Differenciál hatásai intragasztrikus sav és a kapszaicin a gyomor kiürülését és afferens bemenetet a patkány gerincvelőben és az agytörzsben

Különböző hatásait gyomron sav és kapszaicin gyomorürülésre és afferens bemenetet a patkány gerincvelő és az agytörzs katalógusa Abstract Background katalógusa katalógusa Sósav (HCl) egy potenciális veszélyt jelent a integritását a gyomornyálkahártya és ismert hozzájárulni felső hasi fájdalom. Korábban már megállapították, hogy a gyomor nyálkahártya kihívás feleslegben HCl jelzi, hogy a patkány agytörzs, de nem gerincvelő, amint láthatóvá expressziójának c-fos hírvivő ribonukleinsav (mRNS), egy közbülső markere neuronális gerjesztést. Ez a tanulmány azt vizsgálta, hogy a gyomor nyálkahártya kapszaicin-expozíció, egy stimuláns nociceptív afferensek, amely nem károsítja a gyomor nyálkahártya, jelzi, hogy mindkét agytörzs és a gerincvelő, és hogy különbségek az afferens jelátviteli a gyomor-HCI és a kapszaicin kihívás kapcsolódnak különböző hatásai a gyomor kiürülését.
eredménye
patkányokat kezeltünk intragasztrikusan vivőanyaggal, HCI vagy a kapszaicin, aktiválás a neuronok az agytörzs és a gerincvelő tettük láthatóvá in situ hibridizációval autoradiográfia a c-fos mRNS, és a gyomor kiürülési levezethető retenciós a gyomron beadott folyadék. A járműhöz képest, HCI-oldattal (0,5 M) és kapszaicin (3,2 mm) fokozott c-fos transzkripciós a nucleus tractus solitarii tényezők 7,0 és 2,1, ill. Kapszaicin is okozott egy 5,2-szeres emelkedés a c-fos mRNS expressziójának lamina I a caudalis mellkasi gerincvelő, bár a számát a c-fos mRNS-pozitív sejtek ebben lamina nagyon kicsi volt. Így átlagosan csak 0,13 és 0,68 c-fos mRNS-pozitív sejteket megszámoltuk 0,01 mm szakaszain egyoldalú lamina I következő intragasztrikus beadás jármű és a kapszaicin, ill. Ezzel szemben, a intragasztrikus HCl nem indukált c-fos mRNS a gerincvelőben. Mérése a gyomornedv visszatartás során kiderült, hogy sósavval elnyomott gyomor kiürülését, míg a kapszaicin nem. Katalógusa Következtetés katalógusa A tanulmány megállapításai azt mutatják, hogy a gyomor nyálkahártya expozíció sósavat és kapszaicint differenciáltan továbbítják az agytörzs és a gerincvelő. Mivel csak HCl blokkok gyomorürülés, mégis azt feltételezzük, hogy a két ingerek transzdukált különböző afferens pályák. Azt feltételezzük, hogy sósavval kizárólag jelzi gyomor vagus afferens rostok mivel kapszaicint feldolgozása mind a gyomor-és bélrendszeri vagus spinalis afferensei. Katalógusa Háttér katalógusa Gyomorsav összefüggő betegségek közül a leginkább elterjedt nyálkahártya-rendellenességek a felső tápcsatornában. Arra is van bizonyíték, hogy a sósav (HCI) hozzájárul a fájdalom kapcsolódó gyomor-nyelőcső reflux és a peptikus fekély betegség, valamint nem szíveredetű mellkasi fájdalom és a funkcionális diszpepszia [1-3]. Gyomor chemonociception által kiváltott expozíció a patkány gyomor, hogy a felesleges HCi közvetíti vagus afferens neuronok, tekintettel arra, hogy a visceromotoros fájdalom válasz intragasztrikus (IG) beadása HCl eltörölte kétoldalú vagotomia, míg a visceromotoros válasz disztenzió változatlan marad [4] . Ez a megállapítás összhangban van a megfigyeléssel, hogy az IG adagolása HCI jelzi, hogy a nucleus tractus solitarii (NTS) a patkány agytörzs, a központi megszűnése terület a vagus afferensek, amint láthatóvá expressziója hírvivő ribonukleinsav (mRNS) azonnali korai gén a c-fos, míg a nem indukciós a c-fos mRNS látható a gerincvelőben [5, 6]. Hasonlóképpen, gyomor kihívás ammónium-hidroxiddal indukálja a c-fos mRNS és fehérje csak az agytörzsi, de nem gerincvelő, a patkány [7]. Bár mind a HCl és ammónium-hidroxid-sérülést a gyomor nyálkahártya koncentrációban okozó csaknem maximális fordítása a c-fos gén az NTS [7], a kapszaicin egy kémiai anyag, amely gerjeszti gasztrointesztinális afferens neuronok [8-10], anélkül, hogy kárt a patkány gyomor [11]. Ez azért van, mert a kapszaicin stimulálja az afferens neuronok által kapuzó tranziens receptor potenciál ioncsatornák a vanilloid 1-es típusú (TRPV1), amely által expresszált mind vagus és a spinális afferens neuronok beidegző a patkány gyomor és a belek [12-16].
