Annoksesta riippuvaa inhibitiota mahan vahinkoa vedyllä emäksinen elektrolysoidaan juomavesi

Annoksesta riippuvaa inhibitiota mahan vahinkoa vedyllä emäksinen elektrolysoidaan juomavesi
tiivistelmä
tausta
Vety on raportoitu lievittää vahinkoja monissa tautimallien, ja on potentiaalinen lisäaineena juomaveden tarjota suojaavia vaikutuksia potilailla useissa kliinisissä tutkimuksissa paljastui. Kuitenkin puuttuminen annos-vaste-suhde on vety- on hämmentävä. Yritimme tunnistaa annos-vastesuhde vedyn emäksinen elektrolysoidaan juomaveden kautta aspiriini aiheuttamaa mahalaukun vamman malli. Tool Menetelmät
Tässä tutkimuksessa, vetyä sisältävä emäksinen vesi saatiin lisäämällä H 2 elektrolysoidaan veden yhden ilmakehän paineessa. 2 viikon kuluttua juomisen, olemme havainneet mahan limakalvon vaurio yhdessä MPO, MDA ja 8-OHdG-pitoisuuksiin rotan aspiriini aiheuttamaa mahalaukun vamman malli.
Tulokset
Vety-annoksesta riippuvainen inhibitio havaittiin mahan limakalvon. Under pH 8,5, 0,07, 0,22 ja 0,84 ppm vetyä osoitti vahvasti yhteydessä estovaikutusta osoittivat eroosion alue, MPO toiminta ja MDA sisältö vatsassa. Mahalaukun histologia osoitti myös inhibition vaurioita vetyä sisältävä emäksistä vettä. Kuitenkin 8-OHdG-pitoisuuksiin tason seerumissa ei ollut merkittävää vety-annoksesta riippuva vaikutus. pH 9,5 osoittivat korkeampia mutta ei merkittävää inhibiittorivasteen verrattuna pH 8,5.
Johtopäätökset
Vety on tehokas lievittämään mahalaukun vamman aiheuttama aspiriini-HCl, ja estävä vaikutus on annoksesta riippuvainen. Syy tähän voi olla, että vetyä sisältävä vesi suoraan vuorovaikutuksessa kohdekudokseen, kun taas vedyn pitoisuus veressä oli puskuroitu maksan glykogeenin, tuo mieleen tukahdutti annos-vaste vaikutuksen. Juominen vetyä runsaasti vettä voi suojata terveitä yksilöitä mahalaukun aiheuttamia oksidatiivista stressiä.
Avainsanat
Alkaline elektrolysoidaan veden Annos-vaste Mahalaukun vamma Hydrogen Oksidatiivinen stressi tausta
Endogeeninen vetyä tuotetaan paksusuolen käymisen ruoansulatuskanavassa jyrsijöiden [1], ihmisille [2], ja jopa hyönteiset [3, 4]. Vety nopeasti tunkeutuu kudoksiin ja verisuonten vapaa diffuusio, ja sitten kuljetetaan kaikkiin elimiin. Keskimääräinen H 2 keskittyminen limakerroksessa hiiren vatsa on 43 uM [5]. Vaikka maksassa, pernassa ja ohutsuolessa, pitoisuudet ovat 53, 48, ja 168 uM [6].
Fysiologinen rooli H 2 ei ole vielä selvä. Ohsawa et ai. [7] mukaan vetyä on antioksidantti ja anti-apoptoottiset rooli, joka suojaa aivoja vastaan ​​iskemia-reperfuusiovaurio ja aivohalvauksen valikoivasti neutraloivat hydroksyyliradikaalit ja peroksinitriitin. Nämä tulokset siis viittaavat siihen, että H 2 voidaan terapeuttisesti lääketieteellisenä kaasua. Lisäksi kliininen soveltaminen H 2 on osoittanut monia lisäetuja. Ensinnäkin, H 2 ei reagoi superoksidianionia radikaali ja vetyperoksidi, joilla on tärkeitä fysiologisia tehtäviä [7]. Toiseksi, se voidaan helposti toimitetaan kautta kaasu, juomavesi, ja infuusiona; ja sen suotuisa jakelu ominaisuuksien avulla se saavuttaa monissa elimissä että muut lääkkeet saattavat pääse, myöntänyt sille pääsyä mitokondriot, ydin, ja veri-aivoesteen. Ja lopuksi, H 2 herättää vähän sivuvaikutuksia. Sen soveltaminen Hydreliox, eksoottinen hengitys sekoitus 49% vetyä, 50% heliumia ja 1% happea, käytetään syväsukelluksen, osoittaa sen turvallisuutta ihmisille tarkoitettujen [8, 9]. Samoin kuusi kliinisissä tutkimuksissa, joista pisin hoito oli 6 kuukautta, myös ei näkynyt havaittavissa haittavaikutuksia vedystä juomavedessä, hemodialyysi tai infuusiona laskimoon [10-16].
