Megváltozott expressziója egy feltételezett progenitor sejt marker DCAMKL1 a patkány gyomornyálkahártya regenerációs, metaplázia és diszplázia

Megváltozott expressziója egy feltételezett progenitor sejt marker DCAMKL1 patkány gyomornyálkahártya regenerációs, metaplasia és a dysplasia katalógusa Abstract Background katalógusa katalógusa Doublecortin és kalcium /kalmodulin függő protein kináz-szerű-1 (DCAMKL1) egy jelölt progenitor sejtek markerét a gyomor nyálkahártyáját. Lineage sejtek a gyomornyálkahártya származnak progenitor sejtek, de ezt a folyamatot meg lehet változtatni a sérülés után. Ezért feltárt DCAMKL1 expressziós kóros körülmények között.
Módszerek
immunhisztokémiai elemzést végeztünk patkány gyomor akut felületes sérülés, krónikus fekély, intesztinális metaplázia és dysplasia.
Eredménye
DCAMKL1 kizárólagosan kifejezve éretlen nyugvó sejtekben a földszoros normális fundus mirigy, ahol feltételezett progenitor sejteket úgy gondolják, hogy tartózkodjon. DCAMKL1-pozitív sejtek és a szaporodó sejtek shed lumenébe után felületi sérülés, és újra megjelent során a regeneráló folyamat, főleg a felületes nyálkahártya. A marginális mucosa körüli aktív fekély, parietális és vezető sejtek csökkent, foveolar hyperplasia nyilvánvaló volt, és lóhere faktor család 2 (TFF2) /görcsoldó polipeptid-kifejező metaplasia (SPEM) alakultak a mirigy található. DCAMKL1 sejteket újra felmerült a mély nyálkahártya egymás mellé SPEM és osztódó sejtekben. A gyógyító fekély, a TFF2 sejtpopuláció kiterjesztett és úgy tűnt, hogy redifferentiate a vezető-sejtek, míg a szaporodó sejtek és DCAMKL1 sejtek megjelent felett és alatt TFF2 sejteket a gyógyulás elősegítésére. SPEM megjelent és PCNA sejtek emelkedett a intestinalized nyálkahártya és DCAMKL1 fejeztük közelsége a PCNA sejtek a mély nyálkahártyát. DCAMKL1, PCNA és TFF2 fejeztük különböző dysplasiás sejtek bélelő tágult mirigyek közelében SPEM.
Következtetés
ultrastrukturális megjelenése DCAMKL1-pozitív sejtek és a expressziós mintázatát DCAMKL1 normális és kóros állapotok azt mutatják, hogy a sejtek tartoznak progenitor sejt populációban. DCAMKL1 kifejezés szorosan kapcsolódik a TFF2 /SPEM sejtek a sérülés után. DCAMKL1 sejtek benépesítését közel szaporodó, hiperpláziás, metaplasztikus és diszpláziás sejtek, és a progenitor zóna eltolódik szerint a patológiás körülmények.
Alapon
Az egér és a humán gyomor egység azt jelzi, monoklonális átalakítás, jelezve jelenlétét multipotens őssejtek [ ,,,0],1, 2]. Az elektronmikroszkópos autoradiográfiás egér arra enged következtetni, hogy a granulátum nélküli sejtek a földszoros működnek multipotens őssejtek [3]. A differenciálódás és a migrációs folyamatok sejtvonal megváltoztatható sérülést. A progenitor sejt zóna a földszoros könnyen sérül intraluminális etanol, a nem-szteroid gyulladáscsökkentő gyógyszerek vagy a Helicobacter pylori katalógusa (H. pylori katalógusa). A krónikus gyulladás a gyomor vezethet sorvadás és speciális sejt veszteség kézzelfogható hatása szövet-specifikus progenitor sejtek sérülése vagy elvesztése. Azonban a viselkedése progenitor sejtek az akut vagy krónikus nyálkahártya-károsodás és a mechanizmus a helyreállítás ezeknek a sejteknek során nyálkahártya regeneráció nem ismertek.
