gastrobeschermende mechanisme van Paederia foetida
Linn. (Rubiaceae) - een populaire eetbare plant gebruikt door de tribale gemeenschap van Noord-Oost-Indië
Abstracte achtergrond
Het doel van deze studie is het evalueren van de gastrobeschermende activiteit van Paederia foetida
L. blad voor maagzweer.
Methods Ondernemingen De methanol extract van P. foetida
L. vertrekt om twee verschillende doses werd onderzocht voor gastrobeschermende potentieel met behulp van Indomethacin-pylorus ligatie, alcohol veroorzaakte en water onderdompeling stress-geïnduceerde model in ratten. In vitro
DPPH * radicalen activiteit en western blot analyse van de maag weefsel van pylorus ligaturen ratten werden ook uitgevoerd. HPTLC-analyse werd uitgevoerd om de fyto-farmacologische relatie begrijpen.
Resultaten
Methanol extract bij een dosis van 100 mg /kg en 200 mg /kg lichaamsgewicht vertoonden 72 tot 78% ulcus bescherming in vergelijking met de negatieve controle, terwijl verwijzing drug getoond 82% bescherming in Indomethacin-pylorus ligatie model. Verder methanol extract toonde ook beschermend effect tegen 70% v /v ethanol en stress-geïnduceerde maagzweer model. Ongeveer 84% bescherming tegenover cimetidine (85%) werd waargenomen bij western blot analyse van maagweefsel van pylorus ligaturen ratten. HPTLC analyse methanol extract van P. foetida
L. bevestigde de aanwezigheid van β-sitosterol. In DPPH * radicalen activiteit, de IC
50 waarde werd waargenomen tot 43.52 ug /ml zijn.
Conclusies
Deze observaties richtte de traditionele vordering en dus Paederia foetida
zou een potent gastrobeschermende agent voor zijn te gebruiken in de toekomst. De gastrobeschermende activiteit kan worden gemedieerd door de Nrf2 gemedieerde anti-oxidant en anti secretoire effecten.
Sleutelwoorden
Paederia foetida
gastrobeschermende Antioxidant Noord-Oost-Indische achtergrond
Paederia foetida
Linn. behorende tot de familie Rubiaceae (Sanskriet, Prasarini) is een uitgebreid stinkende ruiken klimplant. De bovengrondse delen van de plant bevatten iridoid glycosiden nl.
Asperuloside, scandoside en paederoside [1]. Verschillende tribale gemeenschappen van Noord-Oosten naar Zuid-deel van India gebruiken de plant als een groente en ook gebruiken om verschillende maagklachten zoals diarree en dysenterie [2-6] te behandelen, maag zwelling, maag, gastritis schoon te maken, in losse beweging, indigestie, buikpijn enz. [3, 7-18]. Het blad wordt ook gebruikt als anti ulcusmiddel [19]. Verschillende wetenschappelijke studie uitgevoerd om het gebruik van Paederia bij de behandeling van reumatische aandoeningen [20-22], anti-inflammatoire, leverbeschermende [23-25], tripsyChemolithotripsy [26], bevordert seksuele kracht, de kwantiteit van onderzoeken sperma en lichaam kracht en een jeugdige glans [27] produceren.
maagzweer (PUD) is de meest voorkomende maagdarmaandoening in de klinische praktijk. PUD gevolg is van een gebrek aan evenwicht tussen defensief en corrosieve factoren, dat wil zeggen corrosieve kracht van de maag zoutzuur en de spijsvertering kracht van pepsine evenals gal versus defensieve factoren, dat wil zeggen het vermogen van de maag en duodenale slijmvlies om deze bijtende /spijsvertering krachten te weerstaan. Verschillende bijwerkingen nl.
Heupfractuur, acute interstitiële nefritis, acuut nierfalen, osteoporose, hepatitis, gezichtsstoornissen momenteel beschikbare medicijnen voor PUD gerapporteerd [28-30]. Daarom is er een dringende behoefte om te zoeken naar een beter alternatief behandeling van PUD. Helicobacter pylori
infecties [31, 32] en oxidatieve stress [33] zijn een van de belangrijkste oorzaak voor het ontstaan van de PUD. Onze eerdere studies op de biologische activiteit van Paederia tegen H. pylori Kopen en oxidatieve stress toonde veelbelovende resultaten [34, 35]. Gezien deze resultaten verder onderzocht we de anti- ulcer activiteit van het plantenhormoon aan diermodellen om het gebruik van Paederia bij de behandeling van maagzweren evalueren. Het onderhavige artikel beschrijft onze inspanningen en resultaten.
