PLoS One: A probiotikus keverék VSLFelgyorsítja gyomorfekély gyógyítás stimulálásával vascularis endothelialis növekedési faktor

absztrakt katalógusa

Tanulmányok hatásának értékelésekor és mechanizmusa probiotikumok betegség a tápcsatorna felső (GI), beleértve a gyomorfekélyt korlátozódnak ellenére alapos munkát és ígéretes eredményei a terápiás lehetőséget más GI betegségek. Ebben a tanulmányban azt vizsgáltuk, a mechanizmusok, amelyek a probiotikus keverék VSL(keveréke nyolc probiotikus baktériumok, beleértve Lactobacillus katalógusa, Bifidobacterium katalógusa és Streptococcus katalógusa faj) gyógyít ecetsavval indukált gyomorfekély patkányon. VSLorálisan alacsony (6 × 10 ^{9 baktériumok) vagy magas (1,2 × 10 10 baktériumok) adagolva 3. nap után fekély indukció 14 egymást követő napon át. VSLkezelés szignifikánsan fokozta a gyomorfekély gyógyulását dózis-függő módon. Annak megállapítására, a mechanizmus (ok), amely szerint a VSLgyakorolt ​​védő hatását számszerűsítettük a gén expresszióját számos proinflammatorikus citokinek, fehérje és expressziója gyomor mucin-Muc5ac, szabályozó citokin IL-10, a COX-2 és különböző növekedési tényezők. Az összes komponens vizsgált, csak expresszió és protein-termelődés VEGF növekedett 332-szeres a 7. napon, a fekélyes szöveteiben kezelt állatok VSL. Megjósolható, kezelt állatok VEGF semlegesítő ellenanyag szignifikánsan késleltette a gyomorfekély gyógyulását VSLkezelt állatokban. Ez az első, mely kimutatta nagy hatékonysággal probiotikus keverék VSLfokozza a gyomorfekély gyógyulását. Probiotikus hatásosság hatásos volt nagyobb koncentrációban VSLáltal specifikusan növeli a expresszióját és termelését az angiogenezis előmozdításában növekedési faktorok, elsősorban a VEGF.}

bevezető hivatkozás: Dharmani P, De Simone C Chadee K (2013) a probiotikum Keverék VSLFelgyorsítja gyomorfekély gyógyítás stimulálásával vascularis endothelialis növekedési faktor. PLoS ONE 8 (3): e58671. doi: 10,1371 /journal.pone.0058671 katalógusa

Vágó: John Wallace, McMaster University, Kanada katalógusa

Beérkezett: október 29, 2012; Elfogadva: február 7, 2013; Megjelent: március 6, 2013 katalógusa

Copyright: © 2013 Dharmani et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka támogatott a támogatás a kanadai Institute for Health Research (CIHR, KC). PD finanszírozta a Kanadai Egyesület Gastroenterology-Axcan Pharma-CIHR Kutatási és Fellowship Award. A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők az alábbi érdeklődés. PD finanszírozta a Kanadai Egyesület Gastroenterology-Axcan Pharma-CIHR Kutatási és Fellowship Award. Ez nem változtat a szerzők betartása minden PLoS One politikák adatok megosztása és anyagok. Katalógusa

Bevezető katalógusa

Gyomorfekély gyógyulás spontán, bonyolult sor különböző mechanizmusok összedolgozni, hogy korrigálja az egyensúlyhiányt az agresszív (pl sav, pepszin, gyulladásos citokinek és Helicobacter pylori katalógusa) és a védekező tényezők (pl nyálka, bikarbonát, a vér áramlását és növekedési faktorok) a gyomorban [1]. A folyamat során enyhítése agresszív luminális tényezők, kitöltve a nyálkahártya-defektus a proliferáló és vándorló hámsejtek és kötőszöveti komponens oly módon, hogy rekonstruálni a nyálka felépítését [2]. Mi és mások [3], [4], [5] kimutatták, hogy a hatékonyság és a feltételezett mechanizmus a különböző gyógyszerek és gyógynövények erősítésében a folyamat spontán fekély gyógyulását különböző in vivo katalógusa gyomorfekély modellek. A vizsgálatok azonban hatásának felmérésekor probiotikumok betegség a tápcsatorna felső (GI) és különösen gyomorfekély korlátozottak ellenére jelentős munka és ígéretes eredményei a terápiás lehetőséget más GI betegségek, beleértve a gyulladásos bélbetegség [6], [ ,,,0],7], [8], [9]. katalógusa

