Scanning elektron mikroskopi observationer af pindsvin mave orm, Physaloptera ClausA (Spirurida: Physalopteridae)

Scanning elektron mikroskopi observationer af pindsvin mave orm, Physaloptera ClausA Hotel (Spirurida: Physalopteridae)
Abstract
Baggrund
Physaloptera ClausA
(Spirurida: Physalopteridae) nematoder snylter maven af ​​den europæiske pindsvin (Erinaceus europaeus
) og forårsage vægttab, anoreksi og gastriske læsioner. Nærværende undersøgelse giver den første morfologiske beskrivelse af voksne P. ClausA
fra maver inficerede pindsvin, hjælp scanning elektronmikroskopi (SEM).
Metoder
Fra juni til oktober 2011, 10 s ClausA
fra europæiske pindsvin blev fastsat, tørret, belagt og underkastet SEM-undersøgelse.
Resultater
Hanner og hunner (22-30 mm og 28-47 mm, henholdsvis) var stout, med neglebånd reflektere over læberne til udgør en stor cephalic collarette og viser fine tværgående riller i begge køn. Munden var præget af to store, enkle trekantede lateral pseudolabia, hver bevæbnet med eksterne og interne tænder. Inde i mundhulen, kan der observeres en cirkel af interne små tænder. Omkring munden, blev der også observeret fire sub-median cephalic papiller og to store amphids. Den forreste ende af både mandlige og kvindelige bar en udskillelsesvej pore på den ventrale side og et par sideværts cilierede cervikal papiller. I den kvindelige orm, blev vulva placeret i midten og æggene blev karakteriseret ved glatte overflader. Den bageste ende af den kvindelige orm var Stumpy med to store phasmider i nærheden af ​​sin ende. Den bageste ende af mandlige havde stor lateral alae, sammenføjet fortil hen over ventrale overflade, med subequal og uensartede spikler samt fire par forfulgt pre-kloak- papiller, tre par post-kloak- papiller, og to phasmider. Tre siddende papiller opstod fortil og fire bagtil til kloakken.
Konklusioner
nuværende SEM undersøgelse giver den første dybtgående morfologiske karakterisering af voksne P. ClausA
, og fremhæver ligheder og forskelle med P. bispiculata P . herthameyerae, Heliconema longissimum
og turgida turgida
.
Nøgleord
Hedgehog nematode Physaloptera ClausA
Morfologi Scanning elektronmikroskopi Baggrund
voksne nematoder af slægten Physaloptera
Rudolphi 1819, optræder i maven og sjældent i tyndtarmen af ​​padder, krybdyr, fugle og en bred vifte af insektædende og altædende pattedyr hele verden [1-6]. Den første post i Physaloptera
fra et pungdyr var, at Ortlepp [1], der beskrev en art fra en lang næse Bandicoot Perameles nasuta
Geoffroy, som døde i London Zoo. Ortlepp ikke navn arterne, fordi asymmetrien af ​​den ventrale caudale papiller på halen af ​​den mandlige var unormal [1, 7]. I 1999 Norman og Beveridge redescribed den Physaloptera
arter (P. peramelis
, P. thalacomys,
og Physaloptera
sp. Fra både Perameles nasuta
Isoodon macrourus
) i punggrævlinger (Marsupialia: Perameloidea) i Australien [7]. Voksne hunner er ovoviviparous og livscyklus involverer insekter, herunder biller, kakerlakker og fårekyllinger som mellemliggende værter og krybdyr som paratenic værter [8-13]. Parasitten er normalt solidt fastgjort til slimhinden i den endelige vært, hvorfra de lever af blod. Det er blevet rapporteret [14], at parasitterne lejlighedsvis kan ændre deres bindingssted, således forårsager dannelse af talrige små ødematøse sår, og følgelig blødning, betændelse og øget slimproduktion. Tunge infektioner fører til anæmi, svaghed, anoreksi, diarre, kakeksi, og vægttab. Diagnose ofte stoler på observation af kliniske tegn og parasit æg i fæces af hvirveldyr vært [14].
Physaloptera ClausA
forårsager alvorlige gastriske læsioner i den europæiske pindsvin (Erinaceus europaeus
), og har været rapporteret fra Israel, Italien, Tyskland, Tyrkiet og Polen [15-19]. Til dato er der for få oplysninger om morfologi arter inden familierne Physalopteridae og Spiruridae [6, 20-30]. Nærværende undersøgelse omhandler dette hul i viden ved at rapportere det første SEM beskrivelse af voksne P. ClausA
fra maver inficerede pindsvin.