Az általános cél e feltáró tanulmány volt, hogy megvizsgáljuk a gyomor nyálkahártya kihívást kapszaicin és a fölösleges sósavat különbözőképpen továbbítják a patkány agytörzs és a gerincvelő, és hogy az eltérés feldolgozása két inger zajlik szinten a felső tápcsatornában. Két kísérletet végeztünk, hogy ezeket a kérdéseket. Az első vizsgálatban, IG adagolt kapszaicin és HCI hasonlítottuk össze ezek hatása a kifejezés a c-fos mRNS az NTS és a caudalis mellkasi gerincvelő amely megkapja a legsűrűbb afferens bemenet a patkány gyomor [17, 18]. Ez különösen azt vizsgálta, hogy az immunglobulin adása HCI és kapszaicin egy külön hatása neuronok különleges lamináiban és magok a háti gerincvelő. A koncentrációk HCI-ot (0,5 M) és kapszaicin (0,64 és 3,2 M) teszteltük ezekhez a kísérletekhez kiválasztott korábbi kísérletek. Expozíció a patkány gyomor nyálkahártya, hogy HCI-t (0,5 M) okoz a megkülönböztető de szubmaximális indukció a c-fos mRNS az agytörzsi [5], míg IG adagolása 0,64 mM kapszaicin maximálisan hatékonyan növeli gyomornyálkahártya véráramlás egy szenzoros neuron -függő módon [19].
Mivel azt találtuk, hogy az afferens jelátviteli HCl és kapszaicin az NTS és a gerincvelő különböző, a cél a második vizsgálatban az volt, hogy megvizsgálja, hogy HCI-ot és a kapszaicin befolyása gyomor motilitás és ürítés a differenciál módon. Azt gondolta, hogy a nagyságát a c-fos választ az NTS és a gerincvelőben egyaránt függ a koncentráció a vegyi anyagok és időtartamát jelenlétük a gyomorban. Korábban már megállapították, hogy az IG adagolása felesleges mennyiségű HCI gátolja a gyomor kiürülését, és megváltoztatja intragasztrikus nyomást [5, 20]. A tanulmány megállapításai azt mutatják, hogy, ellentétben a sósav felesleget, a kapszaicin nem gátolja a gyomor kiürülését. Feltételezhető tehát, hogy a gyomor HCl kihívás kizárólag jelezte, hogy az agytörzs keresztül vagus afferensek, mert megmarad a gyomorban hosszabb ideig, mivel mind gyomor- vagus és duodenális gerincvelői afferensek reagálnak IG adagolása a kapszaicin, a kiürítését, amely a nyombélbe nem retardált. katalógusa eredményei katalógusa hatásai sósavat és kapszaicin indukálja a c-fos mRNS az NTS és a gerincvelőben (1-es vizsgálat) hotelben Amint korábban [5, 21], IG adagolása 0,5 M HCI-okozott sok idegsejtek az NTS, hogy kifejezzék a c-fos mRNS-hez képest IG adagolása fiziológiás sóoldattal. A számú c-fos mRNS-pozitív sejtek számát szakasz után tapasztaltak IG beadása HCl volt 7,0-szer nagyobb, mint után IG beadása fiziológiás konyhasóoldattal (1. ábra). A számú c-fos mRNS-pozitív neuronok számát egy NTS szakasz után megszámoltuk IG beadása jármű jellemzően magasabb lesz, mint beadása után a fiziológiás sóoldat, bár ez a hatás statisztikailag nem volt szignifikáns (1. ábra). A járműhöz képest, a kapszaicin (0,64 és 3,2 mm) a fokozott száma c-fos mRNS-pozitív neuronok számát egy NTS rész, ez a hatás koncentrációjától függően a hatóanyag. Amint az az 1. ábrán látható, csak a koncentráció a 3,2 mM kapszaicin képes volt jelentősen növelni az indukciós a c-fos mRNS-faktorral 2.1. Az eloszlás a c-Fos-mRNS-pozitív sejtek a NTS után IG expozíció HCI-oldatot (0,5 M) és kapszaicin (3,2 mm) egyenetlen volt, a legnagyobb számú aktivált sejtek előforduló ventromediális része a NTS [22]. 1. ábra a c-fos mRNS-pozitív sejt per szakasz (0,01 mm), a egyoldalú NTS meghatározva 45 perc után IG adagolása NaCl (0,15 M), HCI-oldattal (0,5 M), a jármű (Veh) és kapszaicin (KAP, 0,64 és 3,2 mM). Azt jelenti, + SEM, n jelzett. * P < 0,05 versus Veh, ** P < 0,01 versus NaCl.