a probiotikumok olyan élő mikroorganizmusok, amelyek amellett, hogy a tápláló értéke ajándékozni számos egészségügyi előnyt, ha biztosított bőséges mennyiségben. VSLegy probiotikus készítmény keverékét tartalmazó nyolc baktériumfaj, négy faj Lactobacillus katalógusa ( acidophilus katalógusa, bulgaricus katalógusa, casei katalógusa, plantarum katalógusa), három faj Bifidobacterium katalógusa ( breve katalógusa, infantis katalógusa, longum katalógusa) és egy Streptococcus
faj, amelyről kimutatták, hogy klinikailag hatékony megelőzése fellángolási refrakter pouchitis [8], és vezet a elengedése colitis ulcerosa [9]. Korábban már kimutatták, hogy a VSLvagy szekretált termékeket hatásos vastagbél mucin szekretagógok in vitro
humán vastagbél epiteliális sejtekben és a vastagbél-hurok állatmodell-vizsgálatok [10]. A hatás azonban a probiotikus kezelés akut gyomor okozott károkat a gyomorfekély nem jól feltárt. Az elsődleges oka, hogy a bél egy sereg kedvezőtlen fiziológiai feltételek, mint a savas pH, emésztő enzimek, epesav és a mechanikai igénybevétel, amely tompítja az túlélését és növekedését a probiotikus mikroorganizmusok. Azonban a kezelés bőséges mennyiségű többszörös probiotikus mikroorganizmusok leküzdésére ezt a korlátozást. Van néhány beszámoló az egyes probiotikus baktériumok, beleértve Lactobacillus rhamnosus katalógusa [11], L. gasseri katalógusa [12], L. acidophilus katalógusa [13] és a Bifidobacterium katalógusa [14] ellen védelmet biztosítani a gyomorfekély előmozdításában fekély gyógyulását különböző in vivo katalógusa fekély modellek. A vizsgálatok azonban a hatás probiotikus baktériumok fokozásáról H. pylori katalógusa felszámolására voltak következetesek saját megállapításai [14], [15]. Egy nemrégiben készült tanulmány kimutatta, hogy a megfelelő kiegészítés g 8 probiotikumok törzsek lehet kiirtani H. pylori katalógusa [16]. Jelenleg, még nem ismert, hogy a kevert probiotikus baktériumok hatékonyabbak, mint az egyes törzsek előmozdításában fekély gyógyulását. A jelen tanulmányban azt vizsgáltuk, hogy a celluláris mechanizmusokat, amelyek során a VSLprobiotikus keverék kiegészített gyomorfekély gyógyulását patkányokban. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

Állatok katalógusa

A hat hetes hím Sprague-Dawley patkányokat közötti tömegű 150 és 200 g (Charles River, St. Constant, Québec) adtunk ketrecekben 2 per csoport állandó szobahőmérsékleten, 12-H világos és sötét ciklusokat, és tápláltunk szabványos rágcsáló tápot és vizet ad libitum katalógusa. Követően 7 napos akklimatizációs időszak a patkányokat véletlenszerűen kísérleti és kontroll csoportok indukálására gyomorfekély. Az állatkísérletek etikai bizottsága, a University of Calgary jóváhagyta a vizsgálatot. Katalógusa

Kísérleti elrendezés katalógusa

hatásának vizsgálatára VSLprobiotikus keverék gyomorfekély gyógyulását és enyhítése támadó lumen tényezők (pro -inflammatory citokinek) és előmozdítása citoprotektív defenzív faktorok (szabályozó citokinek, mucin és a növekedési faktorok), patkányokat osztottunk három kísérleti csoport. Controls állatokat kezeltük a jármű után, fekély indukció és két másik csoportok kaptak alacsony (6 × 109 baktérium /állat /nap) vagy magas (1,2 × 1010 baktérium /állat /nap) adagot VSL. Az állatokat áldoztak a 3. napon, 7 és 14, a jármű vagy VSLkezelés (a logika, lásd a gyomorfekély indukció és VSLkezelés). Összesen 18 állatot használunk minden egyes időpontban ( N
= 6 az egyes kísérleti /időpont), és a vizsgálatot három párhuzamossal végzünk. Annak vizsgálatára, az anti-vaszkuláris endoteliális növekedési faktor (VEGF) a gyomor fekély gyógyulását, neutralizáló antitestek ellen VEGF használtunk. Ebben a kísérletben négy csoportot használtunk. Miután fekély indukció, a kontroll csoport kezeltük csak vivőanyaggal. A kezelési csoportok olyan kezelt patkányok semlegesítő VEGF antitest egyedül, patkányok, hogy megkapta a nagy dózisú VSL(1,2 × 1010 baktérium /állat /nap), valamint egy vezérlő IgG antitest és a patkányok, hogy kapott nagy dózisú VSL(1,2 × 1010 baktériumok /állat /nap) együtt semlegesítő VEGF antitestek. Az antitesttel kezelt csoportban (IgG és neutralizáló VEGF antitest) kaptak antitestek dózisban 10 mg /ttkg (a logika, lásd a VEGF-neutralizáló ellenanyag-kezelés). Az állatokat leöltük nyaki diszlokáció a 3. napon, 7. és 14. következő anti-VEGF kezelés. Összesen 24 állatot használunk minden egyes időpontban (n = 6 az egyes próba /időpont).

