gastrobeskyttende mekanisme Paederia foetida
Linn. (Rubiaceae) - en populær spiselig plante brugt af stammeledere samfund af nordøstlige Indien
Abstrakt
Baggrund
Formålet med dette studie er at vurdere gastrobeskyttende aktivitet Paederia foetida
L. blad for mavesår.
Metoder
methanol ekstrakt af P. foetida
L. blade på to forskellige dosisniveauer blev undersøgt for gastrobeskyttende potentiale ved hjælp af Indomethacin-pylorus ligation, alkohol induceret og fordybelse vandstress induceret model i rotter. In vitro
DPPH * radikaler aktivitet og western blot-analyse af mave væv fra pylorus ligatur rotter blev også udført. HPTLC-analyse blev udført for at forstå phyto-farmakologiske forhold.
Resultater Salg Methanol ekstrakt i en dosis på 100 mg /kg og 200 mg /kg legemsvægt viste 72 og 78% ulcus beskyttelse sammenlignet med negativ kontrol henviser referencelægemiddel vist 82% beskyttelse i indomethacin-pylorus ligation model. Endvidere methanolekstrakt viste også beskyttende virkning mod 70% v /v ethanol og stress-induceret gastrisk ulcus-model. Ca. 84% beskyttelse sammenlignet med cimetidin (85%) sås i Western blot-analyse af mave væv fra pylorus ligatur rotter. HPTLC-analyse af methanol ekstrakt af P. foetida
L. bekræftede tilstedeværelsen af β-sitosterol. I DPPH * radikaler aktivitet, IC
50 værdi blev observeret til at være 43,52 mg /ml.
Konklusioner
Disse observationer etablerede traditionelle krav og dermed Paederia foetida
kunne være en potent gastrobeskyttende agent for bruge i fremtiden. Den gastroprotektiv aktivitet kan være medieret af Nrf2 medierede antioxidant og anti sekretoriske effekter.
Nøgleord
Paederia foetida
gastrobeskyttende Antioxidant nordøstlige Indien Baggrund
Paederia foetida
Linn. tilhører familien Rubiaceae (sanskrit, Prasarini) er en omfattende foetid ildelugtende slyngplante. De overjordiske dele af planten indeholder iridoid glycosider nemlig.
Asperuloside, scandoside og paederoside [1]. Forskellige stammesamfund i North East til det sydlige del af Indien bruge planten som en grøntsag, og også bruger til at behandle forskellige mave lidelser som diarré og dysenteri [2-6], mave hævelse, til at rense maven, gastritis, i løs bevægelse, fordøjelsesbesvær, mavesmerter osv [3, 7-18]. Bladet er også som et anti ulcus agent [19]. Forskellige videnskabelige undersøgelse er blevet udført for at undersøge brugen af Paederia i behandlingen af reumatiske kærlighed [20-22], anti-inflammatorisk, hepatobeskyttende, [23-25], tripsyChemolithotripsy [26], fremmer seksuel energi, øge mængden af sæd og kroppens styrke og til at producere en ungdommelig glød [27].
mavesår sygdom (pud) er den mest almindelige gastrointestinal lidelse i klinisk praksis. Pud resultater fra en ubalance mellem defensive og ætsende faktorer, dvs. ætsende effekt på mavens saltsyre og fordøjelsessystemet magt pepsin samt galde versus defensive faktorer, dvs. evne gastrisk og duodenal slimhinde til at modstå disse ætsende /fordøjelsesproblemer beføjelser. Flere bivirkninger nemlig.
Hofte fraktur, akut interstitiel nefritis, akut nyresvigt, knogleskørhed, hepatitis, synsforstyrrelser af de foreliggende medicin for pud er blevet rapporteret [28-30]. Derfor er der et presserende behov for at lede efter et bedre alternativ behandling af pud. Helicobacter pylori
infektion [31, 32] og oxidativ stress [33] er en af de vigtigste årsager til udvikling af PUD. Vores tidligere undersøgelser af biologisk aktivitet af Paederia mod H. pylori
og oxidativt stress viste lovende resultater [34, 35]. På baggrund af disse resultater, vi undersøgt yderligere anti ulcusaktivitet af anlægget på dyremodeller for at vurdere brugen af Paederia i behandlingen af mavesår. Nærværende artikel beskriver vores indsats og resultat.
