Dosis-afhankelijke remming van de maag letsel door waterstof in alkalisch geëlektrolyseerd drinkwater

Dosis-afhankelijke remming van de maag letsel door waterstof in alkalisch geëlektrolyseerd drinkwater
Abstracte achtergrond
Waterstof is gemeld om schade in vele ziektemodellen te verlichten, en is een potentieel additief in drinkwater om beschermende effecten voor de te verstrekken patiënten verschillende klinische studies aangetoond. Het ontbreken van een dosis-responsrelatie bij de toepassing van waterstof is een raadsel. We hebben geprobeerd om de dosis-responsrelatie waterstof in alkalisch geëlektrolyseerd drinkwater door aspirine geïnduceerde gastrische schade model te identificeren.
Werkwijzen
In deze studie werd waterstofrijke alkalisch water door toevoeging van H 2 aan elektrolyse water bij één atmosfeer druk. Na 2 weken van het drinken, we ontdekt het maagslijmvlies schade samen met MPO, MDA en 8-OHdG in rat aspirine geïnduceerde maag letsel model.
Resultaten
Waterstof-dosisafhankelijke remming werd waargenomen in de maag slijmvlies. Onder pH 8,5, 0,07, 0,22 en 0,84 ppm waterstof vertoonde een hoge correlatie met remmende effecten vertonen door erosie gebied MPO activiteit en MDA-gehalte in de maag. Gastric histologie ook aangetoond dat de remming van de schade door waterstofrijk alkalisch water. Echter, 8-OHdG niveau in serum niet significant waterstof dosisafhankelijk effect. pH 9,5 werden hogere maar niet significant remmende respons vergeleken met pH 8,5.
Conclusies
Waterstof is effectief in het verlichten van de gastrische schade geïnduceerd door aspirine-HCl en het remmende effect is dosisafhankelijk. De reden achter deze kan dat waterstofrijk water direct interactie met de doelgroep weefsel, terwijl de waterstof-concentratie in het bloed werd gebufferd door de lever glycogeen, het oproepen van een onderdrukte dosis-respons effect. Het drinken van waterstofrijk water kan beschermen gezonde personen uit de maag schade veroorzaakt door oxidatieve stress.
Sleutelwoorden
Alkaline elektrolyse water Dosis-response Gastric letsel Hydrogen oxidatieve stress Achtergrond
endogene waterstof wordt geproduceerd door fermentatie in het maagdarmkanaal knaagdieren [1], mens [2], en zelfs insecten [3, 4]. Waterstof snel doordringt weefsels en bloedvaten door vrije diffusie, en vervolgens vervoerd naar alle organen. De gemiddelde H 2-concentratie op de slijmlaag van de maag van de muis 43 pM [5]. Terwijl in de lever, de milt en de dunne darm, de concentraties 53, 48 en 168 pM respectievelijk [6]. Ondernemingen De fysiologische rol van H 2 is nog niet duidelijk. Ohsawa et al. [7] blijkt dat waterstof heeft een anti-oxidant en anti-apoptotische rol die de hersenen tegen ischemie-reperfusie letsel en beroerte beschermt door neutraliseert selectief hydroxyl radicalen en peroxynitriet. Deze resultaten suggereren dan ook dat H 2 kan worden therapeutisch als een medisch gas toegepast. Bovendien klinische toepassing van H 2 blijkt vele bijkomende voordelen. Allereerst H 2 niet reageert met superoxide anion radicalen en waterstofperoxide, die belangrijke fysiologische rol [7] hebben. Ten tweede kan het gemakkelijk worden geleverd via gas, drinkwater, en intraveneuze infusie; en de gunstige verdeling functies toelaten om vele organen die andere geneesmiddelen niet kan bereiken bereiken, toegang te verlenen tot de mitochondria, nucleus, en over de bloed-hersenbarrière. En tot slot, H 2 lokt weinig bijwerkingen. De toepassing ervan in hydreliox, een exotische ademhaling mengsel van 49% waterstof, 50% helium en 1% zuurstof, voor gebruik in diep duiken, demonstreert de veiligheid voor menselijk gebruik [8, 9]. Ook zes klinische studies, waaronder de langste behandeling was 6 maanden, toonde ook geen waarneembare schadelijke effecten van waterstof in het drinkwater, hemodialyse of intraveneuze infusie [10-16].
