Verännert Ausdrock vun enger putative Grënner Zell Bewaacher DCAMKL1 an der Grenzwäerter gastric mucosa an Erhuelung, metaplasia an dysplasia

verännert Ausdrock vun enger putative Grënner Zell Bewaacher DCAMKL1 an der Grenzwäerter gastric mucosa an Erhuelung, metaplasia an dysplasia VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background
Doublecortin an Kalzium /calmodulin-ofhängeg FAQ kinase-gären-1 (DCAMKL1) ass fir Grënner Zellen am gastrointestinal mucosa engem Kandidat Bissau. Antike Zellen am gastric mucosa sinn aus fréieren Zellen ofgeleet, mä dëse Prozess kann der Verletzung verännert ginn. Dofir, mir DCAMKL1 Ausdrock ënner agebousst Konditiounen lant. VerfÜgung Method VerfÜgung An immunohistochemical Analyse gouf zu Grenzwäerter Mo. mam Fouss opkomm ass iwwerflächlech, chronescher oppent, intestinal metaplasia an dysplasia gesuergt. VerfÜgung Resultater VerfÜgung DCAMKL1 war exklusiv ausgedréckt an Teenie quiescent Zellen vun de Moien vun normal fundic Glands, wou putative Grënner Zelle Gedanken ze wunnen. DCAMKL1-positiv Zellen an proliferating Zellen datts an der lumen der iwwerflächlech blesséiert a während der regenerative Prozess du-wossten, haaptsächlech an der iwwerflächlech mucosa. An der marginalen mucosa ronderëm d'aktiv oppent, parietal a Chef Zellen manner, war foveolar hyperplasia evident, an trefoil Faktor Famill 2 (TFF2) /spasmolytic polypeptide-ausdrécken metaplasia (SPEM) Gedenkminutt am drüs huel. DCAMKL1 Zellen an d'Déift mucosa du-Gedenkminutt Hardcore mat SPEM an proliferating Zellen. An der Heelung oppent, erweidert d'TFF2 Zell Bevëlkerung a war bis Chef Zellen ze redifferentiate, iwwerdeems proliferating Zellen an DCAMKL1 Zellen iwwer an ënner der TFF2 Zellen wossten verkënnegt ze förderen. SPEM wossten an PCNA Zellen am intestinalized mucosa fräi, a DCAMKL1 war an der direkter Noperschaft vun der PCNA Zellen an d'Déift mucosa ausgedréckt. DCAMKL1, PCNA an TFF2 goufen a verschiddene dysplastic Zellen ausgedréckt dilated Glands bei SPEM Doropshin. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung D'ultrastructural Optrëtt vun DCAMKL1-positiv Zellen an den Ausdrock Musteren vun DCAMKL1 zu normal an agebousst Staaten weg datt d'Zellen zu engem gehéieren Grënner Zell Populatioun. DCAMKL1 Ausdrock ass enk mat TFF2 /SPEM Zellen der Verletzung assoziéiert. DCAMKL1 Zellen rëm no proliferating, hyperplastic, metaplastic an dysplastic Zellen, an de Grënner Zone Verännerungen no der agebousst Ëmstänn. VerfÜgung Background VerfÜgung D'Maus a mënschlech gastric Unitéit weist monoclonal Konversioun, d'Präsenz vun multipotent Stammzellen besot [ ,,,0],1, 2]. Elektronen microscopic autoradiography zu Maus hun implizit datt granule-gratis Zellen vun de Moien Akt als multipotent Stammzellen [3]. D'dat a Migratioun Prozesser vun Zell lineages kann duerch Verletzung verännert ginn. De Grënner Zell Zone am Moien ass vun intraluminal Ethanol, Net-steroidal anti-demagogesch Drogen oder Helicobacter pylori VerfÜgung (H. pylori VerfÜgung) liicht beschiedegt. Chronescher inflammation vun de Mo kann als siichtbarst Auswierkunge vun Otemschwieregkeeten-spezifesch Grënner Zell Fouss oder Verloscht fir atrophy a spezialiséiert Zell Verloscht Féierung. Allerdéngs sinn d'Behuele vun de Grënner Zellen der Fouss oder chronesch mucosal Schued an de Mechanismus vun enger Restauratioun vun deenen Zellen während mucosal Erhuelung net gutt verstanen hunn. VerfÜgung D'Populatioun Grënner Zell ass wichteg an Ënnerhalt an Erhuelung vun der gastric epithelium, mä Flegeversécherung gelieft Grënner Zelle Risiko vun Projet'en déi zu Kriibs huet [4] aktueller. Neoplasia kann bewosst metaplasia wéinst chronescher inflammation ewechzehuelen verfollegen. Mä genee Analys vun der Roll a Verfall vun de Grënner Zellen an der Haaptrei vun gastritis-metaplasia-dysplasia-Kriibs