Methods
Etnobotanische survey and Plant materialen collectie Belgique Om het belang, het nut en de therapeutische werkzaamheid van de wilde eetbare planten van Northeast, India, een enquête [8] was kennen uitgevoerd door de auteur S. Chanda. Agartala, de hoofdstad van Tripura werd gekozen als studiegebied voor de etnobotanische enquête. Het onderzoek werd willekeurig uitgevoerd onder de tribale families die in en rond Agartala. Deze etno-farmacologische onderzoek werd uitgevoerd volgens de regels van de Indiase wet Biodiversiteit en Manipur Biological Diversity Rules 2008 post No. 15 (1) en 15 (2), waarin gesteld dat "burger van India of zakelijke, vereniging of organisatie geregistreerd uitgevoerd India op grond van artikel 7 van de wet zijn vrijgesteld van het zoeken naar voorafgaande /vorige goedkeuring van de ten behoeve van onderzoek, bio-onderzoek en bio-gebruik ". De eerste belangrijkste criteria om eventuele consultants koos voor de huidige studie was de diepe kennis van de adviseurs in het gebruik van planten en ten tweede het vermogen om te spreken en begrijpen van de verschillende stammen en niet-inheemse talen van Tripura. Een algemene gesprek is ook gedaan met de diverse tribale medicijnmannen (traditionele beoefenaar) van dat specifieke gebied. Hier medicijnman (lokaal bekend als Kaviraj /Baidya) is een healer die vanuit zijn of haar voorvader diepe kennis over het gebruik van planten als medicijn verworven en gebruik maken van de kennis om mensen te behandelen als ze ziek zijn. Voor de huidige studie werd de mondelinge toestemming verkregen van de traditionele beoefenaars. Totale steekproef werd beschouwd door het naderen van directe interviews met individuele tribale families en medicijnmannen. Een gestructureerde vragenlijst onpartijdige formaat was bereid om de uitkomst van de lijst van de planten gebruikt bij de behandeling van maag stoornissen bijzonder maagzweer te vergemakkelijken. Medicijnmannen werden ondervraagd over hun diagnostische procedure, symptomen en de wijze van medicatie voor de behandeling van maag- of darmzweer. De meest voorkomende symptomen beschreven door medicijnmannen, die verder gekenmerkt als hetzij zweren in maag of risicofactoren ontwikkeld ulceratie zijn zuurgraad, gevoel van een volle maag, overmatige buikpijn die verlicht na voedselconsumptie, verlies van eetlust buikpijn, boeren met een zure smaak etc. We hebben beloofd om respectieve traditionele beoefenaars dat de verkregen traditionele kennis en sample alleen zal worden gebruikt voor het onderzoek doel en zal niet openbaar hun typische formulering of hulpstoffen één. Na een grondige analyse van de ingevulde vragenlijst format identificeerden we dat de plant Paederia foetida
L. is een van de meest veelbelovende plant in de behandeling van zweren gebruik door de stammenfamilies. Deze plant is ook zeer vaak geadviseerd door de medicijnmannen te behandelen zoals de ziekte omdat het te eetbaar. Verse bladeren van Paederia foetida
Linn. (Rubiaceae) werden uit de lokale tribale markt van Agartala, Tripura verzameld en gewaarmerkt door de National Institute of Science Communication and Information Resources, New Delhi (Authentication Ref Nr NISCAIR /rhmd /Consult /2010-11 /1442/40).