Viiden viime vuoden aikana selvää suojaavia vaikutuksia H 2 on dokumentoitu 63 tautimallien ja ihmisten sairauksien [17], kuten aivoinfarkti, maksan ja sydänlihaksen vamma, Parkinsonin tauti, metabolinen oireyhtymä, tulehdus ja allergia, elinsiirron, ja niin edelleen [18-20] . Kuitenkin mahdolliset vaikutukset vedyn mahalaukun haitat ovat vielä tutkittu, ja lisäksi puuttuminen annos-vaste vaikutuksen vedyn käyttöä terapeuttisena molekyyli aikaisemmissa tutkimuksissa on yllättävä useista syistä. Ensinnäkin vedyn määrä tarttunut juomavesi on paljon vähemmän kuin hengittämisestä 1-4% vetykaasua, mutta vetyä sisältävä vesi osoitti vastaavia tai jopa parempia hyödyllisiä vaikutuksia kuin vetykaasua [10, 21]. Toiseksi määrä endogeenisen vetyä syntyy suolistobakteerien (noin 1 litra /vrk) on paljon enemmän kuin määrä juomasta vetyrikas vettä (yleensä alle 50 ml /vrk) [18, 21]. Kolmanneksi, juominen vetyä sisältävä vesi eri pitoisuuksina, suonensisäisten eri määriä vetyä suolaliuosta, tai hengittämästä eri määriä vetykaasua ei osoittanut havaittavaa eroa vaikutuksia [22-24].
Tässä tutkimuksessa emäksinen vetyrikas vesi aikaansaatiin elektrolyysin. Mixed vedyn ja typen kaasun (2: 8 ja 7: 3) käytettiin säätämään vetypitoisuus veteen saada kolme erilaista vedyn konsentraatioita (0,07 ppm, 0,22 ppm, 0,84 ppm). Emme suorita neutralointi koska useimmat tutkimukset tekivät aiemmin [25-28], koska sekä korkea pH ja vetyä voidaan lievittää aspiriinia vamman vatsassa. Elektrolysoidaan emäksinen vesi itsessään voi estää aspiriinia aiheuttamaa mahalaukun vamma [29], ja lisäksi emäksinen kuormitus vesi voi estää lisääntynyt eritys virtsaan mineraaleja kuten kalsiumia ja magnesiumia, aiheuttama elimistön happamuus [30]. Annoksesta riippuvainen estovaikutus vedyn havaittu vatsassa, mutta ei ollut havaittavissa seerumissa. Tulokset viittaavat siihen, annos-vaste vaikutuksen olemassa, kun vety on vuorovaikutuksessa suoraan kudokseen, mutta suuri annos vedyn saa lisätä hyödyllisiä vaikutuksia kohde-elimiin kautta veren kuljetus. Tool Menetelmät
Ethics selvitys
Animal huolto ja kokeelliset menetelmät suoritettiin tiukasti mukaisesti Institutional Animal Care ja Käytä komitea (IACUC) Tsinghuan yliopiston, joka on osa Pekingin Animal Care ja käyttö komitea. Kaikki kokeet tarkistaa ja hyväksyy IACUC (luvan numero 12-LY-02), ja yritettiin minimoida kärsimyksen.
Reagenssit
Kaikki liuokset valmistettiin ennen käyttöä. Elektrolysoidaan emäksinen vesi saatiin emäksinen ioni vettä electrolyzer (TK7505, Panasonic, Japani), kaupallinen electrolyzer Japanista. 8-OHdG-pitoisuuksiin ja HEL ELISA kit ostettiin Japanista instituutin valvonta Aging (JalCA). Tiobarbi- saatiin J & K Scientific Oy; Heksadekyyli- trimetyyliammonium Bromide hankittiin Beijing River Dawn Biotechnology Co., Ltd; ja 3,3 ', 5,5', - tetrametyylibentsidiini saatiin Amresco, USA.