Megegyeznek a korábbi megállapítások [5], az IG expozíció 0,5 M HCI nem indukált semmilyen expressziójának c-fos mRNS a dorzális felében a caudalis mellkasi gerincvelő. Így a teljes számát a c-fos mRNS-pozitív sejtek számát dorzális gerincvelő szakasz után megszámoltuk IG expozíció fiziológiás sóoldatot 1,30 ± 0,29 (n = 4) és után IG expozíció HCI 1,33 ± 0,18 (n = 4). Ez a hiánya hatását HCl is látható volt, amikor az elosztó a c-fos mRNS-pozitív sejtek LI, LII, LIII, LIV, LV, AX és IMLN után IG beadása HCI összehasonlítottuk, hogy miután IG beadása fiziológiás konyhasóoldattal ( 2A ábra). IG a kapszaicin adagolását (3,2 mm) Hasonlóképpen nem sikerült, hogy jelentősen növelje a kifejezés a c-fos mRNS a dorzális gerincvelő, tekintettel arra, hogy a teljes számát a c-fos mRNS-pozitív sejtek számát szakasz után megszámoltuk IG expozíció jármű 2,19 ± 0,32 (n = 6) és után IG kapszaicin-expozíció volt 1,94 ± 0,23 (n = 7). Eloszlásának analízise a c-fos mRNS-pozitív sejtek LI, LII, LIII, LIV, LV, AX és IMLN kiderült azonban, hogy a kapszaicin szignifikánsan 5,2-szeres növekedést a c-fos mRNS expressziójának LI, amely ment párhuzamosan egy jelentős csökkenése a kialakulását a c-fos mRNS LIII és LIV (2b ábra). Meg kell jegyezni, hogy a szint a c-fos transzkripciós nagyon alacsony volt, mint általában kisebb, mint 0,7 a c-fos mRNS-pozitív sejtek számát lamina megszámoltuk a 0,01 mm-szakaszok az egyoldalú dorzális gerincvelő (2. ábra). Emiatt a érintő kísérletek HCl és a kapszaicin szigorúan párhuzamosan futnak magukban foglaló megfelelő vezérlő /jármű oldatot (2. ábra). 2. ábra a c-fos mRNS-pozitív sejt per szakasz (0,01 mm) a különböző lamináiban és területek a egyoldalú dorzális fele a caudalis mellkasi gerincvelő meghatározva 45 perc után IG adagolása az (A) NaCl (0,15 M), HCI (0,5 M), (B) a jármű (Veh) és kapszaicin (Cap, 3,2 mmol). Az ábrák az számít laminák I-V (LI-LV), X-terület (AX) és intermediolaterális nucleus (IMLN). Azt jelenti, + SEM, n jelzett. * P < 0,05, ** P < 0,01 versus Veh. Katalógusa hatásai sósavat és kapszaicin intragastricus nyomás és a gyomornedv hasznosítás (2-es vizsgálat) hotelben A kiindulási IGP beadást megelőzően bármely médium között volt 400 és 500 Pa [20]. IG injekcióval 2 ml folyadék bolus fokozott IGP egy olyan szintre, amelynek nagyságrendje független volt attól, hogy a befecskendezett folyadék volt sóoldat, HCI (0,35 M), a jármű vagy a kapszaicin (3,2 mm) szerint meghatározott 2-3 perc az injektálás után (3A ). Ezzel szemben, az idő folyamán a későbbi csökkenés IGP függött a természet a beadott közegben. Következő sóoldat-injekciót vagy a jármű, IGP csökkent lényegesen gyorsabban, mint az injekció beadása után sósavval vagy kapszaicin, illetve (3B). Így a HCI-és kapszaicin kitett gyomor IGP szignifikánsan nem csökken a 30 perces megfigyelési periódus alatt az injektálás után, míg a NaCl- és a jármű-kitett gyomor IGP jelentősen csökkent szintje körülbelül 65% -a a IGP mért 2-3 percre az (3B). Egy másik hatása HCl volt, hogy fokozzák a gyomor folyadékretenció mint levezethető egy 100% -os visszanyerés az injektált folyadék térfogata a gyomorból 30 perccel az injekció beadása után (3C, ábra). Ezzel szemben, 30 perc a beadás után a sóoldatot, a jármű vagy a kapszaicin csak 30-60% -a az injektált folyadék térfogatát visszanyerte (3C, ábra). 3. ábra hatásai intragasztrikus injekció NaCl (0,15 M), HCI (0,35 M), a jármű (Veh) és kapszaicin (KAP, 3,2 mm) a (A) a kezdeti emelkedés intragasztrikus nyomást (IGP), (b) a későbbi időben során IGP és a (C) folyadékot visszanyerő a gyomorból. NaCl, HCl, Veh és Cap oltottunk, mint 2 ml-es kapszulában. A bemutatott értékeket panel A képviselik IGP elérte 2-3 percre az. Az IGP mért értékek időszakok alatt 9-10 percig, és 29-30 percig az injektálás után (B panel) a százalékában fejezzük ki a kezdeti IGP emelkedés felvett 2-3 perc az injektálás után, és a gyomor térfogat hasznosítás (C panel ) mért után 30 perccel bolus injekciót százalékában kifejezve az injektált térfogat (2 ml). Azt jelenti, + SEM, n = 6-13. ** P < 0,01 versus IGP mért 2-3 percre az; ++ P < 0,01 versus NaCl.