Metoder
europæiske pindsvin er tornede pattedyr, der er blevet populære som eksotiske kæledyr i dette areal. Disse dyr spiller en rolle i transmissionen af ​​en lang række vira, bakterier, svampe og parasitter, hvoraf nogle har zoonotisk betydning [31]. For eksempel er det foreslået, at pindsvin kan være vært for trikiner
spp i nogle dele af verden [32]. Disse dyr er smittet med gastrointestinale nematoder. En af de parasitter i pindsvin er Physaloptera ClausA
en almindelige arter i familien af ​​Physalopteridae. Voksne hunner er ovoviviparous og leddyrarter fungere som mellemliggende værter. I de inficerede angrebne dyr, kan et stort antal parasitter medføre svaghed, kakeksi, anæmi, let diarre, og vægttab. Desuden P. ClausA
kan tjene som en vektor af leptospirose tilvejebringer en kontaminering kilde til dyr og mennesker [15]. Derfor både pindsvin og P. ClausA
kan være vigtigt at blive undersøgt.
Fra juni til oktober 2011, tolv kroppe (nogle blev fundet død i gårde og nogle blev dræbt af motorkøretøjer på vejene) europæiske pindsvin (6 kvinder og 6 mænd) blev henvist til afdelingen for Patobiologi, ved det Naturvidenskabelige Veterinary Medicine, Urmia University, Iran. Parasitologiske og histopatologiske undersøgelser blev udført specielt til indsamling af mave nematoder. Ved obduktion blev iagttaget overbelastning af fastgørelse site af nematoder og ødem, erosion og en fortykket mave væg. I alt 10 orme (5 kvinder og 5 mænd) blev udvalgt til SEM undersøgelse. Ormene blev vasket i 2% natriumcacodylat (pH 7,2), og derefter blokerede med lactophenol opløsning (25% glycerol, 25% mælkesyre, 25% phenol, 25% destilleret vand). Prøver blev identificeret som P. ClausA
baseret på morfologiske træk såsom cephalic arrangement; afstand af vulva fra forreste ende af hun; antal, størrelse og placering af mandlig caudal papiller; kutikulære udsmykning af den ventrale del af mailen hale; form og størrelse af spikler [2, 3, 33-37]. Ormene blev efterfølgende placeret i 4% glutaraldehyd og undersøgt på Patologisk Institut og Molekylær Medicin, McMaster University, Canada. Nematoderne blev anbragt i frisk 4% glutaraldehyd i 2 timer, post fikseret i 1% osmiumtetraoxid i cacodylatbuffer (pH 7,2) ved 4 ° C i 1 time og dehydreret gennem en række stigende ethanolkoncentrationer (50, 75, 96 og 100%). Orme blev derefter tørret med flydende CO 2 i et kritisk punkt tørrere apparat (Critical PointDrier, model nr. 2800, Ladd Research Industries, Burlington, VT, USA). Hver orm blev anbragt på en nummereret aluminium stub, som blev belagt med guld i en ion belægning sputter indretning (Sputter Coater, Model nr. E5100, polaron Instruments, USA) og undersøgt med et JEOL JSM-840 scanningselektronmikroskop betjent ved 20 kV . Fotografier blev taget med et digitalt erhvervelse system til analoge SEMs (GW Elektronik, Norcross, GA, USA).
Resultater
Alle orme fjernet fra maven af ​​de undersøgte pindsvin blev identificeret som P. ClausA
. Ormene var hvide i farve, stout og neglebånd blev afspejlet i læberne at danne en stor cephalic collarette (Figures1A-C). Omkring buccale åbning, blev fire cephal papiller og to store amphids observeret (Figures1B, C). Mundhulen, omgivet af en tyk væg, var cylindrisk og karakteriseret ved to store, enkle trekantet lateral pseudolabia, hver bevæbnet med eksterne (figur 1B) og interne (Figures1C, D) tænder. Figur 1 Scanning elektronmikrofotografier viser forreste ende af kvindelig Physaloptera ClausA. A, Cephalic papiller (tynde pile), cephalic collarette (tyk pil), og cilierede livmoderhalskræft papilla (CP). Bar = 150 um. B, Triangular lateral pseudolabia (LPL), udvendige tænder (T), en af ​​to amphids (A), to af fire cephalic papiller (CP), og cephalic collarette (stjerne). Bar = 42,9 um. C, To amphids (A), fire cephalic papiller (CP), cephalic collarette (stjerne), og en cirkel af interne små tænder inde i munden (pilespids). Bar = 100 um. D, Højere forstørrelse på indersiden af ​​munden (stjerne), og interne små tænder (T). Bar = 5 um.