Eläimet ja mahalaukun vahingon malli
Sprague Dawley rottia painottamalla 150-170 g hankittiin Beijing Vital River Laboratories, ja majoitettu keskiössä Biomedical Analysis, Tsinghua University. Koe alkoi, kun rotat saavutti 200-220 g paino. Emäksistä vettä vedyllä valmistettiin joka ilta laitos vesijohtovettä (pH 6,8, johtokyky 40 mikrosekuntia /cm) ja täytetään pusseihin. Kaksi pH-arvot, 8,5 ja 9,5, valittiin tässä tutkimuksessa. pH 8,5 ja 9,5 ovat jopa rajoissa juomaveden standardin Kiinassa ja standardi electrolyzer Japanissa (katso Japanin teollisuusstandardin JIS T 2004: 2005.), tässä järjestyksessä. Emäksistä vettä pH 8,5 ja 9,5 sisälsi 0,07 ppm ja 0,22 ppm vedyn vastaavasti elektrolyysin aikana (Elektrolysointilaitteeseen on Panasonicin TK7505 Japanista). Lisäksi enemmän vetyä liuotettiin veteen sekoitettu vetyä ja typpikaasu (2: 8 ja 7: 3), joka täytettiin alumiini- pusseihin yhdessä ilmakehän paineessa, jotta saatiin 0,22 ppm ja 0,84 ppm vetyä vettä. Käyttämällä typen kaasuseosten oli vastike turvallisuutta. Lisäksi ilmakehä sisältää 78% typpeä, mikä tekee epätodennäköiseksi toimiva kaasu tutkimuksessamme. Vedyn pitoisuus vedessä mitattiin kannettavalla liuenneen vedyn mittari DH-35A (DKK-TOA Corporation, Japani). Vedyn pitoisuus säilyi 24 tuntia ilman havaittavaa muutosta.
Kukin eläin pidettiin erillisessä häkissä, ja oli vapaa pääsy veteen yöllä 6 pm 9 am. Veden saanti ja kehon paino kirjattiin päivittäin kunkin rotan. Kaikki rotat jaettiin satunnaisesti 7 ryhmiin 6-8 rottaa jokaiselle, ja koska eri juomavesi (taulukko 1). Ryhmä A: pH 9,5, 0,84 ppm H 2, B: pH 9,5, 0,22 ppm H 2, C: pH 8,5, 0,84 ppm H 2, D: pH 8,5, 0,22 ppm H 2, E: pH 8,5, 0,07 ppm H 2, F: pH 6,8, 0 ppm H 2 (laitos vesijohtovesi), G: pH 6,8, 0 ppm H 2 (laitos vesijohtovesi ). Lopullinen vety annos kussakin ryhmässä lueteltu taulukossa 1. Kahden viikon hoidon jälkeen eläimet nälässä 18 tunnin ajan vedyn runsaasti vettä vielä saatavilla. Juomavesi poistettiin yhden tunnin ajan ennen kuin rotille on annosteltu 200 mg /kg aspiriinia ja 0,15 N HCl: lla (8 ml /kg) yhdessä 1%: karboksimetyyliselluloosanatrium intubaatiolla. Ryhmä G on ruokittu, mutta joita ei ole käsitelty aspiriini-HCI, kuten taulukossa 1. Kolmen tunnin kuluttua eläimet nukutettiin uretaanilla (1 mg /kg) ja verta otettiin vatsa-aortasta, jonka jälkeen ne tapettiin exsanguination. Taulukko 1 hoito ryhmiä ja keskimääräisen painonnousun, päivittäinen veden saanti ja läsnäolo mahalaukun vamman
Ryhmät
pH
H
2
( ppm)
H
2
annos (mikrog /d /kg) B † keskiarvo ± SE
Painonnousu (g) ​​
‡ keskiarvo ± SE
vedenottoventtiilit (ml /d) keskiarvo ± SE
Injury

9,5
0,84
80,6 ± 1,9
85,5 ± 6,0
25,6 ± 0,8
Kyllä
B
9,5
0,22
21,1 ± 1,6
81,9 ± 6,4
26,6 ± 2,5
Kyllä
C
8,5
0,84
80,6 ± 2,4
87,3 ± 5,0
25,9 ± 1,2
Kyllä
D
8.5
0,22
20,1 ± 0,8
78,5 ± 5,6
25,2 ± 1,4
Kyllä
E
8,5
0,07
6,8 ± 0,4
92,5 ± 3,0
26,9 ± 1,8
Kyllä
F
6,8
0
0
89,9 ± 3,5
27,2 ± 1,1
Kyllä
G
6.8
0
0
81,5 ± 7,0
26,3 ± 0,8
Ei
Kukin ryhmä koostui 6-8 rotilla. † H2 annos kullekin rotalle laskettiin (vetypitoisuudella x keskimääräinen päivittäinen veden saanti) /keskimääräinen paino. ‡ Painonnousu laskettiin vähentämällä kehon painon ensimmäisenä hoitopäivänä kehosta painosta ennen mahalaukun vammoja. Ei ole merkittävää eroa eri ryhmien välillä.