huet net schonn gesuergt, haaptsächlech wéinst dem Manktem vun diskret Grënner Zell lues an de Moo. VerfÜgung Musashi-1, enger Bewaacher vun ale Zellen an der Maus kleng Daarm, ass net an putative Grënner Zellen ausgedréckt, mee ass am parietal Zellen an d'Grenzwäerter fundic Moien [5] fonnt. D'villin-1 Promoteur /enhancer ofgesprengt ass eng Bissau vum méiglech gastric Grënner Zellen am Moien vun der pyloric Glands [6]. A antike Étude uginn, datt d'intestinal Grënner Zell Bewaacher Lgr5 ass op der Basis vun mèi fundic an pyloric Glands am neonatal Mo. ausgedréckt, hierkommen Ausdrock vun Erwuessenen, mèi un der Basis vun der pyloric Glands limitéiert war [7]. Also, et gi keng definitiv ze lues fir progenitors am Erwuessenen fundic Glands. VerfÜgung DCAMKL1 ass eent vun de Produkter vum Gene Ontogeny-beräichert gët am Verglach mat der Maus gastric a kleng intestinal Grënner konsultéieren fonnt [8]. Immunohistochemical Analyse engem DCAMKL1 antibody benotzt réischt eenzel Zell staining zu intestinal Krypta Sektiounen am oder ronderëm Positioun 4 a gastric Moien Zellen [8]. Nom éischte Rapport, spezifesch Lokalisatioun vun Zellen zu engem Desaccord gratis Sproochenunterricht DCAMKL1-ausdrécken war an der klenger Daarm vu Mais [9, 10] an an de Colon vu Mais a Mënschen [11, 12] hierkommen DCAMKL1 mat Musashi coexpressed huet dës -1 zu parietal Zellen am Mo vun Mais [13]. VerfÜgung déi éischt Zil vun dëser Etude war fir festzestellen, ob DCAMKL1 engem Bewaacher fir Grënner Zellen an d'Grenzwäerter Mo ass. Déi zweet Zil war den séchert a raimlech Musteren vun Opkommen vun Zellen ausdrécken DCAMKL1 ënner verschiddene gastric agebousst Konditiounen speziell ze entschlësselen. VerfÜgung Method VerfÜgung Déieren Virbereedunge VerfÜgung All Déier Ëmwelt- vun der Keio University Déieren Research Comité ofgeseent goufen. Männlech Wistar deër ronn 200 g Persoun sech fir 24 Stonnen mat gratis Zougang zu Waasser fasted. Ze produzéieren Fouss iwwerflächlech Verletzungen an d'fundic mucosa, absolute Ethanol (1 ml) war an de Mo vun gastric intubation hëllt. chronescher déif ulcers, 20% acetic Seier (50 μl) war an der fundic submucosa vun der anterior Mauer ze produzéieren heijen engem microsyringe benotzt. D'deër goufen 3 Deeg euthanized an 1, 2 an 3 Wochen no der acetic Seier Sprëtz. VerfÜgung der Method fir intestinal metaplasia am Grenzwäerter gastric mucosa Pinguin ass soss Débatte [14, 15]. Kuerz, scho deër zwee X-Ray Dosis vun 10 Gy all an huet 6 Méint no irradiation euthanized. D'Method fir dysplasia am Grenzwäerter gastric mucosa Pinguin ass och soss beschriwwe ginn [14]. Kuerz, 50 μg /ml vun N-Duerch-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) (Aldrich chemesche Co., Milwaukee, allem) zu deër gouf ad libitum VerfÜgung fir 4 Méint. VerfÜgung Antibodies
Kanengchen anti-DCAMKL1 immunoglobulin (IG) G (Abcam, Cambridge, UK; Finale dilution 1: 100), Maus anti-proliferating Zell nuklear antigen (PCNA) IgG (DAKO, Carpinteria, CA; prett ze benotzen), Kanéngchen anti -PCNA IgG (Abcam; 1: 200), Maus anti-H + /K + - adenosine triphosphatase (ATPase) α subunit IgG (Research kinnt Galaxy Flandern, NJ; 1: 200), Schof anti -pepsinogen II IgG (USA biologesch, Swampscott, MA; 1: 100), Maus anti-MUC6 IgM (Kanto Kagaku, Tokyo; 1: 100), Maus anti-MUC5AC IgG (Abcam; 1: 100), Maus anti- TFF2 IgM (Abcam; 1: 200), guinea Fierkel anti-histidine decarboxylase (HDC) IgG (Arp, Belmont, MA; 1: 100), Geess anti-ghrelin IgG (Santa Cruz Déi, Santa Cruz, CA; 1: 100 ), a Maus anti-somatostatin IgG (Biomeda, Foster City, CA; 1:25) als alleréischt antibodies benotzt goufen VerfÜgung Histological Analys VerfÜgung De Mo Otemschwieregkeeten Iwwernuechtung zu 10% neutral-gefiermt formalin fest war, an duerno. zu paraffin Ënnerbewosstsinn an sectioned (4 μm). Hëllef Standard