Et udskillelsesvej pore og et par sideværts cilierede cervikal papiller med en gruppe af små papiller blev observeret på den ventrale overflade af den forreste ende af både mandlige og kvindelige (Figures2A, C). Den neglebånd var præget af fine tværgående riller i begge køn (Figures2B-D). I én kvindelig orm, blev en unormal cilierede cervikal papilla observeret (figur 2B). Alle kvindelige orme bar en enkelt papil 589 um fra den forreste ende (figur 2D). Figur 2 Scanning elektronmikrofotografier viser forreste ende af kvindelig Physaloptera ClausA. A, Højere forstørrelse af cilierede cervikal papilla (CP), og en gruppe af små papiller (P). Bar = 10 um. B, Højere forstørrelse af en unormal cilierede cervikal papilla (pilespids), og cuticular tværgående riller (TS). Bar = 20 um. C, Højere forstørrelse af ekskretionsorganerne pore (EP), og cuticular tværgående riller (TS). Bar = 20 um. D, Højere forstørrelse af en enkelt papilla (stjerne), og cuticular tværgående riller (TS). Bar = 7,5 um.
Hunnerne var 28-47 mm lange og 1,3-1,6 mm bred. Den kvindelige vulva var placeret foran midten af ​​legemet. Mønstret af kutikulaen omkring vulva afveg fra de cuticular tværgående riller (figur 3A). Æggene var ovale, med glatte overflader og målte 38 × 52 um (figur 3B). Anal pore var placeret ved den bageste ende (figur 3C). På stumpe afrundede bageste ende blev to subterminale store phasmider observeret, ca. 222 um fra halen ende (figur 3D). Figur 3 Scanning elektronmikrofotografier viser kvindelige Physaloptera ClausA. A, Vulva (V), og kutikula omkring vulva (stjerner). Bar = 20 um. B, Egg (EGG). Bar = 3 um. C, Anal pore (AP). Bar = 75 um. D, Højere forstørrelse af phasmider (Ph). Bar = 85,7 um.
Hannerne var 22-30 mm lang og 0.82-1.31 mm bred. Den mandlige hale bar stor lateral alae, møde ventralt foran kloakken; spikler var subequal og uens (figur 4A, B, D). Mens den højre spicule var karakteriseret ved en skarp spids (figur 4B), den venstre spicule havde en tyk ende (Figures4A, D). Fortil og bagtil til kloakken, tre og fire sessile papiller henholdsvis blev observeret (figur 4D). Den bagerste ende af den mandlige var kendetegnet ved tilstedeværelsen af ​​fire par af forfulgt pre-kloak- papiller (figur 4B-D), tre par post-kloak- papiller (figur 4D-F) og to phasmider (figur 4E, F). Figur 4 Scanning elektronmikrofotografier viser bageste ende af mandlige Physaloptera ClausA. A, caudale alae (CA), og spicule (S). Bar = 429 um. B, Caudal alae (stjerne), fire stilkede precloacal papiller (PrCP), tre postoacal papiller (POCP), og cuticular kamme (CR). Bar = 375 um. C, Højere forstørrelse på fire af forfulgt precloacal papiller (PrCP), og cuticular kamme (CR). Bar = 75 um. D, forfulgt precloacal papiller (PrCP), postcloacal papiller (POCP), tre (pilespids) og fire (pile) sessile papiller direkte til forreste og bageste til kloak, henholdsvis venstre spicule (LS), og cuticular kamme (CR). Bar = 100 um. E, stilkede precloacal papiller (PrCP), postcloacal papiller (POCP), og phasmider (Ph). Bar = 150 um. F, Højere forstørrelse af postcloacal papiller (POCP), og phasmid (Ph). Bar = 60 um.