Arviointi mahalaukun limakalvon vaurioita
jälkeen eläimet lopetettiin, kunkin vatsa poistettiin, avattiin ja pestiin PBS: llä. Erodoidun alue pinnalla takaraajojen mahaan (mahan pisteet) mitattiin alla preparointimikroskooppia henkilö kokematta annostelun yhteydessä. Histologista arviointia, pala elimen seinän alareunassa alueella mahassa leikattiin, parafiiniin, Periodic Acid-Schiff (PAS) värjätään, hematoksyliinillä vasta-värjätään, ja tutkitaan valomikroskoopilla. Mahalaukun limakalvon kaavittiin pois muusta vatsaan lasilevylle, ja säilytettiin -80 ° C: ssa.
Myeloperoksidaasi (MPO) aktiivisuus
Kukin mahan näyte jauhettiin Teflon Potter-Elvehjem homogenisaattoria 500 ui 10 mM kaliumfosfaattipuskuria (pH 7,8), joka sisälsi 30 mM KCI: a, 1% fenyylimetaanisulfonyylifluoridia ja 5 mM EDTA: ta, saada homogenaattia. Homogenaattia sentrifugoitiin sitten ja supernatantti käytettiin havaitsemaan proteiinipitoisuus. Pelletti homogenisoitiin uudelleen 500 ul: aan 0,05 M kaliumfosfaattipuskuria (pH 5,4), joka sisälsi 0,5% heksadekyyli- trimetyyliammoniumkloridi bromidi, ja sitten sentrifugoitiin. 100 ui supernatanttia sekoitetaan sitten samalla tilavuudella 0,05 M kaliumfosfaattipuskuria (pH 5,4), joka sisälsi 15 mM 3,3 ', 5,5', - tetrametyylibentsidiini ja 2% H 2O 2. MPO-aktiivisuus detektoitiin mikrolevylukijalla 630 nm: ssä 15 sekunnin välein 5 minuutin ajan, ja se ilmaistiin yksiköinä per mg proteiinia. MPO-yksikkö määritellään absorbanssin muutoksen (1,0 /minuutti) 630 nm: ssä huoneenlämmössä. Proteiinin kokonaismäärän konsentraatio kudoshomogenaatteja mitattiin coomassie brilliant blue-värjäys menetelmällä.
Malonidialdehydi (MDA) suhteellinen pitoisuus
MDA syntyy mahalaukun limakalvon, kuten tuote lipidiperoksidaation, havaittiin tiobarbituurihappoa reaktio. Mahan limakalvon homogenisoitiin Teflon Potter-Elvehjem-homogenisaattoria ja ultraäänellä 500 ul: aan 0,15 M KCI: a 0 ° C: ssa saada homogenaattia. Homogenaatti erotettiin kahteen putkeen. Yksi käytettiin mittaamaan proteiinipitoisuus, kun taas toinen 150 ui käytettiin havaitsemaan MDA. Proteiini denaturoitiin lisäämällä 150 ui SDS: ää, 150 ui etikkahappoa ja 150 ui vasta valmistettua 0,82% tiobarbituurihappoa liuos. Seos pantiin kiehuvaan vesihauteeseen 45 min, sitten jäähdytettiin ja sentrifugoitiin. Supernatantti käytettiin määrittämään suhteellinen MDA keskittymää mikrolevylukijalla 532 nm: ssä.
Mittaaminen seerumissa 8-hydroksi-2'-deoksiguanosiinin (8-OHdG-pitoisuuksiin) B-8-OHdG-pitoisuuksiin pitoisuus on biomarkkeri DNA-vaurioita ja havaittiin ELISA kit (Cat. IM-KOGHS 040914E) päässä Japanin instituutin valvonta Aging. Testi suoritettiin noudattamalla valmistajan ohjeita.
Heksanoyyli-lysiini (HEL) addukti pitoisuus
HEL on myös biomarkkeri oksidatiivisen stressin. HEL pitoisuudet seerumissa määritettiin ELISA kit (Cat. KHL-700 /E) päässä Japanin instituutin valvonta Aging. Koe suoritettiin seuraten valmistajan ohjeita.
Tilastollinen analyysi
Tulokset esitetään keskiarvona ± keskivirhe (SE), ja data verrattiin varianssianalyysillä (ANOVA) meno testi PASW Statistics 18. erot pidettiin merkittävinä, kun p-arvo oli alle 0,05 Tukey testi.
tulokset
Juomavesi kulutus ja mahalaukun vaurioita
odotetusti keskimääräinen tilavuus vedenkulutus ja keskimääräinen painonnousu per rotta oli samanlainen kaikissa hoitoryhmissä, kuten on esitetty taulukossa 1. Nämä tulokset viittaavat siihen, että sekä pH: n (8,5 ja 9,5) ja vedyn pitoisuus juomavedessä (0,84 ppm, 0,22 ppm, ja 0,07 ppm) ei vaikuttanut eläinten halu kuluttaa vesi, ja sen vuoksi rotat kasvoivat samalla nopeudella. Siten mahalaukun vahinko olisi pitänyt vaikuttanut mahdolliset erot juomiskäyttäytymiseen.