Bereiding van het extract
Het blad materiaal werd verzameld uit Agartala, Tripura en vreemde stoffen werden verwijderd. Het blad materiaal werd in de schaduw gedroogd voor 10 dagen en gemalen tot natuurlijk poeder (ongeveer 1,5 kg) te krijgen. Het gemalen materiaal werd met methanol (4,5 L) in een Soxhlet apparaat gedurende 24 uur. De temperatuur werd ten hoogste 70 ° C gedurende de extractieprocedure. Het methanol extract werd opgevangen, gefiltreerd en drooggedampt in een roterende verdamper. De volledig gedroogde methanol extract werd nagewassen met gedestilleerd water, opnieuw gedroogd en bewaard in de koelkast tot gebruik. De opbrengst van methanol extract was 36,21% w /w.
Dieren
Gezonde albino ratten (Wistar stam) met een gewicht van 150-180 g werden verkregen van Regional Institute of Medical Sciences (RIMS), Imphal. Ethische goedkeuring voor de behandeling en experimenten op dieren werd verkregen uit de Institutional Animal Ethische Commissie (IAEC), IBSD, Imphal met instemming No.-IBSD /IAEC /Ext. Inst./PC/4 (1) vóór het begin van het experiment werkt. Alle studies werden uitgevoerd in een overeenstemming met de Ethische Commissie Animal. De ratten werden geacclimatiseerd gedurende één week onder laboratoriumomstandigheden in een nieuwe omgeving, waarin experiment werd uitgevoerd om vast te stellen. Zij werden ondergebracht in kooien van polypropyleen en gehandhaafd op 25 ° C ± 2 ° C temperatuur en 12 uur donker /lichtcyclus. Zij werden gevoed met soja bori
, Gram of eenmaal daags standaard pellet voedsel en water ad libitum gedurende de experimenten. Het beding materialen in de kooien werden dagelijks vernieuwd om hygiënische toestand en maximaal comfort voor de dieren te zorgen.
Bepaling van de acute toxiciteit (ALD50)
De acute toxiciteit voor methanol extract van P. foetida
werd bepaald in albino muizen , gehandhaafd onder standaardomstandigheden. De dieren werden gevast gedurende de nacht voorafgaand aan het experiment. Acute orale toxiciteit - acute toxische klasse methode (OECD Richtlijn geen 423, Annexure -. 2d) door CPCSEA aangenomen, de regering van India werd gevolgd voor de toxiciteit studies. De mortaliteit werd waargenomen na orale toediening van 2000 mg /kg b.w testmonsters [36]. Voorkomende bijwerkingen zoals lichte diarree, gewichtsverlies en depressie van behandelde diergroepen werd binnen de 7 dagen van observatie [37].
Indomethacin-pylorus ligatie opgewekte ulcer
albino ratten werden willekeurig verdeeld in vijf groepen bestonden elk uit 5 dieren. De normale controle (groep 1) en ulcus controle (groep 2) groepen kregen vehikel (gedestilleerd water, 5 ml /kg, p.o.) gedurende het verloop van het experiment. De behandeling groepen kregen verschillende doses van methanol extracten van P. foetida
(100 en 200 mg /kg lichaamsgewicht /dag; Groep 3 & 4) en ranitidine (10 mg /kg, po /dag; Group 5) voor een periode van vier dagen. Alle dieren, die niet in de normale groep werd toegediend met indomethacine suspensie (25 mg /kg, sc) eenmaal per dag gedurende vier dagen als ulcerogene middel, 30 minuten na de toediening van voertuig of test- of standaard drugs.
chirurgische procedure
Op 4 e dag 30 minuten na de behandeling werd chirurgie uitgevoerd [38]. De ratten werden gevast gedurende 24 uur voor het begin van de chirurgische procedure. Ze werden verstrekt gratis toegang tot water in deze periode. Elke rat werd verdoofd met ether en het abdomen werd geopend via een incisie. De pylorus gelegen en strak afgebonden met zijden hechtdraad. Zowel de spieren lagen en huid werden vervolgens gestikt met de hulp van hechtdraad en ligatuur afzonderlijk. Vier uur na pylorus-ligatie werden de dieren gedood door het geven overdosering ether. Maag van alle ratten opgeofferd werd onderzocht onder de microscoop. De gastrische schade in de glandulaire regio's bevonden zich in het maagslijmvlies als langwerpig zwart-rode lijnen parallel aan de lengteas van magen.