Diskussion
nuværende SEM Undersøgelsen giver morfologiske beskrivelser af både mandlige og kvindelige P. ClausA
, for første gang. Den cephal region, blev kvindens vulva, æg, anal pore og phasmider vist. I den mandlige ormen blev morfologiske detaljer af bageste ende, herunder pre-kloaksvaberprøver og post-kloak- papiller, siddende papiller, spicules, phasmider, og cuticular kamme beskrevet. Også, ligheder og forskelle med P. bispiculata, P. herthameyerae, Heliconema longissimum
og Turgida saftspændte
blev drøftet.
Cephalica strukturer af P. ClausA
var lig dem af P. bispiculata
[22]. Munden af ​​P. ClausA
har to store, enkle trekantede lateral pseudolabia, hver bevæbnet med eksterne tænder, med en cirkel af interne små tænder inde i mundhulen; derimod cephalica ende af P. bispiculata
er kuppelformet, der består af to halvcirkelformede læber lateralt omgiver den orale åbning. Læberne er fladtrykt på indersiden og udelt. Hver læbe bærer et par komma-formet cephalic papiller symmetrisk beliggende på overfladen af ​​en hemi kuppel [22]. I lighed med P. bispiculata
, foruden den store tredelte tand, flere mindre er til stede langs den indre kant af hver læbe af P. ClausA
[22]. I en anden SEM undersøgelse af P. herthameyerae
n. sp., cephalica ende var sammensat af to halvcirkulære pseudolips, lateralt omgiver den orale åbning [27]. Hver læbe bar et par cephalic papiller, tre porøse-lignende afgrænsede områder, med en kutikula mønster afviger fra overfladen af ​​den forreste del. De interne margener for læberne var karakteriseret ved et par cuticular folder, med en tredelt tand projiceret mellem dem, hver bærende en pore på den indre overflade og en fjerde ydre tand [27]. Tilsvarende Mundaabningen anden Physalopterid nematode, Heliconema longissimum,
er omgivet af to laterale pseudolabia. Hver pseudolabium bærer to store submedian cephalic papiller og ovale latero-terminale fordybninger med en lille lateral amphid beliggende ved foden af ​​hver pseudolabium. Desuden er den indre overflade af hver pseudolabium kendetegnet ved en trekantet tand og enkel flad tand ved hver dorsoventral ekstremitet [26]. De mange denticles på indersiden af ​​mundhulen af ​​P. ClausA
svarer til dem observeret i Turgida turgida
, en parasitisk nematode af Virginia opossum Didelphis virginiana
, først rapporteret af Matey et al
. [23]. Funktionen af ​​disse denticles er endnu uklart, om end en funktion til fastgørelse til mavevæggen har været en hypotese [38]. I den foreliggende undersøgelse blev to laterale amphids observeret. Nematode amphids eksistere i en række forskellige former og størrelser, nogle sandsynligvis rent chemosensory og nogle photoreceptive, med en tilhørende kirtel [39]. Den funktionelle type af de amphids af P. ClausA
er stadig ukendt. Også blev observeret, et par lateral cilierede cervikal papiller med en gruppe af små papiller på den forreste ende af både mandlige og kvindelige P. ClausA.
Livmoderhalskræft papiller er ofte meget små og uanselige, som har ført til den fejlagtige konklusion at de er fraværende i nogle arter. De større, iøjnefaldende cervikale papiller varierer i form, fra tynde, nåle-lignende vedhæng til komplekse strukturer med denticulate posteriore grænser. Positionen, størrelsen og formen af ​​den cervikale papiller anvendes som taksonomiske tegn. På grund af deres struktur og position, er det sandsynligt, at de fungerer som mekanisk-receptorer [40], er afgørende for deres passage gennem et lille rum [41].
Vulva af P. ClausA
var placeret foran midten af ​​legemet. Vulva åbning af P. bispiculata
er beliggende i den anteriore område, posterior til spiserøret [22], mens vulva åbning af P. herthameyerae
var fra 5,71 til 10,1 mm fra den forreste ende [27]. I H. longissimum
, er vulva Beliggende på 39-66% af kroppens længde fra den apikale ekstremitet, mens det er placeret 1,14-1,36 mm fra den bageste ende af legemet af P. obtusus
[24, 26]. Tilstedeværelsen af ​​æg i den mandlige reproduktive system af P. bispiculata
blev beskrevet af Oliveira-Menezes et al.