Anatomiset Tulokset osoittivat, että ryhmät, joilla on korkea pH 9,5, paljon vetyä 0,84 ppm, tai molemmat (ryhmät A, B ja C), oli merkittävä esto mahalaukun vaurioita verrattuna ryhmän juomaveden laitos vesijohtovettä (ryhmä F) (kuva 1). Ja samassa pH: ssa, merkittävästi vety-annoksesta riippuvainen inhibitio havaittiin ryhmissä C, D, ja E Jos inhiboivia vaikutuksia ja vedyn pitoisuuksia verrattiin, korkea positiivinen korrelaatio havaittiin (taulukko 2). Samaan vetypitoisuus, korkea pH-arvo myös suurempi estäminen (esim. A ja C, tai B ja D), vaikka vaikutukset eivät olleet tilastollisesti merkitseviä. Kuvio 1 mittaus mahalaukun pisteet (alue mahaeroosiota) 7 ryhmiä. Arvot ovat keskiarvo ± SE 6-8 eläintä. **: P < 0,01 verrattuna ryhmään F (neutraali vesi kontrolli). #: P < 0,05 verrattuna ryhmään E (vähävetyistä ja alhainen pH ryhmä).
Taulukko 2 korrelaatio eston vaikutuksia ja vedyn pitoisuudet pH 8,5 elektrolysoidaan veden
Ryhmä
Eroosio
†
MPO
†
MDA
†
8-OHdG-pitoisuuksiin
‡
C: H2 (6,8 ug /d /kg) B 2,1%
1,6%
32,6%
-2,3%
d: H2 (20,1 ug /d /kg) B 13,6%
36,8%
36,8%
41,9%
E: H2 (80.6 ug /d /kg) B 38,6%
77,3%
61,9%
41,4%
Pearson kerroin
0,990
0,952
0,999
0,633
† limakalvon suojaavaa vaikutusta kullakin vetypitoisuudella laskettiin (vaurio tason ryhmässä F - vahinko tason ryhmän C tai D tai E) /(vaurio tason ryhmässä F - vahinko tason ryhmässä G).
‡ seerumissa, koska mahalaukun vaurioita ei vaikuttanut seerumin 8-OHdG-pitoisuuksiin tason, suojaava vaikutus on laskettu (vaurio tason ryhmässä F - vahinko tason ryhmän C tai D tai E ) /vahinko tason ryhmässä F.
inhiboivat vaikutukset olivat myös osoituksena kautta histologisia värjäystä. Eri alueilla mahan oli erilaisia ​​vahinkoja tasoilla, jotka eivät olleet yhden annoksen ryhmässä. Huomasimme, että pohja alue maha yleensä tasaisesti vahingoittunut aspiriini-HCl, eikä verenvuoto eroosiota lehto oli havaittu, että alueella. Siksi histologinen kudokset siitä osasta valittiin vertailun osoitti kuvassa 2a. Kuten odotettua, vahva eroosio ei havaittu kaikissa näytteissä (kuvio 2b). Näytteitä ryhmästä G oli ehjä limakalvo. Ryhmä F osoittivat, että limakalvon pinta oli erillinen solu roskat sekä vialliset liman tuotantoa monilla alueilla, joista huomautettiin kuvassa 2b. Näytteet ryhmien A ja C oli suhteellisen ehjänä limakerroksen, ja useimmat liman eritystä soluista oli vielä toiminnallinen verrattuna ryhmään F, joka on esitetty inhiboiva vaikutus vetyä sisältävä elektrolysoidaan vettä. Ryhmä B, D ja E värjättiin myös ja tarkastetaan mikroskoopilla, ja heillä oli keskellä tasoja vamma (Additional tiedosto 1: Kuva S2). Mutta fenotyyppi ei voida arvioida. Kuvio 2 asento histologinen näyte (a) ja PAS-värjäys rauhasten mahan ryhmistä A, C, F ja G (b). Sininen nuoli osoittaa limakerroksessa (punainen) pinnalla sisäseinän, ja punainen nuoli huomauttaa kuoleminen ja irrotettuja soluja. Mustat nuolet osoittavat, limaa tuottavien solujen (punainen). Suurennus: 100. Kaikki kuvissa edustaja fenotyyppi niitä vastaavien näytteiden.