A progenitor sejt populáció fontos a karbantartási és regenerációs a gyomornyálkahártya, de hosszú élt progenitor sejtek vannak kitéve a felhalmozódó mutációk, rák kialakulásához vezethet. [4] Neoplasia követheti celluláris metaplasia miatt krónikus gyulladás és javítás. Ugyanakkor pontos szerepének elemzése és átalakítása progenitor sejtek szekvenciájának gastritis-metaplasia-dysplasia-rák nem végeztek, elsősorban a hiánya diszkrét progenitor sejt markerek a gyomorban. Katalógusa Musashi-1, a markere progenitor sejtek az egér vékonybél, nem fejeznek ki feltételezett progenitor sejtek, de megtalálható a parietális sejtek a patkány fundus földszoros [5]. A villin-1 promoter /enhancer fragmentet a marker a lehetséges gyomor- progenitor sejtek a földszoros a pylorus mirigyek [6]. A családfa tanulmány kimutatta, hogy a bél progenitor sejt marker Lgr5 fejezik tövében leendő fundus és a pylorus mirigyek az újszülött gyomorban, míg a kifejezés a felnőtt túlnyomórészt korlátozódik az alapja a pylorus mirigyek [7]. Így nincs határozott markerek progenitorok felnőtt fundális mirigyek.
DCAMKL1 egyik termékek Gene Egyedfejlődés dúsított transzkriptumok talált képest egér gyomor és vékonybél progenitor adatkészletek [8]. Immunhisztokémiai analízis segítségével DCAMKL1 ellenanyag kiderült egyetlen sejt festődés bél kripta szakaszok vagy annak közelében a 4-helyzetben és a gyomor-földszoros sejtekben [8]. Az első jelentés után, specifikus lokalizációja DCAMKL1-t expresszáló sejteket egy őssejt niche-ben látható a vékonybélben az egerek [9, 10], valamint a vastagbélben az egerek és az emberek [11, 12], míg a DCAMKL1 volt koexpresszált a Musashi -1 parietális sejtekben a gyomorban az egerek [13].
a első jelen vizsgálat célja az volt, hogy meghatározzuk, hogy DCAMKL1 markere progenitor sejtek a patkány gyomorban. A másik cél az volt, hogy tisztázzák a térbeli és időbeli mintázata megjelenése sejtek specifikusan expresszáló DCAMKL1 alatt több gyomor patológiás körülmények között. Katalógusa Módszerek katalógusa Állati készítmény
Minden állati protokollt jóváhagyta az Keio Egyetem Állat kutatási bizottság. Hím Wistar patkányokat körülbelül 200 g súlyú éheztettünk 24 órán át szabad hozzáféréssel a vízhez. Előállításához akut felületes sérülés a fundus nyálkahártyából, abszolút etanol (1 ml) csepegtetünk a gyomorba gyomorszondával intubálás. A krónikus mély fekély, 20% -os ecetsav (50 ul) injektáltunk a fundus submucosa az elülső fal mikrofecskendő alkalmazásával. A patkányokat elaltattuk 3 nap és az 1., 2. és 3. hét után az ecetsavas injekció.
A módszer indukálására intesztinális metaplázia a patkány gyomornyálkahártya leírták máshol [14, 15]. Röviden, patkányok kapott két röntgen beadott 10 Gy minden leöltük 6 hónappal a besugárzás után. A módszer indukálására dysplasia a patkány gyomornyálkahártya is leírták máshol [14]. Röviden, 50 ng /ml N-metil-N'-nitro-N-nitrozo-guanidin (MNNG) (Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI) adunk a patkányoknak ad libitum
4 hónapig.
Antitestek
nyúl anti-DCAMKL1 immunglobulin (lg) g (ABCAM, Cambridge, UK; végső hígítás 1: 100), egér anti-proliferáló sejtmag antigén (PCNA) IgG-t (DAKO, Carpinteria, CA; felhasználásra kész), nyúl anti -PCNA IgG-t (ABCAM; 1: 200), az egér anti-H + /K + - adenozin-trifoszfatáz (ATPáz) α alegység IgG-t (Research Diagnostics Inc. Flandria, NJ; 1: 200), a juh anti -pepsinogen II IgG-t (United States biológiai, Swampscott, MA; 1: 100), egér anti-MUC6 IgM (Kanto Kagaku, Tokió; 1: 100), egér anti-MUC5AC IgG-t (ABCAM; 1: 100), az egér anti- TFF2 IgM (ABCAM; 1: 200), tengerimalac anti-hisztidin-dekarboxiláz (HDC) IgG-vel (ARP, Belmont, MA; 1: 100), kecske anti-ghrelin IgG-t (santa Cruz Biotechnology, santa Cruz, CA; 1: 100 ) és egér anti-szomatosztatin IgG (Biomeda, Foster City, CA; 1:25) alkalmaztunk az elsődleges ellenanyag.
szövettani elemzéshez
A gyomor szövetet rögzített 10% -os semleges pufferelt formaiinban éjszakán át keverjük, majd paraffinba ágyaztuk, és metszeteket (4 mm). A metszeteket hematoxilinnel és eozinnal (H &E) standard technikák alkalmazásával. Időszakos sav-Schiff (PAS) -Alcian Blue festéssel végeztük kimutatására nyálkahártya sejtvonalban.
