gånger 100 /\\ mathrm {U} \\ mathrm {S} \\ mathrm {c} $$ Där USc = sår yta av kontroll och USt = sår yta område försöksdjur.
Indomethacin-inducerade sår
för att fastställa huruvida antimagsårs egenskaperna hos vatten och metanol extrakten förmedlas genom stimulering av cyklooxigenas aktivitet, var indometacin-inducerad modell användes såsom beskrivits av [9 ]. Femtiofyra djuren fasta under 24 h erhöll indometacin (5 mg /kg. P.o.) i fem dagar. Djuren delades sedan upp i nio grupper (n = 6) och behandlades en gång dagligen i ytterligare fem dagar med de respektive testlösningar som ges nedan:

Grupp 1 (negativ kontroll): 5 mg /kg indometacin + destillerat vatten

Grupp 2: 5 mg /kg indometacin + 50 mg /kg Maalox

Grupp 3: 5 mg /kg indometacin + 100 ug /kg Misoprostol

Grupper 4 , 5, 6: 5 mg /kg indometacin + 125, 250 eller 500 mg /kg av vattenextrakt respektive

Grupper 7, 8, 9: 5 mg /kg indometacin + 125, 250 eller 500 mg /kg av metanolextrakt respektive
Efter testlösningar administrationen avlivades råttorna på den sjätte dagen, var magarna avlägsnades och öppnades längs den större krökningen och tvättas. Gastriska lesioner observerades och såret Index bestämdes [10] enligt följande: 1 (sårigt område: 1-6 mm
^{2 Review),
2 (sårigt område: 7-12 mm
2 Review),
3 (sårigt område: 13-18 mm
2 Review),
4 (sårigt område: 19-24 mm
2 Review),
5 (sårigt område >.. 24 mm
2 Review)
magslemhinnan av varje mage samlades och vägdes
ättiksyra syra-inducerade magsår
ättiksyra-inducerade modellen användes såsom beskrivits av [11]. Sextio Wistar-hanråttor som fastat under 24 h användes i detta experiment. Under anestesi till följd av en Diazepam (5 mg /kg) /ketamin (50 mg /kg) (01/02 volym /volym) blandning tillsattes en laparotomi gjordes på femtio fyra djur genom en mittlinje epigastrisk incision och de sex djuren förblev användes som normal kontrollgrupp. Efter exponering magen, 0,05 ml (volym /volym) av 30% -ig ättiksyralösning injicerades i subserosal skiktet i den glandulära delen av den främre väggen. Magen badades med koksaltlösning för att undvika vidhäftning till den yttre ytan av den såriga regionen och buken stängdes därefter. En dag efter administrering av syra, började daglig behandling och djuren behandlades oralt en gång per dag under 14 på varandra följande dagar. Brifly djuren behandlades med respektive testlösningar enligt nedan:}

Grupp 1 representerade den normala kontrollgruppen, som fick 1 ml /100 g kroppsvikt destillerat vatten

Grupp 2 representerade negativa kontrollgruppen, som fick 1 ml /100 g kroppsvikt destillerat vatten

grupper 3 och 4 representerar de positiva kontrollgrupperna som fick 1 ml /100 g kroppsvikt Maalox (50 mg /kg) och Ranitidin (50 mg /kg) lösningar, respektive.

Grupper 5-7 fick 1 ml /100 g kroppsvikt vattenextrakt i doser på 125, 250 och 500 mg /kg.

Grupper 8-10 erhöll 1 ml /100 g kroppsvikt metanolextrakt i doser på 125, 250 och 500 mg /kg. På dagen 15, var alla grupper avlivades. Blodet uppsamlades och magarna avlägsnades. Blodet användes för att bestämma den kväveoxidnivån och magarna för utvärdering av såriga området, slem vikt, kväveoxid nivå och histologisk om bedömningen.
Mätning av slemproduktion
Gastric slemproduktion mättes i råttor utsatta för HCl /etanol, pylorus-ligering och ättiksyra i enlighet med metoden beskriven av Tan et al.
[8]. Magslemhinnan hos varje råtta försiktigt skrapades med användning av en glasskiva, och slem erhölls noggrant vägas användning av en känslig digital elektronisk balans. Denna operation utförs av samma försöksledaren varje gång.
Bloduppsamlingen sälja The hepariniserade blodprover från råttorna erhölls från abdominal artere (kateterisering).
Omedelbart var blodet in till centrifugering (3000 varv per minut) under 15 min. Efter centrifugerades plasma erhållen bevarades vid -18 ° C fram till användning för NO-nivåer.
Histologisk bedömning Review, en del av magarna bevarad i 10% formalinlösning och följdes av vävnads dehydrerades med alkohol och xylen. Därefter tillsattes varje prov inbäddad i paraffin, sektionerades vid 5 pm i objektglas före för färgning. Hematoxylin och eosin fläck användes. Objektglasen undersöktes under ljusmikroskop och registrerades med 40 × linser.
Kväveoxid dosering
Efter ättiksyra induktion, var det hepariniserade blodet och den homogeniserade magen hos råttorna används för att mäta kväveoxidnivån i enlighet med det metod som beskrivits av [12]. NO-halten kvantifierades genom mätning av nitrit /nitrathalten med hjälp av Griess analys och natriumnitrit användes som standard. I korthet var gastric homogencentrifugerades vid 3900 rpm under 25 minuter. Supernatanten erhölls och plasma var och en följd av den snabba tillsatsen av Griess-reagens och absorbansen vid 540 nm mättes. Resultaten uttrycktes som

• Har D3 kirurgi erbjuda en bättre överlevnad utfall jämfört med D1 operation för magcancer? Ett resultat baserat på ett sjukhus befolkning på två decennier som tar D2 kirurgi för reference
• Pepsinogen I och II uttryck in situ och deras korrelationer med serum pesignogen nivåer i magcancer och dess precancerous disease