Metoder
ethnobotanical undersøgelse og Plant materialer samling
At kende betydningen, bryggers og terapeutiske virkning af de vilde spiselige planter i det nordøstlige Indien, en undersøgelse [8] var udført af forfatteren S. Chanda. Agartala, hovedstaden i Tripura blev valgt som en undersøgelse område for ethnobotanical undersøgelse. Undersøgelsen blev foretaget tilfældigt blandt de stammeledere familiemedlemmer, som bor i og omkring Agartala. Denne etno-farmakologiske Undersøgelsen blev gennemført som pr reglerne i indisk Biodiversitet lov og Manipur Biological Diversity Rules, 2008 post No. 15 (1) og 15 (2), hvor der er anført, at "borger i Indien eller corporate, forening eller organisation er registreret i Indien i henhold til § 7 i loven er undtaget fra at søge forudgående /forrige godkendelse med henblik på forskning, bio-undersøgelse og bio-udnyttelse ". De første vigtigste kriterier for at vælge eventuelle konsulenter for den aktuelle undersøgelse var den dybe kendskab til konsulenterne i brugen af planter og for det andet evnen til at tale og forstå de forskellige stammefolk og ikke stammeledere sprog i Tripura. En generel samtale også er blevet gjort med de mange stammefolk medicinmænd (traditionel praktiserende) af det pågældende område. Her medicinmand (lokalt kendt som Kaviraj /Baidya) er en healer, der har erhvervet dyb viden om brugen af planter som medicin fra hans eller hendes forfader og bruge den viden til at behandle folk, når de er syge. For den nuværende undersøgelse blev opnået mundtligt samtykke fra de traditionelle udøvere. Samlet prøve blev betragtet ved henvendelse direkte interviews med individuelle stammeledere familier og medicin mænd. En struktureret unbiased spørgeskema format var parat til at lette resultatet af listen over de planter, som anvendes til behandling af mavelidelser særligt ulcus. Medicin mænd blev spurgt om deres diagnostiske procedure, symptomer og metoden til medicin til behandling mave eller sår på tolvfingertarmen. De mest almindelige symptomer, der er beskrevet af medicinmænd, som yderligere blev karakteriseret som enten sårdannelse i mave eller risikofaktorer til udviklet ulceration er surhed, følelsen af en fuld mave, overdreven mavesmerter, der lindrer efter fødeindtagelse, appetitløshed med mavesmerter, bøvsen med en sur smag etc. Vi har lovet at respektive traditionelle udøvere, at det opnåede traditionel viden og prøve kun vil brugt til vores forskning formål og vil ikke afsløres deres typiske formulering eller hjælpestoffer til nogen. Efter en grundig analyse af den fyldte spørgeskema format identificerede vi, at anlægget Paederia foetida
L. er en af de mest lovende anlæg til behandling af ulceration brug stammens familier. Dette anlæg er også meget ofte rådgivet af de medicin mænd til at behandle en sådan sygdom, da det er spiseligt også. Friske blade af Paederia foetida
Linn. (Rubiaceae) blev indsamlet fra lokale stammeledere marked i Agartala, Tripura og bekræftes af National Institute of Science Kommunikation og Information Resources, New Delhi (Authentication Ref nr NISCAIR /RHMD /Consult /2010-11 /1442/40).
Fremstilling af ekstrakt
blad materiale blev indsamlet fra Agartala, Tripura og fremmede stoffer blev fjernet. Bladet materiale blev tørret i skygge i 10 dage og formales til få naturligvis pulver (ca. 1,5 kg). Det formalede materiale blev ekstraheret med methanol (4,5 L) i et Soxhlet-apparat i 24 timer. Temperaturen blev holdt på højst 70 ° C under hele ekstraktionsproceduren. Methanolekstraktet blev opsamlet, filtreret og inddampet til tørhed på en rotationsfordamper. Den helt tørret methanol ekstrakt blev vaskes igen med destilleret vand, tørres igen og opbevares i køleskab indtil anvendelse. Udbyttet af methanol ekstrakt var 36,21% w /w.