Berekening van ulcus index [39]
\\ (\\ mathrm {Ulcer} \\ kern0. 5em \\ mathrm {index} \\ kern0.5em = \\ kern0.5em \\ links (\\ mathrm {U} \\ mathrm {N} + \\ kern0.5em \\ mathrm {US} \\ kern0.5em + \\ kern0.5em \\ mathrm { UP} \\ right) \\ kern0.5em \\ tijden \\ kern0.5em {10} ^ {- 1}; \\) Waar VN = gemiddelde van het aantal zweren per dier
US = Gemiddelde van de ernst score, UP = Percentage . dieren met zweren
het percentage bescherming ulcus werd berekend met behulp van de volgende formule: - $$ \\% \\ kern0.75em van \\ zweer \\ Protection = \\ frac {\\ mathrm {Controle} \\ \\ mathrm {betekenen} \\ \\ mathrm {zweer} \\ \\ mathrm {index} - \\ mathrm {proef} \\ \\ mathrm {betekenen} \\ \\ mathrm {zweer} \\ \\ mathrm {index}} {\\ mathrm {Controle} \\ \\ mathrm {betekenen} \\ \\ mathrm {zweer} \\ \\ mathrm {index}} \\ tijden 100 $$ Bepaling van de maag volumes, pH en zuur outputs
de magen van ratten werden uitgesneden uitgevoerd onder ether anesthesie precies na 4 uur van pylorus ligatie en de maaginhoud waren verzameld. De magen werden gewassen met lauw steriel water. Zowel het wassen en maaginhoud werden opgevangen en samen gecentrifugeerd bij 4000 rpm gedurende 10 min. De volumes van de supernatanten van de maaginhoud werden gemeten en andere maag-secretie studies, zoals pH, zuur output, zuurgraad, ulcus index /ulcus score zijn ook gedaan [40, 41]. De pH van alle bovenstaande vloeistoffen werd gemeten en hun zuren bekomen werden bepaald door titratie tot pH 7 met 0,1 N NaOH-oplossing Ondernemingen De zuur outputs werden berekend door de volgende vergelijking:. $$ \\ Mathrm {Acid} \\ \\ mathrm {o} \\ mathrm {utput} \\ \\ links (\\ upmu \\ mathrm {e} \\ mathrm {q} /\\ mathrm {hr} \\ right) = \\ mathrm {Acid} \\ mathrm {teit} \\ \\ links (\\ mathrm {mEq} /\\ mathrm {l} \\ right) \\ tijden \\ mathrm {V} \\ mathrm {o} \\ mathrm {l}. \\ \\ mathrm {o} \\ mathrm {f} \\ \\ mathrm {maag} \\ \\ mathrm {sap} \\ kern0 .75em \\ left (\\ mathrm {ml} \\ right) /4\\kern0.5em \\ links (\\ mathrm {hr} \\ right) $$ $$ zuurgraad = \\ frac {Titre \\ waarde \\ van \\ NaOH \\ X \\ Actueel \\ normaliteit \\ van \\ NaOH} {Veronderstelde \\ normaliteit \\ van \\ NaOH} \\ tijden 100 $$ Alcohol geïnduceerde maagzweer
De dieren werden verdeeld in vijf groepen, elk bestaande uit vijf ratten. De ulceratie werd geïnduceerd door toediening van 70% ethanol (10 ml /kg, p.o.). Alle dieren werden gevast gedurende 36 uur vóór toediening van alcohol. Groep 1 ontvangen van gedistilleerd water (5 ml /kg, p.o.). Groep 2 ontvangen van 70% ethanol om maagzweer en 5 ml gedestilleerd water /kg p.o. induceren als behandeling, groep 3 & 4 ontvangen methanol extract van P. foetida
(100 en 200 mg /kg, p.o.) één uur vóór de toediening van 70% ethanol als enkelvoudige dosis. Sucralfaat werd toegediend aan vijfde groep als referentiestandaard geneesmiddel op de dose100mg /kg, p.o. één uur vóór de toediening van ethanol. Ze werden in speciaal gebouwde kooien gehouden Coprofagie voorkomen tijdens en na het experiment. De dieren werden verdoofd 4 h later met ether verdoving en maag ingesneden langs de grotere kromming en zweerscore opgenomen [41]. De zweer score voor de normale maag, rode kleur, spot zweer, hemorragische streak, zweren en perforatie is 0, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 en 3,0 respectievelijk.
