observaciones de microscopía electrónica de barrido del gusano hedgehog estómago, Physaloptera fue cerrada (Spirurida: Physalopteridae)

observaciones de microscopía electrónica de barrido del gusano del estómago erizo, Physaloptera fue cerrada gratis (Spirurida: Physalopteridae): perfil del Resumen Antecedentes

Physaloptera cLAUSA
(Spirurida: Physalopteridae) nematodos parásitos de estómago del erizo europeo (Erinaceus europaeus
) y causan la pérdida de peso, anorexia y lesiones gástricas. El presente estudio proporciona la primera descripción morfológica de adultos de P. fue cerrada en
de los estómagos de los erizos infectadas, mediante microscopía electrónica de barrido (SEM).
Métodos
De junio a octubre de 2011, 10 p fue cerrada
desde erizos europeos se fijaron, se secó, recubiertos y sometidas a examen SEM.
resultados
machos y hembras (22-30 mm y 28-47 mm, respectivamente) fueron corpulento, con la cutícula refleja en los labios a formar una gran collarete cefálica y mostrando estrías transversales finas en ambos sexos. La boca se caracterizó por dos pseudolabia grande, simple triangular lateral, cada uno armado con dientes internos y externos. Dentro de la cavidad bucal, se puede observar un círculo de pequeños dientes internos. Alrededor de la boca, también se observaron cuatro papilas cefálicas sub-mediana y dos grandes amphids. El extremo anterior del varón y hembra dio a luz un poro excretor en la parte ventral y un par de papilas cervicales ciliadas lateral. En el gusano hembra, la vulva se encuentra en el centro y los huevos se caracteriza por superficies lisas. El extremo posterior del gusano hembra era achaparrado con dos grandes pásmidos en la proximidad de su extremidad. El extremo posterior del macho tenía gran alae laterales, unidas entre sí en sentido anterior a través de la superficie ventral, con espículas subiguales y disímiles, así como cuatro pares de papilas pre-cloacal acechado, tres pares de papilas posterior a la cloaca, y dos Fásmidos. Tres papilas sésiles abajo Se ha encontrado anterior y posterior a cuatro de la cloaca.
Conclusiones Francia El presente estudio proporciona la primera SEM en profundidad la caracterización morfológica de los adultos de P. fue cerrada en
, y subraya las similitudes y diferencias con P. P bispiculata . herthameyerae, Heliconema longissimum Opiniones y turgida turgida
.
Palabras clave
erizo nematodo Physaloptera fue cerrada en
Morfología microscopía electrónica de barrido de fondo
nematodos adultos del género Physaloptera
Rudolphi 1819, producirse en el estómago y rara vez en el intestino delgado de los anfibios, reptiles, aves y una gran variedad de mamíferos insectívoros y omnívoros en todo el mundo [1-6]. El primer registro de Physaloptera En venta un marsupial era el de Ortlepp [1], que describe una especie de una nariz larga bandicut Perameles nasuta
Geoffroy, que murió en el zoológico de Londres. Ortlepp no ​​dio el nombre de la especie, ya que la asimetría de las papilas caudal ventral en la cola del macho fue anormal [1, 7]. En 1999, Norman y Beveridge redescriptas la Physaloptera
especies (P. peramelis
, P. thalacomys, España y Physaloptera
sp., Tanto Perameles nasuta Opiniones y Isoodon macrourus
) en bandicuts (Marsupialia: Perameloidea) en Australia [7]. Las hembras adultas son ovovivíparos, y el ciclo de vida implica insectos incluyendo escarabajos, cucarachas, grillos y como hospedadores intermediarios y reptiles como anfitriones paraténicos [8-13]. El parásito es generalmente firmemente adherido a la mucosa del huésped definitivo, desde donde se alimentan de sangre. Se ha informado [14] de que los parásitos pueden de vez en cuando cambiar su sitio de unión, por lo tanto provocando la formación de numerosas pequeñas úlceras edematosas, y por lo tanto el sangrado, la inflamación y el aumento de la producción de moco. Las infecciones graves conducen a la anemia, debilidad, anorexia, diarrea, caquexia y pérdida de peso. El diagnóstico a menudo se basa en la observación de los signos clínicos y huevos de parásitos en las heces del huésped vertebrado [14].