Dyr
Sunde albino rotter (Wistar-stammen) vejer 150-180 g blev indkøbt fra Regional Institute of Medical Sciences (RIMS), Imphal. Etisk clearance for håndtering og dyreforsøg blev opnået fra Institutional Animal Komité (IAEC), IBSD, Imphal med godkendelse nr-IBSD /IAEC /Ext. Inst./PC/4 (1) før begyndelsen eksperimentet virker. Alle undersøgelser blev gennemført i en overensstemmelse med Animal Etisk Udvalg. Rotterne blev akklimatiseret i en uge under laboratorieforhold til at vedtage i et nyt miljø, hvor forsøget blev udført. De blev huset i polypropylen bure og holdt ved 25 ° C ± 2 ° C temperatur og 12 timer mørke /lys-cyklus. De blev fodret med soja bori
, Gram eller standard pellet mad en gang dagligt og vand ad libitum under hele eksperimenterne. Beding materialer i burene blev fornyet dagligt for at sikre hygiejnisk stand og maksimal komfort for dyr.
Bestemmelse af akut toksicitet (ALD50)
Den akutte toksicitet for methanol ekstrakt af P. foetida
blev bestemt i albino mus , opretholdt under standardbetingelser. Dyrene blev fastet natten over før eksperimentet. Akut oral toksicitet - akut toksisk klasse metode (OECD-Guideline nr 423, Annexure -. 2d) vedtaget af CPCSEA blev Indiens regering fulgt i toksicitetsundersøgelser. Mortaliteten blev observeret efter oral indgivelse af 2000 mg /kg legemsvægt testprøver [36]. Almindelige bivirkninger såsom, mild diarré, vægttab og depression af behandlede grupper af blev registreret inden for de 7 dages observation [37] dyr.
Indomethacin-pylorus ligation-induceret ulcus
Albino rotter blev tilfældigt opdelt i fem grupper, bestod hver af 5 dyr. Den normale kontrol (gruppe 1) og ulcus kontrol (gruppe 2) grupper modtog vehikel (destilleret vand; 5 ml /kg, p.o.) under hele forsøget. De behandlingsgrupper fik forskellige doser af methanol ekstrakter af P. foetida Hotel (100 og 200 mg /kg legemsvægt /dag, Gruppe 3 & 4) og ranitidin (10 mg /kg, po /dag; Gruppe 5) for en periode på fire dage. Alle dyr, bortset fra dem i den normale gruppe, blev administreret med indomethacin suspension (25 mg /kg, sc) én gang dagligt i fire dage som ulcerogen middel, 30 min efter administration af køretøjet eller test eller standard medicin.
kirurgisk procedure
på 4 th dag 30 minutter efter behandlingen blev kirurgisk procedure gjort [38]. Rotterne blev fastet i 24 timer før start af kirurgi. De blev forudsat fri adgang til vand i denne periode. Hver rotte blev bedøvet med ether, og abdomen blev åbnet via en midtlinie incision. Pylorus placeret og ligeret tæt med silkesutur. Både muskulære lag og huden blev derefter syet med hjælp af sutur og ligatur separat. Fire timer efter pylorus-ligering blev dyrene aflivet ved at give overdosering ether. Mave alle ofrede rotter blev undersøgt under mikroskop. De gastriske skader i glandulær områder blev placeret i maveslimhinden som aflange sorte-røde linjer parallelt med den lange akse maver.