Immunhisztokémiai analízis, paraffinba ágyazott metszeteket paraffint és előkezeljük egy megfelelő visszakeresési eljárást mindegyik antigénre. A metszeteket 0,3% -os H 2 O 2 metanolban 10 percen inaktiválására endogén peroxidáz és mossuk foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS), amely 0,1% Tween 20-at (PBST). Inkubálás után a blokkoló oldatot (Block Ace, Dainippon Seiyaku, Tokyo, Japan) 10 perc, a metszeteket egy primer antitesttel 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezt követően minden egyes lépés követte mosással 3-szor PBST 3 percig. A metszeteket inkubáltuk HP-konjugált IgG vagy IgM 40 percig. A jelölt sejteket színű barna 3,3'-diaminobenzidin-hidroklorid (DAB) alkalmazásával DAB reagens készlet (DAKO), majd ellenfestjük Mayer-féle hematoxilinnel.
Kétszárnyú szín immunfestést, közvetett immunoalkaline foszfatáz módszert alkalmaztuk következő az indirekt immunperoxidáz a fent leírt eljárást. A reakció után a DAB, a metszeteket egy második primer antitesttel 1 órán át, majd inkubáltuk ALP-konjugált IgG vagy IgM 40 percig. A jelölt sejteket megfestettük kék egy ALP szubsztrát kit III (Vector kék, Vector Laboratories, Burlingame, CA).
Pre antigén visszakeresése pepszinogén II és MUC6, proteináz-K (DAKO) alkalmaztunk helyileg a paraffint szakaszokat 6 percek. Az antigén visszakeresése PCNA (egér IgG), a metszeteket melegítjük desztillált vízben egy autoklávban 10 percig. Az antigén visszakeresése MUC5AC a metszeteket melegítjük citrátpuffer autoklávban 10 percig. Nem antigén-visszanyerés eljárást alkalmaztunk DCAMKL1, H + /K + - ATP-áz, PCNA (nyúl IgG), TFF2, HDC, ghrelin vagy szomatosztatin-festéssel.
Pontozása DCAMKL1 Cells és PCNA Cells
szakaszok átesett kettős színű immunfestés segítségével DCAMKL1 és PCNA elemezték számának meghatározása immunfestett sejteket. Metszeteket használtunk 5 patkány, és 10 jól orientált gyomor egységek elemeztük az egyes részekben.
Electron Microscopy
Pre-beágyazás immunperoxidáz elektronmikroszkóppal végeztük a következők szerint. Kis darab friss példányok a gyomor corpus kezeletlen patkányokat fixáltuk 4% paraformaldehiddel 24 órán át, majd fixálást 0,1% -os glutáraldehidet és 4% paraformaldehidet 1 órán keresztül. Kriosztát metszeteket (6 um) készítettünk és inkubáltuk anti-DCAMKL1 antitesttel 48 órán keresztül, majd inkubáltuk a HP-konjugált anti-nyúl IgG-t 24 órán át. A metszeteket ezután fixáltuk 0,5% glutáraldehidet 5 percig, reagáltatjuk DAB, poszt-rögzítettük 2% ozmium-tetroxidot, dehidratált keresztül egy fokozatos etanol sorozat, és a beágyazott epoxigyanta. Ultravékony metszeteket Ultramikrotómmal és megfestjük uranil-acetát oldatot és ólom-citrát oldatot. A mintákat vizsgáltuk a transzmissziós elektronmikroszkóp (JEM-1200EX, JEOL, Tokyo, Japán). Katalógusa Eredmények katalógusa Normál fundus mirigy katalógusa DCAMKL1 expresszáló sejteket szét a felső harmadában normál fundus mirigy, a régiót nevezik a földszoros (1A). Ebben elektronmikroszkópia, DCAMKL1-sejteket is találtak a földszoros (1B, a). A DCAMKL1 cella kisebb volt, mint a parietális sejt, amely gazdag volt a mitokondriumokban, és hiányzott a szekréciós granulumok láthatók az endokrin sejt (1B, b). DCAMKL1 immunreaktivitást találtak diffúzan a citoplazmában, ami egy magas nucleocytoplasmic arány (1B ábra, C). DCAMKL1 sejtek voltak jelen a hámsejtek bélés, mivel a sejtek dezmoszómák a csomópont szomszédos hámsejtek (1B ábra, D). A DCAMKL1 sejtek volt egy éretlen megjelenést kevés mitokondrium, vezikulák vagy szekréciós granulátumok (1B ábra, c és 1B, D). 