In de afgelopen vijf jaar, de duidelijke beschermende effecten H 2 werden gedocumenteerd 63 ziektemodellen en menselijke ziekten [17], zoals herseninfarct, lever- en myocardiale letsel, ziekte van Parkinson, metabool syndroom, ontsteking en allergie, orgaantransplantatie, enzovoort [18-20] . De mogelijke effecten van waterstof op gastrische schade moeten nog worden onderzocht, en bovendien, het ontbreken van een dosis-respons effect van het gebruik van waterstof als therapeutische moleculen in eerdere studies is verrassend om verschillende redenen. Ten eerste, de hoeveelheid waterstof door het drinken van water opgenomen is veel minder dan in het inademen 1-4% waterstofgas, maar waterstofrijke water vertoonden vergelijkbare of zelfs beter dan gunstige effecten waterstofgas [10, 21]. Ten tweede, de hoeveelheid endogeen waterstof gegenereerd door darmbacteriën (ongeveer 1 liter /dag) veel meer dan de hoeveelheid van het drinken waterstofrijke water (meestal minder dan 50 ml /dag) [18, 21]. Ten derde, het drinken waterstofrijke water in verschillende concentraties injecteren verschillende hoeveelheden waterstof zoutoplossing of inademen verschillende hoeveelheden waterstofgas had geen waarneembaar verschil in effect [22-24] vertonen.
In deze studie, alkaline waterstofrijke water werd gegenereerd door middel van elektrolyse. Gemengde waterstof- en stikstofgas (2: 8 en 7: 3) werd gebruikt om de waterstofconcentratie passen water drie verschillende waterstofconcentraties krijgen (0,07 ppm, 0,22 ppm, 0,84 ppm). We hebben niet uit te voeren neutralisatie als de meeste studies in het verleden [25-28], aangezien zowel een hoge pH en waterstof aspirine schade in de maag kan verlichten. Geëlektrolyseerd basisch water zelf kan door aspirine geïnduceerde gastrische schade [29] remmen, en daarnaast kan de alkalische lading in water een verhoogde urinaire excretie van mineralen zoals calcium en magnesium, veroorzaakt door de zuurgraad van het lichaam [30] te voorkomen. Dosis-afhankelijke remmende effecten van waterstof werd waargenomen in de maag, maar was niet zichtbaar in serum. De resultaten suggereren een dosis-respons effect bestaat wanneer waterstof direct interageert met het weefsel, maar een hoge dosis van waterstof kan niet de gunstige effecten in doelorganen te verhogen via het bloed vervoer.
Methods
Ethics statement
Animal onderhoud en experimentele procedures werden uitgevoerd in strikte overeenstemming met de Institutional Animal Care en gebruik Comite (IACUC) van de Tsinghua Universiteit, dat is een tak van Beijing Animal Care en gebruik Comite uitgevoerd. Alle experimenten werden beoordeeld en goedgekeurd door IACUC (vergunning nummer 12-LY-02) goedgekeurd en alle inspanningen werden gedaan om het lijden te minimaliseren.