gyomorfekély kiváltása és VSLkezelés

A krónikus gyomorfekélyt voltak kísérletileg kiváltott patkányokban a korábban leírtak [17]. Anesztézia alatt pentobarbiton (35 mg /testtömeg-kg, i.p.), a has nyitotta meg középvonali bemetszéssel. A műanyag cső a 6 mm, nyitott mind a végén alkalmazták szorosan a serosa felülete elülső falát a gyomor csak proximális antrum mirigy területen. Felületére gyomor, 60 ul 40% -os ecetsav öntöttünk egy csövön keresztül 90 másodpercig. Ez a termelt azonnali elhalása a teljes nyálkahártya és al-nyálkahártya a területen belül, ahol az ecetsavat alkalmazva. Ecetsav a felületen maradó ezután letörölni steril szűrőpapíron, és a megnyitott has zárva volt. Korábban már kimutatták, hogy ez az eljárás termel szövettanilag jól jellemzett fekélyek után 3 napon belül ecetsav expozíció és gyógyít 3 héten belül teljesen perforáció nélkül, vagy behatolás a környező szervek [3] - [4].

kezelése VSLalacsony (6 × 10 ^{9 baktérium) és a magas dózisok (1,2 × 10 10 baktériumok) került eredményei alapján az előzetes vizsgálatok segítségével öt különböző adagokat VSL(1,5 × 10 9, 3 × 10 9, 6 × 10 9, 1,2 × 10 10 és 2,4 × 10 10 baktérium /állat /nap esetében). VSLdózisa 1,5 × 10 9 és 3 × 10 9 baktérium /állat /nap nem találtak hatékony elősegítésében gyomorfekély gyógyulását, miközben a hatás a dózis 2,4 × 10 10, baktériumok /állat /nap gyomorfekély gyógyulását nem volt lényegesen eltér a 1,2 × 10 10 baktérium /állat /nap (ábra S1). Kezelés VSL-ben kezdődött, amikor a fekélyeket teljesen kifejlődött a 3. napon lép ecetsav adminisztráció; ezt úgy tekintették, mint az 1. napon a kezelés a következő 14 napban. A pH értékét a különböző koncentrációjú VSLvolt 7,0. Az állatokat leöltük a 3. napon, 7. és 14. következő VSLkezelést. A fekélyes és nem-fekélyes terület minden egyes állat öblítjük jéghideg foszfáttal pufferolt sóoldattal jégre helyeztük és három keresztmetszetek gyűjtöttünk. Két keresztmetszetek voltak lefagyasztottuk folyékony nitrogénben, és -70 ° C-on az RNS izolálás és fehérje készítmény. Harmadik keresztmetszet azonnal rögzített 10% -os semleges pufferelt formalinban szövettani elemzés. Katalógusa}

felmérése fekély méretét százalékos gyógyulást és a szövettani vizsgálat katalógusa

A teljes fekély terület és százalékos a fekély gyógyulását különböző időpontokban tegye kezeléseket értékelték patkányoknál gyomorban a vágás a nagyobb görbület mentén, és a fekély (mm ^{2) terület mérjük. Két különböző egyének mértük a fekély terület egy vak elrendezésben. A százalékos gyógyító számítottuk ki:}

Szövettani vizsgálatok szerint végeztük a korábban leírt módszer [18]. Röviden, a fekély kráter egyes gyomrot szekcionált ki, és éjszakán keresztül rögzítettük 10% -os semleges, pufferolt formalin, majd dehidratáljuk fokozatosan etanolban és paraffinba ágyaztuk, felhasználva neoclear köztes oldószerben. Szakaszai 6 um kaptuk automatizált mikrotomot. Fekélyes metszeteket hematoxilinnel és eozinnal (H &E) szövettani értékelés során a gyógyulást. Mikroszkópos, H &E szöveteket számoltak mutatja: egy normális megjelenés, enyhe beszűrődés a gyulladásos sejtek be a lamina propria nyálkahártya, akár nem, vagy csak sekély erózió, vagy mély eróziót és fekélyesedést.