Beregning af mavesår indeks [39]
\\ (\\ mathrm {mavesår} \\ kern0. 5em \\ mathrm {index} \\ kern0.5em = \\ kern0.5em \\ venstre (\\ mathrm {U} \\ mathrm {N} + \\ kern0.5em \\ mathrm {US} \\ kern0.5em + \\ kern0.5em \\ mathrm { UP} \\ højre) \\ kern0.5em \\ tider \\ kern0.5em {10} ^ {- 1}; \\) Hvis FN = Gennemsnit af antal sår per dyr
US = Gennemsnit af sværhedsgrad score, UP = Procentdel af . dyr med sår
procentdel af mavesår beskyttelse blev beregnet ved hjælp af følgende formel: - $$ \\% \\ kern0.75em af \\ sår \\ Protection = \\ frac {\\ mathrm {Kontrol} \\ \\ mathrm {betyde} \\ \\ mathrm {mavesår} \\ \\ mathrm {index} - \\ mathrm {test} \\ \\ mathrm {betyde} \\ \\ mathrm {mavesår} \\ \\ mathrm {index}} {\\ mathrm {Kontrol} \\ \\ mathrm {betyde} \\ \\ mathrm {mavesår} \\ \\ mathrm {index}} \\ gange 100 $$ Bestemmelse af gastrisk volumener, pH og syre udgange
den maver af rotter blev skåret ud under ether anæstesi præcis efter 4 timer af pylorus ligation og maveindholdet var indsamlet. Maverne blev vasket med lunkent sterilt vand. Både vask og gastrisk indhold blev opsamlet og centrifugeret sammen ved 4000 rpm i 10 min. Mængderne af alle supernatanterne af maveindholdet måltes og andre gastrisk sekretion undersøgelser, ligesom pH, syreproduktionen, surhed, ulcus-indeks /ulcus score er også blevet gjort [40, 41]. PH af alle supernatanter blev målt, og deres syrer blev bestemt ved titrering til pH 7 med 0,1 N NaOH-opløsning
De sure output blev beregnet ved følgende ligning:. $$ \\ Mathrm {Acid} \\ \\ mathrm {o} \\ mathrm {utput} \\ \\ venstre (\\ upmu \\ mathrm {E} \\ mathrm {q} /\\ mathrm {t} \\ højre) = \\ mathrm {Acid} \\ mathrm {hed} \\ \\ venstre (\\ mathrm {mEq} /\\ mathrm {l} \\ højre) \\ tider \\ mathrm {V} \\ mathrm {o} \\ mathrm {l}. \\ \\ mathrm {o} \\ mathrm {f} \\ \\ mathrm {gastrisk} \\ \\ mathrm {juice} \\ kern0 .75em \\ venstre (\\ mathrm {ml} \\ højre) /4\\kern0.5em \\ venstre (\\ mathrm {t} \\ højre) $$ $$ Syreindhold = \\ frac {Titre \\ værdi \\ af \\ NaOH \\ X \\ Actual \\ normalitet \\ af \\ NaOH} {Antaget \\ normalitet \\ af \\ NaOH} \\ gange 100 $$ Alkohol-induceret mavesår
dyrene blev inddelt i fem grupper, hver bestående af fem rotter. Den ulceration blev induceret ved administration 70% ethanol (10 ml /kg, p.o.). Alle dyr blev fastet i 36 timer før administration af alkohol. Gruppe 1 modtagelse destilleret vand (5 ml /kg, p.o.). Gruppe 2 modtog 70% ethanol for at fremkalde mavesår og 5 ml destilleret vand /kg p.o. som behandling, Gruppe 3 & 4 modtog methanol ekstrakter af P. foetida
(100 og 200 mg /kg, p.o.) en time før indgivelse af 70% ethanol som enkeltdosis. Sukralfat blev administreret til femte gruppe som referencestandard stof på dose100mg /kg, p.o. en time før indgivelse af ethanol. De blev holdt i særligt konstruerede bure for at forhindre coprophagia under og efter forsøget. Dyrene blev bedøvet 4 timer senere med bedøvelsesmiddel ether og maven blev indridset langs den største krumning og ulcus score blev registreret [41]. Såret score for den normale mave, rød farve, spot mavesår, hæmoragisk streak, mavesår og perforation er 0, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 og 3,0 hhv.
Nedsænkning Vand stress induceret ulcus (WISIU)
Dyrene blev inddelt i fem grupper, hver gruppe bestod af fem rotter. Gruppe 1 (normal kontrol) modtog destilleret vand (5 ml /kg, p.o.) hvor som gruppe 2 behandles som ulcus kontrol. Gruppe 3 og 4 modtog methanolekstrakter ved dosen 100 & 200 mg /kg legemsvægt henholdsvis og gruppe 5 fik lansoprazol (8 mg /kg, p.o.). Efter behandling blev dyrene lov til at svømme i en glascylinder med vand (25 ° C) i 3 timer. Dyr blev dræbt af høj dosis af bedøvelsesmiddel ether og ulcus score blev registreret [42].