Megbeszélés
Az eredmények a jelenlegi tanulmány azt mutatják, hogy az IG adagolása sósav és kapszaicin patkányoknak generál differenciál bemenet az NTS és mellkasi gerincvelőt, amely kapcsolatban van a differenciális hatása a gyomor kiürülését. A korábban leírtak szerint [5, 7], a gyomor jelzést, hogy az agytörzs és a gerincvelő tettük láthatóvá kifejeződése indukálható gén c-fos mRNS szinten, egy módszert, hogy megállapítást nyert, mint a standard eszköz funkcionális neuroanatómiáját felvázolni az inger -evoked aktiválását neuronok [23, 24]. Transzkripció a c-fos gén belül megkezdődik perc után neuronális gerjesztést [23, 24], és az NTS úgy tűnik, hogy a maximális 45 perc után a gyomor HCl kihívás [5]. Bár a kitettség HCI-t (0,35-0,7 M) indukál gyomornyálkahártya sérülés a koncentráció függő módon, bizonyíték van arra, hogy az afferens jelzés a gyomor HCl kihívás nem közvetlenül kapcsolódik a kialakulását nyálkahártya sérülése, mert a kifejezés a C- fos gén az NTS stimulálható IG koncentrációjú HCI-indukáló kevés, ha egyáltalán, az epiteliális károsodás [5, 7]. Ez tehát az a hipotézis [5, 7], hogy a tömeges növekedése a H + ion gradiens a gyomor nyálkahártya barrier önmagában elegendő ahhoz, hogy H + ionok a lamina propria ahol gerjeszti vagus afferens idegrostok akár közvetlenül [25, 26] vagy közvetve neuroaktív kibocsátott faktorok a szövetben.
a topográfiai eloszlása ​​a c-fos mRNS-pozitív sejtek a NTS egyenetlen volt, de hasonló után IG beadása HCl és kapszaicin. Amint korábban kimutatták immunhisztokémiai [22], a legmagasabb számú HCl-aktivált neuronok volt látható a ventromediális része a NTS. Eltekintve vagus gyomor bemenet [27], ez a terület a NTS is kap bemenetet gerincvelő lamina I-neuronokban a spinosolitary traktusban [28-30]. A relatív hozzájárulását a vagus és a gerincvelő bemenetek ezt a részét a NTS következő kémiai ingerlés a gyomor még nem határozták meg.
