Dozė priklauso nuo slopinimo skrandžio žalos vandeniliu šarminės elektrizuojami gėrimo water

priklauso nuo dozės slopina skrandžio žalos vandenilio šarminės elektrizuojami geriamojo vandens pervežimas Anotacija
fone
vandenilio buvo pranešta atleisti žalą daugelio ligų modeliai ir yra potencialus priedas geriamajame vandenyje pateikti apsauginį poveikį pacientams, kaip parodė keletas klinikinių tyrimų metu. Tačiau iš dozės-atsako santykio vandenilio taikymo nebuvimas yra painus. Mes bandėme nustatyti dozės ir reakcijos santykį, vandenilio šarminės elektrizuojami geriamojo vandens per aspirino sukelta skrandžio žalos modelis.
Metodai
Šiame tyrime, turinčios daug vandenilio šarminis vanduo buvo gautas sudedant H 2 elektrizuojami vandenį vienos atmosferos slėgiui. Po 2 savaičių gerti, mes nustatėme, skrandžio gleivinės pažeidimas kartu su MPO, MDA ir 8-OHdG žiurkių aspirino sukelta skrandžio žalos modelis.
Rezultatai
Vandenilio dozės priklausomas slopinimas buvo pastebėtas skrandžio gleivinės. Pagal pH 8,5, 0,07, 0,22 ir 0,84 ppm vandenilio eksponuojami labai stiprią sąsają su slopinamasis poveikis parodė erozijos zona, MPO veiklos ir MDA kiekio skrandis. Skrandžio histologija taip pat parodė, kad žalos slopinimą daug vandenilio šarminio vandens. Tačiau 8-OHdG lygis serume neturėjo reikšmingos vandenilio dozės priklausomas poveikis. pH 9,5 parodė didesnės, tačiau nėra reikšminga slopinantis atsakas palyginti su pH 8,5.
išvadas
Vandenilis yra veiksminga mažinant skrandžio traumų sukeltų aspirino-HCl, ir slopinantis poveikis priklauso nuo dozės. To priežastis gali būti, kad daug vandenilio vandens tiesiogiai bendravo su tiksliniame audinyje, o vandenilio koncentracija kraujyje buvo buferinis kepenų glikogeno, žadina iš nutylėtų dozės ir atsako poveikį. Geriamojo vandenilio turtingas vanduo gali apsaugoti sveikus asmenis nuo skrandžio padarytą žalą oksidacinio streso.
Raktiniai žodžiai
Šarminis elektrizuojami vandens dozės atsakas Skrandžio žalos Vandenilio oksidacinis stresas faktai
endogeninio vandenilio gaminamas storosios žarnos fermentuojant virškinimo trakto graužikų [1], žmonių [2], ir net vabzdžių [3, 4]. Vandenilio greitai įsiskverbia audinius ir kraujagysles laisva difuzijos, tada vežamos į visus organus. Vidutinė H 2 koncentracija dėl gleivių sluoksnio pelės skrandžio yra 43 mkm [5]. Nors kepenyse, blužnyje ir plonosios žarnos, koncentracija yra 53, 48, ir 168 mkm atitinkamai [6].
Fiziologinį vaidmenį H 2 dar nėra aišku. Ohsawa ir kt. [7] nustatė, kad vandenilio turi antioksidacinį ir anti-Apoptozė vaidmenį, kuris apsaugo smegenis nuo išeminio-reperfuzijos pažeidimo ir insulto pasirinktinai neutralizuoti hidroksilo radikalus ir peroksinitritas. Todėl šie rezultatai rodo, kad H 2 gali būti taikomas terapiškai kaip medicinos dujų. Be to, klinikinių taikymas H 2 parodė daug papildomų privalumų. Pirma, O 2 nereaguoja su superoksido anijonų radikalų ir vandenilio peroksido, kuris turi svarbių fiziologinių vaidmenis [7]. Antra, ji gali būti lengvai pareikšta per dujų, geriamo vandens, ir intraveninės infuzijos būdu; ir jos palankios paskirstymo funkcijos leidžia tai pasiekti daug organus, kad kiti vaistai negali pasiekti, suteikiant jam patekti į mitochondrijas, branduolio ir visoje kraujo-smegenų barjerą. Ir, pagaliau, O 2 priverčia mažai šalutinių poveikių. Jos taikymas Hydreliox, egzotiškas kvėpavimo mišinys 49% vandenilio, 50% helio ir 1% deguonies, naudojamas gilaus nardymo, demonstruoja savo saugumą žmonėms [8, 9]. Be to, šeši klinikiniai tyrimai, tarp kurių ilgiausias gydymas buvo 6 mėnesiai, taip pat parodė, neaptinkama neigiamo poveikio iš vandeniliu geriamojo vandens, atliekama hemodializė arba į veną infuzijos [10-16].