Techniken; de Rubriken huet mat hematoxylin an eosin (E H &) geschriwwen. Periodesch Seier-Schiff (Pas) -Alcian Blue staining Leeschtung war Panz Zell lineages z'entdecken. VerfÜgung Fir immunohistochemical Analyse, paraffin-Ënnerbewosstsinn Rubriken huet mat engem passenden retrieval Prozedur fir all antigen deparaffinized an pretreated. Sektiounen waren an 0.3% H 2O 2 zu methanol fir 10 Minutten incubated endogenous peroxidase zu inactivate an duerno mat phosphate-gefiermt Salins (PBS) mat 0,1% Tween 20 (PBST) gewäsch. No incubation mat erauszesichen Léisung (Block Ace, Dainippon Seiyaku, Tokyo, Japan) fir 10 Minutten huet d'Rubriken mat enger Primärschoul antibody fir 1 Stonn bei Raumtemperatur incubated. Duerno, war all Schrëtt vun wäschen 3 mol mat PBST fir 3 Minutten duerno. D'Sektiounen sech mat HP-conjugated IgG oder IgM fir 40 Minutten incubated. D'Bezeechnung Zellen brong Faarwen sech mat 3,3'-diaminobenzidine hydrochloride (botzt) mat engem botzt reagent Formatioun (DAKO), an dann mat Mayer d'hematoxylin counterstained. VerfÜgung Fir double-Faarf immunostaining, eng indirekt immunoalkaline phosphatase Method gouf benotzt dëse indirekt immunoperoxidase Prozedur uewen beschriwwen. No Reaktioun mat botzt, huet de Rubriken fir 1 Stonn mat enger zweeter Primärschoul antibody incubated, vun incubation mat ALP-conjugated IgG oder IgM fir 40 Minutten duerno. D'Bezeechnung Zellen sech Kierchefënster blo mat enger ALP Realitéiten Kit III (Vecteure Blue, Vecteure Laboratoiren, Burlingame, CA). VerfÜgung Fir antigen retrieval vun pepsinogen II an MUC6, proteinase K (DAKO) war fir topically dem deparaffinized Rubriken applizéiert 6 Minutten. Fir antigen retrieval vun PCNA (Maus IgG), de Rubriken huet an destilléiert Waasser an eng autoclave fir 10 Minutten gehëtzt. Fir antigen retrieval vun MUC5AC, huet de Rubriken fir 10 Minutten an citrate gefiermt an eng autoclave gehëtzt. Nee antigen retrieval Prozedur war fir DCAMKL1, H benotzt + /K + -. ATPase, PCNA (Kanéngchen IgG), TFF2, HDC, ghrelin oder somatostatin staining VerfÜgung Buteur vun DCAMKL1 BTS an PCNA BTS
am datt double-Faarf immunostaining benotzt DCAMKL1 an PCNA mécht sech d'Zuel vun immunostained Zellen ze bestëmmen analyséiert. Sektiounen sech aus 5 deër benotzt, an 10 Meter-konzentréiert gastric Unitéiten sech an all Kapitel analyséiert. VerfÜgung Elektronen Microscopy VerfÜgung Pre-embedding immunoperoxidase Elektronen microscopy als Konsequenz war duerchgefouert. Kleng Stécker vun frësch uplanzen aus der gastric Corpus vun onbehandelt deër sech fir 24 Stonnen op 4% paraformaldehyde fix, gefollegt vun zéien an 0,1% glutaraldehyde a 4% paraformaldehyde fir 1 Stonn. Cryostat Rubriken (6 μm) sech bereet a fir 48 Stonnen mat anti-DCAMKL1 antibody incubated, gefollegt vun incubation mat HP-conjugated anti-Kanéngchen IgG fir 24 Stonnen. D'Sektiounen sech dann fir 5 Minutten mat 0,5% glutaraldehyde fix, geklot mat botzt, post-fix mat 2% Osmium tetroxide, léif duerch eng graded Ethanol Serie, an zu epoxy resin Ënnerbewosstsinn. Ultrathin Rubriken huet mat enger ultramicrotome Géigewier an uranyl acetate Léisung a Féierung citrate Léisung geschriwwen. D'uplanzen sech mat engem Transmissioun Elektronen microscope (Jem-1200EX, JEOL, Tokyo, Japan) iwwerpréift. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Normal Fundic Gland VerfÜgung DCAMKL1-ausdrécken Zellen sech am ieweschten Drëttel vun normal fundic Glands verdeelt, an enger Regioun bezeechent wéi de Moien (Dorënner 1A). An Elektronen microscopy, goufen DCAMKL1-Zellen och am Moien (Dorënner 1B, e) fonnt. D'DCAMKL1 Zell ass méi kleng wéi de parietal Zell, déi zu Mitochondrie räich war, a gefeelt secretory granules am endocrine Zell gesinn (Dorënner 1B, b). DCAMKL1 immunoreactivity war diffusely an der Zytoplasma, wou eng héich nucleocytoplasmic Verhältnis (Dorënner 1B, c) fonnt. DCAMKL1 Zellen sech presentéieren an epithelial Zell linings, well d'Zellen desmosomes vun der Kräizung mat bascht epithelial Zellen (Dorënner 1B, d) hat. D'DCAMKL1 Zellen haten en Teenie Optrëtter mat puer Mitochondrie, vesicles oder secretory granules (Dorënner 1B, c an 1B, d). Figur 1 Distribution an ultrastructure vun Zellen zu normal Grenzwäerter Mo. DCAMKL1-ausdrécken. (A) A Liicht micrograph, weist Lag vun DCAMKL1 Zellen am fundic mucosa. Skala: 100 μm. D'inset weist e Paschtouer Vue vun der duergestallt Beräich vun A. Skala: 10 μm. (B) Transmissioun Elektronen micrographs. (En, c) Ultrathin Sektiounen ouni counterstaining. (B, d) Ultrathin Sektiounen mat counterstaining. (En) DCAMKL1 Zellen am fundic of. Skala: 2 μm, Vergréisserung × 5600. (B) D'DCAMKL1 Zell (D) war méi kleng wéi de parietal Zell (P), déi zu Mitochondrie räich war, a gefeelt der secretory granules an der endocrine Zell gesinn (E). Skala: 2 μm, Vergréisserung × 7000. (C) DCAMKL1 staining war cytoplasmic Kannerbetreiung. Skala: 1 μm, Vergréisserung × 14400. (D) Arrowheads weg desmosomes. De wäisse Feil weist DCAMKL1 immunoreactivity. Skala:. 2 μm, Vergréisserung × 8400 VerfÜgung Mir Verglach nächst der Verdeelung vun DCAMKL1 Zellen mat deene vun bekannt epithelial Zell lineages. DCAMKL1 Zellen sech intermingled mat Zellen gekennzeechent duerch PCNA an de Moien (Dorënner 2a), mee kee DCAMKL1 Zellen enthale PCNA proliferating. DCAMKL1 Zellen ënnert foveolar Zellen gewunnt (Kierchefënster mat Alcian Blue, Dorënner 2b) a virun Panz Hals Zellen (Kierchefënster mat MUC6 an TFF2, Dorënner 2C, d). Parietal Zellen a Chef Zellen vun de Moien zu DCAMKL1 Zellen Niewendru waren, mä DCAMKL1 Zellen net H + /K + -ATPase oder pepsinogen (Dorënner 2e, f) coexpress. DCAMKL1 Zellen sech och aus endocrine Zell lineages diskret. D'DCAMKL1 Zell Bevëlkerung war wäit ewech enterochromaffin-wëll Zellen, déi am Prinzip am fundic huel (Dorënner 2G) verdeelt waren. Eng Majoritéit vun A-wëll gewunnt Zellen am fundic Basis mat e puer vun de Moien verdeelt mä verschidde vun DCAMKL1 Zellen (Dorënner 2H), an D Zellen kloer aus DCAMKL1 Zellen ënnerscheet (Dorënner 2i). Figur 2 Double-Faarf immunostaining weist Lokalisatioun vun DCAMKL1-ausdrécken Zellen an epithelial Zell lineages mat Zellen mat PCNA-Label Kären (e), Alcian Blue-Kierchefënster foveolar Zellen (b) proliferating, MUC6-Kierchefënster Panz Hals Zellen (c), TFF2 -stained Panz Hals Zellen (d), H + /K + -ATPase-Kierchefënster parietal Zellen (E), pepsinogen Chef Zellen (f), HDC-Kierchefënster enterochromaffin-wëll Zellen (g)-II Kierchefënster, ghrelin-Kierchefënster Dat wéi Zellen (h), an somatostatin-Kierchefënster d Zellen (i). CDM: 100 μm. D'inset an (E) weist eng hues Vue vun der duergestallt Beräich. Bedenkt datt d'DCAMKL1 Zellen aus der parietal Zellen isoléiert sech zu Fouss iwwerflächlech Mucosal Gesondheet a Rapid gewonnen VerfÜgung Histological Analyse vun de Prozess vun mucosal blesséiert a gefléckt der Ethanol Administratioun mat H &. E staining an double-Faarf DCAMKL1 an PCNA immunostaining ass zu Well dës 3. direkt nom Ethanol Behandlung, DCAMKL1 Zellen an PCNA Zellen aus der drüs ugebauten an datts an der lumen mat foveolar Zellen (Dorënner 3Aa an 3Ba). DCAMKL1 Zellen an PCNA Zellen hu bal an d'beschiedegt mucosa 1 Stonn no Ethanol Behandlung (Dorënner 3Ab an 3Bb) verschwonnen. DCAMKL1 Zellen Wiki dann no 6 Stonnen, an e puer waren präsent bei der mucosal Uewerfläch (Dorënner 3Ac an 3Bc). PCNA Zellen op 24 Stonnen no Ethanol (Dorënner 3Ad an 3Bd) fräi, während e puer DCAMKL1 Zellen an PCNA Zellen am mucosal Uewerfläch präsent waren (Dorënner 3Ae an 3Be). D'Verdeelung vun DCAMKL1 Zellen an PCNA Zellen haten d'morphologic Optrëtt vun onbehandelt fundic mucosa no 96 h (Dorënner 3Af an 3Bf). Figur 3 Immunohistochemical Analyse vun iwwerflächlech mucosal blesséiert no Ethanol Behandlung. (A) Double-Faarf immunostaining fir DCAMKL1 Zellen an PCNA Zellen. Gastric Rubriken um 5 Minutten (e) geholl, 1 Stonn (b), 6 Stonnen (c), 24 Stonnen (d, e) an 96 Stonnen (f) an der Ethanol Behandlung. (B) H & E-Kierchefënster Rubriken, déi Zäit natierlech vun gastric mucosal Schued a gefléckt der Ethanol Administratioun weist. (Af) Serial Rubriken vun de jeweilege Rubriken an A. Scales:. 