kvantitatív valós idejű PCR-analízis

kvantitatív valós idejű PCR-elemzést végeztünk, hogy értékelje változások a gének expresszióját kódoló szekréciós mucin (Muc5ac), a ciklooxigenáz-2 (COX-2), pro-gyulladásos (TNF-α és IL 1β) és szabályozási (IL-10 és a TGF-β) citokinek és vaszkuláris endoteliális növekedési faktor (VEGF), a transzformáló növekedési faktor-β (TGF-β) és az epidermális növekedési faktor (EGF). Teljes RNS-t extrahálunk fekélyes és nem-fekélyes szövetet Trizol reagens (Invitrogen). A hozam és tisztasága az RNS-t határoztuk meg spektroszkópiai elemzést. 2 ug RNS-t reverz transzkripcióval használatával M-MLV reverz transzkriptáz (Invitrogen), mint egy gyártó utasításai alapján. Egy mikroliter cDNS-t használják a valós idejű PCR (Corbett Research). Valós idejű használt primerek a specifikus lágyítási hőmérséklet táblázat 1. amplifikációkat végeztük Qiagen által QuantiTect SYBR Green PCR készlet segítségével a következő ciklus körülményei: 94 ° C-tartsa 15 percig, majd 40 ciklus követett denaturálással 94 ° C-on 20 s, lágyítás megfelelő hőmérsékleteken 30 s és kiterjesztés 72 ° C-on 30 másodpercig. Sajátosságai erősítés ellenőriztük olvadék analízis. Az mRNS expresszióját különböző gén normalizálását GAPDH, és hajtsa átállás szerint határoztuk meg a ddCt módszer [19]. Katalógusa

Protein VEGF, TGFp és EGF gyomor szövethomogenizátumhoz katalógusa

a gyomor szöveteket homogenizáljuk hideg foszfát-puffer sóoldattal (PBS, pH 7,4) Polytron homogenizátor. A szövet-homogenizátumot ezután centrifugáltuk 20.000 x g-vel 20 percig 4 ° C-on, hogy megkapjuk a tiszta felülúszót és a fehérje koncentrációkat mérjük BCA (bicinchoninsav-) kit. A fehérje szintű VEGF, a TGF-β és EGF homogenizált gyomor szövetekben mind a fekélyes és nem-kifekélyesedett nyálkahártya mértük ELISA kitek a gyártó protokollja (patkány VEGF ELISA Kit, Ray Biotech; patkány TGF-β-készlet, ebioscience és patkány EGF ELISA kit, Uscn Life Science Inc.). VEGF, a TGF-β és az EGF szint fejeztük pg /mg szövetben.

A hatás a neutralizáló anti-VEGF antitest a gyomor fekély gyógyulását kiváltott VSL

hatásának értékelésére neutralizáló anti-VEGF antitest a gyomor fekély gyógyulását segíti elő VSL, négy csoport állatot alkalmaztunk nevezetesen, ellenőrzés, neutralizáló VEGF ellenanyaggal (R &D rendszerek), a VSLnagy dózisú + IgG-t (izoforma ellenanyag, R &D rendszerek), és a VSLnagy dózis + semlegesítő VEGF ellenanyaggal (R &D rendszerek). Előzetes kísérletekben három adagban neutralizáló VEGF antitesttel (5, 10 és 20 ng /állat /nap; ip) vizsgáltunk kapott állatokban a magas dózis VSL14 egymást követő napon, és a dózis 10 ng /állat /nap Azt találtuk, hogy jelentősen csökkenti a gyógyulás, és használatra kiválasztott minden további kísérletekhez. Az állatokat leöltük a 3. napon, 7. és 14 nap elteltével VSL+ antitest kezelés. Gyomorfekély területet megmértük, és szövettani vizsgálatot, kvantitatív valós idejű PCR-analízis, és az ELISA alapú fehérje elemzést végeztünk a fent leírt módon.

Statisztikai analízis

Az eredményeket átlag ± SEM. Jelentősége különbséget a kontroll és a VSLkezelt csoportot határoztuk meg Kruskal-Wallis tesztet Dunn poszt-teszt összehasonlítani bizonyos csoportokat. A választás a nem paraméteres teszt (Kruskal-Wallis-teszt) helyett parametrikus teszt (varianciaanalízis ANOVA) azon a tényen alapul, hogy legalább az egyik csoport az összes, de három összehasonlítások volt nem Gauss. Összhang fenntartása, Kruskal-Wallis tesztet használtunk minden összehasonlításra. Minden statisztikai analízist végeztük Graph Pad Instat szoftver. A P katalógusa érték + 0,05 értéket tekintettük szignifikánsnak. Katalógusa