Physaloptera fue cerrada ¿Qué causa las lesiones gástricas severas en el erizo europeo (Erinaceus europaeus
), y ha sido informaron desde Israel, Italia, Alemania, Turquía y Polonia [15-19]. Hasta la fecha, hay una escasez de información de la morfología de las especies dentro de las familias y Physalopteridae Spiruridae [6, 20-30]. El presente estudio aborda esta brecha en el conocimiento por informar de la primera descripción SEM de adultos de P. fue cerrada en
de los estómagos de los erizos infectados.
Métodos
erizos europeos son mamíferos espinosos que se han vuelto populares como mascotas exóticas en este zona. Estos animales tienen un papel en la transmisión de una amplia variedad de virus, bacterias, hongos y parásitos, algunos de los cuales tienen importancia zoonótica [31]. Por ejemplo, se sugiere que los erizos pueden ser anfitrión de Trichinella spp
en algunas partes del mundo [32]. Estos animales están infectados con nematodos gastrointestinales. Uno de los parásitos en los erizos es Physaloptera CLAUSA
una especie común en la familia de Physalopteridae. Las hembras adultas son ovovivíparos y especies de artrópodos actúan como huéspedes intermediarios. En los animales infestados infectados, un gran número de parásitos pueden conducir a debilidad, caquexia, anemia, diarrea luz, y la pérdida de peso. Además, P. CLAUSA
puede servir como un vector de leptospirosis proporcionando una fuente de contaminación para los animales y los seres humanos [15]. Por lo tanto, tanto el erizo y P. CLAUSA
podría ser importante para ser estudiado.
De junio a octubre de 2011, doce cadáveres (algunos fueron encontrados muertos en granjas y algunos fueron asesinados por los vehículos de motor en la carretera) de erizos europeos (6 mujeres y 6 hombres) fueron remitidos al Departamento de Patología, en la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad de Urmia, Irán. exámenes parasitológicos e histopatológicas se llevaron a cabo específicamente para la recogida de los nematodos del estómago. En la necropsia, se observaron la congestión del sitio de fijación de los nematodos y edema, la erosión y una pared del estómago que espese. Se seleccionaron un total de 10 gusanos (5 mujeres y 5 hombres) para el examen SEM. Los gusanos se lavaron en tampón cacodilato de sodio 2% (pH 7,2), y luego borran con solución lactofenol (25% de glicerina, ácido láctico 25%, 25% de fenol, 25% de agua destilada). Los especímenes fueron identificados como P. fue cerrada en
basado en características morfológicas como la disposición cefálica; distancia de vulva desde el extremo anterior de la hembra; número, tamaño y posición de las papilas caudal masculina; ornamentación cuticular de la parte ventral de la cola de correo; forma y tamaño de espículas [2, 3, 33-37]. Los gusanos fueron colocados posteriormente en el 4% de glutaraldehído y la examinaron en el Departamento de Patología y Medicina Molecular, Universidad de McMaster, Canadá. Los nematodos se pusieron en fresco 4% de glutaraldehído durante 2 h, puesto fijo en 1% de tetróxido de osmio en tampón cacodilato (pH 7,2) a 4 ° C durante 1 h y se deshidrataron a través de una serie de concentraciones crecientes de etanol (50, 75, 96 y 100%). Los gusanos se secaron luego con CO líquido 2 en un aparato secador de punto crítico (crítico PointDrier, modelo no. 2800, Ladd Research Industries, Burlington, VT, EE.UU.). Cada tornillo sin fin se colocó en un trozo de aluminio numerado, que fue recubierta con oro en un dispositivo de pulverización catódica de revestimiento de iones (Sputter Coater, Modelo no. E5100, Polaron Instruments, EE.UU.) y se examinaron con un microscopio JEOL JSM-840 Scanning Electron operado a 20 kV . Las fotografías fueron tomadas con un sistema de adquisición digital para SEM analógicas (GW Electrónica, Norcross, GA, EE.UU.).