100 μm VerfÜgung Time Coursen vun Ännerungen an d'Nummere vun DCAMKL1 an PCNA Zellen sinn an Dorënner 4. D'Zuel vun DCAMKL1 Zellen dës geännert bal concomitantly mat deem vun PCNA Zellen, mä Recrutement vun DCAMKL1 Zellen ugefaang bei 6 Stonnen no Ethanol behandelt, virun Recrutement vun PCNA Zellen. Figur 4 Time Coursen vun der Zuel vun DCAMKL1 Zellen (A) an PCNA Zellen (B) op engem drüs der Ethanol Administratioun. All Bar duerstellt der heeschen ± SE vun Resultater aus 5 deër. Den Y-Axe weist d'Zuel vun Zellen pro drüs an der X-Achs weist d'Zäit nom Ethanol Administratioun. Kliniken oppent VerfÜgung Deep ulcers sensibiliséieren ganz mucosal Schichten VerfÜgung an andeems d'muscularis mucosa 3 Deeg an der Behandlung produzéiert goufen mat acetic Seier. Déi meescht ulcers no 2 Wochen vun Behandlung geheelt an e puer recurred no 3 Wochen. A histopathological Analyse vun mucosal Erhuelung war mat Stoffer op 1 bis 3 Wochen an der Behandlung geholl gesuergt. Cystically dilated Glands am regenerative mucosa vun der oppent Rand ronderëm de Krater vun engem aktive oppent eminent waren (Dorënner 5a, b). Dës Glands sech mat Zellen géinteneen ausdrécken MUC5AC, engem Bewaacher vun foveolar Zellen (Dorënner 5c). Zousätzlech, TFF2, engem Bewaacher vun Panz Hals Zellen an onbehandelt deër, ugewisen enorm staining op der Basis vun regenerative fundic Glands (Dorënner 5D), gläicht dat fir TFF2 staining vun déiwe antral drüs Zellen a konsequent mat der Entstehung vun engem SPEM Zell phenotype [16, 17]. Am Géigesaz, Ausdrock vun MUC6, aner Bewaacher vun Panz Hals Zellen an onbehandelt deër, am regenerative mucosa schlecht an nëmmen schwaach MUC6 staining war vun Zellen am drüs huel (Dorënner 5e) observéiert. Chief Zellen och an der oppent Spillraum manner an Zellen schwaach Kierchefënster mat pepsinogen sech nëmmen op de drüs huel (Dorënner 5f) visualized. Soumat war et iwwerlageren an Ausdrock vun TFF2, MUC6 an pepsinogen vun Zellen op der Basis (Dorënner 5, d-f). Parietal Zellen sech am Otemschwieregkeeten vun der marginalen mucosa vun der aktiver oppent (Dorënner 5g) veréiert. PCNA Zellen am Glands an mesenchyma vun der oppent Spillraum an enger markéiert Erhéijung vun deenen Zellen fräi war um drüs huel (Dorënner 5h) feststellen. Figur 5 Stil vun epithelial Zellen am marginalen mucosa vun enger aktiver oppent. (E) An H & E-grousst Kapitel am 1 Woch no acetic Seier behandelt geholl, engem Krater vun Granulatioun Otemschwieregkeeten an marginalen Otemschwieregkeeten ronderëm de Krater weist. Skala: 1000 μm. (B) A hues Vue vun der oppent Spillraum mucosa duergestallt an (e). Skala: 100 μm. (C-h) Serial Rubriken vun (b) Kierchefënster mat MUC5AC (c), TFF2 (d), MUC6 (E), pepsinogen II (f), H + /K + -ATPase (g), an PCNA (h). (I-k) Double-Faarf immunostaining fir DCAMKL1 mat MUC5AC (i), DCAMKL1 mat TFF2 (j), an PCNA mat TFF2 (k). CDM: 100 μm. (L) Double-Faarf immunostaining fir DCAMKL1 mat PCNA. Skala: 10 μm. D'inset an (h-k) weist eng hues Vue vun der duergestallt Beräich. VerfÜgung Mir lant dann DCAMKL1 Ausdrock am marginalen mucosa vun der aktiver oppent. Verspreet DCAMKL1-ausdrécken Zellen sech dobäi no MUC5AC Zell linings (Dorënner 5i) an Hardcore mat SPEM Zellen (Dorënner 5j). PCNA Zellen sech och an der Géigend vun SPEM Zellen an e puer SPEM Zellen coexpressed PCNA (Dorënner 5k) verdeelt, dass déi zousätzlech