Eredmények katalógusa

VSLprobiotikus keverék meggyorsítja a gyomorfekély gyógyulását katalógusa

Miután savós alkalmazása ecetsav sav 100% az állatok kifejlesztett gyomorfekély 3 nap után. Ezt követően, a gyomorfekély fokozatosan gyógyul akár 14 nap (1A.). Annak meghatározására, hogy a probiotikus keverék VSLmeggyorsíthatja gyomorfekély gyógyulását, állatot kezeltünk a alacsony vagy magas dózisok VSL-tól a 3. napon, amikor a fekélyeket teljesen kifejlődött a következő 14 egymást követő napon. Amint az 1. ábrán látható A /B, fekély gyógyulását a 3. napon a kezelés nem volt szignifikáns a kontroll- vagy VSLkezelt csoportokban. Ezt követően volt egy előrehaladott növekedése a fekély gyógyulását tükrözi csökkent a fekély terület 7. napon kezelt állatokban akár alacsony (p = 0,07) vagy magas (p = 0,003) dózis a VSL, összehasonlítva a kezeletlen kontrollokkal ( 1A.). Különösen a VSLnagy dózisban 14 napon vezetett teljes fekély gyógyulás -50% az állatok (ábra. 1 a), és nincs jele a fekélyes nyálkahártyáját. A megmaradt állatok volt jelentős helyreállítása, a felszíni hám és kiterjedt szöveti regeneráció (ábra. 1b). Míg a VSLbiztosított jelentős növekedés a fekély gyógyulását, nagy dózisú kezelés (% gyógyulás 57% volt, és 84% ​​a 7. napon, illetve 14.) jelentősen felülmúlta az alacsony dózisú kezelések (% gyógyulás 30% volt, és 57% a 7. napon és a 14. , illetve mutatja be. 1a). Mivel a 3. napon a kezelés nem mutatott szignifikáns különbséget a fekély gyógyulásában ellenőrzési és VSLkezelt csoportban, valamennyi eredményt a következő részekben jelennek meg 7. és 14. napon a kezelést. Katalógusa

VSLkezelés elősegíti szövet javítás a fekélyes gyomornyálkahártya

H &E festéssel kimutattuk különböző szövettani jelei gyógyulás között a különböző csoportok. A 14. napon, hasonlóan a bruttó megállapítás fekély terület mérés, szabályozás patkányoknál minimális javítás. Van csökkent gyulladásos váladékok, minimális mértékben a nyálkahártya regeneráció csökkentett méret a fekély kráter. Mi nem tapasztaltam sok mirigyes szervezet kontroll patkányokban (2A.). Azonban a kezelt állatok nagy dózisú VSL, amely azt mutatta, a maximális gyógyulás csökkentést a mérete a fekély terület volt helyreállítása a nyálkahártya epithelium (re-epithelizáló), és néhány gyulladásos sejtek. Amint az a 2c ábrán, szekréciós mirigyek is megoldható. Értékelése a fekélyes szöveteket VSLalacsony dózisú kezelt csoport néhány felületes átalakítás szerény gyulladásos váladékok és in-komplett újra epithelizáló a nyálkahártya. Megfelelő szervezés mirigyek is látható volt néhány helyen (ábra. 2b). Katalógusa

Hatása VSLkezelés Muc5ac, COX-1/2 és pro-gyulladásos és szabályozó citokin génexpressziós katalógusa

a nyálka réteg az első védelmi réteg a gyomornyálkahártya [20], hogy jelentős szerepet játszik a védő szerepét ellen sav és pepszin a gyomorban. Mivel Muc5ac a legnagyobb mennyiségben expresszált mucin a szokásos gyomor nyálkahártya, úgy ítéljük meg, ha VSLkezelés befolyásolja Muc5ac génexpressziót azokban a fekélyes és /vagy nem-elfekélyesednek szövetekben. Amint a 2. táblázatban látható, bár Muc5ac expresszió mérsékelten növekedett VSLkezelt állatokban, nem volt szignifikáns különbség a csoportok között tesztelt. A prosztaglandinok a másik fontos védekező tényező kritikus a fenntartásához gyomornyálkahártya integritását, amelynek szintézisét szabályozza a sebességmeghatározó enzim-ciklooxigenáz (COX), amely két izoform-COX-1 és COX-2 [21]. Konstitutívan expresszálódó COX-1-t is megállapították, hogy változatlan formában a fekélyes és nem-elfekélyesednek szövetekben mivel az expressziója a COX-2 szignifikánsan magasabb volt a VSLnagy dózisú kezelt csoportban a 7. napon, de nem a 14. napon (2. táblázat) .

a proinflammatorikus citokinek TNF-α és IL-1β kimutatták, hogy fontos szerepet játszanak a patogenezisében gyomorfekély kezdeményezett korai gyulladásos folyamatot [22], és a szabályozó citokin IL-10 ismert, hogy gyengítik a TNF-α termelés [23]. Expressziója mind a TNF-α és IL-1β gén találták, hogy megemelkedett a fekélyes szövetek a három csoport az állatok. Azonban VSLkezelés nem befolyásolta az IL-1β és IL-10 és marginálisan csökkent expresszióját a TNF-α a fekélyes szövetben, összehasonlítva a jármű kezelés (2. táblázat).