Per pastaruosius penkerius metus, akivaizdžius apsauginį poveikį H 2 buvo dokumentuojami 63 ligų modelių ir ligų [17], taip pat smegenų infarkto, kepenų ir miokardo pažeidimo, Parkinsono liga, metabolinio sindromo, uždegimo ir alergijos, organų transplantacija ir kt [18-20] , Tačiau, galimą poveikį vandeniliu skrandžio traumos yra dar turi būti tiriamas, ir be to, iš dozės-atsako efektu vandenilio panaudoti kaip terapinė molekulės ankstesnių tyrimų nebuvimas yra stebina dėl kelių priežasčių. Pirma, iš vandenilio kiekis paimtas geriamojo vandens yra daug mažiau nei įkvėpimo 1-4% vandenilio dujas, tačiau turinčios daug vandenilio vandens parodė panašias ar net geriau teigiamą poveikį nei vandenilio dujų [10, 21]. Antra, endogeninio vandenilio suma generuoja žarnyno bakterijų (apie 1 litras /dieną) yra daug daugiau nei suma, iš geriamojo vandenilio-prisotinto vandens (paprastai mažiau nei 50 mililitre /diena) [18, 21]. Trečia, geriamojo daug vandenilio vandens skirtingų koncentracijų, leidžiamus įvairius kiekius vandenilio fiziologiniu tirpalu, arba įkvėpus skirtingas sumas vandenilio dujų neparodė įžiūrimą skirtumą poveikį [22-24].
Šiame tyrime, šarminės daug vandenilio vandens buvo sugeneruotas per elektrolizės. Mišrus vandenilis ir azotas dujos (2: 8 ir 7: 3) buvo panaudota siekiant reguliuoti vandenilio koncentracija vandeniu, kad būtų gauti tris skirtingus vandenilio koncentraciją (0.07 ppm, 0,22 ppm, 0.84 ppm). Mes neatliko neutralizavimo kadangi dauguma tyrimų darė praeityje [25-28], nes tiek aukštos, pH ir vandenilio gali atleisti aspirino žalos skrandyje. Elektrizuojami šarminis vanduo pats gali slopinti aspirino sukelta skrandžio žalos [29], ir papildomai, šarminės apkrova vandenyje gali neleisti padidėjusį šlapimo išsiskyrimą mineralų, pavyzdžiui, kalcio ir magnio, kurį sukelia organizmo rūgštingumas [30]. Priklauso nuo dozės, slopinimas vandenilio buvo pastebėtas skrandžio, bet nebuvo matyti serume. Rezultatai rodo, dozės-atsako efektas egzistuoja, kai vandenilio sąveikauja tiesiogiai su audinių, tačiau didelės dozės iš vandenilio negali padidinti teigiamą poveikį tikslinių organų per kraujo transportu.
Metodai
etikos pareiškimą pervežimas Gyvūnų priežiūra ir eksperimentinės procedūros buvo atliktos griežtai laikantis institucinės gyvūnų priežiūrai ir naudojimui komiteto (IACUC) Tsinghua universitete, kuris yra Pekino gyvūnų priežiūrai ir naudojimui komiteto filialas. Visi eksperimentai buvo peržiūrėtos ir IACUC (leidimo numeris 12-ly-02) patvirtintas ir buvo dedamos visos pastangos, kad kuo mažiau kentėtų.