Reagentia
Alle oplossingen voor gebruik bereid. Electrolyzed alkalisch water is afkomstig van een alkalisch ion water electrolyzer (TK7505, Panasonic, Japan), een commercieel elektrolyseur uit Japan. De 8-OHdG en HEL ELISA-kit werden gekocht van de Japanse Instituut voor de Controle van Aging (JalCA). Thiobarbituurzuur werd verkregen van J & K Scientific Ltd; Hexadecyl trimethylammoniumbromide werd overgenomen van Beijing rivier Dawn Biotechnologie Co, Ltd; en 3,3 ', 5,5' - tetramethylbenzidine werd verkregen van Amresco, Verenigde Staten
Animals and maag letsel model
Mannelijke Sprague Dawley ratten met een gewicht van 150-170 g werden gekocht van Beijing Vital River Laboratories, en gehuisvest. in het centrum van Biomedical Analysis, Tsinghua University. Het experiment begon toen de ratten bereikte 200-220 g in gewicht. Alkaline water met waterstof was bereid elke avond van de faciliteit leidingwater (pH 6,8, geleidbaarheid 40 ps /cm) en gevuld in aluminium zakken. Twee pH-waarden 8,5 en 9,5, werden geselecteerd in deze studie. pH 8,5 en 9,5 zijn de up grenzen van drinkwaternorm in China en de norm voor elektrolyse in Japan (zie Japan Industrial Standard, JIS T 2004:. 2005), respectievelijk. Alkalisch water met een pH van 8,5 en 9,5 bevatte 0,07 ppm en 0,22 ppm waterstof respectievelijk tijdens de elektrolyse (De elektrolyseur is Panasonic TK7505 uit Japan). Daarnaast werd meer waterstofatomen opgelost in water met gemengde waterstof- en stikstofgas (2: 8 en 7: 3), dat werd gevuld in aluminium zakken bij een atmosferische druk, zodat 0,22 ppm en 0,84 ppm waterstof water verkregen. Gebruik van stikstof in de gasmengsels was ook voor de veiligheid. Bovendien is de atmosfeer bevat 78% stikstof, waardoor het onwaarschijnlijk is een functionele gas in onze studie maakt. De concentratie van waterstof in water werd gemeten met een draagbare opgeloste waterstof meter DH-35A (DKK-TOA Corporation, Japan). De waterstofconcentratie werd gehandhaafd gedurende 24 uur zonder waarneembare verandering.
Elk dier werd in een aparte kooi gehouden en hadden vrije toegang tot water nachts 06:00-09:00. De inname van water en het lichaamsgewicht werden dagelijks genoteerd voor elke rat. Alle ratten werden willekeurig verdeeld in 7 groepen van 6 tot 8 ratten elk en gezien de verschillende drinkwater (tabel 1). Groep A: pH 9,5, 0,84 ppm H 2, B: pH 9,5, 0,22 ppm H 2, C: pH 8,5, 0,84 ppm H 2, D: pH 8,5, 0,22 ppm H 2, E: pH 8,5, 0,07 ppm H 2, F: pH 6,8, 0 ppm H 2 (facility leidingwater), G: pH 6,8, 0 ppm H 2 (facility kraanwater ). De uiteindelijke waterstof dosis van elke groep werd vermeld in Tabel 1. Na twee weken van behandeling werden de dieren uitgehongerd gedurende 18 uur onder waterstofrijke water nog beschikbaar. Het drinkwater werd verwijderd één uur voorafgaand aan de ratten gedoseerd met 200 mg /kg van aspirine en 0,15 N HCl (8 ml /kg) met 1% carboxymethylcellulose natrium door intubatie. Fractie G werd uitgehongerd, maar niet behandeld met aspirine-HCl zoals aangegeven in tabel 1. Na drie uur werden de dieren verdoofd met urethaan (1 mg /kg) en werd bloed afgenomen uit de abdominale aorta, waarna deze door verbloeding gedood werden. tabel 1 Behandeling groepen en de gemiddelde gewichtstoename, dagelijkse inname van water en de aanwezigheid van de maag letsel
groepen
pH
H 2
( ppm)
H 2
dosis (ug /d /kg)
† gemiddelde ± SE
Gewichtstoename (g)
‡ gemiddelde ± SE
Water inname (ml /d) gemiddelde ± SE
Injury
Een
9.5
0,84
80,6 ± 1,9
85,5 ± 6,0
25,6 ± 0,8
Ja
B
9,5
0,22
21,1 ± 1,6
81,9 ± 6,4
26,6 ± 2,5
Ja
C
8.5
0,84
80,6 ± 2,4
87,3 ± 5,0
25,9 ± 1,2
Ja
D
8.5
0.22
20,1 ± 0,8
78,5 ± 5,6
25,2 ± 1,4
Ja
E
8.5
0.07
6,8 ± 0,4
92,5 ± 3,0
26,9 ± 1,8
Ja
F
6.8
0
0
89,9 ± 3,5
27,2 ± 1,1
Ja
G
6.8
0
0
81,5 ± 7,0
26,3 ± 0,8 verhuur No
Elke groep bestond uit 6-8 ratten. † De dosis H2 voor elke rat werd berekend door (waterstof concentratie x gemiddelde dagelijkse inname van water) /gemiddelde lichaamsgewicht. ‡ Gewichtstoename werd berekend door het lichaamsgewicht op de eerste dag van de behandeling van het lichaamsgewicht voor gastrische schade. Er is geen significant verschil tussen groepen.