I 2010 [42]. Så vidt vi ved, er dette den første rapport af en mandlig physalopterid nematode husly æg i kloak- region, udløsning kanal eller tarmen. Der blev observeret flere æg limet ved cement til kloak- åbning, ved hjælp af scanning elektronmikroskopi [42]. Lysmikroskopi viste, at nogle mænd havde for utallige befrugtede æg i udløsning kanal, kloakken og også i den bageste del af tarmen [42]. Den sandsynlige forklaring er, at æggene udvikler sig i den kvindelige livmoder pumpes af den kvindelige eller suget af hannen til kloaksvaberprøver åbning og fra dette punkt til tarmen og udløsning kanal. Den mandlige ormen kan være ude af stand til at udvise æggene og et stort antal blev fundet i disse organer. Desuden kunne dette være en vigtig tilpasning for parasitten, fx hannerne bortvist af værten kan bære et stort antal æg og sprede dem til mellemliggende værter, når de indtages af disse værter [42]. Vulva af T. turgida
er placeret i den forreste ende af legemet, og ligesom i P. ClausA
, den koniske hale bar en anal åbning, med phasmider placeret posteriort [23]. Phasmider er involveret i evalueringen af ​​intensiteten af ​​en given stimulus og hjælpe ormen at opretholde sig selv og stabilisere i et passende miljø [41].
Antallet af caudale papiller af mandlige P. ClausA
var forskellig fra af mandlige P. bispiculata, P. obtusus
og H. longissimum
[22, 24, 26], men svarer til den i P. herthameyerae
[27]. I denne undersøgelse den mandlige hale boring stor lateral alae møde ventralt foran kloakken, mens tre og fire sessile papiller blev observeret anteriort og posteriort til kloakken, hhv. Også fire par forfulgt pre-kloak- papiller, tre par post-kloak- papiller, og to phasmider var til stede. Den bageste ende af mandlige P. herthameyerae
var ventralt bøjet og neglebånd optrådte løs, danner lateral caudale alae. De tværgående riller i kroppen henlagt i korrespondance til den alae og de ventrale region bore rækker af cuticular perle-lignende strukturer, danner små forhøjninger flankerer kloakken og de tre precloacal papiller. Det centrale område posteriort for det andet par af post-kloak- papiller var glat mod halespidsen. De 21 papiller var knaplignende. Tre var beliggende forreste af kloak- åbning, mens de fem par post-ventrale papiller, blev to par er placeret på et fremspring posterior til kloakken og tre par mellem kloakken og enden af ​​halen. Fire pedunculated papiller blev observeret hver side af kloakken, sammen med to phasmider [27]. Den bageste ende af mandlige H. longissimum
var spiralformet oprullet, båret af fire dobbelte par af pedunculate pre-anal papiller og seks enkelt par af post-anal papiller, hvoraf hver af de første fire par var store, mens de af de sidste to par var små og sessile; et yderligere par af mindre post-anal sessile papiller var beliggende ventralt på niveauet for den første post-anal par. Hver kaudal papilla var omgivet af en ring bestående af talrige kutikulære, papilla-lignende fremspring [26]. I nærværende undersøgelse, spicules af P. ClausA
var subequal og ulige; den rigtige spicule var præget af en skarp spids, mens den venstre spicule ved en fortykket ende. Spicules af H. longissimum
var ulige og ulige, venstre spicule med et skarpt pegede distal spids og den distale halvdel alate bortset fra en konisk spids; højre spicule var bredere, bådformet, og tilspidset mod den distale spids [26]. Halen af ​​den mandlige P. bispiculata
var ventralt bøjet og neglebånd dukkede løs i området forreste til kloakken, med to folder. Mellem disse strukturer og kloaken var der en dyb kutikulære tværgående fold [22]. Den 21-knap-lignende caudal papiller blev også observeret ved den bageste ende af mandlige P. bispiculata
. De phasmider, som blev godt afgrænsede runde strukturer med porer og bump på deres overflade, var placeret mellem fjerde og femte par af posteroventral papiller [22]. I 2001 Matey et al.