Reagentai
Visi sprendimai buvo parengti prieš naudojimą. Elektrizuojami šarminis vanduo buvo gaunamas iš šarminės jonų vandens Elektrolizer (TK7505, "Panasonic", Japonija), komercinis Elektrolizer iš Japonijos. 8-OHdG ir HEL IFA rinkinys buvo įsigytas iš Japonijos instituto senėjimo kontrolę (JalCA). Tiobarbitūro rūgšties buvo gauta iš J & K mokslinio Ltd; Heksadecilo trimetilhidrazin amonio bromidas buvo įsigytas iš Pekino upę Aušros Biotechnology Co., Ltd; ir 3,3 ', 5,5', - tetramethylbenzidine buvo gauta iš Amresco, JAV pervežimas Gyvūnai ir skrandžio žalos modelis
Vyras Sprague Dawley žiurkės, kurių masė 150-170 g buvo įsigytos iš Pekino Vital River Laboratories, ir veikė. ties biomedicininių tyrimų centras, Tsinghua universitete. Eksperimentas prasidėjo, kai žiurkės pasiekė 200-220 g svorio. Šarminis vanduo vandeniliu buvo parengta kiekvieną vakarą nuo įrenginys vandentiekio vandeniu (pH 6.8, laidumas 40 nm /cm) ir užpildyta aliuminio maišelius. Du pH reikšmės, 8.5 ir 9.5, buvo atrinkti šiame tyrime. pH 8,5 ir 9,5 yra iki ribos geriamojo vandens standartą Kinijoje ir už Elektrolizer standartą Japonijoje (žr Japonija pramonės standartas, JIS T 2004. 2005), atitinkamai. Šarminis vanduo, kurio pH 8,5 ir 9,5 esančius 0,07 ppm ir 0,22 ppm vandenilio atitinkamai elektrolizės metu ( "The Elektrolizer Panasonic TK7505 iš Japonijos). Be to, daugiau vandenilis buvo ištirpinama vandenyje su mišrių vandenilio ir azoto dujų (2: 8 ir 7: 3), kuris buvo užpildyta į aliuminio maišelius vienu atmosferos slėgį, kad būtų gauta 0.22 ppm, o 0,84 ppm vandenilio vandens. Naudojant azoto dujų mišinių buvo atlygis už saugumą. Be to, atmosfera yra 78% azoto, todėl mažai tikėtina, funkcinę dujas mūsų tyrime. Vandenilio vandenyje koncentracija buvo matuojamas pagal nešiojamas ištirpinamas vandenilio metrą DH-35A (DKK TOA Corporation, Japonija). Vandenilio koncentracija išsilaiko 24 val be juntamo pasikeitimo.
Kiekvienas gyvūnas buvo laikomas atskiroje narvo, ir turėjo laisvą priėjimą prie vandens naktį nuo 6 val iki 9 val. Vandens įleidimo ir kūno svoris buvo įrašyti kasdien kiekvienam žiurkės. Visi žiurkės buvo atsitiktinai suskirstyti į 7 grupių 6 iki 8 žiurkių kiekvienas, ir suteikti skirtingas geriamojo vandens (1 lentelė). A grupė: pH 9.5, 0.84 ppm, O 2 B: pH 9,5, 0,22 ppm, O 2 C: pH 8.5, 0.84 ppm, O 2 D: pH 8,5, 0,22 ppm, O 2 E: pH 8,5, 0,07 ppm, O 2, F, pH 6,8, 0 ppm, O 2 (įrenginys vandentiekio vanduo), G: pH = 6,8, 0 ppm, O 2 (įrenginys vanduo iš čiaupo ). Galutinis vandenilis dozė iš kiekvienos grupės buvo įtraukta į 1 lentelėje Po dviejų savaičių gydymo, gyvūnai buvo alkanas 18 valandų su vandenilio-prisotinto vandens dar turimų. Geriamojo vandens buvo pašalintas vieną valandą prieš žiurkių buvo duodama aspirino 200 mg /kg, o 0,15 N HCl (8 ml /kg) kartu su 1% natrio karboksimetilceliuliozė, naudojant zondą. G grupė buvo alkanas, bet kuri nėra apdorota aspirino-HCl, kaip nurodyta 1 lentelėje Po tris valandas, gyvūnai buvo anestezuoti pagal uretano (1 mg /kg kūno svorio) ir kraujo buvo paimti iš pilvo aortos, pagal kurią jie buvo numarinamos exsanguination. 1 lentelė tiriamosios grupės ir vidutinis kūno masės padidėjimas, kasdien vandens įleidimo ir buvimas skrandžio traumos
grupės
pH
o
2
( PPM)
O
2
dozė (g /d /kg),
† vidurkis ± SE
Svorio padidėjimas (g)
‡ vidurkis ± SE


vandens suvartojimas (ml /d) vidurkis ± SE
Žalos

9,5
0.84
80,6 ± 1,9
85,5 6,0
±
Taip
B
25,6 ± 0,8 9,5
0,22
21,1 ± 1,6
81,9 ± 6,4
26,6 ± 2,5
Taip
C
8,5
0.84
80,6 ± 2,4
87,3 5,0
± 25,9 ± 1,2
Taip
D
8.5
0,22
20,1 ± 0,8
78,5 ± 5,6
25,2 Taip
± 1,4
El
8.5
0,07
6,8 ± 0,4
92,5 ± 3,0
26,9 ± 1,8
Taip
F
6.8
0
0
89,9 ± 3,5
27,2 ± 1,1
Taip
G
6.8
0
0
81,5 ± 7,0
26,3 ± 0,8
Nėra
Kiekviena grupė buvo sudaryta iš 6-8 žiurkėms. † H2 dozė kiekvienai žiurkei buvo apskaičiuojamas (vandenilio koncentracijos x vidutinė paros vandens įleidimo) /vidutinis kūno svorio. ‡ Svorio padidėjimas buvo apskaičiuotas atimant kūno svorio per pirmąjį gydymo dieną nuo kūno svorio prieš skrandžio traumos. Nėra didelio skirtumo tarp skirtingų grupių.