1. ábra forgalmazása és ultrastruktúráját DCAMKL1 expresszáló sejtek normál patkány gyomor. (A) A fény mikrokamera, mutatja helyét DCAMKL1 sejtek a fundus nyálkahártyából. Skála: 100 nm. A kis ábra kinagyított vázolt terület A. Skála: 10 um. (B) A transzmissziós elektronmikroszkópos felvételek. (A, C) ultravékony metszeteket nélkül counterstaining. (B, D) ultravékony metszeteket a counterstaining. (A) DCAMKL1 sejtek a fundus mirigy. Scale: 2 um, * nagyítás 5600. (B) A DCAMKL1 cella (D) kisebb volt, mint a parietális sejtek (P), amely gazdag volt mitokondrium, és hiányzott a szekréciós granulumok látható a endokrin sejt (E). Scale: 2 um, * nagyítás 7000. (C) DCAMKL1 festődés túlnyomórészt citoplazmatikus. Skála: 1 um, * nagyítás 14.400. (D) nyílhegyek jelzik dezmoszómák. A fehér nyíl mutatja DCAMKL1 immunreakció. Scale: 2 um, * nagyítás 8400. Katalógusa A következőkben képest forgalmazásával DCAMKL1 sejtek az ismert hámsejt vonalak. DCAMKL1 sejteket keveredtek osztódó sejtek jelölt PCNA a földszoros (2a ábra), de nem DCAMKL1 sejteket tartalmazott PCNA-. DCAMKL1 sejtek a lenti foveolar sejtek (festettük alcián Blue, 2b ábra), és a fenti nyálkahártya nyak sejtek (festettük MUC6 és TFF2, 2c ábra, d). Parietalis sejtek és vezető sejtek a földszoros volt szomszédos DCAMKL1 sejteket, de DCAMKL1 sejtek nem coexpress H + /K + -ATP-áz vagy pepszinogén (ábra 2E, F). DCAMKL1 sejteket is diszkrét endokrin sejtvonal. A DCAMKL1 sejtpopulációt távol enterokromaffin-szerű sejtek, amelyeket elsősorban szét a fundus bázis (ábra 2g). A legtöbb A-szerű sejtek tartózkodott a fundus bázis néhány elosztva a földszoros de különbözik a DCAMKL1 sejtek (2H ábra), és a D-sejtek egyértelműen különbözött DCAMKL1 sejtek (ábra 2i). 2. ábra Kettős színű immunfestés mutatja lokalizációja DCAMKL1 expresszáló sejtek és epiteliáiis sejtvonal, amely tartalmaz proliferáló sejteket PCNA-jelzett sejtmagok (A), Alcian Blue-festett foveolar sejtek (B), MUC6-festett nyálkás nyak sejtek (c), TFF2 -stained nyálkás nyak sejteket (d), H + /K + -ATPáz-festett parietalis sejtek (e), pepszinogén II-vel festett legfőbb sejtek (f), HDC-festett enterokromaffin-szerű sejtek (g), a ghrelin-festett A- szerű sejtek (H), és a szomatosztatin-festett D sejtek (i). Mérleg: 100 nm. A betét, (e) ábrán nagyítva vázolt területen. Megjegyezzük, hogy a DCAMKL1 sejtek elkülönülnek a parietális sejtekben.
Akut felületi nyálkahártya sérülése és a Rapid Renewal
szövettani elemzése folyamatban nyálkahártya sérülések és javítási etanol beadása után a H &E festéssel és dupla színes DCAMKL1 és PCNA immunfestés ábrán látható 3. Közvetlenül azután etanol kezelés, DCAMKL1 sejtek és PCNA sejteket leválasztottuk a mirigy és shed lumenébe a foveolar sejtek (ábra 3aa és 3ba). DCAMKL1 sejtek és PCNA sejtek szinte teljesen eltűnt a sérült nyálkahártya után 1 órával az etanol kezelés (ábra 3ab és 3BB). DCAMKL1 sejteket azután újra megjelent 6 óra után, és néhány jelen voltak, közel a nyálkahártya felszínén (a ábra 3ac és 3Bc). PCNA-sejtek megnövekedett után 24 órával az etanol (ábra 3AD és 3BD), miközben több DCAMKL1 sejtek és PCNA-sejtek voltak jelen a nyálkahártya felszínén (ábra 3AE és 3Be). A terjesztési DCAMKL1 sejtek és PCNA sejteknek morfológiai megjelenése kezeletlen fundus nyálkahártyából 96 óra (ábra 3AF és 3Bf). 3. ábra immunhisztokémiai vizsgálatát felületes nyálkahártya sérülés után etanol kezelést. (A) Kettős szín immunfestés DCAMKL1 sejtek és PCNA sejteket. Gyomor szakaszok hozott 5 perc alatt (A), 1 óra (B), 6 óra (C), 24 óra (d, e) és 96 óra (F) után etanol kezelést. (B) H &E-festett metszeteken, mutatja az idő folyamán a gyomor nyálkahártya-károsodás és javítás az etanol beadása után. (AF) Soros szakaszok a megfelelő szakaszaival A. mérlegek: 100 um.