d'SPEM antike ass multiplizéieren an proliferative. DCAMKL1 Zellen sech mat PCNA Zellen op der Basis vun der drüs intermingled, mee huet net coexpress PCNA (Dorënner 5l). Dëst bedeit datt DCAMKL1 Zellen zu engem quiescent Staat ënnerhale ginn. De Grënner Zon vun PCNA Zellen an DCAMKL1 Zellen aus de Moien am normal drüs zu der Basis vun de Rand vun der aktiver oppent déplacéiert war. An der Heelung Etapp VerfÜgung, d'oppent Gréisst reduzéiert a epithelial Zellen sech restauréiert (Dorënner 6a) . An der Heelung oppent, war e Temperaturgefäll vun epithelial Erhuelung Moment aus den oppent Grenz zu der regenerated Glands wäit aus der oppent (Dorënner 6B). An der regenerative mucosa vun der Heelung oppent, Panz-wëll Zellen Ofstand fräi. Dës Zellen sech bei der Basis vun der oppent Spillraum en der an erweidert fir d'necks vun Glands als verkënnegt dunn. MUC5AC Zellen Verréngerung vun den Hals a gouf dobäi haaptsächlech an der foveolae (Dorënner 6C), ähnlech zu der Lag vun der normal fundic mucosa. Den Ausbau Panz-wëll Zellen am verkënnegt oppent waren deelweis duerch MUC5AC Kierchefënster, mee virun allem mat TFF2 (Dorënner 6d) geschriwwen. MUC6 war vun Zellen am drüs huel awer net zu deenen, déi am Hals (Dorënner 6e) ausgedréckt, hierkommen pepsinogen vun Zellen am Hals (Dorënner 6f) ausgedréckt huet. Parietal Zellen, déi zu der aktiver oppent wäitgehend haten, Wiki iwwer an ënner der TFF2 Zell Populatioun an der mucosa vun der Heelung oppent (Dorënner 6g). Am normal mucosa, sinn parietal Zellen aus sengem ale Zellen vun de Moien ofgeleet, Spannungen eeler, an dann e puer Deeg daueren bis d'Basis fir opgeholl verwandelt [18] hierkommen, an d'Heelung oppent, den Hals an huel vun der drüs parietal Zellen repopulated gläichzäiteg. PCNA war virun TFF2 Zellen bei der oppent staark just ausgedréckt, déi besot verstäerkte amplification vun der epithelial Zellen an dëser Regioun (Dorënner 6h). Verschidde PCNA Zellen sech och ënnert der TFF2 Zellen verdeelt. DCAMKL1 Zellen Wiki uewen an der ënneschter Halschent vun der TFF2 Zell Bevëlkerung (Dorënner 6i) Hardcore. Dës duebel Verdeelung Profil vun de Grënner Zone kënnen ze Promotioun vun rapid an efficace mucosal Erhuelung bäidroen. Figur 6 Stil vun epithelial Zellen an DCAMKL1 Zellen am regenerative mucosa vun engem verkënnegt oppent. (E) An H & E-Kierchefënster Rubrik op 2 Wochen no acetic Seier behandelt geholl, de regenerative Otemschwieregkeeten vun der Heelung oppent weist. Skala: 1000 μm. (B) A hues Vue vun der regenerative mucosa duergestallt an (e). A Temperaturgefäll vun epithelial Erhuelung vun der oppent Südsäit (riets) zu der regenerated mucosa wäit aus der oppent (lénks) war identifizéiert. Skala: 100 μm. (C-h) Serial Rubriken vun (b), grousst mat MUC5AC (c), TFF2 (d), MUC6 (E), pepsinogen II (f), H + /K + -ATPase (g), an PCNA (h). (I) Double-Faarf immunostaining fir DCAMKL1 an TFF2 zu engem Serien Rubrik vun (b). VerfÜgung Intestinal Metaplasia an Dysplasia VerfÜgung An irradiated deër, wouvun intestinal metaplasia Zellen Becher identifizéiert vum Departement Pas-Alcian Blue staining an der fundic gemaach drüs (Dorënner 7A). Zellen ausdrécken DCAMKL1 waren ënnert foveolar Zellen am luminal unzekräizen vun der mucosa, souwéi an den déiwe mucosa (Dorënner 7b, c) fonnt. PCNA Zellen Ofstand zu der intestinalized mucosa an DCAMKL1 Zellen am luminal unzekräizen eropzesetzen distal zu der PCNA Zellen (Dorënner 7c). TFF2-ausdrécken Zellen, konsequent mat SPEM, erweist sech um Fouss vun der intestinalized mucosa (Dorënner 7d). PCNA Zellen sech proximal zu DCAMKL1 Zellen déif an d'intestinalized epithelial Doropshin, mat engem ähnlechen Verdeelung Muster ze dass an dem klengen intestinal Krypta fonnt (Dorënner 7, f). Figur 7 DCAMKL1 Ausdrock vun der intestinalized mucosa. (En) Pas-Alcian Blue staining der mucosa mat intestinal metaplasia mat Becher Zellen weist. Skala: 100 μm. (B-d) Serial Rubriken vun (engem), grousst mat DCAMKL1 (b), DCAMKL1 an PCNA (c), an TFF2 (d). (E, f) hues Meenung vun der duergestallt Beräicher an (b) an (c), bzw.. CDM:. 