Vetypitoinen elektrolysoidaan veden lievittää neutrofiilien välittämää tulehdusta ja oksidatiivista stressiä mahalaukun limakalvon
myeloperoksidaasi (MPO) aktiivisuus limakalvolla havaittiin tribarbituuri- hapan reaktio ja normalisoitu proteiinipitoisuus kullekin näytteelle. Toiminta oli inhiboi pH 9,5 ja 8,5 elektrolysoidaan veden vety annosriippuvaisesti verrattuna ryhmään F (kuva 3). Inhibition tasot korreloivat hyvin vedyllä annos (taulukko 2). Kuva 3 Vaikutus Vedyn MPO toimintaa mahan limakalvoa jälkeen loukkaantuneiden aspiriini-HCl. Arvot ovat keskiarvo ± SE 6-8 eläintä. *: P < 0,05 verrattuna ryhmiin E (vähävetyistä ja matala pH ryhmä) tai F (neutraali vesi ohjaus).
Malonidialdehydi (MDA) tuotetaan reaktiivisia happiradikaaleja (ROS), ja sellaisena se analysoidaan in vivo biomarkkereiden oksidatiivisen stressin. Limakalvon MDA pitoisuus vetyrikas elektrolysoidaan veden hoidetuissa ryhmissä osoitti merkittäviä vähennys verrattuna ryhmän juomaveden muuttumattomana vettä (kuva 4). Ja esto kuvio on samanlainen tulosten mahalaukun pisteet ja MPO toimintaa. Kuva 4 MDA tasot mahan limakalvoa 7 ryhmiä. Määrä MDA normalisoitui kanssa MDA tason ryhmästä G (ei vammoja kontrolli). Arvot ovat keskiarvo ± SE 6-8 eläintä. *: P < 0,05 verrattuna ryhmään F (neutraali vesi ohjaus).
Vetypitoinen elektrolysoidaan veden puolestaan ​​laskenut 8-OHdG-pitoisuuksiin seerumissa
8-OHdG-pitoisuuksiin on yksi hallitseva muodoista vapaa radikaali-indusoidun DNA-vaurioita ytimet ja mitokondrioita, ja siksi on laajalti käytetty biomarkkerina oksidatiivisen stressin ja syövän syntymistä. Seerumin 8-OHdG-pitoisuuksiin vähensi merkittävästi paljon vetyä ryhmissä (vedyn pitoisuus on suurempi kuin tai yhtä suuri kuin 0,22 ppm) verrattuna vesijohtovedellä kontrolliryhmässä F (kuvio 5). Kuitenkin, toisin kuin muut testaus päätepisteitä vähentäminen tasoja ja vety annokset eivät korreloi pH 8,5 ryhmissä, mikä viittaa siihen, että annos-vaste vaikutus ei ollut läsnä seerumissa 8-OHdG-pitoisuuksiin (taulukko 2). Toinen eri havainto 8-OHdG-pitoisuuksiin testi oli, että ryhmä G ollut samanlaisia ​​tason ryhmällä F, joka saattaa ilmaista molemmissa ryhmissä oli taustataso 8-OHdG-pitoisuuksiin. Toinen oksidatiivisen stressin markkeri, HEL, joka tunnistaa lipidiperoksidaatio, testattiin myös seerumissa, mutta tulokset eivät osoittaneet merkittäviä eroja kaikissa ryhmissä (Additional tiedosto 1: Kuva S3). Kuva 5 Seerumin 8-OHdG-pitoisuuksiin tasolla eri ryhmissä. Arvot ovat keskiarvo ± SE 6-8 eläintä. ***: P < 0,001, verrattuna ryhmään E (vähävetyistä ja matala pH ryhmä), F (neutraali vesi kontrolli), tai G (ei vammoja kontrolli).
Keskustelu
Kuten edellä mainittiin, yksi hämmentävä kysymys vety- on puute annos-vaste-vaikutusta. Tämä tutkimus antoi jonkin verran näyttöä siitä, että vetyä annosriippuvaista estäviä vaikutuksia voidaan havaita aspiriini aiheuttaman mahan vamman malli kautta elektrolysoidaan emäksistä vettä, ja siten, puuttuminen vakiintunutta suhdetta annoksen ja vaikutuksen pitoisuudet voivat olla seurausta toimitustapa, koeasetelma, ja kohde-elin.