Időbeli lefutása, a változások a számát DCAMKL1 és PCNA sejteket a 4. ábrán látható száma DCAMKL1 sejtek megváltozott majdnem egyidejűleg, hogy a PCNA sejteket, de toborzása DCAMKL1 sejtek kezdtek után 6 órával az etanol kezelés előtt felvételének PCNA sejteket. 4. ábra időbeli lefutása, a számok a DCAMKL1 sejtek (A) és PCNA-sejtek (B) egy mirigy az etanol beadása után. Mindegyik sáv képviseli az átlag ± SE az eredmények 5 patkányokban. Az Y tengely mutatja a sejtek száma mirigy és az X-tengely mutatja az időt az etanol beadása után.
Krónikus fekélyek
Mély fekélyek bevonásával egész nyálkahártya réteget és átható a muscularis mucosa állítottunk elő 3 nappal a kezelés után az ecetsavval sav. A legtöbb fekélyek gyógyulási 2 hetes kezelés és néhány visszatértek 3 hét után. A hisztopatológiai elemzése nyálkahártya regeneráció végeztünk szöveteket időpontja 1-3 héttel a kezelés után. Cystically tágult mirigyek voltak kiemelkedő a regeneratív nyálkahártya fekély margót a kráter egy aktív fekély (5a ábra, b). Ezek a mirigyek sorakoztak expresszáló sejtek MUC5AC, markere foveolar sejtek (5c). Ezen túlmenően, TFF2, a marker a nyálka- nyak sejtek kezeletlen patkányok, megjelenik intenzív festődés tövénél regeneratív fundális mirigyek (5D ábra), hasonlóan ahhoz, hogy TFF2 festődése mély antrális mirigy sejtek és összhangban van a kialakult egy SPEM sejt fenotípus [16, 17]. Ezzel szemben, a kifejezése MUC6, egy másik marker a nyálka- nyak sejtek kezeletlen patkányok, romlott a regeneratív nyálkahártyájában, és csak gyenge MUC6 volt festődés sejtek a mirigy bázis (5E ábra). Chief sejtek szintén csökkent a fekély árrés és a sejtek gyengén megfestett pepszinogén tettük láthatóvá csak a mirigy bázis (ábra 5f). Így nem volt átfedés expresszióját TFF2, MUC6 és pepszinogén sejtekben a tövénél (5. ábra, D-F). Parietalis sejtek voltak jelen a szövetekben a marginális mucosa az aktív fekély (Figure 5 g). PCNA sejtek megnövekedett a mirigyekben és mesenchyma a fekély árrés és a jelentős növekedése ezekben a sejtekben figyelték meg a mirigy bázis (ábra 5h). 5. ábra Minták hámsejtek a marginális nyálkahártyájában aktív fekély. (A) Az H &E-festett rész időpontja után 1 héttel ecetsav kezelés, bemutatva egy kráter granulációs szövet és marginális körülvevő szövet kráter. Skála: 1000 nm. (B) kinagyított a fekély árrés nyálkahártya vázolt (A). Skála: 100 nm. (C-H) Soros szakaszai (B) festettük meg MUC5AC (C), TFF2 (d), MUC6 (E), pepszinogén II (f), H + /K + -ATP-áz (G), és PCNA (H). (I-k) Kettős szín immunfestés DCAMKL1 a MUC5AC az (I), DCAMKL1 a TFF2 (J), és PCNA a TFF2 (K). Mérleg: 100 nm. (L) Kettős szín immunfestés DCAMKL1 a PCNA. Skála: 10 um. A betét a (h-K) azt mutatja, nagyított nézete a vázolt területen.