Resultados
Todos los gusanos eliminados del estómago de los erizos examinados fueron identificados como P. fue cerrada en
. Los gusanos eran de color blanco, cerveza de malta y la cutícula se reflejó en los labios para formar una gran collarete cefálica (Figures1A-C). Alrededor de la abertura bucal, se observaron cuatro papilas cefálica y dos grandes amphids (Figures1B, C). La cavidad bucal, rodeado por una pared gruesa, era cilíndrica y que se caracteriza por dos pseudolabia grandes, simples triangulares laterales, cada uno armado con dientes externos (Figura 1B) e internos (Figures1C, D). La figura 1 muestra micrografías electrónicas de exploración extremo anterior fue cerrada en Physaloptera femenina. A, papilas cefálica (flechas finas), collarete cefálico (flecha gruesa), y la papila cervical ciliadas (CP). Bar = 150 micras. B, pseudolabia triangular lateral (LPL), los dientes externos (T), uno de los dos amphids (A), dos de los cuatro papilas cefálica (CP), y collarete cefálica (estrella). Bar = 42,9 m. C, Dos amphids (A), cuatro papilas cefálica (CP), collarete cefálica (estrella), y un círculo de pequeños dientes internos dentro de la boca (punta de flecha). Bar = 100 micras. D, a mayor aumento del interior de la boca (estrella), y los dientes pequeños internos (T). Barra = 5 micras.
Se observó un poro excretor y un par de papilas cervicales ciliadas lateral con un grupo de papilas pequeñas en la superficie ventral del extremo anterior de tanto hombres como mujeres (Figures2A, C). La cutícula se caracterizó por estrías transversales finas en ambos sexos (Figures2B-D). En un gusano hembra, se observó una papila cervical ciliado anormal (Figura 2B). Todos los gusanos hembras llevaban una sola papila 589 m desde el extremo anterior (Figura 2D). La Figura 2 muestra micrografías electrónicas de exploración extremo anterior fue cerrada en Physaloptera femenina. A mayor aumento de la papila de cuello uterino ciliadas (CP), y un grupo de pequeñas papilas (P). Bar = 10 micras. B, un mayor aumento de la papila de cuello uterino anormal ciliadas (punta de flecha), y estrías transversales cuticulares (TS). Bar = 20 micras. C, a mayor aumento del poro excretor (EP), y estrías transversales cuticulares (TS). Bar = 20 micras. D, a mayor aumento de una sola papila (estrella), y estrías transversales cuticulares (TS). Bar = 7,5 micras.
Las hembras fueron 28-47 mm de longitud y 1,3-1,6 mm de ancho. La vulva femenina se encuentra en frente de la parte media del cuerpo. El patrón de la cutícula alrededor de la vulva difería de las estrías transversales cuticulares (Figura 3A). Los huevos eran oval, con superficies lisas y miden 38 x 52 mm (figura 3B). El poro anal se encuentra en el extremo posterior (Figura 3C). En el extremo posterior redondeado romo, se observaron dos grandes fásmidos subterminal, aproximadamente 222 micras desde el extremo de la cola (Figura 3D). La Figura 3 micrografías electrónicas de barrido que muestra fue cerrada en Physaloptera hembra. Una, la vulva (V), y la cutícula alrededor de la vulva (estrellas). Bar = 20 micras. B, huevo (huevo). Bar = 3 m. C, poro anal (AP). Bar = 75 micras. D, a mayor aumento de pásmidos (Ph). Bar = 85,7 micras.
Los machos fueron 22-30 mm de largo y de 0.82-1.31 mm de ancho. La cola masculina de gran calibre alae lateral, ventral cumplir frente a la cloaca; las espículas eran casi iguales y diferente (Figura 4A, B, C). Mientras que la espícula derecho se caracteriza por una punta afilada (Figura 4B), la espícula la izquierda tenía una gruesa extremidad (Figures4A, D). Anterior y posterior a la cloaca, tres y cuatro papilas sésiles, respectivamente, se observó (Figura 4D). La extremidad posterior del macho se caracteriza por la presencia de cuatro pares de acechado papilas pre-cloacal (Figura 4B-D), tres pares de papilas post-cloacal (Figura 4D-F) y dos fásmidos (Figura 4E, F). Figura 4 micrografías electrónicas de barrido que muestra extremo posterior fue cerrada en Physaloptera masculina. A, alae caudal (CA), y espícula (S). Bar = 429 micras. B, Caudal alae (estrella), cuatro acechó papilas precloacal (PRCP), tres papilas postoacal (PCOF), y las crestas cuticulares (CR). Bar = 375 micras. C, a mayor aumento de cuatro de las papilas precloacal acechado (PRCP), y las crestas cuticulares (CR). Bar = 75 micras. D, Stalked papilas precloacal (PRCP), papilas postcloacal (PCOF), tres (punta de flecha) y cuatro (flechas) papilas sésiles directamente al anterior y posterior a la cloaca, respectivamente, espícula izquierdo (LS), y las crestas cuticulares (CR). Bar = 100 micras. E, acechada papilas precloacal (PRCP), papilas postcloacal (PCOF), y pásmidos (Ph). Bar = 150 micras. F, mayor aumento de las papilas postcloacal (PCOF), y phasmid (Ph). Bar = 60 micras.