VSLkezelés serkenti a növekedési faktorok

a szerepe a növekedési faktorok a VEGF, a TGF-β és az EGF az angiogenezisben és epithelialis sejt migrációt és proliferációt gyomorfekély gyógyulását jól dokumentált [24], [25]. Amint a 3. ábrán látható, nem volt jelentős növekedése a VEGF (P < 0,001) génexpressziót azokban a fekélyes szövetekben 7. napon kezelt állatokban alacsony vagy magas dózisú VSLképest kezelt állatok csak hordozóanyagot (97 és 332-szeres növekedését génexpresszió VLS, alacsony és magas dózisú kezelt patkányok esetében). A növekedés a VEGF génexpresszió is nyilvánvaló volt a 14. napon volt a legkiemelkedőbb az alacsony dózisú VSLkezelt patkányok (3., Tetején). A VEGF expresszióját nem változtatta a nem elfekélyesednek szövetekben az összes vizsgált csoportok. VEGF fehérje a gyomor szövethomogenizátumhoz alátámasztja a vizsgálat eredményeit a VEGF génexpressziós adatok (ábra. 4, felső). Hasonlóképpen, a TGF-β és EGF (ábra. 3 középső és alsó panelek) gén és fehérje szinten (ábra. 4 középső és alsó panelek) szignifikánsan megnövekedett VSLkezelt állatokban, de a változás kevésbé volt kifejezett a megfigyelt VEGF .

VEGF semlegesítő antitest gyengíti VSLáltal közvetített gyomorfekély gyógyulását katalógusa

az adatok alapján a 3. ábrán, ahol a VEGF szignifikáns mértékben növekedett, válaszul VSLkezelés fokozott gyomorfekély gyógyulását ( ábra. 1), azt gondolták, hogy a VSLvédő hatása és hatásmechanizmusa függött VEGF. Annak vizsgálatára, ezt, állatot kezeltünk a magas dózisú VSL+ VEGF semlegesítő antitest. Amint az 5. ábrán látható, kezelt állatok VEGF semlegesítő ellenanyag csökkent a fekély gyógyulását, 34%, illetve 41%, a 7. és 14. napon, összehasonlítva az állatok kezelt magas dózisú VSL+ IgG vagy kontrollként hordozóanyagot (ábra. 5a). Gross Pathology (ábra. 5b) azt mutatta, hogy a nyálka felépítését kevésbé volt ép a VSL+ VEGF neutralizáló antitesttel kezelt patkányokban, mint VSL+ IgG-vel kezelt patkányok 7. és 14. napon a kezelést. Kezelt állatok VEGF semlegesítő ellenanyag egyedül csökkenést mutattak a fekély gyógyulását és a kontrollcsoport állatok azonban az eredmények nem voltak statisztikailag szignifikánsak (ábra 5a). Katalógusa

Vita katalógusa

Ez az első átfogó tanulmány bizonyítják, hogy a probiotikus keverék VSLfokozza a gyógyulás ecetsav okozta gyomorfekély. Eredményeink azt mutatták, hogy a VSLjárt el, dózis-függő módon, hogy növelje az expressziót és a termelés a VEGF, amely egy növekedési faktor ismert, hogy elősegítik az angiogenezist és a gyógyulás. VEGF volt kritikusan fontos a gyomorfekély gyógyulását, mint kezelés VEGF semlegesítő ellenanyag szignifikánsan késleltette a gyógyulás VSLkezelt állatokban. Katalógusa