Ezután feltárt DCAMKL1 kifejezést a marginális nyálkahártyájában az aktív fekély. Szétszórt DCAMKL1 expresszáló sejtek is jelen voltak közel MUC5AC sejt bélés (ábra 5i) és egymás mellé SPEM sejtek (ábra 5j). PCNA sejteket is szét a környezetében SPEM sejteket és bizonyos SPEM sejtek koexpresszáljon PCNA (ábra 5k), utalva arra, hogy a SPEM sejtvonal szaporodnak és proliferatív. DCAMKL1 sejteket keveredtek PCNA sejtek az alapja a mirigy, de nem coexpress PCNA (ábra 5l). Ez jelzi, hogy DCAMKL1 sejteket addig tartjuk nyugalmi állapotban. A progenitor zóna PCNA sejtek és DCAMKL1 sejtek elmozdult a földszoros a normál mirigy a bázis a margón az aktív fekély.
A gyógyulási szakaszban, a fekély méretcsökkentett és epitheliumsejt felújított (6a ábra) . A gyógyító fekély, gradiens epiteliális regeneráció jelen volt a fekély szélén, hogy a regenerált mirigyek távol fekély (6b ábra). A regeneratív nyálkahártya a gyógyulás fekély, nyálkahártya-szerű sejtek jelentősen nőtt. Ezeket a sejteket lokalizált tövében a fekély árrés és bővíteni, hogy a nyakára mirigyek gyógyító folytatta. MUC5AC sejtek csökkent a nyak és a jelen volt elsősorban a foveolae (ábra 6c), hasonló a helyét a szokásos fundus nyálkahártyából. A bővülő nyálkás-szerű sejtek gyógyulási fekély részben festettük MUC5AC, de túlnyomórészt festettük TFF2 (ábra 6d). MUC6 expresszáltunk a sejtekben a mirigy bázis, de nem azok, a nyakon (ábra 6e), mivel pepszinogén expresszáltunk a sejtekben a nyakon (ábra 6f). Parietalis sejtek, amely eltűnt az aktív fekély, újra megjelent fölött és alatt a TFF2 sejtpopuláció a nyálkahártyában a gyógyító fekély (ábra 6g). A normális nyálkahártya, parietalis sejtek származnak progenitor sejtek a földszoros, érett abban, majd néhány nap alatt vándorolnak le, hogy az alap [18], míg a gyógyítás fekély, parietalis sejtek újranépesítették a nyak és a bázis a mirigy egyidejűleg. PCNA fejeztük erősen fölött TFF2 sejtek közelében, a fekély, ami fokozott amplifikációs a hámsejtek ebben a régióban (ábra 6H). Néhány PCNA sejteket is forgalmazott alatti TFF2 sejteket. DCAMKL1 sejtek megjelent fenti egymás mellé az alsó fele a TFF2 sejt populáció (ábra 6i). Ez a kettős forgalmazás profilja progenitor zóna hozzájárulhat támogatása gyors és hatékony nyálkahártya regeneráció. 6. ábra Minták a hámsejtek és DCAMKL1 sejtek a regeneratív nyálkahártyájában egy gyógyító fekély. (A) Az H &E-festett metszet után 2 héttel ecetsav kezelés, amely bemutatja a regeneratív szövet a gyógyulás fekély. Skála: 1000 nm. (B) A nagyított visszatápláló nyálkahártya vázolt (a). A gradiens az epiteliális regeneráció a fekély széle (a jobb oldalon) a regenerált nyálkahártya távol fekély (bal oldali) azonosítottuk. Skála: 100 nm. (C-H) Soros szakaszai (B), megfestettük MUC5AC (C), TFF2 (d), MUC6 (E), pepszinogén II (f), H + /K + -ATP-áz (G), és PCNA (H). (I) Kettős szín immunfestés DCAMKL1 és TFF2 egy soros részében (b). Katalógusa intestinalis metaplasia és diszplázia katalógusa A besugárzott patkányok, intestinalis metaplasia tartalmazó kehelysejtet azonosított PAS-alcián Blue festéssel képződik a fundus mirigy (7a ábra). Expresszáló sejteket DCAMKL1 talált alábbi foveolar sejtek luminális rekesz a nyálkahártya, valamint a mély nyálkahártya (7b ábra, C). PCNA sejtek jelentősen megnőtt a intestinalized nyálkahártya és DCAMKL1 sejtek luminális rekesz voltak disztálisan a PCNA sejtek (ábra 7c). TFF2 expresszáló sejtek, összhangban SPEM, megjelent az alapja a intestinalized nyálkahártya (ábra 7d). PCNA sejtet találtunk proximális DCAMKL1 sejtek mélyen a intestinalized epithelialis, egy hasonló eloszlást kell, hogy a vékonybél kripta (ábra 7e f). 7. ábra DCAMKL1 kifejezést a intestinalized nyálkahártyát. (A) PAS-alcián Blue festéssel mutatja a nyálkahártya az intestinalis metaplasia tartalmazó kehely sejtek. Skála: 100 nm. (B-D) Soros szakaszok (a), megfestettük DCAMKL1 (B), DCAMKL1 és PCNA (C), és TFF2 (D). (E, f) Magnified nyílik a körvonalazott (B) és (C), ill. Scales: 10 um.