Water onderdompeling stress-geïnduceerde ulcera (WISIU)
De dieren werden verdeeld in vijf groepen, elke groep van vijf ratten. Groep 1 (normale controle) ontving gedistilleerd water (5 ml /kg, p.o.) indien aan groep 2 behandeld maagzweer controle. Groep 3 en 4 ontvangen methanolextracten in een dosis 100 & 200 mg /kg lichaamsgewicht respectievelijk groep 5 kregen lansoprazol (8 mg /kg, p.o.). Na behandeling werden de dieren toe te zwemmen in een glazen cilinder met water (25 ° C) gedurende 3 uur. De dieren werden gedood door hoge dosis anestheticum ether en zweerscore opgenomen [42].
Western blotanalyse van in-vivo maagweefsel van pylorus ligaturen ratten
dieren werden verdeeld in vier groepen met elk zes en werden uitgehongerd gedurende 24 uur voor experimenteren. Group1 behandeld als normale controle (+ controle) en beheerd water mondeling. De dosis was 5 ml /kg lichaamsgewicht Groep 2 behandeld als een ulcus controle (- control). Groep 3 en 4 ontvangen P. foetida
methanol extract (150 mg /kg lichaamsgewicht, p.o.) en cimeditine respectievelijk (8 mg /kg, lichaamsgewicht p.o.). Na 30 minuten behandeling op de pylorus en geligeerd strak met zijden hechtdraad zoals hierboven beschreven in de indomethacine geïnduceerde zweer model. De maag van ratten werden verwijderd en geopend langs de grotere kromming en vervolgens gewassen met ijs- koude met fosfaat gebufferde oplossingen. Het aantal of erosies of zweren werd onder de loep bepaald en maagzuurafscheiding studies uitgevoerd [40, 41].
Homogenaten verkregen van krassen maagslijmvlies werd gecentrifugeerd bij 4000 rpm, 4 ° C gedurende 30 min (5430R, Eppendorf). De supernatanten die 1: 1000 cocktail van proteaseremmers (P8340, Sigma-Aldrich) werden gehouden op -80 ° C tot gebruik. De eiwitten in weefsel homogenaten werden gescheiden door SDS-PAGE en overgebracht op polyvinylideen (PVDF) membranen (Millipore Merck-) door middel van trans-blot motorunit (BIO RAD). De overgedragen eiwitten werden geïncubeerd met primaire antilichamen (anti-Nr2f2; Ab 1), verkregen in konijnen, gewassen en geïncubeerd met biotine geconjugeerde secundaire antilichamen. Na het nawassen werd gevisualiseerd door chromogene werkwijze SNAP-ID instrument (Merck- Millipore).
Statistische analyse De gegevens werden uitgedrukt als gemiddelde ± standaard fout gemiddelde (SEM). Verschillen werden beschouwd als significant bij *** P Restaurant < 0,001, of ** P
< 0.01 of * P Restaurant < 0,05 in vergelijking testgroep vs controle (ve) -groep en ααα P Restaurant < 0,001, of αα P
< 0.01 of α P Restaurant < 0,05 in vergelijking met de positieve controle vs negatieve controle. Voor numerieke resultaten, one-way variantie-analyse (ANOVA) met Dunnett-test (positieve controle vs negatieve controle en al testgroep vs. negatieve controle) werd uitgevoerd met behulp van GraphPad InStat Versie 3 (GraphPad Software).
DPPH * radicalen activiteit
Hoewel de antioxidant activiteit van de verse bladeren van Paederia ook is geschreven door de auteur [34] maar hetzelfde werd herhaald met het gedroogde monster (methanolische extract van gedroogde bladeren) die voor de huidige dierstudie. De vrije radicalen vangende activiteit van methanol extract van Paederia werd gemeten in termen van waterstof doneren of radicaal-wegvangend vermogen met behulp van de stabiele radicale DPPH. Een oplossing van 0,1 mM α, α-difenyl-β-picryl-hydrazyl (DPPH) (himedia, Bombay) in ethanol werd bereid en 1,0 ml van deze oplossing werd aan 3,0 ml van het extract oplossing toegevoegd in water met verschillende concentraties (10 -100 ug /ml). Dertig minuten later, werd de absorptie gemeten bij 517 nm [43]. De lagere absorptie van het reactiemengsel geeft een hogere vrije radicalen vangende activiteit. Rutine (ozon, Bombay) werd als een standaard drug. De resultaten werden uitgedrukt als IC 50 of 50 remmende concentratie waarde, zijnde concentratie monsters vertoonden 50% remming van DPPH * radicalen.