Evaluatie van gastrische mucosale laesies
Na dieren werden gedood, werd elke maag verwijderd, geopend en gewassen met PBS. De geërodeerde gebied op het oppervlak van de achterste maag (score) werd onder een dissectie microscoop gemeten door een persoon zonder het ervaren van de doseringsprocedure. Voor histologische evaluatie, een stuk orgaan muur bij het bodemgebied van de maag gesneden, in paraffine ingebed, perjoodzuur-Schiff (PAS) gekleurd, tegen haematoxyline gekleurd en onder de lichtmicroscoop onderzocht. Het maagslijmvlies werd afgeschraapt van de rest maag met een glasplaatje, en opgeslagen bij -80 ° C.
Myeloperoxidase (MPO) activiteit
Elk maag monster met Teflon Potter-Elvehjem homogenisator werd gemalen in 500 ui 10 mM kaliumfosfaatbuffer (pH 7,8) bevattende 30 mM KCl, 1% fenylmethaansulfonylfluoride en 5 mM EDTA, tot een homogenaat te krijgen. Het homogenaat werd daarna gecentrifugeerd en de supernatant werd gebruikt om de eiwitconcentratie te detecteren. De pellet werd opnieuw gehomogeniseerd in 500 ui 0,05 M kaliumfosfaatbuffer (pH 5,4) die 0,5% hexadecyl trimethyl ammonium bromide, en vervolgens gecentrifugeerd. De 100 gl supernatant werd vervolgens gemengd met een gelijk volume 0,05 M kaliumfosfaatbuffer (pH 5,4) bevattende 15 mM 3,3 ', 5,5', - tetramethylbenzidine en 2% H 2O 2. MPO-activiteit werd gedetecteerd door microplaat reader bij 630 nm om de 15 seconden gedurende 5 minuten en werd uitgedrukt als eenheden per mg eiwit. De MPO eenheid werd gedefinieerd als een verandering van de absorptie (1,0 /minuut) bij 630 nm in kamertemperatuur. De totale eiwitconcentratie in het weefsel homogenaten werd gemeten door de Coomassie brilliant blue-kleuring.
Malondialdehyde (MDA) relatieve concentratie
MDA opgewekt in het maagslijmvlies, als een product van lipideperoxidatie werd gedetecteerd door thiobarbituurzuur reactie. Maagslijmvlies werd gehomogeniseerd door Teflon Potter-Elvehjem homogenisator en ultrasonicatie in 500 ui 0,15 M KCl bij 0 ° C om een ​​homogenaat te krijgen. Het homogenaat werd gescheiden in twee buizen. Werd gebruikt om de eiwitconcentratie te meten, terwijl de andere 150 ul werd gebruikt om MDA detecteren. Eiwit werd gedenatureerd door toevoeging van 150 pl SDS, 150 gl azijnzuur en 150 ul vers bereide 0,82% thiobarbituurzuur oplossing. Het mengsel werd in een kokend waterbad gedurende 45 min, daarna afgekoeld en gecentrifugeerd. Het supernatant werd gebruikt om de relatieve concentratie MDA microplaat reader bij 532 nm te bepalen. Meet- serum 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG)
8-OHdG concentratie een biomarker van DNA schade en werd gedetecteerd door een ELISA-kit (Cat. IM-KOGHS 040914E) uit de Japan Instituut voor de Controle van Aging. De test werd uitgevoerd volgens de instructies van de fabrikant.
Hexanoyl-lysine (HEL) adduct concentratie
HEL ook een biomarker voor oxidatieve stress. De HEL concentraties in serum werden bepaald door een ELISA-kit (Cat. KHL-700 /E) van het Japan Institute voor de bestrijding van Aging. De test werd uitgevoerd volgens instructies van de fabrikant.