Western blot-analyse af in vivo mavevæv fra pylorus ligaturer rotter
Dyr blev inddelt i fire grupper, der hver indeholder seks og blev udsultet i 24 timer før eksperimenteren. Koncernen1 behandles som normal kontrol (+ kontrol) og administreres vand oralt. Dosis var 5 ml /kg legemsvægt Gruppe 2 behandles som et sår kontrol (- kontrol). Gruppe 3 og 4 modtog P. foetida
methanol ekstrakt (150 mg /kg legemsvægt, p.o.) og cimeditine henholdsvis (8 mg /kg, legemsvægt p.o.). Efter 30 minutters behandling pylorus placeret og ligeret tæt med silkesutur som beskrevet ovenfor i indomethacin-induceret ulcus-model. Maverne af rotter blev fjernet og åbnet langs den store krumning og derefter vasket med iskold phosphatpufret løsninger. Antallet af enten erosioner eller sår blev bestemt under forstørrelsesglas og gastrisk sekretion undersøgelser er blevet udført [40, 41]. Salg Homogenaterne opnået fra ridset maveslimhinden blev centrifugeret ved 4000 rpm, 4 ° C i 30 minutter (5430R, Eppendorf). Supernatanterne indeholdende 1: 1000 proteaseinhibitorcocktail (P8340, Sigma-Aldrich) blev holdt i -80 ° C indtil anvendelse. Proteinerne i vævshomogenater blev separeret ved SDS-PAGE og overført til polyvinylidendifluorid (PVDF) membraner (Merck- Millipore) ved hjælp af trans-blot turboenhed (BIO RAD). De overførte proteiner blev inkuberet med primære antistoffer (anti-Nr2f2; Ab1) produceret i kanin, vasket og inkuberet med biotin konjugerede sekundære antistoffer. Efter rewashing det blev visualiseret ved chromogen metode i SNAP-ID instrument (Merck- Millipore).
Statistisk analyse
Data blev udtrykt som gennemsnit ± standardfejl Mean (SEM). Forskelle blev betragtet som signifikante ved *** P
< 0,001 eller ** P
< 0.01 eller * P
< 0,05 sammenlignet testgruppe vs kontrol (-ve) gruppe og ααα P
< 0,001 eller αα P
< 0.01 eller α P
< 0,05 sammenlignet positiv kontrol vs negativ kontrol. For numeriske resultater blev envejs variansanalyse (ANOVA) med Dunnett-test (Positiv kontrol vs negativ kontrol og alle forsøgsgruppe versus negativ kontrol) udført under anvendelse af GraphPad InStat Version 3 (GraphPad Software).
DPPH * radikaler aktivitet
Selvom antioxidant aktivitet af de friske blade af Paederia også er blevet gjort af forfatteren [34], men det samme blev også gentaget med den tørrede prøve (methanolisk ekstrakt af tørrede blade), der anvendes for den aktuelle dyreforsøg. Den fri radikal-fjernende aktivitet af methanol ekstrakt af Paederia blev målt på hydrogen donere eller radikal-fjernende evne ved hjælp af stabile radikal DPPH. En opløsning af 0,1 mM α, blev α-diphenyl-β-picryl-hydrazyl (DPPH) (Himedia, Mumbai) i ethanol fremstillet og 1,0 ml af denne opløsning blev tilsat til 3,0 ml af ekstraktionsopløsningen i vand i forskellige koncentrationer (10 -100 pg /ml). Tredive minutter senere blev absorbansen målt ved 517 nm [43]. Den nedre absorbans af reaktionsblandingen angiver højere fri radikal-fjernende aktivitet. Rutin (Ozone, Mumbai) blev anvendt som en standard lægemiddel. Resultaterne blev udtrykt som IC 50 eller inhiberende koncentration 50 værdi, dvs. koncentrationen af prøver udviste 50% inhibering af DPPH * radikaler.