Vertinimas skrandžio gleivinės pažeidimų
Po gyvūnai buvo numarinti, kiekvienas skrandis buvo pašalintas, atidaryti ir išplauti su PBS. Eroduoto plotas užpakalinės pilvo (skrandžio balas) paviršiaus buvo matuojamas pagal Sekcijiniai mikroskopu asmuo be patiria dozavimo tvarka. Dėl histologinio vertinimo, iš organų sienos gabalas apačioje regione skrandyje buvo iškirpti, parafino integruotas, Periodiniai rūgštims Schiff (PAS) tamsintas, hematoksilinu skaitliukas tamsintas ir tiriamas šviesos mikroskopu. Skrandžio gleivinė buvo nubraukiamas nuo poilsio pilvo stiklelio ir saugomi -80 ° C temperatūroje.
Myeloperoxidase (MPO) veikla
Kiekvienas skrandžio mėginys buvo sumaltų teflono Poteris-Elvehjem homogenizatoriumi 500 iL 10 mm kalio fosfatinis buferis (pH 7,8), kuriame yra 30 mm KCl, 1% fenilmetansulfonil fluorido ir 5 mm EDTA, gauti homogenatą. Homogenatas tada centrifuguojamas ir viršutinis sluoksnis buvo naudojamas siekiant aptikti baltymo koncentraciją. Granulių buvo pakartotinai homogenizuoti 500 pL 0,05 M kalio fosfato buferio (pH 5.4), kuriame yra 0,5% heksadecilo trimetil amonio bromidas, ir tada centrifuguojamas. tada 100 mikrol paviršinis buvo sumaišyti su tokio paties tūrio 0,05 M kalio fosfatinio buferio (pH 5,4), kuriame 15 mm 3,3 ', 5,5', - tetramethylbenzidine ir 2% H 2O 2. MPO veikla buvo aptikta mikroplokštelės skaitytuvą 630 nm kas 15 sekundžių, 5 minutes, ir jis buvo išreikštas vienetų per mg baltymo. MPO vienetas buvo apibrėžtas kaip absorbcijos (1.0 /minutė), 630 nm, kambario temperatūroje kaita. Bendras baltymų koncentracija audinių homogenatai buvo matuojamas pagal coomassie briliantinis mėlynasis dažymo metodą.
Malondialdehido (MDA) santykinis koncentracija
MDA generuojami skrandžio gleivinės, kaip lipidų peroksidacijos produkto, buvo aptikta tiobarbitūro rūgšties reakcija. Skrandžio gleivinės buvo homogenizuojama, teflono Poteris-Elvehjem homogenizatoriumi ir ultrasonicated 500 pL 0,15 M KCl, esant 0 ° C iki gauti homogenatą. Homogenatas buvo atskirta į dvi vamzdžių. Vienas buvo naudojamas matuoti baltymo koncentraciją, o kita 150 mikrol, buvo naudojamas siekiant aptikti MDA. Baltymų buvo denatūruotas pridedant 150 įxL SDS 150 įxL acto rūgšties ir 150 iL naujai parengtus 0,82% tiobarbitūro rūgšties tirpalas. Mišinys supilamas į verdančio vandens vonioje 45 min, po to atšaldomas ir centrifuguojamas. Virš nuosėdų buvo siekiama nustatyti santykinį MDA koncentraciją mikroplokštelių skaitytuvas 532 nm.
Matavimas serume 8-hidroksi-2'-dezoksiguanozino (8 OHdG)
8-OHdG koncentracija yra DNR žalą biologinis ir buvo aptikti ELISA rinkinys (Kat. MP-KOGHS 040914E) iš Japonijos instituto senėjimo kontrolę. Bandymas buvo atliktas pagal gamintojo nurodymus.
Heksanoilo-Lizinas (HEL) aduktu koncentracija
HEL taip pat yra biologinis oksidacinį stresą. Hel koncentracija serume buvo nustatytas ELISA rinkinys (Kat. KHL-700 /E) iš Japonijos instituto senėjimo kontrolę. Bandymas buvo atliktas pagal gamintojo nurodymus.