A jelen tanulmány megerősíti, hogy a túlzott gyomorsav HCI nem indukálja a c-fos mRNS és a c-Fos fehérje a hátsó szarv hátsó mellkasi gerincvelő [5, 7], amely megkapja a legsűrűbb bemeneti afferens neuronok beidegző patkány gyomor [17, 18]. Hasonló megállapításokat tettek expozíciót követően a patkány gyomornyálkahártya ammónium-hidroxid [7]. Így úgy tűnt, mintha a gyomor kihívást ártalmas vegyi jelzi vagus afferens rostok csak egy sejtés, hogy elutasította a jelenlegi megállapítás, hogy afferens bemenet a kapszaicin kitett gyomor küldött mind a gerincvelő és az agytörzs. Ez az eredmény összhangban van a TRPV1 kifejeződését, a kapszaicin receptor, mind vagus afferens neuronok és a gerincvelő beidegző patkány gyomor-bél traktusban [12-16]. Retrográd nyomkövetés azt mutatja, hogy a 80 és 71% -a a csomós és dorzális gyökér ganglion neuronok ellátó patkány gyomor, illetve kifejezni TRPV1 [16]. Amikor közvetlenül alkalmazni a sejttestekkel, kapszaicin gerjeszti 90% -a a dorzális gyökér ganglion neuronok és 59% -a a csomós ganglion neuronok kiálló hogy a patkány gyomor [31]. Míg TRPV1 könnyű felismerni a csomós ganglionok szintjén TRPV1 expresszió legtöbb vagus afferens idegrostok a gyomor alatti immunhisztokémiai kimutatása küszöb [12]. Ez például megmagyarázhatja, hogy miért IG a kapszaicin adagolását indukálja viszonylag kis expresszióját c-fos mRNS az NTS. Nem gondoljuk, hogy a kis kapszaicin annak köszönhető, hogy a nem megfelelő adagolás, mert korábban már megállapították, hogy az IG adagolása 0,64 mM kapszaicin maximálisan hatékonyan növeli gyomornyálkahártya véráramlás egy szenzoros neuron-függő módon [19].
, például HCI, adagolt kapszaicin a patkány gyomor nem jelentősen javítja az általános kifejezés a c-fos mRNS a dorzális felében a hátsó mellkasi gerincvelő. Mindazonáltal a regionális elemzés kimutatta, hogy a kapszaicin okozta neuronok a felületes lamina I a dorzális szarv, hogy kifejezzék a c-fos mRNS, amely hatás nem volt látható következő IG beadása HCI. Ez a megállapítás kapott kapszaicin összhangban van a vetülete zsigeri afferens neuronok lamina I és a felületes része lamina II, valamint a lamina V. és X-terület a patkány és a macska gerincvelőben [17, 32]. Adataink azt mutatják, hogy a kapszaicin adagolását a gyomor lumenbe aktiválja a szenzoros neuronok, hogy a projekt elsősorban a lamina I a gerincvelő. Tekintettel erre a megállapítás, hogy lehet kizárni, hogy a c-fos-expresszió egy nem megfelelő módszer, hogy szemléltesse kemoreceptor származó jelzésre a gyomor lumene a gerincvelő, és hogy a hiba a gyomor HCl kihívás indukálni c-fos mRNS a gerincvelőben képvisel hamis negatív eredményt. Bár a neurális érzékelők, amelynek során a felesleges HCi-érzékel az gyomor lumenbe nem ismertek, akkor elképzelhető, hogy mind a TRPV1 és a sav-érzékelő ioncsatornák (ASIC), mint például ASIC3 van szó [33]. Mivel mind a TRPV1 és ASIC3 fejezzük többségével hátsó gyöki ganglion neuronok ellátó patkánygyomorra [16], nem tűnik valószínűnek, hogy az IG HCI nem indukálja a c-fos mRNS a gerincvelőben, mert az illető afferensei nem hordozza a megfelelő sav érzékelők.
számához képest expresszáló neuronok c-fos mRNS az NTS, a szám a c-fos mRNS-pozitív neuronok 0,01 mm-szakaszok a gerincvelő nagyon kicsi volt. Ez valószínűleg azt tükrözi, hogy az afferens bemenet a patkány gyomorból a gerincvelő csekély képest a gerinc bemeneti szomatikus szövetekkel és hogy elektrofiziológiailag jellemezve spinális afferensek alig beidegző nyálkahártyáján a gyomor-bél traktus [34, 35]. Az alacsony c-fos transzkripciós a lamináiban dorzális gerincvelő kötelezővé tette futtatni a érintő kísérleteket HCl és kapszaicin szigorúan párhuzamosan azokat, amelyek a megfelelő vezérlő /jármű megoldás. Feltételezzük, hogy a látszólag eltérő eloszlása ​​a c-fos mRNS-pozitív sejtek a dorzális gerincvelő kontroll patkányok, amint az a két panel a 2. ábra, lehet, hogy nem csak tükrözik közötti kísérlet variabilitás, hanem a különböző jellegű a kontroll /jármű oldat: míg a jármű HCl volt fiziológiás sóoldat, a jármű kapszaicint tartalmazó sóoldattal etanol és Tween 80
a hatás a IG kapszaicin, hogy növelje a c-fos mRNS-indukció lamina I a gerincvelő társult jelentős csökkenése a c-fos mRNS expressziójának lamináiban III és a IV. Jelenleg nincs semmilyen egyenes előre magyarázat erre a megfigyelés. Mivel laminák III és IV nem úgy tűnik, hogy a bemenetét közvetlenül a zsigereket [17, 32], azt feltételezzük, hogy a csökkentés a c-fos mRNS képződését ezeken lamináiban közvetett kapszaicin. Elképzelhető, zsigeri afferens bemenet lamina I neuronok aktiválja gátló pályák, hogy lenyomja az ingerlékenység lamina III és IV neuronok.