HPTLC analyse methanol extract van P. foetida
De methanolextract P. foetida
werd geëvalueerd met hoge prestatie dunnelaagchromatografie (HPTLC) systeem (CAMAG Linomat 5, Zwitserland) kwalitatieve schatting van β-
sitosterol bij 540 nm. De commercieel verkrijgbare β-
sitosterol (Sigma-Aldrich, India) en methanol extract van P. foetida
werd gelijktijdig met mobiele fase (tolueen: ethylacetaat: mierenzuur in een verhouding van 8: 2: 0,05 v /v /v) en anijsaldehyd zwavelzuur gebruikt als het visualiseren van reagens.
Resultaten
Bepaling van de acute toxiciteit (ALD50)
In acute toxiciteit onderzoek, methanol extract van P. foetida
geen tonen sterfte op de dosis van 2000 mg /kg. Daarom is 2000 mg /kg dosis werd beschouwd als ALD 50 afgesneden van de dosis onder GHS 5 (veilige dosis), als per Globally Harmonised Classification System (GHS) voor chemische stoffen en mengsels in de OESO-richtsnoer 423 (Annexure 2b &beschreven; 3b). Voorkomende bijwerkingen zoals lichte diarree, gewichtsverlies en depressie bij de behandelde groep dieren werden niet waargenomen binnen de 7 dagen van observatie. In deze studie, alleen 100 mg /kg (laag) en 150 mg /kg (hoog) of 200 mg /kg (hoog) lichaamsgewicht doses werden geselecteerd voor in vivo studie gastroprotectieve en 10-100 ug /ml doses voor ex -vivo Kopen en in-vitro
studies. Omdat ≥200 mg /kg lichaamsgewicht van fragmenten in vivo studies en ≥200 pg /ml extract concentraties in vitro Wat zijn waarschijnlijk kunstmatig ondanks meegevende reproduceerbare effecten. Erger nog, kunnen dergelijke hoge concentraties niet-fysiologische effecten waardoor artefacten [37] te activeren.
Indomethacin-pylorus ligatie model
In dit model toediening van methanol extract van twee verschillende doses (100 en 200 mg /kg) remde de toename van maagzuurafscheiding volume zuuropbrengst op een dosisafhankelijke wijze terwijl er een toename in pH. Het effect was zeer significant (p < 0,001) voor beide doses. De maagzweer index was verlaagd. Het toonde zweer bescherming, 72 en 78% bij de dosis van 100 en 200 mg /kg, respectievelijk, waarbij ranitidine vertoonde 82% van ulcus bescherming (tabel 1) .table 1 Effect methanol extract maagzuurafscheiding volume, pH zuur- output en ulcus index tegen indomethacine-pylorus ligatie geïnduceerde ulcera bij ratten
Behandeling
maag secretie (gemiddelde ± SEM)
zweer index (mm) gemiddelde ± SEM
% van de bescherming zweer
Volume (ml)
pH
Acid uitgang (Eq /100 g /4 h)
Group 1 (5 ml gedestilleerd water /kg)
2.114 ± 0.13
2.80 ± 0.01
2.80 ± 0.01
2.850 ± 0.07
- Groep 2 Indomethacin (25 mg /kg)
9,280 ± 0,09 ααα
1.07 ± 0.01ααα
24,47 ± 2.28ααα
39,12 ± 0.81ααα
- Group3 MeOH PF (100 mg /kg)
4,296 ± 0,11 ***
2.51 ± 0.02 ***
10.99 ± 0.11 ***
10.57 ± 0.15 ***
72.98
Groep 4 MeOH PF (200 mg /kg)
2.670 ± 0.21 ***
2.71 ± 0.71 ***
7,62 ± 0,14 ***
8.38 ± 0.05 ***
78,58
Groep5 Ranitidine (10 mg /kg)
2,426 ± 0,52 ** *
2,89 ± 0,03 ***
5.30 ± 0.31 ***
6.69 ± 0.06 ***
82,89
MeOH PF = methanol extract van Paederia foetida
; n = 5; Data = gemiddelde ± SEM; ααα P Restaurant < 0,001 (G1 Vs G2); *** P Restaurant < 0,001, (groep 2 Vs groep 3, 4 & 5)
Alcohol geïnduceerde maagzweer model