Statistinė analizė
rezultatai buvo pateikiami kaip vidurkis ± standartinė paklaida (SE) ir duomenys buvo lyginami dispersinė analizė (ANOVA) vienas būdas bandymą PASW statistikos 18. buvo laikomi skirtumai reikšmingi, kai p-vertė buvo mažesnė nei 0,05 iki Tukey testą.
rezultatai
Geriamojo vandens suvartojimo ir skrandžio žalos
kaip ir tikėtasi, vidutinis tūris vandens suvartojimo ir vidutinis svorio prieaugis už žiurkių buvo panašus tarp gydymo grupių, kaip parodyta 1 lentelėje Šie rezultatai rodo, kad tiek pH (8,5 ir 9,5) ir vandenilio koncentracija geriamojo vandens (0,84 ppm, 0,22 ppm, ir 0,07 ppm) neturėjo įtakos tokių gyvūnų norą vartoti vanduo, ir todėl žiurkės išaugo tuo pačiu greičiu. Taigi, skrandžio žalos neturėtų būti veikiami galimų skirtumų geriamojo elgesį.
Anatomijos rezultatai parodė, kad grupės, turinčios aukštą pH 9,5, didelio vandenilio koncentracija 0,84 ppm, arba abu (A, B ir C), turėjo reikšmingai neslopina skrandžio žalos palyginti su grupe geriamojo objekto vandeniu iš čiaupo (F grupė) (1 pav.) Ir tuo pačiu pH, reikšmingas vandenilis-priklausė nuo dozės slopinimo buvo stebimas per grupių C, D, ir E. Jei Slopinamasis pasekmės ir vandenilio koncentracija buvo palyginti, buvo nustatyta, aukštos teigiama koreliacija (2 lentelė). Tuo pačiu vandenilio koncentracijos, aukštos pH taip pat su sąlyga, daugiau slopinimo (pvz A ir C, arba B ir D), nors nebuvo statistiškai reikšmingas. 1 pav matavimas skrandžio balas 7 grupes (skrandžio erozijų sritis). Vertės yra vidurkis ± SE nuo 6 iki 8 gyvūnams. **: P < 0,01, lyginant su F grupė (neutralus vanduo kontrolės). #: P < 0,05, lyginant su E grupėje (mažo vandenilio ir žemo pH grupės).
2 lentelė Koreliacija tarp slopinimo poveikiui ir vandenilio koncentracija, pH 8,5 elektrizuojami vandens
Grupė
Erozija
†
MPO
†
MDA
†
8-OHdG
‡
C: H2 (6,8 g /d /kg),
2,1%
1,6%
32,6%
-2,3%
d: H2 (20,1 g /d /kg),
13,6%
36,8%
36,8%
41,9% pervežimas E: H2 (80,6 g /d /kg),
38,6%
77,3%
61,9%
41,4%
Pearson koeficientas
0.990
0,952
0,999
0,633
† Gleivinės apsauginis poveikis kiekvieno vandenilio koncentracijos buvo apskaičiuojamas (nuostolių lygio F grupė - žala lygio C arba D grupių arba E) /(nuostolių lygio F grupė -. žala lygis G grupė)
‡ serume, nes skrandžio žala neturėjo įtakos kraujo serume 8-OHdG lygį, apsauginis poveikis buvo apskaičiuojamas (nuostolių lygio F grupė - žala lygio C arba D grupių arba E ) /žalos lygis grupės F.
slopinamąjį poveikį taip pat buvo matyti per histologinio dažymo. Skirtingų regionų skrandyje turėjo skirtingus žalos lygį, kurie nebuvo nuoseklūs per vieną dozės grupėje. Mes nustatėme, kad apatinė sritis skrandžio buvo paprastai tolygiai pažeisti aspirino-HCl, ir ne kraujavimas erozijos giraitė nebuvo pastebėta tame regione. Todėl, histologiniai audiniai iš tos dalies buvo pasirinkta palyginti, kaip parodė 2a pav. Kaip ir tikėtasi, stipri erozija nebuvo pastebėta visuose mėginiuose (2b pav.) Mėginiai iš G grupė turėjo sveika gleivinės sluoksnis. F grupė parodė, kad gleivinės paviršius buvo atskirtas ląstelių šiukšles, taip pat su defektais gleivių gamybą daugelyje regionų, kurie buvo atkreipė dėmesį į tai 2b pav. Mėginiai iš A ir C grupių turėjo gana sveika gleivių sluoksnį, ir dauguma gleivių sekrecija ląstelės vis dar funkcionalus, palyginti su F grupė, kuri iliustravo slopinamąjį poveikį turinčios daug vandenilio elektrizuojami vandeniu. B grupė, D ir E, taip pat buvo tamsintas ir patikrinti mikroskopu, ir jie turėjo vidutinio lygio traumų (papildomas failą 1: S2 pav.) Bet fenotipas neįmanoma įvertinti kiekybiškai. 