Discusión Francia El presente estudio SEM ofrece caracterizaciones morfológicas de tanto hombres como mujeres P. fue cerrada en
, por primera vez. La región cefálica, se muestra la vulva, el huevo, el poro y pásmidos anal de la hembra. En el gusano macho, se describen los detalles morfológicos del extremo posterior incluyendo papilas pre-cloacal y post-cloacal, papilas sésiles, espículas, pásmidos, y las crestas cuticulares. Además, se discutieron las similitudes y diferencias con P. bispiculata, P. herthameyerae, Heliconema longissimum Opiniones y turgida turgentes
.
Las estructuras cefálicas de P. fue cerrada en
fueron similares a las de P. bispiculata
[22]. La boca de P. fue cerrada en
tiene dos pseudolabia grandes, simples triangulares laterales, cada uno armado con dientes externos, con un círculo de pequeños dientes internos dentro de la cavidad bucal; en cambio, el extremo cefálico de P. bispiculata
es en forma de cúpula, compuesto por dos labios semicirculares que rodean lateralmente la apertura oral. Los labios son aplanadas en la cara interna e indivisible. Cada labio lleva un par de papilas cefálica en forma de coma simétricamente situada en la superficie de una cúpula hemi [22]. De manera similar a P. bispiculata
, además de la gran diente tripartita, varios más pequeños están presentes a lo largo del borde interior de cada labio de P. fue cerrada en
[22]. En otro estudio SEM de P. herthameyerae
n. sp., el extremo cefálico se compone de dos pseudolips semicirculares, que rodea lateralmente la apertura oral [27]. Cada labio dio a luz un par de papilas cefálica, tres regiones circunscritas porosos como, con un patrón de cutícula que difiere de la superficie de la parte anterior. Los márgenes internos de los labios se caracterizan por un par de pliegues cuticulares, con un diente tripartita proyectada entre ellos, teniendo un poro en la superficie interna de cada uno y cuarto diente externo [27]. Del mismo modo, la abertura oral de otro nematodo Physalopterid, Heliconema longissimum, España está rodeada por dos pseudolabia lateral. Cada pseudolabium lleva dos grandes submedianas papilas cefálica y ovalados depresiones latero-terminal con un pequeño amphid lateral situado en la base de cada pseudolabium. Además, la superficie interior de cada pseudolabium se caracteriza por un diente triangular y diente plano simple en cada extremo dorsoventral [26]. Los numerosos dentículos en el lado interior de la cavidad bucal de P. CLAUSA
son similares a los observados en turgida turgida
, un nematodo parásito de la Virginia zarigüeya Didelphis virginiana
, primero reportada por afable et al
. [23]. La función de estos dentículos todavía no está claro, aunque una función para la fijación a la pared del estómago se ha planteado la hipótesis de [38]. En el presente estudio, se observaron dos amphids laterales. existen amphids de nematodos en una variedad de formas y tamaños, algunos probablemente puramente chemosensory y algunos fotorreceptora, con una glándula asociada [39]. El tipo funcional de los amphids de P. fue cerrada en
aún se desconoce. Además, se observó un par de papilas cervicales ciliadas lateral con un grupo de pequeñas papilas en el extremo anterior de tanto hombres como mujeres P. fue cerrada. México La papilas cervicales son a menudo muy pequeñas y discretas, lo que ha llevado a la conclusión errónea que están ausentes en algunas especies. Las papilas cervicales, visibles más grandes varían en su forma, de los apéndices delgadas, similares a agujas de estructuras complejas con bordes posteriores denticulados. La posición, el tamaño y la forma de las papilas cervical se utilizan como caracteres taxonómicos. Habida cuenta de su estructura y posición, es probable que actúen como mecano-receptores [40], esenciales para su paso a través de un pequeño espacio [41]. México La vulva de P. CLAUSA
estaba situado en frente de la media del cuerpo. La abertura vulvar de P. bispiculata
se encuentra en la región anterior, posterior al esófago [22], mientras que la abertura vulvar de P. herthameyerae
fue 5,71 a 10,1 mm desde el extremo anterior [27]. En H. longissimum
, la vulva está situado en 39 a 66% de la longitud del cuerpo desde el extremo apical, mientras que se encuentra 1,14-1,36 mm desde el extremo posterior del cuerpo de P. obtusus
[24, 26]. La presencia de huevos en el sistema reproductor masculino de P. bispiculata
fue descrito por Oliveira-Menezes et al.