orale toediening van ethanol induceert maagzweer. Voorbehandeling van deze ratten met verschillende doses van de extracten hadden hoog significante bescherming ulceratie. 59 en 72% ulcera bescherming werd waargenomen bij de dosis van 100 en 200 mg /kg, respectievelijk, terwijl standaard drug sucralfaat vertoonde 81% van ulcus bescherming (tabel 2) .table 2 Effect van methanol extract van P. foetida
alcohol geïnduceerde maagzweren bij ratten
Behandeling
zweer scoren
% van de bescherming van ulcus
Group 1 (5 ml gedestilleerd water /kg, po)
2.0 ± 0.12
- Groep 2 (5 ml gedestilleerd water + 70% ethanol, 10 ml /kg, po)
3.70 ± 0.49 α
- Groep 3 MeOH PF (100 mg /kg)
1.40 ± 0.29 *
59,45
Groep 4 MeOH PF (200 mg /kg)
1,0 ± 0.31 *
72,97
Group 5 Sucralfate (100 mg /kg, po)
0.70 ± 0.12 *
81,08
MeOH PF = methanol extract van Paederia foetida
; n = 5; Data = gemiddelde ± SEM; α P Restaurant < 0,05 (Group1 Vs Group2); * P Restaurant < 0,05, (groep 2 Vs groep 3, 4 & 5)
Water onderdompeling stress-geïnduceerde ulcera (WISIU) model
De methanol extract (100 en 200 mg /kg) dosisafhankelijk toonden zeer significant (p < 0,001) ulcer bescherming (62 en 67%) aan maagslijmvlies van ratten tegen WISIU waar zoals lansoprazol toonde 70% bescherming (tabel 3) .table 3 Effect methanol extract van P. foetida
waterdompel stress-geïnduceerde ulcera bij ratten
Behandeling
zweer scoren
% van de bescherming van ulcus
Group 1 (5 ml gedestilleerd water /kg, po)
2,0 ± 0.12
- Groep 2 (ulcus controle)
4.00 ± 0.22
- Groep 3 (MeOH PF 100 mg /kg, po)
1.50 ± 0.27 ***
62.50
Group 4 (MeOH PF 200 mg /kg, po)
1.30 ± 0.12 ***
67.50
Group 5 (Lansoprozole 8 mg /kg, po)
1,20 ± 0,26 ***
70.00
MeOH PF = methanol extract van P. foetida
; n = 5; Data = gemiddelde ± SEM; *** P Restaurant < 0,001, (groep 2 Vs groep 3, 4 & 5)
Western blotanalyse van de maag weefsel van pylorus ligaturen ratten
Zoals gemeld in Tabel 4 en Fig. 1 (F-1 tot F-4), de effecten van de methanol extract van P. foetida
in een dosis van 150 mg /kg, p.o. en cimetidine (8 mg /kg, p.o.) verhinderde de ontwikkeling van acute maagzweer. Orale toediening van het extract en cimetidine verminderde ulcus index 1,11 ± 0,46 en 1,00 ± 0,23 in vergelijking met ulcus control 7,00 ± 0,63 (p < 0,001), maar acute maagzweer is aanzienlijk toegenomen (p < 0,001) in ulcus controle in vergelijking met de zweer index van de normale controle dieren 0,33 ± 0,11. Vergeleken met de zweer controleratten werden methanol extract van P. foetida Kopen en cimetidine voorbehandeling ratten een significante vermindering maagvolume, vrije vetzuren en totaal zuurgehalte (P < 0,001). Figuur 2 legde uit dat in ulcus controle (- controle) groep Nrf2 werd niet uitgedrukt, terwijl in de normale controle (+ controle), methanol extract van P. foetida Kopen en cimetidine behandelde groep toonde expressie van Nrf2.Table 4 Effect van methanol extract van P. foetida
pylorus-afgebonden ratten
Behandeling
Mean zweer Index (SEM)
% Bescherming
Volume (ml) van de maag secretie
vrije vetzuren (Eq /l /100gm)
totaal zuurgehalte (Eq /l /100gm)
pH
Groep 1 Normal control (Distl. water, 5 ml /kg, po)
0,33 ± 0,11
- 1.52 ± 0.49
71,97 ± 1,04
83,23 ± 0,68
3,65 ± 0,11
Groep 2 Ulcer Controle (Distl Water, 5 ml /kg, po.)