2 pav histologinio mėginio (a) ir PAS dažymo liaukinio skrandžio iš grupių A, C, F ir G (b) buvimo vietą. Mėlyna rodyklė rodo gleivių sluoksniu (raudonas) dėl vidinės sienelės paviršiaus, ir raudona rodyklė nurodo, miršta ir atskirtus ląsteles. Juodos rodyklės rodo gleivių gaminančias ląsteles (raudona). Didinimas: 100. Visos nuotraukos rodo tipinį fenotipą jų atitinkamų mėginių
daug vandenilio elektrizuojami vandens sušvelnintos neutrofilų tarpininkaujant uždegimas ir oksidacinis stresas, skrandžio gleivinės pervežimas Myeloperoxidase (MPO) veiklos iš gleivinės buvo aptikta tiobarbitūro. rūgšties reakcija ir normalizuotas su baltymų koncentracijos vertės kiekviename mėginyje. Veikla buvo nuslopintos pH 9,5 ir 8,5 elektrizuojami vandens vandenilio dozės priklausomu būdu, lyginant su F grupė (3 paveikslas). Slopinimas lygiai buvo gerai koreliuoja su vandenilio dozę (2 lentelę). 3 paveikslas iš vandenilio poveikis MPO veiklos skrandžio gleivinės po sužeisti aspirino-HCl. Vertės yra vidurkis ± SE nuo 6 iki 8 gyvūnams. *: P < 0,05, palyginti su grupėmis, E (mažo vandenilio ir mažo pH grupės) arba F (neutralia vandens valdymas).
Malondialdehido (MDA) yra generuojamas iš aktyvių deguonies formų (ROS), ir kaip tokia, ji yra tiriami in-vivo kaip iš oksidacinio streso biologinis. Gleivinės MDA kiekis vandenilio turtingas elektrizuojami vandens gydytų grupių parodė žymiai sumažinti, palyginti su grupe geriamojo nepakeisto vandens (4 paveikslas). Ir slopinimas modelis yra panašus į skrandžio rezultatą ir MPO veiklos rezultatų. 4 pav MDA kiekį skrandžio gleivinės 7 grupes. Iš MDA kiekis normalizavosi su MDA lygio nuo grupės G (žala kontrolė). Vertės yra vidurkis ± SE nuo 6 iki 8 gyvūnams. *: P < 0,05, palyginti su F grupė (neutralia vandens valdymas).
Turi daug vandenilio elektrizuojami vandens sumažino 8-OHdG lygį serume
8-OHdG yra vienas iš vyraujančių formų laisvos-radikalų sukeliamo DNR pažaida, branduoliai ir Mitochondrija, ir todėl buvo plačiai naudojamas kaip oksidacinio streso ir kancerogenezės biožymens. Koncentraciją serume 8-OHdG buvo gerokai sumažintas didelės vandenilio grupių (vandenilio koncentracija didesnė nei arba lygus 0,22 ppm), palyginti su vandens iš čiaupo kontrolinės grupės F (5 paveikslas). Tačiau ne kitų bandymų pasekmes, mažinimo lygis ir vandenilio dozės nebuvo susijęs pH 8,5 grupes, o tai rodo, kad dozė-atsakas poveikis nebuvo Posėdyje serume 8-OHdG (2 lentelė). Kitas skiriasi išvada 8-OHdG testas buvo, kad G grupė turėjo panašų lygį F grupė, kurios gali rodyti abi grupės turėjo fono lygį 8-OHdG. Kitas oksidacinis stresas žymeklis, HEL, kuris aptinka lipidų peroksidacijos, taip pat buvo analizuotos serume, tačiau rezultatai neparodė reikšmingų skirtumų tarp visų grupių (papildomas failų 1: S3 pav.) 5 pav serumas 8-OHdG lygis skirtingose ​​grupėse. Vertės yra vidurkis ± SE nuo 6 iki 8 gyvūnams. ***: P < 0,001, palyginti su grupės E (mažo vandenilio ir žemo pH grupės), F (neutralus vanduo reguliuojamas), arba G (žala valdymas).