In kezelt patkányok MNNG, cisztás tágulata mirigyek diszplázia váltottuk ki a nyálkahártyában és submucosa (8a ábra). SPEM fejlődött és bővült, közel a tágult mirigyek és szegmentális kifejezése TFF2 találtak borító sejtek a mirigyek (8b ábra). DCAMKL1 ben ritkán kifejezett ezek a mirigyek (8c ábra). TFF2 és DCAMKL1 fejeztük ki különböző sejtekben, a kitágult mirigyek (ábra 8d, 8e) és PCNA is expresszáltunk a sejtekben eltérő DCAMKL1 sejtek, jelezve a proliferatív jellege a mirigyek (ábra 8f). 8. ábra DCAMKL1 kifejezést a tágult mirigyek dysplasia. (A) Egy H &E-festett rész, amely bemutatja a cisztás tágulata mirigyek. (B) bővítése SPEM. A nyilak jelzik szegmentális kifejezése TFF2 a tágult mirigyek. (C) expresszáltatása DCAMKL1 a kitágult mirigy. (D-F) Soros szakaszok a kitágult tömszelence TFF2 (d), DCAMKL1 (E) és DCAMKL1 a PCNA (F). Mérleg: 100 nm. Katalógusa Megbeszélés katalógusa A tanulmány kimutatta, hogy a DCAMKL1 expresszáló sejtek kizárólag jelen a földszoros a patkány fundus mirigy, amelyben multipotens progenitor sejtek úgy gondolják, hogy tartózkodjon [1, 3]. Kimutattuk, hogy DCAMKL1 sejtek diszkrét differenciált hámsejtek, beleértve endokrin sejtvonal. Továbbá, immun-vizsgálatok azt mutatták, hogy a DCAMKL1 fejeztük éretlen epithelialis sejtek kevés organellumok, amelyek megfelelnek a granulátum-mentes sejteket a korábban javasolt, mint vélelmezett progenitor sejtek a gyomor földszoros [3]. DCAMKL1 van koexpresszált a Musashi-1 parietális sejtek a egér gyomorban [13], mivel ez a tanulmány kimutatta, hogy DCAMKL1 sejtek elkülönült parietális sejteket, amelyek kifejezik Musashi-1 a patkány gyomor [5].
Szekvenciális változások sejtes veszteséget és helyreállítási a gyomor mirigy után felületes nyálkahártya sérülés etanollal -ról a 9. ábra tagozatára számának változásait a DCAMKL1 és PCNA sejtek 6-96 óra után az etanol kezelés patkány összhangban vannak az egér [13 ]. Ezen kívül, elemeztük korábbi változások ezekben a sejttípusokban. DCAMKL1 sejtek és PCNA sejtek lehámlott a foveolar sejtek után azonnal etanol kezelés. A lecsupaszított nyálkahártya felszínén után etanollal expozíció újra hámosod a 1-2 óra alatt gyorsan vándorló foveolar sejtek a közeli ép hám [19]. Mivel ez a korai kárpótlás alapja nem a sejtburjánzás, de a migráció, a mozgósítás az őssejtek nem szükséges. Miután egy látens időszak körülbelül 8 óra, a tört proliferatív aktivitást történt, míg 24 óra, hogy visszaállítsa a foveolae az eredeti hossz [20]. Ez az idő folyamán epithelialis proliferáció után etanol expozíció hasonló a megfigyelt a jelen tanulmányban. 9. ábra A szekvenciális változások celluláris veszteség és helyreállítási a gyomor mirigy után felületes nyálkahártya sérülés etanollal.
Egy friss jelentés azt mutatja, hogy PCNA-pozitív osztódó sejtek tartalmaznak prefoveolar sejtek [21]. A megnövekedett számú osztódó sejtek valószínűleg származik progenitor sejtek, de a folyamat a progenitor sejtek újratelepítési sérülés után homályos. Ebben a vizsgálatban, DCAMKL1 sejteket toborzott megelőzően helyreállítása szaporodó sejtek, és a szám és elosztását DCAMKL1 sejtek megváltozott majdnem egyidejűleg azok a proliferáló sejtek 24 óra elteltével. Ez a megállapítás azt jelenti, hogy DCAMKL1 expresszáló sejtek progenitor sejtek növekedését eredményező osztódó sejtek. Számos DCAMKL1 sejtek és PCNA-sejtek voltak jelen a nyálkahártya felületén a korai regenerációs időszak. Tranziens elmozdulása a progenitor zóna a felszín felé segíthet, hogy megkönnyítse a gyors és a preferenciális helyreállítása foveolar sejtek, ami a Lineage, amely a leginkább a sérült és elveszett a felületes nyálkahártya sérülések. Mivel a felvett DCAMKL1 sejtek megjelent után egy napon belül az őshonos sejteket elveszett, a repopuláló DCAMKL1 sejtek a sérült nyálkahártya vándorolnak, nem sérült mirigy vagy toborozni utóda multipotens őssejt leszármazási megy folyamatos bővülése vagy megszűnésére a fülkében [9, 22].