7,00 ± 0.63 *** c
- 7.40 ± 0.61 *** c
88.17 ± 2.14 *** c
130,17 ± 6.41 *** c
2.38 ± 0.19 *** c
Groep 3 Methanol extract (150 mg /kg, po)
1,11 ± 0,46 ***
84
2,20 ± 0,35 ***
50.17 ± 5.12 ***
60.33 ± 3.20 ***
5.42 ± 5.50 ***
Group 4 Cimetidine (8 mg /kg, p. o.)
1.00 ± 0.23 ***
85
1,88 ± 0,22 ***
36.00 ± 5.29 ***
44.00 ± 1.13 ***
7,42 ± 0,15 * **
gegevens werden uitgedrukt als gemiddelde ± standaard fout gemiddelde (SEM), waarbij n = 6 in elke groep. Verschillen werden als significant beschouwd bij P ***
< 0,001 vergeleken controlegroep versus ulcus controlegroep (c) en testgroepen vs maagzweer controlegroep. Voor numerieke resultaten, one-way variantie-analyse (ANOVA) met Tukey-Kramer Multiple Vergelijking na tests werden uitgevoerd met behulp van GraphPad InStat Versie 3 (GraphPad Software)
Fig. 1 waarneming van zweren in pylorus ligaturen ratten; F-1: Normaal controlegroep (+ Control), F-2: Ulcer controlegroep (- Control), F-3: P. foetida
behandelde groep, F-4: Cimetidine behandelde groep
Fig. 2 Nrf2 uitdrukking in de maag van de rat aangetoond door western blot analyse van pylorous afgebonden rat
DPPH * radicalen activiteit
In in-vitro
assay, de IC 50-waarden van referentie-standaard rutine en methanol extract van P. foetida
blad werd berekend 17,97 ug /ml en 43,52 pg /ml voor DPPH * radicalen effect resp.
HPTLC analyse methanol extract van P. foetida
HPTLC toonde de aanwezigheid van β -sitosterol achtige verbinding in methanol extract. De R f waarde van standaard β-sitosterol verbinding was vergelijkbaar (R f 0,38) van een van de verbindingen gevisualiseerd in het chromatogram methanol extract bij 540 nm en als na chemische behandeling (fig. 3) . Fig. 3 HPTLC chromatogram van P. foetida
methanol extract en Discussie standaard β-sitosterol
In onze huidige studie hebben we voornamelijk gericht het blad deel van de plant op basis van de uitkomst van de etno-botanische veld onderzoeksrapport uitgevoerd door de desbetreffende auteur [8], waaruit bleek dat blad is alleen het deel toont voor tweeërlei gebruik als eetbaar evenals medicijn door de inheemse bevolking van Tripura. Ten tweede, uitgebreid overzicht van de literatuur (2004 - 2012) gedekt door de zorg van de auteurs om alleen de etnobotanische onderzoeksrapport (n = 24) in totaal 79,17% van artikelen beweerde het gebruik van blad als ethnomedicine terwijl 12,5% (n
= 3) eiste het gebruik van de hele plant, slechts 8,33% (n
= 2) verklaarde het gebruik van wortel en takje en 4,17% artikel beweerde het gebruik van de stengel, stam schors, antenne deel en fruit afzonderlijk. Dus in de huidige studie, hebben we ons gericht op de Paederia blad als gastrobeschermende agent op dierlijke modellen te evalueren. Onze vorige in vitro
studie [34, 35] ook aangegeven hetzelfde.