10 μm VerfÜgung An deër mat MNNG behandelt, fir mech dilation vun Glands mat dysplasia war an der mucosa an submucosa (Dorënner 8a) elicited. SPEM Perséinlechkeeten an erweidert bei der dilated Glands an segmental Ausdrock vun TFF2 war vun Zellen Doropshin der Glands (Dorënner 8B) fonnt. DCAMKL1 fonnt an dës Glands (Dorënner 8C) ausgedréckt. TFF2 an DCAMKL1 sech zu verschidden Zellen am dilated Glands (Dorënner 8D, 8e) ausgedréckt, an PCNA war och zu Zellen aner wéi DCAMKL1 Zellen ausgedréckt, beweist den proliferative Natur vun der Glands (Dorënner 8f). Figur 8 DCAMKL1 Ausdrock vun der dilated Glands mat dysplasia. (E) An H & E-Kierchefënster Rubrik, weist mech dilation vun Glands. (B) Expansioun vun SPEM. Feiler weg segmental Ausdrock vun TFF2 an der dilated Glands. (C) Expression vun DCAMKL1 an der dilated of. (D-f) Serial Rubriken vun der dilated drüs fir TFF2 (d), DCAMKL1 (e) an DCAMKL1 mat PCNA (f). CDM:. 100 μm VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung D'Etude gewisen, datt DCAMKL1-ausdrécken Zellen vun de Moien vun der Grenzwäerter fundic drüs exklusiv präsent sinn, an déi sinn multipotent Grënner Zellen Gedanken ze wunnen [1, 3]. Mir bewisen datt DCAMKL1 Zellen aus ënnerscheet epithelial Zellen diskret sinn, dorënner endocrine Zell lineages. Ausserdeem, immunoelectron microscopy zougedréckt datt DCAMKL1 war zu Teenie epithelial Zellen mat puer organelles ausgedréckt, déi virdrun als kritt Grënner Zellen am gastric Moien proposéiert fir de granule-gratis Zellen sëlwecht [3]. DCAMKL1 ass mat Musashi-1 zu parietal Zellen an der Maus Mo [13] coexpressed hierkommen dëser Etude bewisen, dass DCAMKL1 Zellen aus parietal Zellen Frae waren, déi Musashi-1 an d'Grenzwäerter Mo. auszedrécken [5]. VerfÜgung mi Ännerungen an bewosst Verloscht a Rétablissement vun der gastric drüs der iwwerflächlech mucosal mat Ethanol blesséiert ginn zu Dorënner 9. d'Zäit Coursen vun Ännerungen an d'Nummere vun DCAMKL1 an PCNA Zellen 6 bis 96 Stonnen no Ethanol Behandlung an Grenzwäerter sinn konsequent mat deenen an Maus [13 zesummegefaasst ]. Zousätzlech, analyséiert mir virdrun Ännerungen an dës Zell Typen. DCAMKL1 Zellen an PCNA Zellen desquamated mat foveolar Zellen direkt no Ethanol Behandlung. A denuded mucosal Uewerfläch der Ethanol stéiert ass an 1 bis 2 Stonnen-du epithelialized vun séier foveolar Zellen aus der Emgéigend uninjured epithelium [19] wanderen. Zënter dësem fréi Zréckbezuelen op bewosst Prolifératioun net baséiert awer op Migratioun, Mobiliséierung vun ale Zellen ass net néideg. No engem Uklang Period vun ongeféier 8 Stonnen, Priedegt engem riicht vun proliferative Aktivitéit bis 24 Stonnen d'foveolae fir hir ausgefale Längt [20] restauréiert. Dës Kéier natierlech vun epithelial Prolifératioun der Ethanol stéiert ass ähnlech ze dass am Moment studéieren observéiert. Figur 9 mi Ännerungen am bewosst Verloscht a Rétablissement vun der gastric drüs der iwwerflächlech mucosal Verletzung mat Ethanol. VerfÜgung A leschte Rapport huet gewisen, datt PCNA-positiv proliferating Zellen enthalen prefoveolar Zellen [21]. Der geklommener Zuel Zellen vun proliferating si wahrscheinlech aus sengem ale Zellen ofgeleet, mä de Prozess vun ale Zell repopulation der Verletzung obskur. An dëser Etude, goufen DCAMKL1 Zellen virun Restauratioun vun proliferating Zellen agestallt, an d'Zuel a Verdeelung vun DCAMKL1 Zellen geännert bal concomitantly mat deene vun proliferating Zellen no 24 Stonnen. Dëst brengt erausfonnt dass DCAMKL1-ausdrécken Zellen Zelle Grënner datt Lut ze proliferating Zellen ginn. Puer DCAMKL1 Zellen an