tutkimuksessamme annoimme kolmea eri pitoisuuksia vedyn emäksistä vettä, ja havaitsimme ilmeinen annosriippuvaista vaikutuksia mahalaukun limakalvon, kun taas useimmat muut raportit vain verrattiin tai ilman vetyä [31-37]. Kaikki ne levitetään paljon vetyä 0,8 ppm: stä 1,5 ppm, ja ne kaikki havaitut suojaavia vaikutuksia eri sairauksien tai lääketieteellisten hoitojen. Vaikka ne eivät anna tarkkaa juominen määrä eläimiä, voimme arvioida vedyn annos sen pitoisuus jälkeen eläimet olivat aina vapaa pääsy veden ja vedyn eivät muuta niiden juomiskäyttäytymistään. Vain yhdessä tutkimuksessa käytetään kahta eri vedyn pitoisuudet (0,08 ja 1,5 ppm) hoidossa hiirimallissa Parkinsonin tauti. Kuitenkin niiden tulokset viittaavat molemmat annokset oli samanlainen toiminto lievittää etenemistä hermosolujen rappeutumisen [22]. Toinen pääasiallinen ero meidän ja aiemmat tutkimukset on se, että vety on annettu juomaveden kautta suoraan mahalaukkuun, sen sijaan, että kuljetetaan verestä kohde-elimiin [17, 18]. Vesi voi imeytyä mahalaukussa, ja uskomme, että vedyn pitoisuudet limakalvoilta mahalaukun vaihtelevat vetypitoisuus veteen. Kuitenkin muut elimet tämä ei voi olla kyse, koska vety joutuu vereen ensin ja sitten kuljetetaan kaikkien elinten koko kehoon. Vety farmakokinetiikkaa ei ole täysin ymmärretty; vielä, tuore tutkimus osoitti, että maksan glykogeenin voi kertyä vedyn juomavedestä [38]. Tutkimuksessa ei todettu ainoastaan ​​yksi syy, miksi kulutus jopa pieni määrä vetyä lyhyellä aikajänteellä tehokkaasti parantaa eri sairauksien malleja, mutta ehdotti myös, että vetypitoisuus voidaan puskuroida veressä. Pidämme tätä glykogeenin puskuroiva vaikutus kuin yksi syy puuttumista annos-vaste ilmiöitä monissa muissa tutkimuksissa. Tässä tutkimuksessa 8-OHdG-pitoisuuksiin seerumissa muuttaa ilman annoksesta riippuvainen vaikutus, joka tukee tätä hypoteesia.
Vaikka ryhmien kanssa paljon vetyä osoitti merkitsevästi pienempi seerumin 8-OHdG-pitoisuuksiin tasolla verrattuna ryhmän juomaveden laitos vesijohtovettä jälkeen mahalaukun loukkaantumisen se oli yllättävää, että ryhmä G, jota ei ollut loukkaantunut aspiriinia-HCI, oli lähes samalla tasolla 8-OHdG-pitoisuuksiin kuin loukkaantunut ryhmä F. Tämä saattaa merkitä sitä, että pieni DNA vahinko tapahtui mahassa, tai että vahingoittunut mahalaukun limakalvon ei vapauttanut 8-OHdG-pitoisuuksiin vereen aikana 3 tuntia vamman. Vety on mahdollisesti vähentänyt taustataso 8-OHdG-pitoisuuksiin seerumissa. Mielestämme tämä voisi olla sama syy ennallaan HEL taso seerumissa. Hapettumista vatsassa ei vaikuttanut veren hyvin paljon, ja taustan taso HEL on liian alhainen voidaan havaita meidän kit.
Vaikka monet päätepisteitä testattiin meidän vammoja mallissa, mahalaukun pisteet, MPO aktiivisuus ja MDA määrä ovat parhaita. Mahalaukun eroosio on ilmeinen alle leikkely mikroskoopilla 3 tunnin kuluttua aspiriini-HCl hoitoa, ja eroosio-ala voidaan laskea käyttämällä mikro-hallitsija. Kuitenkin vakavuus eroosio ei ollut pidetä useimmat aiemmat tutkimukset tekivät. Jotkut eroosio alueet olivat epäsäännöllisiä valkoiset täplät, kun verenvuoto voitiin nähdä muilla alueilla. Ei ole mitään sääntöä, jossa asetetaan painot eri eroosiota vaikeusasteeltaan. Olemme sitä mieltä, että voisi olla mahdollista parannus, joka voidaan tehdä tämän vamman mallia tulevaisuudessa.