Statistische analyse De resultaten werden gepresenteerd als het gemiddelde ± standaardfout (SE) en de gegevens werden vergeleken door analyse van variantie (ANOVA) unidirectioneel proef door PASW Statistics 18. de verschillen werden significant beschouwd als de p-waarde van minder dan 0,05 door Tukey-test.
Resultaten
Drinkwater verbruik en maagschade
Zoals verwacht, het gemiddelde volume van het waterverbruik en de gemiddelde gewichtstoename per rat waren vergelijkbaar in de behandelgroepen, zoals getoond in Tabel 1. Deze resultaten impliceren dat zowel de pH (8,5 en 9,5) en waterstofconcentratie in drinkwater (0,84 ppm, 0,22 ppm en 0,07 ppm) had geen invloed op de wens van de dieren te consumeren water, en dus de ratten groeiden in hetzelfde tempo. Dus de gastrische schade niet zijn aangetast door potentiaalverschillen in drinkgedrag.
Anatomische resultaten bleek dat groepen met een hoge pH 9,5, hoge waterstofconcentratie 0,84 ppm, of beide (groepen A, B en C), had significante remming van maag vertonen in vergelijking met de groep drinkwater voorziening leidingwater (groep F) (figuur 1). En bij dezelfde pH werd significant waterstof dosisafhankelijke remming waargenomen in groepen C, D en E. Wanneer de remmende effecten en waterstofconcentraties vergeleken, hoge positieve correlatie gevonden (Tabel 2). Tegelijkertijd waterstofconcentratie, hoge pH hebben eveneens meer remming (bijvoorbeeld A en C of B en D), maar de effecten waren niet statistisch significant. Figuur 1 Meting van de maag score (het gebied van maag erosie) van 7 groepen. Waarden zijn het gemiddelde ± SE van 6-8 dieren. **: P < 0,01, in vergelijking met de groep F (neutraal water control). #: P < 0,05, in vergelijking met de groep E (lage waterstof en lage pH-groep).
Tabel 2 Correlatie tussen remming effecten en waterstof concentraties in pH 8,5 geëlektrolyseerd water
Group
Erosie
†
MPO
†
MDA
†
8-OHdG
‡
C: H2 (6,8 ug /d /kg)
2,1%
1,6%
32,6%
-2,3%
d: H2 (20,1 ug /d /kg)
13,6%
36,8%
36,8% 41,9%

E: H2 (80,6 ug /d /kg)
38,6%
77,3%
61,9%
41,4%
Pearson coëfficiënt
0.990
0,952
0,999
0,633
† Mucosale beschermend effect op elk waterstof concentratie werd berekend door het (schade niveau in groep F - schade niveau in groep C of D of E) /(schade niveau in groep F -. schade niveau in groep G)
‡ in serum, omdat de maag schade had geen invloed op serum 8-OHdG niveau, het beschermende effect werd berekend door (schade niveau in groep F - schade niveau in groep C of D of E ) /schade niveau in groep F.
Remmende effecten werden ook blijk gegeven door histologische kleuring. Verschillende regio van de maag hadden verschillende schadeniveaus, die niet verenigbaar zijn binnen een dosisgroep waren. We vonden dat het bodemgebied van de maag gewoonlijk gelijkmatig beschadigd door aspirine-HCl en geen bloeden erosie grove was waargenomen in dat gebied. Daarom histologische weefsels van het deel gekozen voor vergelijking zoals getoond in figuur 2a. Zoals verwacht, werd sterke erosie niet waargenomen in alle monsters (Figuur 2b). Monsters uit groep G had intact mucosale laag. Groep F is gebleken dat het mucosale oppervlak celresten evenals gebrekkig slijmproductie was gedetacheerd bij een groot aantal regio's, die in de figuur 2b werden gewezen. De monsters van groepen A en C een betrekkelijk intacte slijmlaag en slijmsecretie meeste cellen nog steeds functionele groep in vergelijking met F, waarbij de remmende