HPTLC-analyse af methanol ekstrakt af P. foetida
methanol ekstrakt af P. foetida
blev vurderet ved anvendelse af højtydende tyndtlagskromatografi (HPTLC) systemet (Camag linomat 5, Schweiz) til kvalitativ vurdering af β-
sitosterol ved 540 nm. Det kommercielt tilgængelige β-
sitosterol (Sigma-Aldrich, Indien) og methanol blad ekstrakt af P. foetida
blev kørt samtidigt ved anvendelse mobile fase (toluen: ethylacetat: myresyre i forholdet 8: 2: 0,05 v /v /v) og anisaldehyd svovlsyre anvendes som visualisere reagens.
Resultater
Bestemmelse af akut toksicitet (ALD50)
Ved akut toksicitet, er methanol ekstrakt af P. foetida
ikke nogen dødelighed ved dosisniveauet på 2000 mg /kg. Derfor 2000 mg /kg dosis blev betragtet som ALD 50 afbrød dosis under GHS 5 (sikker dosis), som pr globale harmoniserede klassifikationssystem (GHS) for kemiske stoffer og blandinger, der er beskrevet i OECD guideline 423 (Annexure 2b & 3b). Almindelige bivirkninger såsom mild diarré, vægttab og depression i den behandlede gruppe af dyr blev ikke observeret inden for de 7 dages observation. I den foreliggende undersøgelse kun 100 mg /kg (lav) og 150 mg /kg (høj) eller 200 mg /kg (høj) kropsvægt doser blev valgt til in vivo gastrobeskyttende undersøgelse og 10-100 pg /ml doser til ex -vivo Salg og in-vitro
undersøgelser. Fordi, ≥200 mg /kg legemsvægt af ekstrakter til in vivo studier og ≥200 mg /ml ekstrakterne i in vitro
sandsynligvis vil være kunstig trods af at give reproducerbare virkninger. Endnu værre, så høje koncentrationer kan udløse ikke-fysiologiske virkninger, der medfører artefakter [37].
Indomethacin-pylorus ligation model
I denne model administration af methanol ekstrakt af to forskellige doser (100 og 200 mg /kg) inhiberede stigningen i gastrisk sekretion volumen, syreproduktionen i en dosisafhængig måde henviser der er en stigning i pH. Virkningen var yderst signifikant (p < 0,001) for begge doserne. Den mavesår indeks blev sænket. Den viste ulcus beskyttelse, 72 og 78% ved en dosis på 100 og 200 mg /kg, hvor ranitidin viste 82% af beskyttelse ulcus (Tabel 1) .table 1 Virkning af methanol ekstrakt på gastrisk sekretion volumen, pH, syre- output og sår-indeks mod indomethacin-pylorus ligation induceret mavesår hos rotter
Behandling
gastrisk sekretion (Middelværdi ± SEM)
ulcus-indeks (mm) Middelværdi ± SEM
% af mavesår beskyttelse
Volume (ml)
pH
Acid output (Eq /100 g /4 h)
Gruppe 1 (5 ml destilleret vand /kg)
2,114 ± 0,13
2,80 ± 0,01
2,80 ± 0,01
2,850 ± 0,07 -
Gruppe 2 Indomethacin (25 mg /kg)
9,280 ± 0,09 ααα
1,07 ± 0.01ααα
24,47 ± 2.28ααα
39,12 ± 0.81ααα -
Group3 MeOH PF (100 mg /kg)
4,296 ± 0,11 ***
2,51 ± 0,02 ***
10.99 ± 0,11 ***
10.57 ± 0.15 ***
72,98
Gruppe 4 MeOH PF (200 mg /kg)
2,670 ± 0,21 ***
2.71 ± 0,71 ***
7,62 ± 0,14 ***
8.38 ± 0.05 ***
78,58
gruppe 5 Ranitidine (10 mg /kg)
2,426 ± 0,52 ** *
2,89 ± 0,03 ***
5,30 ± 0,31 ***
6,69 ± 0,06 ***
82,89
MeOH PF = methanol ekstrakt af Paederia foetida
; n = 5; Data = Middelværdi ± SEM; ααα P
< 0,001 (G1 Vs G2); *** P
< 0,001, (Gruppe 2 Vs Gruppe 3, 4 & 5)
alkohol-induceret mavesår model