MPO runsaimmin ilmaistaan ​​neutrofiilien granulosyyttien. Merkittäviä todisteita ovat ehdottaneet, että neutrofiilien välittämää tulehdus on mukana kehittämässä aspiriini aiheuttaman mahalaukun vahinko [39-42]. Naito et ai. [29] havaitsivat, että MPO aktiivisuus lisääntyi mahalaukun limakalvon 1 h aspiriini hoito ja säilyivät 3 h, ja voitaisiin vähentää pH 10 elektrolysoidaan vettä. Tulehdus on yleensä indusoi kuolevat solut kudoksessa. On vaikea suoraan havaita määrä kuolee solujen limakalvon, koska jotkut niistä ovat jo rikki palasiksi. Täten tutkimalla elävien tulehdussolujen on viisas valinta.
Oksidatiivinen stressi on yksi tärkeimmistä aiheuttamat aspiriini hoito vatsassa. Ja vety on raportoitu lievittää oksidatiivista stressiä monissa kudoksissa [17, 18]. MDA on yksi tunnetuimmista biomarkkereita oksidatiivisen stressin. Se tulee hajoaminen monityydyttymättömien lipidin reaktiivisia hapen lajeja. Se on yksi monista reaktiivisen elektrofiili lajeja, jotka voivat muodostaa kovalenttisia proteiinin addukteja kutsutaan pitkälle lipoxidation lopputuotteiden (ALE). Ennen näimme tulokset, pelkäsimme, että MDA on liian reaktiivinen voidaan havaita näytteissä, jotka oli säilyttää jääkaapissa useita viikkoja. Onneksi tulokset osoittivat johdonmukaisesti vähennys MDA vedyllä annoksella, joka osoittaa se on luotettava ja vakaa päätetapahtuma aspiriini-HCl vamman malli.
TNF-α ilmentyminen oli kuitenkin tehostaa merkittävästi aspiriiniryhmässä-HCI loukkaantunut vatsa ja seerumi [29]. Ja juo elektrolysoidaan emäksistä vettä voi vähentää TNF-α sekä proteiini- ja mRNA-tasolla. Testasimme myös TNF-α-mRNA tason vatsassa ja TNF-α-mRNA teki kasvu loukkaantunut vatsaan. Emme kuitenkaan ei löytänyt merkittäviä muutoksia eri testiryhmään (Additional tiedosto 1: Kuva S4). Se saattaa johtua aika pisteen korjuu kudosnäytteen. TNF-α on varhainen responder mahalaukun vahinkoa ja voi indusoida apoptoosia mahalaukun epiteelisolujen sekä endoteelisoluissa [43-45]. Merkittävä esto TNF-α-mRNA ilmentyminen elektrolysoidaan vedenkäsittely voidaan havaita 1 tunnin kuluttua aspiriinin hoidon [29], mutta ei 3 tuntia kommunikoivat tekijä tämän aikaisemman työn. 1 tunnin jälkeen aspiriini-HCl hoitoa, eroosio ei ole helppo havaita, mikä tarkoittaa sitä, limakalvon kerros on vielä suhteellisen ehjänä. Tuolloin mitä tahansa pala mahan voi olla samanlaisia ​​TNF-α-mRNA: n tasolla. Kuitenkin, kun jotkut eroosiot muodostuu 3 tuntia, eri palaset mahalaukun seinämän voi olla eri TNF-a-mRNA-tasoja, koska eroosio osat ovat suhteellisesti raskaasti vaurioitunut. Katsomme, että on parempi ottaa koko mahan TNF-α-mRNA kvantifiointiin muuta kuin pala vatsa seinään, mutta se tarvitsee kaksinkertainen määrä eläimiä.
Yksi kyseessä on mekanismi vetyrikas elektrolysoidaan emäksinen vesi aiheuttamaa vahinkoa estäviä vaikutuksia. Varhainen työ jo osoittanut, että esto mahalaukun vaurioita välillisesti aiheuttama jatkuva elektrolysoidaan emäksinen vedenkäsittely, mutta ei suoraa vuorovaikutusta elektrolysoidaan emäksistä vettä ja aspiriinia [29]. Lisäksi estäviä vaikutuksia elektrolysoidaan emäksistä vettä eivät johtuneet vähentämällä mahan happamuutta, jotka voivat vaikuttaa absorptio aspiriinia [29]. Vedyn elektrolysoidaan emäksistä vettä ehdotettiin aktiivisena molekyyli. Ohsawa et ai. löydetty välinen suora reaktio vedyn ja hydroksyyli radikaali ja peroksinitriitin [7]. Tämä järjestelmä ei sovi havaintojemme koska juomavesi poistettiin tuntia ennen mahalaukun vahinkoa tapahtunut. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• Ihmisen mahalaukun taudinaiheuttaja Helicobacter pylori on potentiaalia asetonia boksylaasia joka parantaa sen kyvystä kolonisoida mice
• Perustaminen ja tunnistaminen kanimallissa vatsakalvon carcinomatosis mahalaukun cancer