A afferens jelátviteli gyomornyálkahártya kapszaicin-expozíció és a felesleges HCi határozza meg nem csak a koncentráció a káros kémiai, de által is időtartamát jelenlétét a gyomor lumenbe. Azt már korábban tapasztaltuk, hogy, viszonyítva a sóoldat, az IG adagolása HCl altatott patkányok meghosszabbítja folyadék-visszatartás a gyomorban és a késedelmek adaptációja IGP [7, 20]. HCl-indukált gyomor folyadék-visszatartás eredménye gátlását gyomorürülés és a fokozott gyomornedvben, hidrogén-karbonát és a nyálka szekréció [20, 36], de elemzése a gyomortartalom volt túlmutat a jelen tanulmány. HCl-kiváltott gátlását gyomorürülés közvetíti idegi reflexek, amelyek kezdeményezett mind a gyomorban és a nyombélben [20, 37-40]. A koncentráció HCi teszteltük annak gastropyloric motoros hatásokat altatott patkányokban csökkent, 0,35 M, mert érzéstelenítés gyengíti a gyomor nyálkahártya akadályát HCI-ot és az IG koncentrációja HCI-ot (0,5 M) vizsgáltuk annak hatása a központi c-fos-expresszió indukál kiterjedt sérülés altatott patkányokban, de okoz kisebb gyomor kárt éber állatokon [5]. Mivel a kísérletek azt mutatták, gyomor- expozíció sósavat és kapszaicin módosított gastropyloric mozgékonyságát differenciál módon. Míg a gyomor ürülését blokkolta HCI de maradt változatlan, a kapszaicin, adaptációja IGP megakadályozta mind HCl és a kapszaicin. A kapszaicin, hogy késleltesse IGP alkalmazkodás lehet kapcsolatos, hogy képes indukálni kontrakció vagy pihenés a patkány gyomor izomzat a típusú válasz a dózistól függően a kapszaicin és a gyomor régió és az izom réteg alatt tanulmány [19, 41-43 ].
tekintettel a eltérő hatása IG-HCI és a kapszaicin gerinc c-fos-expresszió volt különösen fontos megjegyezni, hogy ellentétben HCI, a kapszaicin nem növelné gyomor- folyadékot visszanyerő, ami azt jelenti, hogy a gyomor kiürülését bekövetkezett sértetlen és IG adagolt kapszaicin gyorsan bejut a felső vékonybélben. Ezért azt állítani, hogy a kapszaicin által kiváltott c-fos választ az NTS, ami kisebb volt, mint a HCl és a gerincvelő miatt kapszaicin által kiváltott gerjesztése mind gyomor- és bélrendszeri afferens, mivel a serkentő hatása HCI többnyire csak a gyomor afferens. Az a tény, gyomor HCl kihívás indukálni c-Fos expresszió a gerincvelő nem magyarázható a jelentett képességét vagus afferensek aktiválása leszálló pályák és ezáltal gátolják afferens bemenetet a gerincvelő [44, 45], mert a kétoldalú krónikus vagotomia sikertelen hogy bárminemű növekedését gerinc c-fos mRNS indukció miatt a gyomor HCl kihívás [5]. Vannak más módon megmagyarázni a differenciális képességét IG sósavat és kapszaicin indukálja a c-fos mRNS az NTS és a gerincvelőben, de az elemzés e tényezők volt túlmutat a jelen tanulmány. Például, bizonyíték van arra, hogy a kapszaicin kevéssé szívódik fel a gyomor falán [19], ami azt is megmagyarázza, hogy miért IG adagolt kapszaicin viszonylag gyenge stimuláló gyomor vagus afferens rostok kiálló az NTS, míg kapszaicin szállítják a vékonybél felső szakaszán lehet több könnyen elérheti és serkentik gerincvelői afferens idegvégződések a bél lamina propria.
köszönhetően feltáró jellegű, a jelenlegi tanulmány megvannak a maga korlátai. Így a differenciális hatása IG adagolt kapszaicin és a HCl a vagus és a spinális afferens pályák valószínűleg függ nemcsak a gyomorürülés sebessége és az abszorpciós kinetikája-HCI és a kapszaicin, hanem a mértéke nyálkahártya sérülések és nagysága nyálkahártya vér folyam. Míg a integritását a gyomornyálkahártya zavarja csak HCI [5, 7, 46], de nem kapszaicin [11], a gyomor nyálkahártya véráramlását emelkedett mindkét kapszaicin [19] és backdiffusing HCI [46].