En 2010 [42]. A lo mejor de nuestro conocimiento, este es el primer reporte de un nematodo physalopterid macho que alberga huevos en la región cloacal, conducto eyaculador o el intestino. Se observaron varios huevos pegados por el cemento a la abertura cloacal, usando microscopía electrónica de barrido [42]. Microscopía de luz revelado que algunos hombres tenían un número incontable de huevos embrionados en el conducto eyaculador, cloaca y también en la parte posterior del intestino [42]. La explicación probable es que los óvulos en desarrollo en el útero femenino son bombeados por la hembra o succionados por el macho a la abertura cloacal y desde este punto hasta el conducto eyaculador y delgado. El gusano macho puede ser incapaz de expulsar los huevos y se encontró un gran número de estos órganos. Además, esto podría ser una adaptación importante para el parásito, por ejemplo los machos expulsados ​​por el huésped pueden llevar a un gran número de huevos y difundirlas a huéspedes intermedios cuando se ingiere por estos anfitriones [42]. La vulva de T. turgida
, ubicado en el extremo anterior del cuerpo, y al igual que en P. fue cerrada en
, la cola cónica dio una abertura anal, con pásmidos ubicados posteriormente [23]. Fásmidos están involucrados en la evaluación de la intensidad de un estímulo determinado y ayudar al gusano para mantenerse y estabilizarse en un entorno adecuado [41].
La cantidad de papilas caudales del macho de P. fue cerrada en
era diferente de la del macho de P. bispiculata, P. y H. obtusus
longissimum
[22, 24, 26], pero similar a la de P. herthameyerae
[27]. En este estudio, la cola masculina de gran calibre reunión alae lateral ventral frente a la cloaca, mientras que tres y cuatro papilas sésiles se observaron anterior y posterior a la cloaca, respectivamente. Además, cuatro pares de papilas pre-cloacal acechado, tres pares de papilas posterior a la cloaca, y dos Fásmidos estaban presentes. El extremo posterior del macho de P. herthameyerae
era ventral dobladas y la cutícula apareció suelta, formando alae caudal lateral. Las estrías transversales del cuerpo terminan en correspondencia con el alae y las filas región de agujero ventrales de estructuras de talón-como cuticulares, formando pequeñas crestas que flanquean la cloaca y los tres papilas precloacal. La zona central posterior al segundo par de papilas posterior a la cloaca era suave hacia la punta de la cola. Las papilas eran 21 en forma de botón. Tres estaban situadas anterior de la abertura cloacal, mientras que de los cinco pares de papilas post-ventral, dos pares se encuentran en una posterior protuberancia a la cloaca y tres pares entre la cloaca y el extremo de la cola. Cuatro papilas pediculados se observaron cada lado de la cloaca, junto con dos fásmidos [27]. El extremo posterior del macho H. longissimum
era espiral enrollada, con el apoyo de cuatro pares de gemelos de pedunculate papilas pre-anal y seis pares individuales de papilas post-anal, de los cuales cada uno de los cuatro primeros pares eran grandes, mientras que las de los dos últimos pares eran pequeñas y sésiles; un par adicional de menor papilas sésiles post-anal se encuentra ventral a nivel del primer par de post-anal. Cada papila caudal estaba rodeado por un anillo que consta de numerosos cuticular, la papila-como protuberancias [26]. En el presente estudio, las espículas de P. fue cerrada en
eran casi iguales y diferente; la espícula derecho se caracteriza por una punta afilada, mientras que la espícula izquierda por un extremo engrosado. Las espículas de H. longissimum
eran desiguales y diferentes, la espícula izquierda con una punta aguda punta distal y la mitad distal alate a excepción de una punta cónica; la espícula derecha era, en forma de barco más amplia y cónica hacia la punta distal [26]. La cola del macho de P.
bispiculata era ventral dobladas y la cutícula apareció suelto en la región anterior de la cloaca, con dos pliegues. Entre estas estructuras y la cloaca había un profundo transversal cuticular veces [22]. El papilas caudales 21 similar a un botón, también se observaron en el extremo posterior del macho de P. bispiculata
. Los pásmidos, que fueron bien delimitada estructuras redondas con poros y golpes en su superficie, se encuentran entre los pares cuarto y quinto de papilas posteroventral [22]. En 2001, afable y col.