Oral administration af ethanol inducerer mavesår. Forbehandling af sådanne rotter med forskellige doser af ekstrakterne udviste yderst signifikant beskyttelse til ulceration. 59 og 72% ulcus beskyttelse blev set i dosis på 100 og 200 mg /kg, hvorimod standard drug sucralfat viste 81% af beskyttelse ulcus (tabel 2) .table 2 Virkning af methanol ekstrakt af P. foetida
på alkohol-induceret mavesår i rotter
Behandling
mavesår score
% af mavesår beskyttelse
Gruppe 1 (5 ml destilleret vand /kg, po)
2,0 ± 0,12 -
Gruppe 2 (5 ml destilleret vand + 70% ethanol, 10 ml /kg, po)
3,70 ± 0,49 α -
Gruppe 3 MeOH PF (100 mg /kg)
1,40 ± 0,29 *
59,45
Gruppe 4 MeOH PF (200 mg /kg)
1,0 ± 0,31 *
72,97
Gruppe 5 sucralfat (100 mg /kg, po)
0,70 ± 0,12 *
81,08
MeOH PF = methanolisk ekstrakt af Paederia foetida
; n = 5; Data = Middelværdi ± SEM; α P
< 0,05 (koncernen1 Vs Group2); * P
< 0,05, (Gruppe 2 Vs Gruppe 3, 4 & 5)
nedsænkning Vand stress induceret ulcus (WISIU) model
methanol ekstrakt (100 og 200 mg /kg) dosisafhængig viste stærkt signifikant (p < 0,001) beskyttelse ulcus (62 og 67%) til maveslimhinden af rotter mod WISIU hvor som lansoprazol viste 70% beskyttelse (tabel 3) .table 3 Effekt af methanol ekstrakt af P. foetida
på nedsænkning i vand stress induceret ulcus hos rotter
Behandling
mavesår score
% af mavesår beskyttelse
Gruppe 1 (5 ml destilleret vand /kg, po)
2,0 ± 0.12 -
Gruppe 2 (mavesår kontrol)
4,00 ± 0,22 -
Gruppe 3 (MeOH PF 100 mg /kg, po)
1,50 ± 0,27 ***
62.50
Gruppe 4 (MeOH PF 200 mg /kg, po)
1,30 ± 0,12 ***
67.50
Gruppe 5 (Lansoprozole 8 mg /kg, po)
1,20 ± 0,26 ***
70.00
MeOH PF = methanolisk ekstrakt af P. foetida
; n = 5; Data = Middelværdi ± SEM; *** P
< 0,001, (Gruppe 2 Vs Gruppe 3, 4 & 5)
Western blot-analyse af mave væv fra pylorus ligatur rotter
Som rapporteret i tabel 4 og fig. 1 (F-1 til F-4), virkningerne af methanol blad ekstrakt af P. foetida
i en dosis på 150 mg /kg, p.o. og cimetidin (8 mg /kg, p.o.) forhindrede udviklingen af akut mavesår. Oral administration af ekstrakten og cimetidin faldt sår indeks til 1,11 ± 0,46 og 1,00 ± 0,23 i sammenligning med sår kontrol 7,00 ± 0,63 (p < 0,001), men akut mavesår blev udviklet signifikant (p < 0,001) i sår kontrol i forhold til såret indeks af normale kontroldyr 0,33 ± 0,11. Sammenlignet med rotter såret kontrol blev methanol ekstrakt af P. foetida
og cimetidin forbehandling rotter vist en signifikant reduktion i gastrisk volumen, syretal og totalt syreindhold (P < 0,001). Figur 2 forklarede, at i mavesår kontrol (- kontrol) gruppe Nrf2 ikke blev udtrykt, mens der i den normale kontrol (+ kontrol), methanol ekstrakt af P. foetida
og cimetidin behandlede gruppe viste udtryk for Nrf2.Table 4 Effekt af methanol ekstrakt af P. foetida
på pylorus-ligerede rotter
Behandling
Mean sår Index (SEM)
% Beskyttelse
Volumen (ml) af gastrisk sekretion Kanal Gratis Syreindhold (Eq /l /100gm)
totalt syreindhold (Eq /l /100gm)
pH
Gruppe 1 Normal kontrol (Distl. Vand, 5 ml /kg, po)
0,33 ± 0,11 -
1,52 ± 0,49
71,97 ± 1,04
83,23 ± 0,68
3,65 ± 0,11
Gruppe 2 mavesår Kontrol (Distl Vand, 5 ml /kg, po.)