Következtetés
Gyomor kihívás, sósavval és kapszaicint differenciáltan jelezte, hogy a NTS és a gerincvelő, amely azt jelzi, hogy a két inger által feldolgozott eltérő nociceptív afferens pályák. Mivel HCI gátolja a gyomor kiürülését, mivel a kapszaicin nem, akkor arra következtetni, hogy a HCI-kiváltotta afferens bemenetet a NTS által továbbított vagus afferensek a gyomorban, míg a aktiválása NTS és a gerincvelő lamina I neuronok kapszaicin közvetíti mind vagus afferensek a gyomor és a gerinc afferensek a felső vékonybélben. További kísérletezés szükséges meghatározni, hogy ezek a megállapítások a gyomor chemonociception. Egyetértésben a c-fos adatok, fájdalomérzékelés által kiváltott túlzott gyomorsav HCI közvetítik vagus afferens neuronok [4], és azt várja, hogy a vizsgálandó ami afferens pályák relé nocicepciót által kiváltott gyomor kapszaicin. Mechanonociception által kiváltott puffadás a gyomor által előidézett spinális afferens [4], bár kifejezése c-fos látható mind a gerincvelő és az, hogy nagyobb mértékben, az agytörzsben [47]. Katalógusa Módszerek
Állatok
jóváhagyta a vizsgálatot etikai bizottság a Szövetségi Oktatási, Tudományos és Kulturális Osztrák Köztársaság és vezeti az irányelv szerint az Európai Közösségek Tanácsa november 24, 1986 (86/609 /EEC) . A kísérleteket kialakítva oly módon, hogy a felhasznált állatok számát és azok szenvedése minimalizálható. Nő korban hozzáillő Sprague-(Abteilung für Labortierkunde und -genetik, Bécsi Orvostudományi Egyetem, Himberg, Ausztria) darabonként 180-220 g-ot használtunk. Az állatokat négyes csoportokban műanyag átlátszó ketrecekben standard körülmények között; lámpa égett, 6:00, amíg 06:00. katalógusa Kísérleti protokollok Tanuld az összes kísérlet zajlott a világos fázisban 8:00-00:00. Húsz órával megelőzően kezdődik A kísérletek a patkányokat táplálékot annak érdekében, hogy a gyomor üres volt, mire a kísérletek, míg a víz volt ad libitum áll rendelkezésre ez alatt az előkészítő fázisban. Ezen felül, a patkányokat helyeztük csoportok két a padlóra rács, hogy megakadályozzák coprophagy. Két tanulmány a különböző kísérleti protokoll végeztük. Katalógusa 1. vizsgálat zajlott a nem altatott állatok. Fiziológiás sóoldatot (0,15 M NaCl), HCI-oldattal (0,5 M), a kapszaicin (0,64 és 3,2 mm), vagy annak hordozóanyagot adagoltunk IG térfogatban 10 ml /kg keresztül egy puha csecsemő etetése cső (külső átmérő 2,2 mm; Portex, Hythe , UK). 45 perc elteltével a patkányokat leöltük intraperitoneális injekcióval túladagolt pentobarbitállal (200 mg /kg; Intervet, Bécs, Ausztria), és azok az agytörzs és a gerincvelő gyorsan eltávolítjuk. A kapszaicin (Sigma, Bécs, Ausztria) feloldunk egy tápközegben, amely 10% Tween 80-at, 10% etanol és 80% fiziológiás sóoldat, így törzsoldatokat a 2 és 10 mg /ml-es (6,4 és 32 mm) kapszaicint tartalmaz. Ezeket a törzsoldatokat ezután hígítjuk fiziológiás sóoldattal, hogy teszt-oldatok 0,64 és 3,2 mM kapszaicin, ill. A jármű kapszaicin állt 1% Tween 80-at, 1% etanol és 98% fiziológiás sóoldat.