Diskusijos
Kaip minėta anksčiau, viena nerimą klausimas vandenilio taikymo yra nuo dozės-atsako efektas trūkumas. Šis tyrimas pateikė tam įrodyti, kad vandenilio dozės priklausomas slopinamasis poveikis gali būti stebimas aspirino sukelta skrandžio žalos modelis per elektrizuojami šarminio vandens, ir taip, kad nustatytos tarp dozės ir poveikio lygis nebuvimas gali būti pristatymo būdą pasekmė, eksperimentinio projektavimo ir organų taikinių.
mūsų tyrime mes davė tris skirtingų koncentracijų vandeniliu šarminio vandens, ir mes pastebėti akivaizdžių priklauso nuo dozės poveikį skrandžio gleivinę, o dauguma kitų ataskaitų tik palygino poveikį su arba be vandenilio [31-37]. Visi iš jų taiko didelius vandenilio koncentraciją nuo 0,8 ppm iki 1,5 ppm, ir visi iš jų pastebėjo apsauginį poveikį prieš įvairias ligas arba medicininio gydymo. Nors jie nepasidavė tikslią geriamojo sumą gyvūnų, galime apskaičiuoti vandenilio dozę nuo jo koncentracijos, nes gyvūnai visada galėjo laisvai prieiti prie vandens ir vandenilio nepakeitė savo geriamojo elgesį. Tik vienas tyrimas taikomas du skirtingus vandenilio koncentraciją (0,08 ir 1,5 ppm) pelės modelio Parkinsono ligos gydymui. Tačiau jų rezultatai rodo tiek dozės turėjo panašią funkciją silpnino neurodegeneraciją [22] pažangą. Kitas pagrindinis skirtumas tarp mūsų ir ankstesnių tyrimų yra, kad vandenilio buvo pristatytas per geriamąjį vandenį tiesiai į skrandį, o ne gabenami kraujyje tikslinėms organų [17, 18]. Vanduo gali būti absorbuojamas skrandyje, ir manome, kad vandenilio koncentracija gleivinės ląstelių, skrandžio gali skirtis priklausomai nuo vandenilio koncentracijos vandenyje. Tačiau, dėl kitų organų, tai gali būti ne tas atvejis, nes vandenilis pirmasis patenka į kraują, ir tada yra transportuojamas į visų organų visą kūną. Vandenilio farmakokinetika nėra iki galo suprastas; dar, neseniai atliktas tyrimas parodė, kad kepenų glikogeno gali kauptis vandenilį iš geriamojo vandens [38]. Šis tyrimas ne tik parodė, viena iš priežasčių, kodėl vartojimas net nedideliu kiekiu vandenilio per trumpą laiko tarpą efektyviai pagerina įvairių ligų modelius, bet taip pat rodo, kad vandenilio koncentracija gali būti buferinis kraujyje. Mes į šį glikogeno buferinė poveikį kaip vieną iš skirtų dozės ir reakcijos reiškinių nėra daugelyje kitų tyrimų priežasčių. Šiame tyrime, 8-OHdG lygiai serume keičiamos be dozės priklausomas poveikis, kuris palaiko šią hipotezę.
Nors grupės, turinčios didelės vandenilio koncentracijos parodė žymiai mažesnis serumą 8-OHdG lygis, palyginti su grupe geriamojo vandens įrenginys čiaupo po skrandžio traumos , tai buvo keista, kad G grupė, kuri nebuvo sužeisti su aspirinu-HCl, turėjo beveik tokį patį lygį 8-OHdG kaip nukentėjusiajai grupės F. Tai gali reikšti, kad mažai DNR pažeidimai pasireiškė skrandžio arba kad pažeisto skrandžio gleivinės nebuvo išleisti 8-OHdG į kraują ir 3 valandas po traumos metu. Vandenilio galėjo sumažinti foninį lygį 8-OHdG serume. Mes manome, kad tai galėtų būti tas pats priežastis nepakitusio HEL lygio serume. Oksidacinio pažeidimo, skrandžio neturėjo įtakos kraujo labai daug, ir fono lygį Helis yra per maža, kad būtų galima aptikti mūsų rinkiniu.
Nors daugelis vertinamosios baigtys buvo išbandyta mūsų žalos modelį, skrandžio rezultatas, MPO veiklos ir MDA kiekio yra geriausi. Skrandžio erozija yra akivaizdus pagal išpjaustymo mikroskopu 3 valandas po aspirino-HCl gydymo ir erozijos plotą galima apskaičiuoti naudojant mikro-valdovas. Tačiau erozijos sunkumas nebuvo laikoma dauguma ankstesnių tyrimų padarė. Kai erozijos sritys buvo nereguliarios baltos dėmės, o kraujavimas gali būti vertinamas dėl kitų regionų. Nėra taisyklė nustatant koeficientą skirtinguose erozijos sunkumo. Mes manome, kad tai gali būti įmanoma tobulinimas, kuri gali būti padaryta dėl šios žalos modelį ateityje.