effecten van waterstofrijke geëlektrolyseerd water weergegeven. Groep B, D en E werden ook gekleurd en gecontroleerd onder de microscoop, en ze hadden midden niveau van de schade (Extra file 1: Figuur S2). Maar het fenotype niet kwantificeerbaar. Figuur 2 de positie van histologische monster (a) en PAS kleuring van voormaag van groepen A, C, F en G (b). Blauwe pijl geeft de slijmlaag (rood) op het oppervlak van de binnenwand en rode pijl wijst de stervende en losgemaakte cellen. Zwarte pijlen geven slijm producerende cellen (rood). Vergroting: 100. Alle foto's tonen de vertegenwoordiger fenotype van hun corresponderende monsters
Waterstof-rijk electrolyzed water verlicht neutrofiel-gemedieerde ontsteking en oxidatieve stress in maagslijmvlies
Myeloperoxidase (MPO) activiteit van het slijmvlies werd gedetecteerd door thiobarbituur. zure reactie en genormaliseerd met eiwitconcentratie van elk monster. De activiteiten werden geremd door pH 9,5 en 8,5 geëlektrolyseerd water in waterstof dosisafhankelijke wijze vergeleken met de groep F (Figuur 3). De remming niveaus waren goed gecorreleerd met waterstof dosis (Tabel 2). Figuur 3 Het effect van waterstof op de MPO-activiteit in maagslijmvlies na verwond door aspirine-HCl. Waarden zijn het gemiddelde ± SE van 6-8 dieren. *: P < 0,05, vergeleken met groepen E (lage waterstof en lage pH-groep) of F (neutraal watercontrole).
Malondialdehyde (MDA) wordt gevormd uit reactieve zuurstofverbindingen (ROS), en als zodanig wordt getest in vivo een biomarker van oxidatieve stress. De mucosale MDA inhoud waterstofrijke geëlektrolyseerd water behandelde groepen vertoonden significante afname ten opzichte van de groep drinkwater ongewijzigde water (figuur 4). En de remming patroon is vergelijkbaar met de resultaten van maag score en MPO-activiteit. Figuur 4 MDA niveaus maagslijmvlies van 7 groepen. De hoeveelheid MDA werd genormaliseerd met de MDA niveau uit groep G (geen schade control). Waarden zijn het gemiddelde ± SE van 6-8 dieren. *: P < 0,05, in vergelijking met de groep F (neutraal water control).
Waterstof-rijk elektrolyse water verminderde het niveau van de 8-OHdG in serum
8-OHdG is een van de belangrijkste vormen van vrije radicalen-geïnduceerde DNA-schade in kernen en mitochondriën, en daarom is op grote schaal gebruikt als een biomarker voor oxidatieve stress en het ontstaan ​​van kanker. De serumniveaus van 8-OHdG werden significant verminderd bij hoge waterstofgroepen (waterstofconcentratie groter dan of gelijk aan 0,22 ppm) ten opzichte van leidingwater controlegroep F (Figuur 5). Echter, in tegenstelling tot de andere tests eindpunten reductieniveaus en waterstof doses niet gecorreleerd pH 8,5 groepen, wat suggereert dat een dosis-respons effect aanwezige serum 8-OHdG (Tabel 2) was. De andere verschillende bevinding in 8-OHdG test was dat de groep G had vergelijkbaar niveau met de groep F, wat kan wijzen op beide groepen hadden achtergrondniveau van 8-OHdG. Andere oxidatieve stress merker, HEL, die lipideperoxidatie detecteert, werd ook getest in serum, maar de resultaten geen significante verschillen tussen de groepen (aanvullende bestandsinformatie 1: Figuur S3) tonen. Figuur 5 Het serum 8-OHdG niveau in verschillende groepen. Waarden zijn het gemiddelde ± SE van 6-8 dieren. ***: P < 0.001, in vergelijking met de groep E (lage waterstof en lage pH-groep), F (neutraal water control), of G (geen controle blessure).