Especuló que la disposición general de las papilas caudales masculina en T. turgida
es el mismo que en P. Pyura
, P. rara
, y P. bispiculata
[23]. La característica única de sexo masculino T. turgida
es la presencia de la 22 nd amplia papila caudal, que ya había sido observado por Gray y Anderson en 1982 [11], que la consideró una papila sésiles. La amplia papila puede representar un tipo distinto de estructura sensorial [23]. Al igual que P. y P. rara
bispiculata
, y en contraste con P. Pyura
, T. pásmidos turgida
ha emparejado [11, 22, 43]. En el presente estudio, el patrón de la cutícula de macho P. fue cerrada en
en la región cloacal era diferente y cubierto con pequeñas crestas cuticulares. La ornamentación de la superficie ventral de la cola masculina de T. turgida, España como P. bispiculata, España incluye tres modelos diferentes que presentan algunas similitudes y diferencias con las características de la cutícula de la cola masculina en otros physalopterids [22, . 23] Conclusiones

Los resultados de estudios previos y actuales indican que las características morfológicas; tales como disposición cefálica; número de úteros; distancia de vulva desde el extremo anterior de la hembra; número, tamaño y posición de las papilas caudal masculina; ornamentación cuticular de la parte ventral de la cola de sexo masculino; forma y tamaño de las espículas son características importantes que deben tenerse en cuenta en la clasificación de physalopterids. La información proporcionada en este documento contribuirá a la elucidación de la biología de este parásito poco conocida. Aunque, la función de los dientes externos e internos en pseudolabiae lateral triangular, los numerosos dentículos en el lado interior de la cavidad bucal de P. fue cerrada en
, es aún desconocido, pero pueden tener un papel importante en la alimentación del nematodo durante su fijación a la pared del estómago, y causar daño tisular grave como se observó en la necropsia. Mientras tanto, las estructuras tales como amphids, pásmidos, papilas cervicales ciliadas con un racimo de pequeñas papilas, las papilas caudales, papilas sésiles, y espículas se describe aquí utilizando SEM, merecen más investgation usando miscroscope electrónica de transmisión (TEM) dirigida hacia la determinación de sus funciones y para ( ?) proporcionar más datos sobre la biología del parásito.
Declaraciones
Agradecimientos
los autores expresan su agradecimiento al profesor Larry A. Arsenault, director del laboratorio de microscopía electrónica, Departamento de Patología y Medicina Molecular, McMaster Universidad, Canadá, por su ayuda en la prestación de todos los servicios durante el estudio. Además se reconoció la valiosa ayuda del Sr. Ernie Spitzer, jefe técnico, y todos los técnicos en la instalación de un microscopio electrónico. Debo dar las gracias al Sr. Seyed Ali Hosseini, Facultad de Ingeniería Eléctrica, Universidad de Teherán, Irán por su sincera ayuda en la toma de algunas micrografías. Los autores están especialmente en deuda con Robin S. Houston, M. S., Servicios de Laboratorio Clínico, Parasitología Clínica, Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad de California en Davis, CA, EE.UU. por sus comentarios constructivos que mejoraron el manuscrito. Este estudio fue parte de una tesis doctoral por el Dr. Tahmine Gorgani, y el apoyo financiero de la Universidad de Urmia, Irán.
Los autores originales presentados archivos de imágenes
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Los autores declaran que no tienen intereses en competencia contribuciones de los autores

TG:. examinó los erizos, elimina los parásitos y lleva a cabo el proceso parasitológico usando microscopio de luz. SN: diseñó el proyecto, transfiere las muestras de la Universidad de McMaster, Canadá, y preparó las muestras para el estudio SEM, editado micrografías SEM, y redactó el manuscrito. AAF: participó en el diseño del estudio y la planificación del trabajo. DO: participó en el diseño del estudio, ha comentado micrografías SEM, el manuscrito redactado y revisado el documento. Todos los autores revisados ​​y aprobados el manuscrito.

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