PCNA Zellen präsent waren am Ufank regenerative Period um mucosal Uewerfläch. Flüchteg Verleeen vun de Grënner Zone géintiwwer der Uewerfläch rapid a privilegiéierten Restauratioun vun foveolar Zellen ze vereinfachen, kann hëllefen, deen den antike ass, datt déi meescht beschiedegt ass an iwwerflächlech mucosal Fouss verluer. Zënter der rekrutéiert DCAMKL1 Zellen bannent engem Dag Wiki no der Naturvölker Zellen verluer huet, opgeholl vum repopulating DCAMKL1 Zellen am blesséiert mucosa kann aus Net-blesséiert Glands oder aus progeny vun enger Zell antike multipotent Desaccord do- datt bestänneg Ausbau oder Verschwannen vun de gratis Sproochenunterricht awer [9, 22]. VerfÜgung D'Prozesser vun mucosal Rekonstruktioun a Grënner Zell repopulation zu enger chronescher kloer aus deenen ënnerscheet déif oppent zu Fouss iwwerflächlech blesséiert (Dorënner 10). Ënnerscheet Zell lineages sinn der Fouss iwwerflächlech Verletzung haten hierkommen uerdentlecht dat vun mucosal Zell lineages vun der aktiver oppent Kopfhörer war an Onfruchtbarkeet Zell lineages goufen duerch nei entwéckelt Panz Zell lineages ersat. Parietal a Chef Zellen sech verluer, foveolar hyperplasia ass evident, an SPEM an der regeneréiert epithelium Gedenkminutt der aktiver oppent Ëmfeld. Dës Conclusiounen rescht agebousst Ännerungen am verschidde experimentell Modeller vun Fouss oder chronesch oxyntic atrophy entschlof [16, 17, 23, 24]. An der oppent Spillraum, MUC6 an pepsinogen schéngs mat TFF2 um drüs Basis ze ginn coexpressed. Dëst brengt ënnerstëtzt d'Hypothes, datt Chef Zellen transdifferentiate zu SPEM [17, 25], an datt de Prozess vun redifferentiation aus Panz Hals Zellen zu Chef Zellen ass an eng aktiv oppent geännert. Eng alternativ Erklärung, déi méi wahrscheinlech op den haitegen Resultater baséiert ass, ass dass SPEM aus sengem ale Zellen ofgeleet ass an redifferentiates zu Chef Zellen. Déi fannen dass SPEM mat fräi Prolifératioun assoziéiert ass ënnerstëtzt dës Propose [16, 24]. Figur 10 hire Restaurant vun mucosal Zell lineages an de Spillraum vun aktiv an verkënnegt ulcers. VerfÜgung Kliniken mucosal ulceration an der gastrointestinal TRACT Initiaten engem verkënnegt Prozess vun der Basis mucosal um oppent Wäitschoss, an kann Roman Zell lineages induce 26 bis SPEM entspriechend [ ]. Dës schéngen aus multipotent Stammzellen an der Krypta vun der klenger Daarm an Colon ofgeleet ginn, hierkommen SPEM an an de Moien aus der normal Grënner Zone Zellen op der Basis vun de Rand vun der gastric oppent ass wäit proliferating. D'chronescher oppent Modell vun dëser Etude entwéckelt puer Wochen no Behandlung, déi Migratioun vun Réckemuerch hiirgestallt-ofgeleet Stammzellen onwahrscheinlech well engraftment vun deenen Zellen als gastric epithelial Zellen existeiert zu Mais no nohalteg H. felis VerfÜgung Wonn méi wéi 1 Joer mécht , awer net vun acetic Seier entschlof mat engem gastric oppent zu mais [27]. D'Präsenz vun enger zweeter Grënner Bevëlkerung, cryptic Grënner Zellen am Mo, ass fir vill Joer virausgesot [16, 24], mee huet nach identifizéiert ginn. An dëser Etude, goufen putative Grënner DCAMKL1 Zellen am Ëmkrees vun zwee Panz Zell lineages, foveolar Zellen an SPEM Zellen, an hyperplasia um oppent Spillraum fonnt. DCAMKL1 Zellen Hardcore mat SPEM sinn kompatibel mat der cryptic Grënner Zellen. D'intestinal Grënner Zell Bewaacher Lgr5 ass op der Basis vun Glands präsent a net zu de Moien [7], an dass en ale Zell Populatioun Ofstand während inflammation fräi [6]. Mir hypothesize datt DCAMKL1-ausdrécken Zellen op der Basis vun der gastric drüs sinn déi zweet-Linn Grënner Bevëlkerung, déi ënnert gestallt Konditiounen maskéiert ass.

• Der Gentherapie-Reduktioun Effet vun chromosomal Verloschter am gastric Cancers fonnt
• Serological Beurteelung vun gastric mucosal atrophy zu gastric cancer