Spekuleret på, at der generelt beskriver de mandlige caudale papiller i T. turgida
er den samme som i P. praeputialis
, P. rara
, og P. bispiculata
[23]. Det unikke i mandlige T. turgida
er tilstedeværelsen af ​​22 nd bred caudale papilla, som allerede var blevet observeret af Gray og Anderson i 1982 [11], der fandt det en siddende papilla. Den brede papilla kan repræsentere en særskilt form for sensorisk struktur [23]. Ligesom P. rara
og P. bispiculata
, og i modsætning til P. praeputialis
, T. turgida
har parrede phasmider [11, 22, 43]. I den foreliggende undersøgelse mønstret for kutikula af mandlige P. ClausA dele på den kloak- region var forskellige og dækket med små cuticular kamme. Udsmykningen af ​​den ventrale overflade af den mandlige halen af ​​T. turgida,
ligesom P. bispiculata,
omfatter tre forskellige mønstre, der præsenterer nogle ligheder og forskelle med cuticular funktioner i den mandlige halen i andre physalopterids [22, . 23]
konklusioner
resultaterne af tidligere og nuværende undersøgelser viser, at morfologiske træk; såsom cephalic arrangement; antal uteri afstand af vulva fra forreste ende af hun; antal, størrelse og placering af mandlig caudal papiller; kutikulære udsmykning af den ventrale del af den mandlige hale; form og størrelse af spikler er vigtige funktioner, der bør overvejes i klassificeringen af ​​physalopterids. Oplysningerne heri vil bidrage til belysning af biologi denne lille kendt parasit. Selv om funktionen af ​​eksterne og interne tænder på trekantet lateral pseudolabiae, de talrige denticles på indersiden af ​​mundhulen af ​​P. ClausA
, er stadig ukendt, men de kan have en vigtig rolle i nematoden fodring under dens tilknytning til maven væggen, og forårsage alvorlige vævsskader som blev observeret ved obduktion. I mellemtiden, strukturer såsom amphids, phasmider, cilierede cervikal papiller med en gruppe af små papiller, caudale papiller, siddende papiller og spicules beskrevet heri ved hjælp af SEM, fortjener yderligere investgation hjælp transmission elektron miscroscope (TEM) rettet mod at bestemme deres funktioner, og til ( ?) giver flere data om biologi af parasitten.
erklæringer
tak
forfatterne udtrykke deres taknemmelighed til professor Larry A. Arsenault, leder af elektronmikroskop facilitet, Patologisk Institut og Molekylær Medicin, McMaster University, Canada, for hans hjælp i at yde alle faciliteter i løbet af undersøgelsen. Desuden værdifuld hjælp af Mr. Ernie Spitzer, chef tekniker, og alle teknikere i elektronmikroskop anlægget er anerkendt. Tak til Mr. Seyed Ali Hosseini, School of Electrical Engineering, University of Tehran, Iran for hans oprigtige bistand i at tage nogle mikrofotografier. Forfatterne er især i gæld til Robin S. Houston, M. S., Clinical Laboratory Services, Clinical Parasitologi, School of Veterinary Medicine, University of California-Davis, CA, USA for hans konstruktive kommentarer, som forbedrede manuskriptet. Denne undersøgelse var en del af en ph.d.-afhandling af Dr. Tahmine Gorgani, og støttet af Urmia University, Iran.
Forfattere 'originale indsendte filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder . 13071_2013_891_MOESM1_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 1 13071_2013_891_MOESM2_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 2 13071_2013_891_MOESM3_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 3 13071_2013_891_MOESM4_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 4 konkurrerende interesser
Forfatterne erklærer, at de har ingen konkurrerende interesser
Forfattere bidrag
TG:. undersøgte pindsvin, fjernede ormene og udførte parasitologisk proces med lysmikroskop. SN: designet projektet, overføres prøverne til McMaster University, Canada, og forberedt prøverne for SEM undersøgelse, redigeret SEM mikrografier, og udarbejdede manuskriptet. AAF: deltog i udformningen af ​​undersøgelsen og planlægning af arbejdet. DO: deltaget i udformningen af ​​undersøgelsen, kommenterede SEM mikrografier, udarbejdet manuskriptet, og revideret papiret. Alle forfattere og godkendt manuskriptet.

• Rolle γ-glutamyltranspeptidase i patogenesen af ​​Helicobacter suis og Helicobacter pylori-infektioner
• Gastric versus post-pylorus fodring: en systematisk gennemgang