A megelőző és gyógyító szerepét probiotikumok jól számoltak nem csak abban az esetben colitis ulcerosa és Crohn-betegség [8] - [9], hanem a körülmények olyan változatos, mint égett sebek és lőtt sebek [26] - [27]. Vannak azonban korlátozott számú tanulmányok hatásának értékelése a probiotikumok kezelés Gyomorfekély elsősorban a kedvezőtlen fiziológiai körülmények gyomor, amely csökkenti a túlélés és a mikroorganizmusok növekedését. Érdekes, hogy egy tanulmány [28] kimutatták, hogy a bakteriális kolonizáció gyorsan bekövetkezik után fekély indukció és különösen kolonizáció bizonyos baktériumok, beleértve Lactobacillus katalógusa jelentősen javítja a gyomorfekély gyógyulását. Más tanulmányok kimutatták, hogy a probiotikus baktériumok Lactobacillus katalógusa faj, Saccharomyces boulardii katalógusa, Escherichia coli törzs katalógusa Nissle 1917 hatékonyan megelőzésére és kezelésére akut gyomor okozott károkat ecetsav [ ,,,0],12], a stressz [13], az aszpirin [29], etanol [30], az ibuprofen [31] és az indometacin [32] indukált gyomorfekély. Emberben a bizonyítékok arra utalnak, hogy a rendszeres fogyasztása egy Lactobacillus katalógusa tartalmú termék védi a integritását a gyomor nyálkahártya barrier ellen indometacin [32], míg mások [15] arról számoltak be, hogy a hatás a probiotikus baktériumok mentén a hármas terápia nem jobb, mint a hármas terápia önmagában kezelésére gyomorfekély. Egy friss jelentés [13] szerint a regény szimbiotikus a kezelésre, ha a probiotikus ( L. Acidophilus katalógusa) és gyömbér kivonatot egyidejűleg és egyénileg tokozott /várakoztatják alginát lebegő szemcsék jelentősen befolyásolja a gyomorfekély gyógyulását patkányokban. Egy alternatív megközelítés az, hogy különböző mennyiségű, több törzs probiotikumok elősegítő fekély gyógyulását az IBD vizsgálatok kimutatták, hogy a több törzs probiotikumok hatékonyabbak, mint monostrain probiotikumok [33]. Eredményeink megerősítik ezeket a megállapításokat használó VSL, a keverék nyolc baktériumfajok, hogy erősen hatékonyan fokozza hámsejt migráció és proliferáció, angiogenezis, és a termelés a granulációs szövetek ami gyorsabb gyógyulását gyomorfekély.

foglalkozik a mechanizmusokat, amelyek VSLgyorsított gyomorfekély gyógyulását tudjuk számszerűsíteni sértő üregi és /vagy támogatása, defenzív tényezők. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a probiotikumok fejtenek változatos mechanizmusok, beleértve stabilizálása nyálkahártya hízósejt-degranulációt [29], indukcióját slgA termelés [29], csökkenti a sejt apoptózis a sejt proliferáció aránya a gyomorban [11], növeli transzepithelialis ellenállás [34 ] és az angiogenezis elősegítésében [11], hogy közvetítsen a gyomorfekély gyógyulását. Itt azt mutatják, hogy a VSLmozdítani gyomorfekély gyógyulását expresszióját fokozzuk a növekedési faktorok, elsősorban a VEGF által több redők. A VEGF egy alapvető angiogén faktor, amely stimulálja a granulációs szövet képződésének és az új mikro hajók keresztül angiogenezis [24], ami viszont felgyorsítja a gyomor- és nyombélfekély gyógyulását [35]. Eddig csak egy jelentés [11] azt mutatják, hogy L. rhamnosus GG katalógusa is erősítő szabályozása VEGF fehérje alatt a fekély gyógyulását. Vizsgálataink azt találtuk, hogy a 7. napon a kezelés nagy dózisú VSL, A VEGF expresszióját növelte 332-szeres, mint a kontroll állatokkal összehasonlítva. Ezt a növekedést nem látott olyan jól látható a 14. napon a kezelés, elsősorban azért, mert a legtöbb fekélyek már gyógyult addigra a VSL-kezelt patkányokban. Összehasonlításképpen, az alacsony dózisú VSLkezelt állatok továbbra is magas expressziót mutatnak a VEGF egyaránt 7. és 14. napon, mint a fekélyek még folyamatban volt meggyógyult. Lezáró VSL-indukált gyomorfekély gyógyulását, hogy kezeljük az állatokat anti-VEGF semlegesítő antitest megerősítette, hogy a VSLkiegészített gyomorfekély gyógyulását keresztül egy VEGF-közvetített mechanizmus. Az a megfigyelés, csökkentett a fekély gyógyulását kezelt állatok VEGF semlegesítő ellenanyag egyedül kontrollokhoz képest is támogatja szerepe VEGF spontán gyomorfekély gyógyulását [35]. Fontos, hogy jóllehet a VEGF ismert, hogy fel szabályozni a COX-2-eredetű PGE _{2 [36], azt találtuk, marginális változások a kifejezés a COX-2-in VSLkezelt patkányok azt sugallva, hogy a VSLindukált VEGF-expresszió nem a COX-2 által közvetített.}