Discussie
Zoals eerder vermeld, een verontrustend probleem bij de toepassing van waterstof het ontbreken van dosis-respons effect. Dit onderzoek leverde aanwijzingen dat waterstof dosisafhankelijke remmende effecten in de aspirine geïnduceerde maag traumamodel via geëlektrolyseerd basisch water kan worden waargenomen, en dus kan het ontbreken van een vaste relatie tussen dosis en effect niveaus gevolge van levering methode, experimenteel ontwerp en doelorgaan.
in ons onderzoek gaven we drie verschillende concentraties waterstof in alkalisch water, en we waarnamen duidelijke dosisafhankelijke effecten in het maagslijmvlies, terwijl de meeste andere rapporten alleen werden de effecten met of zonder waterstof [31-37]. Allen toegepaste hoge waterstofconcentratie van 0,8 ppm tot 1,5 ppm, en allemaal waargenomen beschermende effecten tegen verschillende ziekten of medische behandelingen. Hoewel de exacte hoeveelheid drinkwater van de dieren niet gaf, kunnen we de waterstof dosis schatten van de concentratie omdat de dieren altijd vrij toegankelijk water en waterstof niet hun drinkgedrag niet veranderen. Slechts één onderzoek toegepast twee verschillende waterstofconcentraties (0,08 en 1,5 ppm) bij de behandeling van muizenmodel van de ziekte van Parkinson. Hun resultaten suggereerden beide doseringen had een soortgelijke functie in het verlichten van de voortgang van neurodegeneratie [22]. Een ander belangrijk verschil tussen onze en eerdere studies is dat de waterstof geleverd via drinkwater direct in de maag, in plaats van door het bloed wordt getransporteerd naar de doelorganen [17, 18]. Water kan worden geabsorbeerd in de maag, en wij geloven dat waterstofconcentratie in de mucosale cellen van de maag zijn afhankelijk van de waterstofconcentratie in het water. Voor andere organen kan niet het geval zijn, omdat waterstof wordt in het bloed, en dan getransporteerd naar alle organen in het lichaam. farmacokinetiek waterstof wordt niet volledig begrepen; Nog een recente studie toonde aan dat hepatisch glycogeen waterstof accumuleren van drinkwater [38]. Deze studie toonde niet alleen een van de redenen waarom de consumptie van zelfs een kleine hoeveelheid waterstof over een korte tijdspanne efficiënter verbetert diverse ziektemodellen, maar ook gesuggereerd dat waterstofconcentratie kunnen worden gebufferd in het bloed. Wij beschouwen dit glycogeen bufferende werking als een van de redenen voor het ontbreken van dosis-respons verschijnselen in veel andere studies. In deze studie, de 8-OHdG niveaus in het serum veranderd zonder de dosis-afhankelijke effect dat deze hypothese ondersteunt.
Hoewel groepen met een hoge concentratie waterstof bleek significant lager serum 8-OHdG niveau in vergelijking met de groep drinken faciliteit kraanwater na de maag letsel het was verrassend dat groep G die niet waren verwond met aspirine-HCl, had bijna hetzelfde niveau van 8-OHdG de gewonde groep B. Dit kan dat kleine DNA schade wordt opgetreden in de maag of de beschadigde maagslijmvlies heeft 8-OHdG niet vrij in het bloed tijdens de 3 uur na de verwonding. De waterstof kunnen hierdoor beperkt het achtergrondniveau van 8-OHdG in serum. We denken dat dit kan dezelfde reden ongewijzigd HEL niveau in het serum zijn. Oxidatieve schade in de maag had niet veel invloed hebben op het bloed, en het achtergrondniveau van HEL te laag is om te worden gedetecteerd door onze kit.
Hoewel veel eindpunten werden getest in onze letsel model, maag-score, MPO-activiteit en MDA kwantiteit zijn de beste. De gastrische erosie onder dissectie microscoop duidelijk 3 uur na aspirine-HCl behandeld en de erosie kan worden berekend met behulp van een micro-liniaal. De ernst van erosie niet was beschouwd als de meeste eerdere studies gedaan. Sommige erosie gebieden waren onregelmatige witte vlekken, terwijl het bloeden kan worden gezien op andere regio's. Er is geen regel voor het instellen van de gewichten voor de verschillende erosie gradaties. We denken dat het zou een mogelijke verbetering, die kan worden gedaan voor deze schade model in de toekomst.