MPO yra Gausiausiai išreikštas neutrofilų granulocitų. Esminiai įrodymai parodė, kad neutrofilų tarpininkaujant uždegimas dalyvauja aspirino sukelta skrandžio traumos [39-42] plėtrai. Naito ir kt. [29] nustatė, kad MPO veikla padidėjo skrandžio gleivinės po 1 h aspirino gydymo ir išliko ne 3 h, ir galėtų būti sumažintas pH 10 elektrizuojami vandens. Uždegimas yra paprastai, kurias sukelia žuvusių ląstelių audinio. Ji yra sunku tiesiogiai aptikti žuvusių ląstelių pakeitimą kiekį su gleivinės, nes kai kurie iš jų yra jau suskaidytas į gabalus. Taigi, nagrinėjant gyvenančius uždegiminių ląstelių yra protingas pasirinkimas.
Oksidacinis stresas yra viena iš pagrindinių poveikio, atsirandančio dėl aspirino gydyti skrandyje. Ir vandenilio buvo pranešta atleisti oksidacinį stresą daugelyje audinių [17, 18]. MDA yra vienas iš geriausiai žinomų biomarkeriai oksidacinį stresą. Jis yra iš polinesočiųjų lipidų degradacijai, kurią lemia aktyvių deguonies formų. Ji yra viena iš daugelio reaktyviosios electrophile rūšių, kurios gali susidaryti kaip pažangių lipoxidation galutinių produktų (ALE) nurodytus kovalentiškai surištų baltymų aduktus. Prieš matėme rezultatus, buvome bijo, kad MDA yra per reaktyviosios būti aptikta mėginiuose, kurie buvo laikomas šaldytuve keletą savaičių. Laimei, rezultatai parodė pastovią sumažinti MDA vandeniliu dozę, o tai rodo, kad yra patikima ir stabili tyrimo tikslas aspirinas-HCl žalos modelį.
TNF-α išraiška buvo pranešta, kad žymiai sustiprintas aspirino-HCl sužalotas skrandžio ir serumo [29]. Ir geriamojo elektrizuojami šarminį vandenį galėtų sumažinti TNF-alfa tiek baltymų ir iRNR lygiu. Mes taip pat išbandyti TNF- lygis mRNR iš skrandžio ir TNF-α mRNR tiesų padidėjo patyrusios skrandį. Tačiau neradome reikšmingų pokyčių tarp skirtingų grupių, kurios veikiamos (papildomas failą 1: S4 pav). Tai gali būti dėl to, kad laiko momentu derliaus audinių mėginį. TNF-α yra anksti atsakiklis į skrandžio traumos ir gali sukelti apoptozę skrandžio epitelinių ląstelių, taip pat endotelio ląstelių skaičius [43-45]. Didelis slopinimas TNF- mRNR ekspresijos elektrizuojami vandens valymo galima pastebėti per 1 valandą, po to, kai aspirino gydymo [29], bet ne 3 valandų, kaip pranešama su šio ankstesnių darbų autorius. Per 1 valandą, po to, kai gydymo aspirinas-HCl, erozijos negali būti lengvai pastebėti, o tai reiškia, gleivinės sluoksnis vis dar yra santykinai nepažeistas. Tuo metu, bet kurią iš skrandžio gabalas gali turėti panašų TNF- iRNR lygį. Tačiau, kai kai kurie erozijos susidaro 3 valandas, skirtingi teisės skrandžio sienos gali turėti skirtingas TNF- iRNR lygiui, nes erozijos dalys yra santykinai labiau stipriai pažeistas. Manome, kad ji yra geriau imtis visą skrandį kitą, nei nuo skrandžio sienos gabalas TNF-alfa iRNR kiekybinio, bet ji bus reikėti dvigubos gyvūnų skaičių.
Kito atžvilgiu klausimą taškas yra mechanizmas turi daug vandenilio elektrizuojami šarminio vandens sukelta žala slopinantis poveikis. Ankstyvas darbas jau parodė, kad skrandžio žalos slopinimas netiesiogiai sukelia nuolatinį elektrizuojami šarminio vandens valymo, bet ne tiesiogine sąveika elektrizuojami šarminio vandens ir aspirino [29]. Be to, slopinimas elektrizuojami šarminio vandens nebuvo sukelia sumažinti skrandžio rūgštingumą, kuris gali paveikti absorbciją aspirino [29]. Į elektrizuojami šarminio vandens vandenilio buvo pasiūlyta kaip aktyvi molekulinės. Ohsawa ir kt. rado tiesioginį reakcijai tarp vandenilio ir hidroksilo radikalus ir peroksinitritas [7].

• Žmogaus skrandžio patogenas Helicobacter pylori turi potencialų acetono karboksilazės, kuris didina jo gebėjimas kolonizuoti pelėms
• Steigimas ir identifikavimas triušio modelio peritoninės karcinomatoze nuo skrandžio vėžio