Azt is megállapították, hogy a növekedési faktorok az EGF és a TGF-β szignifikánsan fel szabályozni a fekélyes szöveteiben VSLkezelt patkányokban. A TGF-β ismert, hogy befolyásolja az extracelluláris mátrix, amely bekapcsolja a folyamat az epiteliális sejt-helyreállítás be és ki, míg az EGF elősegíti mindkét epitheliális kárpótlás és proliferációja a GI rendszerben [25]. Érdekes, VSLtalálták hatékonynak csak elősegítésében növekedési faktorok, és nem a defenzív tényezők Muc5A és COX2. Továbbra is lehetséges, hogy a VSLbefolyásolhatja más védekező tényezők nem elemezték a jelen tanulmányban. Korábban már kimutatták, hogy a VSLkezelés fokozza a vastagbél MUC2 /MUC2 mucin szekréciót patkány vastagbél és a humán vastagbél epiteliális sejtekben. VSLkezelés az állatoknál is, nem jelentősen csökkentik a kifejezés a proinflammatorikus citokinek, az IL-1β, és kisebb mértékben a TNF-α. Mindkét citokinek kritikus szerepet játszanak a kialakulása gyomorfekély kezdeményezett korai akut gyulladásos válasz [22]. Ezek az eredmények alátámasztják a legutóbbi jelentésében, hogy értékelni 13 probiotikus törzsek aszpirin-indukált gyomorfekély gyógyulását [29]. Jelenleg nem tudjuk, hogy mely baktérium faj (ok) vagy ezek kombinációi a VSLprobiotikus keverék felelősek gyomorfekély gyógyulását. Korábbi vizsgálatok arra utaltak, hogy a több törzs probiotikumokat (pontosabban, több nemzetség törzsek) hatékonyabbak, mint a mono-törzs probiotikumok [33]. Az is lehetséges, hogy a VSLkeverék, hogy egy semleges oldatot (különböző koncentrációjú VSLpH-ja 7,0) befolyásolhatják gyomorsav gyógyulás hígításával a savasság a gyomornedv. Ugyanakkor a bemutatott adatok ebben a tanulmányban nem következtethetett Ez a tény, gyomornedv savasságát nem mértük. Mindazonáltal VSLcsak akkor lenne, amelynek savas hígítás és nem savat semlegesítő hatása a gyomornedv, ha van ilyen. Minden valószínűség szerint, a savas hígítás hatására VSLcsak hozzájárul a másodlagos szerepet erős sejtvédő funkciót mutatja kiterjedt fel a VEGF. Ahogy VSLadagoltuk, mint egy élő sejt-szuszpenziót, ez a megfogalmazás volna kifejtett védő hatását az élő mikrobák által anyagcsere-, sejtfal komponensek és /vagy a DNS-tartalom, vagy az összes fenti. Nem végeztünk egy kísérletet, hogy összehasonlítsa a hatását az élő mikrobák és hővel inaktivált probiotikus keverék, hogy értékelje ezt a kérdést noha a korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a hővel elölt vagy sugárzás inaktivált probiotikus baktériumok (a dózis hasonló, az élő mikrobák) nem segítik elő a fekély-gyógyulás [11], [12]. Továbbá, mivel mi nem értékelték angiogenezis, a következtetés, hogy a VSLtámogatja gyomorfekély gyógyítás angiogenezis csak feltételezték alapul VSLképes indukálni egy robusztus fel a VEGF, ami rendkívül fontos az angiogenezis [35].

Végeredményben a vizsgálatok igazolják, hogy a VSLprobiotikus keverék nagyon hatásos hatásfokozó gyomorfekély gyógyulását. A hatás domináns magas koncentrációban VSLkeverék és érhető mechanikusan stimulálásával expresszióját és szekrécióját az angiogenezis előmozdításában növekedési faktorok, elsősorban a VEGF. Ez a tanulmány megállapítja a kilátás a VSLprobiotikus keverék terápiás növelni gyomorfekély gyógyulását. Katalógusa

alátámasztó információk
ábra S1.
kezelés hatását különböző koncentrációjú VSLecetsavval indukált gyomorfekély gyógyulását patkányokban. [A] A fekély terület (mm ^{2) ábrázoljuk az állatok ecetsavval indukált gyomorfekély a 3. napon, 7. és 14. kezelés jármű (sötétkék), VSL1.5 × 10 9 baktérium /állat /nap (halványsárga), VSL3.0 × 10 9 baktérium /állat /nap (sötét sárga), VSL6.0 × 10 9 baktérium /állat /nap (világoszöld), VSL1.2 × 10 10 baktérium /állat /nap (sötétzöld), VSL2.4 × 10 10 baktérium /állat /nap (világoskék). Az adatokat képviselik átlag ± SEM 6 állat per nap.}

• PLoS One In vivo antioxidáns és Fekély tevékenysége Parkia speciosa etanolos kivonat ellen Etanol-által kiváltott gyomorfekély Rats
• PLoS One: kétirányú közötti áthallás stressz által kiváltott gyomorfekély és depresszió alatt Krónikus Stress