MPO is het meest overvloedig uitgedrukt in neutrofielen granulocyten. Aanzienlijke bewijzen suggereren dat neutrofiel-gemedieerde ontsteking is betrokken bij de ontwikkeling van aspirine geïnduceerde gastrische schade [39-42]. Naito et al. [29] vonden dat MPO-activiteit in het maagslijmvlies toegenomen na 1 uur acetylsalicylzuur en bleef bij 3 uur, en kan worden verminderd door pH 10 geëlektrolyseerd water. De ontsteking wordt meestal veroorzaakt door de stervende cellen in het weefsel. Het is moeilijk om de hoeveelheid stervende cellen direct te detecteren met slijmvliezen, aangezien sommige reeds vermorzeld. Derhalve onderzoekt het levende ontstekingscellen een verstandige keuze.
Oxidatieve stress is een van de belangrijkste effecten van acetylsalicylzuur in de maag. En waterstof is gemeld oxidatieve stress in veel weefsels [17, 18]. MDA is een van de best bekende biomarkers voor oxidatieve stress. Het komt bij de afbraak van polyonverzadigde lipiden door reactieve zuurstofsoorten. Het is een van de vele reactieve elektrofiel soorten die covalent ook geavanceerde lipo-oxidatie eindproducten (ALE) adducten kunnen vormen. Voordat we de resultaten zagen, waren we bang dat MDA te reactief is om te worden gedetecteerd in de monsters die in de koelkast bewaard had gedurende enkele weken. Gelukkig zijn de resultaten toonden een consistente vermindering van MDA met waterstof dosis, hetgeen aantoont dat het een betrouwbaar en stabiel eindpunt in aspirine-HCl letselmodel. Ondernemingen De TNF-α expressie werd gerapporteerd significant verbeterd in het aspirine-HCl gewonden maag en serum [29]. En het drinken van geëlektrolyseerd alkalisch water kan TNF-α te verlagen op zowel eiwit als mRNA niveau. We testten ook de TNF-α mRNA-niveau in de maag en de TNF-α mRNA deed verhoging van de gewonden maag. Maar, we hebben geen significante verandering tussen verschillende behandelde groepen (Figuur S4 Extra file 1) te vinden. Het kan te wijten zijn aan het tijdstip van het oogsten van het weefselmonster. TNF-α is een vroege responder naar de gastrische schade en apoptose van maagepitheelcellen en endotheelcellen [43-45] induceren. De significante remming van TNF-α mRNA expressie door geëlektrolyseerd water behandeling kan worden waargenomen bij 1 uur na aspirine behandeling [29], maar niet om 3 uur, zoals gecommuniceerd bij de auteur van dit eerdere werk. 1 uur na de behandeling aspirine-HCl, de erosie niet gemakkelijk worden waargenomen, hetgeen betekent dat de mucosale laag nog relatief intact. Op dat tijdstip kan een stuk van de maag gelijke TNF-α mRNA niveau. Wanneer echter een aantal erosies gevormd bij 3 uur, verschillende delen van de maagwand kunnen verschillende TNF-a mRNA niveaus, omdat de erosie onderdelen zijn relatief zwaar beschadigd. Wij vinden dat het gemakkelijker het pakket maag TNF-α mRNA kwantificering anders dan een stuk van een maagwand, maar het zal een dubbel aantal dieren nodig.
Ander punt in kwestie is het mechanisme van waterstofrijke electrolyzed alkalisch water veroorzaakte schade remmende effecten. Vroeg werk reeds aangetoond dat de remming van gastrische schade indirect geïnduceerd door continue geëlektrolyseerd alkalisch waterbehandeling, maar niet door directe interactie van geëlektrolyseerd basisch water en aspirine [29]. Bovendien zijn de remmende effecten van geëlektrolyseerd basisch water niet veroorzaakt door het verminderen van maagzuur, die van invloed kunnen absorptie van acetylsalicylzuur [29]. De waterstof in geëlektrolyseerd alkalisch water werd voorgesteld als een actieve moleculaire. Ohsawa et al. In totaal hebben de directe reactie tussen waterstof en hydroxyl radicalen en peroxynitriet [7]. Echter, dit mechanisme niet fit onze waarnemingen, omdat het drinkwater werd verwijderd één uur voor de maag blessure plaatsvond. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• De menselijke maag-pathogeen Helicobacter pylori heeft een potentieel aceton carboxylase dat haar vermogen om mice
• Oprichting en identificatie van een konijn model van peritonitis carcinomatosa uit de maag cancer