7,00 ± 0,63 *** c -
7,40 ± 0,61 *** c
88,17 ± 2,14 *** c
130,17 ± 6,41 *** c
2,38 ± 0,19 *** c
Gruppe 3 Methanol ekstrakt (150 mg /kg, po)
1,11 ± 0,46 ***
84
2,20 ± 0,35 ***
50,17 ± 5.12 ***
60,33 ± 3,20 ***
5,42 ± 5,50 ***
Gruppe 4 Cimetidin (8 mg /kg, s. o.)
1,00 ± 0,23 ***
85
1,88 ± 0,22 ***
36.00 ± 5.29 ***
44.00 ± 1.13 ***
7,42 ± 0,15 * ** Salg data blev udtrykt som gennemsnit ± standardfejl Mean (SEM), hvor n = 6 i hver gruppe. Forskelle blev betragtet som signifikante ved P ***
< 0,001 sammenlignet kontrolgruppe vs ulcus kontrolgruppen (c) og testgrupper vs ulcus kontrolgruppen. For numeriske resultater, envejs variansanalyse (ANOVA) med Tukey-Kramer multiple sammenligningstest post-tests blev udført ved anvendelse af GraphPad InStat Version 3 (GraphPad Software)
Fig. 1 Observation af sår i pylorus ligatur rotter; F-1: Normal kontrolgruppe (+ Control), F-2: ulcus kontrolgruppe (- Control), F-3: P. foetida
behandlede gruppe, F-4: Cimetidin behandlede gruppe
Fig. 2 Nrf2 ekspression i rottemave påvist ved Western blot-analyse af pylorous ligatured rotte
DPPH * radikaler aktivitet Salg In in vitro
assay IC 50 værdier af referencestandard rutin og methanol ekstrakt af P. foetida
blad blev beregnet 17,97 pg /ml og 43,52 ug /ml for DPPH * radikaler virkning hhv.
HPTLC-analyse af methanol ekstrakt af P. foetida
HPTLC viste tilstedeværelsen af β sitosterol lignende forbindelse i methanol-ekstrakt. R f værdien af standard β-sitosterol forbindelse var ens (R f 0,38) med en af forbindelserne visualiseret i kromatogrammet af methanol ekstrakt ved 540 nm og såvel som efter kemisk behandling (fig. 3) . Fig. 3 HPTLC kromatogram af P. foetida
methanol ekstrakt og standard β-sitosterol
Diskussion
I vores aktuelle undersøgelse, vi primært fokuseret bladet del af anlægget på grundlag af resultatet af etno-botaniske felt rapport undersøgelse foretaget af den tilsvarende forfatter [8], som afslørede, at bladet er kun den del, der viser dobbelt anvendelse som spiselige samt medicin ved de stammefolk i Tripura. For det andet omfattende gennemgang af litteraturen (2004 - 2012) omfattet af forfatternes bekymring alene ethnobotanical undersøgelse rapport (n = 24) i alt 79,17% af artikler hævdede brugen af bladet som ethnomedicine mens 12,5% (n
= 3) hævdede brug af hele planten, kun 8,33% (n
= 2) erklærede brugen af rod og kvist og 4,17% artiklen hævdede brugen af stilken, stamceller bark, antennen del og frugt individuelt. Så i den foreliggende undersøgelse, vi fokuseret på at evaluere Paederia blad som gastrobeskyttende agent på dyremodeller. Vores tidligere in vitro
undersøgelse [34, 35] også angivet den samme.