2. vizsgálat végeztük állatok altattunk fenobarbitál (230 mg /kg intraperitoneálisan; Sigma), és helyezzük egy termosztált táblázatot megtartják a rektális hőmérséklet 37 Celsius-fokon [20]. A patkányokat ezután ellátott tracheális kanült spontán légzés elősegítésére. A kanül a bal nyaki vénába használtunk folyamatos infúzió fiziológiás konyhasóoldattal (1,5 ml /óra), hogy elkerülje a kiszáradást. Miután egy középvonal laparotomiát egy IG katéter (külső átmérő: 2,2 mm) helyeztünk a gyomorban keresztül a nyelőcső, valamint a gyomor átöblítjük [20]. A Tip van elhelyezve a corpus régió, a katétert rögzítésére használt gyomron belüli nyomás (IGP) keresztül egy nyomás-jelátalakító, valamint a beadni folyadékot és a csatorna azt a gyomorban [20]. Ez a módszer a IGP mérés leírták és jóváhagyott egy korábbi vizsgálatban [20]. Egy kiegyenlítődési időszak leteltével 30 perc, 2 ml-es folyadék bolus lassan injektáljuk a gyomor alatt 5 s, és elhagyta a gyomorban egy 30 perces időtartamra, ami után a gyomor leszívattuk, és a súlya a visszanyert folyadék meghatározva . A helyreállítási folyadék a gyomor (indirekt mérésére alkalmas gyomorürülés) volt százalékában kifejezve a súlya a beadott folyadék a gyomorba [20]. Mindegyik patkány vetjük alá 4 injekciós /hasznosítási kísérletek időközönként 15 perc, amely alatt a gyomor üres. Először is, a két alapozó kísérletek sóoldattal végeztük, amelyet vagy egy teszt próba sóoldattal és egy teszt próba HCI-oldattal (0,35 M), vagy egy teszt vizsgálatban a jármű és egy teszt próba kapszaicinnel (3,2 mm). IGP átlagoltuk az időszakok 2-3 perc, 9-10 percig, majd 29-30 percre az. Mivel a korábban leírtak szerint [20] a csúcs emelkedik a IGP injekció utáni változatos eltérései miatt injekció sebesség, a IGP átlagolt időszaka alatt 2-3 perc az injektálás után vettük 100%, és az IGP során rögzített ezt követő megfigyelési időszakok százalékában kifejezve az adott referenciaértéket.
In situ hibridizáció autoradiográfia katalógusa Az agytörzs és a gerincvelő gyorsan eltávolítottuk, és fagyott porított szárazjéggel. Koronális metszeteket (0,01 mm) vágtunk sorozathígítást a agytörzsben a rostrocaudális kiterjesztése a area postrema és a caudalis mellkasi gerincvelő egy kriosztát [5, 6, 22]. Minden hatodik szakasz feldolgoztuk in situ hibridizáció egy oligodezoxiribonukleotid szondával jelzett a 3 'végén [ 35S] dezoxiadenozin 5' (α-tio) trifoszfát korábban leírtak szerint [6]. A metszeteket mártott Ilford K5 fotóemúlzió és után 18-25 napos expozíció lezárt dobozokban 4 Celsius fok, a autoradio fejlett és a szakaszok kontrasztfestést hematoxilinnel és lefedtük [6]. A sajátossága az eljárás bizonyítja hiányában hibridizációs jelet, amikor a kontroll metszeteket hibridizáltuk keverékével jelölt próba egy 100-szoros feleslegben nem jelzett ( "hideg") próbával.
A autoradiogramokat vizsgált kódolt módon egy könnyű mikroszkóp (Axiophot, Zeiss, Oberkochen, Németország) kapcsolt olyan számítógépes képanalizáló rendszerrel (Imaging, St. Catharines, Ontario, Kanada). A sejteket tekinthető a c-fos mRNS-pozitív, amikor a gabona sűrűsége legalább 10-szer magasabb, mint a háttér [6]. Annak érdekében, hogy fokozza a megbízhatóság a kvantitatív eredmények, 5 agytörzs szakaszok és 7-10 gerincvelő szakaszok minden állatból értékeltük. Ezeket a metszeteket választjuk meg, hogy azok 0,05 mm távolságra egymástól oly módon, hogy elkerüljék, hogy ugyanazt a sejteket megszámoltuk kétszer. A c-fos mRNS-pozitív sejtek számát szakasz megszámoltuk egyoldalúan az NTS szintjén posztremális területén és a dorzális felében a gerincvelő, a caudalis mellkasi szint (T8-T12). Ezek a struktúrák azonosítottuk szerint Molander és Grant [48] és Paxinos és Watson [49]. A dorzális felében a gerincvelő, az elosztó a c-fos mRNS-pozitív sejtek laminák IV (Li-LV), X-terület (AX) körül a központi csatorna és a intermediolaterális mag (IMLN) szerint értékeltük a patkány gerinc cytoarchitecture által leírt Molander et al. [50] és Molander és Grant [48].

• Emésztőrendszeri daganatok a gyomor utánozva májtumor: egy esetben report
• Új módszere, epeúti rekonstrukció egy elszigetelt gyomorszonda egy vascularized kocsány: élő állat kísérleti vizsgálata és az első klinikai case