A folyamatok nyálkahártya rekonstrukciós és progenitor sejt újratelepítési egy krónikus mély fekély különbözött világosan azoktól akut felszínes sérülés (10. ábra). A differenciált sejtvonalak fenntartását akut felületes sérülés, míg szabályos differenciálódása nyálkahártya sejtvonal az aktív fekély zavart és a bennük rejlő sejtvonal váltották újonnan kifejlesztett nyálkahártya sejtvonalban. Parietális és vezető sejteket elveszett, foveolar hyperplasia nyilvánvaló volt, és SPEM alakult a regenerálódó hám körülvevő aktív fekély. Ezek a megállapítások utánozzák kóros elváltozásokat a különböző kísérleti modellekben által kiváltott akut vagy krónikus corpus típusú atrófia [16, 17, 23, 24]. A fekély árrés, MUC6 és pepszinogén tűnik koexpresszáljon a TFF2 a mirigy található. Ez a megállapítás alátámasztja azt a hipotézist, hogy a fő sejtek transdifferentiate hogy SPEM [17, 25], és hogy a folyamat a redifferentiation származó nyálkahártya nyak sejtek fő sejtek módosított aktív fekély. Egy másik lehetséges magyarázat, amely inkább alapul a jelenlegi eredmények, hogy SPEM származik progenitor sejtek és redifferentiates a főnök sejteket. Az a megállapítás, hogy a SPEM társul fokozott proliferáció támogatja ezt a javaslatot [16, 24]. 10. ábra elváltozásai nyálkahártya sejtvonal a margón aktív és fekélyek kezelésére.
Krónikus nyálkahártya fekélyesedés a gyomor-bél traktusban kezdeményez gyógyulási folyamatot a nyálkahártya-bázis a fekély szélén, és képes indukálni újszerű sejtvonal megfelelő SPEM [26 ]. Ezek láthatóan származhatnak multipotens őssejtek a kriptában a vékonybél és a vastagbél, mivel SPEM és osztódó sejtek tövénél a különbözet ​​a gyomorfekély távol van a normál progenitor zóna a földnyelv. A krónikus fekély modell Ebben a vizsgálatban a kifejlesztett több héttel a kezelés után, ami a migráció csontvelő-eredetű őssejteket valószínűtlen, mert megtapadásának ezen sejtek gyomor epiteliális sejtekben fordul elő, egerekben után tartós H. felis
fertőzés több mint 1 év , de nem egerekben a gyomor fekély által indukált ecetsav [27]. A jelenléte egy második progenitor népesség, kriptikus progenitor sejtek a gyomorban, már megjósolt sok éve [16, 24], de még meg kell határozni. Ebben a vizsgálatban a feltételezett progenitor DCAMKL1 sejteket találtak a szomszédságában két nyálkahártya sejt vonalból, foveolar sejtek és SPEM sejtek, in hiperplázia a fekély árrés. DCAMKL1 sejtek egymás mellé SPEM kompatibilisek a rejtélyes progenitor sejteket. A bél progenitor sejt marker Lgr5 van jelen az alapja mirigyek és nem a földszoros [7], és hogy egy őssejt populáció jelentősen nőtt a gyulladás során [6]. Feltételezzük, hogy DCAMKL1 expresszáló sejtek az alapja a gyomor mirigy a második-line progenitor lakosság, amely van maszkolva fiziológiás körülmények között. Ezek a szunnyadó progenitor aktiválni lehet a gyulladásos citokinek alatt fekély kialakulása, és döntő szerepet játszanak kezdeményezésében a gyógyulási folyamat.
DCAMKL1 sejtek és PCNA-sejtek voltak jelen közel TFF2 /SPEM sejtek a fekély árrés.

• A gén-csökkentő hatás a kromoszóma veszteségek kimutatható gyomor cancers
• Szerológiai vizsgálat gyomornyálkahártya-sorvadás a gyomor cancer